Escherichia coli лактозонегативная что это: Please Wait… | Cloudflare

Содержание

Ученые выяснили, что кишечная палочка использует для питания лактозой “нецелевые” гены – Наука

МОСКВА, 1 марта. /ТАСС/. Группа ученых под руководством профессора Сколтеха Михаила Гельфанда открыла неизвестный ранее способ переработки лактозы бактерией Escherichia coli (кишечная палочка), обитающей в кишечнике человека и других млекопитающих. Бактерия задействует при этом гены, которые предназначены для метаболизма других веществ. Результаты исследования опубликованы в журнале Scientific Reports.

“Полученные результаты говорят о возможной мультифункциональности ферментов, ранее считавшихся очень узкоспециализированными, и поднимает целый ряд дополнительных вопросов об их биохимических характеристиках, специфичности и сродству ко всем возможным субстратам”, – отмечается в пресс-релизе.

Самая привычная пища для кишечной палочки – глюкоза, но в ее отсутствие бактерия может перейти на другие вещества, например на лактозу. Кишечная палочка может быстро, в течение нескольких часов, переключаться с одного “корма” на другой, благодаря тому, что гены, отвечающие за определенные задачи – например, за усвоение лактозы – не разбросаны по всей бактериальной хромосоме, а собраны в группы, опероны. Такая организация помогает легко регулировать работу генов и выключать ненужные гены при необходимости, переключаясь с переработки глюкозы на переработку лактозы.

Раньше считалось, что у кишечной палочки есть только один метаболический путь усвоения лактозы, но ученые обнаружили, что оперон, который нужен кишечной палочке для распада серосодержащих углеводов очень похож по взаимному расположению генов на оперон у других бактерий – бацилл, который отвечает за переработку лактозы.

Ученые предположили, что этот оперон у кишечной палочки может тоже участвовать в утилизации лактозы и эксперимент подтвердил догадку, показав, что генов, которые обеспечивают метаболизм сероуглеродов, участвуют в переработке лактозы. Гены работали, когда в среде присутствовала лактоза, и выключались при ее отсутствии. Более того, даже если выключить классический путь переработки лактозы, бактерии могли расти и размножаться на лактозе за счет нового пути.

Как пишут ученые в статье, исследованный ими случай является примером успешного предсказания функций генов, основанного на их расположении в геноме. “Эта история показывает силу интеграции биоинформатических и экспериментальных методов при решении типичных молекулярно-биологических задач”, – сказал профессор Михаил Гельфанд.

Особенности штаммов Escherichia coli, выделенных при воспалительных заболеваниях человека Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

РИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

© А.П. Годовалов, ГП. Ожгибесов, Е.А. Никулина, 2019

УДК 579.842.11.083.1 DOI: 10.20969/VSKM.2019.12(4).7-10

ОСОБЕННОСТИ ШТАММОВ ESCHERICHIA COLI, ВЫДЕЛЕННЫХ ПРИ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ ЧЕЛОВЕКА

ГОДОВАЛОВ АНАТОЛИЙ ПЕТРОВИЧ, ORCID ID: 0000-0002-5112-2003; SCOPUS Author ID: 57204065570; канд. мед. наук, ведущий научный сотрудник Центральной научно-исследовательской лаборатории, доцент кафедры микробиологии и вирусологии ФГБОУ ВО «Пермский государственный медицинский университет им. академика Е.А. Вагнера» Минздрава России, Россия, 614990, Пермь, ул. Петропавловская, 26, тел. +7(342)236-44-85, e-mail: [email protected] ОЖГИБЕСОВ ГЕОРГИЙ ПЕТРОВИЧ, зав. бактериологической лабораторией Центра государственного санитарно-эпидемиологического надзора ФКУЗ «Медико-санитарная часть МВД России по Пермскому краю», Россия, 614990, Пермь, ул. Пермская, 128, тел. +7(342)264-22-55

НИКУЛИНА ЕЛЕНА АЛЕКСАНДРОВНА, врач-бактериолог бактериологической лаборатории Центра государственного санитарно-эпидемиологического надзора ФКУЗ «Медико-санитарная часть МВД России по Пермскому краю», Россия, 614990, Пермь, ул. Пермская, 128, тел. +7(342)264-22-55

Реферат. В настоящее время наблюдается рост числа случаев инфекционно-воспалительных заболеваний, обусловленных условно-патогенными микроорганизмами, среди которых одно из ведущих мест принадлежит Escherichia coli. Относительно мало внимания уделяется изучению отдельных свойств E. coli, а также роли таких нетипичных вариантов в развитии заболеваний человека. Цель исследования – оценить встречаемость E. coli при воспалительных заболеваниях урогенитального тракта и дыхательных путей, а также оценить свойства выделенных штаммов. Материал и методы. За период 2016-2018 гг. проведено микробиологическое исследование проб мочи, отделяемого цервикального канала, верхних дыхательных путей, мокроты пациентов с воспалительными заболеваниями и выделяемого из кишечника. У выделенных штаммов E. coli оценивали способность к движению, ферментацию лактозы, утилизацию цитрата как единственного источника углерода, а также уреазную и гемолитическую активность. Для статистического анализа данных использовали критерий х2. Статистически значимыми считали различия при p<0,05. Результаты и их обсуждение. В настоящем исследовании показано, что нетипичные варианты E. coli встречаются при воспалительных заболеваниях мочеполовой системы и внебольничных пневмониях более чем в трети случаев выделения E. coli. Зачастую регистрируется колонизация лактозонегативными, гемолитическими и неподвижными вариантами E. coli. Подобная ситуация может быть обусловлена тем фактом, что геном E. coli характеризуется высокой пластичностью, которая обеспечивает адаптацию и «фитнесс» штаммов. Можно предположить, что утрата некоторых свойств может быть как раз необходима для успешной колонизации несвойственного битопа. С другой стороны, урогенитальный тракт и дыхательные пути могут колонизировать только те штаммы E. coli, которые способны успешно перестраивать свой метаболизм, например, снижая подвижность и утилизацию лактозы, но сохраняя способность к синтезу гемолизинов. Выводы. Таким образом, при проведении микробиологических исследований следует учитывать нетипичные проявления свойств E. coli, поскольку такие данные могут быть дополнительными факторами, увеличивающими вирулентность штаммов, обеспечивая им более успешную колонизацию несвойственных биотопов.

Ключевые слова: Escherichia coli, ферментация лактозы, подвижность, гемолитическая активность, нетипичный вариант, воспаление.

Для ссылки: Годовалов, А.П. Особенности штаммов Escherichia coli, выделенных при воспалительных заболеваниях человека / А.П. Годовалов, Г.П. Ожгибесов, Е.А. Никулина // Вестник современной клинической медицины. – 2019. – Т. 12, вып. 4. – С.7-10. DOI: 10.20969/VSKM.2019.12(4).7-10.

THE PROPERTIES OF ESCHERICHIA COLI STRAINS ISOLATED IN HUMAN INFLAMMATORY DISEASES

GODOVALOV ANATOLIYP., ORCID ID: 0000-0002-5112-2003; SCOPUS Author ID: 57204065570; C. Med. Sci., leading researcher of the Central research laboratory, associate professor of the Department of microbiology and virology of Perm State Medical University named after acad. E.A. Wagner, Russia, 614990, Perm, Petropavlovskaya str., 26, tel. +7(342)236-44-85, e-mail: [email protected]

OZHGIBESOV GEORGY P., the Head of Bacteriological laboratory of Center for State Sanitary and Epidemiological Surveillance of Medical Unit of the Ministry of Internal Affairs of Russia in the Perm region, Russia, 614990, Perm, Permskaya str., 128, tel. +7(342)264-22-55.

NIKULINA ELENA A., bacteriologist of Bacteriological laboratory of the Center for State Sanitary and Epidemiological Surveillance of Medical Unit of the Ministry of Internal Affairs of Russia in the Perm region, Russia, 614990, Perm, Permskaya str., 128, tel. +7(342)264-22-55

Abstract. Currently, we can see an increase in the incidence of infectious and inflammatory diseases caused by opportunistic pathogenic microorganisms. One of the leading positions among them belongs to Escherichia coli. Relatively little attention is paid to the study of individual properties of E. coli, as well as to the role of such atypical

species in human disease development. Aim. The aim of the study was to assess the presence of E. coli in urogenital and respiratory tract inflammatory diseases, as well as the properties of the isolated strains. Material and methods. Microbiological study of urine, cervical discharge, upper respiratory tract, sputum of patients with inflammatory diseases, and intestinal discharge samples was carried out during the period of 2016-2018. The ability to move, lactose fermentation, citrate utilization as the sole carbon source, as well as urease and hemolytic activity was evaluated in the isolated E. coli strains. x2 test was used for statistical data analysis. Differences were considered statistically significant at p<0,05. Results and discussion. Current study has shown that atypical E. coli strains are present in urogenital inflammatory diseases and in community-acquired pneumonia in more than a third of cases of E. coli recovery. The most common recorded colonies are represented by lactose-negative, hemolytic and immobile E. coli strains. Such findings may be related to the fact that the E. coli genome is characterized by high plasticity, which provides adaptation and «fitness» for the strains. It can be assumed that the loss of certain properties may be just necessary for successful unusual biotope colonization. On the other hand, urogenital and respiratory tract can be colonized only by those E. coli strains that are able to successfully rebuild their metabolism, for example, by reducing mobility and lactose utilization, but by retaining the ability to synthesize hemolysins. Conclusion. Thus, when conducting microbiological studies, it is necessary to take into account the atypical manifestations of E. coli properties, since such data may indicate additional factors that increase the virulence in the strains, allowing them more successful unusual biotope colonization.

Key words: Escherichia coli, lactose fermentation, motility, hemolytic activity, atypical strain, inflammation. For reference: Godovalov AP, Ozhgibesov GP, Nikulina EA. The properties of Escherichia coli strains isolated in human inflammatory diseases. The Bulletin of Contemporary Clinical Medicine. 2019; 12 (4): 7-10. DOI: 10.20969/ VSKM.2019.12(4).7-10.

Один из типичных представителей условно-патогенной микрофлоры – Escherichia coli -характеризуется широким спектром ферментативной активности, способностью к движению, высокой биопленкообразующей активностью, участием в горизонтальном переносе генетической информации. Установлено, что благодаря своим уникальным свойствам E. coli может успешно колонизировать все ткани и органы человека. При этом клиническая картина варьирует от полного отсутствия симптомов до тяжелых летальных заболеваний [1, 2]. Хорошо описаны случаи бактериемии, обусловленной E. coli [3]. С другой стороны, среди грамотрицательных микроорганизмов именно E. coli принадлежит ведущее место в списке этиологических агентов воспалительных заболеваний мочевых путей [4] и женского гени-тального тракта [5]. Более того, в настоящее время наблюдается неуклонный рост заболеваемости, обусловленной условно-патогенной микрофлорой и, в частности, E. coli.

Не менее важной составляющей патогенеза воспалительных заболеваний является участие E. coli в формировании сложно регулируемых ассоциаций микроорганизмов. В таких консорциумах симби-онтная микрофлора биотопа выполняет зачастую ключевую роль [6, 7].

Достаточно детально описан спектр факторов патогенности E. coli: адгезины, токсины, железо-связывающие системы, полисахарид и инвазины. Показаны различия экспрессии этих факторов в зависимости от вирулентности штаммов [8]. В свою очередь, некоторым свойствам E. coli уделяется относительно мало внимания. Так, например, ферментативная активность учитывается только при ряде кишечных заболеваний, когда показана роль лактозонегативных штаммов E. coli в развитии диарейного синдрома. В ряде случаев проводят учет гемолитической активности. Однако практически отсутствуют сведения о вариантах E. coli, утративших способность к движению или продукции индола, а также о совокупном

изменении фенотипических признаков. В исследованиях [4, 9] описано, что фенотип вариантов E. coli, обусловливающих развитие внекишечных воспалительных заболеваний, не соответствует генотипу микроорганизма. Высказывается предположение, что вирулентность E. coli ассоциирована исключительно с мобильной частью генома, когда привнесение генов может как увеличивать проявление какой-либо способности, так и снижать ее активность, обусловливая тем самым генетическую адаптацию микроорганизма к другой нише обитания.

Цель исследования – оценить встречаемость E. coli при воспалительных заболеваниях уроге-нитального тракта и дыхательных путей, а также оценить свойства выделенных штаммов.

Материал и методы. За период 2016-2018 гг. проведено микробиологическое исследование 514 проб мочи пациентов с хроническим пиелонефритом, 535 проб отделяемого цервикального канала женщин с хроническим цервицитом и вагинитом, 502 пробы отделяемого верхних дыхательных путей пациентов с воспалительными процессами носа и зева, 276 проб мокроты пациентов с внебольничной пневмонией и 324 пробы отделяемого кишечника.

Выделение E. coli осуществляли на агаре Эндо, изучали тинкториальные и культуральные свойства штаммов. Оценивали способность штаммов E. coli к движению путем посева в 0,3% полужидкий агар, ферментацию лактозы – на средах Гиса, утилизацию цитрата как единственного источника углерода – на среде Симмонса, уреазную активность – на среде по Преусу. Для выявления гемолитической активности E. coli использовали кровяной агар.

Для статистического анализа данных использовали критерий х2. Статистически значимыми считали различия при р<0,05.

Результаты и их обсуждение. При анализе проб мочи от пациентов с хроническим пиелонефритом E. coli обнаружены в 21,6% случаев, причем в 76% из них были выделены типичные варианты,

характеризующиеся способностью к движению и разложению лактозы, обладающие уреазой и не способные к утилизации цитрата, а также не проявляющие гемолитической активности. Среди нетипичных штаммов более чем в половине случаев (58,6%) преобладали те, которые утратили подвижность. Реже встречались гемолитические (20,7%) и лактозонегативные штаммы (17%). В трети случаев гемолитические варианты E. coli были не способны к ферментации лактозы. За три анализируемых года частота встречаемости E. coli в пробах мочи составила в 2016 г. 17,2%; в 2017 г. – 17,8%; в 2018 г. – 28,9%. Обнаружение нетипичных вариантов по годам существенно не менялось – (25,4±3,1)%.

В пробах отделяемого цервикального канала женщин с хроническими неспецифическими цервицитами и вагинитами E. coli обнаружены в 12,3% случаев, что существенно меньше, чем при исследовании проб мочи (х2=16,02; р<0,05). Однако в цервикальном канале нетипичные варианты E. coli обнаруживались значимо чаще (60,6% штаммов), чем в пробах мочи (х2=20,6; р<0,05). Среди нетипичных вариантов часто встречались гемолитические (60%) и лактозонегативные (50%). При анализе встречаемости типичных и нетипичных вариантов E. coli существенных отличий по годам не выявлено.

В отделяемом дыхательных путей при воспалительных заболеваниях E. coli встречаются относительно редко. Так, в верхних дыхательных путях E. coli обнаружены в 0,6% случаев, при этом все они были типичными вариантами. В пробах мокроты пациентов с внебольничной пневмонией E. coli содержали 3,3% проб, среди которых в 67% выделены нетипичные варианты. Более половины таких нетипичных штаммов одновременно не ферментировали лактозу и не обладали подвижностью (60%). Гемолитические штаммы составили 17% проб, содержащих нетипичные варианты E. coli.

При исследовании отделяемого кишечника типичные варианты E. coli обнаружены в 71,9% случаев. Среди нетипичных штаммов встречались неподвижные (44%), гемолитические (28,6%) и лактозонегативные (27,4%) варианты.

Все изученные штаммы E. coli не обладали уреаз-ной активностью и были не способны утилизировать цитрат как единственный источник углерода.

В целом в настоящем исследовании показано, что нетипичные варианты E. coli встречаются при воспалительных заболеваниях мочеполовой системы и внебольничных пневмониях более чем в трети случаев выделения E. coli. Подобная ситуация может быть обусловлена тем фактом, что геном E. coli характеризуется высокой пластичностью. Показано наличие в его составе консервативной («core») и вариабельной частей. Генетический материал именно этой вариабельной части генома E. coli обеспечивает адаптацию и «фитнесс» штаммов [4] и включает мобильные генетические элементы – фаги, плазмиды, ин-серционные последовательности, транспозоны и

интегроны [10]. В связи с этим можно предположить, что утрата некоторых свойств может быть как раз необходима для успешной колонизации несвойственного битопа.

В исследованиях [11, 12] описана гипотеза, что в кишечнике здоровых людей присутствуют ExPEC-подобные штаммы E. coli, ряд генов которых (в частности, гены, кодирующие адгезины, сидерофоры, капсульные элементы и продукцию токсин)задействованы в колонизации кишечного тракта непатогенными вариантами, т.е. можно говорить о функционировании совокупного генома микроорганизмов биотопа. Это, в свою очередь, предполагает, что при определенных условиях деятельность такого «генетического консорциума» может быть изменена, что приведет к транслокации отдельных штаммов E. coli в смежные органы и ткани, а также к изменению функционирования микробиоты в целом, что может быть ключевым звеном патогенеза хронизации воспалительного процесса.

Факт потери подвижности штаммами, вовлеченными в развитие воспалительного процесса, выглядит неожиданным, поскольку в экспериментальных исследованиях [13] показано, что при утере или параличе жгутиков E. coli блокируется начальный этап биопленкообразования, необходимый для успешной колонизации поверхности. Снижение подвижности, как правило, обусловлено уменьшением уровня транскрипции генов флагел-лина и, соответственно, его синтеза [14]. Можно предположить, что при этом увеличивается транскрипционный уровень других белков, например токсинов, оказывающих повреждающее действие на ткани человека, что более важно для E. coli при колонизации биотопа.

В исследованиях [15] показана тесная связь дыхательной цепи мембраны и переноса молекул лактозы, поскольку один из элементов этой цепи является в то же время и переносчиком молекул лактозы. Подобный факт позволяет предположить, что при увеличении потребности в энергии, наблюдаемой при колонизации новой ниши, перенос молекул лактозы может снижаться.

Обобщая накопленные данные, можно предположить, что урогенитальный тракт и дыхательные пути могут колонизировать те штаммы E. coli, которые имеют ряд генов, возможно полученных при горизонтальном переносе, и успешно перестраивают свой метаболизм, например, снижая подвижность и утилизацию лактозы, но сохраняя способность к синтезу гемолизинов.

Вывод. Таким образом, при проведении микробиологических исследований следует учитывать нетипичные проявления свойств E. coli, поскольку такие данные могут быть дополнительными факторами, увеличивающими вирулентность штаммов, обеспечивая им более успешную колонизацию несвойственных биотопов.

Прозрачность исследования. Исследование не имело спонсорской поддержки. Авторы несут полную ответственность за предоставление окончательной версии рукописи в печать.

Декларация о финансовых и других взаимоотношениях. Все авторы принимали участие в разработке концепции, дизайна исследования и в написании рукописи. Окончательная версия рукописи была одобрена всеми авторами. Авторы не получали гонорар за исследование.

ЛИТЕРАТУРА

1. Pathogenic and non-pathogenic Escherichia coli colonization and host inflammatory response in a defined microbiota mouse model / Z.R. Stromberg, A. Van Goor, G.A.J. Redweik [et al.] // Dis. Model. Mech. – 2018. -Vol. 11 (11). – P.dmm035063.

2. Escherichia coli early-onset sepsis: trends over two decades / N. Mendoza-Palomar, M. Balasch-Carulla, S. González-Di Lauro [et al.] // Eur. J. Pediatr. – 2017. -Vol. 176 (9). – P. 1227-1234.

3. Oppenheim, B. Escherichia coli bacteraemia papers / B. Oppenheim // J. Hosp. Infect. – 2017. – Vol. 95 (4). -P.363-364.

4. Escherichia coli: an old friend with new tidings / J. Vila, E. Sáez-López, J.R. Johnson [et al.] // FEMS Microbiol Rev. – 2016. – Vol. 40 (4). – P.437-463.

5. Prevalence of Escherichia coli among samples collected from the genital tract in pregnant and non-pregnant women: relationship with virulence / E. Guiral, J. Bosch, J. Vila, S.M. Soto // FEMS Microbiol. Lett. – 2011. -Vol. 314. – P.170-173.

6. Годовалов, А.П. Особенности межмикробных отношений в микробиоте влагалища инфертильных женщин / А.П. Годовалов, М.О. Гущин, Т.И. Карпунина // Медицинский вестник Северного Кавказа. – 2019. – Т. 14, № 11. – С.40-44.

7. Годовалов, А.П. Сравнительный анализ результатов молекулярно-генетического и культурального исследования эякулята / А.П. Годовалов, Т.И. Карпунина, Ю.В. Ракитина // Проблемы медицинской микологии. -2019. – Т. 21, № 2. – С.57-58.

8. Virulence factor profiles and phylogenetic background of Escherichia coli isolates from veterans with bacteremia and uninfected control subjects / M.R. Sannes, M.A. Kus-kowski, K. Owens [et al.] // J. Infect. Dis. – 2004. -Vol. 190. – P.2121-2128.

9. The population genetics of commensal Escherichia coli / O. Tenaillon, D. Skurnik, B. Picard, E. Denamur // Nature Rev. Microbiol. – 2010. – Vol. 8. – P.207-217.

10. Toussaint, A. Prokaryote genome fluidity: toward a system approach of the mobilome / A. Toussaint, M. Chandler // Methods Mol. Biol. – 2012. – Vol. 804. – P.57-80.

11. Nowrouzian, F. P fimbriae, capsule and aerobactin characterize colonic resident Escherichia coli / F. Nowrouzian, I. Adlerberth, A.E. Wold // Epidemiol. Infect. -2001. – Vol. 126. – P.11-18.

12. Dale, A.P. Extra-intestinal pathogenic Escherichia coli (ExPEC): Disease, carriage and clones / A.P. Dale, N. Woodford // J. Infect. – 2015. – Vol. 71 (6). – P.615-626.

13. Pratt, L.A. Genetic analysis of Escherichia coli biofilm formation: roles of flagella, motility, chemotaxis and type I pili / L.A. Pratt, R. Kolter // Mol. Microbiol. – 1998. -Vol. 30 (2). – P.285-293.

14. The high-pathogenicity island (HPI) promotes flagellum-mediated motility in extraintestinal pathogenic Escherichia coli / G. Magistro, C. Magistro, C.G. Stief, S. Schubert // PLoS One. – 2017. – Vol. 12 (10). – P.e0183950.

15. Ghazi, A. Comparison of lactose uptake in resting and energized Escherichia coli cells: high rates of respiration

inactivate the lac carrier / A. Ghazi, H. Therisod, E. Shechter // J. Bacteriol. – 1983. – Vol. 154 (1). – P.92-103.

REFERENCES

1. Stromberg ZR, Van Goor A, Redweik GAJ, Wymore Brand MJ, Wannemuehler MJ, Mellata M. Pathogenic and non-pathogenic Escherichia coli colonization and host inflammatory response in a defined microbiota mouse model. Dis Model Mech. 2018; 11 (11): dmm035063.

2. Mendoza-Palomar N, Balasch-Carulla M, González-Di Lauro S, Céspedes MC, Andreu A, Frick MA, Linde MÁ, Soler-Palacin P. Escherichia coli early-onset sepsis: trends over two decades. Eur J Pediatr. 2017; 176 (9): 12271234.

3. Oppenheim B. Escherichia coli bacteraemia papers. J Hosp Infect. 2017; 95 (4): 363-364.

4. Vila J, Sáez-López E, Johnson JR, Römling U, Dobrindt U, Cantón R, Giske CG, Naas T, Carattoli A, Martínez-Medina M, Bosch J, Retamar P, Rodríguez-Baño J, Baquero F, Soto SM. Escherichia coli: an old friend with new tidings. FEMS Microbiol Rev. 2016; 40 (4): 437-463.

5. Guiral E, Bosch J, Vila J, Soto SM. Prevalence of Escherichia coli among samples collected from the genital tract in pregnant and non-pregnant women: relationship with virulence. FEMS Microbiol Lett. 2011; 314: 170-173.

6. Godovalov AP, Gushhin MO, Karpunina TI. Osobennosti mezhmikrobnyh otnoshenij v mikrobiote vlagalishha infertil’nyh zhenshhin [Features of intermicrobial relations in the microbiota of the vagina at infertile women]. Medicinskij vestnik Severnogo Kavkaza [Medical Bulletin of the North Caucasus]. 2019; 14 (1.1): 40-44.

7. Godovalov AP, Karpunina TI, Rakitina JuV. Sravnitel’nyj analiz rezul’tatov molekuljarno-geneticheskogo i kul’-tural’nogo issledovanija jejakuljata [Comparative analysis of the results of molecular-genetic and cultural studies of ejaculate]. Problemy medicinskoj mikologii [Medical Mycology Problems]. 2019; 21 (2): 57-58.

8. Sannes MR, Kuskowski MA, Owens K, et al. Virulence factor profiles and phylogenetic background of Escherichia coli isolates from veterans with bacteremia and uninfected control subjects. J Infect Dis. 2004; 190: 21212128.

9. Tenaillon O, Skurnik D, Picard B, Denamur E. The population genetics of commensal Escherichia coli. Nature Rev Microbiol. 2010; 8: 207-217.

10. Toussaint A, Chandler M. Prokaryote genome fluidity: toward a system approach of the mobilome. Methods Mol Biol. 2012; 804: 57-80.

11. Nowrouzian F, Adlerberth I, Wold AE. P fimbriae, capsule and aerobactin characterize colonic resident Escherichia coli. Epidemiol Infect. 2001; 126: 11-18.

12. Dale AP, Woodford N. Extra-intestinal pathogenic Escherichia coli (ExPEC): Disease, carriage and clones. J Infect. 2015; 71 (6): 615-626.

13. Pratt LA, Kolter R. Genetic analysis of Escherichia coli biofilm formation: roles of flagella, motility, chemotaxis and type I pili. Mol Microbiol. 1998; 30 (2): 285-293.

14. Magistro G, Magistro C, Stief CG, Schubert S. The high-pathogenicity island (HPI) promotes flagellum-mediated motility in extraintestinal pathogenic Escherichia coli. PLoS One. 2017; 12 (10): e0183950.

15. Ghazi A, Therisod H, Shechter E. Comparison of lactose uptake in resting and energized Escherichia coli cells: high rates of respiration inactivate the lac carrier. J Bacteriol. 1983; 154 (1): 92-103.

Дисбактериоз, E coli лактозонегативные повышены у взрослого – Вопрос гастроэнтерологу

Если вы не нашли нужной информации среди ответов на этот вопрос, или же ваша проблема немного отличается от представленной, попробуйте задать дополнительный вопрос врачу на этой же странице, если он будет по теме основного вопроса. Вы также можете задать новый вопрос, и через некоторое время наши врачи на него ответят. Это бесплатно. Также можете поискать нужную информацию в похожих вопросах на этой странице или через страницу поиска по сайту. Мы будем очень благодарны, если Вы порекомендуете нас своим друзьям в социальных сетях.

Медпортал 03online.com осуществляет медконсультации в режиме переписки с врачами на сайте. Здесь вы получаете ответы от реальных практикующих специалистов в своей области. В настоящий момент на сайте можно получить консультацию по 74 направлениям: специалиста COVID-19, аллерголога, анестезиолога-реаниматолога, венеролога, гастроэнтеролога, гематолога, генетика, гепатолога, гериатра, гинеколога, гинеколога-эндокринолога, гомеопата, дерматолога, детского гастроэнтеролога, детского гинеколога, детского дерматолога, детского инфекциониста, детского кардиолога, детского лора, детского невролога, детского нефролога, детского онколога, детского офтальмолога, детского психолога, детского пульмонолога, детского ревматолога, детского уролога, детского хирурга, детского эндокринолога, дефектолога, диетолога, иммунолога, инфекциониста, кардиолога, клинического психолога, косметолога, липидолога, логопеда, лора, маммолога, медицинского юриста, нарколога, невропатолога, нейрохирурга, неонатолога, нефролога, нутрициолога, онколога, онкоуролога, ортопеда-травматолога, офтальмолога, паразитолога, педиатра, пластического хирурга, подолога, проктолога, психиатра, психолога, пульмонолога, ревматолога, рентгенолога, репродуктолога, сексолога-андролога, стоматолога, трихолога, уролога, фармацевта, физиотерапевта, фитотерапевта, флеболога, фтизиатра, хирурга, эндокринолога.

Мы отвечаем на 96.36% вопросов.

Оставайтесь с нами и будьте здоровы!

Существует ли взаимосвязь между микробиотой мочи, влагалища и кишечника при инфекции верхних мочевых путей? | Набока

Введение

Инфекции мочевых путей (ИМП) любой локализации крайне редко рассматри­ваются в контексте эндогенного генеза взаимосвязи микробиоты мочи больных ИМП с микробиотой макроорганизма в целом и близ­лежащих биотопов, в частности. Пути инфициро­вания органов мочевой системы (ОМС) логично и подробно представлены в монографии «Экология микроорганизмов» (2006) под ред. акаде­мика О.В. Бухарина [1]. Возможность транслока­ции микроорганизмов из желудочно-кишечного тракта лимфогенно и/или гематогенно в ОМС описана в ряде работ [2][3]. Причём «степень транслоцируемости бактерий градиентно убы­вает в ряду: «энтеробактерии – грампозитивная кокковая флора – прочие микроорганизмы» (цит. по В.А. Гриценко, 2006) [1].

В настоящее время отдельными исследова­тельскими группами предпринимаются попыт­ки изучения микробных взаимосвязей ОМС с иными биотопами. В частности, в исследовании Thomas-White K. et al. (2018) проведён сравни­тельный анализ генома бактерий, выделенных из мочевого пузыря женщин с геномом 67 ваги­нальных и 120 кишечных штаммов [4]. Авторами верифицированы общие геномы 23 видов бакте­рий, обнаруженных как в мочевом пузыре, так и во влагалище. В работе Owrangi B. et al. (2018) доказана возможность транслокации уропатогенных E. coli (UPEC) через эпителий кишечника в кровоток, а затем в ОМС [5].

Таким образом, на сегодняшний день данный вопрос недостаточно изучен, но его актуальность подчеркивается отсутствием снижения заболева­емости ИМП [6][7] и поиска принципиально но­вых решений при изучении этиологии и патоге­неза заболеваний.

Цель исследования изучить корреляционные связи между различными таксонами микробио­ты, выделенной из мочи, влагалища и кишечника у пациенток с инфекцией верхних мочевых путей.

Материалы и методы

Обследовано 60 женщин с инфекцией верх­них мочевых путей (острый обструктивный калькулезный пиелонефрит (ООП)) в возрасте от 18 до 65 лет (средний возраст 41,5±23,5 лет). Кри­терии включения: отсутствие конкрементов в мочевых путях в анамнезе, первое обращение в стационар по поводу камня мочеточника, отсут­ствие инфекций нижних мочевых путей и заболе­ваний, передающихся половым путём, согласие обследуемых на участие в исследовании.

В течение первых 3 часов от момента госпита­лизации для бактериологического исследования забирали пузырную мочу уретральным катете­ром в стерильный одноразовый контейнер Sterile Uricol «HiMedia». Забор фекалий, их бактериоло­гическое исследование, а также интерпретацию полученных результатов проводили в соответ­ствии с протоколом отраслевого стандарта [8]. Отделяемое заднего свода влагалища забирали стерильным тампоном с транспортной средой (Hiculture Transport Swabs w/Alternafiv Thioglycol- late Medium). Материал, полученный от больных ООП, транспортировали в лабораторию в тече­ние 30-60 минут.

За основу бактериологического исследова­ния мочи и отделяемого заднего свода влагали­ща были взяты методики В.В. Меньшикова (2009) [9], но с модификациями в плане использования питательных сред. Спектр применяемых пита­тельных сред был шире регламентированных, включая как культивирование факультативно­анаэробных бактерий (ФАБ) (MacConkey Agar, Hi-Crome Klebsiella Selecdve Agar Base, HiCrome Can­dida Differential Agar, HiCrome Enterococci Agar, HiCrome Aureus Agar Base, Blood Agar Base, Streptococcus Selection Agar), так и анаэробных таксо­нов микробиоты (Rogosa Agar Modified, Anaero­bic Agar, Shaedler Agar, Bacteroides Bile Esculinum

Agar, Shaedler Broth, Блаурокка). Соответственно применяли аэробные и анаэробные методики культивирования. Идентификацию бактерий, вы­деленных из мочи, фекалий и отделяемого за­днего свода влагалища проводили по общепри­нятым методикам.

Для статистической обработки полученных результатов использовали версию «R ver 3.2» («R Foundafi’on for Stafisfical Computing», Вена, Ав­стрия) с общепринятыми коэффициентами зна­чимости.

Результаты

На первом этапе исследования был проведён анализ результатов по признакам частот встреча­емости и количественных характеристик различ­ных таксонов микробиоты, верифицированной в трёх биотопах. На втором этапе проведён срав­нительный корреляционный анализ между так­сонами микроорганизмов, верифицированных в мочевых путях и влагалище, мочевых путях и кишечнике, а также во влагалище и кишечнике.

В биотопах мочевые пути и влагалище об­наружено 26 значимых коэффициентов корре­ляции: 4 – обратных и 22 – прямых от слабой до сильной тесноты связи. Необходимо отметить, что 15 (57,7%) из 26 коэффициентов корреляции регистрировали для таксономически общих ро­дов или видов (рис. 1). 11 (42,3%) значимых ко­эффициентов корреляции были зафиксированы для различных таксонов (табл. 1).

 

Рисунок 1. Значимые корреляции (p<0,05) между идентичными представителями микробиоты мочевых путей и влагалища

Figure 1. Significant correlations (p <0.05) between identical representatives of the urinary tract and vagina microbiota

 

 

Таблица 1. Значимые корреляции (p<0,05) между различными представителями микробиоты мочевых путей и влагалища

Table 1. Significant correlations (p <0.05) between different representatives of the urinary tract and vagina microbiota

Моча/Urine

r

Влагалище/ Vagina

КОС/Coagulase-negative Staphylococci

0,33

Lactobacillus spp.

E. coli типичные/E. coli typical

0,48

Bifidobacterium spp.

E. coli лактозонегативные/ E.coli lactose-negative

0,34

Propionibacterium spp.

 

0,39

Corynebacterium spp.

Proteus spp.

0,32

Bacteroides spp.

 

0,42

Fusobacterium spp.

Bacteroides spp.

-0,26

Lactobacillus spp.

0,31

Candida spp.

 

-0,27

КОС/ Coagulase-negative Staphylococci

E. coli гемолитические/E. coli hemolytic

-0,26

Corynebacterium spp.

 

-0,28

Bifidobacterium spp.

Интересным является следующее обстоятель­ство: значимые корреляционные связи между общими таксонами микроорганизмов, верифи­цированных в мочевых путях и влагалище, были прямыми. Причём из 15 коэффициентов корре­ляции большая доля (11) была зафиксирована для представителей факультативно-анаэробной микробиоты.

При анализе значимых коэффициентов кор­реляции между различными таксонами микро­биоты более разноплановые связи получены для Proteus spp. и гемолитических E. coli., выделен­ных из мочи больных с различными таксонами микробиоты влагалища (табл. 1). Несмотря на разноплановость полученных связей в большин­стве случаев микроорганизмы, выделенные из мочи больных ООП имели прямые или обратные значимые коэффициенты корреляции с Lactoba­cillus spp., Bifidobacterium spp. и Corynebacterium spp., верифицированных во влагалище этих же пациенток.

У пациенток с ООП в мочевых путях и кишеч­нике обнаружен 21 значимый коэффициент кор­реляции с преобладанием прямых (15 (71,4%)), реже обратных (6 (28,6%)) связей. Между об­щими таксонами микробиоты зафиксированы 9 (42,8%) коэффициентов корреляции, между раз­личными таксонами – 12 (57,2%) (рис. 2, табл. 2).

 

Рисунок 2. Значимые корреляции (p<0,05) между идентичными представителями микробиоты мочевых путей и кишечника

Figure 2. Significant correlations (p <0.05) between identical representatives of the urinary tract and gut microbiota

 

 

Таблица 2. Значимые корреляции (p<0,05) между различными представителями микробиоты мочевых путей и кишечника

Table 2. Significant correlations (p <0.05) between various taxa of the urinary tract and gut microbiota

Моча/Urine

r

Кишечник/Gut

Corynebacterium spp.

0,32

Lactobacillus spp.

Enterococcus spp.

0,26

E.coli лактозонегативные/E.col/ lactose-negative

Lactobacillus spp.

0,26

Bacteroides spp.

 

0,28

E.coli типичные

КОС/Coagulase-negative Staphylococci

E.coli лактозонегативные/E.coli lactose-negative

-0,29

 

-0,28

Bacteroides spp.

Klebsiella spp.

-0,32

Bifidobacterium spp.

Propionibacterium spp.

-0,28

Bifidobacterium spp.

Eubacterium spp.

-0,26

Proteus spp.

 

-0,29

Klebsiella spp.

Peptostreptococcus spp.

0,28

Bifidobacterium spp.

Candida spp.

0,31

Proteus spp.

Аналогично выявленным корреляционным связям в биотопах мочевые пути – влагалище, в исследуемых локусах между общими таксонами микробиоты также регистрировали только пря­мые корреляционные связи и, в основном (5), для ФАБ. 

Из 12 значимых коэффициентов корреляции между различными родами и/или видами ми­кробиоты 6 были обратными, 6 – прямыми, при­чем, в большинстве случаев между аэробными и анаэробными представителями микробиоты (табл. 2).

У пациенток с ООП во влагалище и кишечнике выявлены 28 значимых коэффициентов корреля­ции, из них 13 – для общих таксонов микробиоты (рис. 3), 15 – для различных таксонов (табл. 3).

 

Рисунок 3. Значимые корреляции (p<0,05) между идентичными представителями микробиоты влагалища и кишечника

Figure 3. Significant correlations (p <0.05) between identical taxa of vaginal and gut microbiota

 

 

Таблица 3. Значимые корреляции (p<0,05) между различными представителями микробиоты влагалища и кишечника

Table 3. Significant correlations (p <0.05) between different taxa of vaginal and gut microbiota

Влагалище/ Vagina

r

Кишечник/Gut

КОС

-0,27

E.coli лактозонегативные

Corynebacterium spp.

0,34

Lactobacillus spp.

E.coli типичные

-0,28

E.coli лактозонегативные

 

-0,28

E.coli лактозонегативные

E.coli гемолитические

-0,33

Peptococcus spp.

 

-0,29

Eubacterium spp.

Lactobacillus spp.

0,3

КОС spp.

Peptococcus spp.

0,29

Bifidobacterium spp.

Eubacterium spp.

-0,42

Proteus spp.

 

-0,35

Klebsiella spp.

Peptostreptococcus spp.

 

0,31

Proteus spp.

Bacteroides spp.

-0,33

Peptostreptococcus spp.

 

-0,5

Enterococcus spp.

Bifidobacterium spp.

0,3

E.coli типичные

Candida spp.

-0,27

Lactobacillus spp.

Среди общих таксонов обращает внимание, что 6 коэффициентов корреляции обнаружены для аэробных представителей микробиоты, а 9 – для анаэробных. Все значимые корреляции были прямые.

Из 15 значимых коэффициентов корреляции между различными таксонами микроорганиз­мов, выделенными из влагалища и кишечника больных ООП 10 были обратными, 5 – прямыми (табл. 3). Причём в большинстве случаев значи­мые связи зафиксированы между аэробными и анаэробными таксонами микроорганизмов.

Таким образом, при изучении микробиоты мочевых путей, влагалища и кишечника у боль­ных ООП в мочевых путях и влагалище между так­сонами микробиоты обнаружены 26 значимых коэффициентов корреляции, в мочевых путях и кишечнике – 21, во влагалище и кишечнике – 28. Полученные результаты свидетельствуют о том, что необходимо рассматривать этиологиче­скую структуру ООП и микробиоту, участвующую в манифестации заболевания, вне зависимости от её каузативности или дискутабельности во взаимосвязи с другими биотопами.

Заключение

Бесспорно, существование различных родов микроорганизмов в каждом конкретном био­топе определяются особенностями среды оби­тания, питательными субстратами, межвидовой конкуренцией за ресурсы (углеродные, энерге­тические), необходимостью выработки устойчи­вости к защитным механизмам макроорганизма. Представители семейства Enterobacteriaceae, вы­зывающие ИМП и бактериемию являются ком­менсалами кишечника, который насыщен пита­тельными веществами и углеродами, однако они же могут трансформироваться в патогенные фор­мы и размножаться в обедненных с точки зрения питательных веществ и богатых азотом мочевы­водящих путях. В исследовании [10] обсуждают­ся механизмы адаптации микроорганизмов, ко­торые позволяют патогенным энтеробактериям вне кишечника устанавливать как комменсальные, так и вирулентные взаимосвязи при транс­локации микроорганизмов между биотопами одного и того же человека.

Анализируя связи энтеробактерий в биотопах мочевые пути, влагалище мы получили прямые достоверные значимые коэффициенты корреля­ции для типичных E. coli и Klebsiella spp. в обоих биотопах.

Для типичных E. coli, выделенных из мочи имеется прямая значимая связь с Bifidobacterium spp., обнаруженными во влагалище. Для лактозо­негативных E. coli, регистрируемых в моче, также зафиксированы прямые коэффициенты корреля­ции с Propionibacterium spp. во влагалище. Одна­ко для гемолитических E. coli зафиксированы об­ратные значимые коэффициенты корреляции с КОС, Corynebacterium spp., Bifidobacterium spp., обнаруженными во влагалище. Это свидетель­ствует о том, что при повышении в моче частоты обнаружения гемолитических E. coli во влагали­ще снижается присутствие вышеперечисленных таксонов бактерий.

Энтеробактерии, обнаруженные в мочевых путях, также значимо связаны с энтеробакте­риями, обнаруженными в кишечнике. Анало­гично влагалищному биотопу зафиксированы прямые коэффициенты корреляции между типичными E. coli и Klebsiella spp., обнаружен­ными в моче и кишечнике. При повышении в моче Klebsiella spp. снижаются частота обнару­жения и количество Bacteroides spp. и Bifido­bacterium spp. в кишечнике, а при повышении в моче Eubacterium spp., снижаются Proteus spp. и Klebsiella spp.

Полученные значимые коэффициенты корреляции между различными таксонами микробиоты в трёх изучаемых биотопах явля­ются бесспорным доказательством связи этих локусов, что подтверждается пока ещё единич­ными работами с филотипированием и генотипированием, в частности энтеробактерий, вы­деленных из мочи и кишечника пациенток с ИМП [11, 12].

1. Бухарин О.В., Валышев А.В., Гильмутдинова Ф.Г., Гриценко В.А., Карташова О.Л., Кузьмин М.Д., Усвяцов Б.Я., Черкасов С.В. Экология микроорганизмов человека. Екатеринбург: УрО РАН; 2006:389-470. ISBN 5-7691-1738-9

2. Алмагамбетов К.Х., Горская Е.М., Бондаренко В.М. Транслокация кишечной микрофлоры и её механизмы. Журн. микробиологии. 1991;7:74-79.

3. Berg RD. Bacterial translocation from the intestines. Jikken Dobutsu. 1985;34(1):1-16. PMID: 3987819

4. Thomas-White K, Forster SC, Kumar N, Van Kuiken M, Putonti C, Stares MD, Hilt EE, Price TK, Wolfe AJ, Lawley TD.Culturing of female bladder bacteria reveals an interconnected urogenital microbiota. Nat Commun. 2018;9(1):1557. DOI:10.1038/s41467-018-03968-5

5. Owrangi B, Masters N, Kuballa A, O’Dea C, Vollmerhausen TL, Katouli M. Invasion and translocation of uropathogenic Escherichia coli isolated from urosepsis and patients with community-acquired urinary tract infection. Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2018;37(5):833-839. DOI: 10.1007/s10096-017-3176-4

6. Клинические рекомендации «Инфекции мочевыводящих путей у детей, взрослых, беременных: цистит, пиелонефрит, бессимптомная бактериурия». М.-Казань-Ростов-на-Дону. 2014:25.

7. Schaeffer A.J., Matulewicz M.S., Klumpp D.J. Infection of the urinary tract. Campbell-Walsh Urology. 2016;12:237-303.

8. Отраслевой стандарт «Протокол ведения больных. Дисбактериоз кишечника» (ОСТ 91500.11.0004-2003).

9. Меньшиков В.В. Методики клинических лабораторных исследований. М.: Лабора; 2009:880.

10. Alteri CJ, Mobley HL. Escherichia coli physiology and metabolism dictates adaptation to diverse host microenvironments. Curr Opin Microbiol. 2011;15(1):3-9. DOI: 10.1016/j.mib.2011.12.004

11. Moreno E, Andreu A, Pigrau C, Kuskowski MA, Johnson JR, Prats G. Relationship between Escherichia coli strains causing acute cystiti s in women and the fecal E. coli population of the host. J Clin Microbiol. 2008;46(8):2529-34. DOI: 10.1128/JCM.00813-08

12. Ramos NL, Saayman ML, Chapman TA, Tucker JR, Smith HV, Faoagali J, Chin JC, Brauner A, Katouli M. Genetic relatedness and virulence gene profiles of Escherichia coli strains isolated from septicaemic and uroseptic patients. Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2010 Jan;29(1):15-23. DOI: 10.1007/s10096-009-0809-2


Escherichia coli. Что это такое в посеве мочи на флору, мазке у женщин. Лечение

Escherichia coli в мазке — одна из причин проведения дальнейшей диагностики для обнаружения пока еще скрытно протекающих в органах мочеполовой системы воспалительных процессов. Но только в том случае, если количество бактерий превышает пределы нормы. Забор мазка на микрофлору выполняется при плановом ежегодном обследовании женщин и мужчин, а также при жалобах на слабость, жжение при мочеиспускании, выделения из влагалища или уретры. Стандартный метод обнаружения кишечной палочки — бактериальный посев. При его малоинформативных результатах проводится ПРЦ-диагностика. Лечением инфекции занимается уролог или гинеколог.

Причины появления e. coli в моче, мазке у женщин

Существует несколько причин развития патологии. Определить и установить точную природу происхождения болезни можно только после консультации со специалистом и прохождении всех необходимых обследований.

Физиологические

Заболевание развивается на фоне нарушения правил личной гигиены, при половых контактах, а также путем заражения от носителя или потенциально опасных предметов домашнего обихода.

Причины:

  • недостаточная обработка (подмывание) половых органов или использование некачественных средств личной гигиены для ухода за половыми органами;
  • нарушение техник ухода за половыми органами;
  • использование неудобного или некачественного нижнего белья;
  • касание области гениталий грязными руками;
  • специфические виды половых актов – анальный секс;
  • передача инфекции половым путем;
  • большое количество половых партнеров;

  • отсутствие средств предохранения во время сексуальных контактов.

При этом заболеванию в большинстве подвержены женщины. Количество носителей инфекции среди женщин в 4-5 раз превышает число инфицированных среди мужчин.

Патологические

Главным провоцирующим фактором развития болезни является особенность строения мочевыделительной системы у женщин. Анальное отверстие имеет близкое расположение к мочеиспускательному каналу, что многократно увеличивает риски проникновения (миграции) патогенной микрофлоры.

Причины:

  • сопутствующие заболевания мочеполовой системы воспалительного характера – воспаление стенок мочевого пузыря, почек, мочеиспускательного канала;
  • ослабленный иммунитет, в том числе местный;
  • дисбактериальное поражение кишечника, нарушенная микрофлора;
  • аномалии в строении мочевыделительной системы.

Нередко заболевание развивается на фоне протекания беременности. Патология образуется более чем в 30% случаев. Связано это с гормональными изменениями и нарушениями в иммунной системе.

Норма кишечной палочки в микрофлоре

Coli обычно обнаруживается в небольшом количестве в микрофлоре влагалища. Это норма! Мазок может показывать множество палочковидных бактерий, но он не способен подтвердить окончательный диагноз. Для этого необходимо выращивать культуру бактерий.

Кишечную палочку часто обнаруживают среди женщин, у которых нет жалоб и симптомов расстройства. Наличие инфекции мочевыводящих путей ещё не означает, что у вас есть E.Coli.

Палочка может попасть во влагалище из прямой кишки или во время полового акта. Обычно заболевание не лечат при отсутствии у женщины симптомов вагинальной инфекции, даже если результаты мазка положительны.

www.forums.webmd.com



Симптомы эшерихии коли в моче

Escherichia coli в посеве мочи у женщин сопровождается сопутствующими заболеванию симптомами. Признаки развития патологического процесса различаются в зависимости от периода формирования болезни. Инкубационный период длится от 6 ч до 3-х дней.

При этом наблюдаются следующие симптомы:

  • резкое повышение температуры, вплоть до 39 0C;
  • развитие тошноты с частыми позывами к рвоте;
  • головные боли;
  • резкие боли при мочеиспускании;
  • общая слабость организма;
  • болевые ощущения в области мышц и суставов;
  • устойчивый диарейный синдром – посещение туалета может доходить до 10 раз за сутки;
  • наличие посторонних примесей в каловых массах – чаще всего сопровождается образованием слизи, в редких случаях – отмечается небольшое количество крови.

По истечении инкубационного периода состояние больного нормализуется. Энтеротоксигенная форма болезни сопровождается сильной рвотой, незначительным повышением температуры, развитие жидкого водянистого стула.


Как передается инфекция

На данный момент существует несколько путей передачи или заражения инфекционным возбудителем. При этом заболевание классифицируется в зависимости от способа заражения.

Пути распространенияОсобенности
Фекально-оральныйЛокализуется в области желудочно-кишечного тракта.
БытовойВозникает при контакте с зараженными вещами, предметами домашнего обихода.
ПищевойРазвивается на фоне употребления в пищу зараженных продуктов питания – немытых овощей, фруктов, молочной продукции, кваса, компота.
Контактно-бытовойОсновной причиной является несоблюдение правил личной гигиены. Данный вид патологии также образуется при половом контакте.
ВодныйОбразуется патология при употреблении зараженной жидкости.

Эшерихиоз нередко развивается на фоне переезда с одной страны в другую по причине смены климата, режима питания и других стрессовых ситуаций.

Профилактика появления полиморфной палочки

Чтобы избежать расстройства микрофлоры:

  • Следует не пользоваться ароматизированными средствами интимной гигиены, антибактериальным мылом.
  • Стараться как можно чаще менять прокладки, тампоны, не оставлять их во влагалище на весь день.
  • Секс должен быть защищённый, снизить число случайных половых контактов.
  • При покупке нижнего белья отдать предпочтение изделиям из хлопка, для доступа воздуха к наружным половым органам.
  • Включить в рацион кисломолочные продукты, свежие фрукты и овощи. Ограничить сладости, сахара, потому что они не способствуют формированию нормальной микрофлоры влагалища, устойчивой к развитию вагинитов.

Заболевания, вызываемые Escherichia coli

Escherichia coli в посеве мочи у женщин может приводить к дополнительным осложнениям и вызывать иные нарушения в организме.

При тяжелом протекании могут возникать следующие состояния и заболевания:

  • развитие инфекционно-токсического шока;
  • септическое поражение;
  • воспаления легких;
  • менингококковая инфекция;
  • энцефалит;
  • гемолитико-уремическая болезнь – энтерогеморрагическая форма;
  • образование тромбоцитопенической пурпуры;
  • острая форма почечной недостаточности;
  • синдром «путешественников» — энтеротоксигенная форма;
  • энтероколит.

В редких случаях заболевание может привести к коматозному состоянию.

Диагностика

Для выявления заболевания применяются различные методы инструментальной и лабораторной диагностики. Перед назначением исследований проводится общая консультация специалиста, опрос и сбор анамнеза.

Общий анализ мочи как способ обнаружить бактерии в моче у женщин

Данный способ исследования позволяет определить уровень патогенной микрофлоры в мочевой жидкости. При этом определяется как количественное содержание бактерий, так и природа их происхождения. Нормой считается полное отсутствие кишечной палочки в моче. Незначительное содержание патогенной микрофлоры может указывать на начало развитие патологического процесса.

Посев мочи на стерильность, антибиотикограмма

Процедура направлена на определение чувствительности бактериальных штаммов к той или иной группе антибиотиков. Исследование обязательно к прохождению и помогает правильно определить дальнейшую схему лечения препаратами.

При этом было установлено, что патогены невосприимчивы к амоксициллину, стрептомицину, канамицину. Высокая эффективность доказана у декасана и мирамистина. Исследование проводится в течение 7 суток.

Экспресс-тест на бактериурию

Диагностика позволяет практически мгновенно определить наличие возбудителей в организме. Однако метод обладает существенным недостатком – количество и природа происхождения микроорганизмов не устанавливаются.

Методы экспресс-теста:

  • Солевой. Тестирование проводится с помощью специальной соли, которая при наличии бактериального поражения окрашивается в синий цвет.
  • Нитриты. При наличии микроорганизмов нитриты преобразуются в нитраты. Используется только для взрослых.
  • Определение с помощью глюкозы. Наличие патогенной флоры способствует отсутствию глюкозы.

Конкретный способ подбирается лечащим врачом.

Мазок на микрофлору из влагалища

Метод исследование проводится непосредственно в кабинете специалиста. При помощи специальных инструментов осуществляется забор биологического материала со стенок влагалища.

Такой мазок отправляется в лабораторию для дальнейшего изучения. Диагностика позволяет определить количественное содержание бактерий, а также их этиологию.

Патогенное воздействие полиморфной палочки

Нормальная микрофлора женского организма – это качественное и количественное соотношение микробных популяций, которые колонизировали определённую систему организма. Колонии бактерий участвуют в поддержании здоровья. Когда начинают преобладать патогенные микроорганизмы, нарушается баланс микрофлоры. Среди патогенов есть как палочковые формы, так и кокки.


В статье описаны причины появления полиморфной палочки в мазке у женщин.

Влагалище женщины имеет кислую среду, потому что в ней содержится много молочной кислоты, вырабатываемой под воздействием эстрогена. Около 97% бактерий, населяющих микрофлору, относятся к молочно-кислым бактериям. Одновременно в микрофлоре присутствуют условно-патогенные организмы, кокки, палочки, бациллы.

Их количество не должно в норме превышать 10,3 КОЕ/мл. Превышение этого параметра говорит о начавшемся бактериальном заболевании. Увеличение кокков сопровождается разрастанием другой условно-патогенной формы – полиморфной палочки.

Что делать при обнаружении бактерий при беременности?

Период вынашивания ребенка в большинстве случаев сопровождается сбоями в гормональной системе, понижением иммунитете, в результате чего возникают риски развитии инфекций или других патологических процессов.

При этом инфицирование опасно для формирования и развития плода, ввиду чего требуется незамедлительное обращение к врачу при подозрении на диагноз.

Заболевание способно приводить к раннему отхождению вод, изредка может наблюдаться прерывание беременности. При проникновении патогенов через плаценту в плод патология в дальнейшем может привести к аномалиям в развитии будущего ребенка или врожденным дефектам. Нередко заболевание приводит к развитию менингококковой инфекции, септическому поражению.

Лечение антибиотиками на ранних сроках проводить запрещается виду высокой токсичности препаратов и рисков развития осложнений при протекании беременности. В данный период показано соблюдение диеты, специально подбирающейся в каждом случае отдельно.

Опасность для беременных женщин и плода

В период беременности наличие патогенных микроорганизмов и посторонних бактерий во влагалище, цервикальном канале и других органах половой системы – крайне опасно. Лечение должно проходить по щадящей схеме, чтобы не наносить вреда плоду.

В первую очередь определяют чувствительность кишечной палочки к антибактериальным препаратам. Отказываться от их употребления не стоит. Новые средства абсолютно безопасны для женщины и ребенка, а кишечная палочка может нанести существенный вред и нарушить процесс нормального развития плода в утробе.

Медикаментозное лечение

Escherichia coli в посеве мочи у женщин часто обнаруживается на последних этапах развития болезни. При этом состояния требует оперативного медикаментозного лечения. Терапия с помощью медицинских средств подбирается в соответствии со степенью тяжести, характера протекания и установленной формы заболевания.

В первую очередь назначаются антибактериальные препараты – полимиксин М, нифуроксазид, нилидиксовая кислота (на протяжении 5 суток). Дополнительно предписываются антибиотики широкого спектра действия.

По окончании антибактериальной терапии назначаются пробиотики. Для восстановлений и улучшения пищеварительных функций используются лекарства на основе ферментов – Мезим, Панкреатин, Фестал.


После того, как антибактериальные препараты справятся с бактерией Escherichia coli, нужно использовать пробиотики для восстановления микрофлоры.

При боевых ощущениях и высокой температуре предписываются обезболивающие и жаропонижающие препараты – Анальгин, Ибупрофен.

Диарейный синдром сопровождается большой потерей жидкости, ввиду чего назначаются препараты, восстанавливающие водно-электролитный баланс в организме.

Бактерия в мазке из зева

Иногда E. coli можно найти и в полости рта. Обычно это подтверждается при исследовании мазка из зева, с поверхности миндалин. У больных с такими изменениями в анализе часто наблюдаются тяжелые тонзиллиты, склонные к рецидивам.

Обнаружение микроорганизмов в мазке часто становится причиной начала специального лечения. Его основой является использование различных антибиотиков, после курса приема которых, назначают препараты для восстановления микрофлоры.

www.mednotess.com

Лечение с помощью мумие

Мумие – биологически активное вещество, принимаемое внутрь.

Свойства средства:

  • противовоспалительное и антибактериальное действие;
  • улучшение и нормализация вещественного обмена;
  • оказывает общеукрепляющее действие за счет входящих в состав макро- и микроэлементов;
  • укрепление нервной системы;
  • отсутствие противопоказаний – разрешено к использованию детям от 3-х месяцев, назначается при беременности.

Для устранения признаков заболевания рекомендуется использовать следующий рецепт: 1 г средства необходимо полностью растворить в кипяченой воде. При помощи полученного раствора проводят ежедневные спринцевания. В день рекомендуется провести подобных процедур не мене 2-3-х.

Для употребления внутрь необходимо взять 0,5 г средства и растворить в 0,2 л дистиллированной воды. Данный раствор следует принимать 3 раза в сутки за 30 мин. до еды. Продолжительность такого лечения должна составлять 21 день. Затем необходимо сделать 7-дневный перерыв.

При необходимости и только после предварительной консультации с лечащим врачом терапия может быть продлена еще на 1 или несколько дополнительных курсов.

Подготовка к сдаче мазка на флору

За 1-2 дня до сдачи мазка не рекомендуются половые контакты и спринцевания, исключается применение лубрикантов, свечей, таблеток и кремов. Мазок не следует сдавать во время менструации, так как менструальные выделения искажают лабораторную картину. За 2-3 часа до похода к гинекологу не следует мочиться. Гигиена половых органов не проводится в день визита к гинекологу, а накануне — только теплой водой без использования мыла.

Мазок желательно сдавать в первые дни после менструации либо перед началом нового цикла.

Лечение с помощью кисломолочных продуктов

У женщин escherichia coli, обнаруженный во время исследований посева мочи, приводит к нарушению микрофлоры кишечника и провоцирует развитие дисбактериоза.

Зарекомендовавшим себя в терапии эшерихиоза средством является творожная сыворотка. При этом лакомство можно изготовить самостоятельно. Для этого используется кефир, настоявшийся до кремообразного состояния и творог, приготовленный на водяной бане.

Еще одним кисломолочным продуктом, способствующим нормализации пищеварения, является простокваша. Для приготовления средства необходимо взять 1 л молока, затем прокипятить и охладить. После чего добавляется 1 небольшой сухарик из белого хлеба. Полученную смесь необходимо заквашивать на протяжении 24 ч.

По истечении суток небольшие сухарики из белого хлеба необходимо предварительно натереть чесноком и добавить в напиток. Принимать средство рекомендуется 3-4 раза в день.

Что это такое

Микроорганизм был выделен еще в 1885 году. Сегодня же известны многие его разновидности. Их масса безвредна и необходима для микрофлоры кишечника. Кишечная палочка участвует в синтезе ряда витаминов: К, группы В.

Но существует больше ста видов патогенных микроорганизмов, способных спровоцировать серьезные заболевания или отравления.

Даже условно-патогенные бактерии, попадая из кишечника в другие органы, могут представлять опасность.

Нормальная среда обитания палочки – расположенный ближе к анальному отверстию участок толстой кишки.

В малых количествах эта бактерия присутствует во влагалище, но при ее размножении она приводит к проблемам — бактериальному вагинозу и другим.

Лечение с помощью топинамбура

Топинамбур или «земляная груша» представляет собой эффективное народное средство, помогающее восстановить пищеварительные функции и наладить работу кишечника. Для приготовления необходимо взять 0,3 кг корнеплодов растения и очистить от кожуры. После чего следует порезать земляную грушу небольшими кубиками и выложить в емкость.

Сверху добавляют 0,25 л свежего натурального молока, 2 ст.л. сливочного масла и 1 ст.л. пшеничной муки. Средство (отдельно от растения) ставят на огонь и варят до кремообразного состояния. После приготовления заливают топинамбур молоком и сверху посыпают зеленью.

Лечение с помощью лапчатки гусиной

Растение помогает предотвратить патогенное действие опасных микроорганизмов, обладает противомикробным действием, снимает воспаления.

Для приготовления лекарства необходимо взять 1 ст.л. растения и залить 0,25 л кипяченой воды. Смесь ставят на огонь, доводят до полного кипения и варят на протяжении 15 мин. Оставляют отвар на ночь, после чего процеживают и принимают в течение дня, поделив при этом порцию на 3 равные части.

Лечение настоем из лекарственных трав

Escherichia coli в посеве мочи у женщин может стать причиной развития иных заболеваний, ввиду чего при лечении патологии рекомендуется использовать сбор из нескольких лекарственных растений.

Подобный настой помогает устранить признаки воспаления, снять отечности, купировать болевой синдром. Средство позволяет избавиться от неприятных симптомов болезни, обладает выраженным противомикробным действием. Для приготовления настоя используют различные растения, проявляющие антибактериальные и противовоспалительные свойства.

Рекомендуется использовать зверобой, ромашку, календулу. Берут по одной части репешка и зверобоя и по 2 части – мяты, подорожника, ромашки. Затем все тщательно перемешивается. Берут из приготовленной смеси 1 ст.л. средства и заливают 0,5 л кипяченой воды. Рекомендуется использовать полулитровую банку, которую затем обворачивают полотенцем и отставляют на 30 мин.

Принимают настой вместо чая. Средство способствует нормализации стула, устраняет признаки вздутия и метеоризма, снижает болевые ощущения.

Прогноз и осложнения

Заболевания при несвоевременной терапии приводит к развитию различных осложнений, выражающихся в поражении внутренних органов и образовании иных патологических процессов в организме. Прогноз при эшерихиозе в большинстве случаев благоприятный, однако при отсутствии терапии заболевание в конечном итоге может привести к летальному исходу.

Во избежание развитие патологии рекомендуется соблюдать специальные профилактические мероприятия:

  • обработка пищевых продуктов перед употреблением;

  • слежение и выполнение ежедневных гигиенических процедур;
  • соблюдение техник и правил личной гигиены;
  • ограничение контактов с носителем инфекционного заболевания;
  • соблюдение иных санитарно-гигиенических правил и норм на предприятиях;
  • ежегодное обследование у специалиста.

При соблюдении предписанной терапии и диетического питания, профилактических мер болезнь поддается полному клиническому излечению. При первых признаках поражения escherichia coli у женщин необходимо обратиться к врачу за консультацией и пройти все виды диагностики, включая посев мочи, для назначения адекватной терапии.

Оформление статьи: Лозинский Олег

Микроэкологический подход к оценке особенностей микробиоты эякулята в профилактике снижения фертильности

Общепризнанно, что биотопы человека колонизированы большим числом микроорганизмов с различным патогенным потенциалом. Достаточно детально изучена функциональная активность отдельных представителей микробиоты человека, но лишь в последнее время стали уделять внимание роли межмикробных взаимоотношений в патогенезе заболеваний. Более того, ряду условно-патогенных микроорганизмов отводится роль лишь случайных «обитателей» биоценоза. Такая ситуация исторически обусловлена, поскольку исходно в медицинской микробиологии доминировали постулаты Р. Коха, Л. Пастера и Р. Вирхова о едином этиологическом агенте, что справедливо и по сей день, но исключительно для «классических» патогенных микроорганизмов [1]. С развитием микробиологической техники и более детальным изучением группы «условно-патогенных микроорганизмов» пришло понимание того, что поскольку патогенный потенциал отдельных видов оказывается недостаточным для запуска инфекционно-воспалительного процесса, патогенез заболеваний может быть опосредован совокупным действием участников ассоциаций. Так, Х. Плаут и Ж. Венсан одновременно описали особую форму язвенно-некротической ангины, возникновение которой обусловлено симбиозом бактерий. Впоследствии заболевание назвали ангиной Симановского-Плаута-Венсана. Возбудители этого заболевания, Fusobacterium necrophorum и Treponema vincentii, являются представителями нормальной флоры полости рта и по отдельности не участвуют в развитии заболевания. Более того, даже сформированный этими бактериями симбиоз приводит к ангине лишь при определенных условиях. Другим примером может служить язвенный колит Крона — заболевание, обусловленное нарушениями в микробиоте кишечника. Результаты «революционных» пересадок микробиоты показывают, как изменения взаимоотношений между микроорганизмами могут отразиться на функционировании всего организма человека.

Многими авторами признается существенная роль неспецифической микрофлоры в снижении фертильности, но есть и противники такой точки зрения [2—5]. В обзоре [6] представлены данные о прямом негативном влиянии микроорганизмов на сперматозоиды. Напротив, в ряде исследований выдвигается гипотеза, что микрофлора может быть необходимым элементом эякулята здоровых фертильных мужчин [6, 7]. Кроме того, одним из факторов репродуктивных неудач может служить микробная колонизация тканей генеративных органов и, как следствие, обсемененность спермальной жидкости микроорганизмами [8]. Важно подчеркнуть, что в большинстве исследований отслеживается функциональная активность отдельных видов, изменения состава микрофлоры, но не учитываются симбиотические связи между ними. Известно, что в эякуляте здоровых фертильных мужчин обнаруживается преимущественно грамположительная микрофлора, вследствие чего выдвигается предположение о ее необходимости, поскольку она обеспечивает защиту от заселения репродуктивного тракта патогенными видами. Однако эта же микрофлора может успешно увеличивать свою вирулентность за счет генетического обмена, приобретения новых свойств в результате селекции и других факторов и тем самым обусловливать повреждение эукариотических клеток. Приобретение новых свойств может происходить в условиях симбиоза видов, когда у них включаются адаптационно-приспособительные механизмы к новой форме сосуществования. Представляется, что установить роль микрофлоры в снижении фертильности можно на основе изучения микроэкологических отношений в биотопе [9].

Цель исследования — оценить прогностическую значимость бессимптомной бактериоспермии в снижении фертильности с использованием экологического подхода.

Материал и методы

В ходе исследования были сформированы две группы мужчин. В 1-ю группу включили 76 пациентов с бессимптомной бактериоспермией и патологическими изменениями спермограммы в виде снижения подвижности или числа сперматозоидов согласно критериям ВОЗ [10]. Во 2-ю группу вошли 25 здоровых доноров, в эякуляте которых отсутствовали микроорганизмы (культуральный метод), а показатели спермограммы соответствовали норме по рекомендациям ВОЗ [10].

Для бактериологического исследования эякулята использовали традиционные методы [11]. Частоту обнаружения представителей микрофлоры выражали в процентах. Исследования проводили несколько раз в течение 2012—2019 гг.

Для оценки долевого участия разных видов микроорганизмов в структуре микробиоты использовали коэффициент постоянства вида, который рассчитывали по формуле:

С=р·100/Р,

где р — число наблюдений с регистрацией изучаемого вида; Р — общее число наблюдений [12].

Для количественного выражения взаимодействия между членами микробиоценоза использовали коэффициент сходства Жаккара, рассчитываемый по формуле:

q=c/(a+b–c)·100,

где a — число наблюдений с видом а; b — число наблюдений с видом b; c — число наблюдений, содержащих оба вида [12].

Характер взаимоотношений между двумя видами в составе микробиоты определяли по соотношению коэффициента совместного существования двух «случайных» видов и числа наблюдений, содержащих оба исследуемых вида [13].

Результаты

У мужчин 1-й группы общее микробное число спермоплазмы составило 4,8±0,2 lg КОЕ/мл, микроорганизмы были обнаружены в 95,9% проб семенной жидкости. В 62,4% образцов присутствовал один вид бактерий, из которых в 39,7% были детектированы грамотрицательные палочковидные формы. Эти микроорганизмы в 89,6% случаев были выделены в количестве 103 КОЕ/мл и более. Наиболее часто в семенной жидкости встречались Enterobacter aerogenes. Основную массу выделенных Escherichia coli составили нетипичные варианты: гемолитические (44%) и лактозонегативные (11%). Другие грамотрицательные таксоны в 15,4% проб были представлены Klebsiella spp., в 11,5% — Citrobacter spp., в 3,8% — Proteus spp.

Бактерии родов Staphylococcus и Streptococcus изолировали в 37,6% проб. В том числе стафилококки в количестве 103 КОЕ/мл и более, обнаруженные в 2/3 из них, в 55% случаев были идентифицированы как S. epidermidis, в 15% — как S. haemolyticus, в 10% — как S. hominis. Численность коагулазопозитивных стафилококков, содержащихся лишь в 2,7% проб, не превышала 103 КОЕ/мл.

Ассоциации разных микроорганизмов в эякуляте были выявлены у каждого четвертого мужчины: 24% выделенных штаммов относились к грамотрицательным бактериям, 75% — к грамположительным и 1% — к грибкам рода Candida. Наиболее часто встречали ассоциации, образованные двумя видами бактерий, и только в 18,2% случаев — тремя. В трети микробных ассоциаций семенной жидкости численность каждого ассоцианта составляла 103 КОЕ/мл и более, в 45,5% проб прослеживалось количественное доминирование только одного из них на фоне минимальной концентрации (≤102 КОЕ/мл) прочих микроорганизмов. В формировании ассоциаций из числа E. coli наибольшую роль играли типичные варианты (87,5%), реже встречались лактозонегативные штаммы. Доля участия коагулазопозитивных стафилококков — 5,2%. Streptococcus viridans был определен в 7,3% ассоциаций, а S. agalactiae — в 6%. Из рода Neisseria основной вклад в образование ассоциаций вносили N. mucosa и N. lactamica. В 34,1% случаев ассоциации формировали стафилококки и стрептококки, а в 31,8% — стафилококки и энтеробактерии. Достаточно высокой (в каждой десятой пробе) оказалась совместная индикация нейссерий и стрептококков, стафилококков и энтерококков, стафилококков и нейссерий, а также нескольких видов рода Staphylococcus (6,8%).

Для выявления долевого участия разных видов в структуре биоценоза использовали коэффициент постоянства (КП) [12]. Так, в эякуляте субфертильных мужчин отсутствовали постоянные виды микроорганизмов. Только представители рода Staphylococcus были отнесены к добавочным (КП=30,1%), а остальные — к случайным (КП<25%).

Представляется более ценным изучение не только структуры сообщества микроорганизмов, но и характера взаимоотношений между ними, который отражает показатель, разработанный C. Bern и J. Martines [13]. Для большинства видов, выделенных из эякулята, была отмечена некомфортность совместного существования. Только для представителей родов Staphylococcus и Streptococcus установлено, что они могут присутствовать в пробах совместно. Однако показатель совместимости видов в микробиоценозе [13] указывает на то, что изолированные виды не приспособлены обитать совместно. В целях определения количественной характеристики взаимодействия между членами микробиоценоза вычисляли коэффициент сходства Жаккара (q) [14]. В итоге для всех выделенных видов условия в биотопе характеризовались как антагонистические. Лишь представители родов Enterococcus и Staphylococcus проявляли слабо выраженную экологическую общность (q=26,1).

Более чем у 1/2 мужчин при повторных исследованиях были выделены те же самые микроорганизмы, причем у 1/10 из них однотипные микроорганизмы выделялись более чем 2 раза. При этом бактериоспермия не сопровождалась клиническими симптомами. Кроме того, как правило, у таких мужчин стаж бесплодия составлял не менее 5 лет.

Во всех случаях ассоциаций микроорганизмов в эякуляте регистрировали более 5 лейкоцитов, при выделении одного микроорганизма число лейкоцитов варьировало от 2 до 5 в поле зрения. В пробах мужчин 2-й группы единичные лейкоциты регистрировали как случайные находки. Кроме того, при детальном анализе клеточного состава в пробах, где присутствовали ассоциации микроорганизмов, было выявлено большое число макрофагов (в 1-й группе — 0,69±0,07, во 2-й — 0,48±0,02; p<0,05).

Вязкость эякулята в 1-й группе была 5,4±0,4 см, в контрольной — 2,4±0,1 см (p<0,05).

Обсуждение

В настоящее время наблюдается противоречивость представлений о вкладе микроорганизмов в развитие мужского бесплодия — от абсолютизации роли в первую очередь патогенных микроорганизмов до полного отрицания их значимости, особенно условно-патогенных представителей. Большинство исследователей сконцентрированы на поиске специфических этиопатогенов в эякуляте, а общая структура бактериального сообщества остается крайне малоизученной [15, 16].

Существенное расширение представлений о микробиоте человека и отдельных его биотопов произошло с момента внедрения молекулярно-генетических методов исследования, технологии метагеномного секвенирования генов 16S рРНК. Такой подход позволил обнаружить в репродуктивном тракте генетические маркеры широкого спектра различных по грампринадлежности и степени патогенности таксонов, в том числе относящихся к Lactobacillus spp., Moraxella spp., Morganella spp., Prevotella spp., Bacteroides spp., а также Gardnerella vaginalis, Atopobium vaginae и др. [17]. Стало понятно, что микробное разнообразие весьма значительно и в мужской репродуктивной сфере [15]. Однако интерпретация метагеномных данных применительно к анализу межмикробных взаимоотношений в этом биотопе затруднительна, поскольку исследователи [18, 19], как авторы настоящей работы, при идентичных ситуациях столкнулись с пестротой результатов по долевому участию отдельных видов. Генетический материал одного и того же вида микроорганизмов в некоторых случаях составлял доли процента, а в других — более половины совокупного генома, но при этом соответствующие штаммы не обнаруживались при культуральном исследовании. Возможно, это является следствием другой, не менее существенной дилеммы метагеномного анализа, — невозможности дискриминировать найденные генетические фрагменты по принадлежности живым активным участникам микробиоты либо всего лишь их предшествующему присутствию или миграции в анализируемом биотопе. Так или иначе, оценочную систему межмикробных отношений по результатам молекулярно-генетических методов анализа еще предстоит разработать. Представляется, что не менее ценную информацию о вкладе микроорганизмов в патогенез бесплодия можно получить при изучении не столько структуры сообщества, сколько характера взаимоотношений между ассоциантами на основе сложившихся подходов. При культуральном исследовании установлено, что микрофлора эякулята находится в сложных взаимоотношениях, по большей части антагонистических друг к другу, на что указывают малое число ассоциаций и результаты индексной оценки взаимоотношений микроорганизмов. В такой ситуации можно ожидать активацию ряда синтетических процессов, которые направлены на поддержание антагонизма, а также селекцию таких видов микроорганизмов, которые способны существовать в симбиозе с другими ассоциантами. В результате происходит обеднение микрофлоры репродуктивного тракта у пациентов с бесплодием, что выявлено в настоящем исследовании и согласуется с данными других исследований [20]. Более того, можно говорить, что происходит отбор видов, опосредованный условиями биотопа репродуктивного тракта: метаболиты микроорганизмов-ассоциантов и факторы иммунной системы хозяина — основные эффекторы такого отбора. Например, по данным Ю.Л. Набока и соавт. [21], у пациентов с хроническим простатитом штаммы характеризуются высокой адгезивной способностью и антилизоцимной активностью. По наблюдениям настоящего исследования, представители E. coli в большом числе случаев проявляли гемолитическую активность и, как правило, не участвовали в формировании ассоциаций.

Межмикробный антагонизм не может не отражаться на состоянии эукариотических клеток, особенно в антагонистически «настроенном» микробиоценозе. Так, показано, что E. coli синтезируют метаболиты, обеспечивающие продукцию реактивных форм кислорода, что в свою очередь негативно влияет на подвижность сперматозоидов [22]. Токсины других грамотрицательных энтеробактерий также оказывают негативное влияние на двигательную активность сперматозоидов [23]. Наиболее неблагоприятная ситуация развивается при фрагментации ДНК половых клеток, которую невозможно выявить в рутинной спермограмме с использованием световой микроскопии, а требуются специальные процедуры. Разрушение нуклеиновой кислоты может быть опосредовано продукцией активных форм кислорода, ряда ферментов и метаболитов с токсическими для эукариотических клеток свойствами.

В связи с этим использование индексной оценки взаимоотношений между отдельными микроорганизмами сохраняет свою актуальность, поскольку не требует трудоемкого лабораторного исследования и дает представления о «направленности» ассоциативного симбиоза в биотопе. П.В. Фурсова и A.П. Лeвич [24] подчеркивают, что видовой спектр представляет собой экологическую «систему отсчета», поскольку именно изменения в численности видов дают информацию о структуре и функционировании сообщества. Удобной формой интегрирования информации о сообществе являются экологические индексы, в частности, использованный в настоящем исследовании индекс Жаккара, дающий представление о типе симбиотических отношений.

Двоякое отношение медицинской общественности к бактериоспермии вызвано в том числе отсутствием клинических проявлений и четких корреляций с теми или иными репродуктивными нарушениями. Однако в контексте профилактики репродуктивных неудач, в особенности при реализации вспомогательных технологий, необходимо учитывать способность микроорганизмов к прочной адгезии к сперматозоидам за счет ковалентных связей, что позволяет им проникать в женский репродуктивный тракт и оказывать влияние на оплодотворение яйцеклетки. Так, например, энтерококки способны прочно прикрепляться к хвостовой части сперматозоида и в последующем обусловливать развитие замершей беременности [25].

Ситуация с увеличением числа макрофагов представляется опасной, поскольку дифференцировка последних в М2-тип будет способствовать более длительному течению воспаления, что отчасти и наблюдалось у мужчин 1-й группы — бессимптомная бактериоспермия с минимальным набором клинических проявлений. Увеличение вязкости эякулята косвенно указывает на воспалительный характер изменений. Показано, что достаточно большой спектр условно-патогенных микроорганизмов обладает способностью менять поляризацию макрофагов за счет своих метаболитов, обеспечивая тем самым себе выживание [26].

В целом можно предположить, что в эякуляте формируются антагонистические отношения между отдельными микроорганизмами, которые отчасти обусловливают и противостояние с иммунной системой хозяина, когда синтетическая активность прокариотических клеток значительно меняется. В результате продуцируемые метаболиты более вирулентных штаммов подавляют рост и функционирование микроорганизмов-ассоциантов, а также модулируют работу иммунокомпетентных клеток таким образом, что воспаление протекает бессимптомно и переходит в хронический процесс. Такие ситуации не могут не отражаться на состоянии половых клеток, которые, как было показано ранее [27], при бессимптомной бактериоспермии теряют двигательную активность, меняют морфологию и обеспечивают транспорт микроорганизмов с выраженным патогенным потенциалом в репродуктивный тракт женщины.

Заключение

Таким образом, сложные, в большинстве своем антагонистические отношения между микроорганизмами в эякуляте, не проявляясь клинически, создают условия для снижения репродуктивного потенциала. В частности, длительная персистенция может быть причиной более прочной адгезии микроорганизмов к половым клеткам, что, вероятно, служит предиктором репродуктивных потерь. Использование ряда микроэкологических индексов позволяет количественно оценить взаимоотношения между выделенными микроорганизмами, что важно для расшифровки механизмов снижения фертильности, ассоциированных с неспецифическими инфекциями.

Работа выполнена в рамках научного проекта 17-44-590404р_а, поддержанного РФФИ и Администрацией Пермского края.

Участие авторов равное на всех этапах подготовки статьи.

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Случай лечения рецидивирующего хронического цистита, ассоциированого с Escherichia coli

Эшерихия коли

E.3 КОЕ/тамп (Комментарий: условно-патогенные микроорганизмы, не имеющие диагностического значения в низком титре). Скажите, нужно ли лечение?

Добрый день!

Семейство энтерококки (Enterococcus sp.) – повсеместно распространенные грамположительные бактерии, активно живущие в окружающей среде и теле человека. Они относятся к группе стрептококковых микробов, обитающих в кишечнике.

Доминирует в теле человека Enterococcus faecalis – фекальный энтерококк. Он – это 80-90% всей популяции Enterococcus sp. в анализе мазка или посева. Ему помогает Enterococcusfaecium, составляет 5-10% микрофлоры. Именно их можно встретить в анализе бакпосева выделений или мочи у женщин.

Enterococcus sp. у женщин включает бактерии, необходимые человека для нормальной жизнедеятельности, здорового пищеварения и функционирования всего организма, а также микроорганизмы, которые являются условными патогенами, т.е. при определенных обстоятельствах могут вызывать различные заболевания. Чтобы они проявили свои вредные качества, необходимы соответствующие благоприятные условия. Восприимчивым организмом становятся те, у кого снижаются защитные механизмы.

Причинами нарушения иммунного статуса могут быть гормональные изменения, хронические заболевания или воспалительные процессы других органов и систем, тяжелая физическая работа, нахождение в состоянии стресса и т.д. Иногда, причиной могут быть нарушения личной и интимной гигиены ношение тесного белья (например, трусики-стринги), при смене полового партнера.

Пути передачи

Из кишечника эти микроорганизмы попадают во влагалище при:

  1. анально-вагинальных контактах,
  2. обычных половых актах и нессоблюдении элементарных правил гигиены;
  3. из-за близости анального отверстия и входа во влагалище,
  4. неправильного подмывания и ношения стрингов,

Enterococcus sp. в мазке

  • 102 степени или 10 в 3 степени — умеренный рост, вероятно, энтерококк попал во влагалище из прямой кишки случайно;
  • 104 кое/мл, 105, 106, 10 в 7-й степени— обильный рост, такие титры требуют лечения (полового партнера часто тоже).

Симптомы инфицирования половых путей

Если воспаление есть, то у женщины будут следующие его проявления.

  1. Боль во время полового акта, так называемая диспареуния.
  2. Обильные желтые выделения без неприятного запаха.
  3. Отечность и покраснение вульвы и влагалища.
  4. Зуд и жжение в вагине, иногда “щипят” половые губы.

При выявление у женщин в мазке Enterococcus sp., рекомендуется сдача анализов на бактериологическое исследование сопутствующих микробов (см. здесь цены на бакпосевы), а именно на такие возбудители (большинство из них смотрятся в групповом тесте):

Нужно ли лечить Enterococcus sp

В вашем мазке Enterococcus sp. 103 – это количество клинически, в принципе, не значимое. Но если беспокоят выделения из влагалища и других причин гинекологи не нашли, то виноват только энтерококк и его нужно лечить даже в небольших титрах 103 и 104.

вљ  Как запиаться к врачу

в†ђ Вернуться к началу

Энтерококки представляют собой бактерии семейства Enterococcaceae и относятся к санитарно-показательным микроорганизмам. С точки зрения физиологических особенностей они схожи со стрептококками. В кишечнике человека широко представлены два вида симбионтов – E. faecalis и E. faecium. Патогенные штаммы энтерококков могут вызвать ряд заболеваний, в том числе бактериальный эндокардит, менингит, а также нагноение ран. Некоторые из них отличаются устойчивостью к антибиотикам, среди которых пенициллин, цефалоспорин.

Уровень содержания энтерококков в водной среде строго регламентируется – так, для морской воды ПДК является значение 7 КОЕ/100 мл. Также уровень данных микроорганизмов отслеживается в мясе, рыбе и их производных. Энтерококки успешно применяются для более точной оценки качества продуктов. В зависимости от количества можно судить об уровне фекального загрязнения воды или почвы.

Физиолого-биохимическая характеристика

Энтерококки за счет имеющейся энергии брожения могут жить при недостатке или избытке кислорода, а также способны расти при температуре от 10 до 45 °C. Микроорганизмы отличаются устойчивостью к различным воздействиям внешних факторов. Например, они могут выдерживать нагрев до 60 °C на протяжении 30 минут, а также воздействие низкой температуры и процедуру высушивания.

Чем опасны энтерококки?

Энтерококки имеют по меньшей мере 20 видов, представляющих экологическое значение и способных долгое время выживать в почве и продуктах. В случае, если организм ослаблен другой болезнью, они могут атаковать разные органы и системы. В частности, микроорганизмы могут вызывать нарушение работы пищеварительной системы и органов, заболевания кожи, рта, носа, мочеполовых и желчных путей. При этом энтерококки, вопреки ошибочному мнению, не вызывают пищевую токсикоинфекцию, если при производстве продуктов их культура использовалась для получения особого, эксклюзивного вкуса и аромата. В качестве примера можно упомянуть сыр «чеддер».

Методы выявления

Анализ на энтерококки, которые представляют собой санитарно-показательные микроорганизмы, осуществляется для оценки состояния ключевых объектов среды – воды и почвы. Методы обнаружения энтерококков включены не только в государственные, но также в европейские и мировые стандарты.

В случае с жидкой средой на необходимость проведения анализов указывает помутнение с последующим образованием осадка. При этом методы, которые позволяют определить энтерококки в воде и почве схожи: в обоих случаях чаще всего используют титрационный метод и метод мембранной фильтрации.

Титрационный метод

Принцип титрационного метода основан на применении параллельных рядов посевов в щелочной полимиксиновой среде. В зависимости от предполагаемого уровня загрязнения воды кратность разведения может отличаться. Инкубирование осуществляется в течение суток при температуре 37 C с минимальной погрешностью. В случае, если рост присутствия в воде бактерий не наблюдается – это может выражаться в помутнении, изменении цвета среды – посевы остаются в термостате, а процесс инкубирования продлевается.

Для подтверждения принадлежности обнаруженной колонии к энтерококкам используется микроскопия.

  1. Для проведения процедуры применяется 3% раствор перекиси водорода, капля которого наносится на колонию.
  2. Если в течение минуты на стекле образуются пузырьки газа, это означает присутствие в образце искомого вещества.
  3. Далее индекс энтерококков рассчитывается по таблицам.

В случае исследования пробы почвы подготавливаются разведения суспензии, которая перед этим проходит обязательную обработку. Далее при помощи стерильной пипетки берется 10 см³ и размещается по флаконам с 50 см³ жидкой среды – это может быть ЛПС или ЩЭС. Посевы инкубируются в условиях, которые идентичны исследованиям проб воды. При отсутствии признаков развития в первые 24 часа процесс продлевают на сутки.

Признаком наличия в образце микроорганизмов является появление небольших колоний c характерной структурой. С помощью данной среды можно вывести вид энтерококков. Е. faecalis – аспидно-черные выпуклые колонии, которые отличаются характерным блеском. Е. faecium – плоские колонии, имеющие серый оттенок.

Чтобы убедиться в наличии энтерококков во взятом образце почвы, проводится микроскопия окрашенных по Граму мазков, а также каталазное тестирование. В случае выявления энтерококков устанавливается титр с учетом предельного уровня разведения почвы, при котором были обнаружены колиформы. Чтобы перевести титр в индекс, достаточно 1000 разделить на число, которое выражает титр.

Метод мембранной фильтрации

Количество фильтруемой воды зависит от уровня предполагаемого загрязнения. Принцип самого метода предельно прост:

  1. Образец проходит через фильтр мембранного типа в асептических условиях, а он в свою очередь удерживает микроорганизмы, содержащиеся в пробе.
  2. Далее фильтр помещается в чашку Петри и инкубируется в течение одного-двух дней при идентичной вышеописанному методу температуре.
  3. В случае обнаружения присутствия колоний энтерококков подсчитывается их количество, после чего они суммируются и делятся на объем воды, которая подвергалась фильтрации.

Особенность исследования почвы в данном случае схожа с анализом пробы воды. Однако, при выборе объема анализируемого образца необходимо учитывать, что на 2-х и больше фильтрах должно вырасти от 5 до 50 изолированных колоний. Выполнение анализа производится с помощью мембранных фильтров, сквозь которые проходит испытуемый образец. Для инкубирования при температуре 37 °C отводится 24-48 часов – продолжительность зависит от степени развития колоний.

Стоит отметить, что для установления получаемых результатов используются фильтры, на которых было выращено не больше 20-30 колоний. Выделение из них энтерококков определяется по ключевым признакам – они могут быть плоскими и крупными с ровными краями, а также иметь характерный оттенок: белый, бледноокрашенный, кремовый и даже малиновый. Последний свидетельствует о присутствии E. faecalis. Для подтверждения наличия энтерококков производится микроскопирование 2-3 колоний каждого типа.

Важность правильного отбора проб

Даже новейшее оборудование и соблюдение всех правил во время анализа не гарантирует получение точной информации, если при отборе образца были допущены нарушения. Специалисты лаборатории «НОРТЕСТ» учитывают это, отбирая воду или почву для исследований. Помимо соблюдения необходимых правил, мы также обеспечиваем безопасную доставку образца, что позволяет рассчитывать на высокую точность результатов при проведении анализа.

Услуга анализа воды и почвы в лаборатории «НОРТЕСТ»

Испытательный центр «НОРТЕСТ» является аккредитованной организацией и имеет все необходимые разрешения для выполнения комплексных задач по оценке и анализу исследуемых объектов. Наша лаборатория оснащена современным оборудованием, что позволяет реализовывать передовые методики и рассчитывать на минимальную погрешность при проведении исследований. Наша задача – предоставление аналитических услуг высшего качества, поэтому своевременное обращение в центр позволит определить характер и серьезность загрязнений среды и предпринять шаги по устранению проблем.

Полезные статьи

Азот аммонийный в воде

Загрязнение почв и грунтов тяжелыми металлами

Анализ воды в Дмитрове

Оставьте заявку онлайн Наши сотрудники перезвонят и проконсультируют по вашему вопросу

« А.Доброкотов

Все не так просто при незащищенном и оральном сексе. Иллюзия безопасности присуствует только  в нашем сознаии. На самом деле все много сложнее.

Рот, как ни странно, одно из наиболее нечистоплотных мест в организме. Рот – это та область, в которую попадает очень много постронних бактерий. Даже, если вы моете руки и соблюдате гигиену полости рта (чистите зубы и полощите рот), все-равно избежать попадания чужой флоры не удается. Она вокруг нас везде. В пище, на руках, под ногтями, на вашей зубной щетке…

На фото то,что высевается только с ваших рук.

Не верите? Можете сами взять и проверить. Инструкция – здесь.

А тут мама попросила пришедшего с прогулки ребенка приложить свою немытую ладошку к чашке Петри*

*Чашка Петри – это та лабораторная посудина, на которой выращивают бактерии.

И вот, что получилось.

Источник: pikabu.ru

Эти разноцветные пятна – колонии разросшихся бактерий. О чем это говорит? О том, что немытые руки очень грязные. Человек трогает этими руками все. И гениталии в том числе. Бактерии с рук могут переходить в рот, глаза, гениталии. Равно, как в обратном порядке из гениталий в рот, в глаза и т.д.

То, что на руках, то нередко и во рту.

Будете неприятно удивлены! Изо рта высевается бактерий больше в разы (!!!). И много более разнообразных, в том числе и патогенных.

Предвижу вопрос: «Слюна содержит бактерицидный фермент лизоцим, который все обезвредит?».

Да, лизоцим есть. Но его активности не хватает для умерщвления большого количества бактерий во рту, в том числе патогенных.  Полезная флора (т.н. сапорофиты*), которая постоянно проживает во рту, адаптирована к лизоциму.

*сапорофиты – живущие в симбиозе с организмом человека

Активности лизоцима не хватит на обезвреживание всех поступающих в рот извне бактерий.

Ниже – бакпосев из зева.

Во рту могут быть выявлены много разновидностей бактерий: стафилококки-комменсалы*, некоторые вирусы, простейшие микроорганизмы и др. Чаще это постоянные обитатели ротовой полости, от которых, как правило никакого вреда нет.   Это те бактерии, «которым ты просто нравишься»

*Комменсалы – сожители, которые не приносят вреда

Понятие «нормальная микрофлора» объединяет в себе микроорганизмы, наличие которых является нормой для здорового человека.

Вместе с тем, достаточно часто встречаются и патогенные бактерии. Грань между здоровой флорой и патогенами провести сложно. Более того, случаются ситуации, когда происходит «обвал» иммунитета и своя «родная и безобидная» флора «покажет зубы» — станет патогенной.

Состав флоры ротовой полости человека постоянно обновляется. В рот микроорганизмы попадают с пищей, воздухом, водой… Во рту есть места, где могут задержаться бактерии. Это межзубные промежутки, карманы десен, складки слизистых полости рта и др. Именно там остатки пищи и др. превращаются в среду для роста бактерий.

Во рту преобладают анаэтобные типы бактерий (те, которым для жизни не нужен кислород). На щеках, в их эпителии живет стрептококк — Streptococcus mitior. На проверхности зубов —  Streptococcus mutans  и Streptococcus sangius. Кончик языка украшает Streptococcus salivarius Во рту обитают спирохеты родов Treponema  LeptospiriaBorrelia Есть там и микоплазмы (M. Salivarium, M. orale) – ничего не напоминает? Много простейших микроорганизмов —  Trichomonas buccalis,  Entamoeba buccalisEntamoeba dentalis, аэробактерии, Клебсиелла (палочка Фридлендера).

Естественная флора – это барьер для внешней флоры. Своя флора конкурирует с пришельцами. И в этом, в том числе, ее польза. Эта флора полезна.

Но, как себя поведет естественная флора при попадании в иную среду?

Например, во влагалище или в уретру партнера?

В рот неизбежно попадают и патогенные бактерии. Именно они в состоянии нанести вред.

Тем более, что нередки такие заболевания полости рта, как кандидоз, стоматит, глоссит, лейкоплакия, пародонтит, пародонтоз, гингивит и др. Все они вызваны инородными бактериями и вирусами, которые попали в рот. Все эти заболевания вызваны патогенной флорой.

Что характерно: выраженность проявлений этой патологии может быть смазанной. Поэтому человек может на них и не обратить внимания.

Доминирующие обитатели полости рта – это стрептококки. Более 100 стрептококков содержится в 1 миллилитре слюны. При этом в зубном налете неизменно присутствует эпидермальный стафилококк Staph. epidermidis. Последние исследования показали, что эпидермальный стафилококк, попадая, например, в гениталии (не свойственное для него место) становится патогеном (вредным).

Такой же патогенной флорой является золотистый стафилококк (Staph. aureus) – очень агрессивная внутрибольничная инфекция. Ее вывести из больничного помещения невозможно. Ремонты и дезинфекция не помогают. Из-за золотистого стафилококка в Америке целые больницы не ремонтируют, а просто сносят.

Доказано, что золотистый и эпидермальные стафилококки абсолютные патогены, способные вызвать воспалительные заболевания мочеполовой системы.

Во рту выявляются грибы Candida , Aspergillia niger, Pseudomonae aeruginosa, род бактерий  Staphylococcus , Streptococcus , кишечная палочка Esherichia coli , Klebsiella , рода Neisseria , Энтерококки Enterococcus , Коринобактерии (Corynobacter). Грибы: C. albicans, C. tropikalis, 

Другие виды стафилококков, что находят во рту:  Staph. Viri, Staph. Albic, Staph. Aureus, Staph. haeruelibicus,  

СтрепотококкиStreptococcus. Viridans,  абсолютно патогенная для мочеполовой системы флора, как и эпидермальный стафилококк Str. Epidermidis 

и другие стрептококки: Str. Faecabis, Str. Aureus, Str. Hominis, Str. Vissei, Str. Flaeris, Str. Salivarum, Str. Agalactika, Str. Milis, Str. Sanguis, Str. Pyogenes, Str. Anginosus, Str. Mutans, Str. Cremoris,  

Род Neisseria: N. sicca, N. subfeava, N. feava

Клебсиеллы: K. pneumoniae, — флора, которая вызывает пневмонию и прогрессировать до абсцесса легкого, вызывает цистит, пиелит, бактериемии, сепсис и др.

Кишечная палочка Esherichia coli, — нередкий обитатель как рта, так и половых органов. 

Энтерококки — Enterococcus faeceum (энтерококк фекалис) агрессивная патогенная флора. Ее находят как во рту, так и в гениталиях.

Синегнойная палочка —  Pseudomonae aeruginosa, 

Плесневые грибки  Aspergillia niger, 

Дифтероид Corynobacter pseudodiphteriae.

Источник natural-sciences.ru

Перечисленное выше – это далеко не все, что можно высеять во рту.

Заболевания, передающиеся половым путем (ЗППП), передаются от партнера к партнеру через биологические жидкости (в том числе и через слюну). При попадании слюны от зараженного человека на гениталии (половые органы) партнера вызывает инфицирование, что ведет к местному воспалению.

Внизу частично приведен список возбудителей ЗППП, которые поражают ротовую полость.

Герпес

Хламидиоз — характерные хламидийные включения в клетке

Как оказалось, хламидии очень живучие бактерии. Они живут в условиях совершенно несовместимых с жизнью. Ученые нашли хламидии в Северном Ледовитом океане на глубине 3000 метров. Они выживают без кислорода и в условиях очень высокого давления. Неудивительно, что хламидии так сложно лечатся. Этот паразит приспособиться к любым условиям. Источник: ferra.ru

Уреоплазмоз

Гарднереллез 

Представление о о том, что гарднарелла является естественной флорой в организме, не очень соответствует действительности. Гарднарелла легко становится патогенным микроорганизмом, вызывая воспалительные изменения в половых органах такие, как жжение во влагалище (вагинит)  и другие воспаления. Гарднереллез является одним из наиболее частых причин бектериального вагиноза. Последние исследования показали, что гарднереллез может провоцировать боль в суставах (артрит)

Гонорея (диплококк)

Сифилис

Вот такой устрашающий вид имеет бледная спирохета — возбудитель известного столетиями заболевания «сифилис».

При этом можно заразиться, например, гепатитом С, который передается через биологические жидкости, в том числе через слюну и половым путем

Гепатит C

Инфекции, имеющие отношение к желудочно-кишечному тракту. Например – кишечная палочка и энтерококки и др.

Энтерококк фекалис 

Эти и многие другие инфекции являются абсолютными патогенами для мочеполовой системы. Они могут передаваться как естественным путем, так и при оральном сексе.

Опасен! И вариантов бактерий, находящихся во рту множество.

С высокой степенью вероятности возможен переход бактериального содержимого рта на мочеполовые органы как у женщин, так и у мужчин.

Причем это касается не только строго патогенной флоры, а и любых, даже сапрофитных* бактерий, которые могут находиться во рту.

*Сапрофитные бактерии – бактерии – сожители.

Относительно патогенная и даже непатогенная флора рта может быть частично нейтрализована условиями, где она прижилась.  Попадая изо рта в половые органы, бактерия сталкивается с совершенно другой средой. Иная кислотность, другая слизистая, другая концентрация гормонов …, которые могут сделать ее абсолютным патогеном. В половых органах эти бактерии способны вызвать воспалительные заболевания.

Достаточно одного единственного сексуального контакта для того, что бы существенно нарушить бактериальную чистоту половых органов и вызвать  воспление: бектериальный вагинит, уретрит,  цервицит, эндомтреит, сальпингит, воспаление яичников — аднексит.

Если возник вопрос, откуда у женщины пульсирующая боль справа внизу живота, то с высокой степенью вероятности можно предположить, что это, например, правосторонний аднексит воспалительного характера. Наиболее вероятная причина воспаления – чужеродная флора. Которую, кстати, не сложно выявить и ликвидироать. Решив все проблемы с воспалением.

Так же и с вопросами «боль внизу живота при мочеиспускании», «зуда в промежности», «жжение в промежности», «почему болезненные месячные?» или «болезненные месячные, что делать?». Перед тем, как перебирать большой перечень возможных причин, сделайте банальное исследование на беаткериальную чистоту половых органов. И вопрос может быстро и легко решиться.

  1. Руки нужно мыть
  2. Оральный секс далеко не безопасен.
  3. Патогенная флора при оральном сексе переходит из полости рта в мочеполовые органы и с высокой степенью вероятности может вызвать воспаление (цистит, уретрит, простатит, цервицит, эндометрит, аднексит и др.). Все зависит от состава флоры и от персонального иммунитета.
  4. Воспаление может быть выраженным, с бурными проявлениями, как, например, при гонорее: боль, жжение, гнойные выделения, тяжесть внизу живота.
  5. Воспаление может протекать без каких-либо ощущений и внешних проявлений. Пациент может об инфекции не догадываться. Как, например, при хламидиозе, уреаплазмозе, микоплазмозе. Эти микроорганизмы имеют специальную ферментную систему, которая препятствует развитию воспаления.  В этом нередко и проблема, когда пациент считает, что он полностью здоров поскольку «его ничего не беспокоит». В одной лаборатории нашли, а во второй – нет???   NB! Ошибка в диагностике у мужчин достигает 60%, а у женщин – 12% (официальные данные, связанные с техническими моментами забора материала и самих исследований. На сегодня независимо от рейтинга лаборатории и страны исполнения!). Но существуют технические решения, способные в разы уменьшить ошибку диагностики.
  6. Проявления могут быть минимально выраженными при стафилококковой и энтерокковой инфкекции, но вызывать при этом реактивные изменения, например, в суставах и сосудах (например, эндоваскулит).
  7. Неважно, в каком направлении двигается инфекция: из рта в гениталии или в обратном направлении. Незащищенные и оральный секс может заразить как ротовую полость, так и мочеполовую систему.
  1. Опрос может что-либо показать при наличии жалоб.
  2. На глаз и при ручном гинекологическом или урологическом осмотре найти причину воспаления не выйдет. Нужно более глубокое обследование.
  3. УЗИ трансвагинальное и УЗИ простаты показывают воспаления в 80% случаев. Но только при соблюдении определенных стандартов.

Если приведенные выше пункты 1, 2 и 3 дополнить профессиональным лабораторным обследованием (с соблюдением всех стандартов), то, как правило, удается получить абсолютно точные данные по бактериальной чистоте мочеполовых органов.  Это самый короткий путь в решении лечения воспаления, особенно – хронических воспалений женских и мужских половых органов.

Диагностика и лечение заболеваний, передающихся половым путем и других инфекций мочеполовой системы проводится в Киеве, на левом берегу, 250 метров от ст. метро Дарница, пер. Строителей, дом. 4. Центр «Меддиагностика»

.

Гинеколог и уролог в Киеве.

Энтерококки – это широко распространенные микробы, активно живущие в окружающей среде и даже «одомашненные» и «прирученные» человеком. Но среди энтерококков все-таки встречаются потенциально опасные и зловредные особи, которые могут вызывать у детей или взрослых различные заболевания и патологические состояния.

Энтерококками — возбудителями пищевых токсикоинфекций являются стрептококки, относящиеся к серологической группе D.

Различают 5 видов и разновидностей энтерококков, а именно: Str. faecalis, Str. faecalis var. zymogenes, Str. faecalis var. liquefaciens, Str. faecium var. duraus.

Энтерококки отличаются большой устойчивостью к окружающей среде, способны расти при температуре от 10 до 45°, сохраняются при содержании 6,5% хлорида натрия в пищевых продуктах. При pH 9,6 выдерживают нагревание до + 60° С в течение 30 мин, при

+ 85° С в течение 10 мин погибают. Устойчивы к высыханию, длительно переносят низкие температуры, обладают выраженной галофильностью (растут в присутствии повышенной концентрации соли), размножаясь в средах с содержанием хлорида натрия до 17%, растут в средах с большим диапазоном pH — от 3 до 12.

Эпидемиология. Возбудителями пищевых токсикоинфекций являются только такие штаммы энтерококков, которые обладают энтеротоксическими свойствами.

Энтерококки, как представители нормальной микрофлоры кишечника человека и теплокровных животных, в большом количестве попадают в окружающую среду: в почву, воздух, воду, растения, пищевые продукты. Источником инфекции являются человек и теплокровные животные. На пищевых предприятиях источником инфекции могут быть больные или бактерионосители из числа лиц обслуживающего персонала.

Пища может быть инфицирована энтерококками в результате попадания в нее кишечного содержимого, а также воздушно-капельным путем. В колбасных изделиях, готовых блюдах и полуфабрикатах, полученных из гастрономических магазинов и магазинов кулинарных изделий, энтерококки обнаруживаются в 31% случаев. Присутствие этих микроорганизмов чаще отмечается в студнях, салатах, винегретах.

Энтерококки быстро и интенсивно размножаются на самых разнообразных пищевых продуктах при комнатной температуре и достигают максимальной концентрации уже в первые сутки.

Клиника. Развитие заболевания зависит от ряда факторов, в частности наличия строго определенного вида энтерококка, количества живых микробов в пищевом продукте, срока хранения штаммов, а также индивидуальной чувствительности людей. Для возникновения заболеваний необходимо попадание в организм значительного количества живых энтерококков, обладающих энтеротоксичными свойствами.

Клинические проявления токсикоинфекций, обусловленных энтерококками, мало характерны. Продолжительность инкубационного периода 3—18 ч. Чаще всего заболевание длится от нескольких часов до суток, редко затягивается до 3 сут. У больных отмечается тошнота, рвота, боли в животе, понос.

Профилактика. Профилактика пищевых токсикоинфекций энтерококковой этиологии такая же, как и других пищевых токсикоинфекций, и заключается в соблюдении требований, предъявляемых к правильному хранению, транспортировке, реализации и приготовлению пищевых продуктов и готовой пищи, выполнению правил личной гигиеныобслуживающим персоналом предприятий пищевой промышленности и общественного питания.

ИЦ

Лаборатория микробиологии: MOLB 2210


Тесты, используемые для выявления грамположительных бактерий

Тесты, используемые для идентификации грамотрицательных бактерий


Агар с маннитоловой солью (MSA)

Этот тип среды является одновременно селективным и дифференциальным. MSA выберет такие организмы, как виды стафилококков, которые могут обитать в районах с высокой концентрацией соли (таблица слева на рисунке ниже). Это в отличие от видов Streptococcus , против роста которых выбран этот агар с высоким содержанием соли (пластинка справа на картинке ниже).

Отличительным ингредиентом MSA является сахар маннит. Организмы способный использовать маннит в качестве источника пищи, будет производить кислые побочные продукты ферментации, что снизит рН среды. Кислотность среда заставит индикатор pH, феноловый красный, стать желтым. Стафилококк aureus способен ферментировать маннит (левая сторона левой пластины) в то время как Staphylococcus epidermidis – нет (правая сторона левой пластины).


 

ТОП


Глюкоза бульон с пробирками Дарема

Это дифференциальная среда. Проверяет способность организма ферментировать сахарную глюкозу, а также ее способность превращать конечный продукт гликолиза, пировиноградная кислота в газообразные побочные продукты. Этот тест обычно используется при попытке идентифицировать грамотрицательные кишечные бактерии, все из которых ферментируют глюкозу, но только некоторые из них производят газ.

Как и MSA, эта среда также содержит индикатор pH, феноловый красный. Если организм способен ферментировать сахарную глюкозу, то образуются кислые побочные продукты, и индикатор рН становится желтым. Escherichia coli способна ферментировать глюкозу, как и Proteus mirabilis (крайний справа) и Shigella dysenteriae (крайний слева). Pseudomonas aeruginosa (в центре) является неферментатором.

Конечным продуктом гликолиза является пируват.Организмы, которые способен превращать пируват в муравьиную кислоту и муравьиную кислоту до h3 (г) и CO2 (г) под действием фермента муравьиной гидролиазы выделяют газ. Этот газ задерживается в трубке Дарема и выглядит как пузырек. в верхней части трубки. Escherichia coli и Proteus mirabilis (крайний справа) являются производителями газа. Обратите внимание, что Shigella dysenteriae (крайний слева) ферментирует глюкозу, но не производит газ.

*Примечание. Пробирки с бульоном могут быть изготовлены с содержанием сахара, отличного от глюкоза (например, лактоза и маннит). Потому что тот же pH индикатор (феноловый красный) также используется в этих ферментационных трубках, одинаковые результаты считаются положительными (например, анализ лактозы пробирка с бульоном, которая желтеет после инокуляции с организмом, способным ферментировать лактозу).

ВЕРХ

 



Чашки с кровяным агаром (BAP)

Это дифференциальная среда.Это богатая, сложная среда, содержащая 5% бараньих эритроцитов. БАТ проверяет способность организма вырабатывать гемолизины, ферменты, повреждающие/лизирующие эритроциты (эритроциты). Степень гемолиза этими гемолизинами помогает дифференцировать представители родов Staphylococcus , Streptococcus и Энтерококк .

  • Бета-гемолиз — это полный гемолиз.Он характеризуется четкой (прозрачная) зона, окружающая колонии. Staphylococcus aureus , Streptococcus pyogenes и Streptococcus agalactiae являются b-гемолитическими (рисунок слева внизу показывает бета-гемолиз S. pyogenes ).
  • Частичный гемолиз называется альфа-гемолизом. Колонии, как правило, окружен зеленой непрозрачной зоной. Streptococcus pneumoniae и Streptococcus mitis являются а-гемолитическими (на рисунке справа внизу показан а-гемолиз S.митис ).
  • Если гемолиз не происходит, это называется гамма-гемолизом. Нет заметные зоны вокруг колоний. Staphylococcus epidermidis является гамма-гемолитиком.

Какой тип гемолиза наблюдается при каждом из следующих тарелки?

ТОП


Полоса удара техника

Часто при инокуляции БАТ для наблюдения за паттернами гемолиза исследователи также несколько раз протыкают агар с помощью инокуляционной петли.Этот укол позволяет обнаружить стрептолизин О, специфический гемолизин, продуцируемый Streptococcus pyogenes. Этот гемолизин инактивируется O 2 и виден только под поверхностью (в анаэробных условиях). окружающей среды) вокруг следа от укола. Обратите внимание на овальные участки просветления. вокруг следов укола на картинке ниже; они вызваны стрептолизином О.


Желчь Эскулиновый агар

Это среда одновременно селективная и дифференциальная.Он тестирует способность организмов гидролизовать эскулин в присутствии желчи. Он обычно используется для идентификации представителей рода Enterococcus ( E faecalis и E. faecium ).

Первым селективным ингредиентом этого агара является желчь, которая ингибирует рост грамположительных бактерий, кроме энтерококков и некоторых стрептококков разновидность. Вторым селективным ингредиентом является азид натрия.Этот химическое ингибирует рост грамотрицательных.

Дифференциальный ингредиент – эскулин. Если организм может гидролизовать эскулина в присутствии желчи образуется продукт эскулетин. Эскулетин реагирует с цитратом железа (в среде), образуя фенольный комплекс железа, окрашивающий весь скос в темно-коричневый цвет в черный. Пробирка справа была инокулирована E. faecalis (положительный).Пробирка в центре была засеяна с желчно-эскулин-отрицательным микроорганизмом и трубкой слева был непривит.

ТОП


Сера Индольная подвижная среда (SIM)


Это дифференциальная среда. Проверяет способность организма сделать несколько вещей: уменьшить содержание серы, произвести индол и проплыть через агар (быть подвижным).SIM-карта обычно используется для дифференциации участников из Enterobacteriaceae .

Сера может быть восстановлена ​​до H 2 S (сероводород) либо путем катаболизма аминокислоты цистеина ферментом цистеином десульфуразой или восстановлением тиосульфата при анаэробном дыхании. При образовании сероводорода в среде образуется черный цвет. Proteus mirabilis дает положительный результат на продукцию H 2 S.Организм, изображенный в крайнем левом углу, положителен на водород. производство сульфидов.

Бактерии, имеющие фермент триптофаназу, могут превращать амино кислоты, триптофана в индол. Индол реагирует с добавлением Ковача реагент с образованием красителя розиндола красного цвета (индол +). Escherichia coli является индол-положительной. Изображенный организм второй слева – E. coli, положительный на индол.

Пробирки SIM

инокулируют одним уколом в дно пробирки. трубка.Если организм подвижен, рост будет исходить от след от укола и сделать всю пробирку мутной. Псевдомонада aeruginosa и штамм Proteus mirabilis , мы работаем с подвижны.

ТОП


Железный агар Клигера (KIA)

Это дифференциальная среда. Проверяет способности организмов ферментировать глюкозу и лактозу до кислоты и кислоты плюс конечные продукты газа.Он также позволяет идентифицировать понизители содержания серы. Это СМИ обычно используется для разделения ферментирующих лактозу представителей семейства Enterobacteriaceae (например, Escherichia coli ) из представителей, не ферментирующих лактозу, как Шигелла дизентерия . Эти неферментирующие лактозу энтеросолюбильные как правило, являются более серьезными возбудителями желудочно-кишечного тракта. тракт.

Первого дифференциального ингредиента, глюкозы, очень мало.Организмы, способные ферментировать этот сахар, израсходуют его в течение первые несколько часов инкубации. Ферментация глюкозы создаст кислую побочные продукты, которые окрашивают феноловый красный индикатор в среду в желтый цвет. Таким образом, после первых нескольких часов инкубации пробирка будет полностью желтый. В этот момент, когда вся глюкоза израсходована, организм должен выбрать другой источник пищи. Если организм может ферментировать лактозу, это сахар он выберет.Ферментация лактозы будет продолжаться. для производства кислых побочных продуктов, а среда останется желтой (рисунок крайний слева внизу). Если газ образуется в результате глюкозы или лактозного брожения, то в агаре или агаре появятся трещины будет отрываться от дна трубы.

Если организм не может использовать лактозу в качестве источника пищи, он будут вынуждены использовать аминокислоты/белки в носителе. Дезаминирование аминокислот создает NH 3 , слабое основание, которое вызывает среда становится щелочной.Щелочной рН вызывает феноловый красный цвет. индикатор начнет краснеть. Поскольку инкубационный период короткий (18-24 h), только скос имеет шанс стать красным, а не вся трубка. Таким образом, организм, способный ферментировать глюкозу, но не лактозу, будет производить красный скос и желтый приклад в тюбике КИА (второй слева внизу). Эти организмы являются более серьезными возбудителями желудочно-кишечного тракта, такими как Shigella. дизентерии .

Если организм не способен использовать ни глюкозу, ни лактозы, организм будет использовать исключительно аминокислоты/белки. наклон тюбика будет красного цвета, а цвет торца останется неизменным (картинка крайняя справа внизу). Pseudomonas aeruginosa является пример неферментера.

Трубки

KIA также способны обнаруживать производство H 2 S. Виден в виде черного осадка (второе изображение справа).Иногда черный осадок закрывает торец трубка. В таких случаях микроорганизмы следует считать положительными. для ферментации глюкозы (желтый окурок). Proteus mirabilis (на фото здесь, второй справа) глюкозоположительный, лактозоотрицательный, серный уменьшая энтеросолюбильное.

ВЕРХ


Нитрат Бульон

Это дифференциальная среда.Используется для определения того, является ли организм способен восстанавливать нитраты (NO 3 ) до нитрит (NO 2 ) или другие азотсодержащие соединения под действием фермента нитратазы (также называемой нитратредуктазой). Этот тест важен для идентификации как грамположительных и грамотрицательные виды.
После инкубации эти пробирки сначала проверяются на наличие газа в трубке Дарема.В случае неферментирующих это свидетельствует о восстановлении нитратов до газообразного азота. Однако, во многих случаях газ образуется в результате ферментации и дальнейшего тестирования необходимо определить, произошло ли восстановление нитратов. Это дополнительное испытание включает добавление сульфаниловой кислоты. (часто называемый нитратом I) и диметил-альфа-нафталамин (нитрат II). Если в среде присутствует нитрит, то он будет реагировать с нитрата I и нитрата II с образованием соединения красного цвета.Это считается положительный результат. Если при добавлении нитрата не образуется красная окраска I и II это указывает на то, что либо № 3 не был преобразован в № 2 (отрицательный результат), или что NO 3 был преобразован в NO 2 , а затем немедленно преобразован в какую-то другую, не поддающуюся обнаружению форму. азота (тоже положительный результат). Для того, чтобы определить, какой В предыдущем случае в бульон добавляют элементарный цинк.Цинк преобразует любой оставшийся NO 3 в NO 2 , что позволяет нитрат I и нитрат II реагировать с NO 2 и образовывать красный пигмент (подтвержденный отрицательный результат). Если не происходит изменения цвета при добавлении цинка это означает, что NO 3 превратился в NO 2 , а затем был преобразован к какой-либо другой неопределяемой форме азота (положительный результат).

Если нитратный бульон становится красным (пробирки на фото в центре) после добавления нитрата I и нитрата II этот цвет указывает на положительный результат. Если вместо этого трубка становится красной (трубка на фото слева) после добавления Zn это свидетельствует об отрицательном результат. Если после добавления в пробирке не происходит изменения цвета нитрата I и нитрата II результат неопределенный. Если трубка бесцветен (рисунок справа) после добавления Zn это указывает на положительный тест.

ВЕРХ


Каталазный тест

Этот тест используется для выявления организмов, вырабатывающих фермент каталазу. Этот фермент обезвреживает перекись водорода, расщепляя ее до воды. и газообразный кислород.

Пузырьки, возникающие в результате образования газообразного кислорода, четко показывают каталазоположительный результат.Образец справа внизу каталазоположительный. Staphylococcus spp. и микрококк видов. являются каталазоположительными. Стрептококки и виды энтерококков. каталазоотрицательны.

ТОП



Тест на оксидазу

Этот тест используется для выявления микроорганизмов, содержащих фермент цитохром оксидаза (важна в цепи переноса электронов).Обычно это используется для различения оксидазоотрицательных Enterobacteriaceae и оксидазоположительные Pseudomadaceae .

Цитохромоксидаза переносит электроны из цепи переноса электронов до кислорода (конечный акцептор электронов) и восстанавливает его до воды. В оксидазный тест, искусственные доноры и акцепторы электронов. Когда донор электронов окисляется цитохромоксидазой, он превращается в темно фиолетовый.Это считается положительным результатом. На картинке ниже организм справа ( Pseudomonas aeruginosa ) представляет собой оксидазу положительный.

ТОП

 


Тест на коагулазу

Коагулаза — фермент, свертывающий плазму крови. Этот тест проводится на грамположительных, каталазоположительных виды для выявления коагулазоположительного Staphylococcus aureus. Коагулаза является фактором вирулентности S. aureus. Формирование сгустка вокруг инфекции, вызванной этими бактериями, вероятно, защищает это от фагоцитоза. Этот тест отличает Staphylococcus aureus от других коагулазоотрицательных видов Staphylococcus.

ВЕРХ


Taxos A (чувствительность к бацитрацину тестирование)

Это дифференциальный тест, используемый для различения микроорганизмов, чувствительных к к антибиотику бацитрацину и тем, кто нет.Бацитрацин представляет собой пептид антибиотик, продуцируемый Bacillus subtilis . Ингибирует клеточную стенку синтеза и разрушает клеточную мембрану. Этот тест обычно используется различать b-гемолитические стрептококки: Streptococcus agalactiae (устойчивый к бацитрацину) и Streptococcus pyogenes (чувствительный к бацитрацину). Табличка внизу была в полосах Streptococcus pyogenes ; обратите внимание на большую зону торможения окружающих диск.

ТОП

 



Taxos P (тест на чувствительность оптохина)

Это дифференциальный тест, используемый для различения микроорганизмов, чувствительных к к антибиотику оптохину и тем нет. Этот тест используется для различения Streptococcus pneumoniae (чувствительный к оптохину (на фото справа) ниже)) от других а-гемолитических стрептококков (оптохинрезистентный ( Streptococcus mitis изображен слева ниже)).

ВЕРХ


Агар МакКонки

Эта среда является селективной и дифференциальной. Селективный ингредиенты: соли желчных кислот и краситель кристаллический фиолетовый, подавляют рост грамположительных бактерий. Дифференциал ингредиент лактоза. Ферментация этого сахара приводит к кислый pH и вызывает индикатор pH нейтрального красного цвета, приобретать яркий розово-красный цвет.Таким образом, организмы, способные ферментация лактозы, такая как Escherichia coli , образует яркую розово-красные колонии (пластинка здесь слева). МакКонки агар обычно используется для дифференциации Enterobacteriaceae .


Организм слева дает положительный результат на ферментацию лактозы, а справа – отрицательный.

ВЕРХ


Цитратный агар Симмона

Это определенная среда, используемая для определения того, может ли организм использовать цитрат в качестве единственного источника углерода.Часто используется для дифференциации между членами Enterobacteriaceae . У организмов, способных Используя цитрат в качестве источника углерода, фермент цитраза гидролизует цитрата в щавелевоуксусную кислоту и уксусную кислоту. щавелевоуксусная кислота затем кислота гидролизуется в пировиноградную кислоту и CO 2 . Если образуется CO 2 , он реагирует с компонентами среды с образованием щелочного соединения (т.грамм. Na 2 CO 3 ). Щелочной рН превращает индикатор рН (бромтимоловый синий) из зеленый к синему. Это положительный результат (трубка справа является цитрат-положительным). Klebsiella pneumoniae и Proteus mirabilis являются примерами цитрат-положительных организмов. Escherichia coli и Shigella dysenteria e являются цитратными отрицательный.

ВЕРХ



Агар Spirit Blue

Этот агар используется для идентификации организмов, способных продуцировать фермент липаза.Этот фермент секретируется и гидролизует триглицериды. до глицерина и трех жирных кислот с длинной цепью. Эти соединения достаточно малы, чтобы пройти через клеточную стенку бактерий. Глицерин может превращаться в промежуточный продукт гликолиза. Жирные кислоты могут быть катаболизируется, и их фрагменты могут в конечном итоге попасть в нервную систему Кребса. цикл. Спиртовой синий агар содержит эмульсию оливкового масла и спирта. синий краситель. Бактерии, вырабатывающие липазу, гидролизуют оливковое масло. и создают ореол вокруг бактериального роста.Грамположительные палочка Bacillus subtilis положительна по липазе (на фото справа) Чашка, изображенная слева, липазоотрицательна.

ВЕРХ



Испытание на гидролиз крахмала

Этот тест используется для выявления бактерий, способных гидролизовать крахмал (амилозу). и амилопектин) с помощью ферментов а-амилазы и олиго-1,6-глюкозидаза.Часто используется для дифференциации видов от роды Clostridium и Bacillus . Из-за большой размер молекул амилозы и амилопектина, эти микроорганизмы могут не проходят через клеточную стенку бактерий. Для использования этих крахмалов в качестве источника углерода бактерии должны выделять а-амилазу и олиго-1,6-глюкозидазы во внеклеточное пространство. Эти ферменты расщепить молекулы крахмала на более мелкие субъединицы глюкозы, которые могут затем вступают непосредственно в гликолитический путь.Чтобы интерпретировать по результатам теста гидролиза крахмала необходимо добавить йод в агар. Йод вступает в реакцию с крахмалом, образуя темно-коричневый цвет. Таким образом, гидролиз крахмала создаст прозрачную зону вокруг рост бактерий. Bacillus subtilis положительный на крахмал гидролиз (на фото внизу слева). Организм, изображенный на справа – отрицательно для гидролиза крахмала.

ВЕРХ


Метил Красный / Voges-Proskauer (MR/VP)

Этот тест используется для определения используемого пути ферментации. использовать глюкозу.При смешанном кислотном брожении глюкоза ферментируется и образует несколько органических кислот (молочную, уксусную, янтарная и муравьиная кислоты). Стабильное производство достаточного количества кислоты преодоление фосфатного буфера приведет к pH ниже 4.4. Если к аликвоте культуральный бульон и рН ниже 4,4, появится красный цвет (первое фото, трубка слева). Если MR становится желтым, рН выше 6.0, а путь смешанного кислотного брожения не имеет был использован (первое изображение, трубка справа). 2,3-бутандиол Путь ферментации будет ферментировать глюкозу и производить 2,3-бутандиол. конечный продукт вместо органических кислот. Чтобы проверить этот путь, аликвоту культуры MR/VP удаляют и а-нафтол и КОН. Их энергично встряхивают и устанавливают в сторону в течение примерно одного часа, пока результаты не могут быть прочитаны.Фогес-Проскауэр Тест обнаруживает присутствие ацетоина, предшественника 2,3-бутандиола. Если культура положительна на ацетоин, она станет «коричневато-красной». до розового» (трубка слева на втором рисунке). Если культура на ацетоин отрицательна, она станет «коричневато-зеленой». до желтого» (трубка слева на втором рисунке). Примечание: Культура обычно будет положительной только для одного пути : либо MR+, либо VP+. Escherichia coli представляет собой MR+ и VP-. В напротив, Enterobacter aerogenes и Klebsiella pneumoniae являются MR- и VP+. Pseudomonas aeruginosa представляет собой глюкозу неферментер и, таким образом, является MR- и VP-.

ВЕРХ


Тест CAMP

Фактор CAMP представляет собой диффундирующий, термостабильный белок, продуцируемый стрептококки группы В.Это синергический тест между Staphylococcus aureus и Streptococcus agalactiae . S. agalactiae продуцирует фактор CAMP. S. aureus продуцирует сфингомиелин C, который связывается с мембранами эритроцитов. Две бактерии прочерчены под углом 90 90 218 o 90 219 друг к другу. Они делают Не трогать. Фактор САМР, продуцируемый S. agalactiae , усиливает бета-гемолиз S.aureus путем привязки к уже поврежденные эритроциты. В результате стрела бета-гемолиза производится между двумя полосами. Тест предположительно для S. agalactiae , который производит фактор CAMP.

На этой картинке Streptococcus agalactiae был прожилками по всей верхней части пластины и принес вниз к центру пластины. Staphylococcus aureus наносили штрихом по центру чашки.Кольца гемолиза видны вокруг S. aureus , однако гемолиз значительно усиливается (в форме стрелки) где S. agalactiae пересекает кольца гемолиза.

ВЕРХ


Уреаза тест

Этот тест используется для выявления бактерий, способных к гидролизу мочевины с помощью фермента уреазы.Обычно используется для различения род Proteus от других кишечных бактерий. Гидролиз мочевины образует слабое основание, аммиак, как один из его продуктов. Это слабое основание повышает рН среды выше 8,4, а рН индикатор, феноловый красный, меняет цвет с желтого на розовый. Proteus mirabilis представляет собой быстрый гидролизер мочевины (здесь изображена центральная трубка). пробирка справа была засеяна уреазоотрицательным организмом и крайняя левая пробирка была незасеянной.

ВЕРХ


Подвижный агар

это дифференциал среда, используемая для определения того, оснащен ли организм жгутиками и, таким образом, способны уплыть от укола. Результаты подвижного агара часто трудно интерпретировать. Как правило, если вся пробирка мутная, это указывает на то, что бактерии отошли от места укола (подвижны).Организмы в двух пробирках, изображенных справа, подвижны. Если, однако, след от укола хорошо виден, а остальная часть пробирка не мутная, организм, вероятно, неподвижен (пробирка на фото слева).

Агар МакКонки | Принцип | Подготовка

Ⅰ. Обзор

Агар МакКонки — это твердый селективный и дифференциальный агар , который культивирует только виды грамотрицательных бактерий, он может дополнительно дифференцировать грамотрицательные организмы на основе их метаболизма лактозы:

  • Ферментеры лактозы, колонии, окрашивающиеся в красный или розовый цвет на агаре МакКонки
  • Неферментирующие вещества не меняют цвет.

Скорость роста, скорость ферментации лактозы и наличие или отсутствие капсулы также являются способами дальнейшей дифференциации микроорганизмов в агаре Макконки .

Среда макконки разработана Альфредом Теодором Макконки в 1900 году.

Агар Макконки


Ⅱ. Препарат / Состав

Суспендируйте компоненты, обезвоженный порошок, в воде (49.53 грамма на 1000 мл очищенной/дистиллированной воды). Среду кипятят в течение нескольких секунд до полного растворения ингредиентов. Стерилизовать в автоклаве при 15 фунтах (121°C) под давлением в течение 15 минут.

Охладить до 47°С, хорошо перемешать перед разливом в стерильные чашки Петри.

Состав агара МакКонки
Ингредиенты грамм/литр Ингредиенты грамм/литр
Пептон (панкреатическое переваривание желатина) 17 г Нейтральный красный 30 мг
Протеозопептон (мясной и казеиновый) 3g Кристаллический фиолетовый 1 мг
Моногидрат лактозы 10 г Агар 13.5 г
Соли желчных кислот 1,5 г Дистиллированная вода 1 литр
Хлорид натрия 5 г Конечный рН 7,1 +/- 0,2

Агар МакКонки обезвоженный

◈ Лактоза в среде может быть заменена другими сахарами: MacConkey с сорбитом .

◈ Вариант агара МакКонки без кристаллического фиолетового и соли можно использовать для ограничения роения Proteus spp.



Ⅲ. Принцип и интерпретация агара МакКонки

Агар МакКонки — это селективная и дифференциальная среда, используемая для выделения и дифференциации неприхотливых грамотрицательных бацилл , в частности, представители семейства Enterobacteriaceae и рода Pseudomonas .

◈ Селективность : Краситель кристаллический фиолетовый и соли желчных кислот останавливают рост грамположительных бактерий. Это позволяет только грамотрицательным видам, имеющим относительно устойчивую к желчи наружную мембрану, образовывать колонии на агаре МакКонки.

◈ Дифференциация : Грамотрицательные бактерии, растущие на чашке MacConkey, отличаются своей способностью ферментировать лактозу.

  • Бактерии, ферментирующие лактозу, снижают рН среды, это снижение определяется нейтральным красным цветом (становятся красными, если рН ниже 6,8). Когда pH падает, нейтральный красный цвет поглощается бактериями, которые появляются на агаре в виде колоний от ярко-розового до красного цвета: Escherichia coli, Enterobacteria, Klebsiella
  • Грамотрицательные бактерии, которые размножаются на агаре МакКонки, но не ферментируют лактозу, кажутся бесцветными на среде, а агар, окружающий бактерии, остается относительно прозрачным: Salmonella, Proteus, Yersinia, Pseudomonas

Чашка с агаром МакКонки: ферментация лактозы (A) и неферментация лактозы (B)

Чашка с агаром МакКонки: колонии клебсиелл часто слизистые, большие (4–6 мм) и от темных до бледно-розовых (@lab.вяз)

Колонии Escherichia coli на агаровой палитре МакКонки имеют цвет от розового до темно-розового, сухие и имеют форму пончика, окруженные темно-розовой областью осажденных солей желчных кислот.

Примечание :

⚡ Грамположительные бактерии не образуют колоний на среде МакКонки (за некоторыми исключениями).

⚡ Бактерии с сильным брожением лактозы производят достаточное количество кислоты для осаждения солей желчных кислот, что приводит к появлению розового ореола в среде, окружающей отдельные колонии или участки сливающегося роста.

⚡ Слабые ферментаторы лактозы будут образовывать колонии медленнее, чем другие. Пример: Serratia, Citrobacter

⚡ Медленно ферментирующие лактозу могут появляться в виде бесцветных колоний. Пример: Enterobacter (Подробнее)

⚡ Инкапсулированные бактерии производят капсулы с использованием лактозы. Это приводит к липким, влажным видам колоний. Пример: Klebsiella, Enterobacter


Слизистый штамм Klebsiella на агаре МакКонки(@microbiology-cluj)

Enterobacter spp., Слева часто поздно ферментируют лактозу, поэтому колонии могут быть бесцветными или светло-розовыми.(1)


Ⅳ. Варианты агара Макконки

1- MacConkey with Sorbitol (сорбитолсодержащий агар MacConkey (SMAC))

– В этой среде используется D-сорбит, а не лактоза, для выделения и дифференциации энтеропатогенных серотипов E. coli, которые имеют тенденцию быть отрицательными к сорбиту.

– Э.coli O157: H7 (EHEC) является сорбитол-отрицательным, и колонии кажутся бесцветными, в то время как другие штаммы E. coli ферментируют сорбит и появляются в виде розовых колоний со 100% чувствительностью и 85% специфичностью.

MacConkey с сорбитом: слева E. coli O157: H7 сорбит отрицательный (источник: Color Atlas of Medical Bacteriology 4ed)

2- MacConkey без кристаллического фиолетового и соли

Хлорид натрия удаляют из среды, чтобы создать среду с дефицитом электролитов, предотвращающую распространение Proteus spp.Кроме того, эта среда не содержит кристаллического фиолетового, что способствует росту Staphylococcus, Enterococcus и Mycobacterium spp.


Ⅴ. Часто задаваемые вопросы

Q : Почему агар МакКонки используется для посева мочи?
A : Агар Макконки позволяет выделить и дифференцировать непосредственно из образца мочи грамотрицательные палочки , которые включают большинство бактерий, вызывающих инфекции мочевыводящих путей

Q : Растет ли сальмонелла на MacConkey?
A : Да, сальмонелла может расти на MacConkey , сальмонелла не усваивает лактозу (бесцветные колонии).

Q : Как проявляется кишечная палочка на агаре МакКонки?
A : кишечная палочка путем ферментации лактозы снижает рН и меняет цвет с розового на темно-розовый

Q : Шигелла растет на MacConkey?
A : Да, Shigella может расти на MacConkey , Shigella не использует лактозу (бесцветные колонии).

Q : MacConkey селективный или дифференциальный?
A : Агар МакКонки селективный и дифференциальный

Q : Что делает агар МакКонки селективным??
A : Краситель кристаллический фиолетовый и соли желчных кислот останавливают рост грамположительных бактерий.

Ward’s® Live Escherichia coli, лактозоотрицательная культура

Бореальная наука здесь, чтобы помочь вам

Мы упростили размещение заказа на Boreal Science, предоставив всю необходимую информацию ниже.

Условия продажи продукта

Все заказы регулируются Условиями продажи продуктов, доступными здесь.Размещая заказ, вы подтверждаете, что прочитали и согласны с Условиями продажи продукта.

Условия доставки

Все заказы будут нести сборы за доставку и обработку, добавленные к общей стоимости заказа. Стоимость доставки может варьироваться в зависимости от характера продукта, общего веса, пункта назначения, даты доставки и способа доставки. Заказы будут отправлены курьерской службой UPS по текущим опубликованным тарифам. Стоимость доставки рассчитывается на момент онлайн-заказа.Заказы, которые необходимо отправить автомобильным транспортом, могут повлечь за собой дополнительную плату за доставку. Все заказы стоимостью 24,99 долларов США или меньше (до вычета налогов) облагаются дополнительным сбором за обработку в размере 7 долларов США. Наши условия доставки указаны на условиях FOB, если не указано иное. Для получения дополнительной информации о конкретных условиях доставки для вашей учетной записи обратитесь к менеджеру по работе с клиентами Boreal Science. Посетите сайт boreal.com/repfinder, чтобы найти представителя в вашем регионе.

Стоимость перевозки химических и опасных грузов

Материалы, классифицированные Министерством транспорта Канады как опасные.могут включать, но не ограничиваться этим, химические вещества, микробиологические образцы или наборы для занятий, содержащие эти материалы. Если ваш заказ содержит предмет, классифицированный Transport Canada как опасный, за каждую отправку будет взиматься плата в размере не менее 17,50 долларов США. Заказы на химикаты и опасные материалы будут приниматься только от образовательных и научно-исследовательских учреждений; мы не отправляем химические вещества частным лицам. Опасные грузы необходимо перевозить наземным транспортом. Отдельные химикаты теперь доступны в упаковках Poison Pack, чтобы исключить опасные транспортные расходы и ускорить доставку.Раньше эти химические вещества доставлялись в течение 7-14 дней, и к общей сумме заказа добавлялась плата за опасную доставку. Теперь добавленные Poison Packs устраняют опасные сборы за доставку и позволяют доставлять ваши химикаты через UPS в течение 5-7 рабочих дней. Список химикатов, в состав которых входят ядовитые пакеты, можно найти на сайте boreal.com/chemicalship.

Доставка живых материалов и гарантия

Все микрокультуры жизни будут доставлены вам в течение двух рабочих дней, если заказ размещен до 12:00 по восточному стандартному времени.Ваши образцы или культуры будут доставлены в хорошем состоянии, или мы вышлем бесплатную замену. Запрос даты доставки в среду, четверг или пятницу гарантирует здоровую доставку ваших живых образцов. Прямые трансляции не будут доставляться по понедельникам. При доставке во вторник может взиматься дополнительная плата за доставку. Свяжитесь со службой поддержки клиентов Boreal Science (800-387-9393), чтобы договориться о доставке живых материалов во вторник. Чтобы получить купон на живые материалы, посетите сайт boreal.com/livematerials. В случае неблагоприятных погодных условий мы можем задержать или отменить доставку, если она не будет доставлена ​​в целости и сохранности.Посетите нашу домашнюю страницу для получения последних обновлений, если вы подозреваете, что погода может быть проблемой в вашем регионе. Если ваша школа закрыта из-за погодных условий, позвоните в службу поддержки клиентов, чтобы сообщить нам об этом, и мы придержим ваш образец и перенесем его в удобное для вас время.

Бактерии и патогены

Отправка патогенов и бактериальных культур в общеобразовательные учреждения и частным лицам запрещена Федеральной службой здравоохранения. Провинциальные или местные власти могут потребовать разрешения, прежде чем мы сможем отправить вам патогены.Колледжам и университетам разрешается заказывать патогены и бактериальные культуры только через институциональный заказ на поставку.

Представление продукта

Мы прилагаем все усилия, чтобы обеспечить точность изображений, описаний и цен наших продуктов перед публикацией. Однако из-за случайных изменений, вносимых поставщиками после даты публикации, физический вид предметов может измениться или отличаться по цвету от того, что показано в каталоге.Мы гарантируем, что товары, которые вы получите, будут соответствовать всем спецификациям и требованиям продукта. Цены в каталоге и наличие товара могут быть изменены. В случае типографской ошибки в цене мы не обязаны учитывать опечатку. Пожалуйста, проверьте наш веб-сайт для получения последних обновлений изображений продуктов, описаний, доступности и цен.

Ваши любимые товары всегда в наличии

Тысячи наших самых продаваемых продуктов всегда есть на складе и готовы, когда они вам понадобятся, поэтому вам не нужно ждать товары, которые вы используете чаще всего.Товары отправляются в течение 48 часов с момента заказа, если заказ получен в электронном виде или по телефону до 13:00 по восточному поясному времени. Обещание наличия на складе и доставка в течение 48 часов не включают опасные химические вещества и исключительные объемы заказа, которые будут доступны во время выполнения заказа. Доступность может быть изменена в случае стихийного бедствия или сил природы, влияющих на поиск, отгрузку, транспортировку или наличие живых материалов, необходимых для производства товарных товаров. Boreal Science свяжется с клиентом напрямую, чтобы сообщить о возникновении такого события и предоставить альтернативные материалы, когда они будут доступны.Текущие запасы и доступность для всех продуктов доступны онлайн на каждой странице продукта.

Рекламные исключения

Если не указано иное, любой товар, цена которого оканчивается на «9» (т. е. 5,09 долл. США, 14,99 долл. США, 100,89 долл. США), исключается из специальных предложений, скидок и рекламных акций. Рекламные скидки не могут сочетаться с какими-либо другими предложениями, скидками или акциями. Предложения о бесплатной доставке включают только стандартную наземную доставку.

Кредит и выставление счетов

Кредит распространяется на все учебные заведения.Срок составляет 30 дней с даты выставления счета. Персональные заказы учителей всегда приветствуются. Для получения дополнительной информации напишите [email protected].

Налог с продаж

Налог с продаж будет включен в ваш счет. Если вы освобождены от налога с продаж, пожалуйста, предоставьте соответствующие документы при размещении заказа.

100% гарантия возврата

Мы принимаем возврат товара по любой причине в течение 60 дней с момента покупки.Возвращаемые товары должны быть неиспользованными и в оригинальной упаковке. Чтобы вернуть

товара для возврата, замены или кредита, отправьте электронное письмо [email protected] или позвоните по телефону 800-387-9393, чтобы получить номер разрешения на возврат и дальнейшие инструкции по возврату. Пожалуйста, подготовьте номер вашего заказа, чтобы мы могли лучше помочь вам. В некоторых случаях может взиматься плата за пополнение запасов. Товары, возвращенные без предварительного разрешения, не могут быть приняты или зачислены. Товары, находящиеся на гарантии, будут отремонтированы или заменены по нашему усмотрению.Чтобы обеспечить максимально быстрый возврат или замену, мы рекомендуем вам проверять все посылки сразу по прибытии, чтобы убедиться, что вы удовлетворены. Может потребоваться проверка перевозчика.

Факты о Законопроекте 65 штата Калифорния
Boreal Science стремится к вашей безопасности и соблюдению Калифорнийского закона о безопасности питьевой воды и контроле над токсичными веществами от 1986 года. По состоянию на 30 августа 2018 года требования к отчетности этого закона, более известного как Предложение 65, изменились.Эти изменения требуют от розничных продавцов, ведущих бизнес в штате Калифорния, предоставлять более надежную и подробную маркировку на товарах, содержащих определенные химические вещества, известные в штате Калифорния
как опасные. В ответ на это мы добавили новые этикетки, подобные показанной ниже, ко многим упаковкам наших продуктов и описаниям каталогов. Теперь вы можете увидеть эти этикетки на некоторых продуктах
и упаковке, даже если вы не проживаете в штате Калифорния. Безопасность и состав наших продуктов не изменились.Наша продукция по-прежнему соответствует самым высоким стандартам безопасности для вашего класса. Для получения дополнительной информации о Законопроекте 65 штата Калифорния и о том, как он влияет на вас, посетите сайт www.boreal.com/prop65.

Таблица 1 | Бактериологический профиль и характеристики чувствительности к противомикробным препаратам бактерий, выделенных из образцов гноя/мазков из раны детей, посещающих больницу третичного уровня в Катманду, Непал , положительная реакция на коагулазу в предметных стеклах и пробирках, положительная реакция на гидролиз желатина, положительная реакция на бета-гемолиз в кровяном агаре, положительная проба с метиловым красным и реакция Фогеса-Проскауэра, положительная реакция на восстановление нитратов


2 E.coli
1 P.Mirabilis
S.aureus

Грамположительные кокки, каталазоотрицательные, бета-гемолиз в кровяном агаре, чувствительные к бацитрацину, желчно-эскулиновый тест отрицательный, L-пирролидонил- β-P-9001амид S. pyogenes

Грамотрицательные палочки, оксидазоположительные, каталазоположительные, зеленовато-желтые колонии на питательном агаре, цитратоположительные, подвижные, индолотрицательные, лактоотрицательные, лактоотрицательные сульфид отрицательный, газ отрицательный P.aeruginosa

Грамотрицательные палочки, каталазоположительные, оксидазоотрицательные, мукоидные колонии, неподвижные, уреазоположительные, цитратоположительные, индолотрицательные, ферментирующие лактозу, газоположительные, сероводородные
1 pneumoniae

Грамотрицательные палочки, каталазоположительные, оксидазоотрицательные, подвижные, уреазоотрицательные, цитратотрицательные, индолположительные, лактозоферментирующие, газоположительные, сероводородотрицательные

Грамотрицательные палочки, каталазоположительные, оксидазоотрицательные, цитратположительные, лактозоотрицательные, индолотрицательные, неподвижные, газоотрицательные, сероводородотрицательные

Грамотрицательные палочки, оксидазоотрицательные, каталазоположительные, ферментирующие лактозу, индолотрицательные, подвижные, дифференциально-уреазоположительные, сероводородоположительные, газоположительные, цитратположительные C.freundii

Грамотрицательные палочки, оксидазоотрицательные, каталазоположительные, лактозо-неферментирующие, индолположительные, подвижные, уреазодифференциальные, сероводородотрицательные, газоположительные, цитратположительные222

Грамотрицательные палочки, оксидазоотрицательные, каталазоположительные, лактозонеферментирующие, индолотрицательные, подвижные, уреазоположительные, сероводородположительные, газоположительные, цитратположительные


Изменчивость лактозы Escherichia Coli в термически напряженных реакторных водах воды

dccontributor.author Kasweck, К. Л.
dc.contributor.author Флиерманс, Карл Б.
dc.date.accessioned 2018-05-04T21:34:39Z
dc.дата.доступно 2018-05-04T21:34:39Z
постоянный ток.дата выпуска 1978
dc.identifier.citation Kasweck, K.L., Fliermans, C.B. Изменчивость лактозы Escherichia coli в термически напряженных сточных водах реактора (1978) Applied and Environmental Microbiology, 36 (5), pp. 739-746. Цитируется 4 раза. en_US
dc.identifier.uri http://hdl.handle.net/11141/2448
dc.описание охлаждающая вода, лактосен, алидиксовая кислота en_US
постоянный ток.description.abstract Лактозоутилизирующие и устойчивые к налидиксовой кислоте популяции Escherichia coli, имеющие оптимальную температуру роста 37°С, помещали в модифицированные диффузионные камеры. Камеры были погружены в эпилимнион и гиполимнион озера площадью 1100 гектаров (пруд Пар), куда поступает охлаждающая вода из ядерного производственного реактора. Контрольные камеры были размещены в глубоководном резервуаре и в лаборатории Flowing-Streams, обе из которых имели температуру, сравнимую с прудом Par.Популяции E. coli регулярно отбирали на срок до 3 недель. Жизнеспособность бактерий определяли путем посева на питательный агар с последующим повторным посевом на селективную среду для определения использования лактозы и чувствительности к налидиксовой кислоте. Первоначальные популяции E. coli были лактозоположительными, но изменились на лактозоотрицательные в пруду Пар, когда работал реактор (т. е. охлаждающая вода из теплообменников сбрасывалась в озеро). Наиболее быстро это изменение происходило в камерах, ближайших к месту сброса охлаждающей воды.Таких изменений не произошло ни в глубоководном водоеме, ни в пруду Пар при неработающем реакторе, ни в Лаборатории струящихся ручьев. Характеристики устойчивости к налидиксовой кислоте оставались стабильными независимо от размещения камер или работы реактора. Хотя причины таких изменений неясны, похоже, что лактозоотрицательные популяции E. coli отбираются для этих сточных вод реактора. Потеря характеристики лактозы препятствует распознаванию и идентификации E.coli в этом охлаждающем озере (при работающем реакторе) и может помешать оценке качества воды на основе распознавания кишечной палочки. en_US
dc.language.iso en_US en_US
dc.rights © 1978 АВТОРСКИЕ ПРАВА Американского общества микробиологии en_US
dc.rights.uri http://aem.asm.org/site/misc/journal-ita_edi.xhtml#06 en_US
постоянный ток.title Изменчивость лактозы Escherichia coli в термически напряженных сточных водах реактора en_US
Тип постоянного тока Артикул en_US

Конспект лекций по TSI, IMViC, селективным и дифференциальным средам, Enterobacteriacea, MIO, LIA, оксидазе

Конспект лекций по TSI, IMViC, селективным и дифференциальным средам Среда, Enterobacteriacea, MIO, LIA, тест на оксидазу


КИШЕЧНЫЕ БАКТЕРИИ

Многие кишечные бактерии относятся к трибе Enterobacteriaceae .Это грамотрицательные палочки, способные ферментировать глюкозу.

Enterobacteriacieae, которые также способны ферментировать лактозу, включают называется кишечной палочкой . Колиформы обычно считаются условно-патогенными. патогенными и непатогенными микроорганизмами, однако есть много случаев тяжелых, опасные для жизни инфекции, вызванные колиформами. Колиформы очень важны как ПОКАЗАТЕЛИ ФЕКАЛЬНОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ. Некоторые распространенные колиформы:

  • Эшерихия кишечная палочка
  • Клебсиелла pneumoniae
  • Enterobacter аэрогены
В последнее время появился ряд патогенных штаммов E . coli были признан. Ряд неколиформных энтеробактерий являются важными патогенами. С эти неколиформные бактерии являются ОТРИЦАТЕЛЬНЫМИ НА ЛАКТОЗУ, тесты на ферментацию лактозы важно при попытке их идентифицировать.
  • Salmonella typhi вызывает брюшной тиф, тяжелое системное инфекция, которая начинается через несколько недель после проглатывания организмов. заболевание характеризуется высокой температурой, головной болью, сыпью на животе (розовые пятна), запор и/или диарея и микроорганизмы в стуле, кровь и моча.
  • Другие Salmonellae вызывают менее тяжелый гастроэнтерит, обычно называемый Сальмонеллезное «пищевое отравление», хотя более точно его можно назвать «пищевым отравлением». инфекция.”
  • Shigella dysentariae вызывает бациллярную дизентерию. В этом заболевание, отходит частый кровянистый, слизистый водянистый стул. Организм проникает и убивает кишечный эпителий. Это приводит к тому, что белые клетки накапливаются, и их можно увидеть в стуле при микроскопическом исследовании.
  • Yersinia enterocolitica вызывает диарейное заболевание сходное к Шигелла . Этот организм часто ассоциируется со свиньями и поэтому недоваренная свинина связана с инфекциями.
  • Другие лактозоотрицательные энтеробактерии, не классифицируемые как патогены включают Proteus sp. и Serratia marcescens .

Существует ряд неэнтеробактерий, важных для кишечника. патогены.

  • Vibrio cholerae вызывает холеру.
  • Vibrio parahemolyticus – морской организм, который часто загрязняет морепродукты. Вызывает острую диарею в течение 24-48 часов. после употребления в пищу сырых или недоваренных моллюсков и реже, рыбы.
  • Частично приготовленная птица может быть источником Campylobacter jejuni . Этот микроорганизм может вызывать диарею, часто с кровью и гноем, от 1 до 7 дней. после заражения.
  • Helicobacter pylori , микроорганизм, предположительно связанный с только у людей, в настоящее время известно, что является причиной язвы желудка

ЛАБОРАТОРНЫЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ КИШЕЧНЫХ БАКТЕРИЙ

Для выделения фекальных организмов используется ряд методов селективного выделения.

БУЛЬОН СЕЛЕНИТА используется в основном для обогащения Salmonella и в некоторой степени Shigella . Этот отвар называется обогащением бульон, потому что он подавляет рост большинства кишечных организмов, в то время как позволяя возбудителям размножаться, тем самым увеличивая шансы обнаружение возбудителей.

Материалы для покрытия, такие как:

  • Агар Salmonella-Shigella (SS),
  • Агар с эозином и метиленовым синим (EMB)
  • Агар МакКонки (MAC)
    содержат различные красители и соли желчных кислот, обеспечивающие селективный рост Грамотрицательные кишечные микроорганизмы.Эти среды также содержат сахара (такие как лактоза) и индикаторы pH, позволяющие различать различных организмов в зависимости от их метаболических способностей. Следовательно, ферментеры лактозы будет казаться отличным от других организмов, которые не могут ферментировать лактоза.

    • На EMB лактозные (+) микроорганизмы выглядят пурпурно-красными, иногда с металлическим оттенком. зеленый блеск. Лактозные (-) микроорганизмы кажутся светлоокрашенными и прозрачными.
    • На MAC лактозные (+) микроорганизмы имеют цвет от пурпурно-красного до кирпично-красного, часто с зона осадка вокруг колоний.Лактозные (-) микроорганизмы могут быть от светло-розового до белого, и они часто прозрачны.
    • Агар SS обладает высокой селективностью в отношении сальмонелл и шигелл, и эти формы бесцветные колонии, часто с черным центром, указывающим на продукцию h3S. Большинство других организмов не растут на этой среде. Если они это сделают, они будут бело-розовый.

Агар с ТРОЙНЫМ САХАРОМ-ЖЕЛЕЗОМ (TSI) используется для идентификации биохимических из семейства энтеробактерий. Эта среда содержит три сахара и индикатор pH:
  • 0.1% глюкоза
  • 1% лактозы
  • 1% сахароза
  • феноловый красный
  • Организм, способный ферментировать только глюкозу и ни один другой два сахара образуют очень небольшое количество кислоты (почему?).

    В то время как ферментеры лактозы и/или сахарозы будут образовывать относительно большие количества кислоты.

    Возможны три интерпретации реакции сахара на этот агар.:

    • Щелочной/щелочной (красный/красный) = без ферментированного сахара
    • Щелочная/кислотная (красный/желтый) = только ферментированная глюкоза
    • Кислота/кислота (желтый/желтый) = произошла ферментация лактозы и/или сахарозы кроме ферментации глюкозы.

    Обратите внимание, что кислотно-щелочная реакция невозможна. (Почему?)

Эта среда также содержит соли железа, которые реагируют с любым H 2 S вырабатывается растущим организмом с образованием черного осадка.

ИМВиК ИСПЫТАНИЯ

Тест INDOLE измеряет способность микроорганизма разлагаться триптофана на индол, аммиак и пировиноградную кислоту:


Тест METHYL RED – VOGUES PROSKAUER измеряет типы продуктов образуется при ферментации глюкозы.

  • Тест MR определяет, являются ли кислые продукты, такие как молочная и муравьиная кислоты, формируются.
  • Тест VP определяет, являются ли нейтральные продукты, такие как этиловый спирт, ацетоин, и бутандиол образуются.
  • МР-тест
  • использует метиловый красный в качестве индикатора pH, который становится красным при кислом pH, следовательно, красным является положительным тестом MR.
  • Ацетоин реагирует с альфа-нафтолом в щелочной среде с образованием розового или красный продукт, для образования которого требуется несколько минут.

Тест ЦИТРАТ определяет, способен ли организм использовать цитрат как единственный источник углерода и энергии. Такие организмы производят щелочные конечные продукты в присутствии кислорода, и их можно измерить с индикатором рН.Бромтимоловый синий имеет зеленый цвет при нейтральном рН и синий при щелочной pH, поэтому синий цвет представляет собой положительный тест.


ЖЕЛЕЗО-ЛИЗИН-АГАР

Этот носитель позволяет тестировать

  • (1) если организм может декарбоксилировать лизин;
  • (2) если организм может дезаминировать лизин; и
  • (3) если организм может производить H 2 S.
Возможные цветовые реакции после 24-48 часов инкубации:
  • Щелочной/щелочной (фиолетовый/фиолетовый) = положительная реакция на лизиндекарбоксилазу
  • Щелочной/кислотный (фиолетовый/желтый) = нерасщепленный лизин = отрицательный тест
  • Красный пигмент/кислота (красный/желтый) = положительная реакция на лизиндезаминазу
Если организм вырабатывает сероводород, выпадает черный осадок. быть видимым.H 2 Производство S в этом случае обычно не такое сильное. средний, как и с TSI.

ПОВОРОТНОСТЬ ИНДОЛ ОРНИТИН

Этот носитель позволяет

  • (1) определить, подвижен ли организм;
  • (2) посмотреть, может ли организм декарбоксилировать орнитин; и
  • (3) посмотреть, может ли организм расщеплять триптофан с образованием индола.
Туманный рост или рост, распространяющийся в сторону от линии инокуляции, указывает на подвижность.

Декарбоксилирование орнитина приводит к тому, что среда становится щелочной, поэтому:

  • пурпурный цвет по всей пробирке = положительный результат на орнитиндекарбоксилазу
  • желтый цвет внизу или по всей поверхности = отрицательный результат на орнитиндекарбоксилазу
Индольный тест можно провести на этой среде, капнув несколько капель реактива Ковача на верхнюю часть среды. Ярко-красный цвет является положительным для индола.

ОКИСЛИТЕЛЬНЫЙ ТЕСТ

Тест на оксидазу определит наличие в организме цитохрома c, один из белков-переносчиков электронов, обнаруженных в системе переноса электронов. цепь. (Хотя многие бактерии способны к дыханию и поэтому имеют цепь переноса электронов, не все бактерии имеют одинаковый цитохром белков в цепи. Например, кишечная палочка и другие энтеробактерии. не имеют цитохрома с, но вместо них имеют цитохром о и цитохром d.На с другой стороны, Pseudomonas aeruginosa, а также ряд других микроорганизмов. поскольку наши митохондрии используют цитохром с при аэробном дыхании.)

В тесте используется соединение под названием тетраметил-п-фенилендиамин, которое прозрачный в восстановленном (электронно-обогащенном) состоянии и фиолетовый в окисленном (электронно-бедное) состояние. В присутствии организма с цитохромом с восстановленный тетраметил-п-фенилендиамин будет отдавать свои электроны цитохрома с и окрашиваются в пурпурный цвет.

  1. Смочите небольшой кусочек бумажного полотенца white или фильтровальной бумаги реагент тетраметил-п-фенилендиамин
  2. Используйте деревянный аппликатор , чтобы взять рост из TSA или крови. агара, а затем нанесите его на смоченную бумагу.
  3. Немедленная пурпурная реакция положительная на оксидазу
©2008 Джон М. Берестецкий
Все права защищены

Конструирование штаммов Escherichia coli с хромосомно интегрированными экспрессионными кассетами для синтеза 2′-фукозиллактозы | Microbial Cell Factory

  • Живкович А.М., Герман Дж.Б., Лебрилла С.Б., Миллс Д.А.: Гликобиом грудного молока и его влияние на микробиоту желудочно-кишечного тракта младенцев.Proc Natl Acad Sci U S A. 2011, 108 (Приложение 1): 4653-4658.

    КАС Статья Google ученый

  • Ninonuevo MR, Park Y, Yin H, Zhang J, Ward RE, Clowers BH, German JB, Freeman SL, Killeen K, Grimm R, Lebrilla CB: Стратегия аннотирования гликома грудного молока. J Agric Food Chem. 2006, 54: 7471-7480. 10.1021/jf0615810.

    КАС Статья Google ученый

  • Kunz C, Rudloff S, Baier W, Klein N, Strobel S: Олигосахариды в грудном молоке: структурные, функциональные и метаболические аспекты.Анну Рев Нутр. 2000, 20: 699-722. 10.1146/аннурев.нутр.20.1.699.

    КАС Статья Google ученый

  • Тоттен С.М., Живкович А.М., Ву С., Нгьюен У, Фримен С.Л., Рухаак Л.Р., Дарбо М.К., Герман Дж.Б., Прентис А.М., Лебрилла К.Б.: Комплексные профили олигосахаридов грудного молока дают высокочувствительные и специфические маркеры для определения секреторного статуса у кормящих матерей. J Протеом Res. 2012, 11: 6124-6133.

    КАС Google ученый

  • Бланк D, Дотц В., Гейер Р., Кунц С. Олигосахариды грудного молока и группа крови по Льюису: профилирование индивидуальных высокопроизводительных проб для уточнения выводов функциональных исследований.Ад Нутр. 2012, 3: 440С-449С. 10.3945/ан.111.001446.

    КАС Статья Google ученый

  • Чатурведи П., Уоррен К.Д., Алтай М., Морроу А.Л., Руиз-Паласиос Г., Пикеринг Л.К., Ньюбург Д.С.: Фукозилированные олигосахариды грудного молока различаются у разных людей и в течение лактации. Гликобиология. 2001, 11: 365-372. 10.1093/гликоб/11.5.365.

    КАС Статья Google ученый

  • Kunz C, Rudloff S: Оздоровительные аспекты молочных олигосахаридов.Int Dairy J. 2006, 16: 1341-1346. 10.1016/j.idairyj.2006.06.020.

    КАС Статья Google ученый

  • Newburg DS, Ruiz-Palacios GM, Altaye M, Chaturvedi P, Meinzen-Derr J, Guerrero MDL, Morrow AL: Врожденная защита, обеспечиваемая фукозилированными олигосахаридами грудного молока, от диареи у детей, находящихся на грудном вскармливании. Гликобиология. 2004, 14: 253-263.

    КАС Статья Google ученый

  • Bode L: Последние достижения в области структуры, метаболизма и функции олигосахаридов грудного молока.Дж Нутр. 2006, 136: 2127-2130.

    КАС Google ученый

  • Yu ZT, Chen C, Kling DE, Liu B, McCoy JM, Merighi M, Heidtman MND: Основные фукозилированные олигосахариды грудного молока проявляют пребиотические свойства в отношении культивируемой микробиоты младенцев. Гликобиология. 2012, 23: 169-177.

    Артикул Google ученый

  • Морроу А.Л., Руис-Паласиос Г.М., Алтай М., Цзян X, Герреро М.Д.Л., Мейнцер-Дерр Дж.К., Фаркас Т., Чатурведи П., Пикеринг Л.К., Ньюбург Д.С.: Олигосахариды грудного молока связаны с защитой от диареи у грудных детей. кормили младенцев.J Педиатр. 2004, 145: 297-303. 10.1016/j.jpeds.2004.04.054.

    КАС Статья Google ученый

  • Андерсон А., Дональд А.С.: Усовершенствованный метод выделения фукозиллактозы 2 из грудного молока. J Хроматогр. 1981, 211: 170-174. 10.1016/S0021-9673(00)81188-7

    КАС Статья Google ученый

  • Фернандес-Майоралас А., Мартин-Ломас М.: Синтез 3- и 2 -фукозил-лактозы и 3, 2 -дифукозил-лактозы из частично бензилированных производных лактозы.Карбогид Рез. 1986, 154: 93-101. 10.1016/С0008-6215(00)

    -9.

    КАС Статья Google ученый

  • Albermann C, Piepersberg W, Wehmeier UF: Синтез молочного олигосахарида 2 -фукозиллактозы с использованием рекомбинантных бактериальных ферментов. Карбогид Рез. 2001, 334: 97-103. 10.1016/S0008-6215(01)00177-Х.

    КАС Статья Google ученый

  • Wang G, Boulton PG, Chan NWC, Palcic MM, Taylor DE: Novel Helicobacter pylori альфа1,2-фукозилтрансфераза, ключевой фермент в синтезе антигенов Льюиса.Микробиология. 1999, 145: 3245-3253.

    КАС Статья Google ученый

  • Li M, Liu X-W, Shao J, Shen J, Jia Q, Yi W, Song JK, Woodward R, Chow CS, Wang PG: Характеристика новой альфа-1,2-фукозилтрансферазы Escherichia coli O128: B12 и функциональное исследование его общего мотива. Биохимия. 2008, 47: 378-387. 10.1021/би701345в.

    КАС Статья Google ученый

  • Coyne MJ, Reinap B, Lee MM, Comstock LE: Человеческие симбионты используют путь, подобный хозяину, для поверхностного фукозилирования.Наука. 2005, 307: 1778-1781. 10.1126/науч.1106469.

    КАС Статья Google ученый

  • Yi W, Liu X, Li Y, Li J, Xia C, Zhou G, Zhang W, Zhao W, Chen X, Wang PG: Ремоделирование бактериальных полисахаридов путем инженерии метаболических путей. Proc Natl Acad Sci USA. 2009, 106: 4207-4212. 10.1073/пнас.0812432106.

    КАС Статья Google ученый

  • Андрианопулос К., Ван Л., Ривз П.Р.: Идентификация гена фукозосинтетазы в кластере генов колановой кислоты Escherichia coli K-12.J Бактериол. 1998, 180: 998-1001.

    КАС Google ученый

  • Albermann C, Distler J, Piepersberg W: Препаративный синтез GDP-бета-L-фукозы рекомбинантными ферментами из энтеробактериальных источников. Гликобиология. 2000, 10: 875-881. 10.1093/гликоб/10.9.875.

    КАС Статья Google ученый

  • Mattila P, Räbinä J, Hortling S, Helin J, Renkonen R: Функциональная экспрессия ферментов Escherichia coli , синтезирующих GDP-L-фукозу из присущей GDP-D-маннозы в Saccharomyces cerevisiae .Гликобиология. 2000, 10: 1041-1047. 10.1093/гликоб/10.10.1041.

    КАС Статья Google ученый

  • Byun SG, Kim MD, Lee WH, Lee KJ, Han NS, Seo JH: Производство GDP-L-фукозы, донора L-фукозы для синтеза фукозилоолигосахаридов, в рекомбинантном Escherichia coli . Приложение Microbiol Biotechnol. 2007, 74: 768-775. 10.1007/s00253-006-0730-х.

    КАС Статья Google ученый

  • Koizumi S, Endo T, Tabata K, Nagano H, Ohnishi J, Ozaki A: Крупномасштабное производство GDP-фукозы и Lewis X путем бактериального связывания.J Ind Microbiol Biotechnol. 2000, 25: 213-217. 10.1038/sj.jim.7000055.

    КАС Статья Google ученый

  • Dumon C, Bosso C, Utille JP, Heyraud A, Samain E: Производство тетрасахаридов Lewis x путем метаболической инженерии Escherichia coli . Химбиохим. 2006, 7: 359-365. 10.1002/cbic.200500293.

    КАС Статья Google ученый

  • Lee WH, Pathanibul P, Quarterman J, Jo JH, Han NS, Miller MJ, Jin YS, Seo JH: Цельноклеточный биосинтез функционального олигосахарида, 2 -фукозиллактоза, с использованием сконструированной Escherichia coli .Факт микробной клетки. 2012, 11: 48-10.1186/1475-2859-11-48.

    КАС Статья Google ученый

  • Dumon C, Priem B, Martin SL, Heyraud A, Bosso C, Samain E: In vivo фукозилирование лакто-N-неотетраозы и лакто-N-неогексаозы путем гетерологичной экспрессии Helicobacter pylori альфа-1 , 3-фукозилтрансфераза в сконструированной Escherichia coli . Glycoconj J. 2001, 18: 465-474. 10.1023/А:1016086118274.

    КАС Статья Google ученый

  • Friehs K: Число копий плазмиды и стабильность плазмиды. Adv Biochem Eng Biotechnol. 2004, 86: 47-82.

    КАС Google ученый

  • Джонс К.Л., Ким С.В., Кизлинг Д.Д.: Малокопийные плазмиды могут работать так же или даже лучше, чем высококопийные плазмиды, для метаболической инженерии бактерий. Метаб Инж. 2000, 2: 328-338. 10.1006/мбэн.2000.0161.

    КАС Статья Google ученый

  • Martinez-Morales F, Borges AC, Martinez A, Shanmugam KT, Ingram LO: Хромосомная интеграция гетерологичной ДНК в Escherichia coli с точным удалением маркеров и репликонов, используемых во время конструирования. J Бактериол. 1999, 181: 7143-7148.

    КАС Google ученый

  • Chiang CJ, Chen PT, Chao YP: Безрепликонные и безмаркерные методы геномной вставки ДНК в сайты прикрепления фага и контролируемая экспрессия хромосомных генов в Escherichia coli .Биотехнология Биоинж. 2008, 101: 985-995. 10.1002/бит.21976.

    КАС Статья Google ученый

  • Tyo KEJ, Ajikumar PK, Stephanopoulos G: Стабилизированная дупликация гена обеспечивает длительную экспрессию гетерологичного пути без селекции. Нац биотехнолог. 2009, 27: 760-765. 10.1038/нбт.1555.

    КАС Статья Google ученый

  • Albermann C, Trachtmann N, Sprenger GA: Простой и надежный метод проведения и мониторинга интеграции экспрессионной кассеты в хромосому Escherichia coli .Биотехнолог Дж. 2010, 5: 32-38. 10.1002/биот.2003.

    КАС Статья Google ученый

  • Сабидо А., Мартинес Л.М., Де Анда Р., Мартинес А., Боливар Ф., Госсет Г.: Новый плазмидный вектор, разработанный для интеграции и экспрессии хромосомных генов: использование для разработки генетически стабильного штамма Escherichia coli , продуцирующего меланин. Плазмида. 2013, 69: 16-23. 10.1016/j.plasmid.2012.04.005.

    КАС Статья Google ученый

  • Черепанов П.П., Вакернагель В.: Нарушение гена в Escherichia coli : Кассеты TcR и KmR с возможностью катализируемого Flp вырезания детерминанты устойчивости к антибиотикам.Ген. 1995, 158: 9-14. 10.1016/0378-1119(95)00193-А.

    КАС Статья Google ученый

  • Даценко К.А., Ваннер Б.Л. Одноэтапная инактивация хромосомных генов в Escherichia coli K-12 с использованием продуктов ПЦР. Proc Natl Acad Sci USA. 2000, 97: 6640-6645. 10.1073/пнас.120163297.

    КАС Статья Google ученый

  • Валлон Т., Ганегаонкар С., Вильхауэр О., Мюллер А., Альберманн С., Шпренгер Г.А., Ройсс М., Лемут К.: Количественный анализ промежуточных изопреноидных дифосфатов в рекомбинантных и диких штаммах Escherichia coli .Приложение Microbiol Biotechnol. 2008, 81: 175-182. 10.1007/s00253-008-1707-8.

    КАС Статья Google ученый

  • Lemuth K, Steuer K, Albermann C: Создание штамма Escherichia coli без плазмид для улучшенного биосинтеза in vivo астаксантина. Факт микробной клетки. 2011, 10: 29-10.1186/1475-2859-10-29.

    КАС Статья Google ученый

  • Albermann C, Ghanegaonkar S, Lemuth K, Vallon T, Reuss M, Armbruster W, Sprenger GA: Биосинтез соединения витамина Е дельта-токотриенола в рекомбинантных клетках Escherichia coli .Химбиохим. 2008, 9: 2524-2533. 10.1002/cbic.200800242.

    КАС Статья Google ученый

  • Schwab C, Gänzle M: ​​Ферментация молочнокислыми бактериями компонентов олигосахаридов грудного молока, олигосахаридов грудного молока и галактоолигосахаридов. FEMS Microbiol Lett. 2011, 315: 141-148. 10.1111/j.1574-6968.2010.02185.х.

    КАС Статья Google ученый

  • Newburg DS, Ruiz-Palacios GM, Morrow AL: Гликаны грудного молока защищают младенцев от кишечных патогенов.Анну Рев Нутр. 2005, 25: 37-58. 10.1146/аннурев.нутр.25.050304.092553.

    КАС Статья Google ученый

  • Bode L: Олигосахариды грудного молока: каждому ребенку нужна сахарная мама. Гликобиология. 2012, 22: 1147-1162. 10.1093/гликоб/cws074.

    КАС Статья Google ученый

  • Ruiz-Palacios GM, Cervantes LE, Ramos P, Chavez-Munguia B, Newburg DS: Campylobacter jejuni связывает кишечный H(O) антиген (Fuc альфа 1, 2Gal бета 1, 4GlcNAc) и фукозилолигосахариды человека молока препятствуют его связыванию и заражению.Дж. Биол. Хим. 2003, 278: 14112-14120. 10.1074/jbc.M207744200.

    КАС Статья Google ученый

  • Yu Z-T, Chen C, Kling DE, Liu B, McCoy JM, Merighi M, Heidtman M, Newburg DS: Основные фукозилированные олигосахариды грудного молока проявляют пребиотические свойства в отношении культивируемой детской микробиоты. Гликобиология. 2013, 23: 169-177. 10.1093/гликоб/cws138.

    КАС Статья Google ученый

  • Bajza I, Boutet J, Dékany G, Hederos M, Horvath F, Kovács-Penzes P, Kröger L, Olsson J, Pérez IF, Röhrig C, Schroven A, Vrasidas I: Синтез 2′-O-фукозиллактозы .Заявка на патент ВОИС WO/2010/115935

  • Drouillard S, Driguez H, Samain E: Крупномасштабный синтез олигосахаридов H-антигена путем экспрессии Helicobacter pylori альфа1, 2-фукозилтрансферазы в метаболически сконструированном Escherichia Angew Chem Int Ed Engl. 2006, 45: 1778-1780. 10.1002/ани.200503427.

    КАС Статья Google ученый

  • Lee WH, Chin YW, Han NS, Kim MD, Seo JH: Повышенное производство GDP-L-фукозы за счет сверхэкспрессии регенератора NADPH в рекомбинантной Escherichia coli .Приложение Microbiol Biotechnol. 2011, 91: 967-976. 10.1007/s00253-011-3271-х.

    КАС Статья Google ученый

  • Stein DB, Lin YN, Lin CH: Характеристика Helicobacter pylori α1,2-фукозилтрансферазы для ферментативного синтеза опухолеассоциированных антигенов. Adv Synth Catal. 2008, 350: 2313-2321. 10.1002/adsc.200800435.

    КАС Статья Google ученый

  • Розков А., Авиньон-Росса К.А., Эртл П.Ф., Джонс П., О’Кеннеди Р.Д., Смит Дж.Дж., Дейл Дж.В., Бушелл М.Е.: Характеристика метаболической нагрузки на клетки Escherichia coli Dh2, вызванной присутствием плазмида, содержащая последовательность генной терапии.Биотехнология Биоинж. 2004, 88: 909-915. 10.1002/бит.20327.

    КАС Статья Google ученый

  • Стурла Л., Биссо А., Занарди Д., Бенатти У., Де Флора А., Тонетти М.: Экспрессия, очистка и характеристика GDP-D-маннозы 4, 6-дегидратазы из Escherichia coli . ФЭБС лат. 1997, 412: 126-130. 10.1016/S0014-5793(97)00762-Х.

    КАС Статья Google ученый

  • Somoza JR, Menon S, Schmidt H, Joseph-McCarthy D, Dessen A, Stahl ML, Somers WS, Sullivan FX: структурный и кинетический анализ Escherichia coli GDP-манноза 4, 6 дегидратазы дает представление о каталитический механизм фермента и регуляция GDP-фукозой.Структура. 2000, 8: 123-135. 10.1016/С0969-2126(00)00088-5.

    КАС Статья Google ученый

  • Lee WH, Han NS, Park YC, Seo JH: Модуляция метаболизма гуанозина 5 -дифосфат-D-маннозы в рекомбинантной Escherichia coli для производства гуанозина 5 -дифосфат-L-фукозы . Биоресурсная технология. 2009, 100: 6143-6148. 10.1016/j.biortech.2009.07.035.

    КАС Статья Google ученый

  • Pan JG, Rhee JS, Lebeault JM: Физиологические ограничения в увеличении концентрации биомассы Escherichia coli B в периодической культуре с подпиткой.Биотехнологическая лат. 1987, 9: 89-94. 10.1007/BF01032744.

    КАС Статья Google ученый

  • Anumula KR: Количественное определение моносахаридов в гликопротеинах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с высокочувствительным флуоресцентным детектированием.

  • Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.