Как лечить бактерию хеликобактер пилори: причины появления, симптомы заболевания, диагностика и способы лечения

Содержание

Диагностика и лечение инфекции Геликобактер Пилори Medical On Group Пермь

Геликобактерная инфекция до сих пор вызывает много вопросов среди гастроэнтерологов, терапевтов и пациентов. Ведутся научные споры на эту тему, надо ли лечить геликобактера, имеет ли это смысл? Что это за инфекция и какие изменения вызывает, разберем в этой статье.

Геликобактер – микроорганизм, живущий в кислой среде желудка. Это продолговатая бактерия имеет на одном конце четыре жгутика. Она разъедает слизистую желудка, выделяя аммиак в результате своей жизнедеятельности. В разрушенные места заселяются разные бактерии и вирусы, они вызывают дальнейшее повреждение стенки желудка. Один тип бактерии вызывает язвы и эрозии желудка, другой тип – онкологию.

Стандарты диагностики: По современным стандартам диагноз «геликобактерная инфекция» мы не можем выставить, если пациент не прошел как минимум два теста на эту бактерию. Для нас доступны несколько видов диагностики – обнаружение антител в крови, антигена в кале. Инвазивные методики, где требуется ФГДС (фибро-дуодено-гастроскопия)– биопсия слизистой оболочки желудка, а затем обнаружение бактерии в гистологических материалах или экспресс хелпил-тест – это окрашивание кусочка слизистой желудка реактивами на содержание аммиака. Существует уреазный дыхательный тест. О нем мы расскажем подробнее.

Хелик-тест – это тест на обнаружение геликобактерной инфекции, одна из разновидностей уреазного дыхательного теста. В отличии от ФГДС он не инвазивный, то есть не нужно повреждать слизистую желудка, не нужно прокалывать вену. Этот тест удобный, потому что не нужно собирать кал. Делается в течение 30 минут и результаты получают сразу. Конечно, требуется специальная подготовка. Она необходима для увеличения достоверности результатов теста.

Подготовка к тесту:

  • Нельзя принимать антациды (альмагель, фосфолюгель), ингибиторы протонной помпы (омепразол и препараты из этой группы), антибиотики за две недели до обследования.
  • Нельзя употреблять алкоголь за три дня до обследования
  • нельзя употреблять продукты, увеличивающие газообразование за один день – горох, фасоль, картофель, чёрный хлеб и проч.;
  • Накануне принять лёгкий ужин, желательно за 12 часов до обследования;
  • С утра нельзя курить и жевать жвачку.
Если тест отрицательный, назначается ещё одно обследование, чаще всего это анализ крови на антитела к геликобактеру.

Лечение
Если геликобактер обнаружен у человека, необходимо пройти серьёзное лечение. Он включает длительный курс антибиотиков, физиопроцедуры, коррекция гомеостаза организма, поддержание функций печени, восстановление нормальной деятельности желудка и кишечника. В ряде случаев необходима консультация узких специалистов – проктолога, психотерапевта.

Контроль лечения – обязателен, потому что, несмотря на наличие сильных препаратов, много устойчивых видов бактерии геликобактера, и редко получается полное излечение за один курс.

Если мы пользуемся хелик-тестом – контроль сразу после лечения и повторный контроль через 45 дней после прохождения курса лечения.

Диагностика и лечение геликобактера необходимы. Одна из главных причин того, что нам необходимо излечивать эту бактерию – её онкогенные свойства. Эта бактерия вызывает атрофический гастрит, метаплазию слизистой оболочки, которые часто переходят в рак желудка. Чтобы избежать язвы и рака необходимо лечить геликобактерную инфекцию, как только она обнаружена, не дожидаясь, пока произойдут необратимые изменения.

Кроме того, эта бактерия влияет на моторику желудка и двенадцатиперстной кишки, угнетает иммунитет и способствует заселению других бактерий и вирусов.

Экспресс-диагностика Helicobacter Pylory

Болит желудок? Изжога? Снижение аппетита?

Основная причина таких жалоб – инфекция ХЕЛИКОБАКТЕР ПИЛОРИ – главный возбудитель хронических гастритов и язв желудка.

УЗ «37-я городская поликлиника» предлагает  Вам современную экспресс-диагностику хеликобактерной инфекции по выдыхаемому воздуху

на платной основе.

Пациенты могут воспользоваться данным методом, значительно сократив время диагностики заболевания.

Процедура очень проста и безопасна даже для маленьких детей. Благодаря используемому хелик-тесту нет необходимости ждать, пока придут результаты проб, так как наличие инфекции определяется за 15-20 мин.

Ранняя диагностика Helicobacter Pylori –  важный шаг к лечению желудочно-кишечного тракта.

Пациенты могут воспользоваться данным методом, значительно сократив время диагностики заболевания. Процедура очень проста и безопасна даже для маленьких детей. Благодаря используемому хелик-тесту нет необходимости ждать пока придут результаты проб, так как наличие инфекции определяется за 15-20 минут.

Исследование проводится в кабинете №103

За более подробной информацией обращаться по телефону 8 (017) 220 16 68

Оплату можно произвести в кассе (каб. №136), тел. 8 (017) 298 82 64

Что такое хеликобактериоз?

Хеликобактером пилори называется вредоносная бактерия, вызывающая хеликобактериоз – опасное заболевание желудка и двенадцатиперстной кишки. Обитает бактерия в пилорическом отделе желудка, откуда она и получила свое название.

Открытие этого микроорганизма произошло в 2005 году докторами Барри Маршаллом и Робином Уорреном, совершившими революцию в области медицины и получившими нобелевскую премию за свои исследования. Было доказано, что бактерия хеликобактер пилори способна противостоять разрушающему действию кислотной среды желудка, возможность чего ранее учеными отрицалась. С помощью жгутиков бактерия перемещается и скрывается в слизистой стенок желудка, закрепляясь в ней и сохраняясь в течение многих лет.

Именно хеликобактер вызывает большинство заболеваний желудочно-кишечного тракта. Размножаясь, микроорганизмы губительно действуют на клетки желудка человека, вызывая ряд опасных воспалительных заболеваний (гастрит, язва, рак желудка). Уничтожить бактерию и предотвратить развитие опасных патологий можно с помощью антибиотиков, регулирующих уровень кислотности желудка.

Причины хеликобактериоза

Бактерии хеликобактер пилори не могут жить на воздухе. Они передаются только через слизь и слюну при контакте носителя и здорового человека. Чаще всего заражение происходит при использовании одной и той же посуды или средств личной гигиены, при поцелуе или от матери к ребенку. Таким образом, в группу риска попадает семья, друзья или сожители человека, являющего носителем хеликобактера.

Попадая через пищевод в желудок человека, бактерия не погибает под действием соляной кислоты. Она проникает в слизистую оболочку, покрывающую стенки желудка, разрушая ее ткани и нарушая нормальное функционирование. Таким образом, слизистая желудка воспаляется, развивается гастрит, эрозии и язвы, увеличивается риск появления рака желудка и других опасных заболеваний. Также нарушаются защитные свойства оболочек желудка и кишечника.

Симптомы хеликобактериоза

Настораживающими симптомами, свидетельствующими о возможном заражении хеликобактером пилори, являются часто повторяющиеся боли в желудке. В основном боль приходит на голодный желудок, а после приема пищи успокаивается. Это говорит о наличии эрозий и язв, образовавшихся на стенках желудка. Также среди симптомов часто фигурирует изжога, усиливающаяся со временем, тяжесть в желудке, плохая перевариваемость мясной пищи, тошнота и рвота. При наличии указанных признаков человеку рекомендуется пройти тест на хеликобактер пилори, когда с помощью биохимических реакций в сыворотке крови определяют содержание иммуноглобулинов. Для диагностики используются также дыхательный тест и эндоскопия.

Лечение хеликобактериоза

Лечение хеликобактериоза предусматривает проведение комплексной терапии, направленной на уничтожения вредоносного микроорганизма в желудке. Это является необходимым условием для заживления эрозий и язв.

Следует знать, что не все носители хеликобактера пилори испытывают симптомы заболевания. Длительное время бактерия может никак не проявлять себя, сохраняясь в стенках желудка в неактивном состоянии. Во многом на развитие хеликобактериоза влияет образ жизни человека: курение, злоупотребление спиртным, неправильное питание и нервное перенапряжение.

Важным этапом является также профилактика заражения хеликобактером. Обязательно следует соблюдать правила гигиены: мыть руки перед едой, не пользоваться грязной общей посудой и средствами личной гигиены. Если у человека был диагностирован хеликобактериоз, все члены его семьи обязательно подлежат обследованию.

Бактерии хеликобактер пилори. Влияние на организм человека

В настоящее время много обсуждается роль бактерии хеликобактер пилори в возникновении различных заболеваний. Связь этой бактерии со многими болезнями уже доказана. Например, возникновение воспалительно-язвенных поражений желудка и 12-перстной кишки.

Бактерия Н.pylori приводит к патологическим изменениям в слизистой оболочке антрального отдела желудка посредством того, что выделяет токсические ферменты, которые приводят к развитию воспаления и образование эрозий и язв.

Изучается ее роль в развитии кардиологической патологии. Данная бактерия вызывает способствует повышению уровня триглицеридов, что приводит к развитию атеросклероза и как следствие – ишемической болезни сердца. Роль хеликобактер пилори при сахарном диабете неоднозначная и не является причиной его возникновения. Но предполагают, что присутствие в организме человека с сахарным диабетом данной бактерии приводит к увеличению выработки антител к ткани поджелудочной железы и как следствие повышению суточных доз инсулина, высокого уровня гликозилированого гемоглобина.

Существует связь наличия бактерии Н.pylori и заболеваниями кожи. Многочисленные исследования указывают на то, что у лиц инфицированных хеликобактер пилори, проведение эрадикационной терапии способствует улучшению состояния больных с розовыми угрями, атопическим дерматитом, хронической крапивнице и др. Так же обсуждаются вопросы о влиянии бактерии Н.pylori на обмен железа, при развитии хронического пародонтита.

Заражение бактерией хеликобактер пилори происходит через загрязненную воду или продукты питания. Так же возможно заражение через поцелуи и использование общей посуды.

Диагностика инфекции Нelicobacter pylori осуществляется следующими методами:

  • скрининговый метод – обнаружение специфических антихеликобактерных антител в крови больного;
  • дыхательные тесты;
  • обнаружение ДНК бактерии в анализах кала, слюны, зубном налете,
  • обнаружение микроорганизмов при микроскопическом исследовании биоптата слизистой оболочки, взятого при фиброэзофагогастродуоденоскопиии (ФЭГДС).

Автор статьи: врач гастроэнтеролог – Бессонова Ольга Витальевна

Хеликобактер пилори, знакомство

Хеликобактер пилори, давайте знакомиться)

Бактерия Хеликобактер пилори (Helicobacter pylori) – это особый вид патогенных бактерий, инфицирующих желудок и двенадцатиперстную кишку. Хеликобактер коварная бактерия, которая дает жизнь гастриту или язве.  Признаки заражения могут дать о себе знать не сразу.

Авторы открытия этой бактерии доктор Барри Маршал и Робин Уоррен получили престижную Нобелевскую премию в области медицины в 2005 году. Их открытие стало революционным по нескольким причинам:

  1. Хеликобактер противостоит чрезвычайно кислой среде желудка, он сопротивляется кислотности благодаря нескольким механизмам:
  • после попадания в желудок бактерия, благодаря своим жгутикам, может перемещаться и скрываться в слизи, которая покрывает стенки желудка и защищает клетки.
  • усиливает защитную секрецию аммиака, нейтрализующего кислую среду желудка.

В связи с этим бактерия закрепляется на стенках желудка и может жить в организме годами и десятилетиями.

  1. Размножаясь бактерия способна разрушать клетки желудка. Высвобождение вредных веществ приводит к гастритам, заболеваниям желудка и двенадцатиперстной кишки. Если не заниматься лечением впоследствии проявляется язва желудка и повышается риск развития рака желудка. Доказано, что хеликобактер пилори, является основной причиной появления рака желудка и двенадцатиперстной кишки.

Всех этих неприятностей можно избежать:

  1. Сдать анализы на выявления бактерии Хеликобактер пилори.
  2. Если результат окажется позитивным и с превышением нормы, то необходимо дальнейшие обследование и консультация гастроэнтеролога.
  3. Пройти курс лечения.
  4. Сдать повторный анализ.
  5. Профилактика Хеликобактер пилори – предупреждение инфицирования и реинфицирования слизистой оболочки хеликобактером. В первую очередь должны соблюдаться правила личной гигиены:
  • мойте руки перед приемом пищи;
  • не пользуйтесь общей немытой посудой;
  • не откусывайте, не облизывайте, а лучше отрежьте или отломите;
  • пользуйтесь индивидуальными средствами личной гигиены;
  • не дарите поцелуи каждому;
  • прекратите активное и пассивное курение и злоупотребление алкоголем.

Лечение нужно проводить комплексно и со всеми членами семьи.

Автор: Врач терапевт-гастроэнтеролог Бурбаева С.А.

Хеликобактер. Причина язвы желудка | Explana

Заболевания желудочно-кишечного тракта являются одними из самых распространённых. Причиной всему может быть инфекция, а именно бактерия – Хеликобактер пилори (Helicobacter pylori)!

Такие симптомы как боль в животе, изжога, тошнота, быстрое насыщение после еды или отрыжка, можно диагностировать у каждого второго человека. Кто-то связывает это с неправильным питанием или стрессами, повышенной или пониженной кислотностью желудкаи другими факторами. Чаще прием таблеток, снижающих кислотность, не помогает или временно устраняет симптом и дискомфортные ощущения возобновляются после каждого приема пищи. Причиной всему может быть инфекция, а именно бактерия – Хеликобактер пилори (Helicobacter pylori). Она прекрасно выживает в кислотной среде желудка в отличие от других бактерий и к тому же усиливает защитную секрецию аммиака, нейтрализующего кислую среду.

Открытие данного вида спиралевидных бактерий длиной около 3 мкм, стало настоящей сенсацией в медицине и оказало значительное влияние на лечение язвенной болезни желудка и гастритов. Как было выявлено – именно Хеликобактер и является причиной многих проблем, связанных с пищеварением.

Стоит отметить, что в 2005 году первооткрыватели медицинского значения бактерии Хеликобактер пилори – Робин Уоррен и Барри Маршалл были удостоены Нобелевской премии по медицине.Одними из самых эффективных способов диагностики наличия этой бактерии непосредственно в биоптате желудка можно считать молекулярно-генетический метод, а также бактериологический посев на Helicobacter pylori. Это позволит подобрать адекватную терапию для данного микроорганизма и выбрать наиболее подходящий способ для лечения гастрита и язвы желудка.

В лаборатории Explana используют сразу несколько методов лабораторной диагностики Helicobacter pylori:

 – Бактериологическое исследование на Helicobacter pylori 04-01-17

 – ПЦР исследование Helicobacter pylori 02-02-10

 – Генотипирование Helicobacter pylori cagA,cagE,cagH 02-02-05

 – ПЦР исследование на чувствительность Helicobacter pylori к кларитромицину 02-02-04

– Также можно заказать и комплексное исследование Helicobacter pylori, которое уже включает в себя вышеперечисленные молекулярно-генетических исследования

Номер комплекса: 09-01-51.

Мы проводим такие исследования как:

– Определение антител IgA к Helicobacter pylori 03-02-81

– Определение антител IgG к Helicobacter pylori 03-02-44

– Определение общих антител к гену Helicobacter pylori cag A 03-02-38

– Определение антигена Helicobacter pylori в кале 03-05-06

Анализы на Хеликобактер пилори (Helicobacter pylori) вы сможете сдать в одном из наших пунктов приема анализов.

Связанные исследования

900 р.

#02-02-10

Helicobacter pylori(хеликобактер пилори)

Helicobacter pylori (H. pylori) – спиралевидная бактерия, которая обитает на слизистой оболочке желудка, прикрепляясь к ворсинкам эпителия. H. Pylori является причиной 90% язв двенадцатиперстной кишки и 80% язв желудка. Значение обследования на H. Pylori значительно возрастает из-за строгой ко

770 р.

#03-02-81

IgA антитела к Helicobacter pylori

С данной инфекцией ассоциированы заболевания, такие как: язва двенадцатиперстной кишки и желудка, хронический гастрит, а также возможна бессимптомная форма инфекции.  

1750 р.

#02-02-04

Чувствительность H.pylori к кларитромицину

Определение чувствительности Helicobacter pylori к терапии кларитромицином методом полимеразной цепной реакции с флуоресцентной детекцией результатов в режиме реального времени. Данное исследование предназначено для выявления мутаций A2142G, A2143G и T2717C в геноме Helicobacter pylori, обеспечив

900 р.

#03-05-06

Антиген Helicobacter pylori в кале, ИФА

Возбудитель хеликобактериоза – Helicobacter pylori – грамотрицательная палочка, чаще всего имеющая S-образную форму. Встречается у 87% больных язвенной болезнью и 75% больных острыми гастритами. После проникновения бактерий в желудок происходит их адгезия к клеткам желудочного эпители

Хеликобактер пилори

Что такое хеликобактер пилори (H. pylori)?

Helicobacter pylori (H. pylori) – это тип бактерий, поражающих ваш желудок. Это может повредить ткани желудка и первую часть тонкой кишки (двенадцатиперстную кишку). Это может вызвать боль и воспаление. В некоторых случаях он также может вызывать болезненные язвы, называемые пептическими язвами, в верхних отделах пищеварительного тракта.

H. pylori является обычным явлением. У многих это есть. У большинства людей не появляются язвы и не проявляются какие-либо симптомы.Но это основная причина язв.

H. pylori атакует слизистую оболочку желудка. Бактерии вырабатывают фермент, называемый уреазой. Этот фермент снижает кислотность желудочного сока. Это ослабляет слизистую оболочку желудка. В этом случае клетки желудка имеют больший риск быть поврежденными кислотой и пепсином, сильными пищеварительными жидкостями. Это может привести к появлению язв в желудке или двенадцатиперстной кишке.

Бактерии H. pylori также могут прикрепляться к клеткам желудка. Ваш желудок не может хорошо себя защитить.Эта область краснеет и опухает (воспаляется).

H. pylori также может вызывать повышенную кислотность желудка. Эксперты в области здравоохранения не совсем понимают, как это сделать.

H. pylori также может привести к раку желудка.

Что вызывает инфекцию H. pylori?

Эксперты в области здравоохранения не знают наверняка, как распространяется инфекция H. pylori. Они считают, что микробы могут передаваться от человека к человеку через рот, например, при поцелуях.

Также может передаваться через рвоту или стул.Это может произойти, если вы:

Кто подвержен риску заражения H. pylori?

Вы можете подвергаться большему риску заражения H. pylori из-за:

  • Ваш возраст. Более половины людей в США с бактериями старше 50 лет.

  • Ваша раса или национальность. Почти у половины всех афроамериканцев есть бактерии. Из людей, которые приезжают в U.S. из развивающихся стран, по крайней мере, 50% латиноамериканцев и 50% жителей Восточной Европы имеют H. pylori.

Большинство людей впервые заражаются бактериями в детстве, но и взрослые тоже могут заразиться.

Каковы симптомы H. pylori?

У большинства людей бактерии сохраняются годами, не зная об этом, потому что у них нет никаких симптомов. Эксперты не знают почему.

У вас может быть покраснение и опухоль (воспаление) слизистой оболочки желудка.Это называется гастритом.

Вы можете получить язвы или язвы желудка или первой части тонкой кишки (двенадцатиперстной кишки). Симптомы язвы могут включать боль в животе или животе. Боль может:

  • Будь тупой болью, которая не проходит

  • Происходит через 2–3 часа после еды

  • Приходи и уходи на несколько дней или недель

  • Происходит посреди ночи, когда ваш желудок пуст

  • Уходите, когда вы едите или принимаете лекарства, снижающие уровень кислоты в желудке (антациды)

  • Вызывает анемию из-за кровотечения

Другие симптомы язвы могут включать:

Симптомы язвы могут быть похожи на другие проблемы со здоровьем.Всегда обращайтесь к своему врачу, чтобы убедиться.

Как диагностируется H. pylori?

Ваш лечащий врач изучит ваше прошлое здоровье и проведет медицинский осмотр. Вам также могут потребоваться тесты, в том числе:

  • Анализы крови. Они проверяют наличие клеток (антител), борющихся с инфекциями, которые означают, что у вас есть бактерии.

  • Культура стула. Этот тест ищет в вашем пищеварительном тракте любые патологические бактерии, которые могут вызвать диарею и другие проблемы.Небольшой образец стула собирается и отправляется в лабораторию. Через 2 или 3 дня тест покажет, есть ли у вас патологические бактерии.

  • Анализ стула на антиген. В ходе этого теста берется образец стула для выявления бактерий H. pylori.

  • Дыхательные пробы. Они могут проверить, есть ли углерод после проглатывания таблетки мочевины, содержащей молекулы углерода. Если углерод обнаружен, это означает, что H.pylori вырабатывает фермент уреазу. Этот фермент снижает кислотность желудочного сока. Он ослабляет слизистую оболочку желудка.

  • Верхняя эндоскопия, также называемая EGD (эзофагогастродуоденоскопия). Этот тест исследует слизистую оболочку пищевода (пищевода), желудка и двенадцатиперстной кишки (первая часть тонкой кишки). Для этого используется тонкая трубка с подсветкой или эндоскоп. На одном конце трубки есть камера. Трубка вводится в рот и в горло.Затем он попадает в пищевод, желудок и двенадцатиперстную кишку. Ваш лечащий врач может увидеть эти органы изнутри. При необходимости берется небольшой образец ткани (биопсия). Образец ткани может показать, есть ли у вас фермент уреаза. Он также может проверить наличие бактерий.

Как лечится H. pylori?

Лечение будет зависеть от ваших симптомов, возраста и общего состояния здоровья. Это также будет зависеть от степени тяжести состояния.

Ваш лечащий врач может попросить вас принять лекарство, убивающее бактерии (антибиотики).

Другие лекарства могут включать:

  • Блокаторы Н-2. Они используются для уменьшения количества кислоты в желудке, блокируя гормон гистамин. Гистамин помогает вырабатывать кислоту.

  • Ингибиторы протонной помпы. Они помогают предотвратить образование кислоты в желудке. Они делают это, останавливая работу кислотного насоса желудка.

  • Протекторы слизистой оболочки желудка. Эти лекарства защищают слизистую оболочку желудка от кислоты и помогают убивать бактерии.

Возможно, вам придется принимать несколько лекарств одновременно, чтобы избавиться от H. pylori. Иногда план приема лекарств может быть сложным, но важно следовать инструкциям, чтобы избавиться от бактерий.

Каковы возможные осложнения H. pylori?

Если вы инфицированы бактериями, у вас может появиться болезненная язва, называемая язвенной болезнью.Эти язвы образуются в верхних отделах пищеварительного тракта.

Очень тяжелая язва может истощить слизистую оболочку желудка. Это также может вызвать такие проблемы, как:

  • Кровотечение при износе кровеносного сосуда

  • Отверстие или перфорация в стенке желудка

  • Закупорка, когда язва находится в месте, препятствующем выходу пищи из желудка

H.pylori также может привести к раку желудка.

Что я могу сделать, чтобы предотвратить заражение H. pylori?

Эксперты в области здравоохранения не знают наверняка, как бактерии передаются от человека к человеку. Но хорошие привычки в отношении здоровья (гигиена) могут помочь вам обезопасить себя. Эти привычки включают:

  • Мытье рук водой с мылом. Это очень важно делать после посещения туалета и перед едой.

  • Убедитесь, что вся еда, которую вы едите, была очищена и приготовлена ​​безопасно.

  • Убедитесь, что ваша питьевая вода безопасна и чиста.

Жизнь с H. pylori

Как только вы точно узнаете, что у вас H. pylori, обратитесь к своему врачу. Они проведут несколько тестов, чтобы убедиться, что бактерии удалены.

Когда мне следует позвонить своему врачу?

Позвоните своему врачу, если ваши симптомы ухудшатся или у вас появятся новые симптомы.Немедленно позвоните, если у вас есть такие симптомы, как кровавая рвота, кровь в стуле или черный, дегтеобразный стул. Позвоните своему врачу, если вы худеете без особых усилий.

Основные сведения о H. pylori

  • H. pylori – это бактерия, поражающая ваш желудок.

  • Он атакует ваш желудок и первую часть тонкой кишки (двенадцатиперстную кишку). Это может вызвать покраснение и отек (воспаление).

  • У многих людей с этой бактерией не будет никаких симптомов.

  • Это может вызвать открытые язвы, называемые пептическими язвами, в верхних отделах пищеварительного тракта.

  • Может вызвать рак желудка.

  • Он может передаваться или передаваться от человека к человеку через рот, например, при поцелуях. Он также может передаваться при прямом контакте со рвотой или калом.

  • Хорошие привычки в отношении здоровья (гигиена) могут защитить вас.

Следующие шаги

Советы, которые помогут вам получить максимальную пользу от посещения врача:

  • Знайте причину вашего визита и то, что вы хотите.

  • Перед визитом запишите вопросы, на которые хотите получить ответы.

  • Возьмите с собой кого-нибудь, кто поможет вам задать вопросы и запомнить, что вам говорит поставщик.

  • Во время посещения запишите название нового диагноза и все новые лекарства, методы лечения или тесты. Также запишите все новые инструкции, которые дает вам ваш провайдер.

  • Узнайте, почему прописано новое лекарство или лечение и как они вам помогут.Также знайте, какие бывают побочные эффекты.

  • Спросите, можно ли вылечить ваше состояние другими способами.

  • Знайте, почему рекомендуется тест или процедура и что могут означать результаты.

  • Знайте, чего ожидать, если вы не примете лекарство, не пройдете тест или процедуру.

  • Если вам назначена повторная встреча, запишите дату, время и цель этого визита.

  • Узнайте, как можно связаться с вашим поставщиком медицинских услуг, если у вас возникнут вопросы.

Состояние

Что такое Helicobacter pylori (H. pylori)?

Helicobacter pylori (H. pylori) – это тип бактерий, поражающих ваш желудок. Это может повредить ткани желудка и первую часть тонкой кишки (двенадцатиперстную кишку). Это может вызвать боль и воспаление. В некоторых случаях он также может вызывать болезненные язвы, называемые пептическими язвами, в верхних отделах пищеварительного тракта.

H. pylori является обычным явлением. У многих это есть. У большинства людей не появляются язвы и не проявляются какие-либо симптомы. Но это основная причина язв.

H. pylori атакует слизистую оболочку желудка. Бактерии вырабатывают фермент, называемый уреазой. Этот фермент снижает кислотность желудочного сока. Это ослабляет слизистую оболочку желудка. В этом случае клетки желудка имеют больший риск быть поврежденными кислотой и пепсином, сильными пищеварительными жидкостями. Это может привести к появлению язв в желудке или двенадцатиперстной кишке.

Бактерии H. pylori также могут прикрепляться к клеткам желудка. Ваш желудок не может хорошо себя защитить. Эта область краснеет и опухает (воспаляется).

Хеликобактер пилори также может вызывать повышенную кислотность желудка. Эксперты в области здравоохранения не совсем понимают, как это сделать.

H. pylori также может привести к раку желудка.

Что вызывает инфекцию H. pylori?

Эксперты в области здравоохранения не знают наверняка, как распространяется инфекция H. pylori. Они считают, что микробы могут передаваться от человека к человеку через рот, например, при поцелуях.

Также может передаваться через рвоту или стул. Это может произойти, если вы:

Кто подвержен риску заражения H. pylori?

Вы можете подвергаться большему риску заражения H. pylori по следующим причинам:

  • Ваш возраст. Более половины людей в США с бактериями старше 50 лет.

  • Ваша раса или этническая принадлежность. Почти у половины всех афроамериканцев есть бактерии. Из людей, которые приезжают в U.S. из развивающихся стран, по крайней мере, 50% латиноамериканцев и 50% жителей Восточной Европы имеют H. pylori.

Большинство людей впервые заражаются бактериями в детстве, но и взрослые тоже могут заразиться.

Каковы симптомы H. pylori?

Большинство людей болеют бактериями годами, даже не подозревая об этом, потому что у них нет никаких симптомов. Эксперты не знают почему.

У вас может быть покраснение и опухоль (воспаление) слизистой оболочки желудка. Это называется гастритом.

Вы можете получить язвы или язвы желудка или первой части тонкой кишки (двенадцатиперстной кишки). Симптомы язвы могут включать боль в животе или животе. Боль может:

  • Тупая боль, которая не проходит

  • Происходит через 2–3 часа после еды

  • Приходить и уходить в течение нескольких дней или недель

  • Бывает посередине ночи, когда ваш желудок пустой

  • Уходите, когда вы едите или принимаете лекарства, снижающие уровень кислоты в желудке (антациды)

  • Вызывают анемию из-за кровотечения

Другие симптомы язвы могут включать:

Симптомы язвы могут быть похожи на другие проблемы со здоровьем.Всегда обращайтесь к своему врачу, чтобы убедиться.

Как диагностируется H. pylori?

Ваш лечащий врач изучит ваше прошлое здоровье и проведет медицинский осмотр. Вам также могут потребоваться анализы, в том числе:

  • Анализы крови. Они проверяют наличие клеток (антител), борющихся с инфекциями, которые означают, что у вас есть бактерии.

  • Культивирование стула. Этот тест ищет в вашем пищеварительном тракте любые патологические бактерии, которые могут вызвать диарею и другие проблемы.Небольшой образец стула собирается и отправляется в лабораторию. Через 2 или 3 дня тест покажет, есть ли у вас патологические бактерии.

  • Анализ стула на антиген. В ходе этого теста берется образец стула для выявления бактерий H. pylori.

  • Дыхательные пробы. Они могут проверить, есть ли углерод после проглатывания таблетки мочевины, содержащей молекулы углерода. Если углерод обнаружен, это означает, что H. pylori произвела фермент уреазу. Этот фермент снижает кислотность желудочного сока.Он ослабляет слизистую оболочку желудка.

  • Верхняя эндоскопия, также называемая EGD (эзофагогастродуоденоскопия). Этот тест исследует слизистую оболочку пищевода (пищевода), желудка и двенадцатиперстной кишки (первая часть тонкой кишки). Для этого используется тонкая трубка с подсветкой или эндоскоп. На одном конце трубки есть камера. Трубка вводится в рот и в горло. Затем он попадает в пищевод, желудок и двенадцатиперстную кишку. Ваш лечащий врач может увидеть эти органы изнутри.При необходимости берется небольшой образец ткани (биопсия). Образец ткани может показать, есть ли у вас фермент уреаза. Он также может проверить наличие бактерий.

Как лечится H. pylori?

Лечение будет зависеть от ваших симптомов, возраста и общего состояния здоровья. Это также будет зависеть от степени тяжести состояния.

Ваш лечащий врач может попросить вас принять лекарство, убивающее бактерии (антибиотики).

Другие лекарства могут включать:

  • блокаторов H-2. Они используются для уменьшения количества кислоты в желудке, блокируя гормон гистамин. Гистамин помогает вырабатывать кислоту.

  • Ингибиторы протонной помпы. Они помогают предотвратить образование кислоты в желудке. Они делают это, останавливая работу кислотного насоса желудка.

  • Протекторы слизистой оболочки желудка. Эти лекарства защищают слизистую оболочку желудка от кислоты и помогают убивать бактерии.

Возможно, вам придется принимать несколько лекарств одновременно, чтобы избавиться от H.пилори. Иногда план приема лекарств может быть сложным, но важно следовать инструкциям, чтобы избавиться от бактерий.

Каковы возможные осложнения H. pylori?

Если вы инфицированы бактериями, у вас может появиться болезненная язва, называемая язвенной болезнью. Эти язвы образуются в верхних отделах пищеварительного тракта.

Очень тяжелая язва может истощить слизистую оболочку желудка. Это также может вызвать такие проблемы, как:

  • Кровотечение при износе кровеносного сосуда

  • Отверстие или перфорация в стенке желудка

  • Закупорка, когда язва находится в месте, которое препятствует выходу пищи из организма. желудок

H.pylori также может привести к раку желудка.

Что я могу сделать, чтобы предотвратить заражение H. pylori?

Эксперты в области здравоохранения не знают наверняка, как бактерии передаются от человека к человеку. Но хорошие привычки в отношении здоровья (гигиена) могут помочь вам обезопасить себя. Эти привычки включают:

  • Мытье рук водой с мылом. Это очень важно делать после посещения туалета и перед едой.

  • Убедитесь, что вся еда, которую вы едите, была очищена и приготовлена ​​безопасно.

  • Убедитесь, что ваша питьевая вода безопасна и чиста.

Жизнь с H. pylori

Как только вы точно узнаете, что у вас H. pylori, обратитесь к своему врачу. Они проведут несколько тестов, чтобы убедиться, что бактерии удалены.

Когда мне следует позвонить своему врачу?

Позвоните своему врачу, если ваши симптомы ухудшатся или у вас появятся новые симптомы. Немедленно позвоните, если у вас есть такие симптомы, как кровавая рвота, кровь в стуле или черный, дегтеобразный стул.Позвоните своему врачу, если вы худеете без особых усилий.

Основные сведения о H. pylori

  • H. pylori – это тип бактерий, поражающих ваш желудок.

  • Он атакует ваш желудок и первую часть тонкой кишки (двенадцатиперстную кишку). Это может вызвать покраснение и отек (воспаление).

  • У многих людей с этой бактерией не будет никаких симптомов.

  • Это может вызвать открытые язвы, называемые пептическими язвами, в верхних отделах пищеварительного тракта.

  • Может вызвать рак желудка.

  • Он может передаваться или передаваться от человека к человеку через рот, например, при поцелуях. Он также может передаваться при прямом контакте со рвотой или калом.

  • Хорошие привычки в отношении здоровья (гигиена) могут защитить вас.

Следующие шаги

Советы, которые помогут вам получить максимальную пользу от посещения вашего поставщика медицинских услуг:

  • Знайте причину вашего визита и то, что вы хотите.

  • Перед визитом запишите вопросы, на которые хотите получить ответы.

  • Возьмите с собой кого-нибудь, кто поможет вам задать вопросы и запомнить, что вам говорит поставщик.

  • Во время посещения запишите название нового диагноза и любые новые лекарства, методы лечения или тесты. Также запишите все новые инструкции, которые дает вам ваш провайдер.

  • Узнайте, почему прописано новое лекарство или лечение и как они вам помогут. Также знайте, какие бывают побочные эффекты.

  • Спросите, можно ли вылечить ваше состояние другими способами.

  • Знайте, почему рекомендуется тест или процедура и что могут означать результаты.

  • Знайте, чего ожидать, если вы не примете лекарство, не пройдете тест или процедуру.

  • Если вам назначена повторная встреча, запишите дату, время и цель этого визита.

  • Узнайте, как вы можете связаться с вашим поставщиком медицинских услуг, если у вас возникнут вопросы.

Инфекция Helicobacter pylori

Определение

Helicobacter pylori ( H pylori ) – это тип бактерий, поражающих желудок. Это очень распространенное явление, которым страдает около двух третей населения мира. Инфекция H. pylori является наиболее частой причиной язвенной болезни. Однако у большинства людей инфекция не вызывает проблем.

Альтернативные названия

Инфекция H. pylori

Причины

Бактерии H. pylori , скорее всего, передаются напрямую от человека к человеку.Обычно это происходит в детстве. Если не лечить, инфекция сохраняется на протяжении всей жизни.

Непонятно, как бактерии передаются от человека к человеку. Бактерии могут распространяться от:

  • Контакт рот в рот
  • Заболевание желудочно-кишечного тракта (особенно при рвоте)
  • Контакт со стулом (фекальным материалом)
  • Загрязненная пища и вода

Бактерии могут вызывать язвы в следующим образом:

  • H. pylori проникает в слизистый слой желудка и прикрепляется к его слизистой оболочке.
  • H. pylori заставляет желудок производить больше желудочной кислоты. Это повреждает слизистую оболочку желудка, что у некоторых людей приводит к язве.

Помимо язв, бактерии H. pylori могут также вызывать хроническое воспаление желудка (гастрит) или верхней части тонкой кишки (дуоденит).

H pylori также иногда может привести к раку желудка или редкому типу лимфомы желудка.

Симптомы

Приблизительно от 10% до 15% людей, инфицированных H. pylori , заболевают язвенной болезнью.Небольшие язвы могут не вызывать никаких симптомов. Некоторые язвы могут вызвать серьезное кровотечение.

Ноющая или жгучая боль в животе – частый симптом. Боль может усиливаться натощак. Боль может отличаться от человека к человеку, и у некоторых людей боли нет.

К другим симптомам относятся:

  • Чувство полноты или вздутия живота и проблемы с потреблением такого же количества жидкости, как обычно
  • Голод и чувство пустоты в желудке, часто через 1-3 часа после еды
  • Легкая тошнота, которая может пройти через рвота
  • Потеря аппетита
  • Потеря веса без попытки
  • Отрыжка
  • Кровавый или темный, дегтеобразный стул или кровавая рвота

Обследования и анализы

Ваш лечащий врач проверит вас на H. pylori , если вы:

  • У вас есть пептические язвы или язвы в анамнезе.
  • У вас дискомфорт и боль в желудке, длящиеся более месяца.

Сообщите своему врачу, какие лекарства вы принимаете.Нестероидные противовоспалительные препараты (НПВП) также могут вызывать язвы. Если у вас проявляются симптомы инфекции, врач может выполнить следующие тесты для H pylori . К ним относятся:

  • Дыхательный тест – дыхательный тест с мочевиной (Дыхательный тест с изотопом углерода и мочевиной, или UBT). Ваш врач заставит вас проглотить специальное вещество, содержащее мочевину. Если присутствует H pylori , бактерии превращают мочевину в диоксид углерода. Это обнаруживается и записывается на выдохе через 10 минут.
  • Анализ крови – определение антител к H. pylori в крови.
  • Анализ стула – определяет наличие бактерий в стуле.
  • Биопсия – исследует образец ткани, взятый из слизистой оболочки желудка с помощью эндоскопии. Образец проверяется на бактериальную инфекцию.

Лечение

Для того, чтобы ваша язва зажила и уменьшила вероятность ее рецидива, вам дадут лекарства для: желудок

Принимайте все лекарства, как вам сказали.Также могут помочь другие изменения в образе жизни.

Если у вас язвенная болезнь и инфекция H pylori , рекомендуется лечение. Стандартное лечение включает в себя различные комбинации следующих лекарств в течение 10–14 дней:

  • Антибиотики для уничтожения H. pylori
  • Ингибиторы протонной помпы для снижения уровня кислоты в желудке
  • Висмут (основной ингредиент пепто-бисмола) ) могут быть добавлены для уничтожения бактерий.

Принимать все эти лекарства в течение 14 дней непросто.Но это дает вам лучший шанс избавиться от бактерий H pylori и предотвратить язвы в будущем.

Перспективы (Прогноз)

Если вы примете лекарства, высока вероятность излечения от инфекции H pylori . У вас будет гораздо меньше шансов получить новую язву.

Иногда бывает трудно полностью вылечить H. pylori . Могут потребоваться повторные курсы различных процедур. Иногда проводится биопсия желудка, чтобы проверить микроб, чтобы определить, какой антибиотик лучше всего подействует.Это может помочь в дальнейшем лечении. В некоторых случаях H pylori невозможно вылечить с помощью какой-либо терапии, хотя симптомы можно уменьшить.

В случае лечения повторное заражение может произойти в районах с плохими санитарными условиями.

Возможные осложнения

Длительная (хроническая) инфекция, вызванная H. pylori , может привести к:

  • Язвенная болезнь
  • Хроническое воспаление
  • Язвы желудка и верхних отделов кишечника
  • Рак желудка
  • Слизистая оболочка желудка лимфоидная ткань (MALT) лимфома

Другие осложнения могут включать:

  • Тяжелая кровопотеря
  • Рубцы от язвы могут затруднить опорожнение желудка
  • Перфорация или отверстие желудка и кишечника

Когда проводить Обратитесь к медицинскому работнику

Тяжелые симптомы, которые появляются внезапно, могут указывать на закупорку кишечника, перфорацию или кровотечение, причем все это является неотложной ситуацией.Симптомы могут включать:

  • Деготь, черный или кровянистый стул
  • Сильная рвота, которая может включать кровь или вещество с видом кофейной гущи (признак серьезного кровотечения) или все содержимое желудка (признак кишечного тракта). непроходимость)
  • Сильная боль в животе с рвотой или без нее или с признаками крови

Любой, у кого есть какие-либо из этих симптомов, должен немедленно обратиться в отделение неотложной помощи.

Каталожные номера

Cover TL, Blaser MJ.Helicobacter pylori и другие виды желудочных Helicobacter В: Bennett JE, Dolin R, Blaser MJ, eds. Принципы и практика инфекционных заболеваний Манделла, Дугласа и Беннета. 9 изд. Филадельфия, Пенсильвания: Эльзевьер; 2020: глава 217.

Ku GY, Ilson DH. Рак желудка. В: Niederhuber JE, Armitage JO, Kastan MB, Doroshow JH, Tepper JE, ред. Клиническая онкология Абелова. 6-е изд. Филадельфия, Пенсильвания: Эльзевьер; 2020: глава 72.

Morgan DR, Crowe SE. Инфекция Helicobacter pylori.В: Feldman M, Friedman LS, Brandt LJ, eds. Заболевания желудочно-кишечного тракта и печени Слейзенгера и Фордтрана. 10-е изд. Филадельфия, Пенсильвания: Эльзевьер Сондерс; 2016: глава 51.

Узнайте о Helicobacter Pylori

Helicobacter pylori, или более известная как H. pylori, – это бактерия, обнаруженная в пищеварительном тракте человека, которая поражает более половину взрослого населения мира.

Хотя в целом эти бактерии безвредны, они могут поражать слизистую оболочку желудка, которая представляет собой слой, который защищает желудок от кислоты, участвующей в переваривании пищи.Это может привести к язвам и язвам в желудке и тонком кишечнике.

В очень редких случаях инфекция H. pylori может даже привести к раку желудка.

Ученые до сих пор не знают, как H. pylori может инфицировать людей. Считается, что бактерии могут передаваться от человека к человеку через рот или при контакте с зараженной пищей или водой. Бактерии также могут распространяться через человеческие фекалии, если человек не соблюдает правила гигиены в туалете.

Понимание симптомов и методов лечения инфекции Helicobacter pylori может помочь вам справиться с этим заболеванием более эффективно.

Симптомы инфекции H. pylori

Сама инфекция не вызывает никаких симптомов. У большинства людей с инфекцией может вообще не развиться никаких симптомов.

С другой стороны, когда бактерии H. pylori вызывают язву желудка, у пациентов могут появиться симптомы.

Наиболее частый симптом – тупая или жгучая боль в желудке, которые пациенты могут испытывать между приемами пищи или когда желудок пуст. Боль может уменьшиться после еды или приема антацидов.

Другие общие симптомы, которые могут возникнуть в результате язв, вызванных инфекцией Helicobacter pylori, включают:

  • отрыжка
  • Вздутие живота
  • Изжога
  • Потеря аппетита
  • Рвота
  • Необъяснимая потеря веса

Язвы также могут обостриться и начать кровотечение в кишечник, что может указывать на то, что вы страдаете от более тяжелого состояния здоровья. Проконсультируйтесь с врачом, если у вас появятся следующие симптомы.

  • Необъяснимая усталость
  • Кровь в стуле
  • Сильная боль в животе
  • Головокружение или обмороки
  • Бледная кожа
  • Проблемы с дыханием
Диагностика инфекции Helicobacter pylori

Когда вы консультируетесь со своим врачом по поводу язв, он может спросить вас о вашей истории болезни и может провести физический тест, надавив на живот, чтобы проверить, нет ли отека, болезненности или боли.

Врач может также провести следующие анализы, чтобы установить причину язвы:

Анализы крови: Практикующие врачи проверяют наличие антител к H. pylori в вашей крови.

Анализы стула: Врачи используют образцы стула для выявления признаков инфекции Helicobacter pylori.

Дыхательные пробы: Вас могут попросить проглотить препарат мочевины. Если присутствует H. pylori, он расщепляет вещество и выделяет CO2.

Эндоскопия: Ваш врач может организовать гастроскопию / эндоскопию – тонкую трубку с насадкой для камеры вводят через рот в желудок для проверки на наличие язв.

Лечение Helicobacter pylori

Врачи могут начать лечение пациентов только в том случае, если инфекция приводит к язве, которая может вызвать у вас некоторые из симптомов, описанных выше. Лечение Helicobacter pylori также помогает предотвратить развитие язвы в рак желудка.

Существуют две общепринятые стратегии лечения обостренных инфекций Helicobacter pylori.

Лекарство

Ваш врач может назначить вам комбинацию антибиотиков и препаратов, снижающих количество кислоты, вырабатываемой в желудке.Блокирование чрезмерного производства кислоты может помочь антибиотикам более эффективно бороться с бактериями.

Диетические рекомендации

Ваш врач может попросить вас избегать употребления острой пищи и алкоголя и бросить курить, так как это может усугубить язвы, вызванные инфекцией H. pylori.

Управление инфекциями H. pylori может быть ключом к профилактике язв и рака желудка

Инфекции, вызываемые бактериями H.pylori, являются распространенным бактериальным заболеванием, поражающим значительную часть взрослого населения во всем мире.Понимание симптомов инфекции может помочь предотвратить обострение язвы и рака желудка.

Обратитесь к специалисту сегодня, если считаете, что испытываете эти симптомы.

Лечение инфекций Helicobacter pylori | BMC Gastroenterology

  • 1.

    Bezmin Abadi ATI, Enzo, Yeong Yeh L. Почему в нашем желудке все еще находится Helicobacter pylori? Malays J Med Sci. 2015; 22 (5): 70–5.

    Google Scholar

  • 2.

    Zhu Y, Zhou X, Wu J, Su J, Zhang G. Факторы риска и распространенность инфекции Helicobacter pylori в зоне постоянно высокой заболеваемости карциномой желудка в городе Янчжун. Гастроэнтерол Рес Прак. 2014; 2014: 481365.

    PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 3.

    Gold BD. Новые подходы к инфекции Helicobacter pylori у детей. Curr Gastroenterol Rep. 2001; 3 (3): 235–47.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 4.

    Талеби Безмин Абади А. Терапия Helicobacter pylori: смесь настоящего и будущего. Biomed Res Int. 2014; 2014: 124607.

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 5.

    Николсон Г.Л., Хайер Дж. Роль хронических бактериальных и вирусных инфекций в нейродегенеративных, нейроповеденческих, психиатрических, аутоиммунных и утомляющих заболеваниях: часть 2. Br J Med Pract. 2010. 3 (1): 301–10.

  • 6.

    Ямаока Ю.Патогенез гастродуоденальных заболеваний, связанных с Helicobacter pylori, по данным молекулярно-эпидемиологических исследований. Гастроэнтерол Рес Прак. 2012; 2012: 371503.

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 7.

    Фарзи Н, Малекиан Т, Алебуе М, Вазири Ф, Зали MR. Разнообразие генотипов и развитие квазивидов Helicobacter pylori у одного хозяина. Jpn J Infect Dis. 2015; 68 (3): 176–80.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 8.

    Yamaoka Y, Graham DY. Вирулентность Helicobacter pylori и патогенез рака. Будущее Онкол. 2014; 10 (8): 1487–500.

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 9.

    Portal-Celhay C, Perez-Perez GI. Иммунные ответы на колонизацию Helicobacter pylori: механизмы и клинические результаты. Clin Sci. 2006. 110 (3): 305–14.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 10.

    Abadi ATB, Taghvaei T, Mobarez AM, Vaira G, Vaira D. Высокая корреляция между babA 2-положительными штаммами Helicobacter pylori и наличием рака желудка. Intern Emerg Med. 2013. 8 (6): 497–501.

    Артикул Google Scholar

  • 11.

    Сиппонен П., Хювяринен Х. Роль Helicobacter pylori в патогенезе гастрита, язвенной болезни и рака желудка. Сканд Дж Гастроэнтерол. 1993; 28 (sup196): 3–6.

    Артикул Google Scholar

  • 12.

    Mégraud F. Текущие рекомендации по терапии Helicobacter pylori в мире развивающейся резистентности. Кишечные микробы. 2013. 4 (6): 541–8.

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 13.

    Талеби Безмин Абади А. Обновленное лечение Helicobacter pylori в 2015 году. Саудовская Аравия J Gastroenterol. 2016; 22 (1): 80.

    Артикул PubMed Google Scholar

  • 14.

    Megraud F. Текущие рекомендации по терапии Helicobacter pylori в мире развивающейся резистентности. Кишечные микробы. 2013. 4 (6): 541–8.

    Артикул PubMed Google Scholar

  • 15.

    Фок К.М., Грэм Д.Ю., Малфертхайнер П. Исследование Helicobacter pylori: исторические открытия и направления на будущее. Нат Рев Гастроэнтерол Гепатол. 2013. 10 (8): 495–500.

    PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 16.

    Muller A, Solnick JV. Воспаление, иммунитет и разработка вакцины против Helicobacter pylori. Helicobacter. 2011; 16 Дополнение 1: 26–32.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 17.

    Чжан С., Моис Л., Мосс С.Ф. Вакцины против H. pylori: почему их до сих пор нет. Человеческие вакцины. 2011; 7 (11): 1153–7.

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 18.

    Asaoka D, Nagahara A, Matsuhisa T, Takahashi S, Tokunaga K, Kawai T, Kawakami K, Suzuki H, Suzuki M, Nishizawa T. Тенденции второй линии эрадикационной терапии Helicobacter pylori в Японии: многоцентровое исследование в столице Токио площадь. Helicobacter. 2013; 18 (6): 468–72.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 19.

    Ли В-К, Ма Дж-Л, Чжан Л., Браун Л. М., Ли Дж-И, Шэнь Л., Пан К-Ф, Лю В-Д, Ху И, Хань З. Влияние лечения Helicobacter pylori на заболеваемость раком желудка и смертность в подгруппах.J Natl Cancer Inst. 2014; 106 (7): dju116.

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 20.

    Абади А., Бонтен М.Дж., Кустерс Дж.Г. Комментарий к: «Другой антибиотик Без культуральной эрадикации (DANCE) Helicobacter pylori: простой способ управлять эрадикацией H. Pylori». Dig Liver Dis. 2013; 45 (5): 438–8.

  • 21.

    Mégraud F, Bénéjat L, Ngoyi ENO, Lehours P. Молекулярные подходы к выявлению устойчивости к противомикробным препаратам Helicobacter pylori.Гастроэнтерол Clin N Am. 2015; 44 (3): 577–96.

    Артикул Google Scholar

  • 22.

    Abadi ATB, Taghvaei T, Mobarez AM, Carpenter BM, Merrell DS. Частота устойчивости к антибиотикам у штаммов Helicobacter pylori, выделенных из северного населения Ирана. J Microbiol. 2011; 49 (6): 987–93.

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 23.

    McColl K, Murray L, El-Omar E, Dickson A, El-Nujumi A, Wirz A, Kelman A, Penny C, Knill-Jones R, Hilditch T. Симптоматическая выгода от искоренения инфекции Helicobacter pylori у пациентов с неязвенной диспепсией. N Engl J Med. 1998. 339 (26): 1869–74.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 24.

    Форбс Г., Глейзер М., Каллен Д., Коллинз Б., Уоррен Дж., Кристиансен К., Маршалл Б. Язвенная болезнь двенадцатиперстной кишки, пролеченная с помощью эрадикации Helicobacter pylori: семилетнее наблюдение.Ланцет. 1994. 343 (8892): 258–60.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 25.

    МакКьюн А., Лейн А, Мюррей Л., Харви И., Наир П., Донован Дж., Харви Р. Снижение риска атопических расстройств у взрослых с инфекцией Helicobacter pylori. Eur J Gastroenterol Hepatol. 2003. 15 (6): 637–40.

    Артикул PubMed Google Scholar

  • 26.

    Чен Й, Блазер М.Дж. Обратные ассоциации Helicobacter pylori с астмой и аллергией.Arch Intern Med. 2007. 167 (8): 821–7.

    Артикул PubMed Google Scholar

  • 27.

    ESG. Международная ассоциация между инфекцией Helicobacter pylori и раком желудка. Ланцет. 1993. 341 (8857): 1359–63.

    Артикул Google Scholar

  • 28.

    Ма JL, Zhang L, Brown LM, Li JY, Shen L, Pan KF, Liu WD, Hu Y, Han ZX, Crystal-Mansour S, et al. Пятнадцатилетние эффекты Helicobacter pylori, чеснока и витаминной терапии на заболеваемость и смертность от рака желудка.J Natl Cancer Inst. 2012. 104 (6): 488–92.

    CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 29.

    Blaser MJ, Chen Y, Reibman J. Защищает ли Helicobacter pylori от астмы и аллергии? Кишечник. 2008. 57 (5): 561–7.

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 30.

    Роккас Т., Гисберт Дж. П., Нив Й., О’Морайн С. Связь между инфекцией Helicobacter pylori и воспалительным заболеванием кишечника на основе метаанализа.U Eur Gastroenterol J. 2015; 3 (6): 539–50.

    CAS Статья Google Scholar

  • 31.

    Лютер Дж., Дэйв М., Хиггинс П.П., Као Дж. Связь между инфекцией Helicobacter pylori и воспалительным заболеванием кишечника: метаанализ и систематический обзор литературы. Воспаление кишечника. 2010. 16 (6): 1077–84.

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 32.

    Vaezi MF, Falk GW, Peek RM, Vicari JJ, Goldblum JR, Perez-Perez GI, Rice TW, Blaser MJ, Richter JE. CagA-положительные штаммы Helicobacter pylori могут защитить от пищевода Барретта. Am J Gastroenterol. 2000. 95 (9): 2206–11.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 33.

    Wang Y, Bi Y, Zhang L, Wang C. Связана ли инфекция Helicobacter pylori с риском астмы? метаанализ на основе 770 случаев и 785 контролей.Int J Med Sci. 2012; 9 (7): 603–10.

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 34.

    Rugge M, Genta RM. Стадия гастрита: международное предложение. Гастроэнтерология. 2005. 129 (5): 1807–8.

    Артикул PubMed Google Scholar

  • 35.

    Рагге М., Корреа П., Ди Марио Ф., Эль-Омар Е., Фиокка Р., Гебоес К., Гента Р. М., Грэм Д. Ю., Хаттори Т., Малфертхайнер П. и др.OLGA Стадия гастрита: учебное пособие. Dig Liver Dis. 2008. 40 (8): 650–8.

    CAS Статья PubMed Google Scholar

  • 36.

    Garza-González E, Perez-Perez GI, Maldonado-Garza HJ, Bosques-Padilla FJ. Обзор диагностики, лечения и методов выявления хеликобактер пилори. Мир Дж. Гастроэнтерол. 2014; 20 (6): 1438–49.

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • 37.

    Syrjänen KJ, Sipponen P, Härkönen M, Peetsalu A, Korpela S. Точность теста GastroPanel при обнаружении атрофического гастрита. Eur J Gastroenterol Hepatol. 2015; 27 (1): 102.

    Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

  • Helicobacter Pylori

    Что такое хеликобактер пилори (H. pylori)?

    Helicobacter pylori (H. pylori) – это тип бактерий, поражающих ваш желудок.Это может повредить ткани желудка и первую часть тонкой кишки (двенадцатиперстную кишку). Это может вызвать боль и воспаление. В некоторых случаях он также может вызывать болезненные язвы, называемые пептическими язвами, в верхних отделах пищеварительного тракта.

    H. pylori является обычным явлением. У многих это есть. У большинства людей не появляются язвы и не проявляются какие-либо симптомы. Но это основная причина язв.

    H. pylori атакует слизистую оболочку желудка. Бактерии вырабатывают фермент, называемый уреазой.Этот фермент снижает кислотность желудочного сока. Это ослабляет слизистую оболочку желудка. В этом случае клетки желудка имеют больший риск быть поврежденными кислотой и пепсином, сильными пищеварительными жидкостями. Это может привести к появлению язв в желудке или двенадцатиперстной кишке.

    Бактерии H. pylori также могут прикрепляться к клеткам желудка. Ваш желудок не может хорошо себя защитить. Эта область краснеет и опухает (воспаляется).

    H. pylori также может вызывать повышенную кислотность желудка. Эксперты в области здравоохранения не совсем понимают, как это сделать.

    H. pylori также может привести к раку желудка.

    Что вызывает инфекцию H. pylori?

    Эксперты в области здравоохранения не знают наверняка, как распространяется инфекция H. pylori. Они считают, что микробы могут передаваться от человека к человеку через рот, например, при поцелуях.

    Также может передаваться через рвоту или стул. Это может произойти, если вы:

    Кто подвержен риску заражения H. pylori?

    Вы можете подвергаться большему риску заражения H.pylori из-за:

    • Ваш возраст. Более половины людей в США с бактериями старше 50 лет.

    • Ваша раса или национальность. Почти у половины всех афроамериканцев есть бактерии. Из людей, которые приезжают в США из развивающихся стран, по крайней мере 50% латиноамериканцев и 50% людей из Восточной Европы имеют H. pylori.

    Большинство людей впервые заражаются бактериями в детстве, но и взрослые тоже могут заразиться.

    Каковы симптомы H. pylori?

    У большинства людей бактерии сохраняются годами, не зная об этом, потому что у них нет никаких симптомов. Эксперты не знают почему.

    У вас может быть покраснение и опухоль (воспаление) слизистой оболочки желудка. Это называется гастритом.

    Вы можете получить язвы или язвы желудка или первой части тонкой кишки (двенадцатиперстной кишки). Симптомы язвы могут включать боль в животе или животе. Боль может:

    • Будь тупой болью, которая не проходит

    • Происходит через 2–3 часа после еды

    • Приходи и уходи на несколько дней или недель

    • Происходит посреди ночи, когда ваш желудок пуст

    • Уходите, когда вы едите или принимаете лекарства, снижающие уровень кислоты в желудке (антациды)

    • Вызывает анемию из-за кровотечения

    Другие симптомы язвы могут включать:

    Симптомы язвы могут быть похожи на другие проблемы со здоровьем.Всегда обращайтесь к своему врачу, чтобы убедиться.

    Как диагностируется H. pylori?

    Ваш лечащий врач изучит ваше прошлое здоровье и проведет медицинский осмотр. Вам также могут потребоваться тесты, в том числе:

    • Анализы крови. Они проверяют наличие клеток (антител), борющихся с инфекциями, которые означают, что у вас есть бактерии.

    • Культура стула. Этот тест ищет в вашем пищеварительном тракте любые патологические бактерии, которые могут вызвать диарею и другие проблемы.Небольшой образец стула собирается и отправляется в лабораторию. Через 2 или 3 дня тест покажет, есть ли у вас патологические бактерии.

    • Анализ стула на антиген. В ходе этого теста берется образец стула для выявления бактерий H. pylori.

    • Дыхательные пробы. Они могут проверить, есть ли углерод после проглатывания таблетки мочевины, содержащей молекулы углерода. Если углерод обнаружен, это означает, что H.pylori вырабатывает фермент уреазу. Этот фермент снижает кислотность желудочного сока. Он ослабляет слизистую оболочку желудка.

    • Верхняя эндоскопия, также называемая EGD (эзофагогастродуоденоскопия). Этот тест исследует слизистую оболочку пищевода (пищевода), желудка и двенадцатиперстной кишки (первая часть тонкой кишки). Для этого используется тонкая трубка с подсветкой или эндоскоп. На одном конце трубки есть камера. Трубка вводится в рот и в горло.Затем он попадает в пищевод, желудок и двенадцатиперстную кишку. Ваш лечащий врач может увидеть эти органы изнутри. При необходимости берется небольшой образец ткани (биопсия). Образец ткани может показать, есть ли у вас фермент уреаза. Он также может проверить наличие бактерий.

    Как лечится H. pylori?

    Лечение будет зависеть от ваших симптомов, возраста и общего состояния здоровья. Это также будет зависеть от степени тяжести состояния.

    Ваш лечащий врач может попросить вас принять лекарство, убивающее бактерии (антибиотики).

    Другие лекарства могут включать:

    • Блокаторы Н-2. Они используются для уменьшения количества кислоты в желудке, блокируя гормон гистамин. Гистамин помогает вырабатывать кислоту.

    • Ингибиторы протонной помпы. Они помогают предотвратить образование кислоты в желудке. Они делают это, останавливая работу кислотного насоса желудка.

    • Протекторы слизистой оболочки желудка. Эти лекарства защищают слизистую оболочку желудка от кислоты и помогают убивать бактерии.

    Возможно, вам придется принимать несколько лекарств одновременно, чтобы избавиться от H. pylori. Иногда план приема лекарств может быть сложным, но важно следовать инструкциям, чтобы избавиться от бактерий.

    Каковы возможные осложнения H. pylori?

    Если вы инфицированы бактериями, у вас может появиться болезненная язва, называемая язвенной болезнью.Эти язвы образуются в верхних отделах пищеварительного тракта.

    Очень тяжелая язва может истощить слизистую оболочку желудка. Это также может вызвать такие проблемы, как:

    • Кровотечение при износе кровеносного сосуда

    • Отверстие или перфорация в стенке желудка

    • Закупорка, когда язва находится в месте, препятствующем выходу пищи из желудка

    H.pylori также может привести к раку желудка.

    Что я могу сделать, чтобы предотвратить заражение H. pylori?

    Эксперты в области здравоохранения не знают наверняка, как бактерии передаются от человека к человеку. Но хорошие привычки в отношении здоровья (гигиена) могут помочь вам обезопасить себя. Эти привычки включают:

    • Мытье рук водой с мылом. Это очень важно делать после посещения туалета и перед едой.

    • Убедитесь, что вся еда, которую вы едите, была очищена и приготовлена ​​безопасно.

    • Убедитесь, что ваша питьевая вода безопасна и чиста.

    Жизнь с H. pylori

    Как только вы точно узнаете, что у вас H. pylori, обратитесь к своему врачу. Они проведут несколько тестов, чтобы убедиться, что бактерии удалены.

    Когда мне следует позвонить своему врачу?

    Позвоните своему врачу, если ваши симптомы ухудшатся или у вас появятся новые симптомы.Немедленно позвоните, если у вас есть такие симптомы, как кровавая рвота, кровь в стуле или черный, дегтеобразный стул. Позвоните своему врачу, если вы худеете без особых усилий.

    Основные сведения о H. pylori

    • H. pylori – это бактерия, поражающая ваш желудок.

    • Он атакует ваш желудок и первую часть тонкой кишки (двенадцатиперстную кишку). Это может вызвать покраснение и отек (воспаление).

    • У многих людей с этой бактерией не будет никаких симптомов.

    • Это может вызвать открытые язвы, называемые пептическими язвами, в верхних отделах пищеварительного тракта.

    • Может вызвать рак желудка.

    • Он может передаваться или передаваться от человека к человеку через рот, например, при поцелуях. Он также может передаваться при прямом контакте со рвотой или калом.

    • Хорошие привычки в отношении здоровья (гигиена) могут защитить вас.

    Следующие шаги

    Советы, которые помогут вам получить максимальную пользу от посещения врача:

    • Знайте причину вашего визита и то, что вы хотите.

    • Перед визитом запишите вопросы, на которые хотите получить ответы.

    • Возьмите с собой кого-нибудь, кто поможет вам задать вопросы и запомнить, что вам говорит поставщик.

    • Во время посещения запишите название нового диагноза и все новые лекарства, методы лечения или тесты. Также запишите все новые инструкции, которые дает вам ваш провайдер.

    • Узнайте, почему прописано новое лекарство или лечение и как они вам помогут.Также знайте, какие бывают побочные эффекты.

    • Спросите, можно ли вылечить ваше состояние другими способами.

    • Знайте, почему рекомендуется тест или процедура и что могут означать результаты.

    • Знайте, чего ожидать, если вы не примете лекарство, не пройдете тест или процедуру.

    • Если вам назначена повторная встреча, запишите дату, время и цель этого визита.

    • Узнайте, как можно связаться с вашим поставщиком медицинских услуг, если у вас возникнут вопросы.

    Лечение инфекции Helicobacter pylori липосомальной линоленовой кислотой in vivo снижает колонизацию и облегчает воспаление

    Значение

    Использование липосомальной композиции линоленовой кислоты для уничтожения Helicobacter pylori бактерий в желудке представляет собой мощный вариант лечения H.pylori , а также ассоциированные с ней гастродуоденальные заболевания. Поскольку терапевтический агент представляет собой натуральное соединение, содержащееся в обычных растительных маслах, ожидается, что такое лечение будет рентабельным по сравнению с существующими терапевтическими средствами против H. pylori на основе антибиотиков. Что еще более важно, превосходная противомикробная эффективность, отмеченная значительным снижением бактериальной колонизации и воспаления in vivo, достигается за счет быстрого слияния наноформуляции с бактериальной мембраной, механизма, известного как преодоление устойчивости бактерий к лекарственным средствам.Подобные терапевтические подходы могут быть разработаны для лечения различных типов других бактериальных инфекций.

    Abstract

    Инфекция Helicobacter pylori отличается широкой распространенностью и сильной ассоциацией с различными желудочными заболеваниями, включая гастрит, язвенную болезнь и рак желудка. В связи с быстрым появлением штаммов H. pylori , устойчивых к существующим антибиотикам, текущие схемы лечения демонстрируют быстрое снижение скорости их эрадикации. Очевидно, что новые антибактериальные стратегии против H.pylori необходимы срочно. Здесь мы исследовали терапевтический потенциал липосомальной линоленовой кислоты (LipoLLA) in vivo для лечения инфекции H. pylori . Композиция LipoLLA размером ~ 100 нм была склонна к слиянию с бактериальной мембраной, тем самым напрямую высвобождая высокую дозу линоленовой кислоты в бактериальную мембрану. LipoLLA проникала в слизистую оболочку желудка мыши, и значительная часть введенного LipoLLA оставалась в слизистой оболочке желудка до 24 часов после перорального введения.Тесты in vivo дополнительно подтвердили, что LipoLLA способен убивать H. pylori и снижать бактериальную нагрузку в желудке мышей. Было также показано, что лечение LipoLLA снижает уровни провоспалительных цитокинов, включая интерлейкин 1β, интерлейкин 6 и фактор некроза опухоли альфа, которые в противном случае были повышены из-за инфекции H. pylori . Наконец, тест на токсичность продемонстрировал превосходную биосовместимость LipoLLA с нормальным желудком мыши. В совокупности результаты этого исследования показывают, что LipoLLA является многообещающим, эффективным и безопасным терапевтическим средством для лечения H.pylori инфекция.

    Являясь одним из наиболее распространенных бактериальных патогенов в мире, Helicobacter pylori инфицирует более половины населения мира (1, 2). Инфекция H. pylori является причиной большинства случаев воспалительного гастрита, язвенной болезни и рака желудка у людей (3). Во всем мире стандартное лечение инфекции H. pylori включает два антибиотика (кларитромицин плюс амоксициллин или метронидазол) и ингибитор протонной помпы, называемую тройной терапией, которая остается первой линией лечения в клинике (4).Однако уровень эрадикации H. pylori при тройной терапии значительно снизился, варьируя от 60 до 75%, в результате увеличения числа штаммов H. pylori , устойчивых к этим антибиотикам (5). В частности, распространенность резистентности H. pylori к метронидазолу, который является ключевым компонентом схемы тройной терапии, увеличилась до ~ 40% в развитых странах, с еще большей распространенностью ~ 90% в развивающихся странах (6). . Хотя в настоящее время исследуются различные модифицированные схемы лечения антибиотиками, направленные на преодоление лекарственной устойчивости, они дали лишь смешанные результаты (7).Кроме того, плохое соблюдение пациентом режима лечения, побочные эффекты и высокая стоимость, связанная с приемом нескольких антибиотиков, часто приводят к неэффективности терапии (8). Ясно, что срочно необходимы новые препараты против H. pylori , обладающие как превосходной терапевтической эффективностью, так и незначительными побочными эффектами.

    Различные свободные жирные кислоты (FFA), включая лауриновую кислоту, миристолеиновую кислоту, линолевую кислоту и линоленовую кислоту (LLA), обладающие антибактериальной активностью против широкого спектра бактерий, включая H.pylori , недавно вызвали интерес исследователей (9, 10). Интересно, что по сравнению с обычными антибиотиками, СЖК вызывают лекарственную устойчивость у H. pylori с гораздо меньшей частотой (11). Кроме того, эти липидоподобные молекулы вездесущи и поэтому считаются безопасными. Хотя и многообещающе, ингибирование H. pylori с помощью FFA остается сложной задачей. В частности, большинство FFA со средней длиной цепи, эффективных против H. pylori , плохо растворимы.Их растворимость дополнительно снижается после перорального приема из-за протонирования карбоксильных групп при pH желудочного сока, что делает эти молекулы неэффективными. Кроме того, СЖК, подверженные окислению, этерификации и комплексообразованию липид-белок, дополнительно снижают их бактерицидную активность in vivo (9).

    Упаковка свободных жирных кислот в состав наночастиц стала привлекательным и эффективным подходом к преодолению вышеупомянутых проблем. В частности, амфифильные свойства СЖК позволяют напрямую встраиваться в двухслойную липидную мембрану фосфолипидных липосом с высоким выходом нагрузки (12).Огромный успех липосом как одобренного средства доставки открывает отличные возможности для FFAs для трансляционного тестирования и клинического использования. Среди различных липосомальных композиций FFA липосомный LLA (LipoLLA) показал замечательную бактерицидную активность против H. pylori (13). При тестировании с H. pylori Sydney штамм 1 (SS1), лабораторным штаммом бактерий, LipoLLA продемонстрировал антибактериальную эффективность, сравнимую со свободным LLA, предварительно растворенным в органическом растворителе, в подавлении как спиральных, так и кокковидных форм бактерий.По сравнению с амоксициллином, который убивал спиралевидную, но не кокковую форму бактерий, LipoLLA был способен убивать обе формы. В дальнейших испытаниях на множестве клинически изолированных и устойчивых к метронидазолу штаммов H. pylori , LipoLLA уничтожил все штаммы бактерий, независимо от их статуса устойчивости к метронидазолу. Что еще более важно, бактерии не развивали лекарственную устойчивость в экспериментальных условиях при культивировании с LipoLLA в различных суббактерицидных концентрациях, но они приобрели устойчивость как к метронидазолу, так и к LLA при культивировании с лекарствами в сопоставимых концентрациях.Эти предварительные результаты in vitro предполагают, что LipoLLA обладает большим потенциалом, чтобы стать эффективным противомикробным средством для лечения инфекции H. pylori .

    Чтобы реализовать терапевтический потенциал LipoLLA, мы систематически оценивали LipoLLA для лечения инфекции H. pylori in vivo. Используя помеченный флуоресценцией LipoLLA, мы исследовали его распределение в просвете слизистой оболочки желудка и зависящее от времени удерживание внутри желудка мыши после перорального введения. Используя модель мыши H.pylori , мы оценили терапевтическую эффективность LipoLLA против H. pylori в сравнении со стандартной тройной терапией и LLA. Чтобы оценить ответ хозяина на лечение LipoLLA, мы также исследовали уровни провоспалительных цитокинов, включая интерлейкин 1β (IL-1β), IL-6 и фактор некроза опухоли альфа (TNFα) во время лечения. Кроме того, профиль токсичности LipoLLA у мышей оценивали с помощью гистологического анализа ткани желудка и изменений массы тела.Результаты этого исследования обеспечивают более клинически связанную оценку LipoLLA как эффективного и безопасного средства против H. pylori .

    Результаты

    Состав LipoLLA и характеристика in vitro.

    Из-за своей амфифильной природы LLA может быть легко загружен в липосомы и впоследствии может сливаться с бактериями для антибактериальной активности (рис. 1 A ). В исследовании LLA, l-α-фосфатидилхолин (EggPC) и холестерин сначала были смешаны в массовом соотношении 3: 6: 1, а затем экструдированы для получения LipoLLA (14).Полученный LipoLLA имел гидродинамический диаметр 105,7 ± 0,3 нм, что сравнимо с диаметром липосом без покрытия, сделанным только из EggPC и холестерина, при весовом соотношении 9: 1 (фиг. 1 B ). Индексы полидисперсности липосом без покрытия и LipoLLA составили 0,17 ± 0,01 и 0,18 ± 0,01 соответственно, что указывает на относительно узкое распределение липосом по размерам. Между тем, поверхностный дзета-потенциал липосом без покрытия составлял -8,7 ± 0,1 мВ в деионизированной воде, тогда как дзета-потенциал LipoLLA составлял -54.9 ± 1,0 мВ. Такое резкое снижение поверхностного дзета-потенциала указывает на включение LLA в липидные бислои, где группа карбоновой кислоты депротонируется до COO при pH, близком к физиологическому, равному 7,4.

    Рис. 1. Состав

    LipoLLA и характеристика in vitro. ( A ) Схематическое изображение слияния LipoLLA с бактериальной мембраной для обеспечения антибактериальной активности. ( B ) Гидродинамический размер (диаметр, нм) и дзета-потенциал поверхности (мВ) липосомы EggPC (без LLA) и LipoLLA, измеренные с помощью динамического светорассеяния.( C ) Флуоресцентные изображения подтверждают взаимодействие слияния между LipoLLA и H. pylori . LipoLLA метили флуоресцентным красителем RhB (красный), а бактерии окрашивали DAPI (синий). Контрольные бактерии инкубировали с PBS. (Шкала, 5 мкм) ( D ) Бактерицидная активность LipoLLA и LLA in vitro в различных концентрациях против H. pylori . ( E ) Жизнеспособность клеток AGS карциномы желудка человека при обработке LipoLLA и LLA в различных концентрациях лекарственного средства.В D и E все концентрации относятся к концентрации LLA, независимо от составов. Планки погрешностей представляют собой стандартное отклонение, полученное из трех независимых экспериментов.

    Состав LipoLLA был дополнительно исследован на его способность к слиянию с бактериями H. pylori , механизм, который может нарушить целостность бактериальной мембраны из-за бактерицидной активности (13). Здесь LipoLLA метили липофильным 1,2-димиристоил-синглицеро-3-фосфоэтаноламин- N – (лиссамин родамин B сульфонил) (соль аммония) (DMPE-RhB) флуорофором (возбуждение / испускание = 557/571 нм).Необработанные бактерии, использованные в качестве контроля, показали только нуклеоиды, окрашенные DAPI (синий) (фиг. 1 C ). Однако, когда бактерии инкубировали с LipoLLA, содержащим DMPE-RhB, наблюдался сильный сигнал флуоресценции RhB, окружающий бактериальные нуклеоиды, что свидетельствует о наличии активности слияния (фиг. 1 C ). Кроме того, сигнал флуоресценции был исключительно и равномерно распределен вокруг бактериальных нуклеоидов, и изображение четко отражало характерную спиралевидную форму H.pylori бактерий. Таким образом, микроскопические наблюдения, согласующиеся с нашими предыдущими исследованиями (15), подтверждают слияние LipoLLA с H. pylori .

    Бактерицидная активность LipoLLA против H. pylori также оценивалась in vitro. Бактерии, инкубированные в бульонах, содержащих различные концентрации LipoLLA, приводили к нелинейной корреляции между жизнеспособностью бактерий и концентрациями LipoLLA, что согласуется с механизмом слияния LipoLLA– H. pylori (рис.1 Д ) (13). Для этого исследования мы определили минимальную бактерицидную концентрацию как минимальную концентрацию бактерицидного агента, необходимую для уничтожения 3 log (99,9%) бактерий в течение 30-минутной инкубации. Соответственно, минимальные значения бактерицидной концентрации для LipoLLA и LLA были определены как 65 и 80 мкг / мл соответственно. Несмотря на свою сильную бактерицидную активность, LipoLLA продемонстрировал небольшую токсичность по отношению к клеткам AGS карциномы желудка человека, поскольку воздействие LipoLLA в концентрациях от 30 до 900 мкг / мл показало незначительное высвобождение лактатдегидрогеназы (рис.1 E ). Напротив, воздействие свободного LLA приводило к зависимому от концентрации увеличению высвобождения лактатдегидрогеназы. Примечательно, что 5% ДМСО нетоксичен для клеток; следовательно, наблюдаемая цитотоксичность, вероятно, является результатом свободной формы LLA. Фактически, давно известно, что свободные жирные кислоты, включая LLA в их свободных формах, вызывают ряд токсических эффектов (16⇓ – 18). По сравнению со свободными формами FFA, липосомный состав ограничивает молекулы FFA внутри липидных бислоев и, таким образом, ограничивает их влияние на внутриклеточную активность, тем самым снижая их токсические эффекты.

    Удержание и распределение LipoLLA в желудке мышей.

    H. pylori в основном находится в прилипшем слое слизи близко к эпителиальной поверхности (19). Следовательно, для эффективного антибактериального лечения критически важно проникновение LipoLLA через слой слизи и его удержание на стенке желудка (рис. 2 A ). Чтобы изучить удержание и распределение LipoLLA в желудке мышей, мы вводили мышам перорально меченный флуоресценцией LipoLLA. Через 4 и 24 часа после введения LipoLLA весь желудок мыши вырезали и вскрывали.Затем выстилку просвета промывали PBS и выравнивали для флуоресцентной визуализации. В качестве контрольной группы ткань желудка, полученная от необработанных мышей, не показывала детектируемого излучения флуоресценции (фиг. 2 B ). Напротив, сильная флуоресценция наблюдалась в ткани желудка, собранной через 4 часа после перорального желудочного зондирования, что было более длительным временем по сравнению с сообщенным временем опорожнения желудка мышей (рис. 2 C ) (20). Следовательно, очевидное присутствие липосом, наблюдаемое здесь, указывает на эффективное удерживание липосом в слизистой оболочке желудка.Изображение, полученное через 24 часа после перорального желудочного зондирования, также показало свидетельство сигнала флуоресценции по всему желудку, хотя интенсивность флуоресценции немного снизилась (рис. 2 D ). Дальнейшая количественная оценка задержки в желудке LipoLLA показала, что через 4 часа после лечения в желудке оставалось около 69 мкг LipoLLA; это количество снизилось до ~ 34 мкг через 24 ч после обработки (фиг. 2 E ).

    Рис. 2.

    Удержание и распределение LipoLLA в желудке мышей. ( A ) Анатомическое изображение слизистой оболочки желудка, инфицированной H.pylori . ( B D ) Флуоресцентные изображения LipoLLA из просвета выстилки свежевырезанного желудка мыши через 0 (без лечения), 4 и 24 часа после перорального введения LipoLLA через зонд соответственно. ( E ) Количественное определение LipoLLA, удерживаемого в желудке мыши через 4 и 24 часа после перорального введения через желудочный зонд. ( F H ) Светлопольные, флуоресцентные и наложенные изображения поперечного криосреза желудка мыши, полученные через 4 часа после перорального введения LipoLLA через зонд. Все изображения являются репрезентативными для n = 3 мышей, и задержка количественно определяется как масса LipoLLA на желудок ± стандартное отклонение ( n = 5).(Масштабные линейки, 5 мм в B D и 1 мм в F H .)

    Мы дополнительно изучили распределение тканей LipoLLA, исследуя поперечные криосрезы желудка мыши, полученные через 4 часа после перорального желудочного зондирования. На светлопольном изображении слизь представлена ​​тонким слоем на просветной стороне желудка (рис. 2 F ). На флуоресцентном изображении, полученном для того же образца, виден непрерывный тонкий слой LipoLLA на просветной стороне криосреза (рис.2 G ). Наложение флуоресцентного изображения на изображение в светлом поле показывает их точную совместную локализацию, подтверждая диффузию LipoLLA в эпителий желудка и его удержание в слое слизи (рис. 2 H ).

    Anti-

    H. pylori Эффективность in vivo.

    Затем мы попытались оценить терапевтическую эффективность LipoLLA in vivo против H. pylori . Чтобы создать модель инфекции H. pylori , мы инфицировали каждую мышь C57BL / 6 3 × 10 8 КОЕ H.pylori SS1 в бульоне мозг-сердце (BHI) путем перорального желудочного зондирования трижды с 2-дневными интервалами (рис. 3 A ) (21, 22). Через 2 недели после инокуляции инфицированных мышей делили на пять групп ( n = 8) и лечили PBS, липосомами без покрытия, тройной терапией, LLA или LipoLLA. Ингибитор протонной помпы вводили всем мышам за 30 мин до введения всех составов для нейтрализации кислоты в желудке и предотвращения потенциальной деградации лекарственного средства.

    Рис. 3.

    Anti- H.pylori эффективность in vivo. ( A ) Протокол исследования, включающий прививку H. pylori и развитие инфекции у мышей C57BL / 6 с последующим лечением. ( B ) Количественная оценка бактериальной нагрузки в желудке у инфицированных H. pylori мышей, получавших PBS, голые липосомы, тройную терапию, LLA и LipoLLA, соответственно ( n = 8 на группу). Столбцы представляют собой медианные значения. * P <0,05, ** P <0,001.

    В исследовании терапевтическая эффективность оценивалась путем подсчета и сравнения H.pylori в желудке мыши. После обработки количественная оценка бактериальной нагрузки в желудке мыши показала 1,6 × 10 8 и 1,0 × 10 8 КОЕ / г ткани желудка для двух групп отрицательного контроля, получавших PBS и голые липосомы, соответственно (рис. 3 В ). У мышей, получавших тройную терапию антибиотиками в качестве положительного контроля, бактериальная нагрузка составляла 7,2 × 10 5 КОЕ / г, что является значительным снижением по сравнению с отрицательными контролями.Для мышей, которым вводили LLA, предварительно растворенный в ДМСО, количество бактерий составляло 7,5 × 10 6 КОЕ / г. Незначительное снижение количества бактерий у мышей, получавших LLA, по сравнению с двумя группами отрицательного контроля, предполагает неэффективность LLA in vivo против инфекции H. pylori . Такая неэффективность, вероятно, является результатом плохой растворимости LLA и его неспособности сливаться с бактериальной мембраной, что препятствует эффективному уничтожению бактерий. Напротив, когда мышей лечили LipoLLA, бактериальная нагрузка оценивалась как 5.5 × 10 4 КОЕ / г, значительное снижение по сравнению со всеми другими группами лечения. В частности, LipoLLA снизил нагрузку на H. pylori у мышей по сравнению с отрицательным контролем на ~ 2,5 порядка, тогда как антибиотики с тройной терапией снизили ее только на ~ 1,4 порядка. Превосходная эффективность, наблюдаемая с LipoLLA, демонстрирует его значительный потенциал в качестве эффективного средства против H. pylori .

    Провоспалительный ответ на лечение LipoLLA.

    Острая токсичность LipoLLA in vivo оценивалась путем изучения изменений местного иммунного ответа с помощью ПЦР в реальном времени. Мы сосредоточились на экспрессии цитокинов, включая IL-1β, IL-6 и TNFα, которые, как известно, активируются во время инфекции H. pylori (23, 24). Срез ткани желудка, полученный от каждой мыши, использовали для анализа влияния LipoLLA на иммунный ответ хозяина с помощью ПЦР в реальном времени. Как показано на рис. 4, инфекция H. pylori привела к усилению регуляции IL-1β, IL-6 и TNFα, как сообщалось в предыдущих исследованиях (23, 24).Однако, когда инфицированных мышей лечили LipoLLA, экспрессия мРНК этих провоспалительных цитокинов была значительно снижена ( P <0,001), что указывает на отсутствие острой токсичности в ответ на лечение LipoLLA. Фактически, эти результаты показывают, что LipoLLA оказывает подавляющее действие на оцененные провоспалительные цитокины в ответ на инфекцию H. pylori .

    Рис. 4.

    Продукция провоспалительных цитокинов. Уровни экспрессии провоспалительных цитокинов, IL-1β, IL-6 и TNFα у H.pylori- инфицировали мышей C57BL / 6 после обработки PBS или LipoLLA. Данные выражены в виде кратного изменения относительно соответствующих уровней провоспалительных цитокинов у неинфицированных мышей. Планки погрешностей представляют собой стандартное отклонение, полученное для 8 мышей на группу. *** P <0,0001.

    Оценка токсичности LipoLLA in vivo.

    Наконец, мы оценили токсичность LipoLLA на неинфицированных мышах. В исследовании мышам перорально вводили буфер PBS или LipoLLA один раз в день в течение 5 дней подряд.Мыши, которым вводили LipoLLA, сохраняли ту же массу тела по сравнению с мышами, которым вводили PBS (фиг. 5 A ). В 5-дневный период все мыши не показали заметного изменения веса. На 6 день все мыши были убиты. Продольные срезы тканей желудка, полученные от мышей, собирали и окрашивали гематоксилином и эозином. Ткани желудка, обработанные LipoLLA, сохраняли ненарушенную структуру с прозрачным слоем эпителиальных клеток, что было похоже на образцы желудка, обработанные PBS (рис.5 B и C ). Токсичность LipoLLA дополнительно оценивали с использованием срезов ткани желудка с помощью анализа мечения ник-концов дезоксиуридинтрифосфата, опосредованного терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазой (TUNEL), для изучения уровня апоптоза желудочного эпителия как индикатора гомеостаза слизистой оболочки желудка (25). По сравнению с контролем PBS не было явного увеличения апоптоза желудочного эпителия, на что указывает окрашивание TUNEL, у мышей, обработанных LipoLLA (фиг. 5 D и E ).Отсутствие каких-либо обнаруживаемых гистопатологических изменений желудка или токсичности в течение 5-дневного курса лечения предполагает, что пероральный прием LipoLLA безопасен.

    Рис. 5. Токсичность

    LipoLLA in vivo. Неинфицированным мышам перорально вводили буфер PBS или LipoLLA один раз в день в течение 5 дней подряд. ( A ) Мыши, которым вводили LipoLLA, сохраняли такую ​​же массу тела, как и мыши, которым вводили PBS. У всех мышей не было явных изменений веса. ( B E ) На 6 день мышей умерщвляли и срезы желудка мыши обрабатывали и окрашивали гематоксилином и эозином ( B и C ) или TUNEL ( D и E ).Обработка LipoLLA ( C и E ) показала тот же уровень безопасности, что и PBS ( B и D ). (Масштабные полосы, 100 мкм.)

    Обсуждение

    В настоящем исследовании мы оценили эффективность LipoLLA против H. pylori на модели мышей. Наши результаты продемонстрировали значительно улучшенную антимикробную эффективность LipoLLA в снижении бактериальной нагрузки H. pylori в желудке мышей по сравнению с другими схемами лечения, включая тройную терапию, текущий мировой стандарт лечения H.pylori . Было показано, что ненасыщенные жирные кислоты ингибируют H. pylori in vitro (11, 26, 27). Однако убийство in vivo H. pylori с помощью FFA до сих пор было проблемой, о чем свидетельствует отсутствие убийства H. pylori , когда мышей лечили свободным LLA в настоящем исследовании.

    Для решения возрастающих проблем в лечении инфекции H. pylori нанотехнологии предложили ряд инновационных подходов. В частности, было разработано множество платформ для наночастиц, которые в первую очередь ориентированы на изменение фармакокинетики антибиотиков для повышения их эффективности (28, 29).Некоторые платформы одновременно инкапсулируют несколько антибиотиков (30), некоторые предлагают мукоадгезию для длительного удержания лекарства (31), некоторые конъюгированы с бактериально-связывающим лигандом для целевой доставки (32), а некоторые реагируют на градиент pH между просветом желудка и прилипшей слизистой оболочкой. слой для доставки лекарств на место (33). Хотя эти стратегии многообещающи, все они полагаются на биоактивность обычных антибиотиков. Неизбежно они также наследуют высокую восприимчивость к лекарственной устойчивости.

    По сравнению с обычными антибиотиками, превосходная активность против H. pylori , обеспечиваемая LipoLLA, может быть объяснена уникальной способностью LipoLLA быстро сливаться с бактериальной мембраной и впоследствии нарушать целостность мембраны, что является очень разрушительным механизмом уничтожения бактерий с помощью низкая восприимчивость к развитию резистентности (13). Этот механизм подтверждается резким уменьшением количества жизнеспособных бактерий при минимальных значениях бактерицидной концентрации и временем уничтожения не более 30 мин, что относительно мало по сравнению с 2.5 часов необходимо для H. pylori для завершения цикла репликации (9). Механизм слияния дополнительно подтверждается микроскопическими наблюдениями, в которых LipoLLA распределяется исключительно по бактериальной мембране (рис. 1 C ). По сравнению со свободным LLA, LipoLLA несет LLA внутри липидных бислоев. Когда липосома сливается с бактериальной мембраной, молекулы LLA будут напрямую доставляться к бактериальной мембране с ограниченным вмешательством в бактериальные внутриклеточные пути.Такой состав сводит к минимуму химические изменения в биологических путях, но способствует физико-структурному разрушению клеточной мембраны – механизму, который, как ранее сообщалось, снижает индукцию устойчивости бактерий к лекарственным средствам (13). Для приложений in vivo этот рабочий механизм дополнительно обеспечивается липосомальной рецептурой, в которой липидные бислои защищают молекулы LLA от повреждающей среды желудка и предотвращают возможное окисление и ферментативную деградацию (12, 13).

    В этом исследовании LipoLLA также показывает многообещающие результаты в отношении воздействия на слизистую оболочку желудка для длительного удерживания и эффективных анти- H.pylori активности. Мы показали, что LipoLLA накапливается в слое слизи, и значительная его часть сохраняется до 24 часов. Отдельная среда хозяина H. pylori отличается ограниченным проникновением и удерживанием лекарства. Однако множество наночастиц, как природных, так и созданных руками человека, продемонстрировали замечательную способность транспортироваться через слизистую сетку для возможного проникновения в нижележащий эпителий и продления времени пребывания в слое слизи (34, 35). Сравнение LipoLLA с различными проникающими в слизь наночастицами предполагает, что относительно небольшой размер LipoLLA (~ 100 нм в диаметре, с узким распределением) вместе с плотным анионным поверхностным зарядом, который сводит к минимуму гидрофобный захват слизи, объясняется эффективным Удержание LipoLLA в желудке мышей (36).

    Помимо большей эффективности LipoLLA по сравнению с обычно используемым стандартом тройной терапии, наши данные также показывают, что LipoLLA безопасен. Лечение LipoLLA не влияло на массу тела мышей, гистопатологию желудка или целостность слизистой оболочки желудка. Кроме того, лечение мышей LipoLLA не вызывало иммунного ответа хозяина. Интересно, что у мышей, получавших LipoLLA, было значительно снижено индуцированных H. pylori провоспалительных цитокинов по сравнению с H.pylori -инфицированные, но нелеченые мыши. Сообщается, что ненасыщенные жирные кислоты играют роль в защите слизистой оболочки желудка различными путями, включая усиление синтеза простагландинов (37, 38). Отличительной чертой инфекции H. pylori является ее постоянство на протяжении всей жизни хозяина с наличием значительных воспалительных реакций, включая рекрутирование фагоцитов. Также известно, что иммунный ответ на H. pylori вносит свой вклад в патогенез заболевания (39, 40).Таким образом, ожидается, что ослабление провоспалительной реакции, как здесь наблюдается, уменьшит воспалительную реакцию, ответственную за сохранение повреждения ткани.

    Таким образом, мы оценили терапевтический потенциал LipoLLA in vivo для лечения инфекции H. pylori . Состав LipoLLA с размером ~ 100 нм и дзета-потенциалом поверхности -54 мВ был склонен к слиянию с бактериальными мембранами, тем самым напрямую высвобождая высокую дозу LLA в мембраны. LipoLLA проникает в слизистый слой желудка мышей, и значительная его часть остается в слизистой оболочке желудка через 24 часа после перорального введения.Тесты in vivo подтвердили, что LipoLLA способен убить H. pylori и снизить бактериальную нагрузку в желудке мышей. Обработка LipoLLA также снижает уровни провоспалительных цитокинов, включая IL-1β, IL-6 и TNFα, которые в противном случае повышались в ответ на инфекцию H. pylori . Наконец, тест на токсичность продемонстрировал превосходную биосовместимость LipoLLA с нормальным желудком мышей. В целом результаты показывают, что LipoLLA имеет большие перспективы как эффективное и безопасное терапевтическое средство для лечения H.pylori инфекция.

    Материалы и методы

    Получение и характеристика LipoLLA.

    LipoLLA получали с использованием стандартного метода экструзии везикул (14). Вкратце, смесь EggPC, холестерина (Avanti Polar Lipids) и LLA (Ultra Scientific) с массовым соотношением 6: 1: 3 (общий вес 16 мг) растворяли в 4 мл хлороформа. Затем хлороформ выпаривали с образованием тонкого липидного слоя, который регидратировали, добавляя 2 мл PBS. Смесь встряхивали в течение 1 мин, а затем обрабатывали ультразвуком в течение 3 мин в ультразвуковой ванне (Fisher Scientific FS30D).Затем для обработки раствора ультразвуком при 20 Вт в течение 1 мин использовали ультразвуковой аппарат Branson 450 с Ti-зондом. Затем полученные липидные везикулы экструдировали через поликарбонатную мембрану с размером пор 100 нм 11 раз с помощью мини-экструдера (Avanti Polar Lipids). Затем суспензию пропускали через колонку Sephadex G75 (Fisher Scientific) для удаления выгруженного LLA и стерилизовали фильтрованием через фильтрующий элемент 0,22 мкм (Millipore). Для количественной оценки эффективности загрузки LLA, LipoLLA или LLA сушили на роторном испарителе (Buchi, модель R-124), а затем растворяли в метаноле и дериватизировали фенацилэфиром в соответствии с установленным протоколом (41, 42).Конечные растворы, содержащие производные фенацилэфира LLA, анализировали с помощью обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии на колонке C 18 (Perkin-Elmer). Гидродинамический размер и дзета-потенциал поверхности липосом измеряли с помощью динамического светорассеяния с использованием Malvern Zetasizer ZS (Malvern Instruments). Все измерения характеристик повторяли три раза при 25 ° C.

    Культура H. pylori и активность LipoLLA in vitro.

    H.pylori SS1. Бактерии поддерживали на колумбийском агаре с добавлением 5% (об. / Об.) Замороженной лошадиной крови при 37 ° C в микроаэробных условиях (10% CO 2 , 85% N 2 и 5% O 2 ). как описано ранее (24). Антимикробная активность LipoLLA против H. pylori была определена в соответствии с описанным протоколом (13). Вкратце, бактерии инокулировали в бульон BHI, содержащий 5% (об. / Об.) FBS, и культивировали в течение ночи. Затем бактерии собирали центрифугированием при 5000 × g в течение 10 мин, ресуспендировали в свежем бульоне BHI и доводили оптическую плотность до 1 при 600 нм.0, что соответствует ∼1 × 10 8 КОЕ / мл. Бактериальную суспензию, содержащую 1 × 10 6 КОЕ бактерий, смешивали с LipoLLA в различных заранее определенных концентрациях в 96-луночном планшете и инкубировали при 37 ° C в микроаэробных условиях для 30 мин и серию 10-кратных разведений бактериальной суспензии инокулировали на чашки с колумбийским агаром с добавлением 5% (об. / Об.) Замороженной лошадиной крови. Затем чашки с агаром культивировали в инкубаторе в течение 4 дней перед подсчетом колоний.

    LipoLLA Fusion с

    H. pylori .

    Слияние LipoLLA и H. pylori исследовали с помощью флуоресцентной микроскопии. В исследовании DMPE-RhB (0,5 мол.%) Был смешан с EggPC, LLA и холестерином перед приготовлением LipoLLA и впоследствии был включен в двухслойную мембрану LipoLLA (1 мг / мл). Затем 1 мл суспензии LipoLLA смешивали с 5 × 10 8 КОЕ H. pylori . После 10 мин инкубации бактерии собирали центрифугированием при 5000 × g в течение 5 мин с последующей фиксацией 2% (об. / Об.) Глутаровым альдегидом в PBS при комнатной температуре в течение 15 мин.Затем бактерии промывали и ресуспендировали в 1 мл деионизированной воды. Для визуализации 5 мкл бактериальной суспензии смешивали с 5 мкл DAPI-содержащей монтажной среды и помещали на предметное стекло, покрытое лизином. Образец затем визуализировали с использованием иммерсионного объектива 100х на сканирующем флуоресцентном микроскопе с деконволюцией Applied Precision DeltaVision.

    Исследование цитотоксичности LipoLLA in vitro.

    Клеточная линия AGS карциномы желудка человека (ATCC CRL 1739) культивировалась в среде RPMI 1640 с добавлением 10% (об. / Об.) Термоинактивированной FBS при 37 ° C в увлажненной атмосфере с 5% CO 2 .Для исследования 1 × 10 4 клеток на лунку выращивали в 12-луночных культуральных планшетах. После культивирования в течение ночи клетки инкубировали с LLA или LipoLLA в заранее определенных концентрациях в течение 24 часов. Гибель клеток оценивали путем измерения высвобождения лактатдегидрогеназы (Promega) в культуральную среду. Необработанные клетки служили отрицательным контролем, а клетки, обработанные 1% Triton X-100, служили положительным контролем.

    Задержка липолла в желудке.

    мышей-самцов C57BL / 6 в возрасте 8 недель были случайным образом разделены на три группы ( n = 8) для получения RhB-меченного LipoLLA (4 мг / мл) в течение 4 или 24 часов.Одну группу мышей оставили без лечения в качестве контроля. Каждой мыши в двух других группах вводили 0,3 мл LipoLLA внутрижелудочно через желудочный зонд. Мышей умерщвляли в указанные сроки, и желудки удаляли из брюшной полости. Желудки разрезали по большей кривизне, удаляли желудочное содержимое и смывали желудочный сок, содержащий избыточные липосомы. Образцы желудка трех мышей из каждой группы замораживали в смеси с оптимальной температурой резки для конфокальной визуализации.Образцы желудка оставшихся пяти мышей из каждой группы гомогенизировали, и гомогенаты центрифугировали при 5000 × g в течение 10 минут для удаления ткани или клеточного дебриса. Супернатанты собирали и измеряли интенсивность флуоресценции связанного с липосомами DMPE-RhB.

    Anti-

    H. pylori Эффективность in vivo.

    Каждая мышь-самец C57BL / 6 получала 0,3 мл 1 × 10 9 КОЕ / мл H. pylori в бульоне BHI, вводимое внутрижелудочно через пероральный зонд каждые 48 ч, повторенное три раза (на 3, 5 и 7 дни, соответственно), и инфекции позволяли развиваться в течение 3 недель.Мышей случайным образом распределили на пять групп лечения ( n = 8) для получения LipoLLA, LLA, тройной терапии, голых липосом или PBS. Мышам сначала вводили омепразол (ингибитор протонной помпы) через желудочный зонд в дозе 400 мкмоль / кг, после чего следовало время задержки 30 мин перед назначенным лечением. LipoLLA, LLA в 5% (об. / Об.) DMSO (оба при 24 мг LLA / кг) и состав для тройной терапии (амоксициллин 28,5 мг / кг и кларитромицин 14,3 мг / кг) вводили через желудочный зонд один раз в день в течение последовательных 5 дн.Голые липосомы без LLA и PBS служили двумя группами отрицательного контроля. Через 48 часов после последнего введения мышей умерщвляли, а желудок удаляли из брюшной полости. Желудок разрезали по большей кривизне, содержимое желудка удаляли и промывали PBS. Желудки разрезали на три продольных секции, и каждую секцию взвешивали. Срезы использовали для оценки бактериальной колонизации, экспрессии генов и гистологии / эпителиального апоптоза.Для бактериальной колонизации срез ткани желудка суспендировали в 1 мл PBS и гомогенизировали для восстановления H. pylori . Гомогенат серийно разбавляли и наносили на чашку с колумбийским агаром, содержащую добавку Скирроу (10 мкг / мл ванкомицина, 5 мкг / мл триметоприма лактата, 2500 МЕ / л полимиксина B; Oxiod). Затем планшеты инкубировали при 37 ° C в микроаэробных условиях в течение 5 дней, подсчитывали колонии бактерий и доводили до разведения.

    Количественная оценка воспалительных цитокинов.

    Срез ткани желудка, хранившийся при -80 ° C в растворе, стабилизирующем РНК, гомогенизировали в 1 мл реагента TRIzol (Invitrogen) с последующей обработкой ДНКазой (Ambion) для дальнейшей очистки образцов РНК. Концентрацию РНК измеряли с помощью спектрофотометра NanoDrop (NanoDrop Technologies), а целостность проверяли электрофорезом на 1% агарозном геле. Два микрограмма РНК подвергали обратной транскрипции в кДНК с использованием набора для обратной транскрипции кДНК высокой емкости (Applied Biosystems).После транскрипции экспрессию генов определяли с помощью ПЦР в реальном времени с использованием красителя SYBR Green (Eurogentec), как описано в наших предыдущих исследованиях (43, 44). Экспрессию IL-1β, IL-6, TNFα и глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы (GAPDH) проводили с использованием следующих праймеров: мышиный (m) IL-1β-F, 5′-AAAAGCCTCGTGCTGTCGGACC; mIL-1β-R, 5′-TTGAGGCCCAAGGCCACAGGT; mIL-6-F, 5′-AGACAAAGCCAGAGTCCTTCAGAGA; IL-6-R, 5′-GCCACTCCTTCTGTGACTCCAGC; mTNFα-F, 5′-TTCCAGAACTCCAGGCGGTGC; mTNFα-R, 5′-TGAGTGTGAGGGTCTGGGCCAT; GAPDH-F, 5′-TCAACAGCAACTCCCACTCTTCCA; и GAPDH-R, 5′-ACCCTGTTGCTGTAGCCGTATTCA.Условия ПЦР в реальном времени состояли из начального цикла при 95 ° C в течение 5 минут, за которым следовали 40 циклов амплификации с денатурацией при 95 ° C в течение 15 секунд, отжиг при 60 ° C в течение 20 секунд и удлинение при 72 ° C в течение 40 с. Кривую плавления строили для каждого образца в конце реакции, чтобы гарантировать специфичность. Уровни экспрессии генов были нормализованы к GAPDH, и данные были проанализированы с использованием сравнительных расчетов пороговых значений цикла (∆∆C T ; Applied Biosystems). Данные были выражены как кратное изменение относительно соответствующих уровней провоспалительных цитокинов у неинфицированных мышей.Каждый эксперимент ПЦР в реальном времени проводился трижды.

    Исследование токсичности in vivo.

    Для оценки токсичности LipoLLA in vivo самцам мышей C57BL / 6 ( n = 8) в возрасте 6–8 недель перорально вводили 0,3 мл LipoLLA 8 мг / мл один раз в день в течение 5 дней подряд. Параллельно тестировали мышей, которым вводили PBS, в качестве отрицательного контроля. За массой тела мышей следили в течение периода эксперимента путем ежедневного взвешивания мышей. Через 24 часа после последнего перорального введения мышей умерщвляли и желудки удаляли для гистологического анализа.Продольные срезы желудочной ткани фиксировали в 10% (об. / Об.) Формалине с нейтральным буфером, а затем заливали парафином. Срезы тканей окрашивали гематоксилином и эозином. Апоптоз эпителиальных клеток оценивали с помощью анализа TUNEL (Boehringer Mannheim). Срезы визуализировались с помощью Hamamatsu NanoZoomer 2.0HT, а изображения обрабатывались с помощью программного обеспечения для просмотра NDP.

    Выражение признательности

    Эта работа поддержана Национальным институтом диабета, болезней органов пищеварения и почек Национальных институтов здравоохранения в рамках награды R01DK095168.

    Сноски

    • Вклад авторов: S.T., W.G., M.O., and L.Z. спланированное исследование; S.T., W.G. и M.O. проведенное исследование; S.T., W.G., M.O. и L.Z. проанализированные данные; S.T., W.G., M.O. и L.Z. написал газету.

    • Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

    • Эта статья представляет собой прямое представление PNAS.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *