Большое выделение слюны: Ваш браузер устарел

Содержание

Причины обильного выделения слюны у собак

Время чтения 3 мин.Просмотры 39.5k.Опубликовано Обновлено

Если собака встречает вас с полным ртом слюней, то это, в принципе, может быть нормально, но также может быть признаком наличия проблем со здоровьем. Чрезмерное выделение слюны называется гиперсаливацией. В том случае, если вы обладатель собаки с обвисшей губой, к примеру, мастиффа, то чрезмерное образование слюны является нормальным. Такое обильное выделение связано со структурой лица, но никак не с медицинскими проблемами. Однако, в остальных случаях, такое обильное выделение слюны у собаки может стать поводом для обращения к ветеринару.

Если ваша собака страдает от боязни грозы, или же тяжело переживает разлуку, то выделение слюны в большом количестве является нормальным т.к. в эти моменты животное испытывает стресс и чувство страха, который сопровождается выделением слюны. Иные случаи, когда может обильно выделятся слюна – желание полакомится вкусной едой. Вспомните, ведь у вас, наверное, тоже когда-нибудь выделялась слюна, когда вы думали о еде. То же самое и с собакой, если, к примеру, она услышит запах мяса или просто хот-догов, может начаться процесс выделения слюны.

Нередко причины обильного выделения слюны кроются в ротовой полости животного. Виновниками этого процесса могут стать воспаление десен, язвы во рту, опухоли, порезы и нарывы. Внимательно осмотрите рот животного и попытайтесь определить, имеются ли в ротовой полости вышеупомянутые симптомы. Если вы найдете что-то подобное, обязательно обратитесь за консультацией к ветеринару. Отметим, что выделение слюны у собак может быть вызвано и стоматологическими проблемами.

Расстройство желудка

Проблемы с желудком или пищеварительным трактом являются еще одной распространенной проблемой, которая может вызывать данную проблему. Банальная поездка в автомобиле может вызвать т.н. морскую болезнь, способную спровоцировать расстройство желудка и привести к выделению слюны в неестественно большом количестве. Помимо прочего, выделение слюны может быть признаком более серьезных заболеваний, таких как грыжи или опухоли в желудке или других областях пищеварительной системы животного.

Что ела ваша собака?

Если ваш питомец любит погрызть различные вещи или предметы, не предназначенные для питания, то причиной выделения слюны могут быть токсины, попавшие в организм из посторонних предметов. Кроме того, подобную реакцию организма могут также вызвать лекарства, и даже определенные травы, например, пуансетия, которая весьма токсична. Не стоит забывать и о других опасностях: пауках и змеях. Их укусы часто провоцируют обильное выделение слюны.

Более серьезные проблемы

Одно из самых серьезных заболеваний, при котором наблюдается сильное выделение слюны у собаки – бешенство. При этом заболевании выделяются слюни в виде пены. Если ваша собака контактировала с диким животным, обязательно обратитесь за консультацией к ветеринару. Побеспокойтесь о своевременном привитии животного! Другими причинами выделения слюны могут быть: ботулизм, столбняк, неврологические заболевания, судороги.

Когда обращаться к ветеринару?

Если обильное выделение слюны неестественно для вашей собаки, то обращаться к ветеринару необходимо немедленно, ведь слюни могут быть признаком иного, более сложного заболевания!

Причины обильного выделения слюны у взрослых и детей

Слюна представляет собой особый секрет (слизь), который вырабатывается слюнными железами и обеспечивает защиту ротовой полости от жизнедеятельности болезнетворных микроорганизмов, обитающих во рту. В норме у человека выделяется 2–2,2 мг слюны каждые 10–15 минут. Однако под действием негативных факторов, секреция слюны усиливается, что указывает на некоторые сбои в работе внутренних органов и систем. Обильное выделение слюны в медицине называется гиперсаливация. А почему она возникает и как с ней бороться, вы сейчас и узнаете.

Главные причины

Говоря о том, почему у человека выделяется много слюны во рту, следует отметить, что этому состоянию могут способствовать различные факторы. И самыми распространенными из них являются:

  • Прием некоторых медикаментов (гиперсаливация считается побочным действием многих препаратов).
  • Нарушение обмена веществ в организме.
  • Неврологические расстройства.
  • Интоксикация (отравление).
  • Токсикоинфекции (инфекционные заболевания, возбудители которых в процессе своей жизнедеятельности вырабатывают токсины, отравляющие организм).
  • Оториноларингологические патологии (гайморит, синусит, отит и т. д.).

У взрослых людей гиперсаливация часто является следствием патологий, связанных с нарушенной работой пищеварительной системы или ЦНС. А вот у детей такое состояние зачастую возникает на фоне ОРЗ или ЛОР-заболеваний.

Причины у детей до года

Повышенное сильное слюноотделение у детей в возрасте 0–12 месяцев является естественным и не должно вызывать у родителей тревогу, особенно если на фоне гиперсаливации отсутствуют сторонние симптомы, например, плаксивость, раздражительность, нарушенный сон и т. д.

Обуславливается это тем, что первые несколько месяцев после рождения слюнные железы ребенка проходят адаптационный период. Они еще не «знают», как им правильно работать, чтобы обеспечить должную защиту ротовой полости. Как только их адаптация заканчивается, гиперсаливация становится менее выраженной, но ненадолго, так как затем с 4–5 месяцев, у ребенка начинают прорезываться зубы, в результате чего десна воспаляются. А любое воспаление в ротовой полости является для слюнных желез своего рода активизатором, и их функциональность усиливается.

Однако не стоит забывать о том, что дети, также как и взрослые, подвержены различным заболеваниям. А потому, если гиперсаливация у малыша сопровождается неприятными симптомами, его следует немедленно показать врачу.

Причины у взрослых

Факторов, провоцирующих возникновения гиперсаливации у взрослых множество. И зачастую такое состояние провоцируют вредные привычки – курение и алкоголь. Табачный дым и этиловый спирт оказывают химическое воздействие на слюнные железы, раздражая их и активизируя их работу.

Но также привести к развитию гиперсаливации могут следующие причины:

  1. Стоматологические заболевания, поражающие полость рта и зева. К таковым относятся: гингивит, пародонтоз, стоматит, тонзиллит и т. д. При их развитии повышенная секреция слюны является своего рода ответной реакцией организма на возбудителя болезни, которая выводит из ротовой полости продуктов их распада. А так как в процессе своей жизнедеятельности болезнетворные микроорганизмы вырабатывают токсичные вещества, слюна может запахнуть гнилью.
  2. Патологии ЖКТ – язва желудка и двенадцатиперстной кишки, гастрит, холецистит, панкреатит и многие другие. При развитии этих заболеваний в пищеварительном тракте возникают сильные воспалительные процессы, которые также является стимуляторами повышенного слюноотделения.
  3. Паралич лица. Человек не может контролировать свои рефлексы. Слюна выделяется постоянно и чтобы от нее избавиться, человек либо глотает ее, либо выплевывает. При параличе лица больной не может проглатывать жидкости, что и становится причиной скопления слюны в полости рта.
  4. Болезнь Паркинсона. Это серьезная патология, которое характеризуется расстройствами ЦНС. При его развитии мышцы, ответственные за глотание, теряют свой тонус, в результате чего человек не может проглатывать слюну.
  5. Паротит (свинка). Данное заболевание носит инфекционный характер и провоцирует развитие воспалительных процессов в околоушных слюнных железах. Такое состояние приводит отечности лица и горла, что становится причиной сужения глотки и нарушению проходимости жидкости через нее. В связи с этим, человек с трудом проглатывает слюну, и большая ее часть начинает скапливаться в ротовой полости.
  6. Патологии щитовидной железы. Щитовидная железа вырабатывает гормоны, которые обеспечивают контроль над работой слюнных желез. А когда функциональность щитовидки нарушается, процесс продуктивности слюны выходит из-под контроля и начинает вырабатываться в большом количестве.
  7. Раздражение слюнных желез. В данном случае речь идет о механическом раздражении, которое возникает при ношении зубных протезов, во время проведения стоматологических процедур, жевания твердой пищи и т. д.
  8. Прием медикаментов. Как уже говорилось выше, обильное слюноотделение является одним из побочных эффектов. Чаще всего гиперсаливация наблюдается при приеме Мускарина, Лития, Нитразепама и Пилокарпина.
  9. Беременность. На ранних сроках гестации присутствует изменение гормонального фона. А гормоны, как было сказано, принимают непосредственное участие в работе слюнных желез. Также такую реакцию может давать больной желудок и частая изжога.
  10. Чрезмерные физические нагрузки. Каждый организм имеет индивидуальные особенности и в некоторых случаях гиперсаливация может являться следствием чрезмерных физических нагрузок. Сюда относится не только бег, прыжки и поднятие гантелей, но и силовые нагрузки, которые человек получает в течение дня. Примером этого являются грузчики, которые вынуждены постоянно поднимать тяжести.

О чем говорит повышенное слюноотделение в ночное время?

Безусловно, спровоцировать гиперсаливацию могут различные факторы. Но если у человека наблюдается чрезмерное выделение слюны во время сна, то это может указывать не только на расстройства пищеварительного тракта или центральной нервной системы, но и на гельминтоз.

Это заболевание характеризуется паразитарным поражением организма, лечить которое нужно незамедлительно. Гельминты могут поселяться в различных органах (кишечнике, желудке, легких, глазах и т. д.), нарушая их функциональность, что также негативным образом сказывается на работе слюнных желез.

Признаками гельминтоза является не только повышенное слюноотделение, но и:

  • Тошнота.
  • Уменьшение аппетита.
  • Снижение массы тела.
  • Скрежет зубами во время сна.
  • Нарушение сна.
  • Повышенная раздражительность.
  • Нарушение концентрации памяти и внимания.
  • Плохой запах изо рта утром.

Чтобы быстро устранить признаки гельминтоза, необходимо пройти курс лечения, который подразумевает под собой прием противоглистных препаратов. Они имеют различные виды и приниматься должны только по назначению врача после полного обследования пациента и выявления точного типа гельминтоза.

Диагностика

Нужно отметить, что обильное слюноотделение не является заболеванием. Оно считается одним из симптомов различных патологических состояний. И чтобы избавить человека от повышенного слюноотделения, врачу необходимо установить точный фактор, который спровоцировал возникновение гиперсаливации. А для этого он проводит следующие мероприятия:

  • Собирает анамнез, в ходе которого узнает, сколько времени у человека наблюдается повышенное слюноотделение, какими дополнительными симптомами оно сопровождается.
  • Проводит анализ жизнедеятельности пациента, при котором уточняет, какой образ жизни ведет человек (как питается, есть ли вредные привычки и т. д.).
  • Осуществляет осмотр ротовой полости.
  • Определяет объем выделяемой слюны в сутки и берет мазок на исследование уровня ферментов.
  • Назначает консультацию других специалистов, например, невропатолога, эндокринолога, стоматолога и т. д.

Только после того, как будет установлена точная причина, которая могла повысить слюноотделение, врач назначает лечение, позволяющее быстро избавиться от гиперсаливации. Если невозможно установить точную причину данного состояния, производится детальное обследование, которое может включать в себя КТ, МРТ, УЗИ и т. д.

Как лечится ?

Лечение патологии напрямую зависит от причины, которая спровоцировала ее появление. В этом случае лечебная терапия включает в себя разные препараты и мероприятия. Например, удаление кариозных зубов, профессиональная чистка ротовой полости, прием противовоспалительных, противовирусных, антибактериальных или противопаразитарных препаратов, диету в случае с патологиями ЖКТ и т. д. Также рекомендуется использование народных методов лечения, которые подразумевают под собой употребление лимона, обеспечивающего не только устранение неприятного запаха во рту, но и нормализацию работы слюнных желез.

Однако нужно понимать, что заниматься самолечением ни в коем случае нельзя, так как это может привести к серьезным проблемам со здоровьем, особенно если причина возникновения гиперсаливации не была установлена.

 

Слюноотделение у детей | Здоровье малыша

Гиперсаливация – это  повышенное слюноотделение. Причины этого явления самые разнообразные – органические нарушения, связанные с поражениями центральной нервной системы, некоторые врожденные заболевания, например, детский церебральный паралич, опухоли головного мозга, психологические нарушения.

Применение некоторых медицинских препаратов, например, прозерина, так же может спровоцировать повышенное выделение слюны.  Гиперсаливация является симптомом таких угрожающих состояний как травмы головы, сотрясения мозга.

У грудных детей гиперсаливация часто возникает во время прорезывания зубов. Попадание в ротовую полость раздражающих веществ  приводит к этому симптому. Так же причинами могут быть вирусные болезни – вирусный сиалоденит, стоматиты любого происхождения, отравления некоторыми веществами, например, свинцом, различные заболевания органов пищеварения – гастриты, энтериты, гепатиты, глистная инвазия.

Иногда гиперсаливация бывает ложной. То есть количество выделяемой слюны нормально, но она не сглатывается. Такое возможно при нарушении акта глотания, связанного с воспалительными процессами в глотке или параличем. Все эти причины говорят о том, что если у вашего ребенка началось повышенное выделение слюны – необходимо обязательно проконсультироваться с врачом.  


У грудных детей и детей в возрасте одного – двух лет наиболее частой причиной становится прорезывание зубов и всевозможные стоматиты. Если данная причина отсутствует, то необходимо тщательное обследование ребенка для исключения нарушений, связанных с более серьезными заболеваниями – опухоли головного мозга, врожденные патологии. У более старших детей повышенное выделение слюны может стать причиной нарушения произносительной стороны речи – так называемой дизартрии, когда большое количество слюны мешает детям осваивать и произносить слова. Это может привести к формированию невнятной речи, что в дальнейшем затруднит развитие ребенка, его социализацию.

У совсем маленьких детей выделение слюны происходит на уровне безусловного рефлекса. В более старшем возрасте, по мере развития высшей нервной деятельности, к причинам могут добавиться и психологические. Нервные стрессы, сильные эмоциональные переживания, положительные, например, от предвкушения чего-то вкусного, или наоборот, отрицательные, могут спровоцировать усиленное выделение слюны.

593. Слюна: диагностическое значение и передача COVID-19

1 Главная государственная лаборатория заболеваний полости рта, Национальный центр клинических исследований заболеваний полости рта, Стоматологическая больница Западного Китая, Сычуаньский университет, Чэнду, Китай 2 Главная государственная лаборатория заболеваний полости рта, Лаборатория человеческой слюны, Национальный центр клинических исследований заболеваний полости рта, Стоматологическая больница Западного Китая, Сычуаньский университет, Чэнду, Китай

ВВЕДЕНИЕ

Эпидемия коронавирусного заболевания (COVID-19) растет и быстро распространяется по миру1. Вспышка COVID-19 была объявлена чрезвычайной ситуацией в области общественного здравоохранения, имеющей международное значение (ЧСЗМЗ). Это шестая по счету ЧСМЗМ, объявленная ВОЗ после вступления в силу в 2005 г. Международных медико-санитарных правил (ММСП) http://www.euro.who.int/en/health-topics/health-emergencies/international-healthregulations/news/news/ 2020/2/2019-ncov-outbreak-is-anemergency-of-internatio nal-concern)

2. О данном болезнетворном штамме впервые сообщили в конце декабря 2019. Ранее он не был выявлен у людей. После того как исследователи выделили этот коронавирус, его назвали: «новый коронавирус 2019 года» (nCoV-2019, COVID-19)2.

Коронавирусы — оболочечные РНК-вирусы. Два штамма: коронавирус тяжелого острого респираторного синдрома (SARS-CoV) и коронавирус ближневосточного респираторного синдрома (MERS-CoV) — имеют зоонозное происхождение и, как известно, вызывают респираторные заболевания со смертельным исходом, также как и CoVID-19 Поскольку коронавирусы широко распространены и их геномы рекомбинируют, CoVID-19 – это еще один ранее неизвестный коронавирус. Было также показано, что у данного вируса контагиозность выше, чем у предшественников

3-5. Ранняя диагностика коронавируса и эффективная профилактика передачи являются основными задачами в борьбе с эпидемией CoVID-19.

ВОЗ заявила что CoVID-19 распространяется преимущественно через капли слюны или выделения из носа (https://www.who.int/health-topics/coronavirus#tab=tab_1). Большие слюнные железы выделяют 90% слюны, и 10% слюны выделяется малыми слюнными железами. pH слюны находится в пределах от 6 до 76,7. Слюна – это сложная биологическая смесь,которая на физиологическом уровне содержит десневую жидкость, клетки слущенного эпителия ротовой полости и микроорганизмы. Она может также содержать кровь, выделения из органов дыхания, желудочную кислоту как следствие рефлюкса и остатки пищи в случае наличия патологий8. Около 99% слюны – это вода, оставшийся 1% содержит большую группу компонентов, участвующих в пищеварении, балансе вкуса и реминерализации, а также уничтожении микроорганизмов

9.

ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ СЛЮНЫ В СЛУЧАЕ COVID-19

Подтверждение наличия нуклеиновой кислоты COVID-19 в мазке из носоглотки – это официальный метод определения возбудителя инфекции10. Мазок из носоглотки – относительно инвазивная процедура, вызывающая кашель и в некоторых случаях кровотечение, что увеличивает риск инфицирования медицинского персонала. Слюна выделяется в области входа в дыхательную систему, и в ней также была обнаружена нуклеиновая кислота 2019-nCoV11–14. Сбор образцов слюны позволяет упростить процедуру диагностики коронавируса для пациентов и сделать её более безопасной для медицинских работников благодаря неинвазивному характеру. До сегодняшнего дня сообщалось о трех методах сбора слюны: сплевывание, мазок и забор непосредственно из протоков слюнных желез. В двух исследованиях слюны пациентов с COVID- 19, полученной методом сплевывания (после откашливания), в 11 клинических случаях из 12 (91,67%)

11 и 20 случаях из 23 (86,96%)1 в слюне была обнаружена РНК 2019-nCoV.

В одном исследовании мазков слюны, у половины из 15 (50%)13 пациентов с COVID-19 была обнаружена РНК 2019-nCoV. В одном исследовании слюны пациентов с COVID-19, полученной непосредственно из протока слюнной железы, РНК 2019-nCoV была обнаружена в четырех случаях из 31 (12,90%)14. Трое из этих пациентов находились в тяжелом состоянии. Ранняя диагностика COVID-19 остается трудной задачей. Диагностическая ценность образцов слюны для определения нуклеиновой кислоты 2019-nCoV по-прежнему ограничена, но это перспективный метод, к которому следует относиться с осторожным оптимизмом.

Слюна из глубоких отделов глотки

Исследование To et al. показало, что для слюны из глубоких отделов глотки наблюдаются высокие показа- тели выявления COVID-1911. У двенадцати вирус-положительных пациентов диагноз был подтвержден на основании эпидемиологического анамнеза, клинических критериев и лабораторного выявления 2019-nCoV в образцах из носоглотки или мокроты. Слюна была собрана путем сплевывания (после откашливания) через несколько дней после госпитализации

11. Результаты тестов образцов слюны на ген S-белка 2019-nCoV методом полимеразной цепной реакции с обратной транс- крипцией в реальном времени были положительными для 11 пациентов из 12 (91,67%)11. У всех 33 пациентов с отрицательными результатами лабораторных тестов на COVID-19 анализы слюны были отрицательными. Кроме того, у шести пациентов взяли серию образцов слюны, и у пяти из них была прослежена тенденция к уменьшению концентрации вируса в ходе стационарного лечения11. У трех из вышеупомянутых шести пациентов был выделен живой вирус путем выращивания вирусной культуры.

В другом исследовании та же группа ученых использовала образцы самостоятельно собранной слюны из глубоких отделов глотки пациентов с COVID-19. Были проведены тесты на РНК 2019-nCoV и проанализированы временные профили вирусной нагрузки

12. В этом исследовании слюна, смешанная с секретом носоглотки и бронхолегочным секретом, была собрана утром путем откашливания12. Среди 23 пациентов с COVID-19, включенных в исследование, в 20 случаях было показано, что РНК 2019-nCoV в образцах слюны поддается обнаружению12. На временном профиле вирусная нагрузка слюны достигла максимального значения в течение первой недели после появления симптомов и затем начала снижаться12. Данная группа ученых также обнаружила РНК 2019-nCoV в слюне после лечения12. Даже при использовании анти- тел против 2019-nCoV у одного из трех включенных в исследование пациентов вирусная РНК была обнаружена в образцах слюны из глубоких отделов глотки через 20 или более дней. Из этого можно сделать вывод, что после применения антител вирусная РНК не выводится сразу, а может оставаться в организме в течение длительного времени
12
. (прим. ред.: в работе 12 речь идет об определении титров АТ в сыворотке.) У одного пациента, у которого полностью исчезли симптомы, РНК 2019-nCoV была выявлена после 2 дней отрицательных результатов, и это позволяет предположить, что РНК 2019-nCoV может выделяться со слюной в низких концентрациях даже после клинического выздоровления12. Точнее говоря, если РНК 2019-nCoV была выявлена после полного исчезновения симптомов, это означает, что необходимы дальнейшие исследования для подтверждения факта инфицирования или выделения вируса.

Слюна ротовой полости

Мазки со слизистой рта с большой долей вероятности можно применять для ранней диагностики13. Собрав у 15 пациентов с COVID-19 мазки со слизистой горла и проведя тесты на РНК вируса, Zhang et al. показали, что в половине образцов слюны (50%) была выявлена РНК 2019-nCoV. У четырех пациентов (26,7%) были положи- тельные анальные мазки, у шести пациентов (40%) – положительный результат тестов крови и у трех (20%) пациентов вирус был обнаружен в сыворотке крови

13. Среди 16 пациентов был проведен сравнительный анализ динамики содержания вируса в слюне и в анальных мазках. Среди общего количества положительных мазков, наибольшее количество положительных результатов мазков со слизистой рта были получены на ранней стадии болезни, в то время как большинство положительных анальных мазков были взяты на поздних стадиях COVID-19. Это позволяет предположить, что мазки со слизистой рта можно применять для выявления заболевания на ранней стадии, но нельзя использовать как критерий при выписке13.

Слюна из слюнных желез

Для того чтобы исключить загрязнение секретами дыхательных путей, Chen et al. собирали слюну непосредственно из протока слюнной железы, в результате чего в слюне была обнаружена нуклеиновая кислота 2019-nCoV. Это указывает на то, что слюнные железы были инфицированы данным вирусом

14. В исследо- вание был включен 31 пациент с COVID-19, среди них тринадцать случаев с положительными мазками из ротоглотки. У четырех из этих пациентов (12,90%) результаты тестов образцов слюны были также положительными14. В трех из этих четырех случаев пациенты находились в тяжелом состоянии и нуждались в вентиляции легких, из чего можно сделать вывод, что присутствие нуклеиновой кислоты 2019-nCoV в слюне, собранной непосредственно из слюнных желез, является индикатором тяжести COVID-19.

ВЕРОЯТНОСТЬ ВНЕДРЕНИЯ ВИРУСА COVID-19 НЕПОСРЕДСТВЕННО В ТКАНИ РОТОВОЙ ПОЛОСТИ

Для большинства вирусов первый этап в цикле инфицирования – это прикрепление к поверхности и распознавание рецептора на поверхности клетки- хозяина с целью внедрения15,16. Благодаря сходству внешнего субдомена рецептор-связывающих доменов (RBD) «шипы» 2019-nCoV и SARS-CoV прикрепляются к одному и тому же рецептору на поверхности клетки- хозяина — ангиотензинпревращающему ферменту II (АПФ2, ACE2). Но у «шипа» 2019-nCoV более высокое сродство с АПФ2, чем у «шипа» SARS-CoV17–21. Другими словами, клетки, экспрессирующие поверхностный рецептор АПФ2, восприимчивы к 2019-nCoV, как и в случае с SARS-CoV. Было обнаружено, что АПФ2 экспрессируется в легких, пищеводе, подвздошной кишке, тол- стой кишке, печеночных желчных протоках и мочевом пузыре22–25. Соответственно, были получены положи- тельные результаты ОТ-ПЦР на 2019-nCoV жидкости бронхоальвеолярного лаважа2, мазков из носоглотки26, кала27,28 и крови17 пациентов с COVID-19.

Несколько исследований показали, что клетки слюнных желез и языка экспрессируют рецептор АПФ2, что указывает на то, что клетки ротовой полости выступают в роли клеток- хозяев при внедрении 2019-nCoV. Экспрессия АПФ2 в тканях ротовой полости Xu et al., проанализировав общедоступные данные о результатах секвенирования РНК (bulk RNA-seq) нормальных тканей и тканей паракарциномы, обнаружили экспрессию АПФ2 в тканях ротовой полости в области щек и десен29. Анализ данных секвенирования РНК одиночных клеток из тканей ротовой полости пациентов выявил, что большое количество рецепторов АПФ2 присутствует в эпителиальных клетках языка, а также эпителиальных клетках, Т-лимфоцитах, В-лимфоцитах и фибробластах слизистой оболочки полости рта29.

Слюна образуется в слюнных железах и вытекает через протоки в ротовую полость. Liu et al. провели исследование на макаках-резусах и показали, что АПФ2 также экспрессировался в эпителиальных клетках, выстилающих протоки малых слюнных желез30. Такие же эпителиальные клетки, участвующие в выделении 1% суточного количества слюны, удалось обнаружить в синоназальной полости, ротовой полости, глотке, гортани, трахее и легких в общей сложности у 800–1000 людей31. Создав животные модели путем интраназального введения функционального псевдовируса, эта группа ученых по- казала, что клетки эпителия протоков малых слюнных желез, имеющие на своей поверхности АПФ2 (ACE2+ клет- ки), являются основными мишенями вируса в первые 48 часов после заражения30. Помимо приведенных выше данных исследований на животных, Chen et al. проанализировали данные баз (транскриптомов) GTEx, HPA, FANTOM5 и обобщенных баз данных и выявили экспрессию рецептора АПФ2 в зернистых клетках слюнных желез человека. Клетки в слюнных железах, имеющие на своей поверхности АПФ2, возможно, являются клетками-мишенями для 2019-nCoV и теоретически могут выделять инфицированную слюну в течение продолжительного времени.

Экспрессия фурина в клетках языка

Фурин участвует в процессе вирусного заражения: он разрушает гликопротеины вирусной оболочки и способствует заражению клеток-хозяев32. В шиповидном белке 2019-nCoV была обнаружена последовательность АК, подобная сайту расщепления фурином (фуриноподобный сайт)33,34. Существует вероятность, что высокая экспрессия фурина в тканях легких способствует увеличению инфекционных свойств 2019-nCoV33,35,36. Экспрессию фурина определяли путем иммунного окрашивания клеток эпителия языка человека. И она была значительно повышена при плоскоклеточной карциноме (squamous cell carcinoma, SCC) 37. В сочетании с высокой экспрессией АПФ2 язык, как и ткань ротовой полости, с высокой долей вероятности будет инфицирован сразу после контакта с коронавирусом, а плоскоклеточная карцинома (SCC) дополнительно увеличивает риск заражения. Хотя есть предположение, что вирусу легче проникнуть в клетки, экспрессирующие фурин, следует с осторожностью относиться к выводам относительно большого влияния фуриноподобного сайта на инфекционные свойства 2019- nCoV.

ПЕРЕДАЧА COVID-19 ЧЕРЕЗ СЛЮНУ

Передача 2019-nCoV происходит внутри помещений26. Как отмечалось выше, РНК 2019-nCoV была выявлена в слюне, и возникает вопрос: может ли 2019-nCoV распространяться на большие расстояния через аэрозоль слюны. ВОЗ заявила, что один из основных путей передачи 2019-nCoV, помимо несоблюдения гигиены рук при прикосновениях к загрязненным поверхностям, – это передача через капли при близком контакте с инфицированными людьми. Капли образуются в результате кашля, чихания или во время разговора. (https://www.who.int/news-room/q-a-detail/q-a-coronaviruses#). ВОЗ обновила определение «близкого контакта» – это любое лицо, имевшее контакт с человеком с подтвержденным диагнозом, начиная с 4 дней до появления симптомов и в течение периода проявления симптомов38. Тем не менее аэрозольный путь передачи также может иметь место, особенно в пределах одного помещения и при проведении аэрозоль- генерирующих процедур.

Размер капель слюны

Время, в течение которого капли остаются в воздухе, и расстояние, на которое они могут перемещаться, главным образом зависят от их размера39. Большинство инфекционных респираторных заболеваний передаются на небольшие расстояния через крупные капли или при контакте с загрязненными поверхностями40,41. Большие капли (диаметр > 60 мкм), как правило, быстро оседают, поэтому риск передачи патогенных микро- организмов ограничен лицами, находящимися в непосредственной близости от источника капель слюны39. Передача через капли небольшого размера (диаметр ≤ 60 мкм) может осуществляться на короткие расстояния (расстояние между людьми менее 1 м). Существует вероятность того, что небольшие капли, в благо- приятных для этого условиях, превратятся в воздушно- капельную взвесь инфекционных частиц (диаметр <10 мкм), которые потенциально могут переноситься с аэрозолем на большие расстояния42.

Выделение капель слюны у человека

Капли слюны образуются при дыхании, разговоре, кашле или чихании и состоят из смеси жидкости и взвеси микроорганизмов43. Количество и размер капель слюны, а также расстояние, на которое они переносятся, варьируются у разных людей, что позволяет пред- положить, что степень заразности и пути передачи капель слюны в случае инфицирования одним и тем же возбудителем также различаются. При кашле образуется до трех тысяч инфицированных мелких капель. Почти столько же капель образуется в течение 5-минутного разговора43. Если один раз чихнуть, то выделится до 40 000 капель слюны, которые могут разлетаться на расстояния до нескольких метров43,45. (прим. ред.: есть основания предполагать, что авторы толкуют термин “слюна“ расширительно). При обычном выдохе образуются капли слюны, которые могут переноситься по воздуху на расстояние до 1 метра43. Большие и более тяжелые капли слюны, как правило, падают на землю по баллистической траектории. Маленькие капли образуют облако и вместе с потоками воздуха переносятся на более длинные расстояния39,43,45. Передача через аэрозоль слюны, обусловленная окружающей средой. Аэрозоли представляют собой взвешенные в воздухе жидкие или твердые частицы размером от 0,001 до 100 мкм39.

Инфекционные аэрозоли содержат болезнетворные микроорганизмы39. Аэрозольная передача инфекции на большие расстояния (расстояние между людьми более 1 метра) происходит в основном за счет инфицированных капель малого размера, которые могут находиться в воздухе почти бесконечно долго39. Давно известно о передаче воздушно-капельным путем при благоприятных условиях таких инфекций, как туберкулёз, корь, ветряная оспа и других возбудителей инфекционных заболеваний, в том числе SARS-CoV, вирусы гриппа или аденовирусы40,46. Дополнительный аэрозольный путь передачи, обусловленный окружающей средой, – когда, помимо передачи через близкие контакты и капли, возбудители инфекции могут проникать в отдаленные восприимчивые клетки вместе с мелкодисперсными частицами аэрозоля в строго определенных, способствующих этому условиях40. 2019-nCoV может распространяться с потоками воздуха во время применения процедур, генерирующих аэрозоль, например при проведении стоматологических манипуляций38,47.

Вероятность превращения капель слюны в аэрозоль, который может перемещаться на большие расстояния, определяется тем, как долго капли слюны могут находиться в воздухе (физический распад аэрозоля), как долго возбудители в каплях слюны сохраняют инфекционные свойства (биологический распад), а также вероятность по- падания инфицированных капель слюны в организм другого человека (восприимчивость)40. С точки зрения физического распада в сухом воздухе капли слюны быстро испаряются до сухого остатка, при этом они дольше сохраняются в потоке воздуха39. Минимальный размер капель ограничен размерами инфекционных частиц воздушно- капельной взвеси39. В случае медленного биологического распада капель перепады температур и открывание две- рей способствуют переносу капель вместе с воздушными потоками48. Время биологического распада зависит от процессов дегидратации, воздействия солнечного света и химических веществ39. Только такие устойчивые микро- организмы, как M.tuberculos, могут долго оставаться жизнеспособными и переноситься на большие расстояния49. В недавно опубликованном обзоре были кратко изложены данные, показывающие, что коронавирус остается жизнеспособным до 9 дней на поверхностях из металла, стекла или пластика, но не было приведено никаких достоверных данных относительно того, как долго он может находиться в воздухе50. Как описано в литературе, на поверхностях неодушевленных предметов коронавирус можно эффективно инактивировать с помощью 0,1% гипохлорита натрия, 62–71% этанола или 0,5% перекиси водорода в течение 1 мин50.

До сих пор нет убедительных доказательств того, что 2019-nCoV, содержащийся в каплях слюны, может в течение долгого времени сохранять жизнеспособность в воздушных потоках. Liu et al. собрали 35 образцов аэрозолей из трех зон в двух больницах Уханя и провели тесты на РНК 2019-nCoV методом цифровой капельной полимеразной цепной реакции (droplet digital polymerase chain reaction) 51. Они обнаружили, что в палатах пациентов концентрация аэрозоля РНК 2019-nCoV была низкой, либо ниже порога определения, но в осажденном аэрозоле была обнаружена РНК вируса. Это позволяет предположить, что большинство жизнеспособных частиц вируса оседает на пол. И это, как отмечалось выше, соответствует перемещению капель слюны большого размера51. В зоне для медицинского персонала концентрация РНК 2019-nCoV, находящейся в воздухе, уменьшилась, после уменьшения количества пациентов и систематического проведения санитарной обработки51. В зонах общего пользования при скоплении большого количества людей концентрация РНК 2019- nCoV поднималась до определяемого уровня.

Аэрозольная передача инфицированной слюны

Для того чтобы капли инфицированной слюны поразили восприимчивые клетки хозяев, нужно, чтобы они попали в глаза, рот, или, во время вдоха, напрямую в легкие26,52. Опубликован клинический случай инфицирования 2019- nCoV у медработника клиники для лиц с повышенной температурой. Данный работник носил респиратор класса N95, закрывающий рот и нос, но не использовал средства защиты глаз (защитные очки), из чего можно сделать предположение, что инфекция попала ему в глаза53. Также сообщалось, что SARS-CoV передается преимущественно при контакте с глазами, ртом или носом54. Респираторный вирус может вызвать у другого человека респираторное заболевание и при этом спровоцировать офтальмологические осложнения55. В результате исследований SARS-CoV было выявлено, что вероятность заражения увеличивают близкие контакты с зараженными и открытый доступ к слизистым оболочкам55. Результаты более раннего исследования показали, что риск заражения SARS-CoV удалось снизить до определенной степени благодаря тому, что медицинские работники, работающие с больными, носили хирургические маски56.

СРАВНЕНИЕ СЛЮНЫ, СОДЕРЖАЩЕЙ COVID-19 И SARS-CoV

Уровень сходства нуклеотидных последовательностей 2019-nCoV (SARS-CoV-257) и SARS-CoV – 79%5,17,58-61. Процент смертности от SARS-CoV выше, в то время как у 2019-nCoV значительно более высокая скорость распространения12. Сходства и различия между SARS-CoV и 2019-nCoV кратко изложены ниже с точки зрения диагностической ценности слюны, возможности прямого внедрения возбудителя в ткани ротовой полости, а также передачи капель слюны, что, как можно надеяться, объясняет более высокую скорость передачи 2019-nCoV (Таблица 1).

Что касается диагностической ценности слюны при коронавирусной инфекции, высокий уровень экспрессии РНК SARS-CoV был обнаружен в образцах слюны 17 пациентов с ТОРС (тяжелым острым респираторным синдромом, SARS), у четырех из которых еще не было очагового поражения легких. При этом выводы относительно ценности слюны для ранней диагностики были сделаны такие же, как и в случае 2019-nCoV62. Предыдущее исследование на животных ранних проявлений заболевания, вызванного SARS-CoV, показало, что SARS-CoV был обнаружен в мазках со слизистой оболочки рта до того, как тесты крови дали положительный результат на второй день после заражения носовой полости30,63. Профиль вирусной нагрузки в слюне 2019-nCoV достигает пика практически сразу после появления симптомов, в то время как концентрация SARS-CoV достигает максимума примерно через 10 дней после появления симптомов64–67.

Высокий уровень вирусной нагрузки 2019-nCoV позволяет предположить, что вирус может передаваться, даже если симптомы слабые или неочевидные. У пациентов старшего возраста концентрация SARS-CoV в слюне была выше. Высокая начальная вирусная нагрузка SARS-CoV сопровождалась смертельным исходом68,69. РНК 2019-nCoV определяется в слюне в течение 20 и более дней. В случае заболеваний, вызванных SARS-CoV и MERS-CoV, вирусная

Наименование

COVID-19

SARS-CoV

Диагностическая ценность

  1. Определение вирусной РНК в слюне на ранних стадиях болезни.
  2. Пики вирусной нагрузки в начале проявления симптомов.
  3. Присутствие РНК вируса в слюне, выделяемой непосредственно слюнными железами, ассоциировано с тяжестью COVID-19
  1. Определение вирусной РНК в слюне на ранних стадиях болезни.
  2. Пики вирусной нагрузки через 10 дней после проявления симптомов.
  3. Высокая начальная нагрузка SARS-CoV ассоциировалась со смертью

Прямое внедрение в ткани ротовой полости

  1. Рецепторы АПФ2 на поверхности клеток языка и слюнных желез.
  2. В S-белке 2019-nCoV есть уникальный фуриноподобный участок

Рецепторы АПФ2 на поверхности клеток языка и слюнных желез

Капли инфицированной слюны

Возможен дополнительный аэрозольный путь передачи, обусловленный окружающей средой

Аэрозольный путь передачи, обусловленный окружающей средой

Таблица 1. Сравнение COVID-19 и SARS-CoV с точки зрения свойств слюны

РНК также определялась в течение длительного времени64–67. Несмотря на то что как COVID-19, так и SARS-CoV взаимодействуют с АПФ2 на поверхности клеток-хозяев, обнаруженных в слюнных железах и тканях языка23–25,29,53, COVID-19, по всей видимости, более заразен чем SARS-CoV. Это, возможно, объясняется более низкой свободной энергией связывания рецептор-связывающего домена с АПФ2 (RBD-ACE2) и большей гибкостью самого рецептор-связывающего домена (RBD) 2019-nCoV по сравнению с теми же характеристиками в случае SARS-CoV. В отличие от SARS-СoV, в S-белке COVID-19 есть уникальный фуриноподобный участок. И, теоретически, S-белок COVID-19 может расщепляться фурином, экспрессируемым в тканях языка33,34.

Что касается процесса передачи коронавирусной инфекции через капли слюны, ретроспективное когортное исследование передачи SARS-CoV показало, что студенты, находящиеся в одноместной палате с пациентом с ТОРС (SARS) заразились SARS-CoV. Это говорит о том, что близость к пациентам с ТОРС (SARS) увеличивает вероятность заражения SARS-CoV52. В ходе исследований было показано, что в случае эпидемии ТОРС (SARS), капли, содержащие вирус, – это стандартный способ передачи инфекции71,72. van Doremalen et al. оценили устойчивость в аэрозоле COVID-19 и SARS-CoV, используя Байесовскую линейную регрессию, и обнаружили, что COVID-19 сохранял жизнеспособность в течение трех- часового эксперимента. Аналогичные результаты были получены для SARS-CoV73. Для SARS-CoV характерен дополнительный способ аэрозольной передачи, обусловленный окружающей средой (направленными потоками воздуха) 40,74. Для COVID-19, возможно, также характерен этот путь передачи. Передача вируса происходит, если люди длительное время подвергаются воздействию высокой концентрации инфекционных аэрозолей в относительно замкнутом пространстве75.

ПОТЕНЦИАЛЬНОЕ ПРИМЕНЕНИЕ

По всей видимости, диагностическая ценность слюны зависит от того, каким образом были взяты образцы. Наблюдается тенденция к снижению точности обнаружения РНК 2019-nCoV у пациентов с COVID-19 в слюне из глубоких отделов глотки (91,67 и 86,96%, согласно данным двух исследований), слюне из ротовой полости (50%) и непосредственно из слюнных желез (12,90%)11-14. С точки зрения клинического применения, требующего высокой точности обнаружения вируса, у образцов слюны из глубоких отделов глотки наибольшая доля положительных результатов, и, возможно, этот метод сбора образцов подходит для ранней диагностики COVID-19. Результаты тестов образцов слюны непосредственно из протоков слюнных желез зависят от тяжести течения COVID-19. И, вероятно, есть возможность использовать этот метод как прогностический и неинвазивный для пациентов в тяжелом состоянии. До сих пор не хватает доказательств того, что присутствие в слюне РНК 2019- nCoV свидетельствует о ее заразности или указывает на период, когда организм больного выделяет жизнеспособный вирус. Несмотря на то, что метод диагностики с использованием слюны неинвазивный и менее опасный по сравнению с мазками из носоглотки, постановка точного диагноза должна быть подкреплена полной информацией о симптомах, эпидемиологическим анамнезом и анализом нескольких клинических исследований.

Рис. 1. Потенциальная диагностическая ценность слюны и пути передачи COVID-19. COVID-19 определяется в слюне, скорее всего, в результате присоединения вируса к рецептору АПФ2, экспрессируемому в клетках-мишенях тканей слюнных желез языка.
Наряду с инфицированными жидкими выделениями дыхательной системы, в основном, происходит передача капель слюны большого размера на короткие расстояния. Вероятность аэрозольного пути передачи на длинные расстояния вне помещений мала вследствие физического и биологического разложения частиц, осложняющего данный процесс. Предотвращение образования капель, обеззараживание воздуха и блокирование путей попадания капель внутрь организма могут замедлить распространение COVID-19

Существует теоретическая вероятность прямого проникновение вируса в ткани ротовой полости, наряду с легкими, обусловленная экспрессией рецептора АПФ2 и фермента фурина14,29,30,37. Около половины пострадавших сообщили о симптомах сухости во рту и амблигестии (притуплении чувства вкуса)14. Данные симптомы, вероятно, возникли из-за нарушения функций языка, экспрессирующего АПФ2 и фурин, и экспрессии АПФ2 в слюнных железах. Однако на данный момент нет данных гистопатологических исследований, подтверждающих прямое внедрение COVID-19 в ткани полости рта. Хотя предполагается, что вирусу легче проникнуть в клетки, экспрессирующие АПФ2 и фурин, молекулярный механизм инфицирования COVID-19 еще неизвестен во всех подробностях. И мы должны взвешенно подходить к существующей теории проникновения вируса в клетку- хозяина, не переоценивая её роль. Слюна является универсальной и подвижной средой для переноса вируса. Среди капель слюны разных размеров, образующихся при дыхании, разговоре и чихании, крупные капли легко оседают на пол и для них возможна передача только на короткие расстояния39. Капли слюны могут образовывать аэрозоли и долетать до «хозяев», находящихся на дальних расстояниях, в подходящих для этого условиях39. На настоящий момент отсутствуют убедительные доказательства того, что SARS- nCoV или 2019-nCoV могут сохранять жизнеспособность в воздухе в течение длительного времени, делая возможным аэрозольный путь передачи на большие расстояния. Таким образом, ношение масок, чтобы предупредить выделение в воздух образующихся инфицированных капель слюны, тщательное обеззараживание воздуха внутри помещения с целью остановить распространение капель и соблюдение дистанции между людьми, чтобы вирус, содержащийся в каплях слюны, не попал внутрь, могут в определенной степени замедлить эпидемию COVID-19 (Рис. 1).

БЛАГОДАРНОСТИ

Исследование было поддержано Специальными фондами по Предотвращению и контролю COVID-19 Сычуанского университета (2020scunCoV-10008, X.Z.) и проектом, который финансировался Китайским Постдокторским Научным фондом (BX20190224, R.X.)

ВКЛАД АВТОРОВ

X.Z. и Q.Y. предложили и разработали структуру данного обзора; R.X., B.C., X.D. и P.Z. написали статью, и X.Z. и Q.Y. внесли правки в рукопись.

ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ ИНФОРМАЦИЯ: Конфликт интересов: Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

БИБЛИОГРАФИЯ

  1. Wang, C., Horby, P. W., Hayden, F. G. & Gao, G. F. A novel coronavirus outbreak of global health concern. Lancet 395, 470– 473 (2020).
  2. Zhu, N. et al. A novel coronavirus from patients with pneumonia in China, 2019. N. Engl. J. Med. 382, 727–733 (2020).
  3. Cui, J., Li, F. & Shi, Z. L. Origin and evolution of pathogenic coronaviruses. Nat. Rev. Microbiol. 17, 181–192 (2019).
  4. Wong, G. et al. MERS, SARS, and Ebola: the role of super-spreaders in infectious disease. Cell Host Microbe 18, 398–401 (2015).
  5. Bai Y., Nie X. & Wen C. Epidemic Prediction of 2019-nCoV in Hubei Province and Comparison With SARS in Guangdong Province. https://ssrn.com/abstract=3531427 (2020).
  6. Spielmann, N. & Wong, D. T. Saliva: diagnostics and therapeutic perspectives. Oral. Dis. 17, 345–354 (2011).
  7. Navazesh, M. & Kumar, S. K., University of Southern California School of Dentistry. Measuring salivary flow: challenges and opportunities. J. Am. Dent. Assoc. 139 (Suppl), 35S–40S (2008).
  8. Kaufman, E. & Lamster, I. B. The diagnostic applications of saliva-a review. Crit. Rev. Oral. Biol. Med. 13, 197–212 (2002).
  9. Zhang, C. Z. et al. Saliva in the diagnosis of diseases. Int J. Oral. Sci. 8, 133–137 (2016).
  10. General Office of the National Health Commission, General Office of the Nation Administration of Traditional Chinese Medicine. Notice on issuing the pneumonia diagnosis and treatment plan for the new coronavirus infection (The 7th Trial Edition). (2020).
  11. To, K. K. et al. Consistent detection of 2019 novel coronavirus in saliva. Clin. Infect. Dis. https://doi.org/10.1093/cid/ciaa149 (2020).
  12. To, K. K.-W. et al. Temporal profiles of viral load in posterior oropharyngeal saliva samples and serum antibody responses during infection by SARS-CoV-2: an observational cohort study. Lancet Infect. Dis. https://doi.org/10.1016/s1473-3099(20)3 0196-1 (2020).
  13. Zhang, W. et al. Molecular and serological investigation of 2019- nCoV infected patients: implication of multiple shedding routes. Emerg. Microbes Infect. 9, 386–389 (2020).
  14. Chen, L. et al. Detection of 2019-nCoV in Saliva and Characterization of Oral Symptoms in COVID-19 Patients. https://ssrn.com/abstract=3557140 (2020).
  15. Mostafa, A., Abdelwhab, E. M., Mettenleiter, T. C. & Pleschka, S. Zoonotic potential of influenza A viruses: a comprehensive overview. Viruses 10, (2018). https://doi.org/10.3390/v100 90497.
  16. Maginnis, M. S. Virus-receptor interactions: the key to cellular invasion. J. Mol. Biol. 430, 2590–2611 (2018).
  17. Zhou, P. et al. A pneumonia outbreak associated with a new coronavirus of probable bat origin. Nature 579, 270–273 (2020).
  18. Li, W. et al. Angiotensin-converting enzyme 2 is a functional receptor for the SARS coronavirus. Nature 426, 450–454 (2003).
  19. Hofmann, H. et al. Human coronavirus NL63 employs the severe acute respiratory syndrome coronavirus receptor for cellular entry. Proc. Natl Acad. Sci. USA 102, 7988–7993 (2005).
  20. Xu, X. et al. Evolution of the novel coronavirus from the ongoing Wuhan outbreak and modeling of its spike protein for risk of human transmission. Sci. China Life Sci. 63, 457–460 (2020).
  21. Wrapp, D. et al. Cryo-EM structure of the 2019-nCoV spike in the prefusion conformation. Science 367, 1260–1263 (2020).
  22. Zhang, H. et al. The Digestive System is a Potential Route of 2019-nCov Infection: A Bioinformatics Analysis Based on Single-cell Transcriptomes. https://doi.org/10.1101/2020.01.30.927806 (2020).
  23. Zhao, Y. et al. Single-Cell RNA Expression Profiling of ACE2, the Putative Receptor of Wuhan 2019-nCov. https://doi.org/10. 1101/2020.01.26.919985 (2020).
  24. Zou, X. et al. Single-cell RNA-seq data analysis on the receptor ACE2 expression reveals the potential risk of different human organs vulnerable to 2019-nCoV infection. Front. Med. https://doi.org/10.1007/s11684-020-0754-0 (2020).
  25. Chai, X. et al. Specific ACE2 Expression in Cholangiocytes may Cause Liver Damage After 2019-nCoV Infection. https://doi.org/10.1101/2020.02.03.931766 (2020).
  26. Chan, J. F. et al. A familial cluster of pneumonia associated with the 2019 novel coronavirus indicating person-to-person transmission: a study of a family cluster. Lancet 395, 514–523 (2020).
  27. Holshue, M. L. et al. First case of 2019 novel coronavirus in the United States. N. Engl. J. Med. 382, 929–936 (2020).
  28. Liang, W. et al. Diarrhoea may be underestimated: a missing link in 2019 novel coronavirus. Gut. https://doi.org/10.11 36/gutjnl-2020-320832 (2020).
  29. Xu, H. et al. High expression of ACE2 receptor of 2019-nCoV on the epithelial cells of oral mucosa. Int J. Oral. Sci. 12, 8 (2020).
  30. Liu, L. et al. Epithelial cells lining salivary gland ducts are early target cells of severe acute respiratory syndrome coronavirus infection in the upper respiratory tracts of rhesus macaques. J. Virol. 85, 4025–4030 (2011).
  31. Kessler, A. T. & Bhatt, A. A. Review of the major and minor salivary glands, part 1: anatomy, infectious, and inflammatory processes. J. Clin. Imaging Sci. 8, 47 (2018).
  32. Izaguirre, G. The proteolytic regulation of virus cell entry by furin and other proprotein convertases. Viruses 11, https://doi.org/10.3390/v11090837 (2019).
  33. Coutard, B. et al. The spike glycoprotein of the new coronavirus 2019-nCoV contains a furin-like cleavage site absent in CoV of the same clade. Antivir. Res. 176, 104742 (2020).
  34. Li, X. D. et al. A Furin Cleavage Site was Discovered in the S Protein of the Wuhan 2019 Novel Coronavirus. www.chinaxiv.org/abs/202002.00004 (2020).
  35. Bassi, D. E., Zhang, J., Renner, C. & Klein-Szanto, A. J. Targeting proprotein convertases in furin-rich lung cancer cells results in decreased in vitro and in vivo growth. Mol. Carcinog. 56, 1182–1188 (2017).
  36. Mallapaty, S. Why does the coronavirus spread so easily between people? Nature 579, 183 (2020).
  37. Lopez de Cicco, R., Watson, J. C., Bassi, D. E., Litwin, S. & Klein- Szanto, A. J. Simultaneous expression of furin and vascular endothelial growth factor in human oral tongue squamous cell carcinoma progression. Clin. Cancer Res. 10, 4480–4488 (2004).
  38. WHO. The First Few X Cases and Contact Investigation Protocol for 2019-Novel Coronavirus Infection. https://www.who.com.au/2019- nCoV/FFXprotocol/2020 (2020).
  39. Tang, J. W., Li, Y., Eames, I., Chan, P. K. & Ridgway, G. L. Factors involved in the aerosol transmission of infection and control of ventilation in healthcare premises. J. Hosp. Infect. 64, 100–114 (2006).
  40. Roy, C. J. & Milton, D. K. Airborne transmission of communicable infection-the elusive pathway. N. Engl. J. Med. 350, 1710–1712 (2004).
  41. Chapin, C. V. The importance of contact infection. Am. J. Public Hyg. 20, 742–759 (1910).
  42. Fennelly, K. P. et al. Cough-generated aerosols of Mycobacterium tuberculosis: a new method to study infectiousness. Am. J. Respir. Crit. Care Med. 169, 604–609
  43. (2004). Kohn, W. G. et al. Guidelines for infection control in dental health-care settings-2003. MMWR Recomm. Rep. 52, 1–61 (2003).
  44. Edwards, D. A. et al. Inhaling to mitigate exhaled bioaerosols. Proc. Natl Acad. Sci. USA 101, 17383–17388 (2004).
  45. Cole, E. C. & Cook, C. E. Characterization of infectious aerosols in health care facilities: an aid to effective engineering controls and preventive strategies. Am. J. Infect. Control 26, 453–464 (1998).
  46. Sehulster, L., Chinn, R. Y., Cdc & Hicpac. Guidelines for environmental infection control in health-care facilities. Recommendations of CDC and the Healthcare Infection Control Practices Advisory Committee (HICPAC). MMWR Recomm. Rep. 52, 1–42 (2003).
  47. Peng, X. et al. Transmission routes of 2019-nCoV and controls in dental practice. Int J. Oral Sci. 12, 9 (2020).
  48. Tang, J. W. et al. Door-opening motion can potentially lead to a transient breakdown in negative-pressure isolation conditions: the importance of vorticity and buoyancy airflows. J. Hosp. Infect. 61, 283–286 (2005).
  49. Fitzgerald, D. W., Sterling, T. R. & Haas, D. W. Mycobacterium tuberculosis. In: Mandell, G. L., Bennett, J. E. & Dolin, R. (Eds). Mandell, Douglas, and Bennett’s principles and practice of infectious diseases. Seventh edition (Philadelphia, PA, Churchill Livingstone Elsevier, 2010).
  50. Kampf, G., Todt, D., Pfaender, S. & Steinmann, E. Persistence of coronaviruses on inanimate surfaces and their inactivation with biocidal agents. J. Hosp. Infect. 104, 246–251 (2020).
  51. Liu, Y. et al. Aerodynamic Characteristics and RNA Concentration of SARS-CoV-2 Aerosol in Wuhan Hospitals during COVID-19 Outbreak. https://doi.org/10.1101/2020.03.08.982637 (2020).
  52. Wong, T. W. et al. Cluster of SARS among medical students exposed to single patient, Hong Kong. Emerg. Infect. Dis. 10, 269– 276, https://doi.org/10.3201/eid1002.030452 (2004).
  53. Lu, C. W., Liu, X. F. & Jia, Z. F. 2019-nCoV transmission through the ocular surface must not be ignored. Lancet 395, e39, https://doi.org/10.1016/S0140-6736(20)30313-5 (2020).
  54. Peiris, J. S., Yuen, K. Y., Osterhaus, A. D. & Stohr, K. The severe acute respiratory syndrome. N. Engl. J. Med. 349, 2431–2441 (2003).
  55. Belser, J. A., Rota, P. A. & Tumpey, T. M. Ocular tropism of respiratory viruses. Microbiol Mol. Biol. Rev. 77, 144–156 (2013).
  56. Seto, W. H. et al. Effectiveness of precautions against droplets and contact in prevention of nosocomial transmission of severe acute respiratory syndrome (SARS). Lancet 361, 1519–1520 (2003).
  57. Gorbalenya, A. E. et al. Severe acute respiratory syndrome-related coronavirus: the species and its viruses—a statement of the Coronavirus Study Group. Preprint at https://www.biorxiv.org/content/, https://doi.org/10.1101/2020.02.07.937862v1 (2020).
  58. Chen, N. et al. Epidemiological and clinical characteristics of 99 cases of 2019 novel coronavirus pneumonia in Wuhan, China: a descriptive study. Lancet 395, 507–513 (2020).
  59. Li, Q. et al. Early transmission dynamics in Wuhan, China, of novel coronavirusinfected pneumonia. N. Engl. J. Med. https://doi.org/10.1056/NEJMoa2001316 (2020).
  60. de Wit, E., van Doremalen, N., Falzarano, D. & Munster, V. J. SARS and MERS: recent insights into emerging coronaviruses. Nat. Rev. Microbiol. 14, 523–534 (2016).
  61. Al-Tawfiq, J. A., Zumla, A. & Memish, Z. A. Coronaviruses: severe acute respiratory syndrome coronavirus and Middle East respiratory syndrome coronavirus in travelers. Curr. Opin. Infect. Dis. 27, 411–417 (2014).
  62. Wang, W. K. et al. Detection of SARS-associated coronavirus in throat wash and saliva in early diagnosis. Emerg. Infect. Dis. 10,1213–1219 (2004).
  63. Qin, C. et al. An animal model of SARS produced by infection of Macaca mulatta with SARS coronavirus. J. Pathol. 206, 251–259 (2005).
  64. Perlman, S. & Netland, J. Coronaviruses post-SARS: update on replication and pathogenesis. Nat. Rev. Microbiol. 7, 439– 450 (2009).
  65. Huang, C. et al. Clinical features of patients infected with 2019 novel coronavirus in Wuhan, China. Lancet 395, 497–506 (2020).
  66. Peiris, J. S. et al. Clinical progression and viral load in a community outbreak of coronavirus-associated SARS pneumonia: a prospective study. Lancet 361, 1767–1772 (2003).
  67. Oh, M. D. et al. Viral load kinetics of MERS coronavirus infection. N. Engl. J. Med. 375, 1303–1305 (2016).
  68. Chu, C. M. et al. Initial viral load and the outcomes of SARS. CMAJ 171, 1349–1352 (2004).
  69. Chen, W. J. et al. Nasopharyngeal shedding of severe acute respiratory syndromeassociated coronavirus is associated with genetic polymorphisms. Clin. Infect. Dis. 42, 1561–1569 (2006).
  70. He, J., Tao, H., Yan, Y., Huang, S.-Y. & Xiao, Y. Molecular Mechanism of Evolution and Human Infection With the Novel Coronavirus (2019-nCoV). https://doi.org/10.1101/2020.02.17.952903 (2020).
  71. Yu, I. T. et al. Evidence of airborne transmission of the severe acute respiratory syndrome virus. N. Engl. J. Med. 350, 1731– 1739 (2004).
  72. Li, Y., Duan, S., Yu, I. T. & Wong, T. W. Multi-zone modeling of probable SARS virus transmission by airflow between flats in
  73. Block E, Amoy Gardens. Indoor Air 15, 96–111 (2005). van Doremalen, N. et al. Aerosol and surface stability of SARS-CoV-2 as compared with SARS-CoV-1. N. Engl. J. Med. https://doi.org/10.1056/NEJMc2004973 (2020).
  74. WHO. Infection Prevention and Control of Epidemic- and Pandemic-prone Acute Respiratory Infections in Health Care (World Health Organization, 2014).
  75. Su, J. [Aerosol transmission risk and comprehensive prevention and control strategy in dental treatment]. Zhonghua Kou Qiang Yi Xue Za Zhi 55, E006 (2020).

Открытый доступ: Данная статья распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 International License, которая разрешает использование, выкладывание в общий доступ, внесение изменений, распространение на любых носителях и в любом формате, при условии указания кредитов авторов оригинала и оригинального источника, а также предоставления ссылки на лицензию Creative Commons и информации о том, какие изменения были внесены. Картинки и другие материалы третьих лиц, включенных в статью, имеют лицензию Creative Commons, если не указано иное в строках благодарности к данным материалам. Если материал не включен в лицензию Creative Commons данной статьи, и Ваша цель использования выходит за рамки разрешенных видов использования или правового регулирования, необходимо получить разрешение напрямую от правообладателя. Для того, чтобы посмотреть копию данной лицензии, пройдите по ссылке: http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.

© Авторы 2020

Боль и повышенное слюноотделение является нормальным явлением после профессионального отбеливания?

Эта вполне естественная реакция организма, не стоит волноваться по этому поводу. В наше время для поддержания здоровья и красоты полости рта разработано множество методов, одним из которых является очень эффективное и абсолютно безопасное отбеливание эмали зубов. Оно не просто помогает сохранить белизну, но и защищает от появления кариозного поражения и от образования камня. Как и к любой стоматологической процедуре, к отбеливанию следует готовиться заранее. Важно знать некоторые рекомендации по уходу за зубами после процедуры в случае появления сильной чувствительности и прочих моментов, доставляющих дискомфорт.

Возможные побочные эффекты

Конечно, главным побочным эффектом является сильная боль в зубах при прикосновении, а также их повышенная чувствительность по отношению к горячему или слишком холодному. У некоторых пациентов наблюдается сильная боль при надавливании или при пережевывании пищи. Снизить вероятность появления подобных неприятных моментов может лишь правильно подобранная технология отбеливания. Именно поэтому настоятельно рекомендуется делать отбеливание в профессиональных клиниках, а не самостоятельно в домашних условиях. Так в чем же причина появления болей? Несмотря на то, что сама процедура совершенно не сложная и безболезненная, в процессе отбеливания в структуру эмали проникают определенные вещества, которые на время ослабляют защитные свойства внешней оболочки зуба. Как правило, этим веществом может являться активный кислород. Период незащищенности длится не более пары дней в зависимости от индивидуальных особенностей строения зубов каждого отдельного пациента.

Как с этим бороться?

Для минимизации болевых ощущений после отбеливания рекомендуется к процедуре заранее правильно подготовиться. Также важно, чтобы ваш стоматолог подобрал наиболее подходящий вариант отбеливания и рассказал о дальнейшем уходе за полостью рта. Несколько полезных советов: За две недели до назначенной даты отбеливания можно начать чистить зубы профессиональной  пастой, которая положительно влияет на чувствительность эмали. Это может быть Сенсодин или Колгейт Сенситив. Их составы способны блокировать чувствительность нервных окончаний, поэтому зубы будут заранее подготовлены к процедуре отбеливания. Чистить зубы следует три раза в день, а также после каждого приема пищи. При этом рекомендуется использовать максимально мягкую щетину, которая не травмирует эмали и мягкие ткани вокруг зуба. Некоторые врачи предлагают своим пациентам прием легких обезболивающих препаратов перед процедурой и после нее в течение нескольких суток.

Щадящие способы отбеливания

Важным моментом, как уже говорилось выше, является выбор надежной стоматологической клиники и корректного способа отбеливания. В медцентрах используется множество различных методик:
  • химическое отбеливание;
  • с применением активного кислорода;
  • с помощью лазера; деликатное фото – отбеливание при помощи специальных галогеновых ламп и многое другое.

Забота о зубах после осветления

Если человек будет соблюдать все предписания врача, то дискомфорт и повышенное слюноотделение исчезнут без следа намного быстрее. При этом риск развития каких-либо осложнений или воспаления будет минимален. Основные правила:
  1. В первые дни после процедуры обязательно следите за своим рационом питания. Рекомендуется употреблять мягкую пищу, избегать слишком горячего, очень холодного и кислого.
  2. Нельзя пить красящие напитки, а также употреблять слишком много сахара.
  3. Чистить зубы нужно аккуратно с помощью мягкой зубной щетки и фторосодержащих паст. Можно использовать флоссы и ирригатор.
  4. Для нормализации кислотно – щелочного баланса можно употреблять жевательные резинки без содержания в них сахара.
Важно отметить, что процедуру осветления зубной эмали не рекомендуется проводить чаще 1- 2 раз в год. Если же неприятные ощущения и дискомфорт при жевании после нее не проходят в течение длительного времени, то лучше проконсультироваться со своим стоматологом.

Большое выделение слюны – Вопрос стоматологу

Если вы не нашли нужной информации среди ответов на этот вопрос, или же ваша проблема немного отличается от представленной, попробуйте задать дополнительный вопрос врачу на этой же странице, если он будет по теме основного вопроса. Вы также можете задать новый вопрос, и через некоторое время наши врачи на него ответят. Это бесплатно. Также можете поискать нужную информацию в похожих вопросах на этой странице или через страницу поиска по сайту. Мы будем очень благодарны, если Вы порекомендуете нас своим друзьям в социальных сетях.

Медпортал 03online.com осуществляет медконсультации в режиме переписки с врачами на сайте. Здесь вы получаете ответы от реальных практикующих специалистов в своей области. В настоящий момент на сайте можно получить консультацию по 74 направлениям: специалиста COVID-19, аллерголога, анестезиолога-реаниматолога, венеролога, гастроэнтеролога, гематолога, генетика, гепатолога, гериатра, гинеколога, гинеколога-эндокринолога, гомеопата, дерматолога, детского гастроэнтеролога, детского гинеколога, детского дерматолога, детского инфекциониста, детского кардиолога, детского лора, детского невролога, детского нефролога, детского онколога, детского офтальмолога, детского психолога, детского пульмонолога, детского ревматолога, детского уролога, детского хирурга, детского эндокринолога, дефектолога, диетолога, иммунолога, инфекциониста, кардиолога, клинического психолога, косметолога, липидолога, логопеда, лора, маммолога, медицинского юриста, нарколога, невропатолога, нейрохирурга, неонатолога, нефролога, нутрициолога, онколога, онкоуролога, ортопеда-травматолога, офтальмолога, паразитолога, педиатра, пластического хирурга, подолога, проктолога, психиатра, психолога, пульмонолога, ревматолога, рентгенолога, репродуктолога, сексолога-андролога, стоматолога, трихолога, уролога, фармацевта, физиотерапевта, фитотерапевта, флеболога, фтизиатра, хирурга, эндокринолога.

Мы отвечаем на 96.62% вопросов.

Оставайтесь с нами и будьте здоровы!

Обильное выделение слюны во время сна (у взрослого, ребенка, беременной) – причины, лечение

Время чтения 8 мин.

Выделение слюны – нормальный физиологический процесс, который протекает бесконтрольно. За этот рефлекс отвечают три крупные железы: околоушные, подчелюстные, подъязычные. Однако обильное выделение слюны является нарушением, которое требует особого внимания. Важно знать причины и лечение такого явления, как повышенное выделение слюны.

Что такое гиперсаливация?

Гиперсаливацией называют механизм, во время которого выделяется много слюны. Больной жалуется на большое слюнотечение, которое доставляет немало неудобств. Чтобы понять причину его появления, необходимо провести исследование слюнного секрета.

Гиперсаливация или обильное слюноотделение бывает нескольких типов: истинная форма (при которой наблюдается усиленная выработка слюнной жидкости), ложная форма (проблема проглатывания слюны, сбой в выполнении функций лицевых мышц, поражения губной части).

Существует разделение по уровням возникновения: из-за нарушения в работе слюнных желез (при отравлении, воспалительных процессах ротовой полости), из-за неправильной деятельности спинного и головного мозга (при психозах, атеросклерозе сосудистых стенок головного мозга, бульбарном параличе), из-за рефлекторных воздействий от органов через передачу нервных импульсов в часть мозга (печени, почек, сердца).

Также различают типы слюнотечения в соответствии со временем возникновения:

  1. Утреннее выделение слюны.
  2. Дневное выделение слюны (часто наблюдается при заболеваниях носовой полости).
  3. Ночное выделение слюны (поражения глистами и ленточными червями, гастроэнтерологические недуги). Во время таких явлений присутствует тошнота и выделения слюны во время сна.
  4. Выделение слюны во время психических припадков.

Причины возникновения

Причина сильной выработки слюнной консистенции кроется во многих факторах:

  1. Заболевания ротовой полости: язвенный стоматит, гингивит, ангина.
  2. Заболевания желудочно-кишечного тракта: сужение пищевода вследствие повреждений, гастроэнтерология (гастрит, язвенная болезнь, панкреатит).
  3. Нервно-психические недуги: инсульт, болезнь Паркинсона, онкология головного мозга, ваготония, шизофрения, неврозы, олигофрения и пр.).
  4. Бешенство.
  5. Гельминтоз.
  6. Дефицит никотиновой кислоты.
  7. Токсические отравления (ртуть, йод, бром, медь).
  8. Побочное действие лекарств.
  9. Отравление продуктами почечной системы.
  10. Рефлекс на сбой в работе организма.
  11. Чрезмерное потребление алкогольных напитков.
  12. Аномалии полости рта (нарушение прикуса), патологии слюнной железы.
  13. Период беременности.
  14. Злоупотребление вредными привычками.

Сильное слюноотделение появляется по нескольким причинам:

Продукты, вяжущие ротовую полость

Как только пища попадает в полость рта, начинает интенсивно вырабатываться слюна, чтобы беспрепятственно переварить еду. На вяжущие продукты необходимо больше слюнного секрета, вследствие этого организм дает себе такую установку, и слюнные железы начинают интенсивно работать.

Насморк

Во время простудных заболеваний нередко возникает насморк, больному трудно дышать преимущественно в ночное время. Слизь, которая скопилась в носоглотке, стекает по задней стенке, и от этого слюноотделение увеличивается.

Прием лекарственных средств

Многие медицинские препараты имеют побочный эффект в виде усиленного слюнотечения. Узнать, вызывает ли медикамент данное действие, можно прочитав инструкцию по применению.

Патологии слюнных желез

Патологическим процессом в работе слюнной железы можно назвать сиаладенит. Заболевание протекает остро, с выраженным воспалением слюновырабатывающих желез. Оно характеризуется отечностью, гнойными явлениями и отмиранием ее тканей, в результате появляется рубец.

Важно! При сиаладените повышается температура, становится чувствительной ротовая полость, может выделяться гной.

Еще одной патологией являются онкологические опухоли (сосудистые, нейрогенные, липомы). Устранить данные дефекты возможно исключительно путем хирургической операции.

Беременность

Период вынашивания малыша характеризуется токсикозом, когда женщина чувствует тошноту и рвотные позывы. Эти все процессы подают сигнал в мозг, и из-за этого усиливается кровообращение. Появление слюны в большом количестве, как и изжоги, сигнализирует о недомогании. Дефицит витаминов и минералов также усиливает слюноотделение.

Неправильный прикус

Правильный прикус считается, когда один зубной ряд смыкается со вторым рядом зубов при закрытой челюсти. Нарушение прикуса исправляют путем ношения пластинок, брекетов и пр. Во время неправильного смыкания полости рта, выделяется дополнительное количество слюнного секрета. Точно определить прикус сможет врач ортодонтической специализации.

Язвенный стоматит

Это заболевание воспалительного характера, характеризующееся отеками и высыпаниями в виде язв с гнойным налетом. Язвенный стоматит сопровождается лихорадочным ознобом, увеличением лимфоузлов. Существуют разделения в зависимости от пораженного участка (десны, щеки, губы, язык).

Важно! Симптомами являются жжение, покраснение, образование беловатых язвенных воспалений, колющая боль при приеме пищи.

Появлению язвенного стоматита способствуют гастроэнтерологические заболевания (язва, энтерит), нарушения в сердечно-сосудистой системе, инфекционные недуги (грипп, скарлатина, корь), а также авитаминоз.

Стоматологические проблемы

Если в полость рта попадают микробы, то тогда начинается воспалительный процесс (стоматиты, гингивиты, ангины). В первую очередь происходит воспаление слюнного канала, и затем от него задается сигнал сильного слюнотечения.

Лакунарная ангина

При лакунарной ангине начинает интенсивно болеть горло, из-за этого количество слюны заметно прибавляется. Этот недуг проявляется общим недомоганием с повышением температуры тела, отеками миндалин, увеличением лимфатических узлов. Лечить данную болезнь нужно только после консультации с врачом.

Заболевания желудочно-кишечного тракта

Многие заболевания пищеварительных органов характеризуются повышением кислотности желудочного сока, воспалением слизистого слоя желудка. Такие проблемы вызывают гиперсаливацию с небольшим отклонением. Выделение слюнного секрета происходит преимущественно ночью, когда у спящего человека расслаблены челюсти. Данный процесс протекает в нескольких стадиях, которые больной принимает за физиологическую норму. Этого категорически делать нельзя, потому что усиленное слюноотделение перейдет в хроническую фазу.

Бульбарный синдром

Бульбарным параличом называют поражение черепного нерва: языкоглоточного, подъязычного, блуждающего. Вследствие этого нарушается нормальная речь больного, ухудшается глотательный и небный рефлекс, атрофируются мышцы языка. Из-за этого у лиц, страдающих этим заболеванием, нередко слюна вытекает из уголков рта.

Вредные привычки

Курящие люди подвержены развитию язвенного некротического гингивита, во время которого происходит разрушение слизистых оболочек в ротовой полости. Начало заболевания характеризуется воспалением десен и покрытием их слоем гнойного налета, которые кровоточат. Все это протекает с выраженным зловонным запахом изо рта, спазмами во время еды, мигренью, привкусом металла в ротовой полости. Такая разновидность гингивита молниеносно переходит в хроническую фазу.

Алкогольное опьянение

Острое алкогольное отравление характеризуется увеличением слюнной секреции, нарушением дыхательных режимов, судорожными сокращениями, непрекращающейся рвотой. В крови у взрослого человека содержится 0,4 промилле алкоголя, как только этот показатель становится выше, наблюдается алкогольное опьянение. Отравление спиртными напитками в экстренном порядке устраняют медикаментозным путем, иначе такое состояние может привести к летальному исходу.

Лечение

Первое, что нужно сделать, если Вы заметили у себя обильное слюноотделение, обратиться к врачу. Он проведет все необходимые лабораторные исследования и выяснит причину, почему слюна вырабатывается в больших количествах.

Народная медицина

Лечение усиленного слюнотечения возможно при помощи народной медицины. Есть множество рецептов, как уменьшить слюну. Например, эффективным будет полоскание ротовой полости настойкой на основе водяного перца, экстракта лагохилуса опьяняющего, настоя калины, пастушьей сумки.

Еще одной полезной процедурой будет полоскание отварами ромашки, дубовой коры. Постоянное ополаскивание рта после приема пищи помогает уничтожить патогенные микроорганизмы. Можно употреблять воду с добавлением лимонного сока.

Гомеопатия

Лечение с помощью гомеопатии помогает нормализовать выработку слюнного секрета. В качестве гомеопатического препарата используют следующие лекарственные средства на основе:

  • азотной кислоты со спиртом,
  • борнокислого натрия,
  • ртутного оксида,
  • серы и кальция,
  • кремниевой кислоты,
  • серозного сублимата.

Стандартная терапия

При медикаментозном лечении применяют холинолитические медицинские средства, которые нормализуют работу центральной нервной системы, уменьшая слюноотделение. Это такие препараты, как «Мебедрол», «Метабизил», «Циклодол», «Тропацин». Перед началом употребления этих средств, необходимо проконсультироваться с лечащим врачом.

Хирургическая операция

Хирургическое удаление крупных слюнных желез имеет ряд рисков, связанных с повреждением лицевых нервов, деформированием тканей и образованием рубцов.

Важно! Операция проводится под местным или общим наркозом и требует некоторого реабилитационного периода после хирургического вмешательства.

При появлении нетипичных признаков (озноб, повышение температуры, выделения из ротовой полости), нужно обратиться за врачебной помощью. Также существует огромное количество хирургических методов, как вылечить повышенное слюнотечение: паротидэктомия, резекция, энуклеация, иссечение и пр.

Гиперсаливация при беременности

Период беременности характеризуется усилением выработки слюнного секрета из-за постоянных токсикозов. От чего так происходит? Из-за воздействия факторов, которые активизируются, как только падает иммунная защита:

  1. Заболевания полости рта.
  2. Нарушения желудочно-кишечного тракта.
  3. Неврологические болезни (психозы, инсульты).
  4. Поражение ленточными паразитами.
  5. Дефицит витамина РР.
  6. Отравление ядовитыми элементами.
  7. Сбой в функционировании почек.

Симптомами гиперсаливации являются регулярное заглатывание слюнного секрета, раздражение кожного покрова из-за подтекания слюней.

Гиперсаливация у детей

Процесс гиперсаливации у детей от трех до шести месяцев – нормальное явление. Слюни текут как рефлекс организма. В период прорезывания зубов также усиление слюны считается нормой. Однако усиленное слюнотечение может являться признаком черепно-мозговой травмы, нарушением в работе ЖКТ и вирусным поражением.

В старшем возрасте появление большого слюноотделения означает, что проблемой является психическая подавленность и гельминтоз. Нужно помнить о том, что сильная выработка слюней может нарушать качество речи.

Слюнотечение во время сна

Интенсивное появление слюней в ночное время говорит о следующих проблемах:

  1. Работа слюнных желез активизируется в то время, когда человек спит.
  2. Сон с раскрытым ртом указывает на отоларингологические и стоматологические патологии.
  3. Самопроизвольное выделение без участия человека.

Важно! Небольшое количество испускания слюны во сне не является патологией.

Снизить слюноотделение можно путем устранения сопутствующих факторов: воспалительные заболевания полости рта, хронические инфекционные недуги, глистные поражения кишечника. Все перечисленные обстоятельства проверяются врачом, вследствие чего больной получает лечебное назначение. Выполняя все рекомендации врача, количество слюны придет в норму.

Слюнотечение (Сиалорея): основы практики, проблема, эпидемиология

Автор

Нирадж Н. Матур, MBBS, MS, FAMS, DNB (ENT), MNAMS  Профессор передового опыта (ENT), Медицинский колледж леди Хардиндж, Нью-Дели, Индия

Нирадж Н. Матур, MBBS, MS, FAMS, DNB (ENT ), MNAMS является членом следующих медицинских обществ: Ассоциация отоларингологов Индии, Группа кохлеарной имплантации Индии, Индийская медицинская ассоциация, Национальная академия медицинских наук (Индия), Нейроотологическое и эквилибриометрическое общество Индии, Королевское медицинское общество

Раскрытие информации: Нечего раскрывать.

Редакционная коллегия специалистов

Франсиско Талавера, PharmD, PhD Адъюнкт-профессор Фармацевтического колледжа Медицинского центра Университета Небраски; Главный редактор Medscape Drug Reference

Раскрытие информации: Получал зарплату от Medscape за трудоустройство. для: Медскейп.

Karen H Calhoun, MD, FACS, FAAOA  Профессор отделения отоларингологии-хирургии головы и шеи, Медицинский колледж Университета штата Огайо

Karen H Calhoun, MD, FACS, FAAOA является членом следующих медицинских обществ: Американское Академия пластической и реконструктивной хирургии лица, Американское общество головы и шеи, Ассоциация исследований в области отоларингологии, Южная медицинская ассоциация, Американская академия отоларингологической аллергии, Американская академия отоларингологии-хирургии головы и шеи, Американский колледж хирургов, Американская медицинская ассоциация, Американский Ринологическое общество, Общество университетских отоларингологов-хирургов головы и шеи, Техасская медицинская ассоциация

Раскрытие информации: Нечего раскрывать.

Главный редактор

Арлен Д. Мейерс, доктор медицины, магистр делового администрирования  профессор отоларингологии, стоматологии и инженерии Медицинской школы Университета Колорадо

Арлен Д. Мейерс, доктор медицинских наук, магистр делового администрирования, является членом следующих медицинских обществ: Хирургия, Американская академия отоларингологии – Хирургия головы и шеи, Американское общество головы и шеи

Раскрытие информации: Служить директором, сотрудником, партнером, сотрудником, советником, консультантом или доверенным лицом для: Cerescan, Ryte, Neosoma, MI10< br/>Получил доход в сумме, равной или превышающей 250 долларов США, от: , Cliexa;;Neosoma
Получил долю владения от Cerescan за консультации; для: Neosoma, eMedevents, MI10.

Дополнительные участники

Дженнифер П. Портер, доктор медицины  доцент кафедры оториноларингологии, отделение коммуникативных наук, пластическая хирургия лица Chevy Chase

Дженнифер П. Портер, доктор медицины, является членом следующих медицинских обществ: Американская академия лицевой пластической и реконструктивной хирургии, Американская академия отоларингологии – Хирургия головы и шеи, Техасская медицинская ассоциация

Раскрытие информации: Нечего раскрывать.

Благодарности

Авторы и редакторы Medscape Reference с благодарностью признают вклад предыдущих авторов Карлы Р. Браун, доктора медицины, и Трейси Л. Вон, доктора медицины, в разработку и написание этой статьи.

Чрезмерное слюноотделение у собак

Птиализм у собак

Гиперсаливация — это состояние, характеризующееся чрезмерным выделением слюны. Псевдоптиализм (т., ложный слюнотечение), с другой стороны, представляет собой выделение избыточной слюны, скопившейся в полости рта. Слюна постоянно вырабатывается и выделяется в полость рта слюнными железами. Производство слюны увеличивается из-за возбуждения слюнных ядер в стволе головного мозга. К этому приводят вкусовые и осязательные ощущения рта и языка. Высшие центры в центральной нервной системе также могут возбуждать или тормозить ядра слюны. Поражения, затрагивающие либо центральную нервную систему, либо полость рта, также могут вызывать чрезмерное слюноотделение.Заболевания, поражающие глотку, пищевод и желудок, также могут стимулировать чрезмерное выделение слюны. И наоборот, нормальная выработка слюны может казаться чрезмерной у животных с анатомической аномалией, которая позволяет слюне капать изо рта, или у животных с состоянием, которое влияет на глотание. Проглатывание токсина, едкого агента или инородного тела также может привести к слюнотечению.

У молодых собак чаще развивается птиализм, вызванный врожденной проблемой, такой как портосистемный шунт.В нормальных условиях воротная вена входит в печень и позволяет печени обезвреживать токсичные компоненты крови. При наличии шунта воротная вена неправильно соединяется с другой веной, из-за чего кровь течет в обход печени. Йоркширские терьеры, мальтийские болонки, австралийские пастушьи собаки, цвергшнауцеры и ирландские волкодавы имеют относительно более высокую частоту врожденных портосистемных шунтов. Расширение пищевода является наследственным у жесткошерстных фокстерьеров и цвергшнауцеров, а семейная предрасположенность была зарегистрирована у немецких овчарок, ньюфаундлендов, немецких догов, ирландских сеттеров, китайских шарпеев, борзых и ретриверов.Врожденная грыжа пищеводного отверстия диафрагмы была обнаружена у китайского шарпея. Гигантские породы, такие как сенбернар и мастиф, известны чрезмерным слюнотечением.

Симптомы и типы

  • Потеря аппетита – чаще всего наблюдается у собак с поражениями полости рта, желудочно-кишечными заболеваниями и системными заболеваниями
  • Изменения пищевого поведения – собаки с заболеваниями полости рта или дисфункцией черепных нервов могут отказываться от твердой пищи, не жевать на пораженной стороне (пациенты с односторонним поражением), держать голову в необычном положении во время еды или ронять пищу
  • Другие поведенческие изменения – раздражительность, агрессивность и замкнутость распространены, особенно у собак с болезненным состоянием
  • Затрудненное глотание
  • Регургитация у собак с заболеванием пищевода
  • Рвота – вторичная по отношению к желудочно-кишечному или системному заболеванию
  • Царапание морды или морды – собаки с дискомфортом или болью во рту
  • Неврологические признаки — собаки, подвергшиеся воздействию возбудителей или токсинов, а также собаки с печеночной энцефалопатией после употребления пищи с высоким содержанием белка

 

Причины

  • Нарушение формы губ , особенно у собак гигантских пород
  • Болезни полости рта и глотки
    • Наличие инородного тела (например,г., линейное инородное тело, такое как швейная игла).
    • Опухоль
    • Абсцесс
    • Гингивит или стоматит: воспаление слизистой оболочки рта, вторичное по отношению к периодонтальному заболеванию
    • Вирусная инфекция верхних дыхательных путей
    • Иммуноопосредованное заболевание
    • Болезнь почек
    • Проглатывание едких веществ или ядовитых растений
    • Влияние лучевой терапии на полость рта
    • Ожоги (например, от укуса электрического шнура)
    • Неврологическое или функциональное расстройство глотки
  • Заболевания слюнных желез
    • Инородное тело
    • Опухоль
    • Сиалоаденит: воспаление слюнных желез
    • Гиперплазия: чрезмерная пролиферация клеток
    • Инфаркт: участок некротической ткани, вызванный потерей адекватного кровоснабжения
    • Сиалоцеле: слюнно-ретенционная киста
    • Заболевания пищевода или желудочно-кишечного тракта
    • Инородное тело пищевода
    • Опухоль пищевода
    • Эзофагит: воспаление пищевода, вторичное по отношению к проглатыванию едких веществ или ядовитых растений
    • Гастроэзофагеальный рефлюкс
    • Грыжа пищеводного отверстия диафрагмы: выпячивание желудка в грудную клетку
    • Мегаэзофагус: увеличенный пищевод
    • Вздутие желудка: вздутие живота
    • Язва желудка
  • Нарушения обмена веществ
    • Гепатоэнцефалопатия – вызванная врожденным или приобретенным портосистемным шунтированием, при котором печень не способна удалять вредные вещества из крови, а токсины направляются в головной мозг
    • Гипертермия: высокая температура
    • Уремия: почечная недостаточность
  • Неврологические расстройства
    • Бешенство
    • Псевдобешенство
    • Ботулизм
    • Столбняк
    • Дизавтономия: заболевание нервной системы
    • Заболевания, вызывающие дисфагию или затрудненное глотание
    • Заболевания, вызывающие паралич лицевого нерва или отвисшую челюсть
    • Заболевания, вызывающие судороги
    • Тошнота, связанная с вестибулярным заболеванием
  • Лекарства и токсины
    • Едкие/разъедающие токсины (например,г., бытовые чистящие средства и некоторые обычные комнатные растения).
    • Вещества с неприятным вкусом
    • Вещества, вызывающие гиперсаливацию.
    • Яд животных (например, пауков черной вдовы, чудовищ Gila и североамериканских скорпионов)
    • Выделения жаб и тритонов
    • Потребление растений может вызвать повышенное слюноотделение (например, пуансеттия, диффенбахия)

Диагностика

Существует множество различных причин чрезмерного слюноотделения.Вам нужно будет предоставить подробную историю здоровья вашей собаки, включая статус вакцинации, текущие лекарства, возможное воздействие токсинов, предысторию симптомов и любые другие возможные инциденты, которые могли ускорить это состояние. Ваш врач должен будет различать гиперсаливацию, связанную с состоянием, вызывающим трудности с глотанием, от гиперсаливации, связанной с тошнотой. Депрессия, причмокивание губ и позывы на рвоту — вот некоторые из признаков, на которые обращает внимание ветеринар.Ваш врач также захочет провести полное медицинское обследование вашей собаки, уделив особое внимание ротовой полости и шее, а также неврологическое обследование. Диагностические инструменты могут включать рентгенографию и ультразвуковое исследование, чтобы определить, есть ли проблема в структуре печени или каких-либо других внутренних органов. Если есть подозрение на иммунное заболевание, ветеринар может также провести биопсию тканей и клеток.

Лечение

Лечение основной причины птиализма после того, как она будет эффективно диагностирована, станет первой задачей.Хотя в этом обычно нет необходимости, ваш врач может также лечить внешние симптомы, чтобы уменьшить выделение слюны. Пищевые добавки могут быть рекомендованы, если ваша собака страдает от паралича в течение длительного времени и не может нормально питаться.

Жизнь и управление

В зависимости от первопричины ваш ветеринар может наблюдать за вашей собакой так часто, как это необходимо, чтобы убедиться, что план лечения работает.

Чрезмерное слюнотечение у собак | Больница для животных-компаньонов River North

Для собак совершенно нормально иногда немного «пускать слюни»; это часть собаки в семье.Тем не менее, собака, пускающая слюни больше, чем обычно, может вызывать некоторое беспокойство. Хотя вам, вероятно, не нужно срочно везти собаку к ветеринару при первых признаках обильных слюней, вам следует обратиться к ветеринару, чтобы выяснить причину. Мы стремимся информировать родителей домашних животных River North об их собаках и помогать им быть более активными в сохранении их здоровья. То, что может показаться нормальным, может указывать на основную проблему, и мы хотим предотвратить ухудшение этой проблемы. Вот почему у вашей собаки может быть чрезмерное слюнотечение в Ривер-Норт.

Итак, почему у моей собаки много слюней?

Существует длинный список причин, которые могут объяснить чрезмерную слюнотечение вашей собаки. Перечисленные ниже причины могут помочь вам оценить ситуацию и узнать, необходим ли звонок ветеринару. Мы бы предпочли, чтобы вы обратились к нам в любом случае, чтобы мы могли дать вам душевное спокойствие.

«Типичное» слюнотечение

Некоторые породы собак печально известны своей слюнявостью. Сюда входят сенбернары, ищейки, мастифы и другие собаки с челюстями.Это считается «типичным» слюнотечением, потому что оно не вызвано какими-либо проблемами со здоровьем. Скорее, это происходит из-за того, что форма головы и губ породы не может удерживать всю слюну, которая попадает в складки дополнительной кожи вокруг губ и морды. Когда они пьют, в этих складках также может застревать вода.

Если ваша собака принадлежит к одной из этих пород, всегда держите под рукой тряпку для слюнотечения!

Другие примеры типичного слюнотечения собаки

Собаки также могут обильно пускать слюни, когда они предвкушают еду (похоже на нас, но немного грязнее) или когда они принимают лекарство, имеющее неприятный вкус.Обильное слюнотечение в этом случае является нормальной реакцией, и беспокоиться не о чем.

Проблемы со здоровьем, которые могут вызвать чрезмерное слюнотечение у собак

Различные состояния могут вызывать аномально обильное слюноотделение у собак в дополнение к другим симптомам.

Заболевания полости рта

Разрушение зубов, воспаление десен, образование зубного камня и опухоли полости рта и/или горла вызывают у собак более сильное слюнотечение, чем обычно. Заболевания полости рта и зубов, если они прогрессируют, могут вызвать серьезные заболевания во всем организме и даже в некоторых случаях быть опасными для жизни.

Обязательно серьезно относитесь к здоровью полости рта вашего питомца и не реже одного раза в год водите его на профессиональную чистку зубов, чтобы мы могли помочь вам справиться с его потребностями в полости рта и зубах.

Инородное тело во рту или горле

Собаки любят что-то брать в рот и жевать. К сожалению, нередко инородное тело застревает в зубах или горле. Древесная стружка, кусочки пластика, фрагменты костей (от пережевывания костей) и даже веревки являются известными опасностями.

Если какой-либо предмет застрянет у них во рту, у них начнется обильное слюноотделение. Не стесняйтесь обращаться к нам, если вы подозреваете, что у вашего питомца есть инородное тело.

Расстройство желудка

Расстройство желудка, будь то тошнота или боль в животе, также может вызывать обильное слюнотечение у собак. Слюнотечение, вызванное тошнотой, конечно, носит временный характер, и его можно даже устранить с помощью лекарств от тошноты, назначенных вашим ветеринаром.

Беспокойство — еще один фактор, который может вызвать у вашей собаки слюнотечение больше, чем обычно.Поговорите с нами, чтобы мы могли помочь вашему питомцу преодолеть тревогу и жить более счастливой (и менее слюнявой) жизнью.

Употребление в пищу того, что им не следует, также может вызвать серьезные проблемы с желудочно-кишечным трактом. Сюда входят игрушки, носки, ядовитые растения и химические вещества и даже лекарства для людей. В дополнение к слюнотечению у вашей собаки также может быть рвота и вялость. Не ждите, пока все пройдет; немедленно позвоните нам, если вы чувствуете, что что-то не так.

Тепловой удар

Тепловой удар — это серьезное заболевание, возникающее в результате чрезмерного воздействия солнца и тепла на вашу собаку (как и у людей).Собака с тепловым ударом будет тяжело дышать, пытаясь остыть, и это сопровождается обильным слюнотечением. Поскольку тепловой удар может быть смертельным, вам следует немедленно обратиться к ветеринару в Ривер-Норт, прежде чем пытаться самостоятельно лечить.

Инфекции верхних дыхательных путей

Если у вашей собаки инфекция носа, носовых пазух или горла, это также может вызвать слюнотечение. Другие признаки инфекции верхних дыхательных путей включают выделения из глаз и носа, кашель и снижение аппетита.

Болезнь органов

Как и люди, собаки с возрастом становятся более склонными к болезням. Это включает заболевания почек и печени, из-за которых у вашей собаки может быть больше слюны, чем обычно. Ежегодные или полугодовые визиты вашего питомца к врачу — лучший способ выявить болезни на ранней стадии, прежде чем их станет труднее лечить.

Вздутие

Вздутие живота — это опасное для жизни состояние, при котором желудок наполняется газом или жидкостью, оказывая давление на окружающие органы.Слюнотечение является одним из предупредительных признаков этого состояния, наряду с беспокойством и вздутием живота. Немедленно обратитесь за медицинской помощью для вашей собаки, если вы подозреваете, что у нее может быть вздутие живота.

Если вы сомневаетесь, поговорите со своим ветеринаром о чрезмерном слюнотечении вашей собаки

Даже если слюнотечение вашего питомца не связано с какой-либо медицинской проблемой, мы все равно хотим вас заверить. Если когда-нибудь вы не уверены, означает ли их состояние что-то серьезное, позвоните нам по телефону (312) 643-2901!

Высокое сходство профилей антител IgG в крови и слюне открывает возможности для серологии на основе слюны

Abstract

Диагностика по слюне является быстро развивающейся областью благодаря большому диагностическому потенциалу и простоте сбора образцов.В настоящее время только несколько отдельных молекул были исследованы на предмет их диагностических возможностей в слюне. В научной литературе до сих пор отсутствует систематическое сравнение профилей антител IgG в слюне и плазме. Наша гипотеза состоит в том, что профили IgG в плазме и слюне очень похожи у каждого человека. Как следствие, можно реализовать практически любой анализ IgG на основе плазмы (классическая серология) в качестве анализа на основе слюны. Другими словами, антитела IgG, обнаруженные в крови, также доступны из слюны.Мы подтверждаем нашу гипотезу, сравнивая реактивность IgG по отношению к белковым и пептидным антигенам. Мы выделили IgG из слюны с высокой степенью чистоты и продемонстрировали, что реактивность IgG в плазме (классическая серология) может быть получена из слюны. В качестве примера мы проводим определение титра (плазмы) антител к вирусу гепатита В в слюне. Кроме того, мы показываем, что профили IgG в плазме и слюне 20 человек очень похожи по 256 пептидным антигенам и совпадают (без наблюдения) с высокой вероятностью. Наконец, мы выступаем за обобщение полного профиля антител IgG.Представленные результаты могут внести значительный вклад в разработку диагностических методов многочисленных тестов на основе антител, основанных на слюне.

Образец цитирования: Hettegger P, Huber J, Paßecker K, Soldo R, Kegler U, Nöhammer C, et al. (2019) Высокое сходство профилей антител IgG в крови и слюне открывает возможности для серологии на основе слюны. ПЛОС ОДИН 14(6): e0218456. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0218456

Редактор: Томмазо Ломонако, Пизанский университет, ИТАЛИЯ

Поступила в редакцию: 28 декабря 2018 г.; Принято: 3 июня 2019 г.; Опубликовано: 20 июня 2019 г.

Авторское право: © 2019 Hettegger et al.Это статья с открытым доступом, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Доступность данных: Данные доступны в омнибусном хранилище экспрессии генов (GEO) с инвентарным номером GSE117142 (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/query/acc.cgi?acc=GSE117142) .

Финансирование: Это исследование было поддержано Jubiläumsfond (Юбилейный фонд) Австрийского национального банка (Österreichische Nationalbank) номер проекта 15952 (получатель гранта – Андреас Вайнхойзель) и исследовательской программы Research Studios Austria от FFG (Österreichische Forschungsförderungsgesellschaft). mbH) по соглашению о гранте № 859182, проект PepPipe (грантополучатель – Андреас Вайнхойзель).Спонсоры не участвовали в разработке исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

Введение

Растущие расходы систем здравоохранения и увеличивающееся число пациентов требуют повышения эффективности всех процессов, связанных со здравоохранением. Перспективной возможностью повышения эффективности диагностики, скрининга или мониторинга является использование слюны в качестве диагностической жидкости благодаря хорошей доступности образцов и большому разнообразию потенциальных возможностей диагностики и мониторинга [1–10].Диагностика заболеваний и скрининг, т.е. при эпидемиях часто проводится стационарно путем физического осмотра и проведения анализов крови. Использование слюны вместо крови имеет потенциальные преимущества, особенно для скрининга большого числа людей или для использования в децентрализованных регионах, например, в пунктах оказания медицинской помощи (POC) или домашнем тестировании: (i) взятие проб слюны является простым, не обязательно требует наличия обученного персонала и обычно легко доступен; (ii) для сбора слюны не требуются медицинские работники для взятия крови и, в принципе, даже стерильные материалы, как в случае забора крови — для многих применений слюна может быть микробиологически стабилизирована после сбора; (iii) сбор можно производить где угодно, а обработку можно выполнять централизованно, если исследуемый аналит можно стабилизировать; (iv) можно легко собрать большое количество проб.Однако несколько факторов приводят к тому, что слюна является относительно гетерогенной жидкостью организма среди людей по сравнению, например, с слюной. кровь или плазма. Эти факторы включают: (i) возрастные и генетически обусловленные эффекты, которые вызывают различия в вязкости или относительной воде, белке (например, муцинах, ферментах и ​​антителах), а также в содержании ионов; (ii) курение, так как это может привести к высокому содержанию частиц и обесцвечиванию слюны; (iii) различия в слюноотделении; (iv) микробиом полости рта; (v) изменения, связанные с заболеванием, такие как повышенное содержание крови из-за кровотечений в ротовой полости или связанных с ней структурах и многое другое.Эти различия могут создавать трудности при сборе и подготовке образцов и потенциально мешать последующим анализам [11]. Состав слюны можно дополнительно изменить с помощью процедуры сбора или любой формы стимуляции, например, с помощью жевательных резинок, психологической стимуляции или использования экстракционных растворов [12,13]. Таким образом, точно определенные процедуры отбора проб и условия необходимы для воспроизводимого анализа. Кроме того, многие интересующие аналиты обнаруживаются в гораздо более низких концентрациях по сравнению с кровью, что дополнительно усложняет процедуры и методы анализа [5].

Антитела, выделенные из крови или слюны, потенциально могут быть использованы для диагностики и мониторинга заболеваний и медицинских состояний, связанных или связанных с (IgG) антителами у людей. Описаны многочисленные потенциальные применения для различных заболеваний, таких как: аутоиммунные заболевания (рассеянный склероз [14], воспалительное заболевание кишечника [15], системная красная волчанка (СКВ) [16]), вирусы (ВИЧ [17–19], лихорадка денге [20 ], корь, эпидемический паротит и краснуха [21]), антитела против опухолеассоциированных антигенов [22–25] и паразитов [26], и это лишь некоторые из них.Уже было показано, что некоторые из них можно обнаружить и (в принципе) диагностически использовать в слюне [3,18–21], и на сегодняшний день на рынке уже имеется один тест на ВИЧ на основе слюны [18]. Однако во всех упомянутых исследованиях изучались только специфические идиотипы антител, связанные с заболеванием, или наборы идиотипов. В научной литературе до сих пор отсутствует более общий подход, не связанный с конкретным применением или медицинским состоянием.

Наша гипотеза состоит в том, что профили IgG в плазме и слюне очень похожи у каждого человека.Иммунологический профиль индивидуума на данный момент формально определяется как реактивность IgG этого индивидуума против определенного набора антигенов. Следовательно, его можно рассматривать как иммунологический отпечаток определенного набора антигенов. Для удобства чтения более подробное рассмотрение иммунологического профиля как понятия приведено в разделе «Обсуждение». Показывая высокое сходство иммунологических профилей в плазме и слюне, мы показываем, что диагностический потенциал слюны не ограничивается заболеваниями, локализованными в полости рта или анатомо-физиологически связанными структурами, а распространяется на весь организм в целом или, конкретнее, на по крайней мере, к любому антителу IgG, которое можно найти в крови.Таким образом, антитела IgG, обнаруженные в крови, также доступны из слюны, это наш главный результат. В настоящей работе мы не сосредотачиваемся на разработке конкретного диагностического приложения для слюны, а стремимся показать, что в принципе возможно разработать/принять диагностический тест, основанный на IgG плазмы человека, также и для слюны. Документ структурирован следующим образом: мы показываем, что (i) мы можем выделить IgG слюны с высокой чистотой; (ii) мы можем сделать вывод о титре (плазмы) анти-HBV-антител по слюне; (iii) относительная реактивность антител IgG очень похожа в слюне и плазме, и, таким образом, мы можем сделать вывод о реактивности IgG в плазме по слюне; (iv) иммунологические профили очень похожи в слюне и плазме.Обратите внимание, что (ii)–(iv) являются последовательными шагами обобщения. Из-за природы иммунной системы по своей природе возможно наблюдать только (iii) и (iv) на подмножестве иммунологического профиля. Правомерность обобщения от подмножества до всего иммунологического профиля человека аргументируется в разделе «Обсуждение». Таким образом, мы предоставляем общую основу и представляем данные для демонстрации высокого сходства (или фактического равенства) иммунологического репертуара антител IgG в плазме и слюне.

Результаты

Выделение высокочистых IgG из слюны

Мы разработали метод выделения IgG из слюны человека с высокой чистотой, что является наиболее важным предварительным условием для последующих анализов. Короче говоря, слюну центрифугировали для удаления тяжелых компонентов, подвергали микрофильтрации для удаления частиц и крупных молекул, а затем буфер заменяли буфером для связывания для очистки с помощью аффинной хроматографии с белком G (рис. 1А). Для сравнения чистоты и выхода мы подготовили плазму из венозной крови и выделили IgG из плазмы, используя коммерческий набор для выделения Melon Gel.Кроме того, использовали коммерческий стандарт IgG. Средний выход IgG составил 5,3 мкг (диапазон 1,7–12,5 мкг) из 2 мл слюны и 54,8 мкг (диапазон 40–76,45 мкг) из 15 мкл плазмы (таблица S1). IgG плазмы и слюны дополнительно обрабатывали с помощью различных анализов для последующего анализа. Страница SDS для изолятов слюны и плазмы показана на рис. 1B. Средняя чистота IgG слюны составляла 79% ± 13% стандартного отклонения (SD) (рис. S1), а конечная концентрация IgA была ниже предела обнаружения (LOD) 1 мкг/мл на основе анализов Luminex IgA (с общей концентрацией белка в образце более 50 мкг). /мл).Все дорожки, включая коммерческий стандарт IgG, показывают сравнительно заметные полосы IgG между положениями маркера 100 и 250 кДа. Образцы IgG, очищенные слюной, показали, следовательно, достаточно высокую чистоту для дальнейшей обработки. Сравнение концентрированной и микрофильтрованной слюны с очищенным IgG показано на рис. S2

.

Рис. 1. Схематический протокол выделения и чистота выделения IgG из образцов слюны и плазмы человека.

(A) Слюну собирали с использованием коммерческого набора для сбора слюны, содержащего цитратный буфер.Затем смесь слюны/буфера центрифугировали и подвергали микрофильтрации для удаления тяжелых компонентов, частиц и крупных молекул. Стадия замены буфера буфером для связывания выполнялась для последующей аффинной хроматографии с использованием смолы Protein G. Плазму готовили из венозной крови и очищали IgG с использованием коммерческого набора для очистки. IgG слюны и плазмы обрабатывали в различных тестах для последующего анализа. (B) Невосстанавливающая страница SDS очищенных образцов слюны и плазмы. Показаны изоляты слюны и плазмы от 10 и 5 человек соответственно.Кроме того, для целей сравнения показан коммерческий стандарт IgG (дорожка 12). Наиболее заметные полосы очень похожи для всех дорожек. Полосы IgG хорошо видны между позициями маркеров 100 и 250 кДа. Средняя чистота изолятов IgG слюны составила 79% (±13% стандартное отклонение), как определено по относительной площади под кривой (AUC) на хроматограммах (S1 Fig). Количество IgA было ниже LOD 1 мкг/мл (общее содержание белка в выделенных образцах > 100 мкг/мл), как определено калиброванным анализом IgA Luminex.

https://дои.org/10.1371/journal.pone.0218456.g001

Определение титра антител к ВГВ в слюне

В качестве первого доказательства равенства реактивности IgG плазмы и слюны мы показываем сходство для хорошо охарактеризованного антитела против вируса гепатита В (анти-HBV), которое реактивно против поверхностного антигена HBV. Это служит иллюстрацией практической осуществимости диагностической процедуры на основе IgG слюны, поскольку разработанная система подходит для определения титра антител против HBV (титр плазмы) из слюны.Несмотря на то, что существуют потенциально более важные области применения в промышленности и научных кругах, мы все же выбрали определение титра антител к ВГВ в качестве пилотного примера, поскольку в Австрии, как правило, наблюдается высокий уровень охвата вакцинацией против ВГВ, и поэтому мы можем ожидать положительных сигналов с разумной дисперсией в наших исследованиях. исследуемая когорта (n = 38). Мы хотим подчеркнуть, что это должно служить иллюстративным примером одного возможного клинического применения. Тем не менее, основной целью статьи является не разработка специфического теста, который можно использовать в рутинной диагностике, а демонстрация того, что IgG, обнаруженные в крови, доступны из слюны, независимо от определенных особенностей (идиотипов).Для следующих анализов мы использовали индивидуальные белковые микрочипы с рекомбинантным поверхностным антигеном гепатита В подтипа ad (HBsAg ad) для количественного определения реактивности антител против HBV. Интенсивность сигналов, измеренная в плазме и слюне, демонстрирует высокую согласованность для всех 21 человека (R 2 = 0,91), для которых были доступны парные образцы слюны и плазмы (рис. 2А). Анализ был откалиброван с использованием стандарта антител против поверхностного антигена гепатита В (анти-HBs) Национального института биологических стандартов и контроля (NIBSC).Коэффициент детерминации (COD) для калибровки составляет R 2 = 0,93 (рис. 2B). Для сравнения с титром антител, предсказанным в нашем анализе, титр антител был определен для всех людей из их соответствующих образцов плазмы внешней обычной медицинской диагностической лабораторией. Этот титр плазмы использовали в качестве эталона для образцов слюны и плазмы. Напротив, мы использовали наш анализ на основе белкового микрочипа для прогнозирования значений титра антител из очищенного IgG плазмы и очищенного IgG слюны.COD между эталонным и прогнозируемым значениями титра составляет R 2 = 0,73 (рис. 2C). Обратите внимание, что для 7 из 59 образцов (12%), которые находятся далеко от диагональной линии, наблюдается относительно большое расхождение между значениями, полученными в нашем анализе и в эталонной лаборатории. Это не противоречит предыдущему утверждению, что мы можем сделать вывод о реактивности IgG в плазме по IgG слюны. Несоответствие наблюдается в прогнозируемых значениях титра (рис. 2С), но не в измеренных интенсивностях сигналов плазмы и слюны (рис. 2А), и поэтому считается систематической ошибкой в ​​определении титра.Различия в определении титра предположительно возникают из-за того, что (i) эталонная лаборатория использует смесь подтипов HBsAg ad и HBsAg ay ; (ii) мы используем очищенный IgG, в отличие от цельной плазмы, используемой в референс-лаборатории (обычные медицинские диагностические лаборатории обычно используют цельную плазму для определения титра). Это может привести к различным матричным эффектам; (iii) структура нашего анализа (прямой иммуноанализ с флуоресцентным обнаружением) отличается от анализа, используемого в эталонной лаборатории (сэндвич-электрохемилюминесцентный иммуноанализ), см. часть «Материалы и методы».

Рис. 2. Определение титра антител к ВГВ в плазме и слюне.

Поверхностный антиген гепатита В подтипа ad (HBsAg ad) использовали в качестве антигена на самопечатающихся микроматрицах для определения титра в формате непрямого иммуноанализа. (A) Интенсивность сигналов плазмы и слюны для 21 парных образцов человека. Линия идентификации показана серым цветом. (B) Калибровка анализа с использованием стандарта антител против HBs. Линия линейной регрессии показана сплошным черным цветом. Границы предсказания обозначены красной и зеленой пунктирными линиями.(C) Значения титра плазмы и слюны, определенные в эталонной рутинной диагностической лаборатории (абсцисса), и прогнозы титра из очищенного IgG плазмы и очищенного IgG слюны, определенные с помощью нашего анализа (ордината). R 2 линейной регрессии равно 0,73 (n = 59). Сплошная линия показывает линию тождества, пунктирная линия показывает соответствие регрессии. Небольшой джиттер был добавлен (на графике, а не в данных) к (1000,1000) точкам на C для лучшей иллюстрации (чтобы точки не лежали друг над другом).Парные образцы плазмы и слюны были доступны для 21 человека. Дополнительные образцы плазмы были доступны для 17 человек. Данные для всех трех графиков можно найти в таблицах S2 и S3. R 2 — Коэффициент детерминации (квадрат r Пирсона).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0218456.g002

Антитела IgG проявляют количественно равную реактивность в слюне и плазме

Далее мы показываем, что в дополнение к относительной реактивности против белкового антигена HBsAg (показанной выше) относительная реактивность против пептидных антигенов (15 аминокислот) демонстрирует высокое сходство для образцов слюны и плазмы всех испытуемых.Это служит первым шагом обобщения от одного антигена HBV до нескольких антигенов иммунологического профиля. У 20 человек были взяты парные образцы слюны и плазмы, и был выделен IgG (рис. 1). Выделенный IgG анализировали на пептидных микрочипах со 158 линейными эпитопами вируса Эпштейна-Барр (EBV) и 98 из антигенов вируса гепатита В (HBV). Мы использовали микроматрицы пептидов EBV и HBV из-за ожидаемой высокой реактивности в результате высокой распространенности (EBV) и высокого уровня охвата вакцинацией (HBV), а также хорошей воспроизводимости из-за химического синтеза пептидов и коммерческой доступности.

Реактивные пептиды демонстрируют линейную зависимость и высокое соответствие интенсивности сигналов между образцами слюны и плазмы (рис. 3А и 3В). Почти половина пептидов (47%) имеют r Пирсона больше 0,8 или R 2 > 0,64 для интенсивности сигнала в слюне и плазме. Все остальные пептиды, за исключением 2 из 256, демонстрируют относительно высокий r > 0 по сравнению с нулевым распределением (рис. 3C). Пептиды с низкими значениями корреляции обычно демонстрируют низкие средние значения и/или низкую дисперсию интенсивностей флуоресценции, что указывает на низкую или неспецифическую реактивность соответствующих пептидов (S3 Fig).Более того, средние значения интенсивности сигнала и диапазоны интенсивности (максимум минус минимум) очень похожи в образцах плазмы и слюны для всех пептидов (рис. S4). Это указывает, помимо относительных интенсивностей, на высокое сходство абсолютных интенсивностей и, следовательно, относительных количеств (доля антител по отношению ко всем антителам в соответствующей жидкости организма). Анализы были нормализованы с использованием одинакового количества IgG для массивов слюны и плазмы и путем нормализации медианы между массивами.

Рис. 3.Высокое соответствие реактивности IgG в парных образцах плазмы и слюны по отношению к отдельным пептидам.

(A, B) Реактивность репрезентативных пептидов, полученных из EBV и HBV, в плазме и слюне. Линия идентификации показана серым цветом. (C) Распределения коэффициентов корреляции Пирсона (r xy ) между интенсивностью плазмы и слюны (зеленые столбцы) для всех 256 пептидов (158 EBV и 98 пептидов HBV) и нулевые распределения (красные столбцы и черная линия соответственно) для сравнения . r Пирсона показан вместо R 2 в C для ясности.47% всех пептидов имеют r xy > 0,8, 83% имеют BH FDR < 0,01 (аналитический ноль). Для сравнения результирующих коэффициентов корреляции нулевое распределение (ожидаемое распределение r в случае нулевой корреляции или случайных данных) вычисляется двумя способами. Эмпирическое нулевое распределение генерируется путем случайной повторной выборки данных массива. Аналитическое нулевое распределение показано для случая независимых нормальных переменных. Примечание: небольшая положительная асимметрия эмпирического нулевого распределения возникает из-за положительной асимметрии данных (log2 MFI образцов), что типично для данных микрочипов.R 2 — Коэффициент детерминации (квадрат r Пирсона).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0218456.g003

В совокупности эти данные показывают, что антитела IgG проявляют количественно одинаковую реактивность в наборах слюны и плазмы. Эквивалентно, это указывает на возможность вывода об абсолютной реактивности видов IgG плазмы с использованием образцов IgG слюны.

Высокое сходство профилей IgG слюны и плазмы

Мы продолжили сравнение профилей IgG в плазме и слюне 20 человек по 256 пептидным антигенам (см. матрицы пептидов EBV и HBV выше).Иерархическая кластеризация приводит к попарной кластеризации образцов IgG слюны и плазмы для всех 20 человек (рис. 4А). Это указывает на то, что профили IgG в слюне и плазме каждого человека больше похожи друг на друга, чем на любой другой образец плазмы или слюны (рис. S5 и S6). Другими словами, можно сказать, что отпечатки пальцев IgG идентичны в слюне и плазме. Кроме того, высокое индивидуальное сходство профилей IgG сохраняется даже для образцов (один и тот же человек, одна и та же жидкость тела), взятых повторно в разные дни с интервалом более 6 недель от исходного образца (рис. S7 и таблица S4).

Рис. 4. Высокое сходство профилей IgG в образцах слюны и плазмы каждого человека.

(A) Иерархическая группировка образцов IgG слюны и плазмы 20 человек. S и P отмечают соответствующие образцы IgG слюны и плазмы для каждого человека. Образцы сгруппированы попарно, что указывает на высокое сходство (расстояние соответствует <0,06) IgG слюны и плазмы каждого человека. Использовалась одинарная связь, а концевые края окрашены в красный цвет. (B) Гистограммы попарных расстояний между всеми выборками.Расстояния совпадения — это попарные расстояния внутрииндивидуальной слюны и плазмы (т. е. красные пары в A). Расстояниями несовпадения являются все остальные попарные расстояния (межиндивидуальные). Обратите внимание, что гистограммы соответствия и несоответствия не перекрываются (расстояние несоответствие > 0,08). Среднее расстояние совпадения составляет 0,037, среднее расстояние несовпадения — 0,205. Оценки плотности ядер показаны сплошными линиями. Кроме того, для всех 20 выборок показаны оценочные апостериорные вероятности совпадения P(match|dist xy ) с априорной вероятностью P(match) = 1/1000 (см. интерпретацию априорной вероятности 1/1000 в тексте).Для каждого индивидуума dist xy значения этого индивидуума были исключены из оценки условных распределений, чтобы избежать переоценки апостериорных вероятностей. Функция расстояния: dist xy = 1 –r xy , r xy — r Пирсона.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0218456.g004

Профили IgG слюны и плазмы совпадают с высокой вероятностью

Просмотр всех попарных расстояний между выборками показывает, что совпадение (внутрииндивидуальное) и несовпадение (межиндивидуальное) расстояния не перекрываются на гистограммах (рис. 4B).Основываясь на данных микрочипов по каждому образцу, можно определить вероятность того, что конкретная пара образцов плазмы и слюны получена от одного и того же человека. Мы получили эти вероятности, чтобы подчеркнуть высокое соответствие профилей IgG плазмы и слюны с помощью гипотетического примера из судебной медицины.

Далее проводится оценка (апостериорной) вероятности совпадения между образцами плазмы и слюны каждого человека. Распределения условной вероятности совпадения и несовпадения расстояний, P ( dist xy | match ) и P ( dist xy | ), оцениваются с использованием профиля несовпадения Ig7G | оценка плотности по попарным расстояниям 20 особей.Таким образом, совпадение указывает на вероятность того, что образцы получены от одного человека, а несоответствие указывает на то, что образцы получены от разных лиц. Используя теорему Байеса, апостериорная вероятность совпадения (вероятность совпадения при определенном значении расстояния) для профилей IgG в слюне и плазме каждого человека равна С условной вероятностью P ( DIST XY | Match ), предыдущая вероятность P ( Match ) и предельная вероятность P ( DIST XY P ) = P ) = P ( DIST XY | Match ) P ( P ( P ) + P ( DIST | Mismatch | Mismatch ) (1- P ( несоответствие )).Таким образом, для расчета апостериорной вероятности каждого индивидуума значения расстояния этого индивидуума не учитывались при оценке распределений условного совпадения и несовпадения, чтобы избежать переоценки апостериорной вероятности (это по своей сути может привести к немонотонным апостериорным результатам (зависящим от dist xy ), но здесь он незначителен). Вероятность априорного совпадения P(match) выбрана равной 0,001 при условии, что априорная вероятность совпадения составляет 1/1000. Практический пример: представьте себе уголовное дело с 1000 потенциальных подозреваемых и только с одним следом слюны.Апостериорная вероятность для каждого человека — это вероятность того, что след слюны принадлежит этому человеку. Поскольку апостериорная вероятность рассчитывается здесь для иллюстрации, а фактический выбор априорной вероятности качественно не меняет результирующие апостериорные вероятности, разумным выбором считается 1/1000. Минимальное апостериорное совпадение составляет примерно 0,08 (рис. 4B), что означает увеличение вероятности совпадения с 1/1000 до примерно 1/12,5. Все остальные совпадающие выборки имеют более высокие апостериоры, причем 10 из 20 сэмплов имеют вероятность совпадения практически 100%.Все предполагаемые апостериорные значения выборок несоответствия уменьшаются ниже априорных. Для нашего практического примера это означает, что только для человека, от которого исходит след слюны, вероятность возрастает до значений выше 1/1000, для всех остальных подозреваемых она снижается до значений ниже 1/1000. Высокое изменение вероятности от априорного к апостериорному в основном является следствием малого перекрытия оцененных условных распределений вероятностей и приводит к высокой чувствительности и специфичности решений о совпадении и несоответствии.Различия в распределении совпадений и несоответствий могут быть дополнительно уменьшены за счет автоматизации и стандартизации всего анализа, особенно подготовки образцов слюны, а также за счет использования большего количества антигенов (пептидов или белков), которые по-разному реагируют между людьми. Однако уже с 256 антигенами достигается высокая вероятность индивидуального совпадения из-за низкого перекрытия оцениваемых распределений. Это указывает на высокое соответствие профилей IgG слюны и плазмы.

Обсуждение

Из-за относительно высокой гетерогенности слюны у разных людей по сравнению с плазмой или кровью (см. Введение) выделение аналитов из слюны является сложной задачей. Тем не менее, нам удалось разработать надежный метод выделения IgG из слюны (рис. 1) с высокой средней чистотой (79% ± 13% SD). Процедура демонстрирует высокую устойчивость к различным составам слюны, так как у нас были образцы от курильщиков и некурящих, молодых и пожилых людей (24,4–56.5 лет), а также женщин и мужчин. Средний выход IgG в очищенных образцах слюны составил 5,3 мкг (конечная концентрация 0,15 мг/мл в 35 мкл) из 2 мл слюны (таблица S1), что примерно в 2 раза ниже ранее опубликованных значений [5]. Таким образом, среднее количество слюны, необходимое для наших экспериментов с микроматрицами (2 мкг очищенного IgG), составляло 0,75 мл, минимально необходимое количество составляло 1,8 мл для образца с самой низкой концентрацией. Абсолютный выход IgG для каждого образца потенциально может быть увеличен за счет оптимизации протокола. Однако наше внимание было сосредоточено на высокой чистоте и высокой концентрации выделенных антител IgG.Содержание IgA в образцах очищенной слюны было ниже LOD 1 мкг/мл. Хотя стратегии очистки слюны и плазмы в значительной степени различаются (истощение и аффинная очистка соответственно), полосы при гель-электрофорезе и последующем анализе микрочипов показывают очень похожие профили. Это еще раз подчеркивает пригодность разработанной методики очистки.

Мы смогли продемонстрировать диагностический потенциал слюны, внедрив процедуру определения титра антител против HBV (антиген HBsAg ad) в слюне.Процедура была откалибрована для определения уровней титра IgG в плазме на основе измерений IgG в слюне. Значения титра, определенные из слюны и плазмы с помощью нашего анализа, сравнивали со значениями, определенными эталонной лабораторией из плазмы (рис. 2). Согласованность между эталонными значениями и нашим анализом достаточно высока (R 2 = 0,73). Сравнение реактивности слюны и плазмы (против HBsAg) нашего анализа показывает еще более высокую согласованность для парных образцов (R 2 = 0,91). Это согласуется с нашей первоначальной гипотезой о том, что профили IgG в плазме и слюне очень похожи для каждого человека.

После демонстрации высокого сходства интенсивности сигналов между плазмой и слюной для одного белкового антигена HBV мы обобщили результат на первом этапе, выполнив корреляционный анализ парных образцов слюны и плазмы 20 человек, проанализированных на пептидных микрочипах (256 пептидных антигенов). Общее совпадение относительных интенсивностей в слюне и плазме высокое (47% пептидов показывают коэффициент корреляции r xy > 0,8), см. рис. 3. Это указывает на общую возможность вывода относительной и абсолютной реактивности IgG плазмы из IgG слюны.Таким образом, стандартные анализы на основе IgG плазмы можно, в принципе, легко адаптировать к анализам на основе слюны путем калибровки, как показано в этой работе на примере антител против HBV.

Мы показали, что профили IgG в плазме и слюне очень похожи для 256 антигенов, использованных в нашем исследовании (рис. 4 и рис. S7). Хотя антитела IgG против 256 антигенов представляют собой лишь небольшую часть всего иммунологического репертуара антител IgG, мы предполагаем, что результаты все же можно обобщить.Прежде чем мы продолжим нашу аргументацию, нам необходимо рассмотреть некоторые общие соображения о демонстрации равенства и неравенства в научном/статистическом смысле в контексте иммунологических профилей.

Равенство, неравенство и статистическая проверка: На практике практически невозможно определить научную методологию проверки равенства на непрерывных шкалах, если не существует общепринятых определений равенства и неравенства. Именно по этой причине Нуль-гипотеза не может быть принята при классической проверке нулевой гипотезы (т.грамм. Т-тест), если его не удается отвергнуть. Для непрерывных шкал практически не бывает ситуаций, когда результирующие значения в точности совпадают и, таким образом, нулевая гипотеза строго верна, поэтому нам в принципе все равно нужны границы, определяющие равенство и неравенство [27]. Возможное решение этого может, например. заключается в том, что пытаются найти условные вероятностные распределения мер подобия для равенства (совпадения) и неравенства (несоответствия) для конкретной задачи. Полученные значения затем могут быть присвоены любому распределению с определенной вероятностью для разумного набора/размера выборки.Этот подход похож на классическую проблему классификации, и, таким образом, можно рассчитать такие показатели, как чувствительность, специфичность или ROC AUC. При желании эти значения могут быть дополнительно проверены на значимость различными методами [28–30].

В контексте представленного профилирования IgG на пептидных микрочипах это означает, что нам нужна процедура, которая учитывает все характеристики (интенсивность сигналов пептидов и белков) двух образцов и вычисляет меру сходства (или несходства) между двумя образцами.Мы использовали 1 – r Пирсона в качестве метрики расстояния. Затем мы присвоили апостериорную вероятность совпадения или несоответствия каждой паре выборок, используя эмпирическое условное распределение и предварительно заданную априорную вероятность. Вероятности всех совпадений увеличились до вероятностей выше предыдущих, а все вероятности несоответствий увеличились до вероятностей ниже предыдущих. Обратите внимание, что выбор другой априорной вероятности качественно не меняет результат. Чувствительность и специфичность соответствующей классической задачи классификации равны 100%, или ROC AUC равен 1.Это можно считать идеальным результатом в отношении сопоставления образцов плазмы и слюны каждого человека. Профили IgG уникальны для каждого человека и очень похожи между слюной и плазмой (по крайней мере, для нашей группы исследования и нашей технологии измерения).

Определение иммунологического профиля: Иммунологический профиль человека можно рассматривать как своего рода иммунологический отпечаток пальца. Можно попытаться определить иммунологический профиль, например. как полный иммунологический репертуар человека посредством концентраций каждого идиотипа антител.Однако полный иммунологический (IgG) профиль человека практически не поддается измерению, так как репертуар иммуноглобулинов (количество различных идиотипов) у человека составляет не менее 10 11 и, вероятно, даже на несколько порядков больше [31,32]. Кроме того, иммунологический профиль демонстрирует временные вариации из-за динамики иммунной системы и изменения антигенов окружающей среды («отпечатки пальцев меняются со временем»). Таким образом, практически невозможно создать полный иммунологический профиль человека с помощью доступных в настоящее время технологий, по крайней мере, насколько нам известно.Даже новейшие технологии, основанные на секвенировании, могут быть не в состоянии создать полный профиль, поскольку не последовательность антител, а окончательная общая трехмерная структура (которую трудно предсказать) паратопа в конечном итоге определяет идиотип. Как следствие, в любом случае можно было бы построить профиль IgG только на подмножестве иммунологического профиля человека и найти веские аргументы, которые делают правдоподобным обобщение результатов.

Для представленных анализов профилей IgG и полученных в результате выводов в основном не имеет значения, какое конкретное подмножество антигенов (эпитопов) исследуется или используются ли белковые или пептидные антигены, если имеется по крайней мере определенное количество реактивных антигенов. способный различать образцы (иначе в результирующих данных преобладал бы технический шум).Принимая во внимание изложенные выше мысли, пока нет указаний против обобщения результатов на весь иммунологический профиль, хотя мы можем наблюдать профиль только частично. Таким образом, крайне маловероятно, что анализ случайно сработает только для исследуемого в настоящее время подмножества, но не для любого другого подмножества. Другими словами, нет никаких указаний на то, что определенное подмножество идиотипа IgG попадает в слюну, а другое подмножество — нет. Более общее «доказательство» равенства профилей IgG в плазме и слюне с помощью исчерпывающего анализа (например,грамм. с набором антигенов, охватывающим «все возможные антигены»), в настоящее время невозможно по указанным выше техническим причинам.

Таким образом, мы предлагаем обобщить результаты следующим образом: (i) в любом случае можно было наблюдать только подмножество профиля IgG из-за большого количества возможных различных антител в иммунологическом репертуаре; (ii) Пока нет указаний на то, что результаты справедливы только для определенного подмножества антител IgG и что мы случайно выбрали одно из этих подмножеств.

Наша гипотеза заключалась в том, что профили IgG в плазме и слюне очень похожи у каждого человека.Посредством последовательной демонстрации высокого сходства профилей реактивности IgG между плазмой и слюной против нескольких антигенов мы предоставляем доказательства для принятия этого утверждения в отношении подмножества профиля IgG и приводим доводы в пользу обобщения на весь профиль IgG. Таким образом, представленная работа обеспечивает прочную научную основу для разработки анализов слюны на основе IgG в развивающейся области диагностики на основе слюны. Поскольку IgG представляет собой довольно крупную биомолекулу, вполне вероятно, что гораздо больше молекул, представляющих диагностический и прогностический интерес, таких как гормоны и метаболиты, которые обычно выделяют из плазмы, доступны через слюну.Хотя концентрации большинства молекул, представляющих интерес с медицинской и научной точки зрения, в слюне относительно низки по сравнению с кровью, мы и другие исследователи [3,18–21] смогли показать, что экстракция и количественная оценка молекул возможна и практически применима. Мы подчеркиваем, что наше исследование не обеспечивает ни конкретного клинического теста, ни конкретного медицинского применения, но должно рассматриваться как подход, демонстрирующий, что реактивность IgG в слюне и плазме, как правило, очень похожа для каждого человека.Тем не менее, сделанные выводы обеспечивают прочную основу для многочисленных потенциальных применений диагностики на основе слюны, таких как, например. (i) определение титра антител для быстрой проверки статуса вакцинации; (ii) диагностика инфекций и мониторинг эпидемий или пандемий; (iii) тестирование аутоантител против антигенов, ассоциированных с опухолью, или для диагностики и мониторинга аутоиммунных нарушений; (iv) мониторинг антирезусных антител во время беременности и (v) тестирование на совместимость крови.

На практике анализы на основе слюны потенциально могут быть реализованы в виде тестов латерального потока или микрожидкостных чипов.Таким образом, размер пор устройства или начального фильтра должен быть рассчитан таким образом, чтобы муцины и другие тяжелые компоненты образца слюны удерживались, в то время как антитела (или другие интересующие молекулы) могли проходить и впоследствии накапливаться на платформе захвата. Таким образом, обнаружение и количественная оценка могут быть выполнены с помощью непрямого иммунологического анализа с использованием любой системы обнаружения на основе ферментов или меток, такой как электрохимическое или колориметрическое обнаружение. Для неферментативных анализов тест-полоски можно даже высушить после нанесения образца.Таким образом, можно было удобно и недорого собрать и проанализировать большое количество проб.

Методы

Экспериментальный проект

Цель этого исследования состояла в том, чтобы проверить нашу гипотезу о том, что профили IgG в плазме и слюне очень похожи для каждого человека. Подтверждение этой гипотезы в конечном итоге приводит к заключению, что любой анализ на основе IgG плазмы, в принципе, может быть легко адаптирован в качестве анализа на основе слюны и демонстрирует большой потенциал медицинской диагностики на основе слюны.Это было исследование добровольных здоровых людей, и все испытуемые дали согласие на участие в исследовании. Ни один образец не был исключен. Все образцы были деидентифицированы, за исключением пола и статуса курения. Образцы IgG плазмы и слюны анализировали на белковых и пептидных микрочипах. Кроме того, образцы плазмы были отправлены в обычную медицинскую диагностическую лабораторию для определения титра антител против HBV.

Образцы

Пептидный микрочип: парные образцы плазмы и слюны 20 человек.Средний возраст 34,7 ± SD 8,7 (диапазон 24,4–56,5) лет. 8 курящих, 12 некурящих. 12 кобелей, 8 сук.

Белковый микрочип HbsAg: парные образцы плазмы и слюны 21 человека. Средний возраст 35,4 ± 9,5 (27–58) лет. 7 курящих, 14 некурящих. 14 кобелей, 7 сук. Образцы плазмы еще 17 человек. Средний возраст 30,5 + 9,1 (20–48) лет. 2 курящих, 15 некурящих. 9 кобелей, 8 сук.

Идентификаторы физических лиц согласуются во всех рисунках и таблицах документа. Это исследование было одобрено местным комитетом по этике города Вены (Magistratsabteilung 15 – Gesundheitsdienst der Stadt Wien, Ethikkommission der Stadt Wien).Все участники дали устное информированное согласие на участие в исследовании. Все эксперименты проводились в соответствии с соответствующими руководящими принципами и правилами.

Взятие проб плазмы и слюны

Парные образцы плазмы и слюны были взяты одновременно у здоровых людей. Все люди не имели известных заболеваний на момент отбора проб и через 2 недели после него. Слюну собирали в соответствии с инструкциями производителя с использованием имеющейся в продаже системы сбора слюны (Greiner 881002).В ходе сбора слюну разбавляют примерно 1:1 4 мл 39 мМ буфера для экстракции цитрата (см. инструкции производителя) и хранят на льду. Таким образом, процедура сбора дает примерно 8 мл смеси слюна/буфер 1:1, где 4 мл смеси используется для дальнейшей обработки (см. ниже). В течение 30 минут после сбора смесь слюны/буфера немедленно центрифугировали при 2200xg в течение 10 минут при комнатной температуре (КТ). Супернатант подвергали микрофильтрации с помощью шприцевых фильтров 5 мкм и 0,45 мкм (Merck SLSV025LS и SLHVM25NS) для удаления слизистых компонентов, а затем фильтрат замораживали при -20°C.Плазму с ЭДТА готовили в соответствии с инструкциями производителя сразу после сбора (Greiner 456023) и аликвоты замораживали при -20°C.

Очистка IgG слюны

Замороженные аликвоты смеси слюна/буфер оттаивали при комнатной температуре. 4 мл смеси слюна/буфер заменяли на связывающий буфер (100 мМ фосфата натрия, 150 мМ NaCl, pH 7,2) и концентрировали до 200 мкл с использованием центрифужного фильтрующего устройства Amicon 30k (Merck UFC803024). IgG очищали из этого концентрата с использованием набора 96-луночных колонок Protein G (Thermo 45204) в соответствии с инструкцией к набору.Вкратце, колонки были предварительно промыты связывающим буфером, 200 мкл образца с замененным буфером были нанесены на колонки и инкубированы в течение 30 минут при умеренном перемешивании при комнатной температуре. Затем колонки промывали 4 раза буфером для связывания, связанный IgG элюировали 400 мкл 100 мМ глицина, рН 2,5, и рН доводили до 7,2 с помощью 1М фосфата натрия, рН 9. 35 мкл с использованием центробежного фильтрующего устройства Microcon 10k (Merck MRCPRT010), что дает конечную концентрацию примерно 0.15 мкг/мкл или всего 5,3 мкг IgG. Концентрацию белка измеряли спектрофотометрически (спектрофотометр для микропланшетов Biotek Epoch с модулем Take 3). Чистоту IgG, выделенного из слюны, оценивали с помощью SDS page, как описано ниже, и путем количественного определения IgA с помощью разработанного компанией Luminex количественного анализа IgA. Количественный анализ Luminex IgA основан на сэндвич-иммуноанализе. Захватывающее антитело: мышиное вторичное антитело против IgA человека (Thermo SA1-19258). Обнаружение Антитело: Биотин-SP (длинный спейсер) AffiniPure F(ab’)₂ Фрагмент козьего античеловеческого сывороточного IgA, специфичный к α-цепи (Jackson Immuno 109-066-011).Стрептавидин-PE (Jackson Immuno 016-110-084) использовали для обнаружения, и сигналы считывали с помощью системы Luminex Flexmap 3D. Образцы разводили в PBS с 1% BSA, и PBS с 0,05% Tween-20 (Sigma, P9416) использовали в качестве промывочного буфера. Анализ калибровали по стандарту IgA (Sigma i4036) в концентрациях 0, 1, 2,1, 4,2, 8,3, 16,6 мкг/мл. Для всех проанализированных образцов (n = 4) сигналы IgA были ниже предела обнаружения (LOD) 1 мкг/мл.

Плазменная очистка IgG

Плазменный IgG

очищали с использованием набора для гель-лака дыни в 96-луночном формате (Thermo 45208) в соответствии с инструкцией к набору с немного измененным протоколом.Вкратце, 15 мкл плазмы разводили в 95 мкл буфера для очистки, наносили на смолу, инкубировали в течение 5 минут при умеренном перемешивании при комнатной температуре и центрифугировали при 1000 g в течение 1 минуты для получения очищенного IgG (примерно 1 мг/мл в 100 мкл буфера для очистки). Чистоту оценивали с помощью страницы SDS.

Страница паспортов безопасности

Страница

SDS выполнялась с небольшой перегрузкой дорожек для улучшения видимости примесей. 2,5 мкг очищенного IgG (плазма и слюна) наносили на каждую лунку сборных полиакриламидных гелей с градиентом 4–12% (Thermo NP0329BOX).Гели запускали в 1x буфере MOPS (Thermo NP0001) в невосстанавливающих условиях. Кроме того, на двух дорожках использовали белковую лестницу Pageruler Plus (Thermo 26619) и стандарт IgG человека (Sigma i2511). Гель визуализировали и анализировали с помощью Chemidoc Touch с Imagelab 5.2.1 (Biorad).

Пептидные микрочипы

Два различных коммерческих пептидных микрочипа (JPT Berlin, Германия), картирующие линейные пептидные эпитопы ядерного антигена вируса Эпштейна-Барр (EBV) (EBNA, Swiss-Prot ID P03211) и белка большой оболочки вируса гепатита В (большая оболочка HBV). белок, Swiss-Prot ID P17101).Массив EBV состоит из 158 пептидов, отмеченных в трех повторах (RT-MW-EBV-EBNA1, JPT Berlin), массив HBV состоит из 98 пептидов, отмеченных в трех повторах (RT-MW-HBV-LEP, JPT Berlin), что дает 256 проанализированных пептидов. . Линейные пептидные эпитопы были получены в результате сканирования пептидов из белковых антигенов в терминах 15-мерных пептидов с 11 перекрывающимися аминокислотами.

Белковый микрочип HBsAg

Вирус гепатита В Поверхностный антиген ad (HBsAg ad, Biorad PIP002) был напечатан на 2D эпоксидных микроматрицах стандартного формата (PolyAn 104 00 221) с использованием системы печати InkJet (ArrayJet Marathon Argus).HBsAg готовили в концентрации 0,25 мг/мл в 25 мМ фосфатном буфере с pH 8 + 0,02% додецилсульфата натрия, а затем смешивали 1:1 (об./об.) с чистым этиленгликолем для повышения вязкости для струйной печати (относительная влажность 60% при комнатной температуре). . Слайды хранили при относительной влажности 60% и комнатной температуре во время печати и в течение 2 часов после нее. Распечатанные слайды хранили при 4°С в вакууме. Для калибровки анализа использовали международный стандарт иммуноглобулина поверхностного антигена гепатита В (Anti-HBs) (07/164, NIBSC, Южный Миммс, Великобритания).Серию стандартов анти-HBs для калибровки анализа готовили в блокирующем буфере (PBS, pH 7,4, 3% сухого обезжиренного молока, 0,1% Tween-20) и обрабатывали так же, как и другие образцы (см. Обработка микрочипов).

Эталонные значения титра антител к HBsAg

Образцы плазмы были отправлены в обычную медицинскую диагностическую лабораторию (Labors.at, Вена, Австрия) для определения референтных значений титра антител против HBsAg (мМЕ/мл). В референс-лаборатории использовался анализ Elecsys Anti-HBs II (Roche 05894816) на Roche cobas 6000 (модуль e601).

Обработка микрочипов

Обработка микрочипов проводилась одинаково для образцов IgG плазмы и слюны. Массивы блокировали блокирующим буфером (PBS, pH 7,4, 3% сухого обезжиренного молока, 0,1% Tween-20) в течение 30 минут при перемешивании (150 об/мин на шейкере для планшетов) при комнатной температуре и трижды промывали PBST (PBS, pH 7,4, 0,1% Tween). -20). Предметные стекла сушили центрифугированием и инкубировали со 100 мкл 0,02 мкг/мкл образца IgG (2 мкг общего IgG) в блокирующем буфере при перемешивании (150 об/мин) в течение 1,5 часов при комнатной температуре. После трехкратной промывки PBST предметные стекла инкубировали с детектирующим антителом Alexa 647 против человеческого IgG козы (Invitrogen A21445), разбавленным 1:10000 в блокирующем буфере, при перемешивании в течение 1 часа при комнатной температуре в темноте.Предметные стекла промывали еще три раза PBST, два раза H3O и сушили центрифугированием сразу после последней стадии промывки. Интенсивность флуоресценции в красном канале (возбуждающий лазер 635 нм, эмиссионный фильтр 676/37 нм) сканировали с помощью Tecan PowerScanner.

Данные микрочипа

Флуоресцентные изображения микрочипов были обработаны с помощью GenePix Pro 6.0 (Molecular devices) для количественного определения средней интенсивности флуоресценции (MFI), локальной фоновой интенсивности (BG) и выявления низкокачественных или поврежденных пятен.Коррекция фона не производилась. Данные были нормализованы по медиане до log2 MFI, равного 9 (или MFI = 512) для массивов EBV и HBV. Пятна удаляли из анализа, если: пятно было помечено (флаг = -100) или диаметр пятна был меньше 41 или больше 150 (EBV) или 180 (HBV). Повторяющиеся или тройные пятна усреднялись. Затем (усредненные) данные массивов EBV и HBV были объединены и нормализованы путем корректировки глобальной медианной интенсивности всех массивов HBV до глобальной медианной интенсивности всех массивов EBV. Данные микрочипов EBV и HBV доступны в репозитории омнибуса экспрессии генов (GEO) [33] под номером доступа GSE117142.Доступ к массивам данных EBV и HBV можно получить отдельно с регистрационными номерами GSE117140 и GSE117141 соответственно. Данные массива белков HBsAg представлены в приложении (таблица S2). Данные массива белков HBsAg не были скорректированы или нормализованы по фону.

Статистический анализ

Анализы проводились с помощью R 3.4 [34] с пакетами limma и heatmap3 [35,36]. Для калибровки анализа использовали взвешенную линейную регрессию методом наименьших квадратов с весами 1/титр и 1/титр мин для холостых проб.Прогнозы ниже 0 или больше 1000 были установлены на 0 и 1000 соответственно. Для расчета коэффициентов корреляции использовали r Пирсона.

Иерархическая кластеризация выполнялась с функцией расстояния: dist xy = 1 –r xy , r xy – r Пирсона. В качестве метода агломерации использовали одинарную связь.

Дополнительная информация

S1 Рис. Выделение IgG из слюны и плазмы с высокой чистотой.

Показана относительная площадь хроматограммы под кривой (AUC) IgG плазмы и IgG слюны на полосах страницы SDS.Столбцы показывают относительную долю полос 100-250 кДа на общей хроматограмме AUC для геля, показанного на (фиг. 1А). При использовании стандарта IgG (Std) в качестве эталона средняя чистота IgG слюны составляет 79 % (± 13 % SD), а средняя чистота IgG плазмы составляет 91 % (± 9 % SD).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0218456.s001

(DOCX)

S2 Рис. SDS-страница концентрированной слюны и очищенной слюны IgG.

На дорожках 1–8 показана микрофильтрованная (5 мкм и 0,45 мкм) и концентрированная слюна (~ 8 мкг общего белка).На полосе Std показана белковая лестница (10, 15, 25, 35, 55, 70, 100, 130 и 250 кДа). IgG std представляет собой коммерческий стандарт человеческого IgG (2 мкг). На дорожках 11–16 показаны IgG, очищенные из слюны (~ 2,5 мкг общего белка). На дорожке 17 показан BSA (1 мкг общего белка).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0218456.s002

(TIF)

S3 Рис. Пептиды, демонстрирующие низкую корреляцию между образцами плазмы и слюны, демонстрируют низкий средний MFI и/или низкую дисперсию.

Диаграммы рассеяния значений корреляции (r xy ) между образцами IgG слюны и IgG плазмы против среднего (слева) и дисперсии (справа) log MFI для 256 пептидов (EBV и HBV).Эти диаграммы показывают, что пептиды, которые либо имеют низкую среднюю реакционную способность, либо мало различаются между образцами (слабая способность к дифференцировке), демонстрируют низкие значения корреляции.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0218456.s003

(TIF)

S4 Рис. Средние значения интенсивности сигнала и диапазоны интенсивности сигнала очень похожи в плазме и слюне.

Показаны средние значения и диапазоны log2 MFI для 256 пептидов (EBV и HBV) в 20 парных образцах IgG слюны и IgG плазмы.Это указывает на высокую согласованность относительной реактивности IgG в образцах слюны и плазмы.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0218456.s004

(TIF)

S5 Рис. Парные образцы слюны и плазмы демонстрируют высокое сходство профилей IgG.

Парные образцы больше похожи друг на друга, чем на образцы слюны или плазмы любого другого человека. Попарные диаграммы рассеяния log2 интенсивности сигнала MFI (256 пептидов) для четырех репрезентативных парных образцов IgG плазмы и слюны.Значения корреляции показаны белым цветом для каждой пары. Красные сплошные линии — соответствующие диагонали (x = y). Цвет представляет значения корреляции с (красный = 0,79 и синий = 1). Средняя корреляция соответствия (образцы слюны и плазмы одного и того же человека) составляет 0,963, средняя корреляция несоответствия составляет 0,795 (рис. 4).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0218456.s005

(TIF)

S6 Рис. Попарное группирование образцов слюны и плазмы для всех людей.

Показана тепловая карта log2 MFI для микрочипов IgG слюны и пептидов IgG плазмы.Данные нормализованы в соответствии с разделом «Материалы и методы». Верхние цветные полосы (красный, синий) обозначают образцы слюны и плазмы соответственно. Левая цветная полоса указывает на пептиды, полученные из EBV или HBV, а также на пустые и контрольные пятна. Значения Log2 MFI для 20 парных образцов показаны для 256 пептидов и контрольных пептидов (технологические контрольные пептиды и пробелы).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0218456.s006

(TIF)

S7 Рис. Повторные образцы и технические повторы демонстрируют высокое сходство для индивидуума, даже если выборки разделены более чем на шесть недель.

Иерархическая кластеризация образцов IgG плазмы и IgG слюны, проанализированных на микрочипах пептидов EBV. Включены технические реплики и реплики образцов, более подробное описание см. в таблице S4. Серая линия указывает на наибольшее несходство образцов от одной особи. Одиночное сцепление использовалось как метод агломерации, а (1 – r Пирсона) использовалось как расстояние. Концевые края окрашены в красный цвет.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0218456.s007

(TIF)

S1 Таблица.Концентрации и общее количество IgG, выделенных из парных образцов слюны и плазмы.

Конечный объем изолята IgG слюны составил 35 мкл, конечный объем изолята IgG плазмы составил 100 мкл. Средний выход IgG составил 5,3 мкг (диапазон 1,7–12,5 мкг) из 2 мл слюны и 54,8 мкг (диапазон 40–76,45 мкг) из 15 мкл плазмы.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0218456.s008

(DOCX)

S2 Таблица. Интенсивность сигнала и значения титра для образцов плазмы и слюны.

MFI, контрольные значения титра (титр анти-HBs) и прогнозируемые значения титра для образцов IgG, выделенных из слюны и плазмы.Парные образцы плазмы и слюны были доступны у 21 человека, образцы плазмы были доступны еще у 17 человек. Референсные значения титра для всех индивидуумов измеряли в образцах плазмы (см. раздел «Материалы и методы»). Прогнозируемые значения титра (мМЕ/мл) рассчитывали по формуле регрессии из таблицы S3.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0218456.s009

(DOCX)

S4 Таблица. Спецификация образцов, проанализированных на пептидном микрочипе EBV.

Технические повторы (повторная очистка IgG и обработка микрочипов из одного и того же образца) и повторы образцов (повторный отбор от одного человека) включены и обозначены точкой и последовательным номером после индивидуального номера (1–20) и типа образца ( плазма P и слюна S). Образцы 1.Пла.4, 1.Пл.2, 14.Пл.2, 14.Пл.4, 17.Пл.2, 2.Пла.3 и 2.Пл.2 являются технической повторностью соответствующего предыдущего образца. ID (например, 1.Pla.4 является технической копией 1.Pla.3).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0218456.s011

(DOCX)

Благодарности

Мы хотели бы поблагодарить всех участников исследования за их щедрость. Мы хотели бы поблагодарить Х. Хеттеггера за многочисленные плодотворные обсуждения. Эта работа финансировалась Австрийским технологическим институтом (AIT) и Юбилейным фондом Австрийского национального банка (Oesterreichische Nationalbank OeNB) проект № 15952.

Каталожные номера

  1. 1. Ван Дж., Шивакумар С., Баркер К., Тан Ю., Уоллстром Г., Парк Дж. Г. и др.Сравнительное исследование ответов аутоантител между аденокарциномой легкого и доброкачественными легочными узлами. Дж. Торак Онкол. Эльзевир Инк; 2015; 11: 334–345. пмид:26896032
  2. 2. Хофман Л.Ф. Слюна человека как диагностический препарат. Дж Нутр. 2001; 131: 1621–1625.
  3. 3. Мадар Р., Страка С., Башка Т. Обнаружение антител в слюне — эффективный вспомогательный метод надзора за инфекционными заболеваниями. Братиславске Лекарске Листы. 2002. С. 38–41. пмид:12061087
  4. 4.Качор-Урбанович К.Э., Мартин Каррерас-Пресас С., Аро К., Ту М., Гарсия-Годой Ф., Вонг Д.Т. Диагностика слюны – Современные взгляды и направления. Экспер Биол Мед. 2017; 242: 459–472. пмид:274
  5. 5. Йошизава Дж.М., Шафер К.А., Шафер Дж.Дж., Фаррелл Дж.Дж., Пастер Б.Дж., Вонг ДТВ. Слюнные биомаркеры: на пути к будущим клиническим и диагностическим возможностям. Clin Microbiol Rev. 2013; 26: 781–791. пмид:24092855
  6. 6. Шафер К.А., Шафер Дж.Дж., Якоб М., Лима П., Камарго П., Вонг ДТВ.Диагностика слюны: использование ротовой жидкости для определения состояния здоровья. Функция секрета слюны. 2014; 24: 88–98. пмид:24862597
  7. 7. Кавас С. Аль-Рахим ЖА, Фергюсон Д.Б. Возможное использование анализа белков и пептидов слюны человека в диагностике заболеваний. Arch Oral Biol. ООО «Эльзевир»; 2012; 57: 1–9. пмид:21774913
  8. 8. Лю Дж., Дуан Ю. Слюна: потенциальная среда для диагностики и мониторинга заболеваний. Оральный онкол. ООО «Эльзевир»; 2012; 48: 569–577. пмид:22349278
  9. 9.Spielmann N, Wong D. Слюна: диагностика и терапевтические перспективы. Оральный Дис. 2011; 17: 345–354. пмид:21122035
  10. 10. Гименти С., Ломонако Т., Онор М., Мургия Л., Паоличи А., Фуоко Р. и др. Измерение варфарина в ротовой жидкости пациентов, получающих пероральную антикоагулянтную терапию. ПЛОС Один. 2011 г.; пмид:22164240
  11. 11. Джасим Х., Олауссон П., Хеденберг-Магнуссон Б., Эрнберг М., Гафури Б. Протеомный профиль цельной и железистой слюны у здоровых людей без боли.Научный доклад 2016;6. пмид:27976689
  12. 12. Беллагамби Ф.Г., Дегано И., Гименти С., Ломонако Т., Дини В., Романелли М. и др. Определение уровня α-амилазы и кортизола в слюне у пациентов с псориазом, прошедших тест Trier Social Stress Test. Микрохим Дж. 2018;
  13. 13. Ломонако Т., Гименти С., Пига И., Биаджини Д., Онор М., Фуоко Р. и др. Влияние отбора проб на определение варфарина и варфариновых спиртов в ротовой жидкости. ПЛОС Один. 2014; пмид:25478864
  14. 14.Comabella M, Montalban X. Биомаркеры жидкости организма при рассеянном склерозе. Ланцет Неврология. 2014. С. 113–126. пмид:24331797
  15. 15. Мицуяма К., Нива М., Такэдацу Х., Ямасаки Х., Куваки К., Йошиока С. и др. Маркеры антител в диагностике воспалительных заболеваний кишечника. Всемирный журнал гастроэнтерологии. 2016. С. 1304–1310. пмид:26811667
  16. 16. Арбакл М.Р., Макклейн М.Т., Рубертон М.В., Скофилд Р.Х., Деннис Г.Дж., Джеймс Дж.А. и др. Развитие аутоантител до клинического проявления системной красной волчанки.N Engl J Med. 2003; 349: 1526–1533. пмид:14561795
  17. 17. Гринвальд Дж. Л., Бурштейн Г. Р., Пинкус Дж., Брэнсон Б. Экспресс-обзор экспресс-тестов на антитела к ВИЧ. Текущие отчеты об инфекционных заболеваниях. 2006. С. 125–131. пмид:16524549
  18. 18. Roehr B. FDA одобряет «мгновенный» домашний тест на ВИЧ. BMJ (Клинические исследования под ред.). 2012. pmid:22767643
  19. 19. Камат Х.А., Адхия М., Коппикар Г.В., Парех Б.К. Обнаружение антител к ВИЧ в слюне. Natl Med J Индия.1999; 12: 159–161. пмид:10573970
  20. 20. Кузуббо Дж., Вон Д.В., Нисалак А., Сунтаякорн С., Аасков Дж., Дивайн П.Л. Обнаружение специфических антител в слюне при лихорадке денге. Дж. Клин Микробиол. 1998; 36: 3737–3739. пмид:9817913
  21. 21. Перри К.Р., Браун Д.В.Г., Парри Дж.В., Пандей С., Пипкин С., Ричардс А. Обнаружение антител против кори, эпидемического паротита и краснухи в слюне с использованием радиоиммуноанализа с захватом антител. J Med Virol. 1993; 40: 235–240. пмид:8355022
  22. 22.Тан Э.М., Чжан Дж. Аутоантитела к опухолеассоциированным антигенам: репортеры иммунной системы. Иммунологические обзоры. 2008. С. 328–340. пмид:18364012
  23. 23. Heo CK, Bahk YY, Cho EW. Опухолеассоциированные аутоантитела как диагностические и прогностические биомаркеры. Отчеты БМБ. 2012. С. 677–685. пмид:23261052
  24. 24. Чепмен С.Дж., Хили Г.Ф., Мюррей А., Бойл П., Робертсон С., Пик Л.Дж. и др. Тест EarlyCDT-Lung: улучшенная клиническая полезность благодаря дополнительным анализам аутоантител.Опухоль биол. 2012; 33: 1319–1326. пмид:22492236
  25. 25. Tan HT, Low J, Lim SG, Chung MCM. Сывороточные аутоантитела как биомаркеры раннего выявления рака. FEBS J. 2009; 276: 6880–6904. пмид:19860826
  26. 26. Доенхофф М.Дж., Чиодини П.Л., Гамильтон Дж.В. Специфическая и чувствительная диагностика шистосомной инфекции: можно ли это сделать с помощью антител? Тенденции паразитологии. 2004. С. 35–39. пмид:14700588
  27. 27. Гельман А., Хилл Дж., Ядзима М. Почему нам (обычно) не нужно беспокоиться о множественных сравнениях.J Res Educ Eff. 2012;5: 189–211.
  28. 28. Пепе МС. Статистическая оценка медицинских тестов и биомаркеров для классификации. Рак рез. 2007 г.; 153 диапозитивы.
  29. 29. Оджала М., Гаррига Г.К. Перестановочные тесты для изучения производительности классификатора. Дж. Мах Узнать Рез. 2010; 11: 1833–1863 гг.
  30. 30. Голланд П., Фишл Б. Тесты перестановок для классификации: к статистической значимости в исследованиях на основе изображений. Раз в два года Международная конференция по обработке информации в медицинской визуализации.2003. С. 330–341.
  31. 31. Мерфи К., Трэверс П., Уолпорт М. Генерация антигенных рецепторов лимфоцитов. Иммунобиология Джейнвей, 8-е издание, Нью-Йорк: Garland Science. 2012.
  32. 32. Альбертс Б., Джонсон А., Льюис Дж., Рафф М., Робертс К., Уолтер П. Молекулярная биология клетки, 4-е издание [Интернет]. Гарланд Наука. 2002. https://doi.org/10.3389/fimmu.2015.00171
  33. 33. Эдгар Р. Омнибус по экспрессии генов: хранилище данных массива экспрессии генов и гибридизации NCBI.Нуклеиновые Кислоты Res. 2002; 30: 207–210. пмид:11752295
  34. 34. Основная команда R. R: Язык и среда для статистических вычислений [Интернет]. Вена, Австрия; 2017. Режим доступа: https://www.r-project.org/
  35. 35. Смит Г. Лимма: Линейные модели для данных микрочипов. Bioinforma Comput Biol Solut с использованием R Bioconductor. 2005 г.; 397–420. citeulike-article-id:5722720
  36. 36. Zhao S, Guo Y, Sheng Q, Shyr Y. Heatmap3: Улучшенный пакет тепловых карт [Интернет].2015. Доступно: https://cran.r-project.org/package=heatmap3
.

Слюна: больше, чем просто слюни

Слюна: больше, чем просто DroolGIS2020-03-25T12:19:56-07:00

Слюна, водянистая жидкость, вырабатываемая железами, расположенными под языком, является важным компонентом пищеварительного процесса. Слюна на 98% состоит из воды, поэтому она увлажняет рот и помогает уплотнять пищу в размягченные частицы для облегчения глотания. Наши зубы и язык работают как кухонный комбайн, используя слюну в качестве жидкости, необходимой для создания смеси, подходящей для желудка.Важно как можно больше пережевывать пищу, так как длительное пережевывание дает ферментам слюны время, чтобы начать процесс расщепления углеводов, что является очень важной частью пищеварения. И наоборот, быстрое проглатывание частично пережеванной пищи с последующим большим количеством жидкости подрывает функцию слюны, поэтому ваш желудок получает куски пищи, а не более мелкие частицы. Тщательно пережевывая пищу, вы можете убедиться, что у слюны есть шанс сделать свою работу, помогая остальным пищеварительным процессам работать более гладко.
Слюна насыщена полезными элементами, такими как электролиты, ферменты, слизь, различные антибактериальные соединения, а также полезные бактерии. Слюна также слабощелочная с высокой концентрацией ионов кальция и фосфата, что делает ее идеальной средой для ваших зубов.

Небольшое исследование, включающее два эксперимента, недавно опубликованное в журналах Health , 1 , проверяло способность слюны защищать зубную эмаль от разрушающего воздействия кислых (с низким pH) напитков. Предыдущие исследования показали, что слюна обладает буферной способностью против кислоты, но в этом исследовании специально изучалось, насколько хорошо слюна защищает от деминерализации зубов, вызванной кислыми напитками, такими как газированные напитки и апельсиновый сок.Исследование показало, что слюна обладает постоянным защитным эффектом, покрывая зубы. Авторы исследования также говорят, что их результаты показывают, что буферная способность слюны не коррелирует напрямую с уровнем pH потребляемых напитков, а это означает, что риск деминерализации от конкретного напитка не может быть точно измерен только по его уровню pH, как это было ранее. было стандартной практикой. Они также обнаружили, что слюна, насыщенная полезными для зубов минералами, не только обеспечивает защиту от кислых напитков, способных вызвать деминерализацию, но также играет важную роль в реминерализации уже разрушенной зубной эмали.


Впервые опубликовано в информационном бюллетене
Inside Tract ®, выпуск 183 – 2012 г.
1. Такахаши С.
и др. . Подавляющее действие слюны на деминерализацию эмали, вызванную кислыми напитками. Здоровье . 2011;3(2):742-7.
Изображение: Эльнур | bigstockphoto.com

Исследование показывает, как SARS-CoV-2 заражает клетки во рту, что может привести к симптомам со стороны полости рта клетки железы, которые обведены зеленым цветом.Изображение предоставлено Паолой Перес, доктором философии, Национальный институт стоматологических и черепно-лицевых исследований



Исследование, изучающее роль полости рта в инфекции SARS-CoV-2, обнаружило доказательства того, что вирус заражает клетки во рту, что может объяснить, почему у некоторых пациентов с COVID-19 наблюдается потеря вкуса, сухость во рту и образование волдырей. Исследование также показало, что слюна заразна, что указывает на то, что рот может играть роль в передаче вируса глубже в организм или другим людям.

Доктор Берд
«После нескольких месяцев сотрудничества наше исследование показывает, что рот является путем заражения, а также инкубатором для вируса SARS-CoV-2, вызывающего COVID-19», — сказал Кевин М. Берд, доктор медицинских наук, доктор философии, один из ведущих исследователей и научный сотрудник Энтони Р. Вольпе Научно-исследовательского института ADA. «Эта фундаментальная работа поможет направить наши следующие исследования для дальнейшего понимания на молекулярном уровне, почему у людей наблюдается изменение/потеря вкуса и сухость во рту после заражения во время COVID-19, почему некоторые люди демонстрируют эти эффекты спустя шесть с лишним месяцев после заражения. первая инфекция, и если и как мы можем придумать стратегии лечения, чтобы помочь этим людям выздороветь.

Исследование Национального института здоровья и Университета Северной Каролины в Чапел-Хилл было опубликовано 25 марта в журнале Nature Medicine. Доктор Берд, в то время доцент Школы стоматологии Адамса Университета Северной Каролины, руководил исследованием вместе с Блейком М. Уорнером. , DDS, Ph.D., ассистент клинического исследователя и руководитель отдела заболеваний слюны Национального института стоматологических и черепно-лицевых исследований

До этого исследования было мало что известно о том, как ротовая полость участвует в SARS-CoV-2. инфекционное заболевание.Известно, что верхние дыхательные пути и легкие являются основными местами заражения, а слюна может содержать высокие уровни вируса, но ученые не совсем знают, откуда берется вирус в слюне, согласно пресс-релизу Национального института здравоохранения. У людей с COVID-19, у которых есть респираторные симптомы, вирус потенциально может поступать из носовых выделений или мокроты, выделяемой из легких, но это может не объяснять, как вирус попадает в слюну людей, у которых нет этих симптомов.


Др.Уорнер
«Основываясь на данных наших лабораторий, мы подозревали, что по крайней мере часть вируса в слюне может исходить от инфицированных тканей во рту», ​​— сказал доктор Уорнер.

Исследователи проверили эту теорию, изучив ткани ротовой полости здоровых людей, чтобы определить области рта, восприимчивые к инфекции SARS-CoV-2. Они обнаружили, что некоторые клетки в слюнных железах и тканях, выстилающих полость рта, содержат РНК двух ключевых «входных белков» — рецептора ACE2 и фермента TMPRSS2, — которые позволяют вирусу проникать в клетки, что делает их восприимчивыми к инфекции.Небольшое количество клеток слюнной железы и десны содержало РНК как для рецептора ACE2, так и для фермента TMPRSS2, что повышало уязвимость клеток, поскольку считается, что вирусу необходимы оба входных белка, чтобы получить доступ к клеткам.

Исследовательская группа изучила образцы тканей ротовой полости людей с COVID-19 на наличие признаков инфекции и обнаружила, что РНК SARS-CoV-2 присутствует чуть более чем в половине слюнных желез, взятых у умерших пациентов. В ткани слюнных желез одного из умерших людей и живого человека с тяжелой формой COVID-19 они также обнаружили специфические последовательности вирусной РНК, которые указывали на то, что клетки активно производят новые копии вируса.

У людей с легкой или бессимптомной формой COVID-19 было обнаружено, что клетки, попадающие изо рта в слюну, содержат РНК SARS-CoV-2 и входные белки, что указывает на то, что инфицированные ткани полости рта, по-видимому, являются источником вируса в слюне . Ученые подвергли воздействию слюны восьми человек с бессимптомным течением COVID-19 здоровые клетки, выращенные в чашке, и слюна двух добровольцев вызвала инфицирование здоровых клеток, показав, что бессимптомные люди могут передавать вирус другим через слюну. .

«Бессимптомное распространение — это ахиллесова пята этой пандемии, и мы обнаружили, что вирус может присутствовать в слюне бессимптомных людей, а также в слюне тех, у кого изменился вкус/запах», — сказал доктор Берд. «Если изменения вашего вкуса/запаха являются вашим единственным симптомом, для вас по-прежнему важно пройти тест на COVID-19 и самоизолироваться на благо вашего сообщества».

Исследователи собрали слюну у отдельной группы из 35 добровольцев NIH с легкой или бессимптомной формой COVID-19 и обнаружили, что те, у кого были симптомы, с большей вероятностью сообщали о потере вкуса и обоняния, если в их слюне был вирус, что позволяет предположить, что оральная инфекция может быть причиной оральных симптомов.

Исследование также показывает, что рот может играть роль в передаче SARS-CoV-2 в легкие или пищеварительную систему через слюну, содержащую вирус из инфицированных клеток полости рта.

«Когда инфицированная слюна проглатывается или вдыхаются крошечные ее частицы, мы думаем, что она потенциально может передать SARS-CoV-2 дальше в наше горло, легкие или даже в кишечник», — сказал доктор Берд.

Результаты исследования должны быть подтверждены на большей группе людей, и необходимы дополнительные исследования, чтобы определить точную природу вовлечения рта в инфекцию SARS-CoV-2 и ее передачу внутри и снаружи тела, согласно NIH. выпуск новостей.

«Обнаружив потенциально недооцененную роль полости рта в заражении SARS-CoV-2, наше исследование может открыть новые направления исследований, ведущие к лучшему пониманию течения инфекции и болезни», — сказал доктор Уорнер. «Такая информация может также использоваться для принятия мер по борьбе с вирусом и облегчению пероральных симптомов COVID-19».

Секреция слюны – модификации

Организм вырабатывает около 1,5 литров слюны каждый день, и она играет жизненно важную роль в смазывании пищи, пищеварении и защите полости рта.

В этой статье будет рассмотрено производство слюны, как оно зависит от потребления пищи и последствия низкой секреции.

Функция

Слюна играет важную роль в желудочно-кишечном тракте. Он не только помогает смазывать и влажный корм, но также начинает переваривать углеводы.

Одной из важнейших функций является защита полости рта:

  • Поддержание влажности слизистой оболочки
  • Чистка зубов
  • Поддержание щелочной среды
  • Содержит высокую концентрацию кальция

Составные части слюны

Слюна состоит из нескольких компонентов в различных концентрациях:

  • Вода
  • Электролиты – ионы натрия и хлора обычно в более низкой концентрации, чем в плазме (гипотонические).Ионы калия, кальция и йодида обычно находятся в более высокой концентрации, чем в плазме (гипертоническая)
  • Бикарбонат – присутствует в более высокой концентрации, чем в плазме, для поддержания щелочной среды
  • Бактериостаты – химические вещества, препятствующие размножению бактерий. К ним относятся лизоцимы, лактоферрин, иммуноглобулин А, а также лактопероксидаза слюны.
  • Слизь-  способствует увлажнению содержимого пищи и облегчает глотание.
  • Ферменты – слюнная амилаза, лингвальная липаза и калликреин (помогает вырабатывать брадикинин-> сосудорасширяющее средство)

Слюнные железы

За выработку слюны отвечают три парные слюнные железы: подчелюстные железы, подъязычные железы и околоушные железы. Все они протоковые, экзокринных желез.

Каждая из желез производит несколько иной секрет. Околоушные железы производят серозных слюны: водянистый секрет, богатый ферментами.Секрет подъязычных желез известен как слизистой слюны; вязкий секрет, не содержащий ферментов и большое количество слизи. Наконец, поднижнечелюстные железы производят смешанный секрет, который бывает серозным и слизистым.

Слюнная железа Доля всей выделяемой слюны
Поднижнечелюстная 70%
Околоушная железа 25%
Подъязычный 5%

Дополнительную информацию об анатомии этих желез можно найти здесь.

Секрет

Общий секрет

Слюна всегда представляет собой гипотонический раствор , но ее необходимо производить из концентрированной внеклеточной жидкости и модифицировать.

Жидкость, выделяемая ацинусами, в целом изотонична внеклеточной жидкости:

  • Ионы натрия и калия эквивалентны
  • Иодид-ионы присутствуют в повышенной концентрации
  • Ионы хлорида присутствуют в пониженной концентрации
  • Бикарбонат присутствует в той же концентрации

Во время модификации протоков объем изменяется незначительно, однако концентрации некоторых ионов меняются:

  • Концентрация натрия снижается
  • Концентрация калия увеличивается
  • Концентрация бикарбоната снижается в покое и увеличивается при стимуляции

Клетки протоков имеют максимальную скорость модификации, поэтому чем быстрее вырабатывается слюна, тем меньше она модифицируется (за исключением бикарбоната).

Рис. 1. Диаграмма, показывающая модификацию слюны.

Слюна покоя

В покое ацинарная секреция сильно модифицирована и имеет следующие характеристики:

  • Малый объем
  • Очень гипотонический
  • Нейтральная или слабокислая
  • Несколько ферментов

Стимулированная слюна

При стимуляции выработки слюны поток превышает максимальную скорость модификации клеток протоков, поэтому ацинарная секреция изменяется меньше:

  • Большой объем
  • Менее гипотоничен, чем слюна покоя
  • щелочной
  • Многие ферменты

[начальный клинический]

Клиническая значимость — ксеростомия

Ксеростомия — это ощущение сухости во рту , возникающее при изменении состава слюны или уменьшении слюноотделения.

Это может быть вызвано многими вещами, но чаще всего это связано с побочными эффектами лекарств . Другие причины включают:

  • Дегидратация
  • Лучевая терапия слюнных желез
  • Старый Возраст

Как правило, лечение часто бывает неудовлетворительным. Если есть идентифицируемая причина, то ее следует устранить в первую очередь, но часто, несмотря на это, ксеростомия не может быть исправлена. Доступны заменители слюны , а также стимуляторы, предназначенные для поощрения слюнных желез к увеличению производства, хотя эти стимуляторы, как правило, неэффективны, если функция слюноотделения сохраняется.

Кроме того, образование играет важную роль в плане улучшения гигиены полости рта.

Рис. 2. Изображение рта пациента, страдающего ксеростомией.

[конечный клинический]

.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.