Энтерол антибиотик или нет: ЭНТЕРОЛ® 250 — антибиотикотерапия без «последствий»

Содержание

Энтерожермина® Форте

Перечень сведений, необходимых до начала применения

Противопоказания
– повышенная чувствительность к активному веществу или компонентам препарата

Необходимые меры предосторожности при применении
Возможно наличие видимых включений во флаконах препарата Энтерожермина® Форте, что обусловлено агрегатами спор Bacillus clausii, это не означает, что препарат претерпел изменения.
Необходимо встряхнуть флакон перед применением.
Данный препарат предназначен только для перорального приема.
Взаимодействия с другими лекарственными препаратами
Лекарственные взаимодействия в результате одновременного приёма с другими лекарственными средствами не известны.
Специальные предупреждения
Запрещен инъекционный или любой другой путь введения в связи с высоким риском тяжелых анафилактических реакций, таких как анафилактический шок.
Во время терапии антибиотиками препарат следует принимать между двумя последовательными приемами дозы антибиотика.

Беременность
В настоящее время нет данных о применении препарата Энтерожермина® Форте для лечения беременных. Поэтому невозможно сделать какие-либо выводы относительно безопасности применения препарата Энтерожермина® Форте во время беременности.
Препарат Энтерожермина® Форте следует использовать во время беременности только в том случае, если потенциальная польза для матери перевешивает потенциальные риски, включая риски для плода.
Кормление грудью
В настоящее время нет данных о применении препарата Энтерожермина® Форте во время кормления грудью, о его влиянии на состав грудного молока и на младенца. Поэтому невозможно сделать какие-либо выводы относительно безопасности применения препарата Энтерожермина® Форте во время кормления грудью.
Препарат Энтерожермина® Форте следует использовать во время кормления грудью только в том случае, если потенциальная польза для матери перевешивает потенциальные риски, включая риски для ребенка, употребляющего грудное молоко.
Репродуктивная функция
В настоящее время нет данных о влиянии препарата Энтерожермина® Форте на репродуктивную функцию человека.
Особенности влияния препарата на способность управлять транспортным средством или потенциально опасными механизмами
Препарат не влияет на способность управлять транспортным средством или движущимися механизмами.

СПИСОК БЕСПЛАТНЫХ ЛЕКАРСТВ ДЛЯ ДЕТЕЙ ДО 3 ЛЕТ.

№ п/п  МНН Торговое  название
1 Метилпреднизолонаацепонат Адвантан мазь
2 Умифеновир Арбидол
3 Депротеинизированныйгемодериват из крови телят Актовегин
4 Депротеинизированныйгемодериват из крови телят Актовегин
5 Амброксол Амброксол сироп
6 Амоксициллин Амоксиклав
7 Анаферон Анаферон детский
8 Ампициллин+ сульбактам Амписид
9 Амоксициллин+клавулановая кислота Аугментин
10 Gentiana + Aconitum + Bryonia + Ferrumphosphoricum + Acidumsarcolacticum Афлубин
11 Ацикловир Ацикловир мазь
12 Ипратропиябромид + фенотерол Беродуал
13 Бифидобактериибифидум Бифидум-бактерин
14 Бромгексин Бромгексин сироп 
15 Лизат бактерий (Escherichiacoli) Бронхо-ваксом
16 Будесонид Буденит
17 Винпоцетин Винпоцетин
18 Ретинол Вит.А (Ретинола пальмитат) 
19 Интерферон альфа – 2b Виферон суппозитории
20 Интерферон альфа – 2 Гриппферон
21 Цетиризин Зиртек
22 Ибупрофен Ибупрофен  
23 Ипратропия бромид + Ипратерол-
Фенотерол натив
24 Лизаты  бактерий ИРС 19  спрей
25 Калия йодид Калия йодид
26 Карбамазепин Карбалепсин
27 Лоратадин Кларисенс сироп
28 Полипептиды коры головного мозга скота Кортексин
29 Панкреатин Креон
30 Лактобактерии ацидофильные Лактобактерин
31 Лактулоза + лигнин Лактофильтрум
32 Хлорамфеникол Левомицетин гл.капли
33 Лебенин Линекс
34 Магния лактатдигидрат + магния пидолят + пиридоксина гидрохлорид Магне В6
35 Железа III гидроксид полимальтозат Мальтофер сироп 
36 Мирамистин Мирамистин
37 Домперидон Мотилиум
38 Оксиметазолин Називин
39 Нафазолин Нафтизин
40 Смектитдиоктаэдрический Неосмектин
41 Нимесулид Нимика
42 Лактулоза Нормазе сироп  
43 Диоксотетрагидрокситетрагидронафталин Оксалин мазь
44 Лидокаин + феназон Отирелакс
45 Гопантеновая кислота Пантогам
46 Цефиксим Панцеф
47 Парацетамол Парацетамол  
48 Парацетамол Парацетамол суппозитории
49 Пирантел Пирантел   суспензия
50 Лактулоза Порталак сироп
51 Будесонид Пульмикорт
52 Будесонид Пульмикорт
53 Поливитамины Ревит
54 Инозин Рибоксин
55 Фенспирид Сиресп
56 Сульфацетамид Сульфацил натрия  
57 Азитромицин Сумамед
58 Азитромицин Сумамед
59 Хлоропирамин Супрастин  
60 Таурин Таурин
61 Диметинден Фенистил
62 Диметинден Фенистил гель  
63 Железа III гидроксид полимальтозат Феррум  Лек
сироп
64 Амоксициллин Флемоксин Солютаб
65 Амоксифиллин Флемоксин Солютаб
66
Флуконазол
Флуконазол
67 Флуконазол Флуконазол
68 Фолиевая кислота Фолиевая кислота  
69 Фосфолипиды Фосфонциале
70 Фуразидин Фурагин
71 Артишок листьев экстракт Хофитол
72 Цефазолин Цефазолин
73 Парацетамол Цефекон Д  суппозитории
74 Парацетамол Цефекон Д суппозитории
75 Цинаризин Цинаризин
76 Левокарнитин Элькар
77 Нифуроксазид Энтерофурил
78 Амоксициллин + Клавулановая кислота Экоклав
79 Амоксициллин + Клавулановая кислота Экоклав
80 Урсодезоксихолевая кислота Эксхол
81 Урсодезоксихолевая кислота Урсолив
82 Азитромицин Экомедсуспенз.
83 Полиметилсилоксана полигидрат Энтеросгель
84 Энтерол Энтерол
85 Симетикон Эспумизан L
По  списку детей :
86 Вальпроевая  кислота ВальпаринХР
87 Вальпроевая  кислота ВальпаринХР

Медицина Челябинска – консультации врачей статьи новости Челябинск

!
Всего вопросов 64 показывается по 5 10 15 25

25.05.2010

Доброго времени суток, уважаемые врачи. Пропил курс антибиотиков, теперь проблемы со стулом, то запоры то жидкий, то 50/50, еще и со слизью. Уже замучился. Что попить, подскажите, наши местные врачи мне не помогут, проверено. Спсибо за отклик. Анатолий

Здравствуйте, Анатолий! Думаю, что Вы зря обижаете моих коллег. Ваша ситуация называется «антибиотик-ассоциированная диарея», довольно распространенная. Хотелось бы, конечно, знать, по какому поводу, какие и как долго Вы принимали антибиотики. Попробуйте полечиться так: энтерол по 1 капсуле 2 раза в день до еды 2 недели, затем бифиформ по 2 капсулы в день 2 недели, затем биовестин-лакто по 6 мл в день 1-1,5 месяца. Если после этого проблемы будут продолжаться, все же придется обратиться к врачу по месту жительства. В следующий раз, если придется лечиться антибиотиками, предупредите доктора, что кишка на это реагирует и параллельно с антибиотиками и сразу после принимайте препараты кишечных бактерий. Выздоравливайте!

С уважением,
Светлова Ирина Олеговна,
врач-гастроэнтеролог
к.м.н., доцент

17.05.2010

Здравствуйте, доктор! Моей маме 54 года. В последнее время у нее участились боли в правом боку. Стул стал жидкий и зеленоватого оттенка. Что это может быть, похоже ли на панкреатит? Пьет омез, но он, вроде бы, не особо помогает. Врача гастроэнтеролога у нас нет, в город пока ехать не получается. Какие действия подскажете принимать? Спасибо. Виктория

Здравствуйте, Виктория! Если у мамы боли в правом подреберье, это может быть связано с патологией желчевыводящих путей, если внизу живота справа – более вероятна какая-то кишечная проблема. Лечение при этом разное. Так что надо маму показать врачу-терапевту, который есть везде, он расспросит подробнее, попальпирует живот, назначит УЗИ, копроскопию, что-то прояснится. В любом случае при описанных симптомах толку от омеза немного. Можно попробовать ферментные препараты с едой, Денол по 2 таблетки 2 раза в день за час до еды недельки две и пробиотики, например, Биовестин-лакто 6 мл в день 4-6 недель. Но начинать лучше с посещения доктора. Здоровья Вашей маме.

С уважением,
Светлова Ирина Олеговна,
врач-гастроэнтеролог
к.м.н., доцент

17.05.2010

Здравствуйте, очень долго принимал антибиотики – микрофлора нарушена значительно, как теперь восстанавливать, какими средствами? Может быть, лучше народными средствами? Сергей

Здравствуйте, Сергей! Из народных средств при дисбактериозе хороши кисло-молочные продукты, а также каши, овощи, фрукты и водоросли, содержащие пищевые волокна – корм для бактерий. Кроме того, разумеется, нужно длительно (4-6 месяцев) принимать пробиотики. Попробуйте пробиотики от разных производителей, какие больше понравятся, те и принимайте. Можно менять препараты. Не забудьте про наши новосибирские Биовестин и Биовестин-лакто, они содержат живые активные бактерии, хорошо себя зарекомендовали. Поправляйтесь.

С уважением,
Светлова Ирина Олеговна,
врач-гастроэнтеролог
к.м.н., доцент

17.05.2010

Здравствуйте, у моего папы на протяжение двух недель был жидкий стул. Его подташнивало, и иногда повышалась температура. Лежал на обследовании, ничего серьезного, что могло бы вызвать регулярный жидкий стул не нашли. Из инфекционного отделения, где он пролежал неделю, выписали домой, пропил назначенные лекарства, но ничего не помогло. Мама дает ему есть сухой кисель для связующего эффекта, правильно ли она поступает, посадила на диету: ест каши, бульоны куриные, немного мяса. Ему значительно легче, симптомы отступают. Но не окажется ли так, что просто симптомы заглушат, а болезнь-то останется. Очень переживаю, подскажите, как лучше поступить? Мария

Здравствуйте, Мария! Скорее всего, Ваш папа все же переболел какой-то кишечной инфекцией, несмотря на то, что инфекционисты никакого возбудителя не выявили. Это обычная практика. Всего у 15-20% больных удается выявить причину кишечной инфекции при лабораторном обследовании. У большинства людей никаких последствий после инфекций не остается, вот и Ваш папа постепенно выздоравливает на диете. Чтобы избежать неприятных последствий, что тоже иногда бывает, можно дополнительно к диете принимать сборы трав (в аптеке спросить сбор после перенесенной кишечной инфекции, посоветуют). Кроме того, показан курс пробиотиков, например, сначала энтерол по 1 капсуле 2 раза в день 10 дней, а затем Бифиформ по 2 капсулы в день или Биовестин-лакто по 6 мл в день до еды 1-1,5 месяца. Желаю окончательного выздоровления Вашему папе.

С уважением,
Светлова Ирина Олеговна,
врач-гастроэнтеролог
к.м.н., доцент

14.05.2010

Добрый день. Подскажите, вчера вечером началось расстройство желудка (зеленого цвета). Сегодня утром усилилось, знобит, боли в желудке и цвет черный! Это что такое? Два дня назад начала пить табл. Гемофер (при недостатке железа). Алёна

Уважаемая Алена! Скорее всего, это реакция на гемофер. Попробуйте отменить препарат и принимать какой-нибудь сорбент 3-4 раза в день 2-3 дня, например, Смекту, Вентер, Билигнин, Полифепан, Энтеросгель или др. Если будет высокая температура (38 градусов и выше), или обильный жидкий стул с обезвоживанием, или не будет эффекта от сорбентов в течение суток – обращайтесь к врачу.

С уважением,
Светлова Ирина Олеговна,
врач-гастроэнтеролог
к.м.н., доцент

14.05.2010

Добрый день! У меня болит живот и отдает в право от пупка. Выпила но-шпу, она не помогает. Подскажите, что делать? Анна

Уважаемая Мария! Мало информации, чтобы дать обоснованный совет. Боль может оказаться симптомом какой-нибудь несерьезной мелкой неприятности, типа кишечной колики, а может быть и аппендицит или гинекологическая патология. В такой ситуации лучше гипердиагностика, чем пропустить «острый живот». Советую обратиться к хирургу в поликлинику или в приемное отделение больницы скорой помощи, пусть хирурги живот попальпируют, проверят анализ крови и решат, что делать дальше.

С уважением,
Светлова Ирина Олеговна,
врач-гастроэнтеролог
к.м.н., доцент

14.05.2010

Здравствуйте! Предыстория: в свои 17 лет (в феврале) почуствовал боль в животе, которая продолжалась почти всю неделю, в пятницу не выдержал и пошёл в больницу, после чего меня записали на ФГС, так как это сразу сделать не представилось возможным, записали на определённый день, а до этого выписали лекарство (уже не помню какое), не в этом суть в общем, болеть, конечно, перестало после приёма лекарств. Пришёл на ФГС, после чего мне сказали, что у меня язва ДПК. Потом значит меня отправили к врачу, она мне выписала полгрузовика лекарств и уколов (каких-то дорогих по тем временам) после курса лечения, сказали что всё хорошо у меня. Год-полтора, наверное, не болело, потом снова началось, после чего снова ФГС и снова подтверждение язвы ДПК, пару лет после чего у меня это всё повторялось раз в год, теперь это стало повторяться два раза в год. Как-то отправляли меня ещё на УЗИ, после чего мне сказали, что у меня повышенный уровень сока или что-то в этом роде. В общем больше я в больницы не ходок, смысла не вижу. Вопрос в следующем, так как я лечусь сам, прошу Вас посоветовать какое-нибудь эффективное лекарство от язвы ДПК, после всех курсов лечился сам Омезом, очень помагал несколько лет, потом что-то эффективность слабая стала, перешёл на Альмогель, но что-то начинаю думать, что и он слабже начинает действовать, посоветуйте, пожалуйста, что-нибудь. Сергей

Здравствуйте, Сергей! То, что с Вами происходит, – это какой-то каменный век и полное безобразие. Самолечение при язве, да еще альмагелем, чревато серьезными осложнениями, типа желудочного кровотечения или прободения язвы. Вы обязательно должны обратиться к врачу, так как от рецидивов язвенной болезни Вас должны вылечить, чтобы больше не было обострений. Для этого Вы должны пройти обследование на пилорический хеликобактер – микроб, который вызывает гастрит и способствует рецидивированию язвы. Это исследование могут сделать во время ФГС или определить антитела в крови. Если хеликобактер найдут, Вам должны назначить на две недели курс антибиотиков и мощный надежный блокатор кислотообразования в желудке (лучше не омепразол, а более сильный, и в большей дозе, чем по стандарту, учитывая высокую кислотность желудочного сока, например, Париет 40 мг 2 раза в день, или Нексиум по 80 мг 2 раза в день или др.). Перед лечением нужно проверить состояние печени и почек, так как лекарственная нагрузка предстоит большая. А после схемы 2-4 недели надо принимать препараты кишечных бактерий (например, Биовестин 6 мл в день) для профилактики дисбактериоза и продолжать прием препарата, подавляющего выработку желудочного сока. Если Вы избавитесь от хеликобактера, то вероятность, что язвы больше не будет – 97-98%. Если хеликобактер не найдут, что маловероятно, так как в России уже к 20 годам заражаются им 80% населения, то нужно в следующий раз его еще раз поискать. А пока для заживления язвы принимать 4-6 недель лекарство, круглосуточно подавляющее выработку желудочного сока (тот же париет, или нексиум, или ланзоптол, или ланзап по 1 таблетке утром и вечером до еды). Тогда язва заживет. А альмагель только на 15-30 минут связывает выделившуюся кислоту в просвете желудка, это не лечение. Если же кислотность желудочного сока очень высокая, а это тоже желательно проверить, то нужно думать о других, более редких причинах язвобразования, но это уже задача врача. В этом случае лекарства, подавляющие выработку кислоты, надо принимать ежедневно хотя бы одну дозу, пока не разберутся с причинами болезни. Эти препараты не очень вредные, их можно принимать десятки лет. Кроме того, категорически при язвенной болезни нельзя курить, нужно регулярно и правильно питаться, высыпаться, не поднимать тяжести, поменьше нервничать. Вы ходите в Интернет – почитайте про язвенную болезнь, много сайтов для больных, там все написано. Но лечиться все равно нужно под наблюдением врача. Цели лечения: 1) Для заживления язвы – круглосуточно подавлять кислотообразование в желудке в течение 4-6 недель. 2) Для профилактики рецидивов язвы – вывести хеликобактер из желудка раз и навсегда, больше им не заражаться. Или, если нет хеликобактера, а кислотность высокая, все время принимать ингибиторы кислотообразования. Всего доброго.

С уважением,
Светлова Ирина Олеговна,
врач-гастроэнтеролог
к.м.н., доцент

14.05.2010

Здравствуйте! 2 года назад результаты ФГДС: Слизистая пищевода в дистальной трети эрозирована, с вкраплениями фибрина. Отмечается гастро-эзофагеальный рефлюкс. Кардиальный жом звездчатой формы. Желудок обычных размеров, в просвете небольшое количество светлой слизи. Стенки эластичны, перистальтика равномерная. Рельеф и окраска слизистой физиологические. Привратник округлой формы. B.d. деформирована по задней-нижней стенке без воспалительных изменений. Верхний, нисходящий отделы без изменений. DS: Эрозивный рефлюкс-эзофагит. Умеренная рубцовая деформация луковицы ДПК. Лечение омез 1 т. 1 раз 10 дней, ганатон 3 раза 3 недели и все. На данный момент беспокоят боли и жжение особенно ночью. Что значат данные ФГДС, правильно ли поставлен диагноз, какая степень заболевания? Что можно принимать на данный момент? Какие нужны обследования, где можно их пройти (я живу в Нижнем Тагиле, у нас на платный прием к гастроэнтерологу нужно записываться за месяц и то нет талонов, а к бесплатному вообще не попадешь), и сколько это стоит. Каким должен быть и образ жизни (если можно, то подробно). Заранее благодарна. Лариса

Уважаемая Лариса! У Вас гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь (ГЭРБ) с эрозивным эзофагитом и язвенная болезнь 12-перстной кишки. Чтобы установить степень эзофагита, должно быть описано количество, величина эрозий и площадь окружности пищевода, которые они занимают. Эти заболевания не обязательно должен лечить гастроэнтеролог, может и терапевт. При ГЭРБ показано дробное питание малыми порциями, ранний ужин за 2-3 часа до сна, после еды не ложиться, не наклоняться, не поднимать тяжести. Желательно под ножки кровати положить подставку на 10-15 см, чтобы спать на наклонной плоскости с поднятым головным концом кровати (ровно на плоской подушке, не согнувшись). Избегать жирной, жареной, кислой, сильно сокогонной пищи. Препараты типа Омеза 2 раза в день, то есть по 20-30-40 мг утром и вечером до еды при эрозивном эзофагите назначают на 8-12 недель, а при рецидиве (возобновлении) изжоги или эрозий – на полгода. При этом есть лекарства и сильнее омеза. Ганатон тоже можно принимать 1-2 месяца. Желательно поменьше нервничать и иметь регулярный стул. Подробности поищите в Интернете, информации о ГЭРБ, так же как и о язвенной болезни для пациентов очень много. Что касается язвы, от которой остались рубцы в луковице ДПК, то Вам строго показана диагностика и уничтожение пилорического хеликобактера. Современные схемы для лечения хеликобактериоза назначаются на 2 недели, включают сильные блокаторы кислотности 2 раза в день и 2 или 3 антибактериальных препарата (в России не назначают метронидазол, так как наш хеликобактер к нему потерял чувствительность). Если Вам назначат лечение хеликобактера, можете еще раз со мной посоветоваться. Бегите к терапевту и лечитесь. Все Ваши проблемы могут быть ликвидированы.

С уважением,
Светлова Ирина Олеговна,
врач-гастроэнтеролог
к.м.н., доцент

14.05.2010

Здравствуйте, доктора, помогите советом. Ежедневно, независимо от дневного рациона питания, скапливаются газы. Со специфическим запахом, очень сильным. Это мешает уже жить и нормально себя чувствовать в обществе. Иногда бывает жидкий стул, но в целом ничего по части желудочно-кишечного тракта больше не беспокоит. Отчего повышенное газообразование? Какие стоит сдавать анализы? Елена

Уважаемая Елена! Скорее всего, проблема связана с дисбактериозом кишечника. Можно сдать анализ кала на дисбактериоз, но можно и не сдавать, так как из примерно 500 разновидностей кишечных бактерий микробиологи могут определить только 8-10 видов. Показано исследование кала под микроскопом (копроскопия). Попробуйте полечиться без анализа кала на дисбактериоз, например, так: энтерол по 1 капсуле 2 раза в день до еды 2 недели, затем бактисубтил или фловинин по 2 капсулы 2 раза в день до еды 10 дней, затем биовестин-лакто по 6 мл 1 раз в день до еды 1,5-2 месяца. Параллельно можно принимать какой-нибудь ферментный препарат, содержащий желчь, по 1 драже с едой в течение 3-4 недель (например, фестал или холензим). Если не сработает или проблемы вернутся, есть и более мощные схемы. Но тогда уж лучше сначала обследоваться. Удачи!

С уважением,
Светлова Ирина Олеговна,
врач-гастроэнтеролог
к.м.н., доцент

11.05.2010

Здраствуйте! У меня такая проблема: постоянно проблемы со стулом, раза 2-3 в неделю, не зависимо от того, что кушаю, все время вздутие живота и боли. Стул по 3-4 раза в день, оформленный но мягкий и еще тонет. Все это длится с августа 2009 г. Наблюдалась по поводу дисбактериоза, серьезных причин не нашли. На ФГС легкая степень гастрита, капрограмма хорошая, кал на дисбактериоз – есть некоторые позиции чуть ниже нормы, доктор сказал, что ничего такого, что может вызвать такие проблемы. На целиакию анализы отрицательные, на паразитов тоже, инфекций пока не обнаружено ВПГ, ВПЧ и т.д. В крови есть мононуклеары – 3, ВЭБ отрицательный. УЗИ брюшной полости – патологий не выявлено. Вообщем по анализам все хорошо, небольшие улучшения есть при приеме “энтерола”, пробиотиков, также принимала 2 месяца настой (кора дуба, подорожник, тысячелистник, спорыш), на фоне приема трав чувствую себя отлично. В общем доктора от меня отпихнулись и сказали, что проблема с нервной системой, пропила грандаксин –  лучше не стало (с кишечником). Очень прошу помогите хотя бы советом. Да кстати, лет мне 27, планирую беременность, не хочется обострения и проблем. Екатерина

Уважаемая Екатерина! Действительно, больше похоже на синдром раздраженного кишечника. Из методов исследования нет информации о колоноскопии и лабораторных тестах на воспаление (СРБ, гамма-глобулины, СОЭ, лейкоциты, калпротектин) для исключения болезни Крона. Если и эти данные в порядке, попробуйте Метеоспазмил по 1 капсуле 3 раза в день до еды 2 недели, затем Тримедат по 0,2 г 3 раза в день 4 недели. Параллельно принимайте фитосборы, поскольку они хорошо помогают, меняя состав (зверобой, бадан, ромашка, подорожник, пустырник, валериана, фенхель, мелисса, и т.п.). Посоветуйтесь с фитотерапевтами, что лучше в Вашей ситуации. Иногда хороши бывают пчеловодческие препараты с прополисом. И долго принимайте пробиотики – полгода или год. Например, Бифиформ 2 капсулы в день или Биовестин-лакто 6-3 мл в день, можно чередовать. Беременность, особенно желанная, при функциональных расстройствах обычно приносит хорошее самочувствие, чаще всего все симптомы исчезают, чего Вам и желаю.

С уважением,
Светлова Ирина Олеговна,
врач-гастроэнтеролог
к.м.н., доцент

07.05.2010

Здравствуйте, уже длительный срок пью омез, он мне просто уже не помогает. Примерно полгода назад был у гастроэнтеролога, поставил диагноз гастрит. Сейчас беспокоят боли в области пупка. В основном в горизонтальном положении, и если надавливать на эту область. Чем можно заменить Омез, потому что он не помогает совсем уже мне? Благодарю. Виктор

Уважаемый Виктор! Гастрит сам по себе боли не вызывает, тем более возле пупка, при надавливании и в горизонтальном положении. Причина болей явно другая, поэтому омез и не помогает. Думаю, что надо перестать его принимать. Причина болей в этой зоне может быть разная, например, воспаление лимфоузлов (мезаденит), или воспаление и просто повышенная чувствительность нервных сплетений, расположенных в этом месте, или аномальное расположение сосудов у высоких и худых людей, или (реже и менее вероятно) – панкреатит. Есть и еще более редкие и экзотические причины. Все это надо уточнить и в зависимости от результатов обследования назначить лечение. Если бы я имела возможность расспросить Вас поподробнее, попальпировать живот, послушать фонендоскопом брюшные сосуды (нет ли шума), оценить особенности строения тела и прочее, какая-то из гипотез стала бы более вероятной. Поскольку мы в разных городах, поищите доктора у себя на месте, обследуйтесь, проблема решится. Советую после еды не ложиться часа 2 и постоять с полчаса в коленно-локтевом положении. Это иногда облегчает боль. Выздоравливайте.

С уважением,
Светлова Ирина Олеговна,
врач-гастроэнтеролог
к.м.н., доцент

06.05.2010

Здравствуйте. Поставили Д/З в 70 лет – панкреатит, холецистит, цистит, эрозия желудка, назначили лечение: ранитизин, метронидазол, омепразол, пропили весь курс, повторили, а улучшения нет. Кал белый, пенится, в животе и боку боли. После еды, даже стакана чая, бегу сразу же в туалет. Помогите, подскажите, может, другие препараты попить? Биовестин? Он мне поможет? Ольга

Уважаемая Ольга! Возможно, Ваши неприятности связаны с недостатком ферментов поджелудочной железы и дисбактериозом. Можно попробовать Вентер или Денол 4 раза в день по 1 таблетке за час до еды и на ночь 2 недели (от Денола кал темнеет) – это лечение слизистой желудка и для закрепления стула. Креон (или Микразим, Панцитрат, Эрмиталь) 10 тыс. ед. по 1 драже с едой 3-4 раза в день 4 недели, Энтерол по 1 капсуле 2 раза в день 10 дней, а потом Биовестин-лакто по 6 мл в день натощак 1-1,5 месяца. Эту схему лучше согласовать с лечащим врачом, убедиться, что нет противопоказаний. Возможно, дополнительно потребуются спазмолитики, так как сохраняются боли. Желаю выздоровления.

С уважением,
Светлова Ирина Олеговна,
врач-гастроэнтеролог
к.м.н., доцент

06.05.2010

Здравствуйте, мне 35 лет. Месяц назад мне удалили желчный пузырь, диагноз – полип. Лечение п. операции – омез, мезим 10000 и квамател 40 мг на ночь, диету соблюдаю строго. Самочувствие только ухудшается, тупая боль в правом боку, горечь во рту, иногда тошнота, но хуже всего ночью, просыпаюсь от сильной боли в области желудка, если выпить тёплой воды, становится легче. Сопутствующие заболевания – хр. панкреатит, эрозивный бульбит, рефлюкс-эзофагит, гастрит, бывают запоры. Это нормальное состояние после операции или нет? Какое лечение, по вашему мнению, наиболее адекватно при таких симптомах? Галина

Уважаемая Галина! Период адаптации после холецистэктомии длится от 3-6 месяцев до года, редко дольше. Ваши неприятности связаны, скорее всего, с нарушением двигательной функции 12-перстной кишки. Диету держите. Для уменьшения забросов желчи в желудок и пищевод попробуйте мотилиум по 10 мг 3 раза в день до еды 4 недели. Продолжите препарат из группы омепразола (можно Ультоп 20 мг, Ланзоптол 30 мг, Нексиум 20 мг или Париет 20 мг) по 1 таблетке 2 раза в день до еды 4 недели. Перед сном попробуйте 1 ст. ложку геля Маалокс или Релцер 2-4 недели. Стул желателен регулярный, свободный. После окончания Маалокса для улучшения качества желчи и содействия работе кишечника показан Урсосан или Урсофальк по 1 капсуле 2-3 раза в день с едой (доза в зависимости от массы тела: 1 капсула 250 мг на 25 кг массы тела, начинать постепенно с 1 капсулы в день, курс любой – 3-6 месяцев и хоть всю жизнь). Легким послабляющим эффектом обладает Биовестин 3-6 мл 1 раз в день 1-1,5 месяца. Если неприятности будут продолжаться дольше 3-х месяцев – нужно обследоваться снова (УЗИ, гепатобилисцинтиграфия, ФГДС с осмотром 12-перстной кишки, биохимические анализы). Лечение согласовать с лечащим врачом, обсудить возможные противопоказания. Выздоравливайте.

С уважением,
Светлова Ирина Олеговна,
врач-гастроэнтеролог
к.м.н., доцент

06.05.2010

Добрый день! Мне 33 года. Частые боли с правой стороны на уровне пупка, иногда без причины появляется твердое образование размером 8 см длиной и 3 см шириной, при прикосновении (даже легком) – резкая колющая боль, минуты через 3-5 проходит. Подскажите, какие анализы и обследования мне нужно сделать и к какому врачу обратиться на очный прием. Заранее, спасибо! Светлана

Уважаемая Светлана! Начинать всегда лучше с визита к терапевту. Ведите дневник, фиксируйте неприятности, попытайтесь уловить связь с внешними обстоятельствами (еда, стул, физические нагрузки и т.п.). Показано УЗИ брюшной полости в положении лежа и стоя. Появляющееся болезненное плотное образование может быть подвижной почкой, менее вероятно – кишечной петлей или кистой. После осмотра доктора и УЗИ станет ясно, нужны ли какие-то дополнительные исследования. Сходите к гинекологу. Всего доброго.

С уважением,
Светлова Ирина Олеговна,
врач-гастроэнтеролог
к.м.н., доцент

04.05.2010

Здравствуйте, доктор, около трех лет уже меня мучает атопический дерматит. Лечение у дерматологов мне не помогает совсем. Мой врач советует обратиться к гастроэнтерологу. Я уже сдавала различные анализы, но ни паразитов, ни лямблий у меня не обнаружено. УЗИ показало небольшой застой в желчном. Может, стоит попробовать какое-либо очищение кишечника? Например, колоногидротерапию? Елена

Здравствуйте, Елена! Гидроколонотерапия иногда при дерматитах дает эффект, но лишь кратковременный, а затем проблема может усугубиться, так как после промывания в кишке иногда размножается вредная микрофлора. Попробовать можно, но результат непредсказуем. Кроме того, гидроколонотерапию нельзя повторять часто, так как кишка будет травмироваться и может стать еще хуже. Если все же решитесь, то обязательно во время курса и сразу после в течение 1,5 – 2-х месяцев принимайте пробиотики (например, Биовестин-лакто 3-6 мл в день или др.). Вместо гидроколонотерапии можно попробовать навести порядок в кишке с помощью конкурентных пробиотиков и сорбентов, то есть в течение 10-14 дней принимать Энтерол по 1 капсуле 2 раза в день до еды и 2-4 таблетки лактофильтрума или бактистатина между приемами пищи и на ночь, а затем Биовестин-лакто. Кроме того, состояние кожи очень зависит от нервной системы, сна, качества пищи. Ведите пищевой дневник, старайтесь уловить связи между пищей и кожей. Максимально приведите в порядок образ жизни, высыпайтесь, отдохните. Показано обследование на целиакию (ИФА антител к глиадину и тканевой трансглютаминазе). При застое в желчи полезен Хофитол или Урсосан. Для укрепления барьерной функции кишечника и печени иногда назначают Фосфонциале. Желаю выздоровления.

С уважением,
Светлова Ирина Олеговна,
врач-гастроэнтеролог
к.м.н., доцент

04.05.2010

Доброго времени суток! Очень нужен совет специалиста. Давно беспокоит желудок, неприятные ощущения, острые боли – наличие гастрита. Делала ФГДС, результат такой – хр. гастрит с диффузной атрофией слизистой, недостаточность кардии. H.P.(++). Выписали антибиотики для эрадикации HP. Меня волнует атрофия – насколько это серьезно? Какое лечение стоит пройти, куда обратиться? Заранее спасибо! Анна

Здравствуйте! Атрофический гастрит – это уменьшение числа желудочных желез и клеток в железах, что видно только под микроскопом, а невооруженным глазом при эндоскопии не видно. Атрофический гастрит приводит к существенному снижению кислотообразования в желудке, так как исчезают клетки, выделяющие кислоту. Таким образом, по современным представлениям, эндоскописты не должны использовать термин «атрофический гастрит», так как в оценке атрофии они очень часто ошибаются. Доказать атрофию в желудочной слизистой можно с помощью множественной биопсии и гистологического исследования биоптатов, или при исследовании кислотообразующей функции желудка после мощного стимулятора секреции (сейчас почти нигде это не делают), а из современных методов – исследование крови на гастропанель (можете поискать информацию об этом в Интернете). Атрофический гастрит повышает риск развития рака желудка, особенно если есть больные раком желудка близкие родственники. Риск рака желудка примерно 1:50 (то есть из 50 больных выраженным атрофическим гастритом примерно у 1 будет рак желудка). Поэтому при атрофическом гастрите показана эрадикация (уничтожение) хеликобактера, так как после эрадикации существенно снижается онкологический риск. Так что есть у Вас атрофический гастрит или нет, пока точно неизвестно. Но, поскольку есть боли и воспаление, провести эрадикацию полезно. Только схема лечения должна быть самой надежной, самой лучшей, самой аккуратной. Можете посоветоваться насчет схемы с гастроэнтерологом. Желаю успеха.

С уважением,
Светлова Ирина Олеговна,
врач-гастроэнтеролог
к.м.н., доцент

04.05.2010

Здравствуйте, подскажите мне, пожалуйста: каждое утро в носоглотке скапливается слизь. Прочищаю. В течение дня образуется ком в горле. Не могу от этого избавиться в течение года. Промываю регулярно нос. Неприятный запах изо рта. Кажется, что исходит из желудка, а не от носа все-таки. По утру не завтракаю, организм еще не готов как будто бы. В обед возникает сильное чувство голода, ем разово и много, по-другому не могу. Следующий перекус в течение дня, и плотный ужин. Мучает жидкий стул по вечерам. Иногда как пластелин. болей особых нет, иногда бывает побаливает слева под ребрами. Что со мной может быть, какие анализы идти сдавать? Спасибо за внимание к моей проблеме. Екатерина

Здравствуйте, Екатерина! Слизь в носоглотке чаще является проблемой, относящейся к компетенции ЛОР-врача. Однако иногда это может быть связано с забросом желудочного содержимого в пищевод и глотку (слизистая защищается от кислоты избыточной секрецией). Поскольку у Вас есть и другие симптомы со стороны органов пищеварения, стоит обследоваться. Полезно сделать ФГС, УЗИ брюшной полости, сдать анализ кала на цисты лямблий, копроскопию, эластазу, дисбактериоз. В любом случае режим питания у Вас безобразный и нуждается в коррекции. Чтобы в обед и в ужин от сильного голода не объедаться, устраивайте себе на работе поздний завтрак – часов в 10-11 – творожок, йогурт, кашу, чай, и полдник – можно кусок сыра, рыбы, вареного мяса с хлебом и каким-нибудь овощем или фруктом, кефир. Ешьте медленно и очень хорошо жуйте, тогда всем ниже расположенным органам легче работать. Возможно, понадобится и медикаментозное лечение, но это – по результатам обследования. А пока начните с гигиены питания. Выздоравливайте.

С уважением,
Светлова Ирина Олеговна,
врач-гастроэнтеролог
к.м.н., доцент

04.05.2010

Здравствуйте. Мне 21. Строго после обеда (независимо от того, что было на обед) начинается бурление, отрыжка и немножко изжога. Утром и вечером все прекрасно. Единственное, что на обед в будние дни первое не получается поесть, потому что на работе негде. Что это может быть? Болей никаких у меня нет. Дмитрий

Здравствуйте, Дмитрий! Бурление, отрыжка и изжога сразу после еды – свидетельство недостаточного расслабления желудка и его усиленной двигательной функции. Предполагаю 3 возможных причины для Ваших неприятностей в обед: 1) отличающееся от завтрака и ужина качество и количество пищи; 2) более быстрая еда в обед; 3) еда на фоне стресса. Чтобы проверить гипотезы, нужно: 1) вести несколько дней пищевой дневник, то есть подробно записывать, что и сколько съел в завтрак, обед и ужин; 2) попробовать в обед есть медленнее; 3) сравнить ощущения после обеда в рабочий и выходной день, попробовать в обед сходить в кафе и не торопиться. Если какие-то выводы появятся, нужно соответствующим образом изменить поведение. Если ничего не получится, можно какое-то время (2-4 недели) попробовать перед обедом принимать ложку альмагеля, а в начале еды 1 драже холензима. А может быть, в результате наблюдений за собой появятся еще какие-нибудь идеи у самого. В принципе, симптомы не очень тревожные, но, если изжога станет чаще и интенсивней, полезно сделать ФГС и полечиться более серьезно. Всего хорошего.

С уважением,
Светлова Ирина Олеговна,
врач-гастроэнтеролог
к.м.н., доцент

04.05.2010

Добрый день, при взятии биопсии врачь дал заключение: Недостаточность кардии О-I ст. Атрофический гастрит. Дуадено-гастральный рефлюкс. В исследуемом материале покровно-ямочный эпителий с профсифералгией (может, не точно пишу), с кишечной метоплазмой, без выраженных признаков атипии. Дефектов слизистой нет. Пищевод свободно проходим. Слизистая пищевода неровная, тусклая, рыхлая. Розового цвета. Z-линия выше линии ЛЖС на 1 см, неровная. Кардия смыкается не полностью, Проходима. В просвете желужка определяется незначительное количество мутной, светлой, пенистой слизи. Складки деформированы, уменьшены, расположены в виде продольных прилежащих друг к другу валиков. Слизистая неровная, тусклая, рыхлая, истончена. Сосудистый рисунок усилен. Очагово-гиперемирована в виде пятен. Явления воспаления больше выражены в антральном отделе. Привратник проходим, сомкнут. Луковица ДПК сферической формы, слизистая 12-перстной кишки неровная, рыхлая, мутная. Розовая, дефектов слизистой нет. Биопсия Нр. Анализ крови: гемоглобин – 148, Эритроциты – 5,19; Цвет показатель – 0,9; Ретуколоциты Ht 47.1%; Тромбоциты 222,0; Лекоциты – 8,1; Палочкоядерные – 4; Сегментоядерные – 57,1; Эозинофилы – 2; Моноциты – 8,1; Лимфоциты – 28,8; Скорость оседания эритроцитов – 7. Мне 63 года. Буду очень признательна за ответ, что мне делать, какую диету соблюдать, что можно кушать и как лечиться? Нина

Здравствуйте, Нина! Вы очень хорошо описали ФГС, но для назначения лечения этого мало. Нужно знать Ваши жалобы, историю болезни, родословную, состояние других органов (печень, желчный пузырь, кишечник, сердце, почки, щитовидная железа, углеводный и липидный обмен, индекс массы тела и др.) Кроме того, нельзя назначать лечение заочно, не видя пациента. Поэтому могу дать лишь некоторые общие рекомендации. У Вас очевидные признаки воспаления в пищеводе, желудке и 12-перстной кишке, связанные с неправильной эвакуацией, нарушениями функции клапанов на границах органов и высоковероятной хеликобактерной инфекцией. Иногда такие изменения могут быть связаны с приемом лекарств, особенно противовоспалительных, в том числе аспирина. Анализ крови у Вас в порядке. Рекомендуется еда 4-5 раз в день, малыми порциями, есть медленно, хорошо жевать, ничего не жарить (только вареное, тушеное, пареное, паровое), после еды не ложиться 2 часа, лучше ходить. Ужинать за 3 часа до сна. Поднять головной конец кровати (не подушки, а подставка под ножки кровати см 10-15). Избегать острых, кислых, жирных, грубых продуктов и блюд, не увлекаться сладким, цитрусовыми. Не есть редиску, редьку, зеленый лук. Ничем не злоупотреблять. Полезны каши несладкие, рыба, вареное мясо нежирное, супы-пюре, паровые омлеты, масло растительное и немного. Колбаса, майонез, газировка, маринады запрещаются. С овощей и фруктов кожицу срезать, очень хорошо жевать. Из лекарств в такой ситуации обычно назначают ингибиторы желудочной секреции (группа омепразола и ему подобные), антациды (денол, маалокс), прокинетики (мотилиум). Обязательна эрадикация хеликобактера самой лучшей и надежной схемой, с пробиотиками. Но лекарства должен назначить врач после оценки всей необходимой информации. Желаю здоровья.

С уважением,
Светлова Ирина Олеговна,
врач-гастроэнтеролог
к.м.н., доцент

29.04.2010

Здравствуйте! Очень нужна Ваша помощь. Дело в том, что у меня болен брат 1985 г., машинист тепловоза ОАО ЧМЭК, наблюдается в поликлинике по месту работы, болеет 4-ый месяц. Жалобы – общая слабость, очень плохо ест, потеря в весе – за мес 15 кг. Говорит “ком в горле”, тошнит, скачки давления, в последнее время белки глаз немного пожелтели, в поликлинике лечат от гастрита, улучшений нет, только хуже. Он устал. Очень нужна консультация хорошего врача. Альфия

Уважаемая Альфия! Очень хочется помочь Вашему брату, но ваши доктора, наблюдая его 4 месяца, видимо, до сих пор не поставили правильный диагноз. Мне Вы прислали 4 строчки информации о его состоянии: 5 жалоб и ни одного анализа. Поставить диагноз в такой ситуации невозможно. Очевидно, что гастритом состояние брата объяснить нельзя. Но с подобными симптомами могут протекать самые разнообразные болезни – от невроза до описторхоза, вирусного гепатита и онкологии. Придется искать консультанта в Вашем городе. Попробуйте обратиться к главным городским специалистам, профессорам и доцентам мед. института. Сейчас почти все консультируют на клинических базах или в коммерческих центрах. Если не становится лучше, требуйте собрать консилиум, обследовать подробнее. Вы правильно беспокоитесь, но Интернет – это не то место, где нужно искать помощь в Вашем случае. Желаю здоровья Вам и Вашему брату.

С уважением,
Светлова Ирина Олеговна,
врач-гастроэнтеролог
к.м.н., доцент

27.04.2010

Моему сыну 18 лет, с детсва жалуется на боли в желудке, бывает сутки-двое не может есть. В возрасте 10 лет проходили УЗИ – сказали, что узкий желчный проход и с возрастом пройдет, мы терпеливо ждали, никакие обезбаливающие не помогают. В прошлом году брали кровь на анализ – плохих бактерий в желудке не показало, глотал “кишку” – восполительные стенки, поставили диагноз гастродуоденит. Были летом в обласной поликлинике – посоветовали не есть тяжелую пищу и все. А ведь болит сильно! лариса

Уважаемая Лариса! При воспалении в желудке у молодого человека чаще боли бывают голодные и после еды проходят или уменьшаются. Поскольку у Вашего мальчика боли с детства и усиливаются после еды, скорее всего, воспаление в желудке не является причиной болей. Возможно, имеется какая-то особенность или аномалия строения или положения органов в верхней части живота (желудка, 12-перстной кишки, сосудов, желчевыводящих путей или др.), которая мешает нормальной эвакуации пищи и пищеварительных секретов и требует сильных сокращений мышц органов, что может быть причиной болей. Понятно, что это только мои предположения. Хотелось бы на парня посмотреть, подробнее расспросить, тогда гипотезы стали бы более конкретными. Советую настаивать на обследовании, подчеркивая продолжительность и упорство болей. Надо искать причину. Добивайтесь подробного обследования, консультации квалифицированного гастроэнтеролога. Желаю успеха.

С уважением,
Светлова Ирина Олеговна,
врач-гастроэнтеролог
к.м.н., доцент

27.04.2010

Здравствуйте, от чего появляется тяжесть в животе? Стул стабильный, но не всегда оформленный. Бывает, что тошнит, но в основном тяжесть, тяжело дышать после еды. Питание регулярное, не жирное, не постное, все в норме. Много овощей в рационе. Единственное, совсем не пью кисло-молочку. Не ем мучное, иногда по вечерам пью пиво. К кому мне обратиться из врачей? Алексей

Тяжесть в животе после еды – признак нарушения двигательной работы органов (чаще всего – желудка). Тяжесть может быть при особом строении желудка (у худых высоких людей желудок в форме крючка или может быть опущен), или при недостаточном расслаблении мышцы желудка во время приема пищи (когда сильно повышается внутрижелудочное давление), или при повышенном тонусе и недостаточной эвакуаторной способности выходного отдела желудка (когда замедляется эвакуация пищи – «ленивый желудок»). Изредка тяжесть может быть следствием недостаточного кровоснабжения желудка из-за аномалий в сосудах. А может быть, Вы просто редко, помногу и быстро едите? Методов для диагностики причины Ваших неприятностей в реальной практике немного. Можно сделать УЗИ органов и сосудов брюшной полости, рентгенологическое исследование желудка и 12-перстной кишки. Может быть есть смысл начать с ФГС. Но это все делается натощак, а не после еды и может оказаться неинформативным. Почему не едите мучное? Если явно плохо переносите, можно сдать анализ крови на целиакию. Советую питаться чаще небольшими порциями (дробное питание), есть медленно, тщательно жевать. Иногда при тяжести помогает раздельное питание, т.к. смешанная пища дольше находится в желудке. После еды облегчает эвакуацию коленно-локтевое положение (животом вниз). Из препаратов облегчает эвакуацию и уменьшает тяжесть и тошноту Мотилиум (Мотилак) по 1 табл. 10 мг 3 раза в день за 20-30 минут до еды 4 недели. Но таблетки нельзя пить все время. Так что ищите лучше немедикаментозные приемы для облегчения ситуации. К врачу сходить полезно. А пива поменьше. Выздоравливайте.

С уважением,
Светлова Ирина Олеговна,
врач-гастроэнтеролог
к.м.н., доцент

27.04.2010

Здравствуйте! Моему сыну 18 лет, постоянно болит желудок после “тяжелой” пищи. ФГДС показал: слизистая желудка гиперемирована, отечная, бугристая, складки утолщены, перистальтика активна, умеренное кол-во мутной, пенистой слизи, привратник проходим, слизистая ДПК гиперемирована, разрыхлна. Есть косвенные признаки ДЖВП. Диагноз – гастродуоденит в стадии неполной ремиссии. Анализ крови показал – вредных бактерий нет. А гастроэнтеролога у нас нет, как помочь, особенно, когда сильные боли, а они бывают раз в две-три недели, школу пропускает, а скоро в армию. лариса

Зравствуйте! Учитывая, что мальчику скоро в армию, нужно постараться попасть в ту больницу, которая по приказу занимается обследованием призывников. Узнать о ней, вероятно, можно в поликлинике по месту жительства или в военкомате. Можно также обратиться в Комитет солдатских матерей, они могут посоветовать, как лучше поступить. С жалобами на повторяющиеся боли в животе нужно каждый раз обращаться в поликлинику, чтобы были записи в амбулаторной карте. Если нет гастроэнтеролога, лечение должен назначить терапевт. И никакого самолечения здесь быть не должно. Если что-то уже назначали и не помогло, нужно обращаться к зав. отделением поликлиники. Или просить направление на обследование и лечение в больницу. Рекомендовать лечение, не видя мальчика, я не могу. При боли можно попробовать принимать антациды (противокислотные препараты), например, Альмагель А или гели Маалокс, Релцер. А с серьезной терапией нужно разбираться на месте. Желаю успеха.

С уважением,
Светлова Ирина Олеговна,
врач-гастроэнтеролог
к.м.н., доцент

27.04.2010

Здравствуйте, Ирина Олеговна! У меня проблемы с кишечником, несколько лет назад я проходила обследование и лечение в одной из Челябинских клиник, и мне был поставлен диагноз – атония кишечника. Я прошла курс лечения, но через несколько месяцев все симптомы вернулись (каловые массы не выходят по 1 неделе, и кровотёчность из заднего прохода). На данный момент меня беспокоит отрыжка, при том не зависимо, кушала я или нет. Это повторяется раз по 50 подряд, может, потому что газы не могут выйти обычным способом. Меня это очень пугает. Принимаю регулярно таблетки сенаде и фуросемид (отекают оч. сильно голени ног). Юлия

Здравствуйте, Юлия! В первую очередь нужно разбираться, почему отекают ноги. Это может быть проявлением серьезной проблемы. Пить самостоятельно и бесконтрольно фуросемид – смерти подобно! Я не шучу: можно вызвать сердечную аритмию со смертельным исходом, так как фуросемид выводит из организма важные электролиты, в частности калий. За счет этого фуросемид усиливает и атонию кишечника. Кроме того, от мочегонных кал высыхает и плохо эвакуируется. Сенна тоже стул вызывает, а атонию кишки усиливает. Сочетание же сенны и фуросемида – это просто вредительство. Прекратить немедленно! Вы самолечением только усиливаете свои проблемы. Неужели не читала аннотации к фуросемиду и препаратам сенны? Нужно немедленно обратиться к врачу, рассказать о том, что Вы принимаете, и начать лечиться правильно. Поскольку Вы уже существенно ситуацию испортили сенной и фуросемидом, потребуется время на восстановление нормальной работы желудочно-кишечного тракта. Придется набраться терпения. Если Вам назначат пробиотики, что весьма вероятно, не забудьте про Биовестин, который обладает легким послабляющим эффектом. Правильно относитесь к своим проблемам: от отрыжки и запора еще никто не умер, а отеки на ногах, кровь в кале и особенно бесконтрольный прием фуросемида – это серьезно. Так что бегом к врачу. Желаю выздоровления.

С уважением,
Светлова Ирина Олеговна,
врач-гастроэнтеролог
к.м.н., доцент

23.04.2010

Здравствуйте, Ирина Олеговна! У меня уже почти целую неделю болит левый бок (боль монотонная, тупая, тянущая, чувствуется тяжесть и легкие покалывания). Переходит от левого подреберья вниз непосредственно в саму боковую часть и обратно – каждый день по-разному. На второй день поднималась температура до 38,6. В поликлинике не могут сказать ничего вразумительного. Все списывают на почки. Но я знаю, как болят почки, эта боль совсем другая. Что мне нужно потребовать с участкового, чтобы он смог поставить точный диагноз: направления на какие анализы и обследования? Подскажите, пожалуйста. И можете ли вы по этим симптомам предположить, что это может болеть? Заранее спасибо за ответ. Ольга

Здравствуйте, Ольга! Очень трудно дать правильный совет, так как мало информации. Сколько Вам лет? Чем болела раньше? Что предшествовало появлению болей? Как с месячными? Когда была у гинеколога? Делала ли когда-нибудь УЗИ брюшной полости? Не сопровождается ли боль расстройством или задержкой стула? Не было ли расстройств мочеиспускания? Откуда Вы знаете, как болят почки? Что Вам уже назначили для лечения, и какой результат? И еще с десяток вопросов. Кроме того, надо посмотреть, пощупать, постукать, лежа, и стоя, и на боку и т.д. Думаю, для начала нужно сдать общий анализ крови и мочи, сделать УЗИ брюшной полости лежа и стоя. Теоретически в этой зоне может болеть почка с мочеточником, левая часть толстой кишки, мышца, поднимающая ногу и еще всякие редкие события. Так что обследуйтесь, лечитесь и поправляйтесь.

С уважением,
Светлова Ирина Олеговна,
врач-гастроэнтеролог
к.м.н., доцент

Лечусь после антибиотиков – Вопрос инфекционисту

Если вы не нашли нужной информации среди ответов на этот вопрос, или же ваша проблема немного отличается от представленной, попробуйте задать дополнительный вопрос врачу на этой же странице, если он будет по теме основного вопроса. Вы также можете задать новый вопрос, и через некоторое время наши врачи на него ответят. Это бесплатно. Также можете поискать нужную информацию в похожих вопросах на этой странице или через страницу поиска по сайту. Мы будем очень благодарны, если Вы порекомендуете нас своим друзьям в социальных сетях.

Медпортал 03online.com осуществляет медконсультации в режиме переписки с врачами на сайте. Здесь вы получаете ответы от реальных практикующих специалистов в своей области. В настоящий момент на сайте можно получить консультацию по 74 направлениям: специалиста COVID-19, аллерголога, анестезиолога-реаниматолога, венеролога, гастроэнтеролога, гематолога, генетика, гепатолога, гериатра, гинеколога, гинеколога-эндокринолога, гомеопата, дерматолога, детского гастроэнтеролога, детского гинеколога, детского дерматолога, детского инфекциониста, детского кардиолога, детского лора, детского невролога, детского нефролога, детского онколога, детского офтальмолога, детского психолога, детского пульмонолога, детского ревматолога, детского уролога, детского хирурга, детского эндокринолога, дефектолога, диетолога, иммунолога, инфекциониста, кардиолога, клинического психолога, косметолога, липидолога, логопеда, лора, маммолога, медицинского юриста, нарколога, невропатолога, нейрохирурга, неонатолога, нефролога, нутрициолога, онколога, онкоуролога, ортопеда-травматолога, офтальмолога, паразитолога, педиатра, пластического хирурга, подолога, проктолога, психиатра, психолога, пульмонолога, ревматолога, рентгенолога, репродуктолога, сексолога-андролога, стоматолога, трихолога, уролога, фармацевта, физиотерапевта, фитотерапевта, флеболога, фтизиатра, хирурга, эндокринолога.

Мы отвечаем на 96.73% вопросов.

Оставайтесь с нами и будьте здоровы!

Влияние антибиотиков на восстановление и кинетику Saccharomyces boulardii у крыс

  • J. Adam, A. Banet и C. Banet-Bellet. Essais clinique contrôlée en double insu de l’ultra-levure lyophilisée. Étude multicentrique par 25 médecins de 388 cas. Газ. Мед. о. 84 : 2072–2078 (1977).

    Google ученый

  • Г. Линьи. Le Traitement par l’Ultra-Levure де неприятности intestinaux вторичных à l’antibiotherapie.Étude en double aveugle et étude clinique simple. Рев. Фр. Гастро-энтерол. 114 : 45–50 (1975).

    Google ученый

  • С. М. Суравиц, Г. В. Элмер, П. Спилман, Л. В. МакФарланд, Дж. Чинн и Г. ван Белль. Профилактика антибиотикоассоциированной диареи с помощью Saccharomyces boulardii: Проспективное исследование. Гастроэнтерология 96 : 981–988 (1989).

    Google ученый

  • С.М. Суравиц, Л. В. Макфарланд, Г. В. Элмер и Дж. Чинн. Лечение рецидивирующего колита Clostridium difficile ванкомицином и Saccharomyces boulardii . утра. Дж. Гастроэнтерол. 84 : 1285–1287 (1989).

    Google ученый

  • Дж. Г. Бартлетт. Антибиотикоассоциированный псевдомембранозный колит. Ред. Заражение. Дис. 1 : 530–538 (1979).

    Google ученый

  • Л.В. Макфарланд и В. Э. Штамм. Обзор заболеваний, связанных с Clostridium difficile . утра. Дж. Заразить. Контроль 14 : 99–109 (1986).

    Google ученый

  • Дж. Массо, О. Санчес, Р. Куши, Дж. Астуан и А. Л. Пароди. Бактериофармакологическая активность Saccharomyces boulardii при индуцированном клиндамицином колите у хомяков. Арцнейм.-Форш. 34 : 794–797 (1984).

    Google ученый

  • Г. Кортье, Ф. Дюбо и Р. Дюклюзо. Предупреждение вызываемой Clostridium difficile смертности гнотобиотических мышей с помощью Saccharomyces boulardii . Кан. Дж. Микробиол. 32 : 894–896 (1986).

    Google ученый

  • Г. В. Элмер и Л. В. Макфарланд. Подавление Saccharomyces boulardii чрезмерного роста токсигенных Clostridium difficile после лечения ванкомицином у хомяков. Антимикроб. Агенты Чемотер. 31 : 129–131 (1987).

    Google ученый

  • Х. Блехаут, Дж. Массо, Г. В. Элмер и Р. Х. Леви. Кинетика распределения Saccharomyces boulardii у человека и крысы. Биофарм. Утилизация наркотиков 10 : 353–364 (1989).

    Google ученый

  • Р. Дюклюзо и М. Бенсаада. Эффект сравнения уникального или непрерывного действия Saccharomyces boulardii на таблетку различных штаммов Candida в пищеварительном тракте нетоксичных бактерий. Энн. микробиол. (Институт Пастера) 133B : 491–501 (1982).

    Google ученый

  • Р. Д. Тутакер и Г. В. Элмер. Профилактика вызываемой клиндамицином смертности у хомяков с помощью Saccharomyces boulardii . Антимикроб. Агенты Чемотер . 26 : 552–556 (1984).

    Google ученый

  • Л. Лутвак и Б. Т. Бертон.Маркеры фекальных красителей в исследованиях метаболического баланса. утра. Дж. Клин. Нутр. 14 : 109–111 (1964).

    Google ученый

  • Дж. Франс, Дж. Х. М. Торнли, М. С. Д. Дханоа и Р. К. Сиддонс. О математике кинетики потока дигесты. Ж. Теор. биол. 113 : 743–758 (1985).

    Google ученый

  • Р. А. Кирос, К. Р. Понд, Э.А. Толли и У. Л. Джонсон. Выбор среди нелинейных моделей для изучения скорости прохождения жвачных животных. Дж. Аним. науч. 66 : 2977–2986 (1988).

    Google ученый

  • О. Альберт, Ж. Массо и М. К. Куртуа. Étude cinetique, количественный анализ перераспределения живой доли жанра Saccharomyces на различные участки пищеварительного тракта. Vie Med. 18 : 1604–1606 (1977).

    Google ученый

  • Ж.-П. Бутс, П. Бернаскони, М.-П. Ван Крейнест, П. Малдаг и Р. Де Мейер. Реакция слизистой оболочки тонкого кишечника человека и крысы на пероральное введение Saccharomyces boulardii . Педиат. Рез. 20 : 192–196 (1986).

    Google ученый

  • Г. Л. Манделл и М. А. Санде. Химиотерапия микробных заболеваний.В AG Gilman, LS Goodman, TW Rall и F. Murad (ред.), The Pharmacological Basis of Therapeutics , 7-е изд., Macmillan, New York, 1985, стр. 1115–1199.

    Google ученый

  • Дж. П. Сэнфорд. Руководство по антимикробной терапии , Antimicrobial Therapy, Inc., West Bethesda, MD, 1989.

    Google ученый

  • С. М. Finegold. Механизмы резистентности анаэробов и новые разработки в тестировании. Диагн. микробиол. Заразить. Дис. 12 : 117S–120S (1989).

    Google ученый

  • Д. ван дер Ваайдж, Дж. М. Бергуис де Врис и Дж. Э. К. Леккеркерт ван дер Вис. Колонизационная резистентность пищеварительного тракта мышей при системной антибиотикотерапии. Дж. Хиг. 69 : 405–411 (1971).

    Google ученый

  • Л. Кагер, Л.Лильеквист, А. С. Мальмборг и К. Э. Норд. Влияние профилактики клиндамицином на микрофлору толстой кишки у пациентов, перенесших колоректальные операции. Антимикроб. Агенты Чемотер . 20 : 736–740 (1981).

    Google ученый

  • D. J. Hentges, A. J. Stein, S. W. Casey и J. U. Que. Защитная роль кишечной микрофлоры от инфекции Pseudomonas aeruginosa у мышей: влияние антибиотиков на резистентность к колонизации. Заразить. Иммун. 47 : 118–122 (1985).

    Google ученый

  • С. М. Finegold. Анаэробные инфекции и колит Clostridium difficile , возникающие на фоне антибактериальной терапии. Скан. Дж. Заразить. Дис. Доп. 49 : 160–164 (1986).

    Google ученый

  • %PDF-1.4 % 277 0 объект > эндообъект внешняя ссылка 171 107 0000002613 00000 н 0000003473 00000 н 0000003930 00000 н 0000004155 00000 н 0000004653 00000 н 0000005059 00000 н 0000013488 00000 н 0000014181 00000 н 0000014383 00000 н 0000014850 00000 н 0000019096 00000 н 0000019687 00000 н 0000020100 00000 н 0000023715 00000 н 0000024260 00000 н 0000024720 00000 н 0000030605 00000 н 0000031128 00000 н 0000031547 00000 н 0000035687 00000 н 0000036489 00000 н 0000037036 00000 н 0000049124 00000 н 0000049911 00000 н 0000050265 00000 н 0000055564 00000 н 0000056273 00000 н 0000056792 00000 н 0000061611 00000 н 0000061705 00000 н 0000061747 00000 н 0000064435 00000 н 0000065290 00000 н 0000066058 00000 н 0000066822 00000 н 0000067578 00000 н 0000068324 00000 н 0000069056 00000 н 0000069865 00000 н 0000070523 00000 н 0000070645 00000 н 0000070707 00000 н 0000070829 00000 н 0000070891 00000 н 0000071013 00000 н 0000071075 00000 н 0000071197 00000 н 0000071259 00000 н 0000071381 00000 н 0000071443 00000 н 0000071565 00000 н 0000071627 00000 н 0000071749 00000 н 0000071811 00000 н 0000071928 00000 н 0000072050 00000 н 0000072112 00000 н 0000072234 00000 н 0000072296 00000 н 0000072418 00000 н 0000072480 00000 н 0000072602 00000 н 0000072664 00000 н 0000072761 00000 н 0000072824 00000 н 0000072923 00000 н 0000073021 00000 н 0000073119 00000 н 0000073216 00000 н 0000073313 00000 н 0000073409 00000 н 0000073506 00000 н 0000073603 00000 н 0000073700 00000 н 0000073796 00000 н 0000073893 00000 н 0000073989 00000 н 0000074084 00000 н 0000074182 00000 н 0000074279 00000 н 0000075049 00000 н 0000075105 00000 н 0000075686 00000 н 0000075772 00000 н 0000076005 00000 н 0000076068 00000 н 0000076198 00000 н 0000076259 00000 н 0000076356 00000 н 0000076417 00000 н 0000076524 00000 н 0000076585 00000 н 0000076687 00000 н 0000076748 00000 н 0000076893 00000 н 0000076954 00000 н 0000077061 00000 н 0000077123 00000 н 0000077215 00000 н 0000077277 00000 н 0000077381 00000 н 0000077442 00000 н 0000077561 00000 н 0000077623 00000 н 0000077738 00000 н 0000002861 00000 н 0000000017 00000 н трейлер ] >> startxref 0 %%EOF 171 0 объект > /Контуры 253 0 R /Имена 124 0 Р /PageLabels 167 0 R /Страницы 122 0 Р /OpenAction 169 0 Р /PageLayout /Одностраничный /PageMode /UseOutlines /Нитки 123 0 R /Метаданные 170 0 R >> эндообъект 276 0 объект > поток xc“a`e`g`>

    Уникальная генетическая основа выраженной антибиотической активности высокой продукции уксусной кислоты пробиотическими дрожжами Saccharomyces cerevisiae var.Булардии

    1. Йохан М. Тевелейн1,2
    1. 1 Лаборатория молекулярной клеточной биологии, Институт ботаники и микробиологии, KU Leuven, B-3001 Leuven-Heverlee, Фландрия, Бельгия;
    2. 2 Центр микробиологии, VIB, B-3001 Левен-Хеверле, Фландрия, Бельгия
    1. ↵3 Эти авторы внесли одинаковый вклад в эту работу.

  • Авторы, переписывающиеся: johan.thevelein{at}kuleuven.vib.be, maria.foulquie{at}kuleuven.vib.be
  • Аннотация

    Дрожжи Saccharomyces boulardii используются во всем мире в качестве популярного коммерческого пробиотика, но основа их пробиотического действия остается неясной. это считается конспецифичным с почкующимися дрожжами Saccharomyces cerevisiae , которые обычно используются в классических пищевых продуктах.Они имеют почти идентичную последовательность генома, что делает генетический основа пробиотической активности в S. boulardii вызывает недоумение. Теперь мы показываем, что S. boulardii продуцирует при 37°C необычно высокие уровни уксусной кислоты, которая сильно ингибирует рост бактерий при диффузии в лунки агара. анализов и может иметь жизненно важное значение для его уникального применения в качестве пробиотика среди дрожжей. Использование объединенной сегрегантной полногеномной последовательности анализ с S.boulardii и S. cerevisiae нам удалось картировать основные QTL и идентифицировать мутантные аллели SDh2 и WHI2 в качестве причинных аллелей. Оба гена содержат SNP, уникальный для S. boulardii ( sdh2 F317Y и whi2 S287* ), и полностью ответственны за высокое производство уксусной кислоты. Штаммы S. boulardii демонстрируют различные уровни продукции уксусной кислоты в зависимости от числа копий аллеля whi2 S287* .Наши результаты предлагают первое молекулярное объяснение того, почему S. boulardii может оказывать пробиотическое действие, в отличие от S. cerevisiae . Они впервые раскрывают молекулярно-генетическую основу признака, связанного с пробиотическим действием, у S. boulardii и показывают, что антибактериальная активность пробиотического микроорганизма может быть обусловлена ​​штаммоспецифичными мутациями в пределах одного и того же штамма. разновидность. Мы предполагаем, что приобретение антибактериальной активности за счет подкисления среды давало избирательное преимущество. до С.boulardii в его экологической нише и для его применения в качестве пробиотика.

    Некоторые микроорганизмы нашли полезное применение в качестве пробиотиков у людей (Macfarlane and Cummings 2002; Senok et al. 2009; Butel 2014; Szajewska 2016), животноводстве (Chaucheyras-Durand and Durand 2010; Hou et al. 2015) и аквакультуре ( Verschuere и др., 2000; Balcazar и др., 2006). Пробиотики — это живые микроорганизмы, которые приносят пользу здоровью хозяина.Они состоят в основном из бактериальных штаммов и также один специфический штамм дрожжей Saccharomyces cerevisiae var. boulardii ( S. boulardii ) (Elmer et al. 1996; Guandalini 2011). Имеются многочисленные клинические данные о полезном применении пробиотиков при лечении множественных желудочно-кишечных расстройств. (Гуандалини 2008, 2011; Макфарланд 2009). Это также верно для дрожжей S. boulardii (McFarland 2010; Girardin and Seidman 2011; Currò et al.2017). Это единственный штамм дрожжей, который прописывается в качестве пробиотика при желудочно-кишечных заболеваниях и доступен в продаже. из аптек по всему миру. Исследования на животных моделях и клинические испытания на пациентах показали его эффективность против многих кишечные заболевания, в том числе болезнь Крона (McFarland 2010), язвенный колит (Guslandi et al. 2003), антибиотикоассоциированная диарея (McFarland et al. 1995; Duman et al. 2005; Kotowska et al. 2005), проявления воспаления кишечника у пациентов с ВИЧ (Villar-García et al.2015) и рецидивирующие инфекции Clostridium difficile (McFarland et al. 1994; McFarland 2009). Также известно, что S. boulardii облегчает диарею в результате желудочно-кишечных инфекций, вызванных бактериальными энтеропатогенами (Czerucka et al. 2007). Некоторые штаммы S. cerevisiae также обладают пробиотическими свойствами (Martins et al. 2007; Zanello et al. 2011a,b), но о защите от кишечных бактериальных патогенов не сообщалось. Их филогенетическое родство с S.boulardii не известен.

    Происхождение S. boulardii можно проследить до Юго-Восточной Азии, где он был впервые выделен из плодов личи и мангостина в 1920 году Генри Буларом. (МакФарланд, 2010). Хотя ранее он считался другим видом, современные методы молекулярной филогенетики предполагают, что это разновидность пекарских дрожжей, Saccharomyces cerevisiae (McCullough et al. 1998; Mitterdorfer et al.2002 г.; ван дер Аа Кюле и Йесперсен, 2003 г.; Эдвардс-Инграм и др. 2004 г.; Постераро и др. 2005 г.; Маккензи и др. 2008). Более поздний анализ последовательности всего генома показал, что S. boulardii имеет очень сходную геномную последовательность с S. cerevisiae (Khatri et al. 2013, 2017). Несмотря на это, S. boulardii проявляет несколько различных метаболических и физиологических характеристик. Он демонстрирует гораздо лучшую устойчивость к кислотным условиям. сродни желудочной среде (Fietto et al.2004 г.; Эдвардс-Инграм и др. 2007 г.; Касио и др. 2013), обладает повышенной способностью к псевдогифальному переключению (Edwards-Ingram et al. 2007) и лучше развивается при 37°C (Fietto et al. 2004). Остается неясным, насколько эти отличительные свойства важны для его пробиотической активности.

    Было предложено несколько механизмов пробиотического действия S. boulardii . К ним относятся модуляция продукции цитокинов (Dalmasso et al., 2006; Mumy et al., 2006).2008), стимуляция продукции иммуноглобулина А против C. difficile токсина А (Qamar et al. 2001) и деградация токсина и рецепторов токсина хозяина секретируемой протеазой (Pothoulakis et al. 1993; Castagliuolo et al. 1996) . S. boulardii может сохранять целостность энтероцитарного барьера, стимулируя секрецию белков плотных контактов, и может исключать бактериальные патогены от взаимодействия с эпителиальными клетками кишечника путем прямого связывания с патогенами (Gedek 1999; Martins et al.2010 г.; Тиаго и др. 2012).

    Секреция антимикробных соединений в виде пептидов (бактериоцинов), перекиси водорода или органических кислот. занимает видное место среди общепринятых механизмов действия бактериальных пробиотиков (Cursino et al., 2006; Hutt et al., 2006; Pridmore et al., 2008; Girardin and Seidman, 2011; Ciorba, 2012; Dobson et al., 2012; O’Shea et al., 2012). ; Техеро-Сариньена и др., 2012 г.; Патель и Дюпон, 2015 г.; Лопес и др..2017). Никогда не сообщалось о прямом ингибирующем действии S. boulardii на рост бактерий или секрецию противомикробных соединений.

    В отличие от большинства штаммов S. cerevisiae , S. boulardii не обладает способностью образовывать споры, что серьезно затрудняет генетический анализ его специфических признаков, особенно тех, это может быть причиной его пробиотической активности (McCullough et al., 1998; van der Aa Kühle and Jespersen, 2003; Edwards-Ingram et al.2007). В результате генетические различия между S. boulardii и S. cerevisiae , которые могли бы объяснить превосходную пробиотическую активность первого, остались полностью неизвестными. С другой стороны, генетическая исследования сцепления, такие как анализ последовательности всего генома с объединенными сегрегантами в сочетании с анализом реципрокной гемизиготности (RHA) и обмен аллелями для выявления причинных аллелей и SNP оказались очень эффективными для анализа полигенной основы. коммерчески важных признаков у разных видов S.cerevisiae (Liti and Louis 2012; Swinnen et al. 2012).

    Цель этого исследования состояла в том, чтобы выяснить генетическую основу необычно высокого уровня уксусной кислоты, который, как мы обнаружили, вырабатывается с помощью S. boulardii , чтобы оценить их антибактериальную активность как возможное объяснение пробиотического действия S. boulardii и оценить, может ли эта генетическая основа служить специфической генетической сигнатурой для различения S.boulardii и S. cerevisiae .

    Результаты

    Классификация штаммов

    S. boulardii и S. cerevisiae с использованием полиморфизма длин амплифицированных фрагментов (AFLP) и анализа последовательности всего генома

    штаммов S. boulardii , полученных из различных источников (дополнительная таблица S1), были охарактеризованы вместе с 23 штаммами S.cerevisiae , один штамм S. mikatae и один штамм S. paradoxus с использованием полиморфизмов длин амплифицированных фрагментов (AFLP) и анализа последовательности всего генома. Все штаммов S. boulardii образовали единый кластер тесно связанных штаммов (дополнительная рис. S1). Кроме того, этот кластер из штаммов S. boulardii был включен в более крупный кластер из S. cerevisiae , который был лишь отдаленно связан с двумя другими видами Saccharomyces .Эти результаты подтвердили идентичность штаммов S. boulardii , использованных в этом исследовании, и подтвердили, что S. boulardii и S. cerevisiae настолько тесно связаны, что, вероятно, принадлежат к одному виду.

    Оценка

    S. boulardii на противомикробную активность по сравнению с S. cerevisiae

    Затем мы оценили потенциал противомикробной активности S.boulardii по сравнению с другими штаммами S. cerevisiae с помощью диффузионного анализа в лунках агара с использованием Escherichia coli MG1655 в качестве индикаторного штамма. Штаммы дрожжей размножали в среде дрожжевого экстракта пептон-декстроза (YPD) с 2% глюкозой. при 37°С в течение 48 ч, для анализа использовали бесклеточный культуральный супернатант. Из 12 протестированных бесклеточных культуральных супернатантов S. boulardii и 11 S. cerevisiae супернатанты, полученные от S.boulardii , штаммы Sb.P и Sb.A, продуцировали четкую зону ингибирования, тогда как третий штамм, 7136, вызывал слабое ингибирование (рис. 1А). За исключением этих трех штаммов, не наблюдалось явного ингибирования в этих условиях культивирования с 2% глюкозой для любого из других штаммов S. boulardii , а также штаммов S. cerevisiae , первоначально использовавшихся в этом исследовании (рис. 1А, В).

    Фигура 1.

    S. boulardii вырабатывает уксусную кислоту на уровнях, обладающих антибактериальной активностью. ( A , B ) Анализы диффузии в лунках агара для оценки антибактериальной активности бесклеточных YPD с 2% культуральными супернатантами глюкозы из штаммов S. boulardii ( слева, панель ) и штаммов S. cerevisiae () правая панель ), визуализированная на планшетах, содержащих E. coli MG1655 в качестве индикаторного штамма, и при окрашивании клеток хлоридом йодонитротетразолия (INT).( C , D ) Хроматограммы ВЭЖХ супернатантов бесклеточных культур (красная линия) из Sb.P ( S. boulardii ) и ER ( S. cerevisiae ) по сравнению со стандартом 2% уксусной кислоты ( зеленая линия). Вкладыши : анализ антибактериальной активности в лунках агара с использованием E. coli MG1655 в качестве индикаторного штамма. ( E ) Накопление уксусной кислоты в зависимости от времени для дикого типа S. boulardii (Sb.P, Sb.A, 7136, 259, UL, SAN) (заштрихованные символы) и S.cerevisiae (ATCC 38555, MUCL 28177, ER, VR-1, JT22689, CAT-1) (открытые символы). ( F ) Анализы точечного роста на твердой агаровой среде YPD (2%) и YPAc (1%, pH 5) для штаммов S. boulardii , способных накапливать очень высокие уровни уксусной кислоты (Sb.P и Sb.A) по сравнению со штаммами с более низким и преходящим уксусным накопление кислоты (Сб.Л и ЛОР). SBERH6 представляет собой гибридный гаплоидный сегрегант, полученный из Sb.P и ER с очень высоким содержанием уксусной кислоты. накопительная способность.Градиент темного цвета на клине указывает на силу разведения клеточной культуры перед нанесением пятен.

    Идентификация противомикробного агента, секретируемого

    S. boulardii

    Для определения биохимической природы антимикробного действия S. boulardii использовали бесклеточный культуральный супернатант Sb.Штамм P был дополнительно проанализирован. Это привело к идентификации уксусной кислоты как возбудитель (см. Дополнительный материал), составляющий концентрацию 6 г/л уксусной кислоты в супернатанте культуры Sb.P, как определено с помощью ВЭЖХ (рис. 1C). Уксусная кислота практически отсутствовала в супернатанте из S. cerevisiae Ethanol Red (ER) (рис. 1D). Антибактериальный эффект на E. coli можно было имитировать, добавив уксусную кислоту (6 г/л, pH 4,2) (дополнительный рис.С2). Супернатант культуры S288c, как наблюдалось ранее (рис. 1B), не дал зоны ингибирования (дополнительная рис. S2).

    Детальная оценка секреции уксусной кислоты другими штаммами

    S. boulardii

    Затем мы провели временные измерения продукции уксусной кислоты во время аэробного роста при 37°C в культурах всех S. boulardii и некоторых S.cerevisiae , с 12-часовыми интервалами в течение 72 часов. Все штаммов S. boulardii в той или иной степени продуцировали уксусную кислоту, в то время как у штаммов S. cerevisiae она была незначительной (рис. 1E). Увеличение уксусной кислоты происходило в течение первых 24–36 ч роста с аналогичными титрами 2,9 ± 0,25 г/л через 24 ч. час Впоследствии штаммы Sb.P и Sb.A продолжали накапливать уксусную кислоту примерно до 48 ч, достигая максимума 5,30 г/л для Sb.P и 5,10 г/л для Sb.A, которые оставались постоянными до 72 часов. Другие штаммы S. boulardii начали потреблять уксусную кислоту, что привело к более низкому и временному профилю накопления (рис. 1E). По-видимому, Sb.P и Sb.A не могут снова потреблять произведенную уксусную кислоту, что объясняет их гораздо более высокое содержание уксусной кислоты. производство и гораздо более высокая активность в антибактериальном анализе, причем Sb.P является наиболее мощным для обоих свойств.

    Оценка выбранных

    S.boulardii по способности к росту на ацетате

    Поскольку Sb.P и Sb.A оказались неспособными потреблять уксусную кислоту, мы оценили способность к росту на среде YP-ацетат с помощью точечных анализов. из S. boulardii Sb.P, Sb.A, ENT и Sb.L. Все штаммы S. boulardii росли на ацетате при 30°C, но Sb.P и Sb.A не могли расти на ацетате при 37°C (рис. 1F). Это показало, что очень высокая способность этих двух штаммов накапливать уксусную кислоту зависит от температуры. проявляется только при температуре тела человека.

    Влияние накопления уксусной кислоты на пролиферацию и жизнеспособность клеток

    S. boulardii

    Затем мы проанализировали влияние накопления уксусной кислоты на пролиферацию и жизнеспособность клеток S. boulardii . Три штамма S. boulardii (Sb.P, Sb.L и Энтерол) размножали вместе с одним штаммом S. cerevisiae (ER) при 37°C, и образцы культур отбирали с 12-часовыми интервалами.Концентрация уксусной кислоты, рН культуры среда, прирост биомассы (измеренный по OD 600 ) и жизнеспособность клеток определялись в каждый момент времени (дополнительная рис. S3). Уровни уксусной кислоты, продуцируемой этими штаммами, подтвердили предыдущие результаты. Кроме того, накопление уксусной кислоты штаммом Sb.P тесно коррелировало с квазилинейным снижением рН среды в течение 72 ч примерно с 6 до 4,2. Напротив, рН среды для остальных штаммов снизился за 72 ч только примерно на 1 единицу рН, что обычно наблюдается для культур дрожжей. переросла в стационарную фазу.Измерения биомассы и жизнеспособности клеток показали, что высокое накопление уксусной кислоты Sb.P ингибирует собственную пролиферацию и ускоряет гибель клеток. При накоплении 2 г/л уксусной кислоты Sb.P оставался метаболически активен, так как он продолжал вырабатывать уксусную кислоту, но не размножался дальше. Гибель клеток наблюдали при уксуснокислом концентрация 5–6 г / л (дополнительный рис. S3A, D), что привело к Sb.P в необычно низкой конечной жизнеспособности клеток всего 20%. С другой стороны, штаммы Sb.L, Энтерол, и ER продемонстрировали типичные кривые роста для дрожжей, вступающие в стационарную фазу через 36 часов (дополнительная рис. S3C) и поддерживающие почти 100% жизнеспособность клеток (дополнительная рис. S3D).

    Получение способного к спариванию гаплоидного производного

    S. boulardii с высокой продукцией уксусной кислоты

    Поскольку он показал самое сильное производство уксусной кислоты и антибактериальную активность, S.boulardii Sb.P был выбран для анализа генетической основы этого предполагаемого пробиотического признака. Чтобы обойти невозможность S. boulardii для образования спор, мы получили штамм Sb.P MAT a/a и штамм S. cerevisiae ER MAT α/α. Во-первых, обе копии гена HO были делетированы в S. boulardii Sb.P, который является гомоталличным, чтобы избежать аутодиплоидизации конечного сегреганта. Затем мы провели индуцированную галактозой плазмиду. HO экспрессия в Sb.P hoΔ/Δ для получения Sb.P MAT a/a, а также в диплоидном штамме S. cerevisiae ER для получения ER MAT α/α. Два диплоидных штамма скрещивали, чтобы получить тетраплоидный гибридный штамм SBPERT8, который оказался способным к спорообразованию. Среди 145 сегрегантов SBPERT8 мы идентифицировали SBER3C, диплоидный штамм MATa/α с аналогичной очень высокой продукцией уксусной кислоты. при 37°С в виде Sb.P. Затем SBER3C спорулировали, и его гаплоидные сегреганты оценивали по продукции уксусной кислоты.Все разведение стратегия представлена ​​на рисунке 2A. Гаплоидный сегрегант SBERH6 (рис. 2В) демонстрировал самую высокую продукцию уксусной кислоты (7 г/л), сравнимую с таковой у Sb.P (рис. 2С), и также был способен расти на ацетате при 30°С, но не при 37°С (рис. 1F). Другие сегреганты SBER3C продуцировали различные уровни уксусной кислоты, что указывает на полигенную основу фенотипа. (показано на дополнительном рис. S4).

    Фигура 2.

    Происхождение превосходящего гаплоидного родительского штамма SBERH6 и фенотипирование его предшественников и сегрегантов после скрещивания с нижнегаплоидный родительский штамм S288c. ( A ) Схема селекции, использованная для получения превосходного гаплоидного штамма SBERH6. ( B ) Определение плоидности SBERH6 путем сравнения с диплоидными и гаплоидными штаммами S288c. ( C ) Уровень продукции уксусной кислоты SBERH6 и его штаммами-предшественниками.Sb.Pwt и ERwt представляют собой штаммы Sb.P и ER дикого типа соответственно. Sb.Paa и ERαα являются производными Sb.P и ER с гомозиготными локусами MAT . SBERT8 представляет собой тетраплоидный гибрид, полученный из Sb.Paa и ERαα, тогда как SBER3C представляет собой диплоидный сегрегант SBERT8. SBERH6 это сегрегант от SBER3C. Столбцы показывают средние значения двух независимых экспериментов, а столбцы ошибок показывают стандартное отклонение. Данные были проанализированы однофакторным ANOVA (поправка Даннета для множественных сравнений).Значимые различия для накопления уксусной кислоты по сравнению с Sb.Pwt отмечены звездочками, (****) P < 0,0001, (нс) недостоверно. ( D ) Кривая распределения продукции уксусной кислоты в сегрегантах гибридного диплоидного штамма SBERH6/S288c. ( E , F ) Продуцирование уксусной кислоты сегрегантами, отобранными для нижнего пула ( слева, панель ), высшего пула ( справа, панель ) и контрольных штаммов SBERH6, S288c и SBERH6/S288c.Значения являются средними из двух независимых экспериментов, в то время как ошибка столбцы представляют собой стандартное отклонение. Данные анализировали с помощью одностороннего ANOVA (поправка Даннета для множественных сравнений). Существенно звездочками отмечены разные значения накопления уксусной кислоты по сравнению с SBERH6, (****) P < 0,0001, (нс) недостоверно.

    Выяснение генетической основы высокой продукции уксусной кислоты с использованием картирования QTL

    Отобранный гаплоидный сегрегант с очень высоким уровнем продукции уксусной кислоты, SBERH6 ( MAT α), использовали в качестве превосходящего родителя в скрещивании с низшим родителем, прототрофным лабораторным штаммом S288c ( MAT a).Гибридный диплоид (SBERH6/S288c) продемонстрировал незначительное производство уксусной кислоты, как и S288c (рис. 2E,F), что указывает на участие по крайней мере одной существенной рецессивной мутации. SBERH6/S288c продемонстрировал хорошую споруляцию, но умеренную жизнеспособность спор (±50%). Продукция уксусной кислоты 549 сегрегантами SBERH6/S288c показала тенденцию к бимодальному распределению. Однако значительная часть сегрегантов располагалась между двумя крайними хвостами распределения, демонстрируя промежуточное производство уксусной кислоты (рис.2Д). Из 549 сегрегантов 32 продемонстрировали очень высокую продукцию уксусной кислоты и были включены в высший пул (рис. 2F). То же количество сегрегантов, продуцирующих незначительное количество уксусной кислоты, что и родительский S288c, было включено в нижний пул (рис. 2E).

    Равные количества клеточной биомассы из сегрегантов в каждом пуле объединяли и подвергали экстракции геномной ДНК, получая 65,8 и 72,0 мкг ДНК для верхнего и нижнего пулов соответственно.Высший родитель SBERH6 дал 88,0 мкг геномного ДНК. Геномную ДНК обоих пулов и вышестоящего родителя секвенировали с использованием технологии Illumina HiSeq 2000 (BGI). Последовательность чтения были сопоставлены с эталонной последовательностью S288c, а варианты были идентифицированы и отфильтрованы с использованием секвенирования следующего поколения. опытная платформа (NGSEP) (Duitama et al. 2014) и геномная рабочая среда CLC (CLC Bio-Qiagen). Геномная ДНК из высшего пула дала 6 329 693 парных прочтений, что получилось 97.19% общего выравнивания с последовательностью S288c, в то время как 6 328 957 парных прочтений геномной ДНК нижнего пул достиг выравнивания 96,2%. Частота однонуклеотидного варианта (SNV), отклоняющаяся вверх от 50% в высшем пуле, по сравнению с гипотетической частотой SNP 50%, представляющей случайную сегрегацию, указывает на связь с высоким содержанием уксусной кислоты. кислотный фенотип. График частоты SNV (ось y ) в зависимости от положения SNP в хромосоме (ось x ) выявил два основных QTL, связанных с геномом превосходящего родительского штамма SBERH6: QTL1 в хромосоме XI (NC_001143.9:г. 31118…231737) и QTL2 в хромосоме XV (рис. 3). Комплементарных QTL, отклоняющихся вниз от 50% и связанных с низшим родительским штаммом S288c, при картировании не обнаружено. с нижним сегрегантным пулом, что снова свидетельствует о полигенном фенотипе (рис. 3). В нижнем пуле был один значимый QTL, связанный с геномом высшего родителя и расположенный слева. стороне QTL1, но из-за его расположения близко к теломере надежность была сомнительной.Мы сконцентрировали дальнейший анализ при идентификации причинного гена(ов) в QTL1 и QTL2.

    Рисунок 3.

    Картирование QTL для очень высокой способности накапливать уксусную кислоту с SNP в качестве генетических маркеров. Точечные графики частоты вариантов SNP из верхнего пула (красный) и нижнего пула (черный) в зависимости от хромосомного положения.Красные и черные линии на точечных графиках представляют сглаженные данные из верхнего и нижнего пулов соответственно. Красная линия на среднем графике указывает на отклонение из доверительного интервала. P -значения (синяя линия) ≤ 0,05 для разницы между сглаженными линиями высшего (синяя линия) или нижнего (зеленая линия) пулы в конкретном локусе по сравнению с 50% случайной сегрегацией указывают на статистически значимую связь с геномом верхний (SBERH6) или нижний (S288c) родитель в этом локусе.Два основных QTL (QTL1 и QTL2) с сильной связью с геномом старшего родителя присутствуют в первой половине хромосомы XI и первой половине хромосомы XV соответственно.

    Анализ QTL1 с помощью общего анализа реципрокной гемизиготности (bRHA)

    QTL1 имел длину 200 619 п.н.Мы разделили QTL1 на восемь генных блоков для массового анализа реципрокной гемизиготности (bRHA) (рис. 4А). Каждый блок был удален реципрокным образом в хромосоме XI диплоида SBERH6/S288c. Использовали аллель-специфическую ПЦР. чтобы определить, был ли удален блок высших или низших родительских генов. Сравнение производства уксусной кислоты в штаммы с реципрокной делецией показали, что блок 6 содержит причинный генетический элемент (элементы) (Fig. 4B). Этот блок имел размер 25 573 п.н. и был окружен хромосомными позициями NC_001143.9:г. 156173 и 181746. Штамм bRHA. с блоком 6 от превосходящего родителя (SBERH6/S288c block6Δ ) продемонстрировал высокую продукцию уксусной кислоты (5,65 ± 0,18 г/л), аналогично SBERH6 (рис. 4B). Напротив, штамм bRHA с блоком 6 от низшего родителя (SBERH6 block6Δ /S288c) продуцировал незначительное количество уксусной кислоты (0,67 ± 0,06 г/л). Результаты для трех других блоков были отрицательными (рис. 4В). Однако определение во времени продукции уксусной кислоты у двух штаммов bRHA SBERH6/S288c показало, что блокируется 6 лишь частично объясняет этот фенотип.Штамм SBERH6/S288c block6Δ показал аналогичную тенденцию к продукции уксусной кислоты, как и превосходящий родительский SBERH6, до 36 часов инкубации, но начал после этого немного снизилось, в то время как производство SBERH6 уксусной кислоты продолжало существенно увеличиваться (рис. 4C).

    Рисунок 4.

    RHA для идентификации причинного гена в QTL1.( A ) Обзор рассечения QTL1 до разрешения на уровне нуклеотидов. Разделение QTL1 на восемь генных блоков для bRHA и присутствующих генов в блоке 6. Схема аллеля SDh2 SBERH6, изображающая два несинонимичных SNP в кодирующей области SDh2 и полученные ими аминокислотные замены в Sdh2. Причинная мутация показана красным цветом. ( B ) Репрезентативный пример bRHA секреции уксусной кислоты с парами диплоидных штаммов SBERH6/S288c (SB/Sc) для блоков 3, 4, 5 и 6 (B3–B6), что указывает на то, что блок 6 содержит один или несколько причинных генов.( C ) Продуцирование уксусной кислоты в зависимости от времени штаммами RHA с делецией блока 6, SBERH6/S288c B6Δ (•) и SBERH6 B6Δ/S288c (▪) по сравнению с контрольными штаммами SB (SBERH6) (♦), Sc (S288c) (○) и SBERH6/S288c (SB/Sc) (□). ( D ) RHA с отдельными генами, присутствующими в блоке 6, идентифицируя SDh2 как причинный ген. ( E ) Производство уксусной кислоты как функция времени штаммами RHA для SDh2 гена, SB/Sc sdh2Δ (SBERH6/S288c sdh2Δ ) (▴) и SB sdh2Δ sdh2Δ /S288c) (▾) по сравнению с контрольными штаммами Sb (SBERH6) (♦), Sc (S288c) (○) и SBERH6/S288c (□).Результат – это средство из трех биологических повторов для каждого момента времени. Столбики погрешностей показывают стандартное отклонение в каждый момент времени. Данные были проанализированы двухфакторным дисперсионным анализом (критерий множественных сравнений Тьюки). Значительные различия в накоплении уксусной кислоты между штаммами отмечены звездочками, (****) P < 0,0001, (нс) незначимо.

    Идентификация причинного аллеля в QTL1 на хромосоме XI

    В блоке 6 присутствовало шестнадцать открытых рамок считывания (рис.4A), из которых APE2, SDh2, AVT3, LTV1, SDh4 и TGL1 содержали по крайней мере одну миссенс-мутацию или, в случае APE2 , мутацию сдвига рамки считывания. Эти гены были приоритетными в качестве генов-кандидатов для RHA. Пары гемизиготных диплоидов SBERH6/S288c штаммы для каждого гена были сконструированы и протестированы на продукцию уксусной кислоты. Штамм SBERH6/S288c sdh2 Δ показал гораздо более высокую продукцию уксусной кислоты (выход 2,28 ± 0,75 г/л), чем SBERH6 sdh2 Δ/S288c, который производил только 0.66 ± 0,05 г/л (рис. 4D). Гемизиготные штаммы по другим пяти генам не показали существенной разницы в продукции уксусной кислоты (рис. 4D). Эксперимент по выработке уксусной кислоты во времени показал, что SBERH6/S288c sdh2 Δ ведет себя аналогично SBERH6/S288c block6 Δ , что согласуется с тем, что SDh2 является единственным причинным аллелем в блоке 6 (рис. 4C, E). Максимальный уровень продукции уксусной кислоты 6,15 ± 1,04 г/л, достигаемый через 36 часов SBERH6/S288c sdh2 Δ, был аналогичен таковому у превосходящего родительского штамма SBERH6 (рис.4E), в то время как штамм SBERH6 sdh2 Δ/S288c демонстрировал аналогичный очень низкий уровень продукции уксусной кислоты (0,84 ± 0,02 г/л) (рис. 4E), как и штамм SBERH6 block6Δ /S288c (рис. 4С).

    Анализ последовательности

    SDh2 для идентификации возможного причинного полиморфизма(ов) нуклеотидов

    Две точечные мутации были обнаружены в открытой рамке считывания SDh2 из SBERH6, которая происходит от S.штамм boulardii Sb.P, представляющий собой c.[604C > T]; [950T > A], что приводит к двум аминокислотным заменам: p.[h302Y];[F317Y]. Следовательно, у нас есть назвал этот аллель sdh2 h302Y, F317Y . Последующий анализ последовательности показал, что те же точечные мутации и аминокислотные замены также присутствовали в SDh2 в других 11 штаммах S. boulardii (фиг. 5А). Чтобы выяснить, присутствовали ли эти мутации SDh2 в S.cerevisiae и других штаммов S. boulardii , мы проверили все опубликованные последовательности геномов двух дрожжей на их присутствие. Помимо 12 штаммов S. boulardii из этого исследования, общедоступные данные полногеномного секвенирования 992 уникальных штаммов (Strope et al. 2015; Peter et al. 2018) были сопоставлены с эталонной последовательностью S288c. Это включало 24 штамма с высоким сходством с S. boulardii , сгруппированных вместе в «субкладе 3» Peter et al.(2018). Позиции с <85% прочтений, указывающих на одно основание, считались гетерозиготными, и им присваивалось вырожденное основание. вызов сборок с сопоставленными ссылками. На фигуре 5B в качестве примера показано выравнивание для 18 из штаммов S. cerevisiae . Этот анализ показал, что c.604C > T в SDh2 , заменяя гистидин 202 на тирозин 202 , также присутствует в некоторых штаммах S. cerevisiae . Однако c.950T > A, заменяющий фенилаланин 317 на тирозин 317 в Sdh2, присутствовал во всех 12 S.boulardii и во всех 24 штаммах, отнесенных Peter et al. к субкладу S. boulardii . (2018). Из 968 дополнительных проанализированных штаммов S. cerevisiae эта мутация была идентифицирована только в штамме, наиболее тесно связанном с субкладом S. boulardii , ARL (дополнительная рис. S10). На рис. 5C показано выравнивание для двух дополнительных штаммов S. boulardii из Khatri et al. (2017) в качестве примера.

    Рисунок 5.

    Сравнение последовательностей выбранных областей Sdh2 из S. boulardii и S. cerevisiae и идентификация причинной мутации. ( A ) Выравнивание аминокислотной последовательности Sdh2 в областях 181–206 и 313–321 штаммов S. boulardii и S. cerevisiae S288c. ( B ) Выравнивание соответствующей последовательности Sdh2 S. boulardii SBERH6 и 18 дополнительных штаммов S. cerevisiae .( C ) Выравнивание соответствующей последовательности Sdh2 двух дополнительных штаммов S. boulardii . Две позиции, 202 и 317, с аминокислотными заменами, обозначены черными стрелками, а замена аминокислотные остатки выделены красным цветом. ( D ) Накопление уксусной кислоты в зависимости от времени SBERH6 (•) и штаммами SBERH6 с SDH2 , заменены на SDH2 Y202H , Y317F (□), SDH2 Y317F ( ▴) или sdh2 Y202H (◊).( E ) Накопление уксусной кислоты как функция времени штаммами Sb.P (•) и Sb.P с двумя копиями sdh2 , замененными на SDh2 Y202H , Y317F (▿) или sdh2Δ (□). Результаты представляют собой средние значения трех биологических повторов для каждой временной точки. Столбики погрешностей показывают стандартное отклонение для каждого момент времени.

    Функциональное подтверждение

    sdh2 h302Y,F317Y причинных нуклеотидов в SBERH6 и Sb.п

    Чтобы подтвердить, что SDh2 является причиной высокой продукции уксусной кислоты, был проведен обмен аллелями в SBERH6 и S288c. Когда sdh2 h302Y,F317Y в SBERH6 был заменен его аналогом из S288c, что привело к SBERH6 SDh2 Y202H,Y317F , фенотип с высоким содержанием уксусной кислоты был упразднен (рис. 5D), в то время как он был восстановлен путем реинтеграции. оригинала sdh2 h302Y, F317Y (дополнительный рис.С5). Для идентификации причинного SNP в пределах SDh2 в SBERH6 были введены гибридные аллели sdh2 Y202H (только с 604T>C) и SDh2 Y317F (только с 950A>T). У SBERH6 SDh2 Y317F отсутствовала продукция уксусной кислоты, как и у SBERH6 SDh2 Y202H, Y317F , в то время как SBERH6 sdh2 Y294H 902 показал аналогичное накопление. Это указывало на то, что c. Мутация 950T>A, которая приводит к замене фенилаланина 317 на тирозин 317 , является единственным причинным SNP в sdh2 SBERH6.Примечательно, что это уникальный SNP sdh2 , обнаруженный во всех штаммах S. boulardii и ни в одном из обследованных штаммов S. cerevisiae .

    Учитывая, что SBERH6 произошел от тетраплоидного гибрида между Sb.P и ER (рис. 2A), SBERH6, вероятно, имел мозаичный геном с областями от Sb.P и от ER. Для подтверждения причинного характера аллель Superior SDh2 также в исходном Sb.P две его копии SDh2 были заменены нижним аллелем от S288c. Это устранило высокое производство уксусной кислоты (рис. 5E) и было восстановлено путем реинтеграции исходного превосходного аллеля SDh2 (дополнительный рисунок S5). Этот эффект был сравним с эффектом, наблюдаемым при обмене аллелями в SBERH6 (рис. 5D). Делеция SDh2 в Sb.P не влияла на высокое накопление уксусной кислоты (рис. 5E), что позволяет предположить, что его превосходящий аллель sdh2 h302Y, F317Y может быть аллелем потери функции.

    Идентификация причинного аллеля в QTL2 на хромосоме XV

    Чтобы идентифицировать в QTL2 на хромосоме XV причинный аллель высокого накопления уксусной кислоты, мы выполнили bRHA с новым гибридный штамм, полученный скрещиванием SBERH6 с S288c sdh2 h302Y,F317Y . Полученный штамм SBERH6/S288c sdh2 h302Y,F317Y имеет две копии превосходящего аллеля sdh2 h302Y,F317Y , который необходим для высокого накопления уксусной кислоты, поскольку аллель является рецессивным.Чтобы сузить область с самое высокое сцепление в QTL2, мы сначала выполнили точное картирование с использованием аллель-специфической ПЦР. Частота вариантов и соответствующие Значение P было рассчитано после подсчета выбранных SNP-маркеров в отдельных сегрегантах из обоих пулов (дополнительная рис. S6). Это подтвердило сильную связь в центре QTL2 с геномом вышестоящего родителя SBERH6. Для выполнения bRHA область из хромосомной позиции NC_001147.9:г. с 278057 по NC_001147.9:g. 433375 был разделен на девять блоков, после чего каждый блок был удален реципрокным образом в хромосоме XV SBERH6/S288c sdh2 h302Y, F317Y (фиг. 6А). Аллель-специфическую ПЦР использовали, чтобы определить, был ли делетированный блок от вышестоящего или нижестоящего родителя, и штаммы с реципрокной делецией сравнивали по накоплению уксусной кислоты. Только для блока 8 четкая разница между наблюдались два гемизиготных штамма (рис.6Б). SBERH6 BLOCK86Δ / S288C SDH2 H302Y, F317Y H302Y, F317Y , показал, что накапливается с низким, переходным уксусным накоплением уксусной кислоты, сопоставимый с сопоставлением SDHH 2 S288C H302Y, F317Y , в то время как SBERH6 / S288C SDH2 block8Δ показал высокое постоянное накопление уксусной кислоты, сравнимое с SBERH6 (фиг. 6B). Блок 8 (от NC_001147.9:g. 394837 до NC_001147.9:g. 433375) содержал 10 генов: AKR2, YOR034C-A, SHE4, PEP12, CYC2, HIR2, CKB2, GLO4, CUE5 и WHI2 .Поскольку WHI2 содержит несколько несинонимичных SNP, известно, что он регулирует опосредованную STRE (STress Response Element) экспрессию генов (Kaida et al. 2002) и ранее причастен к толерантности к уксусной кислоте (Chen et al. 2016), он был исследован. индивидуально по RHA, а остальные гены были объединены в один блок, блок 8.1. Накопление уксусной кислоты в двух штаммах RHA для WHI2 продемонстрировали разницу, сравнимую с наблюдаемой для всего блока 8, что согласуется с получением превосходящего аллеля от вышестоящего родителя SBERH6 и низший аллель от низшего родителя S288c sdh2 h302Y,F317Y (рис.6Б). Для штаммов RHA блока 8.1 не наблюдалось различий в накоплении уксусной кислоты (дополнительная рис. S7).

    Рисунок 6.

    RHA для идентификации причинного гена в QTL2. ( A ) Обзор рассечения QTL2 до разрешения на уровне нуклеотидов. Разделение QTL2 на девять генных блоков для bRHA и присутствующих генов в блоке 8.( B ) Накопление уксусной кислоты штаммами bRHA для блока 8 и для WHI2 . Штаммы bRHA для блока 8 или WHI2 показаны как SB Block8Δ или SB whi2Δ и Sc Block8Δ или Sc whi2Δ для реципрокных делеций в геноме SBERH6 и S288c, соответственно, в SBERH6/S2302h2h9Y98c sd. ,F317Y фон. Штаммы: SBERH6 / S288C SDH2 H302Y, F317Y (□), SBERH6 / S288C SDH2 H302Y, F317Y B8Δ (▴), SBERH6 B8Δ / S288C SDH2 H302Y, F317Y (▾), SBERH6 whi2Δ /S288c sdh2 h302Y,F317Y (▿) и SBERH6/S288c sdh2 h302Y,F317Y whi21).( C ) Накопление уксусной кислоты штаммами SBERH6 с модификациями WHI2 . Штаммы: sberh6 (○), sberh6 whi2δ (▴), sberh6 whi2 -fl (whi2 * 287s ) (▪), и sberh66 whi2 SC (S288C Allle из Whi2 ) (▾). ( D ) Аккумуляция уксусной кислоты Sb.P с заменой двух копий whi2 S287* двумя копиями WHI2 Sc .Штаммы: Sb.P (•), Sb.P WHI2 Sc / WHI2 Sc (▪) и Sb.P whi2 287* реинтегрант (○). Результаты представляют собой средние значения трех биологических повторов для каждой временной точки. Столбики погрешностей показывают стандартное отклонение в каждый момент времени. ( E ) Анализы точечного роста на твердой агаровой среде YPD (2%), YPAc (0,5%, pH 5) и YPAc (1%, pH 5) при 30°C и 37°C для S288c, Sb.P , и Sb.P WHI2 Sc / WHI2 Sc .Градиент темного цвета на клине указывает на силу разведения клеточной культуры перед нанесением пятен.

    Идентификация уникального SNP

    S. boulardii в превосходящем аллеле WHI2

    Открытая рамка считывания WHI2 из штамма SBERH6 содержала 12 SNP, из которых шесть несинонимичных (табл. 1).Одиннадцать из этих SNP также встречаются в WHI2 в некоторых из 992 штаммов S. cerevisiae (Strope et al. 2015; Peter et al. 2018). Один единственный SNP, бессмысленная мутация c.860C > G, которая генерирует преждевременный стоп-кодон (S287*), не встречалась. в любом из штаммов S. cerevisiae , но присутствовал в 11 из 12 штаммов S. boulardii , использованных в нашем исследовании (все, кроме штамма LSB; см. также ниже в разделе «Статус гетерозиготности»), а также во всех 24 штамма, отнесенных к группе S.boulardii , субклад Peter et al. (2018). В качестве примера мы показываем выравнивание последовательности WHI2 из 45 штаммов S. cerevisiae , показывая, что 11 SNP также встречаются по крайней мере в одном из них (дополнительная таблица S2). Sb.P и Sb.A были гомозиготными по этому SNP (S287*), в то время как все остальные штаммы S. boulardii были гетерозиготными, за исключением штамма CIT среди изолятов, проанализированных Peter et al. (2018), который был гомозиготным (см. также ниже в разделе «Статус гетерозиготности»), а один штамм, LSB, вообще не имел SNP, сохраняя нуклеотид 860C S.cerevisiae (табл. 1). Следовательно, мы идентифицировали новый уникальный SNP, который присутствует почти во всех штаммах S. boulardii и встречается в одной или двух копиях, возможно, причинно связанный с низкой или высокой способностью к накоплению уксусной кислоты соответственно.

    Таблица 1.

    Наличие SNP в WHI2 для штаммов S288c, SBERH6 и 12 S. boulardii

    Идентификация уникального

    S.boulardii SNP как причинный SNP в превосходящем аллеле WHI2

    При замене мутантного аллеля WHI2 в SBERH6 на аллель дикого типа WHI2 из S288c, WHI2 Sc наблюдалось временное накопление уксусной кислоты с максимумом через 36 ч в отличие от непрерывного накопление уксусной кислоты в штамме SBERH6 (рис. 6С). Поскольку бессмысленная мутация c.860C > G в SBERH6 приводит к укороченному, возможно неактивному белку, мы также удалили WHI2 в SBERH6. Штамм SBERH6 whi2 Δ ( whi2 :: NatMX4 ) действительно показал очень похожее накопление уксусной кислоты, как и SBERH6 (рис. 6C). Это предполагает, что нонсенс-мутация c.860C > G в превосходящем аллеле WHI2 может быть причинной мутацией. Чтобы оценить эту возможность, в SBERH6 был введен модифицированный аллель WHI2 , WHI2 -FL ( WHI2 *287S ).Этот аллель содержал все SNP, присутствующие в промоторе, ORF и терминаторе WHI2 из SBERH6, за исключением нонсенс-мутации c.860C > G. Штамм SBERH6 WHI2- FL показал временное накопление уксусной кислоты, как и SBERH6 WHI2 . Sc (рис. 6C), в то время как реинтеграция исходного мутантного аллеля whi2 SBERH6 восстанавливала непрерывное накопление уксусной кислоты (дополнительный рис. S5). Это указывало на то, что мутация c.860C > G действительно была причинным SNP в аллеле whi2 SBERH6.

    Важность номера копии

    whi2 S287* для высокого накопления и усвоения уксусной кислоты

    Мы подтвердили, что номер копии whi2 S287* отвечает за постоянное накопление высоких уровней уксусной кислоты в Sb.P, заменив две копии whi2 S287* на его аналог из S288c, генерация Sb.P WHI2 Sc / WHI2 Sc . Это привело к тому, что профиль высокого накопления уксусной кислоты Sb.P изменился на более низкое и временное накопление уксусной кислоты. профиль других штаммов S. boulardii , в то время как реинтеграция исходного мутантного аллеля whi2 S287* восстанавливала фенотип (рис. 6D). Штамм Sb.P WHI2 Sc / WHI2 Sc также рос при 37°C на чашках YP-ацетата (1%) (рис.6Е). При более низкой концентрации ацетата (0,5%) дефект роста при 37°С, вызванный whi2 S287* , был лишь частичным (рис. 6Д).

    Затем мы исследовали, может ли фенотип Sb.P с очень высоким накоплением уксусной кислоты передаваться другим штаммам S. boulardii с более низким и временным образованием уксусной кислоты путем модификации аллеля WHI2 . С этой целью ген WHI2 был делетирован реципрокным образом у S.boulardii , штамм 259, исключая либо верхний аллель whi2 S287* (кодирующий усеченный Whi2), либо нижний аллель WHI2-FL (кодирующий полноразмерный Whi2). Штамм, в котором был делетирован только верхний аллель whi2 S287* , 259 WHI2- FL/ whi2- TΔ, сохранял свое более низкое и временное накопление уксусной кислоты, тогда как штамм, в котором нижний аллель WHI2- Аллель FL был делетирован, 259 whi2- FLΔ/ whi2- T приобрели очень высокое накопление уксусной кислоты (рис.7А). Сопоставимые результаты были получены с другим штаммом S. boulardii с более низкой и временной продукцией уксусной кислоты, 7103 (фиг. 7B). В обоих штаммах, 259 и 7103, делеция аллеля whi2 S287* вызвала дальнейшее снижение продукции уксусной кислоты, указывая на то, что укороченный продукт гена whi2 S287* может сохранять некоторую активность.

    Рисунок 7.

    Подтверждение функциональной значимости WHI2 для уровня продукции уксусной кислоты у других штаммов S. boulardii . ( A ) Продукция уксусной кислоты у штамма 259 с одиночной делецией полноразмерного аллеля WHI2 ( whi2 -FLΔ/ whi2 -T) или мутантного whi2 S287*

      43 all WHI2 -FL/ whi2 -TΔ). Штаммы дикого типа 259 WHI2 -FL/ whi2 -T (♦), 259 whi2 -FLΔ/ whi2 -T (▵) и 259 WHI2 -FL/ whi2 whi2 whi2 -T (▵) (▿).( B ) Продукция уксусной кислоты у штамма 7103 с одиночной делецией полноразмерного аллеля WHI2 ( whi2 -FLΔ/ whi2 -T) или мутантного whi2 S284 all 1 3 WHI2 -FL/ whi2 -TΔ). Штаммы: дикий тип 7103 WHI2 -FL/ whi2 -T (○), 7103 whi2 -FLΔ/ whi2 -T (▴) и 7103 WHI2 -T6 FL/ whi2 (♦). ( C ) Продукция уксусной кислоты штаммом 7103 с двумя полноразмерными аллелями WHI2 ( WHI2 -FL), двумя мутантными аллелями whi2 S287* ( whi2 -T) или двойной делецией обоих аллелей.Штаммы: 7103 WHI2 -FL/ WHI2 -FL (•), 7103 whi2 -T/ whi2 -T (▪) и 7103 whi2 -FLΔ/ whi2 903 (▪) . ( D ) Производство уксусной кислоты в S. Cerevisiae S288C, содержащие причинные аллели SDH2 H302Y, F317Y ( SDH2 ( SDH2 SBERH6 ) и / или WHI2 S287 * ( WHI2 SBERH6 ) из S. boulardii . Штаммы: SBERH6 (▴), S288C (▾), S288C SDH2 SDH2 (□), S288C WHI2 S288C SDH2 SBERH6 WHI2 Serhh6 (• ).Результаты представляют собой средние значения трех биологических повторов для каждой временной точки. Столбики погрешностей показывают стандартное отклонение для каждого момент времени.

      Мы также сконструировали штаммы, гомозиготные по аллелю WHI2- FL, кодирующему полноразмерный аллель Whi2, 7103 WHI2- FL/ WHI2- FL, или по превосходящему аллелю whi2 S287* , кодирующему аллель Whitruncellated Whi2. , 7103 белый2- T/ белый2- T.Штамм 7103 whi2- T/ whi2- T показал такое же очень высокое накопление уксусной кислоты, что и Sb.P. С другой стороны, штамм 7103 WHI2- FL/ WHI2- FL сохранил более низкое и временное накопление уксусной кислоты, чем штамм 7103 (рис. 7C). Эти результаты показывают, что замена превосходящего аллеля whi2 S287* на подчиненный аллель WHI2- FL в штамме S. boulardii с более низкой и временной продукцией уксусной кислоты приводит к штамму с двумя whi2 . S287* аллелей достаточно, чтобы превратить его в штамм с очень высоким накоплением уксусной кислоты.

      Передача высокой способности накапливать уксусную кислоту

      S. cerevisiae S288c путем введения превосходящих аллелей SDh2 и WHI2

      Чтобы определить, достаточно ли S. boulardii sdh2 h302Y,F317Y и whi2 S287* для переноса, по крайней мере в некоторой степени, фенотипа с высоким накоплением уксусной кислоты на S.cerevisiae , мы интегрировали два аллеля по отдельности, а также вместе в S288c. При этом отдельное введение не повлияло на очень низкую продукция уксусной кислоты в S288c, комбинированное введение приводило к накоплению уксусной кислоты почти до половины (2,98 ± 0,8) уровня SBERH6 (6,98 ± 0,07) (рис. 7Г). Отсутствие полного установления очень высокой продукции уксусной кислоты может указывать на то, что штаммы S. boulardii Sb.P и Sb.A все еще содержат одну или несколько дополнительных мутаций, необходимых для этого фенотипа, или что лабораторный штамм S288c содержит компрометирующие мутации, отсутствующие в Sb.П и Сб.А. Несмотря на это, результат еще раз подтверждает, что очень высокая продукция уксусной кислоты у S. boulardii Sb.P и Sb.A является полигенным признаком, требующим одновременного присутствия как минимум двух генетических полиморфизмов.

      Более высокие уровни сахара приводят к очень высокому накоплению уксусной кислоты у всех штаммов

      S. boulardii , но не у большинства штаммов S. cerevisiae .

      Для проверки антибактериальной активности в большом наборе S.cerevisiae , мы сначала оптимизировали анализ таким образом, чтобы можно было обнаружить антибактериальную активность у штаммов S. boulardii с более низким кратковременным накоплением уксусной кислоты. Повышение уровня глюкозы с 2% до 4% приводило к аналогичным результатам. высокая антибактериальная активность (дополнительная рис. S8A) и накопление уксусной кислоты (дополнительная рис. S8C по сравнению с S8D) у всех штаммов S. boulardii . Такая высокая антибактериальная активность (дополнительная рис. S8B) и накопление уксусной кислоты (дополнительная рис.S8C–E) не наблюдались у 304 штаммов S. cerevisiae , проверенных на оба свойства, хотя меньшинство из штаммов S. cerevisiae также продуцировало средние, а некоторые даже более высокие уровни уксусной кислоты, приближающиеся к уровням, продуцируемым штаммом S. boulardii. штаммов (дополнительная рис. S8E). В качестве единственного исключения, один мутантный гаплоидный лабораторный штамм S. cerevisiae , полученный из М5, продуцировал такой же уровень уксусной кислоты, как и S. boulardii .

      Филогенетический анализ, основанный на анализе последовательности всего генома всех

      S.boulardii по сравнению со штаммами
      S. cerevisiae
      , секвенированными с полным геномом

      Мы создали дерево соединения соседей на основе полногеномного анализа SNP после картирования полногеномного секвенирования Illumina. данные, полученные с использованием BioNumerics 7.6 (Applied Maths) 352 штаммов дрожжей, принадлежащих к Clade 1.Wine/European, а также 12 штаммов S. boulardii , согласно Peter et al. (2018) (дополнительный рис.С9). 12 штаммов S. boulardii четко группируются вместе со штаммами субклада 3, включая известные штаммы S. boulardii . Штамм ARL представляет собой штамм S. cerevisiae , наиболее тесно связанный со всеми штаммами S. boulardii .

      Статус гетерозиготности хромосомной области

      WHI2 во всех штаммах S. boulardii

      Мы провели анализ статуса гетерозиготности 28 позиций SNP в области хромосомы XV в локусе WHI2 (дополнительная рис.С10). Штаммы Sb.P и Sb.A теряют гетерозиготность в расширенной области, что приводит к гомозиготности по аллелю whi2 S 287* , тогда как штамм CIT гомозиготен только по аллелю whi2 3 3 287* аллель, а не для остальной части региона. Штаммы LSB и ARL теряют гетерозиготность в этом положении, что приводит к гомозиготность по аллелю дикого типа WHI2 .Штамм Enterol является репрезентативным для всех 31 другого проанализированного штамма S. boulardii , показывая гетерозиготность во всем регионе.

      Обсуждение

      S. boulardii — пробиотические дрожжи, имеющие широкое распространение во всем мире, эффективность которых подтверждена клиническими испытаниями (Kotowska et al. 2005; McFarland 2006, 2010; Villar-García et al. 2015).Остается неясным, почему и как дрожжи S. boulardii будут оказывать специфический пробиотический эффект в отличие от S. cerevisiae , которые настолько тесно связаны по последовательности генома, что теперь они считаются одним видом. С другой стороны, там по-видимому, нет надежных сравнительных исследований пробиотической активности S. cerevisiae по сравнению с S. boulardii в клинических испытаниях. Следовательно, осталось неясным, является ли S.boulardii может обладать уникальными свойствами по сравнению с S. cerevisiae , которые важны для его предполагаемой превосходной пробиотической активности.

      Были случаи, когда коммерческие пробиотические препараты были недостаточно чистыми или содержали микроорганизмы, отличные от ожидаемых. (Фасоли и др., 2003; Теуниссен и др., 2005; Хьюс и др., 2006). Кроме того, некоторые из штаммов в нашей коллекции (Sb.A, Sb.L и Sb.P) были неизвестного происхождения (van der Aa Kühle et al.2005). Следовательно, мы определили идентичность всех штаммов S. boulardii в нашей коллекции с помощью AFLP (MacKenzie et al. 2008) и анализа последовательности всего генома (дополнительная таблица S1). Это показало, что 12 штаммов S. boulardii были очень тесно связаны, образуя единый кластер на филогенетическом дереве (дополнительный рисунок S1). Они были гораздо более тесно связаны со всеми штаммами S. cerevisiae , чем с S. mikatae и S. paradoxus , что является дополнительным доказательством того, что S.boulardii является конспецификом S. cerevisiae (van der Aa Kühle and Jespersen 2003; Fietto et al. 2004).

      Антимикробное действие за счет секреции антимикробных пептидов или органических кислот считается ключевым свойством пробиотиков (Boirivant and Strober 2007; Vanderpool et al. 2008; Ciorba 2012). Сообщалось, что S. boulardii секретирует жирные кислоты со средней длиной цепи, в основном каприновую кислоту, с биологической активностью в отношении гиф Candida albicans и образованием биопленки (Krasowska et al.2009 г.; Мурзин и др. 2010). Однако, насколько нам известно, секреция диффундирующих антимикробных агентов S. boulardii против бактериальных патогенов никогда не описывалась. Все протестированные штаммы S. boulardii секретировали антимикробный агент с ингибирующим действием на E. coli MG1655, кишечный бактериальный патоген. Мы идентифицировали его как уксусную кислоту, что объясняет сильное закисление среды до рН 4,2 при 37°С. Низкий уровень pH является решающим фактором для того, чтобы органические кислоты с короткой цепью действовали как противомикробные агенты, поскольку пропорция протонированной незаряженной формы сильно возрастает при значениях pH ниже pKa.Незаряженная форма легко диффундирует в клетки, вызывая аберрантное внутриклеточное закисление (Салмонд и др., 1984; Ламберт и Стратфорд, 1999; Такахаши и др., 1999). Способность Sb.P подкислять среду за счет секреции высоких уровней уксусной кислоты при 37°C позволяет предположить, что он может поставить под угрозу метаболическая активность и пролиферация кишечных возбудителей в локальных микросредах на щеточной кайме в кишечнике. Несмотря на то что известно, что более высокая температура увеличивает производство уксусной кислоты на S.cerevisiae (Woo et al. 2014), производство таких высоких количеств уксусной кислоты (около 6 г/л), как наблюдалось в нашем исследовании для S. boulardii , никогда не сообщалось для S. cerevisiae . Накопление уксусной кислоты Sb.P было настолько высоким, что вызывало ингибирование собственного роста и потерю жизнеспособности клеток (дополнительная рис. S3C, D). Бесклеточный супернатант из других штаммов S. boulardii , которые не демонстрировали устойчивого образования уксусной кислоты с течением времени, не ингибировал рост E.coli в условиях первоначально использованного YPD и 2% глюкозы. То же самое наблюдалось для бесклеточного супернатанта. из штаммов S. cerevisiae . Следовательно, сильная антимикробная активность бесклеточного культурального супернатанта Sb.P может быть связана с высокой уровень уксусной кислоты и низкий рН. Последующая работа показала, что в присутствии более высокого уровня глюкозы все штаммы S. boulardii производят очень высокие уровни уксусной кислоты, что приводит к очень высокой пробиотической активности.Это уникальное свойство энергичного производство уксусной кислоты может, по крайней мере, частично объяснить эффективность S. boulardii в качестве пробиотика в кишечнике, а также его уникальность как единственного сорта, отобранного для коммерческого использования в качестве пробиотика среди всех штаммы, которые в настоящее время считаются принадлежащими к виду S. cerevisiae .

      Секреция уксусной кислоты S. boulardii в кишечнике может иметь и другие преимущества для хозяина.Ацетат стимулирует размножение и наращивание Т-регуляторных клеток, облегчает пролиферацию бокаловидных клеток и активирует гены, связанные с секрецией слизи, ингибирует провоспалительный цитокин CXCL8, и служит субстратом для производства бутирата кишечной микробиотой (Engevik and Versalovic 2017). Возможным контраргументом против его предполагаемой пользы может быть то, что производство уксусной кислоты S. boulardii в значительной степени ограничено аэробными условиями (дополнительный рис.S11), по крайней мере, в наших условиях анализа. Однако неинвазивное измерение напряжения кислорода в желудочно-кишечном тракте выявили выраженный кислородный градиент от проксимального к дистальному отделу желудочно-кишечного тракта (He et al. 1999), а также наличие радиального градиента с высокими уровнями O 2 вблизи поверхности эпителия и очень низкими уровнями O 2 в центре просвета кишки (Albenberg et al., 2014). Это говорит о том, что микроорганизмы, колонизирующие эпителий кишечника на щеточной кайме, имеют одинаковую доступность кислорода. как клетки эпителия.Кроме того, известно, что уровни доступности кислорода в желудочно-кишечном тракте значительно увеличиваются. в условиях, нарушающих нормальную микробиоту кишечника, таких как лечение антибиотиками (Rivera-Chávez et al. 2016, 2017; Vacca 2017) и энтеропатогенные инфекции (Rivera-Chávez et al. 2017). Это говорит о том, что кишечные расстройства, при которых хорошо известна эффективность S. boulardii , такие как антибиотикоассоциированная диарея (McFarland et al., 1995; Duman et al.2005), инфекции C. difficile (McFarland et al. 1994) и острая диарея у взрослых (McFarland 2010) могут обеспечить подходящую аэробную среду для максимальной секреции уксусной кислоты S. boulardii .

      Измерение во времени показало, что выработка уксусной кислоты штаммом Sb.P не была нарушена ограничением роста. При остановке роста через 12 ч, по-видимому, из-за ингибирования накопленной уксусной кислотой, продукция уксусной кислоты продолжалась. не ослабевает (дополнительный рис.S3A,С). Это прекратилось только через 48 часов, вероятно, из-за снижения жизнеспособности клеток (дополнительная рис. S3A, D). Производство уксусной кислоты при отсутствии роста имеет большое значение, поскольку пробиотик должен быть эффективен в месте своего действия. (Schrezenmeir and de Vrese, 2001; Hill et al., 2014), и в кишечнике не всегда может быть благоприятная среда для пролиферации клеток.

      В начальном тесте только штаммы Sb.P и Sb.A показали антимикробную активность in vitro.Однако последующие работы показали что все штаммы S. boulardii продуцируют уксусную кислоту, но другие штаммы способны ее потреблять, в отличие от Sb.P и Sb.A. Как результат, Sb.P и Sb.A накапливали гораздо больше уксусной кислоты, чем другие штаммы, что объясняет их гораздо большую противомикробную активность. Анализ способности к росту на ацетате штаммов Sb.P и Sb.A, а также производного Sb.P SBERH6 показал, что они не могли расти на ацетате именно при 37°C, в отличие от других S.boulardii , которые росли на ацетате как при 30°С, так и при 37°С. Таким образом, наличие двух копий аллеля whi2 S287* , по-видимому, вызывает дефект использования чувствительного к температуре ацетата, приводящий к постоянному, очень высокому содержанию уксусной кислоты. накопление кислоты, свойство, возможно, имеющее большое значение для эффективности пробиотиков, которое проявляется только при нормальной температуре тела.

      Дефект спорообразования S.boulardii был серьезным препятствием для любого генетического анализа. В настоящей работе мы обошли эту проблему, удалив сначала две копии гена HO в S. boulardii , чтобы сделать его гетероталличным, затем мы сделали его гомозиготным по типу спаривания и скрестили этот штамм со штаммом S. cerevisiae , гомозиготным по типу комплементарного спаривания, так что для получения гибридного гетероталличного штамма. Этот штамм был способен образовывать споры, что позволило нам создать способный к спариванию гаплоидный гибридный штамм SBERH6, демонстрирующий такое же высокое содержание уксусной кислоты. кислотоаккумулирующая способность как Sb.P. Эта инновационная стратегия обеспечивает эффективные средства, с помощью которых гаплоидные штаммы с определенным интересующий признак может быть получен из диплоидных или полиплоидных штаммов S. cerevisiae с дефектом спорообразования. Это позволяет проводить последующий генетический анализ интересующего признака при условии, что гаплоидный штамм может быть скрещивали с неродственным штаммом для получения компетентного к спорообразованию диплоидного штамма. Так было и с SBERH6, так что мы Затем можно было бы применить платформу полигенного анализа, основанную на анализе последовательности всего генома с объединенными сегрегантами.Теперь это было успешно использовались для выяснения полигенной основы многих признаков у S. cerevisiae (Liti and Louis 2012; Swinnen et al. 2012; Hubmann et al. 2013; Pais et al. 2013; Yang et al. 2013; Meijnen et al. 2016; Триндаде де Карвалью и др., 2017). 549 сегрегантов, полученных нами от гибридного диплоида SBERH6/S288c, показали распределение продукции уксусной кислоты, напоминающее бимодальное распределение, хотя значительное количество сегрегантов продемонстрировало промежуточный фенотип.Это распределение согласуется с небольшим числом задействованных причинных генов. Последующая работа показала, что наличие двух копий sdh2 h302Y,F317Y во всех штаммах S. boulardii необходимо для значительной продукции уксусной кислоты, намного более высокой, чем у S. cerevisiae , в то время как присутствие whi2 S287* в одном или двух экземплярах определяет разницу между транзиторным и умеренным накоплением уксусной кислоты по сравнению с постоянным и высоким накоплением уксусной кислоты.Таким образом, взаимодействие между аллелями SDh2 и WHI2 , по-видимому, отвечает за общую форму кривой распределения сегрегантов и расхождение между различными аллелями. штаммов S. boulardii . Таким образом, очень высокая способность к накоплению уксусной кислоты является полигенным признаком, обусловленным двумя основными генетическими элементами: небольшая вариация, наблюдаемая у сегрегантов, вероятно, связана с неизвестным количеством второстепенных генетических элементов.

      SDh2 кодирует флавопротеиновую субъединицу сукцинатдегидрогеназного комплекса, функционирующую в составе трикарбоновой кислоты (TCA). цикла и митохондриальной дыхательной цепи путем связывания окисления янтарной кислоты с переносом электронов на убихинон (Chapman et al., 1992; Kim et al., 2012). Известно, что делеция SDh2 или других генов, кодирующих субъединицы сукцинатдегидрогеназного комплекса, вызывает повышенную продукцию уксусной кислоты в организме. С.cerevisiae (Romano and Kolter 2005; Szeto et al. 2010; Yoshida and Yokoyama 2012). Уксусная кислота секретировалась штаммом BY4741 sdh2 Δ при 30°C с выходом 60 мМ (3,6 г/л) через 72 часа (Romano and Kolter 2005; Szeto et al. 2010; Yoshida and Yokoyama 2012). В нашей работе Sb.P не показал перепроизводства уксусной кислоты при 30°C, но дал около 6 г/л при 37°C через 72 часа. Следовательно, Аллель sdh2 h302Y,F317Y , необходимый для высокого производства уксусной кислоты при 37°C, на самом деле может быть чувствительным к температуре аллелем, вызывающим нарушение сукцинатдегидрогеназного комплекса при 37°С.

      Связь между дефектной сукцинатдегидрогеназой и высокой продукцией уксусной кислоты может возникать по-разному. Сдх дефект может поставить под угрозу окисление янтарной кислоты в фумаровую кислоту, вызывая нехватку щавелевоуксусной кислоты и, таким образом, снижая инициацию цикла ТСА. Это может привести к накоплению ацетил-КоА и дальнейшему преобразованию митохондриальным ацетил-КоА. гидролаза (Buu et al.2003), приводят к производству уксусной кислоты. С другой стороны, пируват может накапливаться из-за нарушенного цикла трикарбоновых кислот, что приводит к к более высоким уровням цитозольного ацетальдегида и, путем преобразования альдегиддегидрогеназой, к более высоким уровням уксусной кислоты.

      WHI2 кодирует белок с активностью активатора фосфатазы, который образует комплекс с фосфатазой Psr1 плазматической мембраны и локализуется на периферии клетки.Он участвует во многих процессах, включая регуляцию клеточного цикла, пролиферацию клеток, общая реакция на стресс, эндоцитоз, организация актинового цитоскелета и восприятие аминокислот (Saul and Sudbery 1985; Radcliffe et al. 1997; Chen et al. 2018; Teng and Hardwick 2019). Whi2 необходим для полной активации STRE-опосредованной экспрессии генов посредством дефосфорилирования фактора транскрипции. Msn2 (Kaida et al. 2002), который важен для правильной деградации белков с неправильной укладкой (Comyn et al.2017). Было показано, что сверхэкспрессия Whi2 улучшает устойчивость к уксусной кислоте, тогда как ее отсутствие снижает ее (Chen et al. 2016). Хотя штамм whi2Δ демонстрирует множество других дефектов, связь с продукцией уксусной кислоты не очевидна. С другой стороны, поскольку причинный аллель whi2 S287* содержит преждевременный стоп-кодон, его эффект может быть подобен эффекту делеции WHI2 . Следовательно, повышенная чувствительность к уксусной кислоте Sb.P и Sb.A, имеющие две копии whi2 S287* , могут объяснить их неспособность потреблять высокие уровни накопленной уксусной кислоты, в отличие от других штаммов S. boulardii , имеющих только одну whi2 S287* Аллель . Важным наблюдением в этом отношении было то, что штаммы с двумя копиями whi2 S287* были способны расти при более низких уровнях уксусной кислоты при 37°C (рис. 6E), показывая, что у них нет дефицита уксусной кислоты. ассимиляция как таковая.Им не хватало только потребления высоких уровней уксусной кислоты при 37°C, возможно, из-за их пониженной толерантности к уксусной кислоте. Таким образом, аллель whi2 S287* может действовать опосредованно через ингибирование ее потребления уксусной кислотой, что приводит к более высокому конечному уровню накопления уксусной кислоты. Это объяснение также подразумевало бы, что ни одна из двух причинных мутаций не обязательно должна быть чувствительной к температуре. мутация.Вместо этого дрожжи могут быть просто более чувствительны к уксусной кислоте при высокой температуре из-за мутации whi2 S287* . Более высокая чувствительность Sb.P и Sb.A к уксусной кислоте может также способствовать их ранней остановке роста, позволяя больше углерода будет направлено на производство уксусной кислоты, а не на образование биомассы. Вторичные миссенс-мутации были сообщалось в локусе WHI2 штаммов из коллекции делеций дрожжей (Mendl et al.2011 г.; ван Левен и др. 2016; Комин и др. 2017). Удаление STE20 , NUC1 , APM2 , OTU2 , GCN20 , GCN20 , Set2 , URA1 и SGN1 ассоциируется с повышенной частотой ерундых мутаций в WHI2 (Teng et др. 2013). Нам не удалось обнаружить каких-либо явных вредных или бессмысленных SNP в этих генах у S. boulardii Sb.P, но это не исключает того, что миссенс-SNP в одном из этих генов привел к появлению c.860С > Г SNP в WHI2 .

      Идентификация причинных SNP в SDh2 и WHI2 выявила по одному SNP в каждом, c.[950T > A], транслируемом в p.[F317Y], и c.860C > G, транслируемом в p.S287Ter, соответственно, которые были уникальными для S. boulardii и отсутствовали практически во всех секвенированных штаммах S. cerevisiae . Следовательно, наша работа идентифицировала первую генетическую подпись для S .boulardii , который настолько тесно связан по последовательности генома с S. cerevisiae , что считается, что они принадлежат к одному и тому же виду. Эта уникальная генетическая подпись впервые позволяет легко способ выявления новых штаммов S. boulardii , выделенных из природы. Все доступные в настоящее время штаммы S. boulardii , вероятно, произошли от исходного штамма (штаммов), выделенного Boulard. Более того, уникальные полиморфизмы в С.boulardii ответственны за заметное физиологическое отличие — высокое производство уксусной кислоты, которое из-за его противомикробного действия эффективность, возможно, дала преимущество S. boulardii в определенных аэробных экологических нишах. Из-за ее гораздо более высокой токсичности по сравнению с этанолом производство уксусной кислоты будет затруднено. быть выгодным в средах с более низкими концентрациями сахара, в которых могут накапливаться только низкие, нетоксичные уровни этанола.Возможно, это также стало причиной того, что S. boulardii был выбран и успешно применялся во всем мире в качестве пробиотика. Если важна мощность производства уксусной кислоты что касается его пробиотической активности, наша работа открывает потенциал для селекции, селекции или создания штаммов S. boulardii с дальнейшим улучшением пробиотической активности или даже для переноса этого признака антимикробной активности в штаммы S. cerevisiae .

      Однако введение высших аллелей sdh2 h302Y,F317Y и whi2 S287* в S288c привело лишь к примерно 50% очень высокого накопления уксусной кислоты, наблюдаемого в Sb.P и Sb.A. (рис. 7D). Это может быть связано с полигенной природой признака и, следовательно, с потребностью в дополнительных каузативных генах. присутствует в минорных QTL. Одна из возможностей заключается в том, что минорные QTL содержат избыточные причинные гены, один из которых необходим для функционирования. совместно с причинным аллелем SDh2 из Sb.P. Другая возможность заключается в том, что один из основных QTL, QTL1 или QTL2, содержит другой второстепенный причинный аллель. Возможны также комбинации этих двух возможностей. Поскольку штаммы лабораторных дрожжей, такие как S288c, содержат множество изнурительных мутаций, отсутствующих в природных и промышленных штаммах S. cerevisiae , одна из них может поставить под угрозу максимальную способность производства уксусной кислоты и, следовательно, должна быть дополнена соответствующий ген дикого типа из S.булардии .

      В заключение, мы обнаружили новый специфический признак дрожжей S. boulardii , высокую продукцию уксусной кислоты, который может иметь большое значение для их пробиотической активности. Мы выяснили полигенную основу этого свойства и объяснил количественную разницу в продукции уксусной кислоты между штаммами S. boulardii . Этот новый признак обусловлен двумя точечными мутациями, уникальными для S.boulardii и обеспечивают первую специфическую генетическую сигнатуру для S. boulardii по сравнению с S. cerevisiae . Наша работа дает возможное объяснение выбора S. boulardii в качестве единственных пробиотических дрожжей в отличие от очень близкородственных, вероятно конспецифических штаммов S. cerevisiae .

      Методы

      Штаммы, использованные в этой работе, перечислены в дополнительной таблице S1.Условия среды и культивирования, методы общей молекулярной биологии, случайная изоляция спор и подготовка ДНК для амплификации. определение полиморфизма длины фрагмента (AFLP) подробно описано в дополнительных методах.

      Условия культивирования дрожжей для анализа противомикробных препаратов и продукции уксусной кислоты

      Ночные прекультуры дрожжей доводили до OD 600 0,2 в 50 мл YPD (с 2% глюкозы) в колбе Эрленмейера на 300 мл.Колбы инкубировали при встряхивании при 200 об/мин и 37°С. в инкубаторе-шейкере в течение 48 часов. Для получения бесклеточных культуральных супернатантов аликвоты культур дрожжей отбирали из колбы и центрифугировали на максимальной скорости (14000 об/мин) в течение 5 мин. Супернатанты использовали для анализа диффузии в лунки агара. или подвергали ВЭЖХ для определения концентрации уксусной кислоты. Для временных измерений были отобраны пробы. из культур каждые 12 ч для дальнейшего анализа.

      Анализ диффузии в лунках агара

      Для анализа диффузии в лунки агара инокулировали 25 мл расплавленного мягкого агара Мюллера-Хинтона (7,5 г бактоагара/л бульона Мюллера-Хинтона). с 5 × 10 4 клеток/мл индикаторного штамма E. coli . За этим последовало добавление индикатора роста бактерий, йодонитротетразолия хлорида (в 50% метанол) до конечной концентрации 0.2 мг/мл и кратковременное встряхивание. Квадратная чашка Петри, содержащая 80 мл отвержденного Мюллера Затем агар Хинтона покрывали расплавленным верхним агаром. Верхнему агару давали затвердеть, после чего девять лунок (по 3 × 3) пробивали в оба слоя агара с помощью 12-мм стерильного пробкового сверла. Полученные агаровые диски осторожно удаляли. из каждой лунки парой стерильных щипцов и выбрасывают. Затем каждую лунку заполняли примерно 700 мкл супернатанта культуры дрожжей.Все лунки с агаром инкубировали при 37°С в течение 12–18 часов.

      Анализы роста с помощью серий точечных разведений для оценки способности утилизации ацетата

      Штаммы размножали в 3 мл бульона YPD при 30°C в течение 1 дня. Разведение каждой культуры готовили в стерильной среде Milli-Q. водой до наружного диаметра 600 0,5. 5 мкл серии 10-кратных разведений (10 0 -10 -5 ) каждого штамма наносили на YPD, а также на пептон дрожжевого экстракта + 1% ацетат калия (YPAc; pH 5).И YPD, и YPAc планшеты инкубировали при 30°С и 37°С.

      Было проведено определение уксусной кислоты с помощью ВЭЖХ, определение плоидности дрожжей с помощью проточной цитометрии и определение жизнеспособности дрожжей. как подробно описано в дополнительных методах.

      Делеция гена эндонуклеазы

      HO и переключение типа спаривания

      Две копии гена эндонуклеазы HO у Sb.P были удалены, а тип спаривания гетероталлических штаммов Sb.P и ER переключился на гомозиготные штаммы. для типа спаривания, как подробно описано в дополнительных методах.

      Выделение ДНК, секвенирование Illumina, вызов SNP и картирование QTL

      Высокомолекулярная ДНК была выделена для секвенирования, как подробно описано в дополнительных методах. Выделенную ДНК подвергали обработке по технологии Illumina HiSeq 2000 (BGI) с библиотеками из 500 п.н. 101 п.н.Последовательности с коротким считыванием были сопоставлены с эталонной последовательностью S288c, и все варианты (SNP и небольшие вставки) были идентифицированы и отфильтрованы по качеству с помощью NGSEP (Duitama et al. 2014). Параллельно для картирования прочтений использовали геномный рабочий стол CLC (CLC Bio-Qiagen), чтобы упростить сравнение прочтений. сопоставления с аннотированным геномом S288c.

      Массовый реципрокный анализ гемизиготности QTL1

      QTL1 (NC_001143.9: g.31118…231737) определяли как участок ДНК на хромосоме XI, где разница между средним SNV высшего пула и среднее значение 50% для случайной сегрегации предполагали статистическую значимость ( P -значение ≤ 0,05). QTL1 был разделен на восемь блоков генов (∼25 т.п.н. для каждого блока). Блоки 3, 4, 5 и 6 были удалены отдельно. реципрокным образом у гибридного диплоида (SBERH6/S288c). Каждая делеция была достигнута с использованием расщепленной резистентности к генетицину. маркер ( KanMX4 ) выбивная кассета.Кассета была сконструирована путем опосредованного адаптером слияния левой и правой фланкирующих последовательностей, амплифицированных с помощью ПЦР. (между 400 и 700 п.н.) для каждого блока с левым и правым фрагментами маркера KanMX4 соответственно. Гибридный диплоид (SBERH6/S288c) впоследствии трансформировали двумя фрагментами маркера KanMX4 , специально сконструированными для каждого блока.

      Анализ реципрокной гемизиготности отдельных генов в QTL1

      Для RHA отдельных генов в QTL1 точная ORF левой и правой фланкирующих последовательностей и приоритетных генов в QTL1 ( APE2 , SDh2 , AVT3 , LTV1 , SDh4 и TGL1 ) были удалены с KanMX4 .Методология, используемая для конструирования кассет и трансформации штаммов, такая же, как описано выше для bRHA. Несущественные гены APE2 , SDh2 , AVT3 , LTV1 и TGL1 были делетированы в гаплоидных фонах SBERH6 и S288c. Успешные трансформанты оценивали на предмет правильной интеграции. кассеты в каждом локусе с помощью ПЦР. Трансформанты S288c с правильной интеграцией в каждом локусе впоследствии скрещивали. с SBERH6 и наоборот для получения реципрокных гемизиготных штаммов по каждому гену.Единственный существенный ген, SDh4 , был делетирован на фоне гибридного диплоида (SBERH6/S288c). Успешные трансформанты, несущие делецию SDh4 в одной родительской хромосоме, генотипировали с помощью аллель-специфичной ПЦР.

      Анализ реципрокной гемизиготности QTL2

      Для RHA QTL2 весь блок (bRHA) или точная ORF была делетирована с помощью NatMX4 в диплоидных гибридных штаммах SBERH6/S288c sdh2 h302Y, F317Y .Маркер амплифицировали из плазмиды pTOPO-G1- NatMX4 -G1 с праймерами, содержащими хвосты длиной 50 п.н., гомологичными областям, фланкирующим целевой локус, как описано Baudin et al. (1993). Правильная интеграция маркера была подтверждена с помощью ПЦР, а оставшийся неудаленный аллель был идентифицирован с помощью аллель-специфического анализа. ПЦР.

      Генотипирование с помощью аллель-специфической ПЦР и сайт-направленной генетической модификации с использованием технологии CRISPR/Cas9 выполняли как описано в дополнительных методах.

      Заявление о конкурирующих интересах

      VIB и KU Leuven подали заявку на патент (15 сентября 2017 г.; EP 171.0.) на коммерческое использование результатов.

      Благодарности

      Мы благодарим Теуна Бёкхаута, Барта Телеина и Ракель Квинтиллу Матео (Вестердайкский институт грибкового биоразнообразия, Утрехт) за помощь. с начальной характеристикой S.boulardii , Arne Claes за помощь в скрининге сегрегантов, Lene Jespersen за любезную поставку штаммов S. boulardii , Gianni Liti за любезное предоставление штаммов ARL и CIT, Renata Wicik за техническую поддержку и Nico Vangoethem. за помощь в подготовке фигур. Эта работа была поддержана грантом SBO (IWT ) от IWT-Flanders и ЕС. 7-я рамочная программа (проект CORNUCOPIA) для J.M.T. Спонсоры не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных. решение о публикации или подготовке рукописи.

      Вклад авторов: J.M.T. и М.Р.Ф.-М. задумал проект; Б.О. и П.В. провел эксперименты; Б.О., П.В., М.Р.Ф.-М, С.Д.Г. и Дж.М.Т. проанализировали данные; и B.O., M.R.F.-M и J.M.T. написал рукопись.

      Сноски

      • [К этой статье доступны дополнительные материалы.]

      • Статья опубликована в Интернете до печати. Статья, дополнительные материалы и дата публикации находятся на http://www.genome.org/cgi/doi/10.1101/gr.243147.118.

      • Бесплатно доступен в Интернете через опцию Genome Research Open Access.

      • Поступила в редакцию 17.08.2018 г.
      • Принят 20 июня 2019 г.
      Пробиотик Saccharomyces boulardii

      для домашних животных (Белая книга) – FullBucket Health

      ОБЗОР ДРОЖЖЕВОГО ПРОБИОТИКА SACCHAROMYCES BOULARDII ДЛЯ СОБАК И КОШЕК

      Роберт П. Франклин, DVM Dip.ACVIM – Кит М. Латсон, DVM Dip.ACVS

      Чтобы прочитать обновленную версию «Научный обзор пробиотиков для домашних животных: Saccharomyces Boulardii «Белая книга», нажмите здесь…

      ПОЛУЧИТЬ ДОМАШНЕЕ СООБЩЕНИЕ: 
      • Saccharomyces boulardii — это новый дрожжевой пробиотик, который безопасно вводят собакам и кошкам и может лечить и предотвращать диарею, связанную с антибиотиками, диарею Clostridium difficile , неспецифическую диарею и воспалительное заболевание кишечника для использования у собак и кошек.
      • Выяснение механизмов действия и множество рандомизированных клинических испытаний с метаанализом подтверждают его использование у людей и животных.
      • Согласно современным литературным данным, этот пробиотик имеет наибольшее количество подтверждений для применения в ветеринарии.

      Введение

      Пробиотики определяются как живые микроорганизмы, оказывающие положительное влияние на лечение и профилактику желудочно-кишечных расстройств. 1 Люди и животные, употребляющие в пищу ферментированные пищевые продукты, на протяжении столетий усваивали сырые формы пробиотиков.

      Пробиотические микроорганизмы должны обладать определенными качествами, чтобы противостоять факторам естественной защиты хозяина.Это включает устойчивость к желудочно-кишечному транзиту: ферменты, соли желчных кислот, органические кислоты и потоки pH; и способность процветать при температуре ядра животного.

      Большинство пробиотических организмов представляют собой бактерии. Lactobacilli sp.  имеют самую долгую историю заявленных пробиотических эффектов. 2  

      Пищевая промышленность и производители ветеринарных кормов в первую очередь рекламируют преимущества живых пищевых ингредиентов, но механизмы укрепления здоровья в значительной степени плохо определены.

      Преобладание заявленных преимуществ для здоровья при низком качестве данных, подтверждающих такие утверждения, вызвало скептицизм в медицинском сообществе.

      Научная критика ограничивается следующими четырьмя критериями:

      1. Изоляты, продаваемые как пробиотики, плохо охарактеризованы и в сочетании с другими плохо охарактеризованными изолятами оставляют среду сомнительных микроорганизмов без указания свойств какого-либо конкретного микроба.
      2. Отсутствие согласованного воспроизводимого механизма действия пробиотических изолятов.
      3. Относительная нехватка медицинских исследований.
      4. Несоответствие стандартам качества, а именно: дозировка, жизнеспособность, стабильность и рецептура.

      Недоверие к использованию пробиотиков связано с недостоверной информацией

      Ветеринарное сообщество разделяет недоверие и скептицизм, которые сохраняют наши коллеги-люди. Хотя фундаментальные ученые активно стремятся охарактеризовать сотни заявленных пробиотических изолятов, преимущества и механизмы были выяснены только в некоторых из них: Lactobacillus sp., Bifidobacterium sp. и Saccharomyces boulardii (S. boulardii). 4

      Контролируемые исследования на людях проводились с достаточной регулярностью, чтобы их можно было подвергнуть метаанализу. 4  

      Ветеринарные исследования, с другой стороны, удручающе скудны. Тем не менее, коммерческие препараты продолжают производить пробиотики с непостоянными стандартами качества.

      В большинстве, если не во всех, имеющихся в продаже пробиотических продуктах используются низкосортные штаммы, которые имеют низкий уровень концентрации или вообще не имеют концентрации в лабораторных тестах и ​​даже не доказали свою эффективность.

      На самом деле, Weese продемонстрировал, что из 44 человеческих или ветеринарных пробиотиков микроорганизмы были неправильно идентифицированы в 43 % человеческих или 35 % ветеринарных образцов, а 25 % человеческих или 18 % ветеринарных продуктов содержали изоляты, которые даже были написаны с ошибками. 5

      Кроме того, Weese исследовал 13 ветеринарных или человеческих пробиотиков в лаборатории и обнаружил, что описание на этикетке и концентрации были точно указаны только в 2 продуктах, ни один из которых не был ветеринарным продуктом.

      Все восемь исследованных ветеринарных продуктов содержали <2% указанной концентрации пробиотических микроорганизмов. 6  

      Аналогичный вывод был сделан, когда 5 из 19 продуктов человека были исследованы и не содержали количество живых микроорганизмов, указанное на этикетке.

      Целью этого обзора является выявление совокупности знаний, связанных с очень хорошо изученным пробиотиком
      Saccharomyces boulardii, , и предоставление рекомендаций по его применению у собак и кошек.

      S. boulardii ( Saccharomyces cerevisiae var. boulardii ) — факультативные, анаэробные, непатогенные дрожжи, впервые обнаруженные в 1920 году французским микробиологом Анри Буларом во время поисков дрожжей. . 2,8 

      Было опубликовано почти 250 рецензируемых статей, изучающих преимущества Saccharomyces boulardii с момента публикации первой статьи в 1982 году, что делает этот пробиотик одним из наиболее изученных.

      Были воспроизведены рандомизированные, плацебо-контролируемые, двойные слепые исследования, чтобы заявить о подтверждении из обзоров метаанализа того, что S. boulardii является эффективным биотерапевтическим средством для лечения антибиотикоассоциированной диареи, C.difficile , связанное с заболеванием, и другими причинами острой диареи в лабораторных, ветеринарных условиях для людей и лошадей. 8,9,10

      Организм сохраняет отчетливые таксономические и физиологические отличия от Saccharomyces cerevisiae или «пивных дрожжей», которые, по-видимому, не обладают пробиотическим действием. 8, 11

      S. boulardii является идеальным пробиотиком, поскольку он способен противостоять стрессам, возникающим при транзите через желудочно-кишечный тракт, и устойчив ко всем известным антибактериальным антибиотикам, что делает его эффективным при одновременном применении с антибиотиками. 12 

      Для S. boulardii предпочтительная температура вегетации составляет 37°C, что идеально подходит для большинства видов-хозяев. 13 После перорального приема у человека достигается равновесное состояние в течение 3 дней и полностью выводится через 2–5 дней после прекращения приема. 14

      S. boulardii в природе не встречается у собак, кошек или лошадей. 15  

      Дрожжи могут быть восстановлены в течение 5 дней после введения и исчезают в течение 10 дней после прекращения терапии. 10  

      Это быстрое накопление дрожжей в кишечнике важно, так как при взаимодействии с C. difficile отмечается эффект, зависящий от концентрации. 16  

      Дрожжи являются модельными пробиотиками и превосходят бактерии, поскольку они не способны передавать генетический материал, определяющий устойчивость к антибиотикам. 2

      Гены, придающие устойчивость к тетрациклину, эритромицину и ванкомицину, были идентифицированы у Lactobacillus sp. использовались в качестве пробиотиков, и гены могли передаваться патогенам путем горизонтальной передачи. 17

      S. boulardii имеет несколько механизмов действия в иммунной системе, которые обеспечивают защиту от кишечных патогенов, таких как Clostridium difficile и Escherichia coli, разрушение и блокаду токсинов C. difficile , а также иммуностимулирующие и противовоспалительные иммуностимулирующие и противовоспалительные средства воздействие на кишечный тракт хозяина.

       

      Соответственно, эти характеристики обеспечивает S.boulardii имеет явное преимущество в качестве биотерапевтического средства по сравнению с йогуртами и нечеткими коммерческими препаратами бактерий, которые часто встречаются в большинстве пробиотических продуктов для собак и кошек на рынке.

      –> Нажмите здесь, чтобы узнать о пробиотике Saccharomyces boulardii №1 для собак в мире.
      <--

      ИЗУЧЕННЫЕ МЕХАНИЗМЫ ДЕЙСТВИЯ

      Нейтрализация токсинов

      C. difficile патология стимулируется вирулентным воздействием токсинов А и В на хозяина.Новая протеаза высвобождается S. boulardii in vivo, которая ингибирует энтеротоксические и цитотоксические эффекты этих токсинов. Экспериментально эта протеаза способна блокировать связывание токсинов А и В со слизистыми оболочками, специфически лизировать токсин А, уменьшать секрецию, вызванную токсинами, и снижать проницаемость кишечника. 18, 19, 20

      Грамотрицательные микроорганизмы, такие как Escherichia coli , выделяют большое количество сильнодействующего эндотоксина, способного вызывать системную воспалительную реакцию. S. boulardii продуцирует новую протеинфосфатазу, которая способна дефосфорилировать эндотоксин в экспериментальной модели и инактивировать цитотоксические эффекты. 21

      Сотовая сигнализация

      S. boulardii способен модифицировать передачу клеточных сигналов от провоспалительного состояния.

      Несколько исследований локализовали действие дрожжей на ингибирование E. coli , индуцированного связыванием ДНК NF-каппа B и активацией MAP-киназ.

      Блокирование этих двух путей, вероятно, является причиной снижения синтеза ФНО-альфа при приеме S. boulardii. 22, 23

      Иммунная модуляция

      Лечение крыс S. boulardii приводит к значительному увеличению продукции секреторного IgA. Более специфический эффект наблюдался у мышей, ранее получавших анатоксин C. difficile токсина А. Секреция специфического токсина А IgA и антитоксина IgM отмечалась после введения S.boulardii введение. 24, 25

      Трофические эффекты

      S. boulardii усиливает активность ферментов щеточной каемки (сахараза-изомальтаза, лактаза, мальтаза-глюкоамилаза) у крыс и человека.

      Эти ферменты важны для переваривания питательных веществ и часто изменяются при желудочно-кишечных расстройствах. 26-29

      Еще более важным при работе с микрофлорой толстой кишки является влияние измененных концентраций короткоцепочечных жирных кислот (КЦЖК).

      S. boulardii пациентов-людей, получавших полное энтеральное питание, имели более высокую концентрацию бутирата в кале, КЦЖК, которые, как известно, обладают противовоспалительными свойствами, без изменения фекальной микробиоты. 30  

      Антисекреторные эффекты

      Как упоминалось ранее, S. boulardii снижает секрецию C. difficile , производных токсина А. 24,25

      При введении крысам перед касторовым маслом S.boulardii способен значительно минимизировать секреторную диарею, возможно, путем модуляции экспрессии iNOS. 31

      Противовоспалительное действие

      Обнаружена небольшая противовоспалительная молекула под названием Saccharomyces противовоспалительный фактор. 32 Увеличение противовоспалительного бутирата SCFAs было продемонстрировано в исследовании общего энтерального питания. 33

      Блокада патогенов

      Дрожжи в 10 раз больше большинства бактерий и, следовательно, обеспечивают определенный уровень стеариновой защиты от проникновения патогенов в слизистую оболочку. 2

      Дополнительно; клеточная стенка дрожжей представляет собой комбинацию хитина, маннозы и глюкана. Предполагается, что эта композиция очень привлекательна как для Salmonella , так и для E. coli, , при этом S. boulardii действует как «приманка» для хозяина. 34

      Имеются данные in vitro, демонстрирующие, что S. boulardii способны ингибировать прилипание клеток C. difficile. 35  Патоген-адгезивная микрофлора (ПАМ) — это пробиотики, которые связывают патогены и устраняют их с помощью пробиотического транзита. S. boulardii является идеальным PAM, потому что он привлекает многие патогены к маннозному слою стенки и не колонизирует кишечный тракт хозяина и, следовательно, способен уничтожать любые связанные с дрожжами патогены до того, как они прикрепятся к хозяину. 36

      Клинические исследования с участием Saccharomyces boulardii

      Антибиотик-ассоциированная диарея

      Антибиотикоассоциированная диарея (ААД) является распространенной проблемой как у человека, так и у животных.

      Профилактика диареи изучалась в нескольких рандомизированных контролируемых исследованиях.

      В метаанализе 5 рандомизированных контролируемых исследований, включавших 1076 взрослых и детей, было установлено, что S. boulardii эффективно снижает частоту диареи с 17,2% до 6,7% (ОР: 0,43; 95% ДИ: 0,23–0,78; NNT: 10; 95% ДИ 7-16). Большинство пациентов получали антибиотики по поводу респираторных инфекций. 37

      В исследовании, посвященном нескольким пробиотикам, плацебо-контролируемым рандомизированным клиническим испытаниям у детей снова были отмечены положительные эффекты.В анализ были включены шесть испытаний с участием 766 детей. Пробиотики в совокупности снижали риск диареи с 28,5% до 11,9% (ОР: 0,44, 95% ДИ 0,25–0,77).

      Эффективные пробиотические штаммы включали бактерии Lactobacillus GG, Bifidobacterium lactis и Streptococcus thermophilus и дрожжи S. boulardii.

      Еще лучшие результаты были отмечены при исследовании только S. boulardii : исследование 246 детей, получавших S.boulardii имел ОР: 0,2, 95% ДИ 0,07–0,6. Общий NNT составил 7 в этом мета-анализе. 38

      Мета-анализ 19 исследований с использованием смеси пробиотиков для профилактики ААД показал ОР 52% (95% ДИ 0,35-0,65). В исследование были включены пробиотики Lactobacillus GG, L. acidophilus и S. boulardii . Наибольшая защита была отмечена, когда пробиотики были начаты в течение первых 3 дней после введения антибиотика. 39

      Был проведен более крупный метаанализ 25 рандомизированных контролируемых исследований с участием 2810 пациентов, получавших различные пробиотики для профилактики или лечения ААД.Положительный эффект был замечен от использования пробиотиков в профилактике диареи, ОР 0,43, 95% ДИ 0,31-0,58. Пробиотики, которые оказались полезными, включали Lactobacillus GG и S. boulardii . Было обнаружено, что более высокие дозы значительно более эффективны. 40

      C. difficile Диарея

      C. difficile диарея (CDD) — заболевание, отмечаемое как у человека, так и у животных. Часто заболевание связано с приемом антибиотиков и рецидивы проблематичны.

      Метаанализ McFarland, упомянутый выше, также изучал использование пробиотиков для предотвращения CDD. Было включено шесть рандомизированных контролируемых испытаний. ОР 0,59, 95% ДИ 0,41–0,85 был значительным, но только S. boulardii были отмечены как эффективные для профилактики CDD. 40

      Было проведено рандомизированное контролируемое исследование для оценки эффектов S. boulardii в качестве дополнительной терапии к метронидазолу или ванкомицину у 124 пациентов.

      Введение пробиотика S.boulardii приводил к 50% снижению рецидивов CDD у пациентов, у которых ранее были рецидивы. 41

      Острая диарея у детей и взрослых

      Диарея, вызванная различными причинами (вирусная, бактериальная, «диарея путешественников», неизвестные причины), обычно лечится инфузионной терапией. В очень большом Кокрейновском обзоре 1917 пациентов в рамках 23 исследований изучались преимущества применения пробиотиков с регидратационной терапией, и было определено, что пробиотики снижают риск диареи (ОР: 0.66, 95% ДИ 0,55-0,77) и продолжительность диареи на 30,48 часа (95% ДИ 18,51-42,46 часа). 42

      Мета-анализ пяти рандомизированных контролируемых испытаний с участием 619 детей, получавших S. boulardii от острой диареи, показал значительное уменьшение диареи по сравнению с контрольными группами: -1,1 дня 95% ДИ от -1,3 до -0,8). Кроме того, в группе лечения значительно снизился риск продолжительной диареи >7 дней: ОР 0,25, 95% ДИ 0,08–0,83; NNT=5, 95% ДИ 3-20. 43

      Kurugol изучали эффекты S.boulardii у 200 детей с острой диареей в двойном слепом рандомизированном контролируемом исследовании. S. boulardii групп имели значительно более короткую продолжительность диареи, а также количество дней госпитализации. 44

      В Пенсильванском университете было проведено небольшое рандомизированное слепое плацебо-контролируемое исследование с участием 14 лошадей. Лошадям вводили S. boulardii наряду со стандартным лечением острой диареи. Авторы отметили значительное снижение тяжести и продолжительности диареи во время госпитализации у лошадей, получавших S.буларди.  

      Одновременно проводилось экспериментальное исследование концепции. Этот пилотный проект действительно доказал, что введение 10-20×10 9 S. boulardii способно пережить желудочно-кишечный транзит у лошади, и, как и у людей, дрожжевые грибки выводятся из организма в течение нескольких дней после прекращения приема. 10

      –> Нажмите здесь, чтобы узнать о пробиотике № 1 saccharomyces boulardii

      , используемом ветеринарами для борьбы с диареей и заболеваниями пищеварительного тракта.<--

      Воспалительные заболевания кишечника (ВЗК)

      Болезнь Крона — это форма ВЗК у людей. Несколько форм ВЗК, вероятно, существуют у животных всех видов. Двойное слепое исследование 20 пациентов с болезнью Крона показало, что добавление S. boulardii к противовоспалительной терапии значительно уменьшало перистальтику кишечника. 45  

      Пилотное исследование 25 пациентов с язвенным колитом показало, что при добавлении S. boulardii к противовоспалительным препаратам 68% пациентов смогли добиться терапевтического успеха при неконтролируемом заболевании. 46

      Диарея при зондовом питании

      Животные и люди страдают диареей при полном энтеральном питании. Было проведено три исследования с участием пациентов в отделениях интенсивной терапии.

      У пациентов, получавших полное энтеральное питание, и S. boulardii наблюдалось умеренное снижение частоты и продолжительности диареи. 47-49

      В одном исследовании также было отмечено значительное улучшение переносимости энтеральных смесей. 49

      –> Купите сейчас, чтобы предотвратить и защитить пищеварительное здоровье вашей собаки 

      с ежемесячной подпиской и получите 20% от обычной цены! <--
      Заключение

      Четыре причины скептицизма доктора Клэнси в отношении использования пробиотиков тщательно изучены в ходе долгосрочного интенсивного исследования S. boulardii.

      В настоящее время определены многие механизмы действия: производство протеаз и фосфатов in vivo, которые специфически расщепляют токсины и их рецепторы, тем самым предотвращая действие токсинов, блокирование провоспалительных клеточных сигналов, иммуномодуляция, трофические эффекты, антисекреторные эффекты, противовоспалительные свойства и прямые блокада возбудителя.

      Завершены медицинские испытания как на людях, так и в ветеринарии.

      Обработка этих исследований с использованием метаанализа предоставила убедительные доказательства эффективности Saccharomyces boulardii преимуществ при использовании для профилактики или лечения AAD, CDD, неспецифической диареи у взрослых и детей.

      Хотя ветеринарная литература остается скудной, существуют данные об использовании S. boulardii у животных.

      На самом деле, этот небольшой объем литературы ЗНАЧИТЕЛЬНО ПЕРЕВЕШИВАЕТ любое исследование пробиотиков, проведенное ранее.Дополнительные медицинские данные также поддерживают использование S. boulardii при воспалительных заболеваниях кишечника и в качестве дополнения к полному энтеральному питанию.

      Хотя животные — это не люди, очевидно, что как на фундаментальном научном уровне, так и в ходе рандомизированных клинических испытаний добывается огромное количество данных, требующих тщательного ветеринарного контроля.

      Действительно, доказательство концепции было четко продемонстрировано в лаборатории, на людях и в небольшом исследовании на лошадях.

      С.boulardii, , единственный непатогенный дрожжевой пробиотик с биотерапевтическими свойствами, предлагает ветеринарам новую терапию при уходе за животными, включая собак, кошек и лошадей.

       

      С ограничениями, которые были выявлены для доступных в настоящее время ветеринарных пробиотиков, и с небольшим количеством доступных клинических исследований, S. boulardii в дозе 20-50 x 10 9 PO каждые 12-24 ч в задокументированном составе является единственным доказательный пробиотик, доступный ветеринарам-коневодам для лечения и профилактики желудочно-кишечных заболеваний.

      Saccharomyces boulardii ПРИМЕЧАНИЯ:

      1 Havenaar R, Huis in’t Veld JHJ. Пробиотики: общий вид. В: Вуд Б, изд. Молочнокислые бактерии в здоровье и болезнях, Лондон, Великобритания: Elsevier Applied Science, 1992: 209-24.

      2  Czerucka D, Piche T, Rampal P. Обзорная статья: дрожжи как пробиотики — Saccharomyces boulardii. Алимент Фармакол Тер. 2007 г., 15 сентября; 26 (6): 767-78.

      3 Клэнси Р. Иммунобиотики и эволюция пробиотиков.FEMS Immunol Med Microbiol. 2003 18 августа; 38(1):9-12.

      4 Клиглер Б., Корссен А. Пробиотики. Ам семейный врач. 2008 1 ноября; 78 (9): 1073-8.

      5 Weese JS. Оценка недостатков маркировки коммерческих пробиотиков. Can Vet J. 2003 Dec;44(12):982-3.

      6 Weese JS. Микробиологическая оценка коммерческих пробиотиков. J Am Vet Med Assoc. 2002 15 марта; 220 (6): 794-7.

      7   Обзор продукции Consumerlab.com: пробиотические добавки (включая Lactobacillus acidophilus, Bifidcobacterium, и другие).http://www.consumerlab.com/results/probiotics.asp. По состоянию на 16 марта 2009 г.

      8 Бутс Дж.П. Двадцать пять лет исследований трофических эффектов Saccharomyces boulardii: обновления и перспективы. Dig Dis Sci. 2009 Январь; 54 (1): 15-8.

      9 Ducluzeau R, Bensaada M. Сравнительный эффект однократного или непрерывного введения «Saccharomyces boulardii» на закрепление различных штаммов «candida» в пищеварительном тракте гнотобиотических мышей. Энн Микробиол (Париж).1982, ноябрь-декабрь; 133(3):491-501.

      10 Дерошерс А.М., Доленте Б.А., Рой М.Ф., Бостон Р., Карлайл С.Дж. Эффективность Saccharomyces boulardii для лечения лошадей с острым энтероколитом.

      J Am Vet Med Assoc. 2005 г., 15 сентября; 227(6):954-9.

        11 McFarland LV. Saccharomyces boulardii не является Saccharomyces cerevisiae. Клин Инфекция Дис. 1996 янв.; 22(1):200-1.

      12 Бутс Дж.П. Механизмы действия биотерапевтических средств. В: Элмер Г.В., Макфарланд Л.В., Суавиц К.М., ред.Биотерапевтические агенты и инфекционные заболевания. Тотова, Нью-Джерси: Humana Press, 1999; 27–46.

      13 Блехаут Х., Массо Дж., Элмер Г.В., Леви Р.Х. Кинетика распределения Saccharomyces boulardii у человека и крысы. Biopharm Drug Dispos. 1989 г., июль-август; 10(4):353-64.

        14 Buts JP, Bernasconi P. Saccharomyces boulardii: фундаментальные научные исследования и клиническое применение в гастроэнтерологии. Гастроэнтерол Клин Норт Ам. 2005 г., сен; 34 (3): 515–32.

      15 Фей К., Сассе Х.Х.Кишечная флора лошади: обзор. Пфердехейлкундле, 1996 г.; 22:855-863.

      16 Elmer GW, Corthier G. Модуляция смертности, вызванной Clostridium difficile, в зависимости от дозы и жизнеспособности Saccharomyces boulardii, используемых в качестве профилактического средства у гнотобиотических мышей. Может J Microbiol. 1991 Апрель; 37 (4): 315-7.

      17 Матхур С., Сингх Р. Устойчивость к антибиотикам пищевых молочнокислых бактерий — обзор. Int J Food Microbiol. 2005 г., 15 декабря; 105(3):281-95.

      18 Pothoulakis C, Kelly CP, Joshi MA, Gao N, O’Keane CJ, Castagliuolo I, Lamont JT.

      Saccharomyces boulardii подавляет связывание и энтеротоксичность токсина А Clostridium difficile в подвздошной кишке крыс. Гастроэнтерология. 1993 г., апрель; 104(4):1108-15.

      19 Castagliuolo I, Riegler MF, Valenick L, LaMont JT, Pothoulakis C. Протеаза Saccharomyces boulardii ингибирует действие токсинов Clostridium difficile A и B на слизистую оболочку толстой кишки человека. Заразить иммун.1999 г., январь; 67 (1): 302-7.

      20 Castagliuolo I, LaMont JT, Nikulasson ST, Pothoulakis C. Протеаза Saccharomyces boulardii ингибирует действие токсина А Clostridium difficile в подвздошной кишке крысы. Заразить иммун. 1996 декабрь; 64 (12): 5225-32.

      21 Buts JP, Dekeyser N, Stilmant C, Delem E, Smets F, Sokal E. Saccharomyces boulardii продуцирует в тонком кишечнике крыс новую протеинфосфатазу, которая ингибирует эндотоксин Escherichia coli путем дефосфорилирования. Педиатр рез. 2006 г., июль; 60 (1): 24–9.

      22 Черука Д., Дахан С., Мограби Б., Росси Б., Рампал П. Saccharomyces boulardii сохраняет барьерную функцию и модулирует путь передачи сигнала, индуцированный в клетках Т84, инфицированных энтеропатогенной кишечной палочкой. Заразить иммун. 2000 г., октябрь; 68 (10): 5998-6004.

      23 Dahan S, Dalmasso G, Imbert V, Peyron JF, Rampal P, Czerucka D. Saccharomyces boulardii вмешивается в энтерогеморрагические сигнальные пути, индуцированные Escherichia coli, в клетках T84. Заразить иммун.2003 г., февраль; 71(2):766-73.

      24 Камар А., Абудола С., Уорни М., Микетти П., Потулакис С., Ламонт Дж. Т., Келли С. П.

      Saccharomyces boulardii стимулирует иммунный ответ кишечного иммуноглобулина А на токсин А Clostridium difficile у мышей. Заразить иммун. 2001 г., апрель; 69 (4): 2762-5.

        25 Buts JP, Bernasconi P, Vaerman JP, Dive C. Стимуляция секреторного IgA и секреторного компонента иммуноглобулинов в тонком кишечнике крыс, получавших Saccharomyces boulardii.Dig Dis Sci. 1990 фев; 35 (2): 251-6.

      %PDF-1.4 % 239 0 объект > эндообъект внешняя ссылка 239 134 0000000016 00000 н 0000003857 00000 н 0000004082 00000 н 0000004109 00000 н 0000004181 00000 н 0000004217 00000 н 0000004907 00000 н 0000005050 00000 н 0000005241 00000 н 0000005278 00000 н 0000069730 00000 н 0000069759 00000 н 0000069902 00000 н 0000070093 00000 н 0000070237 00000 н 0000070426 00000 н 0000070570 00000 н 0000070759 00000 н 0000070903 00000 н 0000071078 00000 н 0000071271 00000 н 0000071448 00000 н 0000071637 00000 н 0000071820 00000 н 0000072011 00000 н 0000072091 00000 н 0000072171 00000 н 0000072249 00000 н 0000072328 00000 н 0000072406 00000 н 0000072485 00000 н 0000072563 00000 н 0000072643 00000 н 0000072722 00000 н 0000072802 00000 н 0000072882 00000 н 0000072962 00000 н 0000073041 00000 н 0000073120 00000 н 0000073199 00000 н 0000073279 00000 н 0000073358 00000 н 0000073437 00000 н 0000073515 00000 н 0000073594 00000 н 0000073672 00000 н 0000073752 00000 н 0000073832 00000 н 0000073912 00000 н 0000073992 00000 н 0000074072 00000 н 0000074132 00000 н 0000075327 00000 н 0000075783 00000 н 0000076163 00000 н 0000076564 00000 н 0000076984 00000 н 0000077428 00000 н 0000078160 00000 н 0000078460 00000 н 0000078867 00000 н 0000079376 00000 н 0000079589 00000 н 0000081469 00000 н 0000081956 00000 н 0000082318 00000 н 0000082793 00000 н 0000084802 00000 н 0000085186 00000 н 0000085436 00000 н 0000087831 00000 н 00000 00000 н 00000 00000 н 00000 00000 н 00000 00000 н 00000 00000 н 0000092800 00000 н 0000098994 00000 н 0000100036 00000 н 0000100606 00000 н 0000100849 00000 н 0000100895 00000 н 0000103021 00000 н 0000105056 00000 н 0000109595 00000 н 0000115448 00000 н 0000215960 00000 н 0000222358 00000 н 0000235722 00000 н 0000240005 00000 н 0000242413 00000 н 0000251559 00000 н 0000251820 00000 н 0000253670 00000 н 0000253900 00000 н 0000254423 00000 н 0000254530 00000 н 0000258116 00000 н 0000258155 00000 н 0000258693 00000 н 0000258816 00000 н 0000258888 00000 н 0000259034 00000 н 0000259157 00000 н 0000259307 00000 н 0000259481 00000 н 0000259635 00000 н 0000259783 00000 н 0000259923 00000 н 0000260088 00000 н 0000260243 00000 н 0000260384 00000 н 0000260543 00000 н 0000260718 00000 н 0000260943 00000 н 0000261100 00000 н 0000261217 00000 н 0000261366 00000 н 0000261502 00000 н 0000261658 00000 н 0000261822 00000 н 0000261970 00000 н 0000262116 00000 н 0000262278 00000 н 0000262436 00000 н 0000262640 00000 н 0000262852 00000 н 0000263132 00000 н 0000263336 00000 н 0000263556 00000 н 0000263681 00000 н 0000263808 00000 н 0000263940 00000 н 0000002976 00000 н трейлер ]/предыдущая 580238>> startxref 0 %%EOF 372 0 объект >поток hagged [email protected]!ҦKyΔtlthREXEaFӅp+vw6ah$Qo”

      %PDF-1.4 % 40 0 объект > эндообъект внешняя ссылка 40 80 0000000016 00000 н 0000002572 00000 н 0000002699 00000 н 0000004227 00000 н 0000004252 00000 н 0000004389 00000 н 0000004449 00000 н 0000004839 00000 н 0000004950 00000 н 0000005063 00000 н 0000005462 00000 н 0000005652 00000 н 0000006108 00000 н 0000007210 00000 н 0000007349 00000 н 0000008483 00000 н 0000009475 00000 н 0000010467 00000 н 0000010996 00000 н 0000011079 00000 н 0000011503 00000 н 0000011949 00000 н 0000012357 00000 н 0000012677 00000 н 0000013180 00000 н 0000014207 00000 н 0000014422 00000 н 0000014748 00000 н 0000015093 00000 н 0000015187 00000 н 0000015621 00000 н 0000016310 00000 н 0000017017 00000 н 0000017100 00000 н 0000017907 00000 н 0000018295 00000 н 0000018791 00000 н 0000020180 00000 н 0000021119 00000 н 0000021799 00000 н 0000024834 00000 н 0000027903 00000 н 0000033189 00000 н 0000034325 00000 н 0000034554 00000 н 0000034636 00000 н 0000034689 00000 н 0000034758 00000 н 0000034852 00000 н 0000060511 00000 н 0000060791 00000 н 0000061104 00000 н 0000061129 00000 н 0000061559 00000 н 0000062967 00000 н 0000063290 00000 н 0000063657 00000 н 0000064732 00000 н 0000065044 00000 н 0000065401 00000 н 0000082925 00000 н 0000083202 00000 н 0000083572 00000 н 0000119908 00000 н 0000120177 00000 н 0000120685 00000 н 0000136630 00000 н 0000136905 00000 н 0000137201 00000 н 0000144647 00000 н 0000144918 00000 н 0000145369 00000 н 0000151577 00000 н 0000151845 00000 н 0000152328 00000 н 0000154036 00000 н 0000201163 00000 н 0000202906 00000 н 0000207675 00000 н 0000001896 00000 н трейлер ]/предыдущая 305573>> startxref 0 %%EOF 119 0 объект >поток hb“`b“ A؀,`”00p123hpų8,j\qVf

      Эффективность BIO K+ CL1285® в снижении антибиотикоассоциированной диареи – плацебо-контролируемое двойное слепое рандомизированное многоцентровое исследование

      Введение

      Диарея является одним из наиболее частых нежелательных явлений, связанных с лечением антибиотиками.Изменения в балансе и разнообразии состава нормальной кишечной флоры были идентифицированы как два основных фактора, участвующих в патогенезе антибиотикоассоциированной диареи [1, 2]. Заболеваемость ААД широко варьирует от 10 до 30% и была определена как ведущая причина диареи у госпитализированных пациентов [3]. Начало AAD может произойти уже через несколько часов после первой дозы или через 2 месяца после прекращения антибактериальной терапии [1].Осмотическая диарея является наиболее частым проявлением ААД и вызывается изменениями ферментации углеводов и метаболизма желчных кислот, вызванными снижением анаэробной флоры [4, 5]. На величину этих изменений влияет тип используемого антибиотика, а также способность кишечной флоры противостоять колонизации патогенами. В некоторых случаях изменения в составе кишечной флоры приводят к пролиферации патогенных организмов, таких как Staphylococcus aureus, Candida spp., Klebsiella oxytoca и Clostridium difficile [5, 6]. Учитывая, что механизм действия ААД основан на остром нарушении нормальной флоры кишечника, вмешательства, которые могли бы противодействовать этому эффекту, проводимые до или одновременно с лечением антибиотиками, были бы эффективны для предотвращения или уменьшения тяжести ААД.
      Продовольственная и сельскохозяйственная организация Объединенных Наций и Всемирная организация здравоохранения определили пробиотики как «живые организмы, которые при введении в адекватных количествах приносят пользу здоровью хозяина» [7].Накапливаются доказательства того, что пробиотики полезны для предотвращения и сокращения продолжительности AAD из растущего числа клинических исследований [8-11]. Механизмы, с помощью которых пробиотики проявляют свое терапевтическое действие, включают:
      1) модуляцию барьерной функции эпителиальных клеток,
      2) антагонистическую активность в отношении патогенных бактерий либо путем ингибирования прикрепления и транслокации, либо путем продукции антибактериальных веществ,
      3) модуляцию кишечных цитокинов продукции,
      4) противовоспалительные свойства и
      5) улучшение проходимости кишечника [12-14].
      Однако в недавнем метаанализе [15] только 13 (52%) из 25 проанализированных исследований сообщили о благотворном влиянии пробиотиков на профилактику ААД. Разногласия в результатах, представленных в этих исследованиях, могут быть связаны с различиями в популяции пациентов, типом и дозой пробиотиков, классом используемых антибиотиков и продолжительностью лечения [15].
      Роль рода Lactobacillus в снижении AAD тщательно изучалась. Хиксон и его коллеги сообщили об эффективности пробиотического напитка, содержащего Lactobacillus casei, Lactobacillus bulgaricus и Streptococcus thermophilus, в снижении заболеваемости AAD и C.difficile-ассоциированная диарея (CDAD) у 135 пожилых пациентов больницы [9]. В недавнем исследовании пробиотический молочный напиток, содержащий Lactobacillus rhamnosus GG, Lactobacillus acidophilus La-5 и Bifidobacterium Bb-12, снижал риск AAD на 79% у госпитализированных взрослых пациентов [10]. Штамм L. rhamnosus GG также доказал свою эффективность в профилактике ААД в выборке из 188 детей, получавших пероральные антибиотики от распространенных детских инфекций [16].
      При оценке потенциальной пользы пробиотиков при ААД следует отметить, что эффект сильно зависит от штамма, и обобщение результатов на родственные штаммы недопустимо [10, 17].Поэтому важно, чтобы отдельные штаммы оценивались независимо и чтобы результаты интерпретировались для конкретного штамма.
      BIO K+ CL1285® — коммерчески доступный пробиотик с запатентованной формулой, содержащей штамм L. acidophilus CL1285® человеческого происхождения, зарегистрированный в Институте Пастера, и штамм L. casei. В рандомизированном клиническом исследовании кисломолочная смесь, состав BIO K+ CL1285®, показала свою эффективность в профилактике ААД у госпитализированных пациентов [11].Однако это было одноцентровое исследование с относительно небольшим размером выборки. Среди экспертов существует консенсус в отношении того, что для адекватной оценки и демонстрации эффективности пробиотиков в лечении и профилактике ААД необходимы хорошо спланированные клинические испытания с большим размером выборки [10, 15, 17, 18].
      На основании приведенного выше обсуждения ожидается, что введение BIO K+ CL1285® одновременно с антибиотиком сведет к минимуму дестабилизацию нормальной кишечной флоры и будет эффективным в снижении AAD.Цель настоящего исследования состояла в том, чтобы оценить эффективность и безопасность BIO K+ CL1285® по сравнению с плацебо в снижении частоты и тяжести ААД у пациентов, получавших лечение в условиях стационара.

      Материалы и методы

      Дизайн исследования и лечение
      Это было многоцентровое двойное слепое рандомизированное плацебо контролируемое исследование, которое проводилось в восьми канадских центрах в период с марта 2006 г. по октябрь 2007 г. Пациенты были рандомизированы в соотношение 1:1 для получения БИО К+ или плацебо .Рецептура ферментированного молока лактобацилл BIO K+ CL1285® представляла собой комбинацию 50 × 109 колониеобразующих единиц L. acidophilus CL1285® и L. casei (BIO K+ CL1285®, BIO K+ International Inc., Канада). Продолжительность лечения составляла от 29 до 40 дней. Схема дозирования составляла 49 г/день в течение первых 2 дней, чтобы оценить переносимость продукта пациентом, а затем полная доза 98 г/день в течение оставшегося периода лечения. Плацебо было приготовлено компанией BIO K+ International и представляло собой лактосыворотку, лишенную каких-либо микроорганизмов, с текстурой и вкусом, аналогичными BIO K+.Препараты БИО К+ и плацебо вводили в течение 24 ч после первой дозы антибиотика и продолжали один раз в день в течение ± 2 ч после введения антибиотика и в течение 5 дней после прекращения курса антибиотикотерапии.
      Пациентам были предоставлены дневниковые карточки для регистрации использования антибиотиков и исследуемых продуктов, а также наличия диареи в период лечения. Дополнительные последующие оценки проводились через 21 день после прекращения лечения.В течение 21-дневного периода наблюдения пациентов просили заполнять дневниковые карточки только в случае возникновения диареи.
      Тестирование на CDAD проводилось по усмотрению лечащего врача и в соответствии с протоколом, принятым в исследовательских центрах. CDAD определяли как эпизод диареи и положительные результаты на C. difficile Toxin A или B. Данные о пациентах, выписанных из больницы до окончания исследования, были получены путем самостоятельного ведения дневника и стандартизированного телефонного интервью.
      Все статистические анализы были проведены на популяции пациентов с намерением лечить (ITT), которая включала всех пациентов, получивших по крайней мере одну дозу исследуемого продукта, минимум три дня лечения антибиотиками и имевших по крайней мере один визит для последующего наблюдения, чтобы можно было установить результатов исследования.
      Потенциально подходящие пациенты подписали форму информированного согласия до выполнения какой-либо процедуры исследования. Протокол исследования был одобрен внутренним наблюдательным советом каждого учреждения и проводился в соответствии с принципами Хельсинкской декларации.

      Исследуемая популяция

      Для включения в исследование пациенты должны были быть старше 18 лет, находиться на лечении в отделении неотложной помощи или в больничной палате не менее 12 часов и получать антибиотикотерапию в течение минимум три дня и максимум 14 дней. Все пациенты должны были получить не более 24 ч антибактериальной терапии до включения в исследование. Критерии исключения включали активную диарею при включении в исследование, ежедневное потребление кисломолочных продуктов и/или йогурта в анамнезе, известную непереносимость лактозы, беременных/кормящих женщин, активное и неконтролируемое кишечное заболевание, илеостому, еюностому или колостому в анамнезе, иммунный статус. -супрессивное состояние или состояние, диагноз C.difficile-ассоциированная диарея в течение предшествующих трех месяцев, активная лучевая терапия или химиотерапия, недавняя (

      Показатели исхода

      Первичными показателями исхода эффективности были тяжесть и частота ААД в течение периода лечения и 21-дневного наблюдения. При установлении результатов исследования день диареи определяли как один или несколько эпизодов неоформленного или жидкого стула в течение 24 ч. Заболеваемость диареей определяли как долю пациентов с одним или несколькими днями диареи от общего числа пациентов. в популяции ИТТ.Тяжесть оценивали по продолжительности, определяемой как общее количество дней с диареей. Вторичные показатели эффективности включали заболеваемость CDAD. Безопасность оценивали по частоте нежелательных явлений, возникающих при лечении, о которых сообщалось в соответствии со словарем терминов MedDRA (версия 10.1).

      Статистический анализ

      Расчеты размера выборки были проведены для выявления 50% снижения частоты диареи в пользу группы лечения.На основании имеющихся в литературе данных и предварительных результатов исследования BIO K+ предполагалось, что частота диареи в группе плацебо составит 20%. Таким образом, чтобы выявить статистическую значимость с мощностью 80% и значимостью 5%, а также с относительным риском 0,50, в исследование должны были быть включены в общей сложности 200 поддающихся оценке пациентов на группу. С учетом 20% отсева необходимо было набрать в общей сложности 500 пациентов.
      Описательные статистические данные, включая среднее значение и стандартное отклонение для переменных непрерывной шкалы, а также частотные распределения для категориальных переменных были представлены для всех переменных исследования по группам лечения.Различие между группами в отношении частоты диареи оценивали на статистическую значимость с помощью критерия 2. Относительный риск, оцененный с помощью отношения шансов на основе логистической регрессии, использовался для оценки величины и точности различий. Статистическую значимость различий между группами в отношении продолжительности диареи оценивали с помощью критерия Стьюдента для независимых выборок. Скорректированный анализ был основан на многомерной бинарной логистической регрессии для частоты диареи и общих линейных моделях для продолжительности диареи.В скорректированном анализе потенциальными вмешивающимися переменными, которые были включены в качестве ковариатов в многомерные модели, были возраст, пол, продолжительность лечения, продолжительность использования антибиотиков, изменения в использовании антибиотиков и история AAD. Эти ковариаты были выбраны априори из-за их потенциальной важности как факторов риска и прогностических предикторов диареи. Процесс обратного отбора, основанный на статистике Вальда с допуском  0,15, использовался для выбора окончательного набора ковариат, включенных в многомерные модели.
      Оценка безопасности проводилась для всех пациентов, получивших хотя бы одну дозу исследуемого препарата, и оценивалась по количеству событий и количеству пациентов, у которых в течение периода лечения возникло хотя бы одно серьезное или несерьезное нежелательное явление, связанное с лечением. Причинно-следственная связь нежелательного явления с исследуемым препаратом была установлена ​​лечащим врачом.
      Все анализы были основаны на популяции, предназначенной для лечения. Ни один пациент не был исключен из анализа из-за нарушения или несоблюдения протокола.Замены отсутствующих значений или импутации не производились, и все анализы проводились на наблюдаемых случаях. Статистические решения для продуктов и услуг (версия SPSS 12.0 для Windows) использовались для всех статистических анализов.

      Результаты

      Распределение пациентов и исходные характеристики
      Среди 472 рандомизированных пациентов 29 пациентов были исключены из анализа ITT из-за продолжительности лечения антибиотиками менее 3 дней, а 6 пациентов были исключены из-за того, что диарея возникла до начала лечения исследования.Таким образом, всего 437 человек (92,6%) были включены в ITT-популяцию (рис. 1).
      Демографические данные пациентов и исходные характеристики были сходными для групп BIO K+ и плацебо (таблица I). Более 50% пациентов были госпитализированы со средней продолжительностью пребывания в стационаре 8,8 и 7,1 для групп BIO K+ и плацебо соответственно. Наиболее частым типом антибиотиков, которые принимались во время исследования, были -лактамы, включая цефалоспорин и пенициллин, 76 человек.9% пациентов в группе БИО К+ и 78,3% пациентов в группе плацебо . Наиболее частым фоновым состоянием для применения антибиотиков были респираторные инфекции у 39,4% пациентов в группе БИО К+ и у 38,5% пациентов в группе плацебо . Средняя (SD) продолжительность лечения антибиотиками составила 9,8 (3,9) дня для группы BIO K+ и 9,7 (3,8) дня для группы плацебо . Средняя продолжительность лечения исследуемым продуктом составляла приблизительно 12 лет.0 дней для обеих групп.

      Исходы эффективности

      Средняя (СО) продолжительность диареи составила 0,67 (2,05) [95% ДИ: 0,39-0,94] дней для группы БИО К+ и 1,19 (3,20) [95% ДИ: 0,77-1,62] дней для группы плацебо (p = 0,040) (таблица II). Процедура обратного отбора для модели многомерной линейной регрессии, оценивающая различия между группами в отношении продолжительности диареи, сохранила в модели следующие переменные: группа лечения, продолжительность антибактериальной терапии, возраст пациента и продолжительность исследуемого лечения в зависимости от пола, изменение антибиотика. лечение и история AAD не были сохранены.Окончательная модель линейной регрессии показала значительный эффект лечения с уменьшением скорректированного среднего числа дней с диареей в группе BIO K+ по сравнению с группой плацебо на 51,5% (b[SE] = 0,515 [0,256]; 95% ДИ [0,012–1,018]). Скорректированные оценки среднего наименьших квадратов, основанные на этой многомерной линейной регрессии для количества дней с диареей, были аналогичны нескорректированным оценкам, а скорректированная разница между группами оставалась статистически значимой (p = 0,045).
      Частота диареи составила 21,8% в группе BIO K+ по сравнению с 29,4% в группе плацебо . Это различие приближалось к статистической значимости (отношение шансов [95% ДИ] = 0,667 [0,433–1,030], р = 0,067). Тем не менее, выборка исследования была недостаточно мощной, с мощностью всего 40%, чтобы обнаружить это различие как статистически значимое. Окончательная модель многофакторной логистической регрессии, оценивающая разницу между группами в отношении частоты новых случаев ААД, сохранила те же ковариаты, что и модель линейной регрессии, в частности группу лечения, продолжительность исследуемого лечения, продолжительность антибактериальной терапии и возраст пациента.Результаты этого анализа показали статистически значимое скорректированное отношение шансов диареи для группы BIO K+ по сравнению с группой плацебо , равное 0,627 (95% ДИ [0,405–0,971], p = 0,037).
      12,5% пациентов в группе БИО К+ и 19,0% в группе плацебо имели диарею  2 дней (р = 0,062). Доля пациентов с диареей  3 дней составила 7,9% в группе БИО К+ и 13,6% пациентов в группе плацебо (р = 0,054). Эти различия приближались к статистической значимости, поскольку исследование было недостаточно мощным, 40 и 42% соответственно, чтобы обнаружить эти эффекты как статистически значимые. плацебо были 0,554 (95% ДИ: 0,326-0,940, p = 0,029) для продолжительности диареи  2 дней и 0,504 (95% ДИ: 0,269-0,944, p = 0,032) для диареи  3 дней.
      Было 16 пациентов в группе BIO K+ и 30 в группе плацебо , которые прошли тестирование CDAD. Из них 1 (6,2%) пациента в группе БИО К+ и 4 (13,3%) в группе плацебо были положительными на токсины C. difficile (отношение шансов = 0,433, p = 0,645). Частота вздутия живота составила 21,8% в группе БИО К+ по сравнению с группой, получавшей БИО К+.19,9% в группе плацебо . Частота болезненных судорог составила 14,8% в группе BIO K+ и 15,8% в группе плацебо , тогда как частота стула с примесью крови составила 1,9 против 4,1% соответственно. Ни одно из этих различий не было статистически значимым.

      Безопасность

      Об одном или нескольких несерьезных нежелательных явлениях, возникших во время лечения, сообщили 72 (33,3%) пациента в группе BIO K+ и 76 (34,4%) пациентов в группе плацебо . Статистически значимой разницы между двумя исследуемыми группами в отношении частоты развития НПВП, возникающих при лечении, не было (таблица III).Наиболее частыми несерьезными нежелательными явлениями были запор, метеоризм и тошнота. Всего было зарегистрировано 38 серьезных нежелательных явлений; 15 в группе BIO K+ и 23 в группе плацебо в ходе исследования. Ни одно из серьезных нежелательных явлений не было связано с лечебным продуктом. Во время исследования было зарегистрировано восемь смертей, четыре в группе плацебо и три в группе BIO K+. Ни одна из смертей не была причинно связана с исследуемым продуктом.

      Обсуждение

      Результаты этого рандомизированного двойного слепого плацебо контролируемого исследования показали, что лактобактериальный ферментированный молочный продукт BIO K+ CL1285® эффективно снижает тяжесть и частоту возникновения ААД у пациентов, получавших антибиотики в условиях стационара.
      Продолжительность диареи, используемая в качестве меры тяжести AAD, составила 1,19 дня в группе плацебо и 0,67 дня в группе BIO K+. Это статистически и клинически значимое нескорректированное снижение на 43.7% в средней продолжительности диареи. После поправки на исходные прогностические переменные результаты показывают, что в среднем диарея будет уменьшаться на 51,5% у пациентов, получавших BIO K+, по сравнению с пациентами, получавшими плацебо . Это сокращение продолжительности диареи, которое является как клинически важным, так и статистически значимым, имеет серьезные последствия для качества жизни пациентов, а также для прямых и косвенных затрат на здравоохранение, связанных с лечением ААД.
      Результаты этого исследования показали нескорректированное снижение риска диареи (заболеваемости) на 33% у пациентов, получавших BIO K+, по сравнению с плацебо .Хотя этот лечебный эффект является клинически важным, исследование не обладало достаточной мощностью, чтобы определить величину этого эффекта как статистически значимую. Низкая мощность была обусловлена ​​более высокой (29,4%), чем ожидаемая, 20% заболеваемостью диареей в группе плацебо . Это возможная слабость текущего исследования, которая связана с предположениями, использованными для расчета размера выборки. Многомерный логистический регрессионный анализ контролировал влияние ковариат, тем самым снижая внутригрупповую дисперсию и повышая мощность исследования.Эти результаты показали, что после поправки на влияние потенциальных искажающих факторов лечение BIO K+ привело к статистически значимому снижению риска ААД на 37,3%. Хотя тип сопутствующего лечения может быть связан с повышенным риском диареи; две группы были очень хорошо согласованы по этому параметру, и, следовательно, нет необходимости смешивать эффект лечения.
      Результаты текущего исследования сопоставимы с другими, в которых сообщалось об эффективности пробиотиков в снижении заболеваемости ААД [9-11, 16, 17, 19-21].Однако большинство этих исследований было проведено на меньшем числе пациентов. И наоборот, текущее исследование проводилось в нескольких центрах по всей Канаде и в более крупной и разнообразной выборке пациентов, которая является репрезентативной для целевой группы населения. В основе патогенеза антибиотикозависимой диареи лежит нарушение нормальной флоры кишечника. Пробиотики, включая лактобациллы, эффективны для восстановления нормальной флоры и, таким образом, предотвращения или сокращения продолжительности диареи.Сходный механизм действия пробиотиков был отмечен при болезни Крона [22], синдроме раздраженного кишечника [23], язвенном колите [24] и у пациентов, перенесших анальный анастомоз подвздошной кишки [25].
      Основная сила настоящего исследования унаследована от двойного слепого, плацебо-контролируемого дизайна. Учитывая ценность двойного слепого контролируемого исследования, результаты текущего исследования свидетельствуют о том, что пробиотик BIO K+ CL1285®, ферментированный лактобациллами, эффективен в профилактике диареи, связанной с приемом антибиотиков.Эти результаты имеют важное значение для общей целевой популяции, получающей антибиотики в условиях стационара, и показывают, что лечение BIO K+ CL1285® снижает продолжительность диареи примерно наполовину и риск диареи более чем на треть. Это приведет к значительному улучшению качества жизни пациентов и экономии затрат на здравоохранение за счет сокращения числа госпитализаций и использования ресурсов здравоохранения.
      В последние годы отмечается рост заболеваемости C.difficile в больничных условиях, при этом пожилые госпитализированные пациенты подвергаются повышенному риску. Фактически от 10 до 20% случаев C. difficile наблюдается у пожилых пациентов [26]. В текущем исследовании, несмотря на низкую общую заболеваемость C. difficile, более низкая частота наблюдалась в группе лактобацилл по сравнению с группой плацебо . Однако следует отметить, что тестирование на C. difficile проводилось не у всех пациентов и что тестирование зависело от решения лечащего врача и больничных протоколов.Необходимы дальнейшие исследования по оценке эффективности BIO K+ в профилактике CDAD, поскольку эта нозокомиальная инфекция остается важной проблемой здравоохранения во всем мире.
      Несмотря на высокую долю пациентов, сообщивших, по крайней мере, об одном нежелательном явлении в каждой группе, большинство (80%) нежелательных явлений были легкой степени тяжести, а частота возникновения была сходной в группах плацебо и лечебных группах. Эти результаты показывают, что BIO K+ в целом безопасен и хорошо переносится. В заключение, это исследование демонстрирует, что пробиотическая профилактика с помощью BIO K+ CL1285® безопасна и эффективна для снижения частоты и продолжительности антибиотикоассоциированной диареи у пациентов, получающих лечение антибиотиками в условиях стационара.

      Благодарности

      Доктор А. Пуарье (Региональный госпитальный центр Труа-Ривьер, Труа-Ривьер, Квебек), доктор Ю. Пезан (Центр медицинских исследований Св. Жерома, Сен-Жером, Квебек), д-р П. Рошетт (больница Лаваль, Квебек), д-р М. Сивилотти (Кингстонская больница общего профиля, Кингстон, Онтарио), д-р А. Ворстер (Гамильтонские медицинские науки, Гамильтон, Онтарио), д-р Магди Элькашаб ( North York General Hospital, Торонто, Онтарио) и д-р Д. Гримар (Centre de santé et services sociaux de Chicoutimi, Chicoutimi, Québec) внесли свой вклад в исследование в качестве главных исследователей в своих соответствующих центрах.Д-ру Л. Отмен (BIO K+ International Inc., Лаваль, Квебек) за ее вклад в исследование, сбор и проверку данных.

      Конфликт интересов

      Джо С. Далевски был координатором этого исследования. Доктор Дылевски отвечал за критический пересмотр и редактирование рукописи в отношении интеллектуального содержания. Джон С. Сампалис и Элиофотисти Псараделис являются сотрудниками JSS Medical Research Inc.; JSS Medical Research Inc. была оплачена BIO K+ International Inc.для проведения и управления этим исследованием. Компания JSS Medical Research Inc. отвечала за анализ и интерпретацию данных, а также за написание и рецензирование рукописи.
      Исследование финансировалось за счет гранта в поддержку исследований от BIO K+ International Inc.

      Ссылки

       1. Механизмы и лечение антибиотикоассоциированной диареи. Clin Infect Dis 1998; 27: 702-10.
      2. Янг В.Б., Шмидт Т.М. Антибиотикоассоциированная диарея, сопровождающаяся масштабными изменениями состава фекальной микробиоты.Дж. Клин Микробиол, 2004 г.; 42: 1203-6.
      3. Wiström J, Norrby SR, Myhre EB, et al. Частота антибиотикоассоциированной диареи у 2462 госпитализированных пациентов, получавших антибиотики: проспективное исследование. J Antimicrob Chemother 2001; 47: 43-50.
        4. McFarland LV. Эпидемиология, факторы риска и методы лечения антибиотикоассоциированной диареи. Диг Дис 1998; 16: 292-307.
       5. Kaltenbach G, Heitz D. Антибиотикоассоциированная диарея у пожилых людей [французский язык]. Rev Med Interne 2004; 25: 46-53.
       6.Божери Л., Пети Ж.К. Микробно-кишечные взаимодействия в норме и при болезнях. Антибиотикоассоциированная диарея. Best Pract Res Clin Gastroenterol 2004; 18: 337-52.
       7 Доклад совместной рабочей группы ФАО/ВОЗ. Руководство по оценке пробиотиков в пищевых продуктах. Лондон, Онтарио, Канада: ФАО/ВОЗ; ftp://ftp.fao.org/es/esn/food/wgreport2.pdf. 2002. Тип ссылки: Файл данных.
        8. Pedone CA, Bernabeau AO, Postaire ER. Влияние добавок молока, ферментированного Lactobacillus casei (штамм DN-114 001), на острую диарею у детей, посещающих детские сады.Международная клиническая практика, 1999 г.; 53: 179-84.
        9. Hickson M, D’Souza AL, Muthu N, et al. Использование пробиотического препарата Lactobacillus для предотвращения диареи, связанной с антибиотиками: рандомизированное двойное слепое плацебо контролируемое исследование. БМЖ 2007; 335: 80.
      10. Wenus C, Goll R, Loken EB, Biong AS, Halvorsen DS, Florholmen J. Профилактика антибиотикоассоциированной диареи с помощью ферментированного пробиотического молочного напитка. Евро Джей Клин Нутр 2008; 62: 299-301.
      11. Beausoleil M, Fortier N, Guenette S, et al.Влияние ферментированного молока, содержащего лактобациллы ацидофильные Cl1285 и лактобациллы казеи, на профилактику антибиотикоассоциированной диареи: рандомизированное двойное слепое плацебо--контролируемое исследование. Can J Gastroenterol 2007; 21: 732-6.
      12. Джонс Дж.Л., Фокс-Оренстиен А.Е. Роль пробиотиков при воспалительных заболеваниях кишечника. Раскопки науки 2007; 52: 607-11.
      13. Gionchetti P, Rizzello F, Campieri M. Пробиотики в гастроэнтерологии. Curr Opin Гастероэнтерология 2002; 18: 235-9.
      14. Boirivant M, Strober W. Механизм действия пробиотиков. Curr Opin Гастероэнтерология 2007; 23: 679-92.
      15. Макфарланд Л.В. Метаанализ пробиотиков для профилактики антибиотикоассоциированной диареи и лечения болезни Clostridium difficile. Am J Gastro-enterol 2006; 101: 812-22.
      16. Вандерхоф Дж.А., Уитни Д.Б., Антонсон Д.Л., Ханнер Т.Л., Лупо Дж.В., Янг Р.Дж. Lactobacillus GG в профилактике антибиотикоассоциированной диареи у детей. Дж. Педиатр, 1999 г.; 135: 564-8.
      17. Д’Суза А.Л., Раджкумар С., Кук Дж., Булпитт С.Дж. Пробиотики в профилактике антибиотикоассоциированной диареи: метаанализ. БМЖ 2002; 324: 1361.
      18. Cremonini F, Di Caro S, Nista EC, et al. Метаанализ: влияние пробиотиков на антибиотикоассоциированную диарею. Aliment Pharmacol Ther 2002; 16: 1461-7.
      19. McFarland LV, Surawicz CM, Greenberg RN, et al. Профилактика бета-лактамной диареи с помощью Saccharomyces boulardii по сравнению с плацебо .Am J Gastroenterol 1995; 90: 439-48.
      20. Wunderlich PF, Braun L, Fumagalli I, et al. Двойной слепой отчет об эффективности энтерококков SF68, продуцирующих молочную кислоту, в профилактике антибиотикоассоциированной диареи и лечении острой диареи. J Int Med Res 1989; 17: 333-8.
      21. Surawicz CM, Elmer GW, Speelman P, McFarland LV, Chinn J, van Bellle G. Профилактика антибиотикоассоциированной диареи Saccharomyces boulardii: проспективное исследование. Гастроэнтерология 1989; 96: 981-8.
      22. Рахими Р., Никфар С., Рахими Ф. и соавт. Мета-анализ пользы пробиотиков в поддержании ремиссии язвенного колита у человека: доказательства для предотвращения рецидива заболевания и поддержания ремиссии. Раскопки науки 2008; 53: 2524-31.
      23. Никфар С., Рахими Р., Рахими Ф., Абдоллахи М. Эффективность пробиотиков при синдроме раздраженного кишечника: метаанализ рандомизированных контролируемых исследований. дис толстой кишки прямой кишки 2008; 51: 1775-80.
      24. Рахими Р., Никфар С.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.