Осторожно, ротавирус! Лечение и профилактика инфекционного заболевания

Еще вчера вечером ребенок весело играл и бегал, а сегодня у него высокая температура, болит живот, рвота и диарея. «Отравился» – вздыхают родители, «ротавирус» – поправляют врачи. Чем опасен ротавирус, как его лечить, и есть ли способы профилактики? В вопросах разбиралась корреспондент «ВВ».

– Ротавирусная инфекция — это острое инфекционное заболевание, которое характеризуется слабостью, вялостью, снижением аппетита вплоть до полного его отсутствия, бледностью кожных покровов, поражением желудочно-кишечного тракта, обезвоживанием, – рассказал заведующий отделом эпидемиологии Витебского областного центра гигиены, эпидемиологии и общественного питания Сергей Конышев. – Ротавирус – наиболее распространенный возбудитель гастроэнтерита у детей раннего возраста, передается через предметы быта и с легкостью выживает даже после заморозки, а в воде, на песке, на игрушках и просто на руках живет до 30 дней.

Инкубационный период – то есть время, за которое вирус поселяется в организме и начинает действовать, – от 10 часов до 4 дней.

– Чем опасен ротавирус для детей?

– При сильной диарее и рвоте организм теряет большое количество жидкости, что приводит к обезвоживанию, а впоследствии может стать причиной снижения артериального давления, учащения сердечных сокращений, обмороков, при тяжелом течении – острой сердечно-сосудистой и почечной недостаточности.

– Что могут сделать родители для облегчения симптомов?

– Никакого самолечения! При первых признаках заболевания необходимо обратиться к врачу, чтобы он осмотрел ребенка, назначил анализы и правильную терапию.

– Какие основные методы лечения?

– Выбор методики — дело врача. Основная задача родителей – это борьба с обезвоживанием и интоксикацией. Чаще всего поить ребенка из стакана бесполезно. Нужно давать воду по ложечке, а малышам достаточно просто постоянно смачивать губы.

Некоторые дети любят минеральную воду, кто-то соглашается только на сладкий чай. Тут уж все средства хороши, лишь бы восполнить потерю жидкости. В тяжелых случаях ее вводят внутривенно в виде специальных растворов в условиях стационара. Также для лечения используются энтеросорбенты, пробиотики, пребиотики, ферменты, противодиарейные средства и другие препараты. Среди наиболее популярных – активированный уголь, «Смекта» и другие.

– Чем можно кормить ребенка, заболевшего ротавирусом?

– Необходимо следовать специальной диете. Рацион больного должен состоять из блюд, которые не нагружают кишечник. Исключите продукты с большим количеством растительной клетчатки – овощи и фрукты, бульоны, хлеб и другие мучные изделия, молоко, пищу с высоким содержанием жира, соли и специй. Во время болезни дети от еды чаще всего отказываются. Если ребенок попросил кушать, предложите ему, к примеру, рисовую кашу, которая является сорбентом.

–  Расскажите о профилактике ротавирусной инфекции.

– Важно соблюдать правила личной гигиены – тщательно мыть руки с мылом после прихода домой с улицы, после посещения туалета, перед едой, после контакта с домашними животными. Надежное средство профилактики кишечных заболеваний у новорожденных и детей раннего возраста – грудное молоко, которое способствует формированию нормальной микрофлоры желудочно-кишечного тракта, повышает иммунитет, снижает восприимчивость к патогенной микрофлоре. Как только ребенок начал самостоятельно передвигаться – ползать, ходить, – чаще делайте влажную уборку помещений, не ходите в уличной обуви по полу, следите за чистотой игрушек. Соблюдайте сроки и условия хранения продуктов питания и правила приготовления пищи. Сырые и готовые продукты следует хранить в холодильнике раздельно. Продукты, не подвергающиеся термической обработке, особенно овощи и фрукты, перед употреблением необходимо промывать горячей водой и ошпаривать. В жаркие дни не стоит употреблять скоропортящиеся продукты, к примеру, десерты с белковым кремом.

А для питья следует использовать воду только гарантированного качества.

Фото из открытых источников.

При использовании материалов vitvesti.by указание источника и размещение активной ссылки на публикацию обязательны

средство при рвоте при ротавирусе

24 января 2019

Ротавирусная инфекция (кишечный грипп) – это распространенное заболевание, которое проявляется респираторными симптомами и расстройством пищеварения. Передается преимущественно контактным способом. Продолжительность инкубационного периода определяется количеством вирусов, которые проникли в организм, а также состоянием иммунитета, наличием сопутствующих болезней. Как правило, первые симптомы кишечного гриппа появляются на 1–3 день после заражения.

В народе ротавирусную инфекцию называют болезнью грязных рук, так как главный способ заражения – контакт с больным человеком или инфицированным предметом (плохо вымытые овощи и фрукты, посуда и др. ). Заразиться можно и воздушно-капельным путем, если больной человек чихает или кашляет, однако инфицирование таким способом происходит реже.

Нередко ротавирус попадает в организм при рукопожатии, поэтому эффективная профилактика заболевания – это соблюдение правил личной гигиены. Так, нужно тщательно мыть руки перед едой, после посещения общественных мест. Если один из членов семьи болеет, ему следует выдать отдельную посуду, гигиенические принадлежности, полотенце. Если это возможно, больного лучше изолировать в другую комнату.

Ротавирус отличается от отравления тем, что сопровождается не только расстройством желудка, но и респираторными симптомами. Для заболевания характерны следующие признаки:

• Резкое повышение температуры тела до 38–39 градусов.

• Внезапная слабость, озноб.

• Тошнота. Рвота лишь ненадолго облегчает состояние.

• Насморк.

• Боль в горле (особенно при глотании).

• Частый серовато-желтый стул кашицеобразной консистенции.

• Темный цвет мочи. Так происходит из-за выведения токсинов почками.

Симптомы ротавируса у детей выражены более ярко, чем у взрослых. Это связано с тем, что у взрослых концентрация желудочного сока выше, благодаря чему часть вирусов, которые попали в организм, гибнет в желудке.

Взрослые, которые раньше уже болели кишечным гриппом, могут вообще не замечать никаких симптомов. Но эти люди остаются носителями инфекции.

Как и у большинства вирусных заболеваний, у ротавируса нет специфических лекарств: иммунной системе придется самостоятельно справиться с болезнью.

Но это не значит, что на ситуацию нельзя повлиять. В наших силах помочь организму!  Так, для устранения симптомов интоксикации при ротавирусной инфекции у детей и взрослых лечение включает:

• Регидратационные препараты. Диарея и рвота ведут к обезвоживанию организма – это состояние особенно опасно для малышей. Потеря массы тела больше 10% является угрозой для жизни ребенка, поэтому восстановление водно-солевого баланса – первоочередная задача.

• Сорбенты.

  Сорбенты, предназначенные для детей и взрослых, при ротавирусной инфекции выводят из организма вирусные токсины, не позволяя им всасываться в кровь. Благодаря этому исчезают симптомы интоксикации, организм быстрее справляется с болезнью.

• Пробиотики, пребиотики. Пробиотики – это препараты, которые содержат живые полезные микроорганизмы, которые поселятся в кишечнике взамен погибших. Пребиотики создают комфортную среду для роста и размножения полезных кишечных бактерий, при этом вредные микроорганизмы пребиотиками питаться не могут. Прием пробиотиков или пребиотиков при ротавирусе необходим, так как без полезных бактерий невозможно нормальное пищеварение.  

• Симптоматические препараты. В аптеке вы без труда найдете различные средства от рвоты, тошноты и диареи. Они не воздействуют на причину заболевания, но при этом уменьшают симптомы интоксикации. Противорвотные препараты стоит принимать только по рекомендации врача – особенно если речь идет о детях. Эти средства используют при сильной рвоте и угрозе быстрого обезвоживания.

При проявлении первых симптомов ротавируса нужно проконсультироваться с врачом – не стоит лечиться самостоятельно, особенно если болеет ребенок. Пока больной ждет медицинскую помощь, ему нужно давать достаточное количество воды. Также можно принимать сорбенты.

Сорбент Жидкий уголь действует комплексно:

• Пектин выводит токсины, не допускает всасывания вредных веществ в кровь. Это способствует уменьшению симптомов интоксикации, облегчая состояние больного.

• Инулин нормализует микрофлору кишечника, так как является пребиотиком.

Благодаря такому составу прием Жидкого угля при вирусных кишечных инфекциях сокращает длительность интоксикации и способствует скорейшему выздоровлению, что подтверждают и данные клинических исследований.

 

Кроме того, исследования показали, что Жидкий уголь не вызывает рвотного рефлекса, поэтому его можно использовать, даже когда другие средства принимать не получается из-за тошноты и рвоты.

Линейка препаратов включает средства для взрослых и детей с трех лет.

НЕ ЯВЛЯЕТСЯ РЕКЛАМОЙ. МАТЕРИАЛ ПОДГОТОВЛЕН ПРИ УЧАСТИИ ЭКСПЕРТОВ.

Жидкий уголь – ❗Осторожно, ротавирус! Как правильно лечить…

❗Осторожно, ротавирус! Как правильно лечить ротавирусную инфекцию у ребенка?

Осенне-зимний период – время эпидемий ротавируса. Как обезопасить себя и ребенка и что делать при первых симптомах заболевания?

Основные симптомы ротавируса – рвота и резкое повышение температуры, понос. Также может быть насморк и покраснение горла, боли при глотании.

Ротавирус может протекать по-разному. Иногда болезнь может ограничиться и двумя днями, а иногда может растянуться на 2 недели. Но как бы там ни было, за лечение стоит браться серьезно уже с самого начала.

А знаете ли вы, что:

– Более 90% случаев заболевания ротавирусной инфекцией происходит в холодный период (с осени по раннюю весну), поскольку ротавирус более устойчив в холодной среде [1,2].

– Ротавирусная инфекция чрезвычайно заразна, легко передается и распространяется на большие расстояния, при этом даже незначительное количество вирусных частиц вполне достаточно для заражения. В детских коллективах ротавирусная инфекция распространяется подобно пожару в степи. Стоит заболеть одному ребёнку, в опасности оказывается весь лагерь (школа, детский сад).

– Основой путь передачи ротавирусной инфекции – контактно-бытовой (через грязные руки и заражённые предметы)[3] и в гораздо меньшей степени воздушно-капельный. Вирусы сохраняют инфекционность в течение нескольких месяцев при температуре +40 С, и , особенно при минусовых температурах (-200 С и ниже). Ротавирусы выживают в водопроводной воде до 60 дней, в фекалиях сохраняются от нескольких недель до 7 месяцев, на фруктах от 5 до 30 дней, на тканях из хлопка и шерсти от 12 до 45 дней, на различных поверхностях до 10 дней, а с органическими загрязнениями до 16 дней.

– Возбудитель ротавируса устойчив к воздействию большинства дезинфицирующих средств. Тем не менее, руки после контакта с больным лучше помыть, ведь ротавирус еще часто называют «болезнью грязных рук».

Как правильно лечить ротавирусную инфекцию у ребенка?

❶ Боремся с обезвоживанием!

Давайте ребенку специальные растворы для регидратации. В аптеке можно купить Оралит, Регидрон, Гастролит или Глюкосолан. Раствор надо давать ребенку как можно чаще и до полного восстановления. Нужное количество раствора легко можно определить по тому, как часто малыш писает. Ребенок должен мочиться минимум раз в три часа.

❷ Помогаем организму вывести токсины.

Для этих целей подойдет «Жидкий уголь для детей» – мощный сорбент с двойным действием – он выводит вредные вещества и восстанавливает микрофлору кишечника.

С сорбентом «Жидкий уголь для детей» пациенты выздоравливали на 21,4–28,6 % быстрее.

В отличие от традиционного активированного угля Жидкий уголь начинает действовать сразу, не раздражает желудок, не вызывает побочных эффектов и запоров.

Но самое главное: Жидкий уголь – это напиток с приятным яблочным вкусом 🍏. Дети пьют Жидкий уголь с удовольствием, и вам не придется бегать за ребенком с лекарством!

Подробнее о Жидком угле: https://goo.gl/nzefzR

❸ Соблюдаем специальную диету при ротавирусе.

Молочные продукты могут усугубить диарею и даже вызвать раздражение воспаленного кишечника. Поэтому исключите из рациона молоко, йогурт, сыр, сметану.

Жареная или жирная пища может оказаться слишком тяжелой для организма, который пытается бороться с ротавирусной инфекцией. Поэтому о картофеле-фри, чипсах, гамбургерах, и различных кремовых десертах на период этой борьбы придется забыть.

Лучше приготовьте овощной суп, рис или овсянку на воде.

Чего делать не стоит?

❌ Не надо давать ребенку антибиотики – при ротавирусе они не помогут. Ротавирус – это вирус, антибиотики против вирусов бессильны, они действуют только на бактерий. Кроме того, антибиотикик могут еще больше нарушить баланс кишечной микрофлоры.
❌ Не используйте раствор марганцовки для промывания желудка – кристаллы марганцовки могут вызвать ожоги слизистой.
❌ Не стоит пичкать ребенка едой, если у него нет аппетита. Главное во время ротавируса не есть, а пить, чтобы предотвратить обезвоживание.

Источники:
1. (December 2009) «Seasonality of rotavirus disease in the tropics: a systematic review and meta-analysis». International Journal of Epidemiology 38 (6): 1487–96. DOI:10.1093/ije/dyn260. PMID 19056806.
2. Ферьева Е. Е. Ротавирусная инфекция // Consilium Provisorum. — 2007. — Т. 5, № 1.
3. Prevalence of rotavirus on high-risk fomites in day-care facilities. Pediatrics 92 (2): 202–5. PMID 8393172.

Применение энтеросорбентов в лечении острых кишечных инфекций | #05/11

При острых кишечных инфекционных болезнях основные клинические проявления определяет синдром поражения желудочно-кишечного тракта (ЖКТ): диспепсия, рвота, диарея, боли в животе различной локализации [1].

Параллельно с ним могут быть разной степени выраженности проявления лихорадочно-интоксикационного синдрома, являющегося реакцией макроорганизма на возбудителя инфекционного заболевания.

Синдром диспепсии характерен для сальмонеллеза, пищевых токсикоинфекций, эшерихиоза, ротавирусного гастроэнтерита и других вирусных диарей, он наблюдается также при различных органических поражениях и функциональных расстройствах ЖКТ. Рвота возникает вследствие воспалительных изменений слизистой оболочки и повышенного выделения жидкости в просвет верхних отделов ЖКТ, а также развития синдрома интоксикации. Для большинства острых кишечных инфекций (ОКИ) характерна диарея. На основании особенностей патогенетических механизмов выделяют четыре типа диареи: секреторная, гиперэкссудативная, гиперосмолярная, гипер- и гипокинетическая.

Секреторная диарея обусловлена усилением секреции натрия и воды в просвет кишки. Классический пример — диарея при холере, возбудитель которого, холерный вибрион, размножается только на поверхности эпителия тонкого кишечника, но холерный токсин нарушает внутриклеточную регуляцию, в результате эпителий кишечника начинает активно секретировать в просвет воду с электролитами. Гиперсекрецию воды и электролитов вызывают также токсины других бактерий (сальмонелл, эшерихий, клебсиелл), энтеропатогенные вирусы, желчные кислоты, простагландины и другие биологически активные вещества. Секреторная форма характеризуется безболезненной, обильной водной диареей, исчисляемой литрами в сутки.

Гиперэкссудативная диарея характерна для воспалительных заболеваний кишечника. Развивается при бактериальных ОКИ, обусловленных шигеллами, сальмонеллами, клостридиями, эшерихиями и др. бактериями. В этом случае их также называют инвазивными (англ. invasion — вторжение, нашествие). Стул жидкий, нередко с патологическими примесями (слизь, кровь, гной). Подобная диарея наблюдается и при неинфекционных заболеваниях: неспецифическом язвенном колите, болезни Крона, злокачественных опухолях кишечника.

Гиперосмолярная (осмотическая) диарея развивается из-за нарушения всасывания в тонкой кишке. Из инфекционных агентов чаще всего обусловлена ротавирусами, которые размножаются в эпителии и нарушают активность ферментов слизистой оболочки кишки. Из-за этого дисахариды не могут расщепиться до моносахаридов и всосаться. Дисахариды остаются в просвете кишечника и притягивают воду. Под действием кишечной микрофлоры происходит брожение дисахаридов с образованием газов (метеоризм) и воды, что приводит к болям и «водянистой» диарее. Гиперосмолярная диарея наблюдается при синдроме мальабсорбции, при дефиците пищеварительных ферментов (врожденные энтеропатии, хронический панкреатит и др.). При осмотической диарее стул обильный, жидкий, часто содержит большое количество остатков полупереваренной пищи.

Гипер- и гипокинетическая диарея возникает при повышении или понижении моторики кишки, что сопровождается нарушением транзита кишечного содержимого. Гиперкинетическую диарею вызывают неврогенные факторы (стресс), слабительные препараты, секретин, панкреозимин, гастрин, простагландины и серотонин. Этот тип диареи свойственен больным с синдромом раздраженного кишечника. При гиперкинетической диарее стул жидкий или кашицеобразный, частый, но необильный. Гипокинетическая диарея бывает реже и связана с избыточным бактериальным обсеменением тонкой кишки.

Важнейшим синдромом при острых диарейных инфекциях является дегидратация (обезвоживание). Происходит потеря воды и электролитов, что нередко приводит к развитию метаболического ацидоза. Согласно классификации В. И. Покровского (1978) различают четыре степени выраженности обез­воживания: I степень соответствует потере массы тела, не превышающей 3%; при II степени потеря составляет 4–6% массы тела; при III — 7–9%; при IV — 10% и более. В результате обез­воживания может развиться гиповолемический шок. Исходя из патогенеза острых диарейных инфекций основу их лечения составляет регидратационная терапия, которая направлена на восстановление водно-электролитного и кислотно-основного состояния организма. Для этих целей используют полионные кристаллоидные растворы для внутривенного и перорального применения. Коллоидные растворы используют только в целях дезинтоксикации в случаях отсутствия признаков обезвоживания.

Антибактериальные средства (антибиотики, фторхинолоны и др.) применяют в лечении шигеллеза, холеры, кампилобактериозов и иерсиниоза, при других бактериальных диарейных инфекционных болезнях они неэффективны, а при вирусных диареях противопоказаны, т. к. могут стать причиной развития дисбактериоза.

Для коррекции желудочно-кишечных расстройств, развивающихся при острых диарейных инфекционных болезнях в клинической практике используют эубиотики, ферментные препараты, спазмолитики и ряд других групп лекарственных средств, среди которых в последние годы все большее значение придают энтеросорбентам.

Энтеросорбенты (гр. enteron-кишка; лат. sorbens — поглощающий) — это вещества, обладающие высокой сорбционной емкостью, не разрушающиеся в ЖКТ, эффективно связывающие и выводящие из организма эндогенные и экзогенные токсичные соединения, надмолекулярные структуры и клетки, используемые с целью лечения и профилактики болезней [2–4].

Энтеросорбенты как лечебные средства известны с глубокой древности. Еще врачеватели Древнего Египта, Индии, Греции использовали внутрь древесный уголь, глину, растертые туфы, пережженный рог для лечения отравлений, диареи, желтух и других заболеваний, а также и наружно — для лечения ран. Лекари Древней Руси использовали березовый или костный уголь. Авиценна (Абу Али ибн Сина) в своем Каноне врачебной науки из семи постулатов искусства сохранения здоровья на третье место ставил метод, соответствующий современному пониманию энтеросорбции. В России Т. Е. Ловиц (1785), изучая химические свойства древесного угля, обосновал его применение для этих же целей.

Важнейшими медицинскими требованиями к современным энтеросорбентам являются высокая сорбционная емкость по отношению к удаляемым компонентам и способность сорбировать разного размера и массы молекулы и бактериальные клетки, отсутствие токсического и травматического воздействия на слизистые оболочки ЖКТ; они должны хорошо эвакуироваться из кишечника и не вызывать потери полезных ингредиентов, не оказывать отрицательное воздействие на процессы секреции и кишечную микрофлору. По мере прохождения по кишечнику связанные компоненты не должны подвергаться десорбции. Энтеросорбенты не должны проникать через слизистую ЖКТ, следовательно, не иметь системной фармакокинетики. Препараты для энтеросорбции должны иметь удобную лекарственную форму и обладать хорошими органолептическими свойствами [4].

Взаимодействие сорбентов с удаляемыми компонентами реализуется четырьмя основными путями: адсорбция, абсорбция, ионообмен и комплексообразование [5, 6]. При адсорбции взаимодействие между сорбентом и удаляемым веществом происходит на границе раздела сред. Абсорбция — процесс поглощения вещества жидким сорбентом в результате растворения. Ионообмен — процесс замещения ионов на поверхности сорбента ионами сорбата. Патогенетические механизмы энтеросорбции зависят от вида сорбента и структуры сорбируемых частиц.

Сорбенты имеют различные свойства и могут различаться по ряду признаков [4].

По лекарственной форме и физическим свойствам: гранулы, порошки, таблетки, пасты, гели, взвеси, коллоиды, инкапсулированные материалы, пищевые добавки.

По химической структуре сорбенты можно разделить на несколько групп¹:

• Углеродные сорбенты (активированный уголь, Карболонг, Карбовит, Карбосфер, сферический карбонит насыщенный — СКН, Антрален и др.).

Углеродные сорбенты на основе активированного угля, гранулированных углей и углеволокнистых материалов, как губка, поглощают газы, токсины, соли металлов, продукты метаболизма лекарств. Препараты активированного угля могут оказаться травматичными для слизистой оболочки пищеварительного тракта, поэтому их использование не рекомендуется при эрозивных и язвенных поражениях ЖКТ, геморроидальном кровотечении.

• Кремнийсодержащие энтеросорбенты (Полисорб, Силлард П, белая глина, Смекта, Неосмектин и др.).

Среди кремнийсодержащих энтеросорбентов различают природные и синтетические. Из природных наиболее известна белая глина (Каолин), взвесь которой обладает обволакивающими и адсорбирующими свойствами. Кроме Каолина, в медицине используются смектиты (Смекта) и монтлорилониты натрия (Бентонит) и др.

• Сорбенты химического происхождения (Энтеродез, Энтеросорб, Энтеросгель).

Из синтетических энтеросорбентов в настоящее время наиболее широкое применение имеет препарат Энтеросгель, представляющий собой синтезированный гель гидроокиси метилкремниевой кислоты. Обладая высокой сорбционной активностью, он характеризуется избирательным действием: связывает и выводит только среднемолекулярные токсические вещества.

• Сорбенты на основе природных и синтетических смол, синтетических полимеров и неперевариваемых липидов (Холестирамин, Холестипол, Холезивилам и др.).

Энтеросорбенты на основе смол, полимеров и неперевариваемых липидов, представляют собой ионообменные материалы, способные связывать конкретные вещества (аниониты хорошо снижают кислотность желудочного сока, сорбируют пепсин и бактериальные токсины; Холестерамин связывает желчные кислоты; катиониты способны снижать содержание ионов натрия, калия, кальция.

• Природные органические сорбенты на основе пищевых волокон, лигнина гидролизного, хитина, пектинов и альгинатов (микрокристаллическая целлюлоза — МКЦ, Полифепан, Мультисорб, Экстралакт, Альгисорб, Зостерин, Микотон, Фильтрум-СТИ и др. ).

Пищевые волокна — полисахариды и лигнин. Природные пищевые волокна не перевариваются пищеварительными ферментами, не усваиваются пищеварительной системой человека, ферментируются кишечными бактериями. Важнейшее свойство пищевых волокон — способность активно впитывать и удерживать воду (адсорбция) и другие вещества: нитриты, нитраты, канцерогенные вещества, бактериальные токсины.

Виды пищевых волокон

Целлюлоза представляет собой неразветвленный полимер глюкозы, содержащий до 10 тысяч мономеров. Разные виды целлюлозы обладают разными свойствами и различной растворимостью в воде.

Гемицеллюлоза образована конденсацией пентозных и гексозных остатков, с которыми связаны остатки арабинозы, глюкуроновой кислоты и ее метилового эфира. Также как и целлюлоза, разные типы гемицеллюлозы обладают различными физико-химическими свойствами.

Гумми (камеди) являются разветвленными полимерами глюкуроновой и галактуроновой кислот, к которым присоединены остатки арабинозы, маннозы, ксилозы, а также соли магния и кальция; содержатся в основном в морских водорослях и семенах.

Слизи (нейтральные и кислые) представляют собой разветвленные сульфатированные арабиноксиланы; являются полисахаридами семян и морских водорослей.

Пектины — комплекс коллоидных полисахаридов, в основе которыx галактуроновая кислота с боковыми цепями из рамнозы, арабинозы, ксилозы и фруктозы. Пектиновые вещества входят в состав клеточных стенок и межуточного вещества высших растений. Пектины являются желирующим веществами. Пектины легко подвергаются бактериальному расщеплению в толстой кишке.

Альгинаты — соли альгиновых кислот, молекула которых представлена полимером полиуроновых кислот, в большом количестве содержащихся в бурых водорослях. Альгинаты обладают способностью связывать и выводить из организма радионуклиды и тяжелые металлы.

Лигнин является полимерным остатком древесины после ее перколяционного гидролиза, который проводится с целью выделения целлюлозы и гимицеллюлозы.

По физико-химическим свойствам пищевые волокна подразделяют на растворимые в воде (пектины, камеди, слизи, фракции гемицеллюлозы), их условно называют «мягкими» волокнами, и нерастворимые (целлюлоза, часть гемицеллюлозы, лигнин), так называемые «грубые» волокна.

• Комбинированные сорбенты имеют в составе два и более типов сорбентов или дополнительных компонентов (витамин С, ферменты, пробиотики, фруктоолигосахариды, лактулоза и др.), расширяющих спектр лечебного или профилактического действия энтеросорбента (Ультрасорб, Энтегнин-Н, Лактофильтрум, Фильтрум-Сафари, Рекицен-РД, Белый уголь, Эубикор и др.).

По селективности различают сорбенты неселективные, селективные монофункциональные, селективные, би- и полифункциональные.

Основной путь введения энтеросорбентов — пероральный, иногда энтеросорбент вводят через зонд, когда больной не способен самостоятельно принимать препарат или имеются препятствия вследствие стеноза пищевода или пилорического отдела желудка. При зондовом введении сорбент может быть выведен (обычно с экспозицией до 30 мин) и введена новая порция препарата. Иногда по показаниям энтеросорбенты вводятся с помощью клизм в толстую кишку.

Лечебный эффект энтеросорбентов осуществляется в результате их прямого и опосредованного воздействия на патогенетические механизмы.

Прямое действие энтеросорбентов направлено на связывание и элиминацию из ЖКТ токсичных продуктов обмена и воспалительного процесса, патогенных бактерий и их токсинов, вирусов, биологически активных веществ, связывание газов, образующихся в избытке при гнилостном процессе.

Опосредованное действие обусловлено предотвращением или ослаблением клинических проявлении эндотоксикоза, токсико-аллергических реакций, диарейного синдрома. Использование энтеросорбентов снижает метаболическую нагрузку на печень и почки, способствует нормализации моторной, эвакуаторной и пищеварительной функции ЖКТ, положительно влияет на функциональное состояние иммунной системы [4, 6, 7].

Энтеросорбция входит в группу средств эфферентной терапии (лат. efferens — выводить), т. е. лечебных мероприятий, целью которых является прекращение действия токсинов различного происхождения и их элиминация из организма. Энтеросорбция при кишечных инфекционных заболеваниях является патогенетически обоснованным способом терапии.

Целенаправленные клинические исследования по изучению эффективности отечественных энтеросорбентов нами были начаты еще в середине 80-х годов прошлого века [8, 9]. В тот период в практике применяли только углеродные сорбенты, которые, наряду с положительными свойствами, имели сравнительно малую сорбционную емкость и побочные эффекты и ряд противопоказаний. Создание новых препаратов, производных других групп сорбентов, расширило возможности применения энтеросорбции в комплексном лечении ОКИ. Первым из их числа нами был использован Энтеродез — препарат низкомолекулярного поливинилпирролидона, который применили в комплексной терапии 144 больных ОКИ (мужчин — 71, женщин — 73), у 124 из которых диагностирована пищевая токсикоинфекция, у 20 — шигеллез. У 105 (72,9%) течение болезни было средней степени тяжести, у 37 (25,9%) — легкое, у 2 (0,015%) — тяжелое. Препарат назначали, как было рекомендовано производителем, в растворенном виде (5 г в 100 мл воды) 2–4 дозы в сут в течение 3 сут. Лечебный эффект был зарегистрирован у всех больных: купировались боли в животе, метеоризм, тошнота, рвота; через 6–12 часов от начала лечения температура тела нормализовалась у 75,6% больных. У всех пациентов, получивших лечение энтеродезом в первые-вторые сутки болезни, не потребовалось проведения парентеральной регидратации. Выраженный клинический эффект, отсутствие побочных реакций (контролировались также лабораторными биохимическими исследованиями) позволили включить данный препарат в комплекс средств для лечения больных острыми диарейными инфекциями.

По мнению врачей — инфекционистов и педиатров, своевременное, т. е. раннее применении энтеросорбентов при острых инфекционных диарейных болезнях инвазивного типа оказывает быстрый и выраженный дезинтоксикационный, гипотермический и антидиарейный клинический эффект [3, 10–12]. Такие результаты получены при комбинированном использовании в лечении ОКИ энтеросорбентов с антибактериальными препаратами или пробиотиками. По мнению некоторых авторов, клиническая эффективность энтеросорбентов при легких и среднетяжелых формах ОКИ не уступает широко используемым в клинической практике антибактериальным препаратам [13, 14).

А. А. Новокшонов и соавт. (2002) применили энтеросорбент Фильтрум-СТИ для лечения 60 детей, больных легкими и среднетяжелыми формами ОКИ, из которых 40 больных получали препарат как средство этиотропной монотерапии (20) или в комбинации с фуразолидоном (20). Установлено, что «этиотропная» монотерапия энтеросорбентом является более эффективной, чем лечение фуразолидоном, и существенно повышается при их совместном использовании в лечении среднетяжелых форм ОКИ бактериальной этиологии инвазивного типа диареи. Наряду с быстрым и выраженным дезинтоксикационным клиническим эффектом заметно повышалась и санирующая эффективность комбинированной терапии: повторного высева возбудителей ОКИ не зарегистрировано, в то время как при монотерапии фуразолидоном у трети больных по окончании 5-дневного курса имел место повторный высев сальмонелл и синегнойной палочки. Авторы отмечают, что «высокая антибактериальная активность энтеросорбентов не только способствует санации ЖКТ от патогенов, но и может оказывать опосредованное иммуномодулирующее действие за счет детоксикации и предупреждения антигенной перегрузки иммунной системы, что создает благоприятные условия для купирования инфекционного процесса» [15].

В комплексном лечении 63 больных в возрасте от 19 до 34 лет, поступивших в стационар с диагнозом «пищевая токсикоинфекциия», нами также был применен препарат Фильтрум-СТИ. В качестве контроля наблюдалась группа из 23 больных, соответствовавшая по возрасту и другим критериям первой группе, получавшая дезинтоксикационную и регидратационную терапию. В связи с тем, что по клинико-эпидемиологическим характеристикам, подтвержденным лабораторным исследованиями, этиологическими агентами были условно-патогенные бактерии или ротавирусы (у 14), антибактериальные препараты больным не назначали. Все пациенты поступали в состоянии средней степени тяжести. Лечение энтеросорбентом Фильтрум-СТИ проводили в соответствии с рекомендацией производителя: 2–3 таб. 3 раза в день за час до еды и приема других лекарственных средств. Длительность применения препарата в среднем составила 4 ± 0,3 дня. В результате у больных, получавших энтеросорбент, зарегистрировано уменьшение длительности лихорадки и проявлений интоксикации до 2,3 ± 0,4 дня, в контрольной группе этот показатель составил 3,2 ± 0,3 дня (р > 0,05), сократилась продолжительность диареи, которая в рассматриваемых группах составила соответственно 1,6 ± 0,5 и 2,8 ± 0,7 дня (р > 0,05). Применение энтеросорбента способствовало более раннему прекращению болевого синдрома — через 1,4 ± 0,2 дня (р < 0,05), который у больных контрольной группы длился до 2,6 ± 0,3 дня, меньше были сроки исчезновения таких проявлений, как метеоризм, — 1,9 ± 0,2 дня (р < 0,05), в контрольной группе — до 3,7 ± 0,4 дня, вялость и анорексия 1,8 ± 0,3 и 3,1 ± 0,4 дня (р < 0,05) соответственно. Переносимость препарата была хорошая, каких-либо побочных реакций не отмечено. Таким образом, включение энтеросорбента Фильтрум-СТИ в комплексное лечение больных пищевыми токсикоинфекциями оказывало очевидный терапевтический эффект, выразившийся в уменьшении сроков исчезновения проявлений интоксикации и функциональных расстройств ЖКТ.

Приведенные примеры применения препарата Фильтрум-СТИ свидетельствуют о хорошей эффективности энтеросорбента на основе лигнина гидролизного — полимера растительного происхождения, обладающего высокой сорбционной способностью, способного выводить из организма токсины, патогенные микроорганизмы, продукты их жизнедеятельности, а также способствующего восстановлению микрофлоры и нормализации моторики кишечника. Препараты этой группы активно внедряются в медицинскую практику, особенно в педиатрии, т. к. их можно назначать детям начиная с грудного возраста.

В отечественных руководствах по инфекционным болезням, пособиях для врачей и специальной научной литературе последних лет рекомендации по применению энтеросорбентов в комплексном лечении острых инфекционных диарейных болезней присутствуют постоянно [16–18]. Однако следует отметить, что перечень рекомендуемых препаратов сравнительно небольшой. Мало информации об их применении при кишечных инфекционных болезнях вирусной природы, которые, как показали многие исследователи, занимают значительную долю среди диарейных болезней. Так, в Москве в 2010 г. по сравнению с предыдущим годом заболеваемость ротавирусными гастроэнтеритами увеличилась более чем на 50%, в 1,8 раза чаще регистрировался вирус Норволк [19]. В этом плане больше исследований проведено инфекционистами-педиатрами, что вполне закономерно с учетом более широкого распространения вирусных диарейных болезней среди детей. В настоящее время при этих заболеваниях в качестве средств этиотропной терапии используются специфические иммуноглобулины, индукторы интерферона и препараты с иммуномодулирующим действием, а для этио­патогенетической терапии — пробиотики и энтеросорбенты. Следует учитывать, что не все известные энтеросорбенты достаточно эффективны при вирусных диарейных болезнях, но некоторые из них оказывают заметное этиотропное действие, что обусловлено способностью к сорбции и элиминации из кишечника вирусов и условно-патогенных бактерий. Ряд энтеросорбентов (смектит диоктаэдрический, препараты на основе лигнина гидролизного) препятствуют внедрению вирусов через защитный слизистый барьер кишечника, сорбируют избыток дисахаридов, кишечные газы, уменьшают метеоризм и обусловленные им абдоминальные боли; нормализуют всасывание воды и электролитов, состав микрофлоры кишечника; оказывают выраженный дезинтоксикационный и антидиарейный клинический эффект.

Л. Н. Мазанкова и соавт. [10] отметили заметный положительный эффект при применении энтеросорбента Фильтрум-СТИ в лечении ОКИ у детей, где этиологическими агентами были бактерии и ротавирусы. Энтеросорбент больным назначали с момента поступления на фоне пероральной регидратации и диетотерапии. Уже с первых дней лечения отмечалось положительное влияние препарата на общетоксический и местный синдромы ОКИ в виде купирования лихорадки, уменьшения частоты либо полного прекращения рвоты, улучшения аппетита, устранения болей в животе и метеоризма, уменьшения кратности дефекаций и улучшения общего состояния больных.

По данным В. Ф. Учайкина и соавт. (2008), включение другого известного энтеросорбента — препарата Неосмектин (смектита диоктаэдрического) в комплексную терапию ОКИ вирусной (осмотической) и вирусно-бактериальной этиологии (инвазивно-осмотического типа диареи) у детей способствует более быстрому исчезновению симптомов интоксикации и эксикоза, лихорадки, купированию явлений метеоризма, абдоминальных болей и диарейного синдрома. Быстрее, чем в контрольной группе, не получавшей Неосмектин, происходит восстановление нормофлоры кишечника (бифидобактерий, лактобактерий, энтерококков) [4].

Иоанниди Е. А. и соавт. (2011) использовали Неосмектин для лечения больных бактериальными ОКИ, вызванными Proteus mirabilis, P. vulgaris, Citrobacter freundi, Klebsiella pneumoniae и другими условно-патогенными бактериями. Включение данного энтеросорбента оказало положительное воздействие на течение болезни: уменьшило продолжительность интоксикационного и диспепсического синдромов, сократило время госпитализации больных, что свидетельствует об эффективности данного препарата при диареях разной этиологии [20].

Ратникова Л. И. и Пермитина М. И. (2011) положительные результаты при лечении различных ОКИ получили в результате применения препарата Полисорб, который при раннем назначении оказал выраженное дезинтоксикационное действие при сальмонеллезе, пищевой токсикоинфекции, обусловленной условно-патогенными бактериями, и ботулизме. В настоящее время имеются многочисленные исследования других авторов с подобными результатами эффективного применения энтеросорбентов разных групп для лечения больных ОКИ различной этиологии.

В последние годы особое внимание уделяется разработке и внедрению в клиническую практику комбинированных энтеросорбентов, в состав которых кроме основного действующего лекарственного средства — сорбента введены дополнительные компоненты, расширяющие их спектр лечебного и профилактического действия: Энтегнин-Н (лигнин + аскорбиновая кислота), Рекицен-РД (пектин + комплекс витаминов и микроэлементов, незаменимые аминокислоты и винные дрожжи — Saccharomyces vini), Белый уголь (диоксид кремния + микрокристаллическая целлюлоза), Альгилоза кальция-С (альгиновая кислота + клетчатка и кальций) и др. Заслуживает внимания сравнительно новый отечественный комбинированный препарат Фильтрум-Сафари (жевательные пастилки). Данный препарат соединяет в себе свойства энтеросорбента и пребиотика благодаря содержанию в нем лигнина, известного своими сорбционными и детоксикационными свойствами, и фруктоолигосахарида, способствующего восстановлению количественного и качественного состава собственной микрофлоры кишечника. Препарат создан для применения в педиатрии, выпускается в виде пастилок со вкусом шоколада или лесных ягод, гипоаллергенный. Другой препарат из этой группы — Лактофильтрум, кроме лигнина, содержит лактулозу, которая также обладает пребиотическим эффектом.

А. А. Новокшонов и соавт. (2009) изучали клиническую эффективность энтеросорбента Фильтрум-Сафари в комплексной терапии больных детей с установленной ротавирусной инфекцией. Всего было исследовано 45 детей в возрасте от трех до 13 лет. Установлено, что включение в комплексную терапию препарата Фильтрум-Сафари способствует статистически достоверному сокращению продолжительности симптомов интоксикации, токсикоза с эксикозом, диарейного синдрома и средней продолжительности острого периода заболевания. Препарат удобен для применения в педиатрии и практически не имеет побочных реакций [22].

Большинство современных энтеросорбентов известно практикующим врачам разных специальностей. Однако многие зарегистрированные энтеросорбенты пока еще не нашли широкого применения в силу различных причин: из-за недостаточной информированности врачей ЛПУ о роли энтеросорбентов в лечении инфекционных и неинфекционных болезней ЖКТ, незнания достоинств и недостатков тех или иных сорбентов при конкретной патологии и фактически существующего пока еще скептического отношения врачей к энтеросорбции. В одном из выводов академика РАМН В. Ф. Учайкина и соавт. [4], имеющих большой опыт применения энтеросорбентов, сказано, что «при гастроэтерологической патологии, в том числе при ОКИ, энтеросорбенты являются средством с многогранной эффективностью, определяемой не только их патогенетическим (дезинтоксикационным, антидиарейным и др.), но и этиотропным действием как в отношении патогенных бактерий, так и вирусов».

Литература

1. Ющук Н. Д., Розенблюм А. Ю. Синдром поражения желудочно-кишечного тракта при инфекционных болезнях. В кн.: Инфекционные болезни: национальное руководство. Под ред. Н. Д. Ющука. Ю. Я. Венгерова. М.: ГЭОТАР-Медия. С. 276–282.
2. Беляков Н. А., Соломенников А. В. Энтеросорбция — механизм лечебного действия // Эфферентная терапия. 1997, т. 3, № 2.
3. Учайкин В. Ф., Новокшонов А. А., Соколова Н. В. Энтеросорбция эффективный метод этиопатогенетической терапии острых кишечных инфекций // Дет. инфекции. 2005. № 3. С. 39–43.
4. Учайкин В. Ф., Новокшонов А. А., Соколова Н. В., Бережкова Т. В. Энтеросорбция — роль энтеросорбентов в комплексной терапии острой и хронической гастроэнтерологической патологии. Пособие для врачей. М., 2008. 24 с.
5. Энтеросорбция. Под. ред. Н. А. Белякова. Ленинград. 1991. 329 с.
6. Хотимченко Ю. С., Кропотов А. В. Применение энтеросорбентов в медицине // Тихоокеанский медицинский журнал. 1999, № 2, с. 84–89.
7. Николаев В. Г. и др. Энтеросорбция: состояние вопроса и перспективы на будущее // Вестник проблем биологии и медицины. 2007. № 4, с. 7–17.
8. Лобан К. М., Митерев Ю. Г., Жеребцов Л. А. и др. Эффективность препарата «Энтеро дез» при острых кишечных инфекциях // Гематология и трансфузиология. 1983, № 7, С. 33–39.
9. Попова С. П., Токмалаев А. К. Оральная дезинтоксикационная терапия при острых кишечных инфекциях // Советская медицина. 1987, № 6, с. 89–91.
10. Мазанкова Л. Н., Павлова А. А. Совершенствование патогенетической терапии острых кишечных инфекций у детей // Детские инфекции. 2006, 4, с. 67–69.
11. Учайкин В. Ф. и др. Место и значение энтеросорбции в этиопатогенетической терапии ОКИ // Педиатрия. 2007, 86 (2), с. 44–50.
12. Ватутина О. В., Лучшев В. И., Бурова С. В. Влияние энтеросорбента фильтрум на уровень специфической эндотоксемии у больных шигеллезом Флекснера / Сб. мат. XIV конгр. «Человек и лекарство». М., 2007. С. 536.
13. Зайцева И. А., Кошкин А. П., Левин Д. Ю. Применение энтеросорбента «Фильтрум» в комплексной терапии острых кишечных инфекций у детей // Детские инфекции. 2005, № 1, с. 61–62.
14. Новокшонов А. А. и др. Роль энтеросорбентов в составе комплексной терапии острых кишечных инфекций у детей // Практика педиатра. 2008, № 5, с. 20–26.
15. Новокшонов А. А., Портных О. Ю. , Соколова Н. В. Изучение клинической эффективности орального сорбента «Фильтрум» при ОКИ у детей / Сборник трудов «Применение метода энтеросорбции в практической медицине». М., 2002. С. 24–31.
16. Инфекционные болезни: национальное руководство / Под ред. Н. Д. Ющука. Ю. Я. Венгерова. М.: ГЭОТАР-Медия, 2009. 1056 с.
17. Рациональная фармакотерапия детских заболеваний: Рук. для практикующих врачей / Под общ. ред. А. А. Баранова, Н. Н. Володина, Г. А. Самсыгиной М.: Литтерра, 2007. Т. 1. 1088 с.
18. Руководство по инфекционным болезням / Под ред. Ю. В. Лобзина 3-е изд., доп. И перераб. СПб: Изд-во Фолиант. 2003. 1040 с.
19. Груздева О. А., Марьин Г. Г. Особенности заболеваемости острых кишечных инфекций в современном мегаполисе / Материалы III Ежегодного Всероссийского конгресса по инфекционным болезням. Москва, 28–30 марта 2011. С. 83.
20. Иоанниди Е. А., Макарова И. В., Тимонова М. С. Клиническое применение энтеросорбента при острых кишечных инфекциях / Материалы III Ежегодного Всероссийского конгресса по инфекционным болезням. Москва, 28–30 марта 2011. С. 152–153.
21. Ратникова Л. И., Пермитина. Энтеросорбция в лечении интоксикационного синдрома // Материалы III Ежегодного Всероссийского Конгресса по инфекционным болезням. Москва, 28–30 марта 2011. С. 306–307.
22. Новокшонов А. А., Соколова Н. В., Бережкова Т. В., Сахарова А. А. Клиническая эффективность нового энтеросорбента в комплексной терапии острых кишечных инфекций вирусной этиологии у детей // Лечащий Врач. 2009, № 7, C. 78–80.

А. К. Токмалаев, доктор медицинских наук, профессор

РУДН, Москва

Контактная информация об авторе для переписки: [email protected]

¹ Подробная информация по зарегистированным препаратам доступна в соответствующей справочной литературе, руководствах и пособиях для врачей.

как принимать детям и взрослым

Описание и симптомы заболевания

При проникновении внутрь ротавирус начинает активное размножение. Нарушается работа желудочно-кишечного тракта, происходит быстрое выведение жидкости из организма путем рвоты и диареи. Заражение происходит оральным путем. Болезнь опасна тем, что приводит к быстрому обезвоживанию.

Симптомы ротавирусной инфекции:

• сухость слизистых оболочек ротовой полости;
• резкое снижение веса;
• температура тела выше 37,5 ^оС;
• сонливость, вялость слабость;
• потемнение мочи, возможны примеси крови;
• резкая боль в животе, вздутие, отсутствие аппетита;
• частая и обильная рвота;
• многократный жидкий стул.

Рвота и понос способны сильно обезводить организм, потому необходимо своевременно предпринять все меры по восстановлению водно-электролитного баланса.

Действие активированного угля

Активированным углем лечить ротавирус недостаточно. Потребуются регидратационные препараты, противодиарейные лекарства и пробиотики для дальнейшего восстановления утраченной кишечной микрофлоры.

Иногда понос у больного ротавирусной инфекцией не останавливают, так как возбудитель вымывается из организма с каловыми массами. Провоцировать рвоту бесполезно – ротавирус размножается в кишечнике.

В лечении ротавируса активированный уголь является активным сорбентом и разрешен как ребенку, так и взрослому. Проникая в кишечник, активированный уголь свяжет и начнет выведение не только самого вируса, но и продуктов его метаболизма в организме.

Как принимать препарат

При ротавирусе у ребенка активированный уголь в возрасте от трех лет принимают так: 3 таблетки трижды в день, при наличии острой диареи нужно увеличить дозировку до 4 таблеток четырежды в день.

Детям от трех до семи лет назначают пять грамм трижды в день, до 14 лет – семь грамм трижды в день. Для детей рекомендуется приготовление суспензии. Нужно количество таблеток измельчают и растворяют в стакане чистой воды без добавок и газа. Кроме того, ребенку с ротавирусом необходимо обеспечить обильное питье.

Взрослым при ротавирусе принимать активированный уголь показано в дозировке от одной до трех таблеток 3-4 раза в сутки. При сильно выраженной симптоматике – в форме суспензии для восстановления водно-электролитного баланса.

При остром отравлении рекомендуется готовить водную суспензию активированного угля для взрослых из расчета 25 грамм на 1-2 стакана воды. Такую же суспензию активированного угля можно применять для промывания желудка, но в случае с ротавирусом эта процедура малоэффективна. Врач может рекомендовать аналоги при лечении ротавируса: Смекта, Энтеросгель, Полисорб.

Лечение ротавируса и отравления

В терапии отравления и ротавируса существуют явные отличия, которые важно знать, чтобы не навредить при лечении:

• при отравлении выполняют промывание и ставят клизму, при ротавирусе полезна только последняя процедура;
• в лечении ротавируса не всегда останавливают понос, так как вирус выводится с каловыми массами – потому активированный уголь назначают при остром развитии болезни;
• не рекомендуется сбивать температуру, если она ниже 38 ^оС – при этой и более высокой температуре вирус погибает.

Прием обезболивающих и спазмолитических средств будет назначен на усмотрение лечащего врача. Лечение проводит терапевт, инфекционист или гастроэнтеролог.

Источники:

Видаль: https://www.vidal.ru/drugs/activated_charcoal__23846
ГРЛС: https://grls.rosminzdrav.ru/Grls_View_v2.aspx?routingGuid=7e933480-3f46-4b66-bce5-240a95414f91&t=

Нашли ошибку? Выделите ее и нажмите Ctrl + Enter

Лечение ротавирусных инфекций у детей в Приморском районе СПб

В результате попадания в желудочно-кишечный тракт различных патогенных микроорганизмов, у детей любого возраста возможно развитие ротавирусной инфекции, появление которой грозит осложнениями и требует немедленного осмотра врачом с последующим назначением необходимой терапии. 

Симптомы ротавирусных инфекций у детей

У детей в возрасте 1-2 лет ротавирусная инфекция начинает проявляться с отсутствием аппетита и общего упадка сил и присутствием следующих симптомов: 

• Общий упадок сил и отсутствие аппетита; 
• Малыши старше 2-х лет жалуются на частые приступы головной боли;  
• Температура тела может достигать 39 градусов, которая снижается через 3-4 дня за исключением тяжелого течения заболевания, в случае которого высокая температура может продержаться до 7 дней.  
• Приступы диареи, при которых опорожнение кишечника может происходить до 10 раз в день и приводят к обезвоживанию организма; 
• Боли в области живота, которые часто сопровождаются рвотой.  

Диагностика и лечение ротавирусных инфекций у детей  

Специалисты клиники “Основа Дети” при постановке диагноза ротавирусной инфекции у детей обращают внимание родителей на своевременность обращения к врачу, что позволяет значительно ускорить выздоровление маленького пациента. После подробного опроса малыша и родителей доктор назначит необходимые лабораторные исследования: 

• Анализ на ротавирус; 
• Копрограмма; 
• Электромикроскопия; 

В качестве дополнительных мер проводятся микроскопическое исследование кала и общий анализ мочи и кала. После получения результатов диагностики наш специалист назначит все необходимые терапевтические мероприятия. Факторы ранней диагностики и своевременно назначенное лечение специалистами клиники “Основа Дети” гарантируют успешное и своевременное излечение малыша. 

Лечение

При ротавирусной инфекции назначаются энтеросорбенты (активированный уголь, комбинированные препараты), ферменты (панкреатин), пробиотики (лактобактерии, бифидобактерии), пребиотики (лактулоза). Необходима лечебная щадящая диета, соответствующая форме течения заболевания и возрасту маленького пациента. В период обострения болезни из пищи рекомендуется исключить молочные продукты. 

Основы профилактики 

Самое главное мероприятие по профилактике ротавирусной инфекции у детей – полное соблюдение личной гигиены, привить ребенку привычку мыть руки перед едой и после прогулки на улице. Фрукты и овощи употреблять только после тщательного их мытья чистой водой. Одна из главных рекомендаций врачей – закаливание ребенка и укрепление его иммунитета.  

Запись на прием в клинику “Основа Дети” 

Если вашего малыша беспокоят неприятные симптомы, связанные с подозрением на ротавирусную инфекцию, не откладывайте визит к нашему специалисту, просто позвоните или напишите в клинику “Основа Дети”, и мы примем в любое удобное для вас время. 

Родители сообщили о массовом заболевании детей из Петербурга в лагере под Анапой

Фото: прокуратура Анапы

Вспышка ротавирусной инфекции произошла в лагере “Зори Анапы”, где отдыхают маленькие петербуржцы. Их родители утверждают, что детей плохо кормят и не лечат.

На территории лагеря прорвало канализацию из-за непрерывных дождей, сообщает 78.ru со ссылкой на маму одной из пострадавших девочек.

“Им не дают никаких лекарств! Дети обращаются к врачу, а им только активированный уголь дают в течение трёх дней! Питание отвратительное, не соответствующее питанию при кишечных заболеваниях: жирное, жареное, пельмени!” — возмущается родительница. При этом болеющие дети остаются в комнатах вместе со здоровыми.

Мобильные телефоны, по утверждению родителей, у детей забирает администрация.

Смена заканчивается 26 августа, в этот день дети должны поехать домой. Как сложится ситуация в связи с состоянием ребят, их родители пока не знают.

По данным местной прокуратуры, болеют 10 детей из 497 в лагере. Остальные с жалобами не обращались, утверждают в надзорном ведомстве. Тем не менее, администрации лагеря поручили организовать медицинский осмотр всех детей. А деревянные настилы, которые положили из-за затопления, потребовали заменить. Надзорное ведомство публикует фото из лагеря, на котором видно затопленные территории, а прокуроры стоят в резиновых сапогах.

Роспотребнадзор должен обследовать территорию и помещения здравницы на предмет соблюдения требований санитарно-эпидемиологической безопасности и проверить питание. Воду с территории лагеря будут откачивать пожарные машины.

Петербуржцы не первый раз жалуются на организацию отдыха на черноморском побережье. В середине августа в Анапе подтопило санаторий “Черноморская зорька”, где находились дети из Петербурга, в том числе инвалиды-колясочники. Отдыхающие остались без горячей воды, электричества и столовой. Поднимался вопрос об их эвакуации, однако впоследствии ситуация стабилизировалась.

Выделите фрагмент с текстом ошибки и нажмите Ctrl+Enter

Исследования in vitro по использованию глины, глинистых минералов и древесного угля для адсорбции ротавируса крупного рогатого скота и коронавируса крупного рогатого скота

Vet Microbiol. 1998 Oct 1; 63 (2): 137–146.

KJ Clark

^a Департамент ветеринарной патобиологии и общественного здравоохранения, Колледж ветеринарной медицины, Станция колледжа Техасского университета A&M, Техас 77845 США

AB Sarr

^b Департамент ветеринарной анатомии и общественного здравоохранения, , Texas A&M UniversityCollege Station, TX 77845USA

P.G Grant

^b Департамент ветеринарной анатомии и общественного здравоохранения, Колледж ветеринарной медицины, Техасский университет A&M, College Station, TX 77845, США

TD Phillips

^b Департамент ветеринарной анатомии и общественного здравоохранения, Колледж ветеринарной медицины, Техас A&M UniversityCollege Station, TX 77845USA

GN Woode

^a Департамент ветеринарной патобиологии и общественного здравоохранения, Колледж ветеринарной медицины, Техасский колледж A&M University Station, TX 77845 США

^a Департамент ветеринарной патобиологии Ветеринарная медицина, Станция колледжа Техасского университета A&M, TX 77845USA

^b Департамент ветеринарной анатомии и общественного здравоохранения, Колледж ветеринарной медицины, Станция колледжа Техасского университета A&M, TX 77845USA

^* Автор, отвечающий за переписку. Тел .: + 1-409-845-5941; факс: + 1-409-845-9231; e-mail: [email protected]

Поступила в редакцию 26 января 1998 г .; Принято 6 июля 1998 г.

Copyright © 1998 Elsevier Science B.V. Все права защищены.

С января 2020 года компания Elsevier создала ресурсный центр COVID-19 с бесплатной информацией на английском и китайском языках о новом коронавирусе COVID-19. Ресурсный центр COVID-19 размещен на сайте публичных новостей и информации компании Elsevier Connect. Elsevier настоящим разрешает сделать все свои исследования, связанные с COVID-19, которые доступны в ресурсном центре COVID-19, включая этот исследовательский контент, сразу же в PubMed Central и других финансируемых государством репозиториях, таких как база данных COVID ВОЗ с правами на неограниченное исследование, повторное использование и анализ в любой форме и любыми средствами с указанием первоисточника.Эти разрешения предоставляются Elsevier бесплатно до тех пор, пока ресурсный центр COVID-19 остается активным.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Abstract

Ротавирусы являются ведущей причиной, а коронавирусы – основными причинами острого гастроэнтерита у молодняка различных видов млекопитающих и птиц. Несмотря на многочисленные испытания и десятилетия исследований, вакцины имеют ограниченную эффективность, особенно для телят. В качестве альтернативного метода борьбы с инфекцией мы исследовали противовирусные агенты широкого спектра, которые не являются дискриминационными среди различных вирусов.Этот отчет включает тестирование различных адсорбентов, включая древесный уголь, глину и глинистые минералы, для адсорбции ротавируса и коронавируса in vitro. Результаты показали, что все адсорбирующие агенты обладали хорошей или отличной способностью адсорбировать ротавирус и отличной способностью адсорбировать коронавирус. Процент адсорбции колебался от 78,74% до 99,89% для ротавируса и 99,99% для коронавируса; в то время как песок (отрицательный контроль) составлял <0,01%. Присутствовало связывание с высоким сродством, что было определено по низкому проценту десорбции (0.06–3.09%). Однако связанный с адсорбентом вирусный комплекс сохранял и, возможно, фактически усиливал инфекционность.

Ключевые слова: Глина, древесный уголь, вирусные адсорберы, ротавирус, коронавирус

1. Введение

Гастроэнтерит – это клинический термин, обозначающий острое диарейное заболевание; однако на практике более правильным термином является энтерит, поскольку инфекции обычно ограничиваются тонким и толстым кишечником. Гастроэнтерит поражает в первую очередь неонатальных, но также и взрослых животных, птиц и людей и является основной причиной болезней и часто смерти во всем мире.Вирусы, бактерии, простейшие, токсины и тяжелые металлы относятся к числу не связанных между собой причин заболевания, но также важную роль играют экологические, иммунологические и пищевые факторы. На сегодняшний день вирусы, которые вовлечены в этот комплекс заболеваний, включают аденовирусы, астровирусы, калицивирусоподобные агенты, коронавирусы, парвовирусы, ротавирусы и торовирусы. Было показано, что вирусы являются одними из наиболее распространенных агентов, вызывающих диарею у детей, телят ( ^{House, 1978 ; Woode and Crouch, 1978 ; Tzipori, 1981 , Tzipori, 1985 ; Bern and Glass, 1994} ) и жеребят ( ^{Dwyer et al., 1991} ).

В настоящее время ротавирусы являются ведущей причиной, а коронавирусы – основными причинами острого гастроэнтерита у молодых представителей различных видов млекопитающих и птиц. Отрасль животноводства несет большое финансовое бремя из-за гибели животных и затрат, связанных с профилактикой и лечением заболеваний в результате заражения этими двумя вирусами. При эпизоотических инфекциях ротавируса показатели заболеваемости могут достигать 80–100%, и хотя показатели смертности обычно находятся в диапазоне 0–5%, они могут достигать 60%.Уровень смертности, вероятно, зависит от вирулентности штамма вируса, других присутствующих патогенов, а также фенотипа и генотипа хозяина. Применение жидкостной заместительной терапии может значительно снизить или полностью исключить показатели смертности ( ^{Bywater and Woode, 1980 ; Black et al., 1981 ; Bywater, 1983} ).

Гастроэнтерит, вызванный, главным образом, ротавирусной и коронавирусной инфекциями, но также и другими вирусами, оказывает значительное экономическое влияние на сельское хозяйство.Тем не менее, несмотря на многочисленные испытания и десятилетия исследований, до сих пор нет эффективных вакцин против тех или иных вирусных агентов, вызывающих гастроэнтерит. Хотя исследовательские усилия казались многообещающими, полевые испытания вакцины продолжают давать неадекватные результаты или полностью терпят неудачу ( ^{de Leeuw et al., 1980 ; Myers and Snodgrass, 1982 ; Snodgrass et al., 1982 ; Waltner-Toews et al., 1985 ; Yuan et al., 1998} ). Неадекватность ротавирусных вакцин можно частично объяснить сложным антигенным разнообразием ротавирусов группы А ( ^{Woode et al., 1983 , Woode et al., 1987 ; Zheng et al. , 1989 ; Hardy et al., 1991 ; Parwani et al., 1993 ; Xu and Woode, 1993} ), а также сомнениями относительно того, какой из двух основных антигенов, VP4 или VP7 является наиболее важным антигеном, вызывающим иммунную защиту ( ^{Ward et al., 1993 ; Xu et al., 1993} ). Кроме того, иммунизация новорожденных модифицированной живой ротавирусной или коронавирусной вакциной затруднена из-за вмешательства колостральных антител, которые обладают нейтрализующей активностью и эффективно блокируют иммунный ответ хозяина ( ^{Waltner-Toews et al., 1985,} ). После инфицирования единственным доступным лечением является поддерживающая терапия, например, восполнение жидкости. Таким образом, вирусный гастроэнтерит в настоящее время в значительной степени не контролируется.

Из-за вышеуказанных проблем и большого количества кишечных патогенов необходимо изучить альтернативные методы борьбы с инфекцией.Одна из наших целей состояла в том, чтобы исследовать методы широкого спектра, которые не являются дискриминационными среди различных серотипов и штаммов вирусов.

Анекдотические данные показали, что глины веками включались в диеты многими различными обществами для предотвращения желудочно-кишечных заболеваний, а глины использовались для лечения различных заболеваний, включая абсцессы, угри, аллергии, артрит, головные боли и опоясывающий лишай ( ^{Abehsera, 1979,} ). Совсем недавно новый подход был направлен на использование глин и глинистых минералов для изменения биодоступности токсинов.Было обнаружено, что гидратированная алюмосиликатная глина натрия-кальция (HSCAS) связывает афлатоксины и при добавлении в корм значительно снижает побочные эффекты афлатоксина у цыплят леггорна и бройлеров ( ^{Phillips et al. , 1988,} ). Также было показано, что различные глины адсорбируют и инактивируют термолабильные (LT) энтеротоксины Escherichia coli и энтеротоксины холерного токсина (CT) Vibrio cholerae , который недавно был рассмотрен ( ^{Ramu et al., 1997} ). ).Есть также свидетельства адсорбции вируса на глине; наиболее изученные вирусы включают полиовирус, вирус энцефаломиокардита и реовирус ( ^{Kelly et al., 1961 ; Schaub and Sagik, 1975 ; Taylor et al., 1981 ;} 9000tz Lipson, 1983 ^{; Престон и Фарра, 1988} ).

Эта статья является первой из двух, исследующих использование неспецифических методов для подавления инфекционности ротавируса и коронавируса.

2. Материалы и методы

2.2. Адсорбирующие материалы

Различные адсорбирующие материалы, которые были протестированы, включали: глинозем-бемит (оксигидроксид алюминия), аттапульгит (палигорскит), древесный уголь, каолинит, ману, мускувит (слюда), различные смектиты: кислотно-активированная глина (X-4994-H) , активированный кислотой полквилл, гидратированный алюмосиликат натрия-кальция (HSCAS I, HSCAS II и HSCAS III), а также бентонит натрия и два цеолита: клиноптилолит и морденит. Песок имеет низкий коэффициент ионного обмена и небольшую площадь поверхности, что приводит к низкой адсорбции вирусов или ее отсутствию, поэтому он использовался в качестве отрицательного контроля для всех экспериментов.Песок был промыт перед использованием, и песок, а также все адсорбирующие материалы были автоклавированы перед использованием.

2.3. Анализы адсорбции

Эксперименты были разработаны для проверки способности различных адсорбирующих материалов прочно связывать ротавирус крупного рогатого скота и коронавирус. Ротавирус крупного рогатого скота был выбран в качестве модели для экспериментальных анализов и был протестирован несколько раз со всеми адсорбирующими материалами. Коронавирус крупного рогатого скота был протестирован на выбранных материалах; различные сорбенты были проверены, в то время как HSCAS I и II неоднократно тестировались на их способность связывать BCV.HSCAS I и II были протестированы более тщательно из-за их химической селективности, которая хорошо задокументирована ( ^{Phillips et al. , 1995} ).

Для каждого анализа адсорбции 0,1 г глины взвешивали в центрифужной пробирке, добавляли 5 мл среды и затем уравновешивали в течение 5 мин. Вирус (с титром 10 ⁵ –10 ⁶ иммунофлуоресцентных фокусообразующих единиц / мл) добавляли к каждому образцу глины, чтобы получить конечную концентрацию глины 1% мас. / Об. В каждом эксперименте использовали два контроля: (1) среда плюс вирус и (2) промытый песок плюс вирус.Образцы инкубировали 15 мин при комнатной температуре на ротаторе Glas-col при 70 об / мин. После этого все образцы центрифугировали при относительной центробежной силе (RCF) 700 × г в течение 10 мин. Затем супернатанты каждого образца переносили в пробирки с защелкивающимися крышками (по одному образцу на пробирку). Образец глины был зарезервирован для исследований десорбции и инфекционности. Все супернатанты титровали от 10 ^-1 до 10 ^-3 в бессывороточной (SF) среде. Исходные супернатанты и каждое из их разведений проверяли на инфекционность.

2.4. Анализы десорбции

Осадок глины, который был зарезервирован для эксперимента по десорбции, ресуспендировали в SF-среде до конечной концентрации глины 1% мас. / Об. Образец хорошо перемешивали и инкубировали при комнатной температуре в течение 1 ч на ротаторе при 70 об / мин. (Если исследование инфекционности должно было быть выполнено на образце глины, аликвоту глины, суспендированной в среде, удаляли после инкубации.) Образец центрифугировали при RCF 700 × g в течение 10 мин. Затем супернатант переносили в пробирку с защелкивающимся колпачком и титровали от 10 ^-1 до 10 ^-3 в SF / среде и анализировали на инфекционность.

2.5. Анализы инфекционности комплекса глина / вирус

Суспендированные образцы связанного с глиной вируса или комплекса глина / вирус, оставшиеся после экспериментов по адсорбции и десорбции, использовали для тестирования инфекционности. Аликвоту образца глины удаляли и помещали в пробирку с защелкивающимся колпачком, а затем титровали от 10 ^-1 до 10 ^-3 в SF / среде. Эти образцы глины были проанализированы на инфекционность.

Разведения вируса инокулировали (100 мкл / лунка, 3 лунки / разведение) в планшеты для микротитрования 5-7-дневных клеток BSC-1.Планшеты для микротитрования инкубировали при 37 ° C в течение 20 часов, а затем фиксировали 80% ацетоном в воде (-20 ° C) в течение 10 минут; ацетон удаляли и планшеты сушили в течение приблизительно 3 часов. Планшеты регидратировали в PBS перед процедурой окрашивания, состоящей из двух частей. Планшеты окрашивали в течение 1 ч приблизительно 0,03 мл / лунку моноклонального антитела B223 E4 (Mab E4), которое было преобразовано в эпитоп на VP6 ротавируса B223. (Mab E4 разбавляли 1:25 в PBS, pH 7,2). Планшеты промывали PBS и затем окрашивали приблизительно 0.03 мл / лунка меченных флуоресцеином аффинно очищенных антител козьего антимышиного IgG (GAM) в течение 1 ч при комнатной температуре, а затем промывают PBS. (GAM разводили 1:50 в PBS.) Клетки, меченные флуоресцеином, просматривали с помощью инвертированного УФ-микроскопа Leitz. Титры рассчитывали путем подсчета флуоресцентных клеток на лунку или иммунофлуоресцентных фокусообразующих единиц. Методология, описанная Ридом и Мюнчем, была использована для определения конечной точки 50% ( ^{Reed and Muench, 1938,} ).

2.6. Анализ зубного налета

Разведения вируса инокулировали (1 мл / лунка, 2 лунки / разведение) в шестилуночные планшеты с 5-дневными клетками BSC-1.После 60 мин абсорбции при 37 ° C разведения вируса удаляли и в каждую лунку добавляли 2 мл питательного агара (равные объемы 2% агара и MEM двойной концентрации). Затем планшеты инкубировали при 37 ° C в течение 3-4 дней. После инкубации планшеты фиксировали 10% формалином не менее 1 часа. Формалин и агар удаляли, и клетки немедленно окрашивали кристаллическим фиолетовым. Титры рассчитывали путем подсчета количества бляшек при каждом разведении.

2.7. Расчеты

Рассчитывали процент адсорбированного вируса, десорбированного вируса и инфекционность вируса, связанного с глиной. В приведенных ниже формулах использовались следующие символы:

T _d 9024

% Адсорбированный вирус = Tv − TaTv × 100

% Десорбированный вирус = TdTv − Ta × 100

% Инфекционная способность комплекса глина / вирус = TiTv − Ta × 100

3.Результат

3.1. Анализы адсорбции и десорбции

Различные адсорбционные материалы были тщательно протестированы с использованием ротавируса крупного рогатого скота. Было обнаружено, что древесный уголь, бентонит натрия, аттапульгит, каолинит и HSCAS III адсорбируют более 99,0% ротавируса крупного рогатого скота, в то время как другие исследованные материалы имеют адсорбционную способность от менее 99% до более 78% ( ). Древесный уголь, бентонит натрия, аттапульгит, каолинит, морденит, слюда, HSCAS III были проверены на их адсорбционную способность к коронавирусу крупного рогатого скота; их средний процент адсорбции составлял 99.99%. HSCAS I и HSCAS II прошли более обширные испытания из-за их хемоселективности, и их средний процент адсорбции составил 99,99 ± 0,0% и 99,98 ± 0,01% соответственно.

Таблица 1

Результаты анализов адсорбции, десорбции и инфекционности NCDV

T v	Титр вируса
T a	Титр супернатанта из исследования адсорбции
Титр супернатанта из исследования десорбции × 10 (коэффициент разведения)
T i	Титр исследуемого комплекса глины / вируса

9030 Инфекционность

---

H AS41

Образец	Адсорбция			Десорбция
	Среднее значение (%)	n	Стандартная ошибка	Среднее значение (%)	n	Стандартная ошибка	Среднее значение (%)			Среднее значение (%)			Среднее значение (%)	ошибка
Уголь	99. 89	6	0,04	0,06	5	0,04	21,24	3	6,46
Натрий бентонит	99,83	6,46	276,17	3	91,04
Аттапульгит	99,76	7	0,04	0,07	5	0,04		3
Каолинит	99,16	7	0,23	0,62	5	0,35	394,94	3	39,89	X	III 39,89	X	7	0,62	0,81	5	0,61	66,59	3	5,86
Кислотно-активированная глина (X-4994-H)	98,22	13	2,34	4	0,36	626,78	3	75,23
Мускувит	98,14	7	0,63	2353,0 156,92
Клиноптилолит	97,97	6	0,73	2,72	4	1,67	573,51	3
10	1,88	0,57	6 ​​	0,4	476,77	3	49,72
Перу Глина	96,25	2		3	96,25	2	382,4	3	42,37
HSCAS II	94,95	11	1,85	0,61	6 ​​	0,21	40 903,735 9142
Кислотно-активированный полквилл	94,87	3	1,3	2,76	3	0,44	300,78	3	11,31			11,31											2,74	4	1,42	498,31	3	33,25
Бемит глинозема	78,74	7	8,16	2. 17	5	0,57	512,54	3	97,18

Песок использовался в качестве отрицательного контроля во всех анализах адсорбции. Поскольку песок не адсорбировал ни один из вирусов, он не исследовался на десорбцию или инфекционность. Все испытанные адсорбенты обладали высокой аффинностью связывания с обоими вирусами, что было определено по низкому проценту десорбции. Средний процент десорбции колебался от 0,06% до 3,09% для ротавируса крупного рогатого скота, при этом древесный уголь и аттапульгит имели самый низкий процент десорбции ().Анализы десорбции коронавируса крупного рогатого скота были выполнены на хемиселективных веществах, HSCAS I и HSCAS II; Десорбция (0,0%) не была обнаружена нашим анализом.

3.2. Исследования инфекционности комплекса адсорбент / вирус

Поскольку ротавирус крупного рогатого скота и коронавирус связаны с различными адсорбирующими материалами, включая HSCAS I и II, с высоким сродством, оба были протестированы на инфекционность в связанном состоянии. Однако, как показали анализы инфекционности, ни один из вирусов не был инактивирован адсорбирующими материалами.Согласно методу микротитрования, по крайней мере, некоторая инфекционность оставалась во всех образцах обоих вирусов. Средний процент инфекционности комплекса глина / ротавирус варьировал от 21,24% до 626,78%, причем древесный уголь и HSCAS III имели самый низкий процент инфекционности (). Как и в случае с другими анализами с использованием коронавируса, были протестированы только хемиселективные адсорбенты (HSCAS I и HSCAS II). Комплексы HSCAS I / коронавирус и HSCAS II / коронавирус сохранили 100% инфекционность.

Метод анализа бляшек использовали для сравнения результатов инфекционности ротавируса и HSCAS II с результатами микротитрования.Процент инфекционности HSCAS II в анализе бляшек составлял 337,62% по сравнению со средним значением 299,77% в анализе с микротитрованием. Результаты анализа налета подтвердили точность данных микротитрования.

4. Обсуждение

Мы изучили различные неорганические адсорбирующие материалы и обнаружили, что все испытанные адсорбирующие агенты обладают хорошей (адсорбция 70–90%) и превосходной (адсорбция> 90%) способностью адсорбировать ротавирус крупного рогатого скота и отличной способностью. адсорбции коронавируса крупного рогатого скота, оба с высоким сродством.Мы охарактеризовали высокое сродство связывания как адсорбирующий материал, который имеет высокий процент адсорбции вируса и низкий процент десорбции. Структура адсорбирующих материалов очень сложна, и связь связывания полностью не изучена. Однако диаметр частиц ротавируса и коронавируса составляет 60–80 и 60–220 нм, соответственно, что значительно больше, чем поры частиц адсорбирующего материала. Следовательно, вирионы должны быть прикреплены к внешней поверхности каждой частицы адсорбента.Кроме того, мы полагаем, что это взаимодействие является неспецифическим связыванием белка. Это подтверждается связыванием вирусов, включая ротавирус, коронавирус, полиовирус, реовирус и энтеровирус, энтеротоксины CT и LT, а также казеин, который, как было обнаружено, блокирует адсорбцию энтеротоксинов CT и LT, что было рассмотрено ранее ( ^{Ramu et al. , 1997} ).

Адсорбирующие материалы кажутся многообещающими в качестве метода адсорбции вирусов из раствора и могут быть полезны как таковые при фильтрации водных систем.Они могут иметь явное преимущество в предотвращении инфекции и / или заболевания, поскольку большинство агентов, вызывающих гастроэнтерит, включая ротавирус и коронавирус, обычно передаются перорально, обычно через зараженную пищу и воду. Согласно нашим исследованиям, адсорбирующие материалы позволяют от 1% до 10% вирионов оставаться в растворе. В результате они могут не устранить инфекцию, но могут устранить заболевания, передаваемые через воду, за счет эффективного снижения инфекционной дозы более чем на 90%. Наша гипотеза заключалась в том, что профилактическое использование адсорбентов (ежедневное кормление адсорбентами зерном) могло уменьшить кишечные вирусные инфекции за счет связывания с вирусными патогенами в кишечнике и, таким образом, снижения инфекционной дозы.Однако после завершения исследований инфекционности у нас нет поддержки этой гипотезы. Данные об инфекционности комплекса адсорбент / вирус (по сравнению с одним вирусом) указывают на то, что комплексы не только заразны, но и многие комплексы более заразны, чем первоначально был вирус. Эти результаты соответствуют предыдущим исследованиям, которые показали, что устойчивость реовирусов и энтеровирусов сохраняется и часто усиливается, когда они связаны с глиной и глинистыми минералами ( ^{Schaub and Sagik, 1975 ; Lipson and Stotzky, 1984} ).Возможна ошибка при титровании твердого вещества в жидкости; однако данные об инфекционности непротиворечивы и воспроизводимы. Анализ зубного налета считается более чувствительным методом анализа (0,5–1 логарифмическое разведение), чем анализ микротитрования. В этих исследованиях в основном использовался микротитровальный анализ, поскольку он эффективен и экономит время и деньги по сравнению с методом анализа бляшек. Результаты микротитрования были подтверждены анализом бляшек с использованием ротавируса крупного рогатого скота. По нашему мнению, адсорбирующие материалы увеличили инфекционность вируса.Одна из возможностей объяснить это наблюдение – улучшенное представление вируса клеткам. Предыдущее исследование ( ^{Bridger and Woode, 1976,} ) показывает, что существует два типа частиц ротавируса телят: инфекционные и неинфекционные (или малоинфекционные). Полный вирион ротавируса состоит как из внутренней, так и из внешней белковой оболочки и очень заразен, в отличие от неполного вириона, у которого отсутствует внешняя белковая оболочка и который не является инфекционным. Внешняя белковая оболочка состоит из вирусных белков 7 и 4 (VP7 и VP4), которые отвечают за связывание вириона с клеткой, что необходимо для инфекции и, следовательно, репликации.Бриджер и Вуд обнаружили, что отношение числа частиц к инфекционности составляло 7 × 10 ² : 1 для полного вириона по сравнению с 1 × 10 ⁶ : 1 для неполного вириона. Наша гипотеза о более эффективном представлении вируса заключается в том, что увеличенная доля этих неполных частиц попадает в клетки в результате поглощения / фагоцитоза адсорбирующих материалов и, таким образом, переноса вируса в клетку вместе с ними. Если это так, то это может оказаться методом культивирования вирусов, которые трудно размножать, поскольку они состоят из значительной части неполных вирионов.Конечно, трудно предположить, какой эффект это окажет in vivo, но возможно, что диета может усилить инфекцию. Дальнейшая работа включает разделение полных и неполных вирионов и повторение исследований инфекционности, изучение причин инфекционности комплексного вирусного / адсорбирующего материалов и методов значительного снижения уровней инфекционности, а также изучение механизмов концентрации вирусов в водных системах.

Благодарности

Это исследование финансировалось за счет гранта Техасской программы передовых технологий, номер гранта 999902-004.

Ссылки

• Abehsera, M., 1979. Глина лечит современные недуги. В: Anonymous (Ed.), The Healing Clay vol. 2. Swan House Brooklyn, NY, 2, pp. 83–109
• Bern, C., Glass, R.I., 1994. Влияние диарейных заболеваний во всем мире. В: Капикян А.З. (Ред.), Вирусные инфекции желудочно-кишечного тракта. Марсель Деккер, Нью-Йорк, т. 2, pp. 1-26
• Блэк Р.Э., Мерсон М.Х., Тейлор П.Р., Йолкен Р.Х., Сак Д.А. Глюкоза против сахарозы в растворах для пероральной регидратации для младенцев и детей раннего возраста с ротавирусной диареей.Педиатрия. 1981; 67: 79–83. [PubMed] [Google Scholar]
• Бриджер Дж. К., Вуд Г. Н. Характеристика двух типов частиц ротавируса телят. J. Gen. Virol. 1976; 31: 245–250. [PubMed] [Google Scholar]
• Байуотер Р.Дж. Лечение диареи: восполнение жидкости и альтернативы. Анна. Речь. Вет. 1983; 14: 556–560. [PubMed] [Google Scholar]
• Байуотер Р.Дж., Вуд Г.Н. Замена жидкости полости рта составом электролита глюкозы глицина у E. coli и ротавирусной диареи у свиней.Вет. Рек. 1980; 106: 75–78. [PubMed] [Google Scholar]
• de Leeuw P.W., Ellens D.J., Talmon F.P., Zimmer G.N., Kommerij R. Ротавирусные инфекции у телят: эффективность оральной вакцинации в эндемически инфицированных стадах. Res. Вет. Sci. 1980; 29: 142–147. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Dwyer, RM, Powell, DG, Roberts, W., Donahue, M., Lyons, ET, Osborne, M., Woode, G., 1991. Исследование этиологии и борьбе с инфекционной диареей среди жеребят в центральном Кентукки.Proc. 36-е ежегодное собрание. AAEP, стр. 337–355
• Fernelius A.L., Ritchie A.E., Classick L.G., Norman J.O., Mebus C.A. Адаптация клеточной культуры и распространение реовирусоподобного возбудителя диареи телят из полевой вспышки в Небраске. Arch. Virusforsch. 1972; 37: 114–130. [PubMed] [Google Scholar]
• Hardy M.E., Woode G.N., Xu Z., Gorziglia M. Сравнительный анализ аминокислотной последовательности VP4 для штаммов ротавируса крупного рогатого скота VP7 серотипа 6 NCDV, B641 и UK. J. Virol. 1991; 65: 5535–5538.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• House J.A. Экономическое влияние ротавируса и других возбудителей неонатальных заболеваний животных. Варенье. Вет. Med. Доц. 1978; 173: 573–576. [PubMed] [Google Scholar]
• Келли С., Сандерсон В.В., Ридл С. Удаление энтеровирусов из сточных вод с помощью активного ила. J. Загрязнение воды. Control Fed. 1961; 33: 1056–1062. [Google Scholar]
• Липсон С.М., Стоцки Г. Адсорбция реовируса на глинистые минералы: влияние катионообменной емкости, насыщенности катионов и площади поверхности.Прил. Environ. Microbiol. 1983; 46: 673–682. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Липсон С.М., Стоцки Г. Влияние белков на адсорбцию реовирусов на глинистые минералы. Прил. Environ. Microbiol. 1984. 48: 525–530. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Mebus C.A., Stair E.L., Rhodes M.B., Twiehaus M.J. Неонатальная диарея теленка: распространение, аттенуация и характеристики агента, подобного коронавирусу. Являюсь. J. Vet. Res. 1973; 34: 145–150. [PubMed] [Google Scholar]
• Майерс Л.Л., Снодграсс Д. Титры антител к молозиву и молоку у коров, вакцинированных модифицированной живой ротавирусно-коронавирусной вакциной. Варенье. Вет. Med. Доц. 1982; 181: 486–488. [PubMed] [Google Scholar]
• Парвани А.В., Хусейн Х.А., Розен Б.И., Лукчелли А., Наварро Л., Саиф Л.Дж. Характеристика полевых штаммов ротавирусов крупного рогатого скота группы А с использованием генерируемых полимеразной цепной реакцией G- и P-типоспецифичных кДНК-зонды. J. Clin. Microbiol. 1993; 31: 2010–2015. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Филлипс Т.Д., Кубена Л.Ф., Харви Р. Б., Тейлор Д. Р., Хайдельбау Н. Д. Гидратированный алюмосиликат натрия-кальция: сорбент с высоким сродством к афлатоксину. Пульт. Sci. 1988. 67: 243–247. [PubMed] [Google Scholar]
• Филлипс Т.Д., Сарр А.Б., Грант П.Г. Селективная хемосорбция и детоксикация афлотоксинов филлосиликатной глиной. Природные токсины. 1995; 3: 204–213. [PubMed] [Google Scholar]
• Престон Д.Р., Фарра С.Р. Активационная термодинамика адсорбции вирусов твердыми телами. Прил. Environ. Microbiol.1988; 54: 2650–2654. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Ramu J., Clark K., Woode GN, Sarr AB, Phillips TD Адсорбция холерных и термолабильных энтеротоксинов Escherichia coli различными адсорбентами: исследование in vitro . J. Защита пищевых продуктов. 1997; 60: 1–5. [PubMed] [Google Scholar]
• Рид И.Дж., Мюнч Х. Простой метод оценки пятидесятипроцентных конечных точек. Являюсь. J. Hyg. 1938; 27: 493–497. [Google Scholar]
• Schaub S.A., Sagik B.P. Ассоциация энтеровирусов с естественными и искусственно введенными коллоидными твердыми веществами в воду и инфекционность вирионов, связанных с твердыми веществами.Прил. Microbiol. 1975. 30: 212–222. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Шарпи Р.Л., Мебус К.А., Басс Е.П. Характеристика диарейного коронавируса теленка. Являюсь. J. Vet. Res. 1976; 37: 1031–1041. [PubMed] [Google Scholar]
• Snodgrass D.R., Nagy L.K., Sherwood D., Campbell I. Пассивный иммунитет при диарее телят: вакцинация антигеном K99 энтеротоксигенного Escherichia coli и ротавирусом. Заразить. Иммун. 1982; 37: 586–591. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Storz J., Herrler G., Snodgrass D.R., Hussain K.A., Zhang X.M., Clark M.A., Rott R. Моноклональные антитела различают гемагглютинирующую и разрушающую рецепторы активность коронавируса крупного рогатого скота. J. Gen. Virol. 1991; 72: 2817–2820. [PubMed] [Google Scholar]
• Тейлор Д.Х., Мур Р.С., Штурман Л.С. Влияние pH и состава электролита на адсорбцию полиовируса почвами и минералами. Прил. Environ. Microbiol. 1981; 42: 976–984. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Ципори С.Этиология и диагностика диареи телят. Вет. Рек. 1981; 108: 510–515. [PubMed] [Google Scholar]
• Ципори С. Относительная важность кишечных патогенов, поражающих новорожденных домашних животных. Adv. Вет. Sci. Комп. Med. 1985. 29: 103–206. [PubMed] [Google Scholar]
• Waltner-Toews D., Martin S.W., Meek A.H., McMillan I., Crouch C.F. Полевое испытание для оценки эффективности комбинированной вакцины против ротавируса и коронавируса / Escherichia coli у молочного скота. Жестяная банка. J. Comp.Med. 1985; 49: 1–9. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Ward R.L., McNeal M.C., Sander D.S., Greenberg H.B., Bernstein D.I. Иммунодоминантность белка нейтрализации VP4 ротавируса при защитных естественных инфекциях у детей раннего возраста. J. Virol. 1993. 67: 464–468. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Вуд Г.Н., Келсо Н.Э., Симпсон Т.Ф., Галл С.К., Эванс Л.Э., Бабюк Л. Антигенные отношения между некоторыми ротавирусами крупного рогатого скота: нейтрализация сыворотки и перекрестная защита у телят-гнотобиотов.J. Clin. Microbiol. 1983; 18: 358–364. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Вуд Г.Н., Чжэн С.Л., Розен Б.И., Найт Н., Горли Н.Э., Рамиг Р.Ф. Защита между различными серотипами ротавируса крупного рогатого скота у телят-гнотобиотиков: специфичность сывороточных антител и ответы копроантител. J. Clin. Microbiol. 1987; 25: 1052–1058. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Вуд Г.Н., Крауч К.Ф. Возникающие в природе и экспериментально индуцированные ротавирусные инфекции домашних и лабораторных животных.Варенье. Вет. Med. Доц. 1978; 173: 522–526. [PubMed] [Google Scholar]
• Сюй З., Харди М.Э., Вуд Г.Н., Рамиг Р.Ф. Иммунодоминантные нейтрализующие антигены зависят от штамма вируса во время первичного иммунного ответа телят на ротавирусы крупного рогатого скота. Вет. Microbiol. 1993; 35: 33–43. [PubMed] [Google Scholar]
• Сюй З., Вуд Г.Н. Исследования роли VP4 ротавируса G серотипа 10 (B223) в индукции гетерологичного иммунного ответа у телят. Вирусология. 1993; 196: 294–297. [PubMed] [Google Scholar]
• Юань Л., Kang S.Y., Ward L.A., To T.L., Saif L.J. Антитело-секретирующие клеточные ответы и защитный иммунитет, оцененные у свиней-гнотобиотиков, инокулированных перорально или внутримышечно инактивированным ротавирусом человека. J. Virol. 1998. 72: 330–338. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
• Zheng S.L., Woode G.N., Melendy D.R., Ramig R.F. Сравнительные исследования антигенных полипептидов видов VP4, VP6 и VP7 трех штаммов ротавируса крупного рогатого скота. J. Clin. Microbiol. 1989; 27: 1939–1945. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]

Патогенез ротавирусной диареи

Abstract

Rotavirus Диарея является основной причиной инфантильного гастроэнтерита во всем мире.Этот обзор в основном посвящен влиянию Rotavirus на транспорт кишечного эпителия и патофизиологическим механизмам, которые, как предполагается, лежат в основе секреции кишечной жидкости, вызываемой вирусом.

Ключевые слова: Ротавирус , кишечник, диарея

1. Введение

Острые диарейные заболевания по-прежнему являются серьезной проблемой здравоохранения во всем мире, вызывая 25–30% всех случаев смерти среди детей младше 5 лет. возраст в развивающихся странах ^〚1〛 .Диарейные заболевания также имеют важное значение для общественного здравоохранения в развитых странах и связаны со значительной заболеваемостью и значительным числом госпитализаций среди детей и пожилых людей. Острая диарея может быть вызвана множеством различных агентов, включая паразитов, бактерий и вирусов; последним из которых в последние годы уделялось значительное внимание. Этот обзор посвящен кишечной инфекции, вызванной Rotavirus , и, в частности, патофизиологическим механизмам, лежащим в основе секреции кишечной жидкости, вызываемой этим вирусом.

2. Общая характеристика ротавирусов

и ротавирусов кишечных инфекций

Ротавирус является ведущей причиной инфантильного гастроэнтерита во всем мире и является причиной примерно 20% смертей, связанных с диареей, у детей в возрасте до 5 лет ^〚2〛 . Ротавирусы были впервые идентифицированы у людей в 1973 году, когда в цитоплазме эпителиальных клеток двенадцатиперстной кишки были обнаружены характерные частицы, полученные от маленьких детей, поступивших в больницу для лечения острой диареи ^3〛 .Хотя ротавирусные инфекции являются универсальными и возникают независимо от социально-экономического статуса или условий окружающей среды, исход и последствия заболевания значительно различаются между развитыми и развивающимися странами.

2.1. Общие характеристики ротавируса

Ротавирусы являются членами семейства Reoviridae и характеризуются своим сегментированным (11 сегментов) геномом двухцепочечной РНК. Каждый из 11 генов кодирует один генный продукт.Шесть белков обнаружены в вирусной частице (vp1, vp2, vp3, vp4, vp6 и vp7), тогда как остальные пять белков не являются структурными (NDP1 – NSP5). Ротавирус классифицируется на серогруппы A – E на основании антигенных свойств. Было показано, что только группы A – C инфицируют людей, и большинство заболеваний, вызываемых ротавирусом человека , вызывается ротавирусом группы A . Группа A . Ротавирус далее классифицируется на G (серотипы) и P-типы на основе идентификации антигенов на белках внешнего капсида.Из 14 серотипов (G-типов), которые были идентифицированы у различных видов, девять были распознаны у людей, и из них четыре серотипа (1–4) являются доминирующими во всем мире.

Некоторые из генов ротавируса связаны с их способностью вызывать заболевание ^〚4〛 . Считается, что неструктурные белки NSP1, NSP2 и NSP4 участвуют в вирулентности у мышей ^{5〛 , 〚6〛} и структурные белки vp3 и vp7 у свиней ^{7〛 , №8〛} .Наконец, структурный белок vp4 участвует в ряде свойств in vitro, включая ограничение роста в культуре клеток, повышенную протеазой инфекционность, образование бляшек и связывание с клетками. Кроме того, было показано, что vp4 участвует в вирулентности и патогенности у мышей.

2.2. Связывание ротавирусов и проникновение в эпителиальные клетки кишечника

Ротавирус инфицирует зрелые энтероциты в средней и верхней части ворсинок тонкой кишки, что в конечном итоге приводит к диарее.Текущая информация указывает на то, что присоединение Rotavirus и проникновение в клетки представляют собой многоступенчатый процесс. Последние модели предполагают, что ротавирусы сначала взаимодействуют с рецептором сиаловой кислоты, а затем с независимым от сиаловой кислоты рецептором ^9〛 . Было высказано предположение, что рецепторы могут быть частью липидных микродоменов ^10〛 и узнавать интегрины ^〚11〛 . С учетом этой и другой информации были предложены две противоположные гипотезы относительно того, как Rotavirus попадает в клетку-мишень: через прямое проникновение или слияние ^12〛 и через Ca ²⁺ -зависимый эндоцитоз ^〚13〛 .Процесс эндоцитоза, зависящий от Ca ²⁺ , представляет собой наиболее привлекательный способ проникновения и основан на том факте, что инфекционный ротавирус эндоцитируется в цитоплазму с очень низкой концентрацией Ca ²⁺ , что приводит к Ca ^{2. +} приток из пузырьков в цитоплазму. Как только концентрация Ca ²⁺ в эндосоме уравновешивается с цитоплазмой ниже критического уровня для стабильности внешнего капсида, вирус теряет свои внешние белки, а затем лизируется мембраной везикул, позволяя вирусу уйти в цитоплазму ^{14 〛} .

2.3. Гуморальный и клеточно-опосредованный иммунный ответ на ротавирус

Симптоматическая инфекция ротавирусом стимулирует сильный гуморальный иммунный ответ IgG, который длится всю жизнь. Хотя ответы IgG легко регистрируются, обычно считается, что защита от Rotavirus болезни опосредуется местными антителами IgA. Несколько исследований показали, что местный IgA является важным или, по крайней мере, хорошим предиктором защиты ^〚15〛 .Считается, что два белка на Rotavirus , vp4 и vp7, играют решающую роль в создании защитного иммунного ответа. Оба белка являются составными частями внешнего капсида и, как было обнаружено, независимо друг от друга, стимулируют выработку нейтрализующих антител. Дети, инфицированные определенным серотипом Rotavirus , с большей вероятностью будут защищены от заражения тем же серотипом, чем от повторного заражения другим серотипом. Однако гетеротипическая защита действует, как было обнаружено в нескольких исследованиях.Этому есть несколько возможных объяснений. Первый заключается в том, что местные антитела IgA распознают перекрестно реагирующие эпитопы на vp4 и vp7, другой заключается в том, что антитела к внутреннему капсидному белку vp6 могут модулировать защиту, а третья возможность заключается в том, что перекрестно реагирующие вирус-специфические цитотоксические Т-лимфоциты (CTL) участвуют в защита. Однако роль CTL в инфекциях Rotavirus еще не установлена.

2.4. Возрастной диапазон инфицирования человека

Ротавирус Инфекции могут повторяться у людей от рождения до старости.Неонатальные инфекции, по-видимому, имеют нозокомиальное происхождение, потому что они редко встречаются у детей, рожденных дома или в сельских медицинских центрах. Серологические исследования показывают, что большинство детей инфицированы ротавирусом к 24-месячному возрасту. В отличие от способности Rotavirus вызывать инфекцию в любом возрасте, клинические последствия инфекции, по-видимому, сильно зависят от возраста. Например, большинство неонатальных инфекций протекает бессимптомно или проявляется только легкими симптомами.Относительная устойчивость к клиническим симптомам, наблюдаемая у детей старшего возраста и взрослых, скорее всего, не связана с возрастным физиологическим статусом, как у некоторых мелких животных, а, скорее, с активным иммунитетом, усиленным повторяющимися инфекциями на протяжении всей жизни. Ротавирус гастроэнтерит у взрослых был хорошо документирован в нескольких странах, и даже зарегистрированы случаи смерти ^16〛 .

3. Патофизиология

Ротавирус -индуцированная диарея

3.1. Гистологические изменения, вызванные инфекцией

Rotavirus

Большое количество исследователей изучали гистологические изменения, происходящие в кишечнике после инфицирования Rotavirus . В большинстве случаев в этих исследованиях участвовали животные, инфицированные естественным и экспериментальным путем. Здесь будет дан краткий обзор литературы. Более подробные обзоры литературы можно найти в ссылке ^〚17〛 .

У телят, лишенных молозива, инфекция Rotavirus приводит к изменению эпителия ворсинок с столбчатого на кубовидный, а ворсинки становятся низкорослыми и укорачиваются.Изменения происходят в течение 24 часов после заражения и наиболее выражены в проксимальном отделе тонкой кишки. Воспаление практически отсутствует. Штаммы, вызывающие меньшее количество заболеваний, характеризовались более мягкими гистологическими изменениями ^18〛 . Эти гистологические изменения не ограничиваются телятами с симптоматической реакцией; на самом деле у бессимптомно инфицированных телят также наблюдается притупление ворсинок ^19〛 . У свиней макроскопические изменения включают истончение кишечной стенки, а микроскопические изменения включают атрофию ворсинок, притупление ворсинок и преобразование в кубовидный эпителий.Как и в случае ротавируса крупного рогатого скота , ротавирусы свиней несколько различаются по своей способности вызывать гистологические поражения ^–20–. Штамм SDSV свиного Rotavirus вызывает более тяжелую атрофию ворсинок, чем штамм OSU, но эти два штамма вызывают схожие клинические симптомы. Наконец, кролики, инфицированные экспериментально Rotavirus , показывают нормальную гистологию перед лицом заметных изменений в поглощении глюкозы и лейцина ^21〛 . Эти наблюдения еще раз подчеркивают, что нет абсолютной корреляции между гистологическими поражениями и клиническими симптомами.

Хотя Rotavirus инфекции были изучены на мышах более широко, чем на любых других видах, модель имеет один недостаток: ограничение болезни до первых 2 недель жизни. Патология мышиного ротавируса в целом аналогична патологии ягнят, свиней и телят, но отличается в некоторых аспектах. В течение 24 часов после заражения мышиным ротавирусом Rotavirus кишечные энтероциты мыши кажутся набухшими и вакуолизированными. Инфекция и гистологические изменения сосредоточены в верхнем отделе тонкой кишки.Вакуолизация энтероцитов наиболее заметна на кончике ворсинок, но может происходить в энтероцитах по всей ворсинке. Вакуолизация у мышей более обширная, чем у других видов. В отличие от других видов, притупление ворсинок у мышей ограничено и очень преходяще, несмотря на клинические признаки диареи. Отсутствие обширных патологических изменений, обнаруженных в кишечнике мышей, и наблюдение, что многие энтероциты кажутся вакуолизированными, но не демонстрируют доказательств репликации, заставили Осборна и его соавторов (^–22–) предположить, что у мышей потеря жидкости при диарее является вторичной по сравнению с местной. ишемия ворсинок, как более подробно обсуждается ниже.

В отличие от исследований на животных, существует мало исследований патологии слизистой оболочки тощей кишки младенцев, инфицированных Rotavirus . Исследования биопсии выявили укорочение и атрофию ворсинок, растяжение эндоплазматической сети, инфильтрацию мононуклеарных клеток, набухание митохондрий и денудацию микроворсинок ^{〚23〛 , 〚21〛} .

3.2. Транспорт жидкости и электролитов при вирусном энтерите

Большинство исследований влияния вирусного энтерита на транспорт жидкости, натрия и хлоридов через эпителий кишечника проводилось с использованием вирусов, отличных от Rotavirus , не редко Coronavirus .Следует подчеркнуть, что Coronavirus часто вызывает гораздо более выраженное притупление ворсинок, чем штаммы Rotavirus ^〚17〛 . Кроме того, один тип Coronavirus , используемый в одной и той же лаборатории, может по неизвестным причинам вызывать различные морфологические и патофизиологические реакции в разных сериях экспериментов (сравните, например, ссылки ^{, 24,} и ^{, 25,} ). . Такой разброс в ответах затрудняет делать общие выводы из представленных наблюдений.

На удивление мало исследований in vivo вирусной диареи у анестезированных животных. Когда жидкость, перфузирующая кишечник, содержала глюкозу, прививка Coronavirus превратила чистое поглощение натрия, хлорида и воды в чистую секрецию. Однонаправленное определение натрия с использованием ²² Na выявило, что изменение транспорта натрия, как и ожидалось, было вызвано как уменьшением потока из просвета в ткань, так и увеличением потока из ткани в просвет ²⁵ . Когда глюкоза отсутствовала в просвете кишечника новорожденных свиней, у контрольных животных наблюдалась чистая секреция воды и ионов натрия.Заражение этих свиней коронавирусом существенно не изменило чистый транспорт воды и натрия по сравнению с животными, не зараженными вирусом ^26〛 .

Исследование временной последовательности энтерита Rotavirus у крыс было выполнено Salim et al. ^27〛 in vivo. В отличие от экспериментов на свиньях, описанных выше, чистое поглощение жидкости и натрия наблюдалось у контрольных крыс при перфузии просвета кишечника изотоническим раствором электролита, не содержащим глюкозы.Чистая секреция жидкости и значительно сниженное чистое поглощение натрия достигли пика через 24 часа после инокуляции вируса. Одновременно высота ворсинок уменьшилась до одной трети от контроля, тогда как глубина крипт не изменилась. Аналогичным образом Старки и др. ^–28– исследовали эпителиальный транспорт кишечника мышей in vitro в разное время после инокуляции Rotavirus . Сегменты кишечника перфузировали изотоническим раствором электролита, содержащим маннит, в ванне для органов. Значительная секреция жидкости, ионов натрия и хлора наблюдалась только через 72 часа после прививки, время, когда клинические признаки диареи у бодрствующих мышей были наиболее выраженными ^–29–.В соответствии с этим Lundgren et al. ^–30– аналогичным методом продемонстрировал, что через 48–60 часов после заражения новорожденных мышей Rotavirus наблюдалась чистая секреция жидкости, а также были получены косвенные доказательства повышенной секреции электролитов.

Большинство исследований транспорта электролитов в инфицированных вирусом сегментах кишечника было выполнено in vitro с использованием так называемой техники камеры Уссинга. В этом случае сегмент кишечника почти всегда лишается мышечного слоя, чтобы улучшить насыщение тканей кислородом.Изменения в чистом транспорте электролита часто отслеживаются путем регистрации разности потенциалов (PD) через эпителий и / или путем электрического короткого замыкания эпителия, измерения тока короткого замыкания (SCC). Метод камеры Уссинга также можно комбинировать с измерениями однонаправленных потоков электролитов.

При проведении экспериментов с камерой Уссинга на кишечнике, лишенном мышечных слоев, полученные результаты в некоторых отношениях отличаются от результатов, зарегистрированных in vivo.В присутствии глюкозы в просвете чистый захват натрия превращается в секрецию, тогда как вирус не вызывает никакого эффекта в отсутствие глюкозы ^{〚24〛 , 〚31〛 , 〚32〛 , 〚 33〛} . Индуцированное изменение транспорта натрия (присутствие глюкозы) частично объясняется ослабленным потоком от слизистой оболочки к серозной оболочке. Удивительно, но поток ионов натрия или хлорида из серозной оболочки в слизистую оболочку в контрольном кишечнике больше, чем в кишечнике, инфицированном коронавирусом. ^{〚33〛 , 〚34〛 , 〚35〛} , несмотря на то, что морфологические измерения часто показывают, что крипты больше в инфицированном кишечнике, чем в контрольном кишечнике.В соответствии с этим, SCC в контрольном кишечнике часто были больше, чем в инфицированном кишечнике, несмотря на более низкую тканевую проводимость инфицированного кишечника ^{〚32〛 , 〚34〛} . В других исследованиях SCC был сходным в инфицированных и неинфицированных сегментах кишечника ^{, 24,} , ^, , ^{, 32,} , ^, , ^{, 35,} , ^, , ^{, 36,} .

Одним из возможных объяснений наблюдаемых различий между экспериментами in vivo и in vitro, рассмотренными выше, является то, что удаление кишечного сегмента его мышечных слоев заметно изменяет функции кишечной нервной системы, как будет обсуждаться позже.

3.3. Транспорт глюкозы и аминокислот

Апикальные симпорты энтероцитов ворсинок транспортируют ионы натрия вместе с глюкозой или аминокислотами. Неоднократно сообщалось, что совместный транспорт глюкозы и натрия каким-либо образом нарушается в сегментах кишечника, подверженных воздействию ротавируса или коронавируса . В экспериментах с камерой Уссинга увеличение PD и SCC при добавлении глюкозы в инкубационную среду слизистой оболочки было значительно меньше в инфицированных сегментах кишечника ^–32–.Однонаправленные измерения потоков натрия показали, что это различие в ответах в основном объясняется ослабленным влиянием глюкозы на поток натрия в просвет в ткани ^32〛 . В соответствии с этим, влияние глюкозы на чистый поток натрия и воды в кишечнике, измеренное у инфицированных поросят in vivo, отсутствовало или было значительно меньше, чем в нормальном кишечнике ^26〛 . Влияние вирусной инфекции на транспорт глюкозы также было исследовано с использованием более сложной техники мембранных везикул щеточной каймы.Keljo et al. ^–37– не смогли продемонстрировать высокоаффинный натрий-зависимый переносчик глюкозы в инфицированном вирусом кишечнике. В соответствии с этим, Halaihel et al. ^–38– показали, что симпорт Na-D-глюкозы (SGLT1) сильно ингибируется Rotavirus . Однако следует отметить, что эксперименты in vivo показывают, что в присутствии глюкозы , инфицированный коронавирусом кишечник демонстрирует чистое поглощение жидкости и натрия.

Еще одним важным фактором для абсорбции глюкозы и других сахаров являются дисахаридазы, локализованные в области щеточной каймы энтероцитов.В нескольких отчетах было продемонстрировано, что при вирусном энтерите активность всех изученных дисахаридаз слизистой оболочки (сахароза, лактаза, мальтаза) ^{〚24〛 , 〚31〛 , 〚34〛 , 〚35〛 , 〚39〛 , 〚40〛 , 〚41〛} заметно затухает. Пониженные уровни активности дисахаридазы также были измерены в биоптатах пациентов ^–23–.Следовательно, активность ферментов, необходимых для обеспечения симпорта моносахарида натрия с моносахаридами, некоторым образом снижается вирусом.

Апикальная мембрана энтероцитов снабжена симпортами не только натрия / глюкозы, но также натрия / аминокислот. Реакция абсорбции натрия на L-аланин (20 мМ) была значительно снижена в сегментах кишечника, подвергшихся воздействию Коронавирус ^〚33〛 . Этот вывод был дополнительно подтвержден исследованиями транспорта натрия в везикулы щеточной каймы, продемонстрировав заметное ингибирование симпорта Na-L-аланина при вирусном энтерите у поросят ( Coronavirus ) ^〚42〛 и молодых кроликов ( Rotavirus ) ^〚38〛 .С другой стороны, Rhoads et al. ^–43– не смог зарегистрировать каких-либо притупленных эффектов L-глутамина или L-аланина на транспорт натрия в кишечнике свиней, инфицированных Rotavirus .

Подводя итог, вирусный энтерит у животных, вызванный Coronavirus или Rotavirus , вызывает in vivo чистую секрецию жидкости и ослабленное поглощение / секрецию натрия и хлорида. Большинство исследований предполагают, что одним из механизмов, который, по крайней мере частично, может объяснить вызванное вирусом ослабление абсорбции электролитов и жидкости, является ингибирование симпортов натрия и глюкозы / аминокислот.Пониженная активность ферментов щеточной каймы, вероятно, также способствует снижению абсорбционной способности. Наконец, наличие притупленных ворсинок, уменьшающих площадь поверхности для поглощения жидкости и растворенных веществ, может иметь значение.

3.4. Натрий-калиевая АТФаза

Транспорт через полярный эпителий кишечника в значительной степени определяется электрохимическим градиентом через апикальную границу, установленным натриево-калиевым насосом, расположенным на базолатеральной мембране энтероцита.Существует множество исследований, в которых сообщается, что активность Na, K-АТФазы ослабляется в инфицированном вирусом кишечнике ^{〚34〛 , 〚35〛 , 38〛 , 40〛 , 〚42〛} . Это может отражать истинное снижение активности АТФазы, но также может быть объяснено притуплением ворсинок кишечника, уменьшающим количество энтероцитов. Количественно относительное снижение активности Na, K-АТФазы намного меньше, чем наблюдаемое, например, у сахарозы или лактазы ^{〚33〛 , 〚34〛 , 〚37〛 , 〚 39〛 , 〚41〛} .

3.5. Эпителиальная проницаемость

Другой важной переменной для кишечного эпителиального транспорта является эпителиальная проницаемость. Этот параметр был определен в эпителии кишечника на различных уровнях интеграции после воздействия вируса на слизистую оболочку кишечника. Культивируемые бессмертные линии кишечных эпителиальных клеток представляют собой наиболее редукционистский уровень. В трех исследованиях использовались клетки Caco-2, первоначально полученные из аденокарциномы толстой кишки ^{, 44,} , ^, , ^{, 45,} , ^, , ^{, 46,} .Все авторы сообщают, что трансэпителиальное электрическое сопротивление снижалось после воздействия Rotavirus на апикальную или базолатеральную плазматическую мембрану. Молекулярные зонды различного размера продемонстрировали, что проницаемость кишечника для молекул с массой от 182 (маннит) до 70000 Да (декстран) увеличивалась в культивируемых клетках, подвергшихся воздействию Rotavirus ^{45〛 , 〚46〛} , что отражает повышенную межклеточную проницаемость, возможно, вызванную дезорганизацией белков, связанных с плотными контактами, клаудина, окклюдина и ZO-1.

Эксперименты с камерой Уссинга представляют собой следующий уровень интеграции при изучении проницаемости эпителия. Keljo et al. ^–37– и Heyman et al. ^–47– наблюдали временное увеличение абсорбции пероксидазы хрена (HRP; 40 000 Да) на второй день после заражения. Сообщается, что электрическая проводимость ткани увеличивается в кишечнике, инфицированном Rotavirus ^{〚30〛 , 〚48〛} , тогда как в исследованиях с использованием Coronavirus постоянно сообщалось о ее снижении. ^{〚31〛 , 〚32〛 , 〚33〛 , 〚34〛 , 〚35〛 ,} 37〛 .Причина такой разницы между вирусными штаммами неизвестна.

Результаты исследований кишечной проницаемости in vivo, проведенных на новорожденных поросятах, подвергшихся воздействию Коронавирус ^{〚49〛 , 〚50〛 , 〚51〛 , 〚52〛 , 〚53〛} , варьируются даже в пределах одной исследовательской группы ^{〚49〛 , 〚50〛 , 〚51〛 , 〚52〛} .Различие результатов не позволяет сделать какие-либо определенные выводы.

Проницаемость кишечника также исследовалась у детей раннего возраста с диареей Rotavirus с использованием полиэтиленгликолей (ПЭГ) различной молекулярной массы в качестве датчиков кишечной проницаемости. Поглощение ПЭГ было значительно ниже во время острой фазы вирусного энтерита, чем через 3–5 недель после инфицирования. Это в первую очередь приписывалось уменьшению площади поверхности для абсорбции, тогда как соотношение между скоростями абсорбции больших и малых молекул предполагало повышенную проницаемость для изученных ПЭГ ^–54–.

Подводя итог, исследования проницаемости, проведенные на разных уровнях интеграции с использованием Rotavirus , ясно показывают, что инфекция увеличивает параклеточную проницаемость за счет воздействия на плотные контакты. Насколько это верно для инфекции Coronavirus , еще предстоит установить. Повышенная проницаемость может иметь решающее значение для организма, поскольку она позволяет эпителиальному прохождению потенциально токсичных и воспалительных веществ.

4. Гипотезы

Приведенное ниже обсуждение патофизиологических механизмов, лежащих в основе вызванной вирусом потери кишечной жидкости, основано на предположении, что в нормальном тонком кишечнике ворсинки абсорбируют, а крипты выделяют электролиты и жидкость.Есть несколько наблюдений, подтверждающих эту точку зрения. В частности, гиперосмолярный компартмент, в основном связанный с хлоридом натрия, присутствует в собственной пластинке верхней трети ворсинки ^{〚55〛 , 〚56〛} . Было показано, что эта гиперосмоляльность ткани хорошо сохраняется после воздействия на слизистую кишечника холерного токсина в условиях кишечной секреции чистой жидкости ^–57–. Насколько это верно при секреторных состояниях кишечника, вызванных вирусом, никогда напрямую не определялось.Косвенные наблюдения, представленные Osborne et al. ^{〚22〛 , 〚58〛} предполагают, что это может быть так. Они наблюдали, что эритроциты в верхней части нормальных ворсинок и ворсинок, инфицированных ротавирусом , были зубчатыми, что они приписали наличию гиперосмолярного компартмента.

Патофизиологические механизмы, лежащие в основе потери жидкости, наблюдаемой при различных типах диареи, обсуждались десятилетиями. До 1970-х гг. Преобладала гипотеза о том, что большинство поносов, в том числе инфекционных, вызваны нарушениями моторики.Однако в течение последних трех десятилетий становится все более очевидным, что нарушения эпителиального транспорта часто являются одной из основных причин потери кишечной жидкости, хотя подвижность может способствовать, по крайней мере, при некоторых типах диареи.

Демонстрация того, что токсин холеры вызывает повышение внутриклеточной концентрации цАМФ, представляла собой крупный прорыв в то время ^–59–. Впоследствии было показано, что увеличение внутриклеточных концентраций нескольких вторичных мессенджеров, таких как цАМФ, цГМФ и ионы кальция, также вызывает потери жидкости из кишечника.Считалось, что секреторный агент взаимодействовал с секретными криптами, чтобы вызвать секрецию жидкости через одного из упомянутых вторых мессенджеров. Эта точка зрения слишком упрощена, так как большинство стимуляторов просвета, включая Rotavirus , не достигают крипт Lieberkühn ^{〚60〛 , 〚61〛} . Более того, в случае вирусного энтерита в нескольких исследованиях не удалось продемонстрировать какое-либо внутриклеточное увеличение цАМФ или цГМФ в энтероцитах человека или животных, подвергшихся воздействию вируса ^{〚25〛 , 〚39〛 , 〚41〛 , 〚62〛} .

Теперь мы обсудим четыре гипотезы, которые были предложены в отношении вызванной вирусом кишечной секреции жидкости и электролитов.

4.1. Снижение абсорбционной способности кишечного эпителия

Экспериментальные доказательства снижения абсорбционной способности жидкости, электролитов, глюкозы и аминокислот в кишечнике, инфицированном ротавирусом , были рассмотрены выше при описании морфологических и функциональных эффектов вируса. Под влиянием вируса скорость абсорбции эпителием, несомненно, снижается.Однако можно задать вопрос, может ли подавленное поглощение жидкости как таковое объяснять большие потери жидкости, происходящие при диарее Rotavirus , или же необходимо стимулировать секрецию.

Гамильтон и соавторы предположили, что повышенная секреция может быть объяснена секреторным эпителием крипт, «вторгающимся» в ворсинки, создавая дисбаланс между поглощающим эпителием ворсинок и секреторным эпителием крипт. В этом контексте следует отметить, что исследования Гамильтона проводились на новорожденных свиньях с использованием Coronavirus , который может не имитировать Rotavirus во всех его эффектах, как указывалось ранее при обсуждении проницаемости эпителия.В подтверждение своей гипотезы Гамильтон и его сотрудники сообщили о биологических изменениях клеток, которые указали на то, что клетки ворсинок были более похожи на крипты в инфицированном кишечнике. Таким образом, Гамильтон и др. объясняют пониженное поглощение глюкозы (см. выше) инфицированным кишечником как указание на увеличенное количество крипто-подобных клеток в слизистой оболочке кишечника ^–39–. Кроме того, как отмечалось ранее, ферментативная активность, измеренная в соскобах слизистой оболочки контрольного и инфицированного вирусом кишечника, заметно различается.В то время как активность сахарозы, лактазы и Na, K-АТФазы слизистой оболочки была выше в контроле, чем в инфицированном кишечнике, для тимидинкиназы ^{〚24〛 , 〚31〛 , 〚34〛 верно обратное. , 〚35〛 , 〚39〛 , 〚40〛} . Опять же, пониженная активность дисахаридазы рассматривается как свидетельство того, что энтероциты подобны крипте. Повышенная активность тимидинкиназы может объяснить результаты, полученные Shepherd et al.^–40– видно, что миграция ³ H-тимидиновых эпителиальных клеток вдоль оси крипта-ворсинка происходила быстрее во время острой фазы вирусной диареи, чем у контрольных животных. Наконец, в кишечнике, инфицированном коронавирусом , не удалось продемонстрировать ингибирующий эффект теофиллина на поток ионов натрия от слизистой оболочки к серозной оболочке. Все эти наблюдения были предприняты, чтобы указать, что энтероциты инфицированных животных проявляют функциональные характеристики клеток крипт.

Пересмотренные исследования активности ферментов были выполнены на соскобах слизистой у контрольных и инфицированных коронавирусом животных. Коллинз и др. ^–63– исследовали распределение активности лактазы с помощью гистохимического метода у мышей, инфицированных ротавирусом , что позволило более точно определить клеточную локализацию фермента. В контрольной ситуации активность лактазы наблюдалась исключительно в клетках ворсинок. Это было верно также, когда секреция жидкости была наиболее выраженной (72 ч после инфицирования), хотя активность лактазы в щеточной кайме энтероцитов была низкой.Последнее наблюдение противоречит точке зрения, согласно которой клетки крипт заселяют ворсинки на пике вирусной диареи. Кроме того, клиническое исследование не продемонстрировало какой-либо четкой корреляции между снижением активности фермента и гистологическими изменениями, вызванными Ротавирусом ^〚24〛 . Кроме того, на основании экспериментов in vitro на клетках Caco-2 Jourdan et al. ^–64– предположил, что активность сахароза-изомальтазы в клетках, инфицированных ротавирусом , была специфически и избирательно снижена с помощью ротавируса без какого-либо видимого разрушения клеток, вызванного блокированием транспорта сахаразы-изомальтазы из сети транс-Гольджи в щеточная кайма мембрана.Наконец, Halaihel et al. ^–38– не продемонстрировали какого-либо снижения общей массы SGLT1 в кишечном эпителии молодых кроликов, инфицированных ротавирусом , , чего можно было бы ожидать, если бы энтероциты были криптоподобными.

Подводя итог, обзор исследований ясно показывает, что воздействие на энтероциты ротавируса и другого вируса приводит к снижению скорости всасывания воды, электролитов, глюкозы и аминокислот, что, по крайней мере, частично может объяснить секреторный ответ кишечника на вирус.В какой степени это объясняется проникновением клеток крипт в ворсинки, еще предстоит установить. Последний механизм может быть более важным в Coronavirus , чем в Rotavirus энтерите.

4.2. Энтеротоксин ротавируса

Один из неструктурных белков ротавируса , NSP4, представляет собой трансмембранный гликопротеин, специфичный для эндоплазматического ретикулума. Ранние исследования этого белка показали, что NSP4 имитирует некоторые клеточные биологические эффекты Rotavirus .Следовательно, NSP4 увеличивает внутриклеточную концентрацию Ca в основном за счет мобилизации Ca из эндоплазматического ретикулума ^〚65〛 . Кроме того, было показано, что NSP4 дестабилизирует проницаемость плазматической мембраны, что делает возможным утечку, например, лактатдегидрогеназы из клеток ^–66–.

При создании антисыворотки против NSP4 Ball et al. ^–67– отметили, что введение белка внутрибрюшинно вызывало диарею у новорожденных мышей. Это наблюдение положило начало серии исследований, чтобы выяснить, может ли NSP4 представлять собой вирусный энтеротоксин.Несколько наблюдений на мышах предполагают, что часть NSP4 может функционировать как энтеротоксин. Таким образом, было показано, что продукт расщепления NSP4 с энтеротоксиновой активностью, имеющий кажущуюся молекулярную массу 7 кДа, секретировался в среду инкубации клеток, инфицированных вирусом. Этот белок составлял аминокислоты 112–175 NSP4 и вызывал диарею у новорожденных мышей. Кроме того, как ротавирус и полноразмерный NSP4, NSP4 112–175 повышал уровни внутриклеточного кальция при тестировании в различных системах культивирования клеток ^68〛 .Наконец, мутирующий NSP4 продемонстрировал, что вирулентность вируса может быть заметно ослаблена. Делеции и замены в области аминокислот 131 и 140 оказались особенно важными для вирулентности, о чем судили по способности мутированного NSP4 влиять на концентрацию внутриклеточного кальция in vitro или вызывать диарею у новорожденных мышей ^〚69〛 .

Впоследствии Estes et al. также продемонстрировали другие функциональные сходства между NSP4 114–135 и Rotavirus .Следовательно, NSP4 114–135, как было продемонстрировано, является специфическим ингибитором SGLT1 ^70〛 , а NSP4 увеличивает параклеточную проницаемость клеток MDCK ^71〛 . Взятые вместе, функциональное сходство между NSP4 и Rotavirus усиливает предположение о том, что NSP4 или его часть могут функционировать как вирусный энтеротоксин.

Одним из характерных свойств энтерита Rotavirus у мышей является его возрастная зависимость. У этого вида Rotavirus не вызывает диарею с 15-дневного возраста.В первом отчете о NSP4 как энтеротоксине Эстес и соавторы сообщили, что секреторный эффект NSP4, вводимого внутрибрюшинно или интраилеально, зависел от возраста, вызывая дозозависимый ответ у молодых животных (6–9 дней), но не влиял на мышей 17– 18 дней. Аналогичные наблюдения были сделаны с остатками NSP4 114–135 ^〚67〛 . В другом исследовании Morris et al., . ^–5– подвергает изолированные крипты толстой кишки мыши действию NSP4, регистрируя внутриклеточный Са-ответ.Было показано, что NSP4 увеличивает концентрацию Са в клетках крипт толстой кишки независимо от возраста мышей, у которых были взяты крипты. Был сделан вывод, что возрастная зависимость объясняется событиями, удаленными от мобилизации Са, вызванной NSP4. Этот вывод основан на неявном предположении, что энтеротоксин вируса напрямую влияет на концентрацию Са в секретирующих клетках крипт.

В литературе есть сообщения, которые не согласуются с тем, что NSP4 является важным фактором патофизиологии диареи Rotavirus .На это указали Angel et al. ^–72–, что аминокислотная последовательность 131–140 последовательности NSP4 является гипервариабельной как у человека, так и у мышей Rotavirus , и что не было корреляции между аминокислотной последовательностью и вирулентностью у мышей. Подобные наблюдения были сделаны в исследованиях на людях ^{, 73,} , ^, , ^{, 74,} .

Подводя итог, можно сказать, что основная часть экспериментов с остатками 114–135 NSP4 предполагает, что он может действовать как вирусный энтеротоксин, по крайней мере, у мышей.Остается установить, что это важно для штаммов вирусов, поражающих людей.

4.3. Нервные механизмы

Желудочно-кишечный тракт снабжен обширной нервной системой, кишечной нервной системой (ENS), которая функционирует независимо от центральной нервной системы, как показывают морфологические и функциональные исследования. Морфологические доказательства такой независимой функции довольно просты. Было подсчитано, что ENS содержит около 10 ⁸ нейронов у человека, что почти равно числу нейронов спинного мозга ^75〛 .Это огромное количество нейронов в стенке кишечника контролируется 1/300 эфферентных волокон центральной нервной системы ^76〛 . Нейроны ENS, по-видимому, могут функционировать без особого контроля со стороны центральной нервной системы.

ENS состоит из двух основных нервных сплетений, миэнтерического (между двумя мышечными слоями) и подслизистого, а также их взаимосвязей. Большинство нейронов ENS ограничены стенкой желудочно-кишечного тракта, но внешние (афферентные или эфферентные) нейроны также обнаруживаются в ENS.Анатомическое строение нейронов ENS, вообще говоря, довольно простое. Большинство нейронов тонкой кишки направляют проекции в другие нервные клетки кишечника или в гладкие мышцы, в то время как большинство подслизистых нейронов проецируются на другие подслизистые нейроны и слизистую / подслизистую оболочку. Однако есть как морфологические, так и функциональные доказательства того, что два сплетения взаимосвязаны, нейроны кишечника вступают в контакт с нейронами подслизистого сплетения и наоборот.

За последние 30 лет все большее количество полипептидов было выделено из желудочно-кишечного тракта и охарактеризовано биохимически.Эти пептиды были локализованы в ENS и / или в определенных эпителиальных клетках слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта (см., Например, ^{, 75,} ). Пептидам, расположенным в нервах, приписывают предполагаемую функцию нейротрансмиттера, что подразумевает, что количество передатчиков в ENS составляет по крайней мере 20. Большинство, если не все нейроны содержат более одного предполагаемого нейротрансмиттера. В настоящее время мы мало знаем о функциональных последствиях совместной локализации нейромедиаторов в ENS.

В начале 1980-х годов Cassuto et al.опубликовали серию отчетов (для обзора см. ^–77–), в которых они показали, что секреция жидкости, вызванная токсином холеры в внешне денервированном кишечнике анестезированных крыс или кошек, может быть заметно ослаблена тремя соединениями, влияющими на функции ENS. : тетродотоксин (блокатор натриевых ворот в возбудимых мембранах), лидокаин (местный анестетик) и гексаметоний (блокатор никотиновых холинэргических рецепторов). В соответствии с этим секреция холерного токсина сопровождалась повышенным высвобождением вазоактивного кишечного полипептида, нейромедиатора, в венозный сток из сегментов кишечника кошек.Взятые вместе, эти наблюдения убедительно свидетельствуют о том, что ENS каким-то образом активируется токсином холеры. Этот вывод был дополнительно подтвержден Kirchgessener et al. ^–78– , который контролировал активацию нейронов ENS гистохимическим методом с использованием антитела к продукту онкогена fos , экспрессия которого, как было показано, является маркером нервной активности. Воздействие холерного токсина на слизистую кишечника активировало нейроны как в кишечном, так и в подслизистом сплетениях.Наконец, токсин холеры не мог вызвать секреторную реакцию в сегментах кишечника, в которых мышечно-кишечное сплетение было разрушено, при воздействии на серозную поверхность хлорида бензалкония ^–79–.

В последующих исследованиях нервное поражение было также продемонстрировано для некоторых других стимуляторов кишечной секреции, включая желчную кислоту, инвазивный штамм Salmonella typhimurium и энтеротоксины, продуцируемые Escherichia coli . Фактически, все средства, стимулирующие секрецию просвета, протестированные в нашей лаборатории, активировали ENS таким образом, что по крайней мере 60% секреторной реакции жидкости можно объяснить стимуляцией кишечных нервов ^–77–.

Энтеротоксины, продуцируемые различными бактериями, были исследованы на предмет их влияния на перистальтику кишечника. Например, согласно Матиасу и Кленчу ^–80–, холерный токсин вызывает особый паттерн подвижности, который они назвали мигрирующими комплексами потенциала действия. Функционально этот паттерн очень эффективно продвигает кишечное содержимое в аборальном направлении. Интересно, что этот эффект подвижности токсина, по-видимому, также опосредуется через ENS. Таким образом, паттерн моторики может быть ослаблен лидокаином и блокадой никотиновых рецепторов.

Подводя итог, бактериальные энтеротоксины производят кишечную секрецию и стимулирующую моторику через активацию ENS. Этот ответ можно рассматривать как защитный механизм от потенциально вредного воздействия слизистой оболочки, при этом выделяемая жидкость разжижает вредный стимул, а повышенная подвижность продвигает кишечное содержимое в аборальном направлении. Участие ENS может также объяснить, как энтеротоксины, которые, по-видимому, не достигают кишечных крипт ^{〚60〛 , 〚61〛} , могут влиять на секреторные клетки крипт.

Эксперименты, кратко изложенные выше, побудили к исследованию, чтобы выяснить, вызывается ли секреция жидкости у мышей, вызванная Rotavirus , также, по крайней мере частично, активацией ENS. Чтобы проверить это, было проведено три типа экспериментов ^〚30〛 . В экспериментах с камерой Уссинга было продемонстрировано, что тетродотоксин, лидокаин и мекамиламид (блокатор никотиновых рецепторов, более липофильный, чем гексаметоний) дозозависимым образом ослабляли повышенный PD, наблюдаемый в кишечнике, подверженном воздействию вируса.Аналогичным образом, в экспериментах, в которых просвет интактных сегментов кишечника перфузировали в ванне для органов, тетродотоксин, лидокаин и гексаметоний значительно снижали наблюдаемую PD и часто превращали секрецию жидкости в абсорбцию жидкости в инфицированном вирусом кишечнике. Наконец, многократное внутрибрюшинное введение лидокаина бодрствующим мышам, зараженным ротавирусом , значительно предотвращало фекальные потери жидкости. По результатам, полученным in vitro, было подсчитано, что по крайней мере две трети секреции жидкости и электролитов, вызванной вирусом, можно отнести к активации ENS.

Выше указывалось, что существуют экспериментальные данные, показывающие, что энтеротоксины влияют на перистальтику кишечника через ENS. Есть несколько исследований моторики во время диареи Rotavirus , и ни одно из них не исследовало возможное участие ENS в реакции моторики. Molla et al. отслеживали время прохождения (TT) древесного угля у пациентов с различными типами диареи, в том числе вызванной вирусом. Когда присутствовали клинические признаки диареи, было показано, что TT составлял от одной трети до половины того, что наблюдалось через 2 недели после выздоровления от диареи ^〚81〛 .Берроуз и Меррит ^–82– изучали миоэлектрическую активность тощей кишки новорожденных свиней до и после инокуляции животных Coronavirus . Когда наблюдались клинические признаки диареи, нормальный паттерн моторики нарушался. Следовательно, наблюдался длительный мигрирующий комплекс подвижности, а также увеличение числа фронтов активности. Кажется вероятным, что этот паттерн подвижности привел к сокращению времени прохождения, хотя это не измерялось.

Подводя итог, можно сказать, что несколько наблюдений, проведенных во время энтерита Rotavirus у новорожденных мышей, предполагают, что секреторный ответ частично объясняется активацией ENS.Участие ENS может объяснить, как сравнительно небольшое количество клеток на концах ворсинок, инфицированных вирусом, может влиять на кишечные крипты, увеличивая секрецию электролитов и воды. Немногочисленные исследования влияния энтерита Rotavirus на перистальтику кишечника показывают, что время прохождения через кишечник сокращается. Возможное участие ENS в этом ответе неизвестно.

Многие детали, касающиеся гипотезы, касающейся ENS в секреции жидкости, вызванной Rotavirus , еще предстоит выяснить.Один из основных вопросов заключается в том, как вирус может активировать кишечные нервы. В случае секреции жидкости, вызванной бактериальным энтеротоксином, было высказано предположение, что энтеротоксины посредством их воздействия на внутриклеточные вторичные мессенджеры вызывают высвобождение аминов / пептидов из эндокринных клеток кишечного эпителия. В качестве примера можно привести несколько линий доказательств, указывающих на то, что токсин холеры вызывает высвобождение 5-гидрокситриптамина из энтерохромаффинных клеток ^77〛 . Секретируемые амины / пептиды активируют, по отдельности или вместе, нервные дендриты, расположенные непосредственно под эпителием кишечника.Представляется возможным, что предложенный энтеротоксин NSP4 Rotavirus может действовать аналогичным образом, увеличивая внутриклеточную концентрацию кальция.

Другие механизмы также могут объяснить, как Ротавирус активирует ENS. В настоящее время признано, что нормальные эпителиальные клетки функционируют как «сенсоры» для микроорганизмов. При воздействии, например, бактерий или вирусов клетки выделяют широкий спектр биологически активных соединений, таких как цитокины, простагландины и закись азота ^{, 83,} , ^, , ^{, 84,} .Эти соединения также участвуют в воспалительной реакции. Установлено, что рецепторы, расположенные на нейронах, существуют для некоторых из этих веществ и что они, по отдельности или вместе, могут вызывать мембранную деполяризацию дендритов, вызывая потенциалы действия ^85〛 . Фактически, активация кишечных нейронов хемокинами может объяснить тот факт, что Rotavirus вызывает диарею только у мышей моложе 15 дней, поскольку было продемонстрировано, что хемокины высвобождаются из эпителиальных клеток мышей только в течение первых 2 недель жизни ^〚84〛 .

4.4. Нарушение кишечной микроциркуляции

Исследовательская группа под руководством Джона Стивена опубликовала в конце 1980-х серию исследований различных аспектов кишечной секреции, индуцированной Rotavirus , у новорожденных мышей. На основе этих исследований они предложили довольно сложную гипотезу относительно патофизиологии индуцированной вирусом кишечной секреции. Вкратце, гипотеза предполагает, что инвазия Rotavirus в клетки кончика ворсинок вызывает высвобождение «нейроактивных / гормональных веществ», которые вызывают ишемию ворсинок и последующее укорочение ворсинок и, следовательно, снижение абсорбционной способности.Ишемия ворсинок также приводит к увеличению скорости деления клеток, расширяя зону пролиферации. В этой зоне присутствуют клетки с гипертоническим внутриклеточным компартментом. Экструдируя свои избыточные ионы, они создают осмотическую силу для секреции жидкости ^{〚86〛 , 〚87〛} .

Ишемия ворсинок играет очень важную роль в гипотезе Стивена. Однако количественные измерения кишечного кровотока во время энтерита, вызванного Rotavirus , отсутствуют.Осборн и др. ^〚22〛 предпринята попытка качественной оценки кровотока ворсинок морфологическим методом. Метод включал изучение распределения эритроцитов в ворсинках путем окрашивания клеток пероксидазным гистохимическим методом. Предполагалось, что количество эритроцитов отражает кровоток, хотя содержание эритроцитов по определению отражает объем эритроцитов, а не поток эритроцитов. Исследование временного курса показало, что ворсинки были ишемизированы (наблюдалось меньшее количество эритроцитов) через 24–48 часов после воздействия вируса на мышей.При этом ворсинки имели уменьшенную длину (около 60% от контроля). Микроциркуляция показала различную степень восстановления через 72 и 96 ч после заражения животных. О переносе жидкости и электролита в одной и той же экспериментальной модели сообщалось в другом исследовании ^–29–. Это продемонстрировало, что секреция жидкости и электролитов была очевидна только через 72 часа после заражения вирусом, когда казалось, что кишечник перфузируется с нормальной скоростью кровотока.

Следует подчеркнуть, что Osborne et al.^–22– не сообщают о каких-либо морфологических наблюдениях, указывающих на ишемию ворсинок, за исключением содержания эритроцитов в ворсинках. Характерным признаком ишемии ворсинок является отрыв клеток кончика ворсинок от базальной мембраны ^{〚88〛 , 〚89〛} . Ни один из гистологических срезов, опубликованных Osborne et al. проявите этот кардинальный знак. Низкое количество эритроцитов в некоторых срезах может отражать тот факт, что кровоток слизистой оболочки кишечника проявляет вазодвигательную активность (^–90–; Lundgren, неопубликованные наблюдения), т.е.е. кровоток в одной и той же ворсинке колеблется и иногда может быть очень низким. Более того, Стивен ^–86– сообщает, что концентрации АТФ в слизистой оболочке оставались довольно постоянными на протяжении всей инфекции, что свидетельствует против ситуации со сниженной доставкой кислорода. Стивен и др. предполагают, что ишемия может быть опосредована нервами. Однако нет сообщений, позволяющих предположить, что в кишечнике существуют какие-либо интрамуральные сосудосуживающие нервные волокна. Все известные сосудосуживающие волокна являются внешними.Наконец, в одной обзорной статье Стивен и Осборн ^–87– предполагают, что снижение кишечного кровотока имеет большое значение также для патофизиологии кишечной секреции, вызванной холерным токсином. В случае холеры кровоток слизистой оболочки кишечника исследовали количественным методом. Было показано, что кровоток в слизистой оболочке увеличился вдвое после воздействия на слизистую кишечника токсина ^〚91〛 .

В другом исследовании той же лаборатории Spencer et al. ^〚92〛 исследовали внутриклеточные концентрации электролитов в энтероцитах ворсинок и крипт с помощью сложной микрозондовой техники. После воздействия вируса на кишечник наиболее выраженные изменения были обнаружены в клетках у основания ворсинок, где концентрации натрия и хлора были значительно увеличены в инфицированном кишечнике. Авторы предполагают, что эти изменения вызваны ишемией ворсинок и / или опосредованы нервной системой. Кроме того, гиперосмолярность внутриклеточных ионов создает силы для секреции электролитов и жидкости.Однако авторы не предоставляют никаких экспериментальных доказательств этих предположений.

Сложная гипотеза, предложенная Стивеном и др., Часть которой резюмирована выше, подробно описана в двух обзорных статьях ^{, 86, ,} , ^{, 87,} , к которым читатель может обратиться. Несколько шагов в гипотезе Стивена еще предстоит экспериментально проверить, и в настоящее время эти предложения можно рассматривать только как предварительные.

Границы | Шиконин подавляет кишечные каналы хлоридов, активированных кальцием, и предотвращает ротавирусную диарею

Введение

Секреторная диарея остается бременем для здоровья всего мира и вызывает большую смертность у детей в возрасте до 5 лет (Walker et al., 2013). Повторяющаяся диарея приводит к недоеданию, задержке роста, физическим и умственным нарушениям (Petri et al., 2008). Основные причины инфекционной секреторной диареи включают бактерии, такие как Vibrio cholerae и энтеротоксигенный Escherichia coli , а также вирусы, такие как ротавирус и норовирус, а также некоторых паразитов (Walker et al., 2013). Хлоридные каналы, расположенные в просветной мембране энтероцитов, представляют собой важную мишень для лечения секреторной диареи, потому что чрезмерная активация этих каналов может вызвать массивную секрецию хлорид-ионов в просвет кишечника и, следовательно, создать электрохимический градиент и осмотическую силу для стимулируют секрецию натрия и воды (Barrett and Keely, 2000).Повышенная перистальтика кишечника – одна из особенностей некоторых диарейных заболеваний. Было показано, что один из основных хлоридных каналов, трансмембранный регулятор проводимости при муковисцидозе (CFTR), отвечает за индуцированную энтеротоксином секреторную диарею при холере и диарее путешественников (Chao et al., 1994; Grubb, 1995; Thiagarajah et al. ., 2004; Sonawane et al., 2007). Другой хлоридный канал энтероцитов, хлоридные каналы, активируемые кальцием (CaCCs), как полагают, связан с секреторной диареей, индуцированной ротавирусом и, возможно, другой вирусной секреторной диареей (Morris et al., 1999). TMEM16A был первым обнаруженным белком CaCC (Caputo et al., 2008; Schroeder et al., 2008; Yang et al., 2008), и было обнаружено, что он в большом количестве экспрессируется в интерстициальных клетках Cajal (ICC), генерируя гладкие сокращение мышц (Huang et al., 2009; Hwang et al., 2009; Ferrera et al., 2010). При ротавирусной диарее считается, что неструктурный белок NSP4 активирует TMEM16A / CaCC в энтероцитах (Ball et al., 1996; Morris et al., 1999), но точный механизм этого еще предстоит выяснить.

Помимо TMEM16A, идентичность других желудочно-кишечных CaCC (CaCC _GI ) остается неясной. Накопленные данные показывают, что CaCCs способствует хроническим запорам (Jiang et al., 2015), гипертонии (Wang et al., 2015), опухолям (Huang et al., 2002; West et al., 2004; Carles et al., 2006). ) и диареи (Ko et al., 2014). Были идентифицированы специфические ингибиторы против CaCC, и они доказали свою эффективность в уменьшении водянистого стула на модели секреторной диареи у новорожденных мышей (Ko et al., 2014). В нашем предыдущем исследовании мы показали, что антидиарейная активность традиционной китайской медицины Bistortae Rhizoma обусловлена ​​ингибированием опосредованной CFTR и CaCC секреции ионов Cl ^– из эпителия кишечника и замедлением перистальтики желудочно-кишечного тракта ( Ю. и др., 2015). Некоторое внимание уделяется антисекреторной терапии, направленной на снижение потерь жидкости и перистальтики кишечника (Donowitz et al., 2012). Настоящее исследование направлено на выявление новых низкомолекулярных ингибиторов, которые могут ингибировать каналы хлорида TMEM16A или CaCC _GI , чтобы снизить перистальтику кишечника и секрецию жидкости.Это было проведено в рамках поиска потенциально новых терапевтических противодиарейных препаратов.

Материалы и методы

Клеточные линии, животные, вирусы и химические вещества

эпителиальных клеток щитовидной железы крыс Фишера (FRT), коэкспрессирующих TMEM16A и галогенидный сенсор YFP-h248Q / I152L, культивировали в среде енота F12 (Sigma Chemical Co., Сент-Луис, Миссури, США) с добавлением 10% фетальной телячьей сыворотки (HyClone Company, США), 100 Ед / мл пенициллина, 100 мкг / мл стрептомицина и 2 мМ L -глютамина.Клетки HT-29 культивировали в среде RPMI 1640 (Sigma Chemical Co. Сент-Луис, Миссури, США) с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки (компания HyClone, США), 100 ед / мл пенициллина, 100 мкг / мл стрептомицина и 2 мМ L -глютамин. Клетки инкубировали при 37 ° C в присутствии 5% CO ₂ и воздуха 95% влажности. Ротавирус SA-11 был подарком профессора Веркмана из UCSF.

Мышей

ICR (8–10 недель) содержали на стандартной жевательной диете в определенных условиях, свободных от патогенов, в естественном круговороте день / ночь в Даляньском медицинском университете (номер разрешения: SCXK liao 2008-0002).Все эксперименты проводились в соответствии с Руководством по уходу и использованию лабораторных животных Национального института здоровья и были одобрены Комитетом по исследованиям на животных Ляонинского педагогического университета.

CFTR _inh -172 был синтезирован, как описано ранее (Garcia et al., 2009). Специфический активатор TMEM16A E _act и ингибитор CaCC _inh -A01 были закуплены у Chembest Research Laboratory Limited (Шанхай). АТФ и NaI были приобретены у Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd. Карбахол (CCh) был приобретен у EDM Chemicals, Inc. (Сан-Диего, Калифорния, США). Fluo-4 NW был приобретен у Invitrogen (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA). Амфотерицин B был приобретен у Solarbio (Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd). T16A _inh -A01 был щедрым подарком профессора Веркмана из UCSF. Все другие химические вещества, если не указано иное, были приобретены у Sigma (Sigma Chemical Co, Сент-Луис, Миссури, США).

Флуоресцентный анализ притока йодида

Для измерения ингибирования TMEM16A шиконином клетки FRT, экспрессирующие TMEM16A, высевали в 96-луночный планшет с черными стенками и прозрачным дном (Costar, Corning, NY, USA) до слияния.Затем клетки трижды промывали PBS с последующей инкубацией с различными концентрациями шиконина в течение 10 минут. Данные флуоресценции регистрировали с помощью микропланшетного ридера FLUOstar Galaxy (BMG Lab Technologies, Inc.), оснащенного фильтрами излучения HQ 535 / 30M (535 ± 15 нм) и возбуждающими фильтрами HQ500 / 20X (500 ± 10 нм) (Chroma Technology Corp.), и шприцевые насосы. Флуоресценцию регистрировали непрерывно в течение 14 с, а АТФ (200 мкМ) закачивали в систему вместе с йодидом через 2 с. Скорость притока йодида (d [I -] / dt) рассчитывалась, как описано в предыдущем исследовании (Kristidis et al., 1992).

Внутриклеточные измерения кальция

Клетки

HT-29 высевали в 96-луночный микропланшет с черными стенками и инкубировали до слияния. Клетки трижды промывали PBS, а затем инкубировали с Fluo-4 NW в соответствии с протоколом производителя в течение 15 мин. Флуоресценцию Fluo-4 измеряли с помощью флуоресцентного ридера для планшетов FLUOstar Optima, оснащенного шприцевыми насосами и заказными фильтрами возбуждения / эмиссии Fluo-4 (485/538 нм).

Ток короткого замыкания

Эпителиальные клетки щитовидной железы крысы Фишера, экспрессирующие TMEM16A, помещали во вставки Snapwell и позволяли расти до 95% конфлюэнтности.Вставки Snapwell устанавливали в камерах Уссинга (Physiological Instruments, Сан-Диего, Калифорния, США), подключенных к многоканальным вольт-амперным зажимам VCC MC 6 через электроды серебро / AgCl с 3 M агаровыми мостиками KCl. Монослои клеток FRT стабилизировали в течение 30 мин в растворе полу-Cl ^– (апикальный, содержащий в мМ: 65 NaCl, 65 Na глюконат, 2,7 KCl, 1,5 KH ₂ PO ₄ , 0,5 MgCl ₂ , 2 CaCl ₂ , 10 Hepes, 10 глюкозы, pH 7,4.) И забуференный раствор HCO ₃ ^– (базолатеральный, содержащий в мМ: 130 NaCl, 2.7 KCl, 1,5 KH ₂ PO ₄ , 0,5 MgCl ₂ , 2 CaCl ₂ , 10 Hepes, 10 глюкоза, pH 7,4.). После этого клетки базолатерально пронизывали амфотерицином B (250 мг / л) перед активацией E _act .

Самцов мышей ICR были убиты передозировкой внутрибрюшинной инъекции пентобарбитала натрия (100 мг / кг). Толстую кишку удаляли у каждого животного и промывали охлажденным льдом модифицированным раствором KH (содержащим в мМ: 120 NaCl, 5 KCl, 1 MgCl ₂ , 1 CaCl ₂ , 10 _D -глюкоза, 5 Hepes, 25 NaHCO ₃ , 10 мкМ индометацин, pH 7.4.). Затем он был установлен в камерах Уссинга после снятия мышечной ткани. Полукамеры были заполнены 5 мл раствора KH, через который барботировали 95% O ₂ /5% CO ₂ при 37 ° C. Индометацин (10 мкМ) добавляли в обе полукамеры для предотвращения образования простагландинов. Амилорид (10 мкМ) добавляли к слизистой оболочке для подавления эпителиального тока Na ⁺ .

Для измерения тока Cl ^– апикальной мембраны базолатеральную мембрану деполяризовали раствором с высокой концентрацией калия.Спустя более 40 минут апикальный ток Cl ^– измеряли в присутствии градиента Cl ^– от серозно-слизистой оболочки. Апикальный раствор содержит (в мМ): 107 K -глюконат, 4,5 KCl, 25 NaHCO ₃ , 1,8 Na ₂ HPO ₄ , 0,2 NaH ₂ PO ₄ , 5,75 Са-глюконат, 1,0 MgSO ₄ и 12 _D -глюкоза. Базолатеральный раствор содержит (в мМ): 111,5 KCl, 25 NaHCO ₃ , 1,8 Na ₂ HPO ₄ ,0.2 NaH ₂ PO ₄ , 1,25 CaCl ₂ , 1,0 MgSO ₄ и 12 _D -глюкоза.

Для измерения базолатерального тока K ⁺ ткани толстой кишки были помещены в модифицированный раствор KH, апикальный раствор содержит (в мМ): 116 K -глюконат, 4,7 KCl, 5 CaCl ₂ , 1,2 MgCl ₂ , NaHCO ₃ , 1,2 KH ₂ PO ₄ , 11,1 _D -глюкоза. Базолатеральный раствор содержит (в мМ): Na-глюконат 116, 4.7 KCl, 5 CaCl ₂ , 1,2 MgCl ₂ , NaHCO ₃ , 1,2 KH ₂ PO ₄ , 11,1 _D -глюкоза. К базолатеральному раствору добавляли 100 мкМ уабаина для ингибирования Na ⁺ –K ⁺ -АТФазы. Последующая проницаемость апикальной мембраны была проведена с помощью нистатина (200 мкг / мл).

При измерении активности Na ⁺ / K ⁺ -АТФазы слизистая сторона ткани была проницаема для нистатина (200 мкг / мл). Все клетки и ткани аэрировали 95% O ₂ /5% CO ₂ при 37 ° C во время экспериментов.Трансэпителиальные токи короткого замыкания регистрировали с помощью программного обеспечения Acquire and Analyze 2.3, трансэпителиальный потенциал фиксировали на уровне 0 мВ во время всех процессов, упомянутых выше.

Измерение перистальтики кишечника

Мышей

ICR голодали в течение 24 часов, а затем перорально вводили шиконин (5,8 мкг). Через 30 минут перорально вводили 20 мг 10% активированного угля, разведенного в 5% гуммиарабике. Еще через 30 мин животных умерщвляли и удаляли тонкий кишечник.Перистальтический индекс рассчитывали как отношение длины, пройденной активированным углем, к общей длине тонкой кишки.

Модель ротавирусной диареи на мышах

Новорожденных мышей ICR (возраст 4–7 дней, вес 2–3 г) инокулировали 30 мкл ротавируса (титр вируса 1,2 × 10 ⁷ БОЕ / мл) через желудочный зонд с использованием полиэтиленовой трубки (внешний диаметр 0,6 мм, 0,3 мм внутренний диаметр) и инсулиновый шприц. Затем мышей возвращали их матерям и давали кормить грудью.Образцы стула собирали ежедневно путем осторожной пальпации живота. В одной серии экспериментов группа, получавшая шиконин, получала шиконин перорально (0,4 и 1,7 мкг в 30 мкл PBS) за день до инокуляции вируса и три раза в день до дня 3. Контрольные мыши получали только 30 мкл PBS. Мыши с положительным контролем (CaCC _inh -A01) получали 34 мкг (в 20 мкл PBS) CaCC _inh -A01 путем внутрибрюшинной инъекции за день до инокуляции вируса и дважды в день после этого до дня 3.В другой серии экспериментов группа, получавшая шиконин, получала шиконин в PBS на следующий день инокуляции вируса и три раза в день до дня 3. Мыши отрицательного контроля получали только 30 мкл PBS. Мыши с положительным контролем получали CaCC _inh -A01 путем внутрибрюшинной инъекции за день до инокуляции вируса и дважды в день после этого до дня 3.

Анализ содержания воды в стуле

Для сбора образцов стула живот животного осторожно пальпировали. Чтобы количественно определить содержание воды в стуле, использовали пластинку из полиметилметакрилата (ПММА) из 2.Использовали толщину 0 мм, в которой пробивали отверстие диаметром 1,0 мм, чтобы вмещать цилиндрический объем стула 1,57 мм ³ . Цилиндрическую пробку стула наносили на кусок мембраны из ацетата целлюлозы (насыщенной 0,1% нейтральным красным, затем сушили) и позволяли контактировать с бумагой в течение 3 мин в увлажненной атмосфере. Смоченная площадь была определена количественно с помощью цифрового изображения.

Гистология

Мышей умерщвляли на 3-й день, выделяли подвздошную кишку и промывали PBS.Образцы фиксировали формалином в течение 24 часов, а затем заливали парафином и окрашивали гематоксилином и эозином.

Статистический анализ

Все данные были выражены в виде среднего ± стандартная ошибка или в виде репрезентативных кривых. Односторонний или двусторонний дисперсионный анализ с последующим тестом множественного сравнения Даннета использовался для сравнения тестовых и контрольных значений, и статистическая значимость учитывалась на уровне p <0,05.

Заявление об этике

Это исследование было проведено в соответствии с рекомендациями «Руководства по уходу и использованию лабораторных животных Национального института здоровья» и было одобрено Комитетом по исследованиям на животных Ляонинского педагогического университета.Все операции проводились под анестезией пентобарбиталом натрия, и были предприняты возможные усилия, чтобы свести к минимуму страдания.

Результаты

Идентификация шиконина как ингибитора хлоридных каналов TMEM16A

TMEM16A был первым идентифицированным CaCC, и влияние шиконина (рис. 1A) на активность хлоридных каналов TMEM16A было изучено с использованием ранее настроенного клеточного анализа гашения флуоресценции. Измерения тока короткого замыкания проводили в клетках FRT, экспрессирующих TMEM16A.Шиконин ингибировал АТФ-стимулированную активность хлоридных каналов TMEM16A со значением IC ₅₀ , равным 6,5 мкМ (рис. 1В). Измерение тока короткого замыкания показало, что ингибирование хлоридных токов TMEM16A шиконином зависело от концентрации, а самая высокая концентрация (10 мкМ) шиконина могла отменить только около 65% тока Cl ^–, стимулированного E _act ( Рисунок 1С). С другой стороны, T16A _inh -A01 (30 мкМ) полностью ингибировал E _act -индуцированный TMEM16A-опосредованный ток короткого замыкания (рис. 1D).

РИСУНОК 1. Ингибирование активности хлоридных каналов TMEM16A шиконином. (A) Структура шиконина. (B) Анализ тушения флуоресценции, показывающий ингибирование активности хлоридного канала TMEM16A различными концентрациями шиконина. (C) Частичное ингибирование E _act -индуцированных TMEM16A-опосредованных токов короткого замыкания шиконином и T16A _inh -A01. (D) Гистограмма сравнивает величину индуцированных E _act токов короткого замыкания, подавляемых шиконином, и T16A _inh -A01.Показанные кривые являются типичными результатами трех независимых экспериментов.

Шиконин ингибирует индуцированные CCh токи короткого замыкания в эпителии толстой кишки взрослых мышей

Исследовали эффективность подавления, оказываемого шиконином на эндогенный желудочно-кишечный CaCC (CaCC _GI ) толстой кишки мыши. К раствору слизистой оболочки добавляли различные концентрации шиконина, и через 15 мин токи короткого замыкания стимулировались холинергическим агонистом карбахолом. Ингибирование тока CaCC _GI шиконином зависело от концентрации, при этом 5 и 20 мкМ шиконин снижал токи на 24 ± 8.7 и 48 ± 10,7% соответственно (рис. 2А), и это было лучше, чем ингибирование, оказываемое 50 мкМ CaCC _inh -A01 (34 ± 8,8%).

РИСУНОК 2. Влияние шиконина на транспорт Cl ^– в эпителии толстой кишки мыши. (A) Ингибирование индуцированных CCh токов короткого замыкания с помощью ДМСО, шиконина (5 и 20 мкМ) и CaCC _inh -A01 ( n = 3). На графике сравнивается величина ингибирования, показанная на графике. Данные представляют собой средние значения ± стандартное отклонение трех независимых тестов ^∗ p <0.05. (B) Цитоплазматический Ca ²⁺ , измеренный с помощью флуоресценции Fluo-4 NW в базовых условиях после добавления АТФ (100 мкМ). Клетки HT-29 предварительно обрабатывали ДМСО или 5 мкМ шиконином. (C) Ингибирование апикального тока Cl ^– с помощью ДМСО, шиконина (20 мкМ) и CaCC _inh -A01 (50 мкМ) ( n = 3). Краткое описание I _Cl показано на правой панели. На графике сравнивается величина ингибирования, показанная на графике. Данные представляют собой средние значения ± стандартное отклонение трех независимых тестов ^∗ p <0.05. (D) Влияние шиконина на активность хлоридных каналов CFTR в эпителии толстой кишки мышей. CFTR _inh -172 использовался для устранения токов короткого замыкания, вызванных FSK. Показанные кривые являются типичными результатами трех независимых экспериментов.

Поскольку CaCCs могут быть активированы увеличением концентрации кальция в цитоплазме, мы измерили концентрацию кальция после активации АТФ. Оказалось, что 5 мкМ шиконина не влияли на АТФ-индуцированную концентрацию кальция в цитоплазме (рис. 2В).

Чтобы исключить возможность того, что сниженные трансэпителиальные токи, вызванные шинконином, были вызваны ингибированием транспорта K ⁺ , трансэпителиальные токи измеряли в условиях деполяризации. Эксперименты проводились при условии деполяризации базолатеральной мембраны высокой концентрацией K ⁺ . Результаты показали, что апикальное нанесение шиконина (20 мкМ) и CaCC-специфического ингибитора CaCC _inh -A01 (50 мкМ) все еще может снизить токи короткого замыкания, индуцированные CCh, на 27.8 ± 2,7 и 30,5 ± 3,3%, соответственно, по сравнению с контролем ДМСО (рис. 2С), что позволяет предположить, что шиконин напрямую ингибирует потоки хлоридов.

Эффективность опосредованного шиконином ингибирования активности хлоридного канала CFTR была также протестирована ex vivo на свежевыделенной слизистой оболочке толстой кишки мыши. Токи короткого замыкания стимулировались FSK (20 мкМ), а затем шиконин (2–50 мкМ) добавлялся в раствор слизистой оболочки или серозной оболочки для исследования ингибирующего действия шиконина на стимулируемый FSK CFTR-опосредованный ток Cl ^–.Шиконин не влиял на токи короткого замыкания, опосредованные CFTR, в эпителии толстой кишки мышей (рис. 2D). Остальные токи были отменены CFTR _inh -172 (100 мкМ). Эти результаты предполагают, что шиконин непосредственно ингибирует активность хлорида CaCC _GI в эпителии толстой кишки мышей.

Характеристика токов CaCC, ингибируемых шиконином

Апикальная секреция Cl ^– в энтероците требует движущей силы, обеспечиваемой Na ⁺ / K ⁺ -АТФаза, Na ⁺ / K ⁺ / 2Cl ^– котранспортер и K ⁺ каналов расположен в базолатеральной мембране.Таким образом, ингибирование этих переносчиков косвенно приведет к снижению секреции апикального хлорида в энтероците. Поэтому мы проанализировали влияние шиконина на базолатеральный канал K ⁺ и Na ⁺ / K ⁺ -АТФазу в эпителии толстой кишки мышей. Как видно на Рисунке 3А, после пермибилизации апикальной мембраны нистатином шиконин снижает ток короткого замыкания, стимулированный ЦХ, на 55,0 ± 4,3% по сравнению с контролем ДМСО, тогда как базолатеральный ингибитор каналов K ⁺ клотримазол снижает ток на 82.5 ± 2,8%, что свидетельствует о том, что шиконин значительно ингибировал активированный Ca ²⁺ базолатеральный канал K ⁺ . Чтобы измерить активность Na ⁺ / K ⁺ -АТФазы, анализировали ток короткого замыкания после проницаемости слизистой оболочки и добавления различных концентраций (5–50 мкМ) шиконина в серозный раствор. Как показано на рисунке 3B, шиконин не влиял на ток короткого замыкания, опосредованный Na ⁺ / K ⁺ -АТФаза, а токи, стимулированные нистатином, полностью устранялись Na ⁺ / K ⁺ – Ингибитор АТФазы уабаин (500 мкМ), что позволяет предположить, что ингибирование транспорта хлоридов шиконином происходит не за счет ингибирования базолатеральной активности Na ⁺ / K ⁺ -АТФазы.

РИСУНОК 3. Характеристика токов CaCC, ингибируемых шиконином. (A) Ингибирование базолатерального канала K ⁺ с помощью ДМСО, шиконина (20 мкМ) и клотримазола (50 мкМ). Обобщенный I _K показан на правой панели. На графике сравнивается величина ингибирования, показанная на графике. Данные представляют собой средние значения ± SE трех независимых тестов ^∗∗ p <0,01, ^∗∗∗ p <0,0005. (B) Влияние шиконина на Na ⁺ / K ⁺ -АТФазу в эпителии толстой кишки мыши.Ток короткого замыкания индуцировали внутриклеточной нагрузкой Na ⁺ после проницаемости слизистой оболочки нистатином (200 мкг / мл). Показанные кривые являются типичными результатами трех независимых экспериментов.

Ингибирование моторики кишечника взрослых мышей шиконином

Повышенная перистальтика кишечника также является симптомом некоторых инфекционных диареев. TMEM16A в большом количестве экспрессируется в ICC, где он вызывает сокращение гладких мышц, тем самым опосредуя моторику желудочно-кишечного тракта (Huang et al., 2009; Hwang et al., 2009; Ferrera et al., 2010). Поэтому было исследовано влияние шиконина на моторику желудочно-кишечного тракта (рис. 4А). Пероральное введение 5,8 мкг шиконина значительно снизило перистальтику кишечника и задержку движения угля у мышей, в результате чего перистальтический индекс составил 34,9 ± 9,1% по сравнению с 82,3 ± 2,9%, вызванными PBS (рис. 4B).

РИСУНОК 4. Подавление моторики желудочно-кишечного тракта шиконином. (A) Фотографии изолированных кишечных трактов мыши, показывающие расстояние, пройденное активированным углем после введения PBS или шиконина через желудочный зонд. (B) Сравнение перистальтических индексов (расстояния, на которые активированный уголь перемещается в кишечнике) у животных, получавших PBS и шиконин. Данные представляют собой средние значения ± стандартное отклонение трех независимых экспериментов. ^∗∗ Значительно отличается от животных, получавших PBS, при уровне p <0,01.

Шиконин предотвращает водянистый стул у новорожденных мышей, инфицированных ротавирусом

Ингибирующее действие шиконина на ротавирусную диарею in vivo тестировали с помощью двух протоколов, как описано выше.На рисунке 5A (вверху) показан первый протокол, используемый для индукции ротавирусной диареи у новорожденных мышей. Сильно водянистый стул начался на 1-й день после инокуляции ротавируса и продолжался в течение следующих 3 дней. Сравнение изображений мембраны из ацетата целлюлозы, сделанных через 3 минуты после отложения стула, с изображениями, сделанными после удаления стула, показало, что смоченная область (отмеченная тонкими пунктирными круговыми линиями) варьировалась при различных обработках в течение 3 дней (рис. 5А внизу). Содержание воды снизилось в группах, обработанных шиконином и CaCC _{в группе} -A01, о чем свидетельствует меньшая площадь смачивания.На рис. 5В сравнивается влажная область, оставшаяся после стула на 1-3 дни у мышей, получавших шиконин или CaCC _inh -A01. Во втором протоколе шиконин также был эффективен при введении в 1-й день, после того, как началась водянистая диарея, при значительно более низком содержании воды в стуле на 2–3 дни (рис. 5C). Эти результаты продемонстрировали, что шиконин может предотвращать водную диарею после прививки ротавируса новорожденным мышам, и этот эффект был лучше, чем CaCC _inh -A01.

РИСУНОК 5. Влияние шиконина на ротавирусную диарею в модели новорожденных мышей. (A) Схематическое изображение протокола, используемого для индукции ротавирусной диареи у мышей, и изображение стула, полученного от этих животных. Мышам перорально вводили однократную дозу шиконина (0,4 и 1,7 мкг) за день до инокуляции ротавируса и три дозы в день в течение следующих 4 дней. Мышам положительного контроля внутрибрюшинно вводили однократную дозу (34 мкг) CaCC _inh -A01 за день до инокуляции ротавируса с последующими двумя дозами в день в течение следующих 4 дней.Фотографии мембран из ацетата целлюлозы, сделанные через 3 минуты после осаждения образцов стула (слева) и после удаления образцов стула (справа). Смоченная зона обозначена пунктирной линией. (B) На графиках сравнивается размер смоченной области на мембране из ацетата целлюлозы после удаления стула. (C) Исследование, аналогичное (A) , за исключением того, что введение шиконина через желудочный зонд началось в день 1 (SE, n = 4–6 мышей). Данные представляют собой средние значения ± стандартное отклонение трех независимых экспериментов.Значительное различие между группой, инокулированной ротавиусом (a), и группами, обработанными шиконином (b и c) или CaCC _inh -A01 (d) ( p <0,0005).

Шиконин не ингибирует ротавирусную инфекцию

Ротавирусная инфекция кишечника была дополнительно подтверждена гистологией, которая выявила заметную вакуолизацию энтероцитов у инфицированных животных. Через три дня после инфицирования в энтероцитах, выстилающих поверхность ворсинок в инфицированных ротавирусом группах, наблюдались набухание кончика ворсинок и большие вакуоли (рис. 6).Вакуоли не наблюдались у неинфицированных мышей. Мыши, получавшие шиконин, также показали вакуолизацию, аналогичную таковой у необработанных мышей, инфицированных ротавирусом, что подтверждает вывод о том, что шиконин снижает водную диарею за счет антисекреторного действия, а не предотвращает ротавирусную инфекцию.

РИСУНОК 6. Влияние шиконина на ротавирусную инфекцию в модели новорожденных мышей. Гистологический анализ подвздошной кишки мыши на 3-й день заражения. Представленные изображения представляют собой фотографии залитых парафином срезов контрольных мышей, контрольных мышей, инфицированных ротавирусом, и мышей, обработанных шиконином.

Обсуждение

Вирусная диарея остается одним из самых смертельных заболеваний у детей как в развитых, так и в развивающихся странах. Настоящее исследование показало, что шиконин ингибирует TMEM16A и CaCC _GI в кишечнике и значительно снижает перистальтику кишечника у мышей и содержание воды в стуле на модели новорожденных мышей после ротавирусной инфекции. Шиконин ингибировал CaCC-опосредованный транспорт Cl ^– эпителиального эпителия толстой кишки в изолированной толстой кишке мыши.В отличие от дубильной кислоты и галлотаннинов, которые также ингибируют другой главный канал хлорида энтероцитов, CFTR или ENaC (Namkung et al., 2010), шиконин не ингибирует CFTR или Na ⁺ / K ⁺ -АТФаза, таким образом демонстрируя более высокую селективность. для ингибирования активности хлоридных каналов CaCC, чем дубильная кислота и галлотанины. Однако важно отметить, что ни шиконин, ни CaCC _inh -A01 не могут полностью ингибировать стимулированные CCh токи короткого замыкания в изолированной толстой кишке мыши.Было показано, что базолатеральные Ca ²⁺ -активированные каналы K ⁺ экспрессируются в толстой кишке человека и мыши (Rufo et al., 1996, 1997; Sandle and Rajendran, 2012). В нашем исследовании не игнорировалась возможность косвенного ингибирующего действия шиконина через базолатеральный канал K ⁺ . Как предполагалось, базолатеральный канал K ⁺ , активированный Ca ²⁺ , действительно составлял, по крайней мере, часть ингибирования CCh-индуцированного тока хлорида шиконином.

Уменьшение содержания воды в стуле у ротавирусных новорожденных мышей шиконином, наблюдаемое в этом исследовании, вероятно, произошло за счет антисекреторного действия шиконина, которое включало ингибирование активности хлоридных каналов CaCC _GI .Хотя TMEM16A существует в энтероцитах, некоторые исследователи предположили, что секреторная диарея, вызванная ротавирусным неструктурным белком NSP4, в основном происходит из-за активации эпителиального TMEM16A в кишечнике. Одно исследование, в котором использовался низкомолекулярный ингибитор TMEM16A T16A _inh -A01, продемонстрировало, что TMEM16A составляет лишь второстепенный компонент кишечного эпителиального CaCC (Namkung et al., 2011). Наша предыдущая работа показала, что TMEM16A и CaCC _GI имеют разные характеристики, поскольку соединения лигнана кобусин и эудесмин могут по-разному влиять на TMEM16A и CaCC _GI , ингибируя TMEM16A, при активации CaCC _GI (Jiang et al., 2015). В этом исследовании мы показали, что шиконин ингибирует токи короткого замыкания, опосредованные CaCC _GI , как в модели культуры клеток, так и в изолированной толстой кишке мыши. Кроме того, исследований in vivo и показали, что шиконин снижает содержание воды в модели диареи у новорожденных мышей, не влияя на процесс ротавирусной инфекции (рис. 6). Эти данные подтверждают мнение о том, что основным путем водянистой диареи, связанной с ротавирусной инфекцией, является активация NSP4 CaCC _GI , а не TMEM16A, тем самым увеличивая накопление жидкости.Кроме того, ингибирование TMEM16A шиконином задерживает моторику желудочно-кишечного тракта, помогая продлить время абсорбции жидкости для дальнейшего снижения чистой секреции жидкости.

В качестве основного компонента Zicao, сушеного корня Lithospermum erythrorhizon , шиконин широко используется из-за его противовоспалительной активности (Chen et al., 2002). Сообщается, что шиконин обладает антиоксидантным, антибактериальным, противопаразитарным, противовирусным и ранозаживляющим действием (Andujar et al., 2013).Шиконин может использоваться при лечении астмы. Такано-Омуро и др. (2008) исследовали использование шиконина при астме, сосредоточив внимание на его противовоспалительной активности (Takano-Ohmuro et al., 2008). Другие исследователи использовали модель астмы у мышей, чтобы продемонстрировать, что шиконин ингибирует созревание дендритных клеток костного мозга in vitro , а также аллергическое действие, а также гиперреактивность трахеи in vivo (Lee et al., 2010). Поскольку TMEM16A экспрессируется в клетках гладких мышц дыхательных путей и участвует в сокращении гладких мышц (Huang et al., 2012), мы предположили, что TMEM16A может участвовать в опосредованном шиконином ингибировании астмы. В нашем исследовании было обнаружено, что шиконин ингибирует активность хлоридного канала TMEM16A, что указывает на то, что шиконин может облегчить астму, подавляя сокращение гладких мышц в трахее.

Несмотря на множество положительных преимуществ шиконина, он не лишен токсичности. Было продемонстрировано, что внутрибрюшинная инъекция шиконина приводит к некоторой токсичности с LD ₅₀ 20 мг / кг (Sankawa et al., 1977). Исследование фармакокинетики показало, что абсорбция шиконина происходит быстро при пероральном введении через желудочный зонд и мышечной инъекции, так как он почти не обнаруживается в плазме через 1 минуту, а при пероральном введении через желудочный зонд биодоступность составляет около 34% (Wang et al., 1988). В этом исследовании дозы, используемые для лечения перистальтики кишечника (0,38 мг / кг) и ротавирусной инфекции на модели мышей (0,69 мг / кг), были ниже доз, которые считаются токсичными.

Заключение

Настоящее исследование выявило шиконин как новый ингибитор против каналов хлорида TMEM16A и CaCC _GI , добавив к списку биологических активностей, которыми это соединение уже обладает, и показало, что шиконин может быть ведущим лекарством в лечении ротавирусной диареи.

Авторские взносы

YJ провел экспериментальную работу и сбор данных, а также подготовил рукопись. BY участвовал в разработке и координации экспериментальных работ, а также в сборе данных. HY и TM разработали дизайн исследования и критически пересмотрели его с учетом важного интеллектуального содержания. Все авторы прочитали и одобрили окончательную рукопись.

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Благодарности

Эта работа была поддержана Национальным фондом естественных наук Китая (№ 81473265; 31471099; 81173109; 30973577), Молодежным фондом Педагогического университета Ляонин (№ LS2014L010).

Список литературы

Андуджар И., Риос Дж. Л., Гинер Р. М. и Ресио М. К. (2013). Фармакологические свойства шиконина – обзор литературы с 2002 г. Planta Med. 79, 1685–1697. DOI: 10.1055 / с-0033-1350934

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Болл, Дж.М., Тиан П., Цзэн К. К., Моррис А. П. и Эстес М. К. (1996). Возраст-зависимая диарея, вызванная ротавирусным неструктурным гликопротеином. Наука 272, 101–104. DOI: 10.1126 / science.272.5258.101

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Барретт К. Э. и Кили С. Дж. (2000). Секреция хлоридов эпителием кишечника: молекулярные основы и регуляторные аспекты. Annu. Rev. Physiol. 62, 535–572. DOI: 10.1146 / annurev.physiol.62.1.535

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Капуто, А., Caci, E., Ferrera, L., Pedemonte, N., Barsanti, C., Sondo, E., et al. (2008). TMEM16A, мембранный белок, связанный с кальций-зависимой активностью хлоридных каналов. Наука 322, 590–594. DOI: 10.1126 / science.1163518

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Карлес А., Миллон Р., Кромер А., Гангули Г., Лемэр Ф., Янг Дж. И др. (2006). Анализ транскриптома плоскоклеточного рака головы и шеи с помощью комплексного проверенного дифференциального дисплея. Онкоген 25, 1821–1831.DOI: 10.1038 / sj.onc.1209203

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Чао, А.С., де Соваж, Ф. Дж., Донг, Ю. Дж., Вагнер, Дж. А., Геддел, Д. В., и Гарднер, П. (1994). Активация кишечного канала CFTR Cl- термостабильным энтеротоксином и гуанилином через цАМФ-зависимую протеинкиназу. EMBO J. 13, 1065–1072.

Google Scholar

Чен, X., Янг, Л., Оппенгейм, Дж. Дж., И Ховард, М. З. (2002). Исследования производных шиконина в клеточной фармакологии. Phytother. Res. 16, 199–209. DOI: 10.1002 / ptr.1100

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Доновиц, М., Альперс, Д. Х., Биндер, Х. Дж., Брюэр, Т., Кэррингтон, Дж., И Грей, М. Дж. (2012). Трансляционные подходы к разработке фармакотерапии острой диареи. Гастроэнтерология 142, e1 – e9. DOI: 10.1053 / j.gastro.2012.01.014

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Феррера Л., Капуто А. и Галиетта Л. Дж. (2010). Белок TMEM16A: новая идентичность для Ca (2 +) – зависимых Cl (-) каналов. Physiology (Bethesda) 25, 357–363. DOI: 10.1152 / Physiol.00030.2010

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Гарсиа М.А., Янг Н. и Куинтон П.М. (2009). Для нормального выделения слизи из кишечника мышей требуется трансмембранный регулятор муковисцидоза секреции бикарбоната. J. Clin. Инвестировать. 119, 2613–2622. DOI: 10.1172 / JCI38662

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Грабб Б. Р. (1995). Транспорт ионов через тощую кишку у здоровых мышей и мышей с муковисцидозом. г. J. Physiol. 268 (3, часть 1), G505 – G513.

Google Scholar

Хуанг, Ф., Рок, Дж. Р., Харф, Б. Д., Ченг, Т., Хуанг, X., Ян, Ю. Н. и др. (2009). Исследования экспрессии и функции активированного кальцием хлоридного канала TMEM16A. Proc. Natl. Акад. Sci. США. 106, 21413–21418. DOI: 10.1073 / pnas.05106

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хуанг, Ф., Чжан, Х., Ву, М., Ян, Х., Кудо, М., Петерс, К. Дж. И др.(2012). Активированный кальцием хлоридный канал TMEM16A модулирует секрецию муцина и сокращение гладких мышц дыхательных путей. Proc. Natl. Акад. Sci. США. 109, 16354–16359. DOI: 10.1073 / pnas.1214596109

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хуанг, X., Голлин, С. М., Раджа, С., и Годфри, Т. Е. (2002). Картирование с высоким разрешением ампликона 11q13 и идентификация гена TAOS1, который амплифицируется и сверхэкспрессируется в раковых клетках полости рта. Proc. Natl. Акад.Sci. США. 99, 11369–11374. DOI: 10.1073 / pnas.172285799

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Hwang, S.J., Blair, P.J., Britton, F.C., O’Driscoll, K.E., Hennig, G., Bayguinov, Y.R., et al. (2009). Экспрессия аноктамина 1 / TMEM16A интерстициальными клетками Кахаля является основой медленноволновой активности в мышцах желудочно-кишечного тракта. J. Physiol. 587 (Pt 20), 4887–4904. DOI: 10.1113 / jphysiol.2009.176198

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Цзян, Ю., Ю, Б., Фанг, Ф., Цао, Х., Ма, Т., и Ян, Х. (2015). Модуляция функций хлоридных каналов с помощью соединений лигнана растений кобусина и эудесмина. Фронт. Plant Sci. 6: 1041. DOI: 10.3389 / fpls.2015.01041

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ко, Э. А., Джин, Б. Дж., Намкунг, В., Ма, Т., Тиагараджа, Дж. Р., и Веркман, А. С. (2014). Ингибирование хлоридных каналов экстрактом красного вина и небольшой синтетической молекулой предотвращает ротавирусную секреторную диарею у новорожденных мышей. Кишечник 63, 1120–1129. DOI: 10.1136 / gutjnl-2013-305663

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Kristidis, P., Bozon, D., Corey, M., Markiewicz, D., Rommens, J., Tsui, L.C., et al. (1992). Генетическое определение внешнесекреторной функции поджелудочной железы при муковисцидозе. г. J. Hum. Genet. 50, 1178–1184.

Google Scholar

Ли, К. К., Ван, К. Н., Лай, Ю. Т., Кан, Дж. Дж., Ляо, Дж. У., Чан, Б. Л. и др. (2010). Шиконин подавляет созревание дендритных клеток костного мозга и подавляет аллергическое воспаление дыхательных путей на мышиной модели астмы. руб. J. Pharmacol. 161, 1496–1511. DOI: 10.1111 / j.1476-5381.2010.00972.x

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Моррис, А. П., Скотт, Дж. К., Болл, Дж. М., Зенг, К. К., О’Нил, В. К., и Эстес, М. К. (1999). NSP4 вызывает возрастную диарею и опосредованный Ca (2+) приток I (-) в кишечные крипты мышей с CF. г. J. Physiol. 277 (2 балла 1), G431 – G444.

Google Scholar

Намкунг В., Фуан П. В. и Веркман А. С. (2011).Ингибиторы TMEM16A обнаруживают TMEM16A как второстепенный компонент проводимости активируемых кальцием хлоридных каналов в эпителиальных клетках дыхательных путей и кишечника. J. Biol. Chem. 286, 2365–2374. DOI: 10.1074 / jbc.M110.175109

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Намкунг В., Тиагараджа Дж. Р., Фуан П. В. и Веркман А. С. (2010). Ингибирование Ca2 + -активированных Cl- каналов галлотанинами как возможная молекулярная основа пользы для здоровья красного вина и зеленого чая. FASEB J. 24, 4178–4186. DOI: 10.1096 / fj.10-160648

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Петри, В. А. мл., Миллер, М., Биндер, Х. Дж., Левин, М. М., Диллингем, Р., и Герран, Р. Л. (2008). Кишечные инфекции, диарея и их влияние на функции и развитие. J. Clin. Инвестировать. 118, 1277–1290. DOI: 10.1172 / JCI34005

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Руфо, П. А., Цзян, Л., Мо, С. Дж., Бругнара, К., Альпер, С. Л., и Ленсер, В.I. (1996). Противогрибковый антибиотик клотримазол ингибирует секрецию Cl- поляризованными монослоями эпителиальных клеток толстой кишки человека. J. Clin. Инвестировать. 98, 2066–2075. DOI: 10.1172 / JCI119012

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Руфо П. А., Мерлин Д., Риглер М., Фергюсон-Мальцман М. Х., Дикинсон Б. Л., Бругнара К. и др. (1997). Противогрибковый антибиотик, клотримазол, подавляет секрецию хлоридов клетками T84 кишечника человека путем блокирования различных базолатеральных проводимостей K +.Демонстрация эффективности в интактной толстой кишке кролика и на мышиной модели холеры in vivo. J. Clin. Инвестировать. 100, 3111–3120. DOI: 10.1172 / JCI119866

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сандл, Г. И., и Раджендран, В. М. (2012). Циклический АМФ-индуцированная секреция K + происходит независимо от секреции Cl- в дистальном отделе толстой кишки крысы. г. J. Physiol. Cell Physiol. 303, C328 – C333. DOI: 10.1152 / ajpcell.00099.2012

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Санкава, У., Эбизука, Ю., Миядзаки, Т., Исомура, Ю., и Оцука, Х. (1977). Противоопухолевая активность шиконина и его производных. Chem. Pharm. Бык. (Токио) 25, 2392–2395. DOI: 10.1248 / cpb.25.2392

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Шредер, Б. К., Ченг, Т., Ян, Ю. Н. и Ян, Л. Ю. (2008). Клонирование экспрессии TMEM16A как субъединицы хлоридного канала, активируемого кальцием. Ячейка 134, 1019–1029. DOI: 10.1016 / j.cell.2008.09.003

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Sonawane, N.Д., Чжао, Д., Зегарра-Моран, О., Галиетта, Л. Дж., И Веркман, А. С. (2007). Конъюгаты лектина как сильнодействующие неабсорбируемые ингибиторы CFTR для снижения секреции кишечной жидкости при холере. Гастроэнтерология 132, 1234–1244. DOI: 10.1053 / j.gastro.2007.02.018

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Такано-Омуро, Х., Йошида, Л. С., Юда, Ю., Мориока, К., и Китани, С. (2008). Шиконин подавляет опосредованное IgE высвобождение гистамина базофилами человека и активность Syk-киназы. Inflamm. Res. 57, 484–488. DOI: 10.1007 / s00011-008-8067-9

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Thiagarajah, J. R., Broadbent, T., Hsieh, E., and Verkman, A. S. (2004). Предотвращение токсин-индуцированной секреции кишечных ионов и жидкости с помощью низкомолекулярного ингибитора CFTR. Гастроэнтерология 126, 511–519. DOI: 10.1053 / j.gastro.2003.11.005

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Уокер, К. Л., Рудан, И., Лю, Л., Наир, Х., Теодорату, Э., Бхутта, З. А. и др. (2013). Глобальное бремя детской пневмонии и диареи. Ланцет 381, 1405–1416. DOI: 10.1016 / S0140-6736 (13) 60222-6

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ван Б., Ли К., Хуай Р. и Цюй З. (2015). Сверхэкспрессия ANO1 / TMEM16A, артериального Ca2 + -активированного канала Cl ^–, способствует спонтанной гипертензии. J. Mol. Cell Cardiol. 82, 22–32. DOI: 10.1016 / j.yjmcc.2015.02.020

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ван, В.J., Yi, M.G., и Zhu, X.Y. (1988). [Исследование абсорбции, распределения и выведения 3H-шиконина у мышей]. Яо Сюэ Сюэ Бао 23, 246–251.

Google Scholar

Вест Р. Б., Корлесс К. Л., Чен Х., Рубин Б. П., Субраманиан С., Монтгомери К. и др. (2004). Новый маркер, DOG1, повсеместно экспрессируется в стромальных опухолях желудочно-кишечного тракта независимо от статуса мутации KIT или PDGFRA. г. J. Pathol. 165, 107–113. DOI: 10.1016 / S0002-9440 (10) 63279-8

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ян, Ю.Д., Чо, Х., Ку, Дж. Й., Так, М. Х., Чо, Й., Шим, В. С. и др. (2008). TMEM16A придает активируемую рецептором кальций-зависимую хлоридную проводимость. Природа 455, 1210–1215. DOI: 10.1038 / nature07313

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ю, Б., Цзян, Ю., Лю, Ю., Ма, Т., и Ян, Х. (2015). Профилактика секреторной диареи этанольным экстрактом ризомы Bistortae путем ингибирования хлоридного канала. Bangladesh J. Pharmacol. 10, 533. DOI: 10.3329 / bjp.v10i3.23260

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ротавирусная симптоматическая инфекция среди невакцинированных и вакцинированных детей в Валенсии, Испания | BMC Infectious Diseases

1.

ВОЗ. Ротавирусные вакцины Позиционный документ ВОЗ: январь 2013 г. – Рекомендации. Вакцина. 2013. 31 (52): 6170–1.

Артикул Google ученый

2.

Velázquez FR. Защитные эффекты естественной ротавирусной инфекции.Pediatr Infect Dis J. 2009; 28 (Приложение): S54–6.

PubMed Статья Google ученый

3.

Андерсон Э.Дж., Вебер С.Г. Ротавирусная инфекция у взрослых. Lancet Infect Dis. 2004. 4 (2): 91–9.

PubMed Статья Google ученый

4.

Hoffmann T, Iturriza-Gómara M, Faaborg-Andersen J, Kraaer C, Nielsen CP, Gray J, et al. Проспективное исследование бремени ротавирусного гастроэнтерита у датских детей и их семей.Eur J Pediatr. 2011; 170 (12): 1535–9.

PubMed Статья Google ученый

5.

Marinosci A, Doit C, Koehl B, Belhacel K, Mariani Kurkdjian P, Melki I, et al. Nosocomiales à Rotavirus: nosocomiales à rotavirus: étude rétrospective dans un service de pédiatrie générale. Arch Pédiatrie. 2016; 23 (11): 1118–23.

CAS Статья Google ученый

6.

Тейт Дж. Э., Бертон А. Х., Боски-Пинто К., Стил А. Д., Дуке Дж., Парашар Ю. Д..Оценка смертности от ротавирусной инфекции среди детей младше 5 лет во всем мире за 2008 год до введения всеобщих программ вакцинации против ротавируса: систематический обзор и метаанализ. Lancet Infect Dis. 2012; 12 (2): 136–41.

PubMed Статья Google ученый

7.

Троегер С., Халил И.А., Рао П.С., Цао С., Блэкер Б.Ф., Ахмед Т. и др. Вакцинация против ротавируса и глобальное бремя ротавирусной диареи среди детей младше 5 лет.JAMA Pediatr. 2018; 172 (10): 958–65.

PubMed PubMed Central Статья Google ученый

8.

Parashar UD, Hummelman EG, Bresee JS, Miller MA, Glass RI. Заболевания и смертность детей от ротавирусной инфекции в мире. Emerg Infect Dis. 2003. 9 (5): 565–72.

PubMed PubMed Central Статья Google ученый

9.

Alvarez-Aldeán J, Aristegui J, López-Belmonte JL, Pedrós M, García-Sicilia J.Экономические и психосоциальные последствия ротавирусной инфекции в Испании: обзор литературы. Вакцина. 2014. 32 (30): 3740–51.

PubMed Статья Google ученый

10.

Диес-Доминго Дж., Суриньях Н.Л., Алькальде Н.М., Бетегон Л., Ларжерон Н., Тричард М. Бремя детского ротавирусного гастроэнтерита (RVGE) и потенциальные преимущества универсальной программы вакцинации против ротавируса пентавалентной вакциной в Испании. BMC Public Health. 2010; 10 (1): 469.

PubMed PubMed Central Статья Google ученый

11.

Весикари Т. Вакцинация против ротавируса: краткий обзор. Clin Microbiol Infect. 2012; 18: 57–63.

CAS PubMed Статья Google ученый

12.

Руис-Паласиос Г.М., Перес-Шаэль И., Веласкес Ф.Р., Абате Х., Брейер Т., Клеменс С.К. и др. Безопасность и эффективность аттенуированной вакцины против тяжелого ротавирусного гастроэнтерита.N Engl J Med. 2006. 354 (1): 11–22.

CAS PubMed Статья Google ученый

13.

Весикари Т., Матсон Д.О., Деннехи П., Ван Дамм П., Сантошам М., Родригес З. и др. Безопасность и эффективность пятивалентной вакцины реассортантного ротавируса человека и крупного рогатого скота (WC3). N Engl J Med. 2006. 354 (1): 23–33.

CAS PubMed Статья Google ученый

14.

Armah GE, Sow SO, Breiman RF, Dallas MJ, Tapia MD, Feikin DR, et al.Эффективность пятивалентной ротавирусной вакцины против тяжелого ротавирусного гастроэнтерита у младенцев в развивающихся странах Африки к югу от Сахары: рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование. Ланцет. 2010. 376 (9741): 606–14.

CAS PubMed Статья Google ученый

15.

Мадхи С.А., Канлифф Н.А., Стил Д., Витте Д., Кирстен М., Лоу С. и др. Влияние ротавирусной вакцины человека на тяжелую диарею у африканских младенцев. N Engl J Med.2010. 362 (4): 289–98.

CAS PubMed Статья Google ученый

16.

ВОЗ. Совещание Стратегической консультативной группы экспертов по иммунизации, октябрь 2009 г .: выводы и рекомендации. Биологические препараты. 2010. 38 (1): 170–7.

Артикул Google ученый

17.

Чаверс Т., Де Оливейра Л.Х., Парашар Ю.Д., Тейт Дж. Э. Постлицензионный опыт вакцинации против ротавируса в Латинской Америке и Карибском бассейне: систематический обзор и метаанализ.Эксперт Rev. Vaccines. 2018; 17 (11): 1037–51.

CAS PubMed Статья Google ученый

18.

Араки К., Хара М., Цугава Т., Шиманоэ С., Нисида Ю., Мацуо М. и др. Эффективность моновалентных и пятивалентных ротавирусных вакцин у японских детей. Вакцина. 2018; 36 (34): 5187–93.

CAS PubMed Статья Google ученый

19.

Pindyck T, Tate JE, Parashar UD.Десятилетний опыт вакцинации против ротавируса в Соединенных Штатах – распространение вакцины, эффективность и влияние. Эксперт Rev. Vaccines. 2018; 17 (7): 593–606.

CAS PubMed Статья Google ученый

20.

Карафиллакис Э., Хассуна С., Атчисон С. Эффективность и влияние ротавирусных вакцин в Европе, 2006–2014 гг. Вакцина. 2015; 33 (18): 2097–107.

PubMed Статья Google ученый

21.

Mwenda JM, Parashar UD, Cohen AL, Tate JE. Воздействие ротавирусных вакцин на страны Африки к югу от Сахары. Вакцина. 2018; 36 (47): 7119–23.

PubMed Статья Google ученый

22.

Бернаола Итурбе Э., Хименес Санчес Ф., Бака Котс М., де Хуан М. Ф., Диес Доминго Дж., Гарсес Санчес М. и др. Calendario de vacunaciones de la Asociación Española de Pediatría: recomendaciones 2008. An Pediatría. 2008. 68 (1): 63–9.

CAS Статья Google ученый

23.

Pérez-Vilar S, Díez-Domingo J, López-Lacort M, Martínez-beda S, Martinez-Beneito MA. Эффективность ротавирусных вакцин, лицензированных, но не финансируемых, против ротавирусных госпитализаций в регионе Валенсия. Испания. BMC Infect Dis. 2015; 15 (1): 92.

PubMed Статья CAS Google ученый

24.

Оррико-Санчес А., Лопес-Лакорт М., Перес-Вилар С., Диес-Доминго Дж. Долгосрочное влияние самофинансируемых ротавирусных вакцин на связанные с ротавирусом госпитализации и затраты в регионе Валенсия.Испания. BMC Infect Dis. 2017; 17 (1): 267.

PubMed Статья Google ученый

25.

Бернетт Э., Джонстеллер К.Л., Тейт Дж.Э., Йен С., Парашар У.Д. Глобальное влияние ротавирусной вакцинации на детские госпитализации и смертность от диареи. J Infect Dis. 2017; 215 (11): 1666–72.

PubMed PubMed Central Статья Google ученый

26.

Bányai K, Estes MK, Martella V, Parashar UD.Вирусный гастроэнтерит. Ланцет. 2018; 392 (10142): 175–86.

PubMed Статья Google ученый

27.

Glass RI, Jiang B, Parashar U. Будущий контроль ротавирусной болезни: могут ли только живые оральные вакцины решить проблему ротавируса? Вакцина. 2018; 36 (17): 2233–6.

PubMed Статья Google ученый

28.

Boom JA, Sahni LC, Payne DC, Gautam R, Lyde F, Mijatovic-Rustempasic S, et al.Симптоматическая инфекция и выявление вакцинных и вакцинно-реассортантных штаммов ротавируса у 5 детей: серия случаев. J Infect Dis. 2012. 206 (8): 1275–9.

PubMed PubMed Central Статья Google ученый

29.

Santos CB, Araújo KCGM, Jardim-Botelho A, Bezerra Santos M, Rodrigues A, Santana Dolabella S и др. Заболеваемость диареей и кишечными инфекциями среди вакцинированных ротавирусами младенцев из бедных районов Бразилии: пространственный анализ.BMC Public Health. 2014; 14 (1): 399.

PubMed PubMed Central Статья Google ученый

30.

Гаутам Р., Лайд Ф., Эсона, Мэриленд, Куэй О, Боуэн, Мэриленд. Сравнение наборов для иммуноферментного анализа ротавируса Premier ™ Rotaclone®, ProSpecT ™ и RIDASCREEN® для обнаружения ротавирусного антигена в образцах стула. J Clin Virol. 2013. 58 (1): 292–4.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

31.

Buesa J, Montava R, Abu-Mallouh R, Fos M, Ribes JM, Bartolomé R и др. Последовательная эволюция вариантов норовируса генотипа GII.4, вызывающих вспышки гастроэнтерита с 2001 по 2006 год в Восточной Испании. J Med Virol. 2008. 80 (7): 1288–95.

CAS PubMed Статья Google ученый

32.

Boom R, Sol CJ, Salimans MM, Jansen CL, Wertheim-van Dillen PM, van der Noordaa J. Быстрый и простой метод очистки нуклеиновых кислот.J Clin Microbiol. 1990. 28 (3): 495–503.

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

33.

Chomczynski P. Реагент для одноэтапного одновременного выделения РНК, ДНК и белков из образцов клеток и тканей. Биотехники. 1993. 15 (3): 532–4 536–7.

CAS PubMed Google ученый

34.

Итурриза-Гомара М., Даллман Т., Баньяи К., Бёттигер Б., Буэса Дж., Дидрих С. ​​и др.Эпиднадзор за ротавирусами в Европе, 2005–2008 гг .: Интернет-отчеты и анализ генотипирования и эпидемиологических данных в режиме реального времени. J Infect Dis. 2009; 200 (s1): S215–21.

PubMed Статья PubMed Central Google ученый

35.

Уивер К.Ф., Моралес В., Данн С.Л., Годде К., Уивер П.Ф. Введение в статистический анализ в исследованиях: с приложениями в биологических науках и науках о жизни. Хобокен: Wiley .; 2017. с. 393–434.

Книга Google ученый

36.

Патель М.М., Питцер В.Э., Алонсо В.Дж., Вера Д., Лопман Б., Тейт Дж. И др. Глобальная сезонность ротавирусной болезни. Pediatr Infect Dis J. 2013; 32 (4): e134–47.

PubMed PubMed Central Статья Google ученый

37.

Стил А.Д., Нойзил К.М., Канлифф Н.А., Мадхи С.А., Бос П., Нгвира Б. и др. Вакцина против ротавируса человека Rotarix ™ обеспечивает защиту от различных циркулирующих штаммов ротавируса у африканских младенцев: рандомизированное контролируемое испытание.BMC Infect Dis. 2012; 12 (1): 213.

PubMed PubMed Central Статья Google ученый

38.

Lopez-Lacort M, Collado S, Díez-Gandía A, Díez-Domingo J. Ротавирус, неэффективность вакцины или диагностическая ошибка? Вакцина. 2016; 34 (48): 5912–5.

PubMed Статья PubMed Central Google ученый

39.

Bucardo F, Reyes Y, Rönnelid Y, González F, Sharma S, Svensson L, et al.Антигены гисто-группы крови и выделение ротавирусной вакцины у никарагуанских младенцев. Научный доклад 2019; 9 (1): 10764.

PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

40.

Андерсон Э.Дж. Ротавирусные вакцины: выделение вируса и риск передачи. Lancet Infect Dis. 2008. 8 (10): 642–9.

PubMed Статья Google ученый

41.

Бернштейн Д.И., Смит В.Е., Шервуд Дж.Р., Шифф Г.М., Сандер Д.С., ДеФеудис Д. и др.Безопасность и иммуногенность живой аттенуированной ротавирусной вакцины человека 89–12. Вакцина. 1998. 16 (4): 381–7.

CAS PubMed Статья Google ученый

42.

Баньяи К., Ласло Б., Дуке Дж., Стил А.Д., Нельсон Е.А., Генч Дж. Р. и др. Систематический обзор региональных и временных тенденций глобального разнообразия штаммов ротавирусов в эпоху до создания ротавирусной вакцины: идеи для понимания воздействия программ вакцинации против ротавируса. Вакцина.2012; 30: A122–30.

PubMed Статья Google ученый

43.

Доро Р., Ласло Б., Мартелла В., Лешем Е., Генч Дж., Парашар Ю. и др. Обзор глобальных данных о распространенности штаммов ротавируса за шесть лет после лицензирования вакцины: есть ли доказательства отбора штаммов в зависимости от давления вакцины? Заразить Genet Evol. 2014; 28: 446–61.

PubMed Статья Google ученый

44.

Зеллер М., Паттон Дж. Т., Хейлен Е., Де Костер С., Сиарлет М., Ван Ранст М. и др. Генетический анализ выявил различия в антигенных эпитопах VP7 и VP4 между ротавирусами человека, циркулирующими в Бельгии, и ротавирусами в Rotarix и RotaTeq. J Clin Microbiol. 2012; 50 (3): 966–76.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

45.

Огден К.М., Тан Ю., Акопов А., Стюарт Л.С., МакГенри Р., Фоннесбек К.Дж. и др.Многократные интродукции и несовпадение антигенов с вакцинами могут способствовать увеличению преобладания ротавирусов G12P [8] в США. J Virol. 2018; 93 (1): e01476–18.

46.

Bucardo F, Mercado J, Reyes Y, González F, Balmaseda A, Nordgren J. Значительное увеличение числа случаев ротавирусной диареи в больницах, связанное с появлением генотипа G12 у высоко вакцинированного населения в Никарагуа. Clin Microbiol Infect. 2015; 21 (6): 603.e1–7.

CAS Статья Google ученый

47.

Весикари Т., Примула Р., Шустер В., Техедор Дж. К., Коэн Р., Букенуг А. и др. Эффективность и иммуногенность живой аттенуированной ротавирусной вакцины человека у европейских младенцев, вскармливаемых грудью и молочными смесями. Pediatr Infect Dis J. 2012; 31 (5): 509–13.

PubMed Статья Google ученый

48.

Monedero V, Buesa J, Rodríguez-Díaz J. Взаимодействие между гликобиологией хозяина, бактериальной микробиотой и вирусами в кишечнике. Вирусы.2018; 10 (2): 96.

PubMed Central Статья CAS PubMed Google ученый

49.

Бем Р., Флеминг Ф. Е., Маггиони А., Данг В. Т., Холлоуэй Г., Колсон Б. С. и др. Возвращаясь к роли антигенов группы гистокрови в инвазии ротавирусных клеток-хозяев. Nat Commun. 2015; 6 (1): 5907.

PubMed Статья CAS Google ученый

50.

Pérez-Ortín R, Vila-Vicent S, Carmona-Vicente N, Santiso-Bellón C, Rodríguez-Díaz J, Buesa J.Антигены гисто-группы крови у детей с симптоматической ротавирусной инфекцией. Вирусы. 2019; 11 (4): 339.

PubMed Central Статья CAS PubMed Google ученый

51.

Bucardo F, Rippinger CM, Svensson L, Patton JT. Сегмент NSP2 вакцинного происхождения в ротавирусах вакцинированных детей с гастроэнтеритом в Никарагуа. Заразить Genet Evol. 2012; 12 (6): 1282–94.

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

52.

Питцер В.Э., Патель М.М., Лопман Б.А., Вибоуд К., Парашар Ю.Д., Гренфелл Б.Т. Моделирование динамики штаммов ротавируса в развитых странах для понимания потенциального воздействия вакцинации на распределение генотипов. Proc Natl Acad Sci. 2011. 108 (48): 19353–8.

CAS PubMed Статья Google ученый

Ротавирусная инфекция активирует UPR, но модулирует его активность | Журнал вирусологии

1.

Тейт Дж. Э., Патель М. М., Стил А. Д., Генч Дж. Р., Пейн, округ Колумбия, Кортезе М. М., Накагоми О., Канлифф Н. А., Цзян Б., Нойзил К. М., и др. .: Глобальное влияние ротавирусных вакцин. Expert Rev Vaccines 9: 395-407.

2.

Fabbretti E, Afrikanova I, Vascotto F, Burrone OR: Два неструктурных ротавирусных белка, NSP2 и NSP5, образуют подобные вироплазме структуры in vivo. J Gen Virol 1999, 80 (Pt 2): 333-339.

Артикул CAS PubMed Google ученый

3.

Silvestri LS, Taraporewala ZF, Patton JT: Репликация ротавируса: плюс-смысловые матрицы для синтеза двухцепочечной РНК получают в вироплазме. J Virol 2004, 78: 7763-7774. 10.1128 / JVI.78.14.7763-7774.2004

PubMed Central Статья CAS PubMed Google ученый

4.

Паттон Дж. Т., Сильвестри Л. С., Торторичи М. А., Васкес-Дель Карпио Р., Тарапоревала ZF: Репликация и морфогенез генома ротавируса: роль вироплазмы. Curr Top Microbiol Immunol 2006, 309: 169-187. 10.1007 / 3-540-30773-7_6

CAS PubMed Google ученый

5.

Lopez T, Rojas M, Ayala-Breton C, Lopez S, Arias CF: Пониженная экспрессия гена ротавируса NSP5 оказывает плейотропное действие на репликацию вируса. J Gen Virol 2005, 86: 1609-1617. 10.1099 / vir.0.80827-0

Артикул CAS PubMed Google ученый

6.

Contin R, Arnoldi F, Campagna M, Burrone OR: Rotavirus NSP5 управляет рекрутированием вироплазматических белков. J Gen Virol 91: 1782-1793.

7.

Campagna M, Eichwald C, Vascotto F, Burrone OR: РНК-интерференция мРНК сегмента 11 ротавируса показывает важную роль NSP5 в репликативном цикле вируса. J Gen Virol 2005, 86: 1481-1487. 10.1099 / vir.0.80598-0

Артикул CAS PubMed Google ученый

8.

Au KS, Chan WK, Burns JW, Estes MK: Рецепторная активность неструктурного гликопротеина NS28 ротавируса. J Virol 1989, 63: 4553-4562.

PubMed Central CAS PubMed Google ученый

9.

Meyer JC, Bergmann CC, Bellamy AR: Взаимодействие ядер ротавируса с неструктурным гликопротеином NS28. Вирусология 1989, 171: 98-107. 10.1016 / 0042-6822 (89)-1

Артикул CAS PubMed Google ученый

10.

Michelangeli F, Liprandi F, Chemello ME, Ciarlet M, Ruiz MC: Избирательное истощение запасенного кальция тапсигаргином блокирует созревание ротавируса, но не цитопатический эффект. J Virol 1995, 69: 3838-3847.

PubMed Central CAS PubMed Google ученый

11.

Ахмадиан С., Шахрабади MS: Морфологическое исследование роли кальция в сборке ротавирусного внешнего капсидного белка VP7. Biotech Histochem 1999, 74: 266-273. 10.3109 / 105202999063

Артикул CAS PubMed Google ученый

12.

Jourdan N, Maurice M, Delautier D, Quero AM, Servin AL, Trugnan G: Ротавирус высвобождается с апикальной поверхности культивируемых кишечных клеток человека посредством нетрадиционного везикулярного транспорта, который обходит аппарат Гольджи. J Virol 1997, 71: 8268-8278.

PubMed Central CAS PubMed Google ученый

13.

Cuadras MA, Feigelstock DA, An S., Greenberg HB: Характер экспрессии генов в клетках Caco-2 после ротавирусной инфекции. J Virol 2002, 76: 4467-4482. 10.1128 / JVI.76.9.4467-4482.2002

PubMed Central Статья CAS PubMed Google ученый

14.

Rollo EE, Kumar KP, Reich NC, Cohen J, Angel J, Greenberg HB, Sheth R, Anderson J, Oh B, Hempson SJ, и др. .: Ответ эпителиальных клеток на ротавирусную инфекцию. J Immunol 1999, 163: 4442-4452.

CAS PubMed Google ученый

15.

Casola A, Estes MK, Crawford SE, Ogra PL, Ernst PB, Garofalo RP, Crowe SE: Ротавирусная инфекция культивируемых эпителиальных клеток кишечника индуцирует секрецию хемокинов CXC и CC. Гастроэнтерология 1998, 114: 947-955. 10.1016 / S0016-5085 (98) 70314-2

Артикул CAS PubMed Google ученый

16.

Casola A, Garofalo RP, Crawford SE, Estes MK, Mercurio F, Crowe SE, Brasier AR: Регуляция гена интерлейкина-8 в эпителиальных клетках кишечника, инфицированных ротавирусом: роль индуцированной вирусом активации киназы IkappaB. Вирусология 2002, 298: 8-19.10.1006 / viro.2002.1475

Артикул CAS PubMed Google ученый

17.

Xu A, Bellamy AR, Taylor JA: BiP (GRP78) и эндоплазмин (GRP94) индуцируются после ротавирусной инфекции и временно связываются с вирионным компонентом, локализованным в эндоплазматическом ретикулуме. J Virol 1998, 72: 9865-9872.

PubMed Central CAS PubMed Google ученый

18.

Maruri-Avidal L, Lopez S, Arias CF: Шапероны эндоплазматического ретикулума участвуют в морфогенезе инфекционных частиц ротавируса. J Virol 2008, 82: 5368-5380. 10.1128 / JVI.02751-07

PubMed Central Статья CAS PubMed Google ученый

19.

Graff JW, Mitzel DN, Weisend CM, Flenniken ML, Hardy ME: Регуляторный фактор интерферона 3 является клеточным партнером ротавируса NSP1. J Virol 2002, 76: 9545-9550. 10.1128 / JVI.76.18.9545-9550.2002

PubMed Central Статья CAS PubMed Google ученый

20.

Graff JW, Ewen J, Ettayebi K, Hardy ME: Цинк-связывающий домен ротавируса NSP1 необходим для протеасомозависимой деградации IRF3 и ауторегуляторной стабильности NSP1. J Gen Virol 2007, 88: 613-620. 10.1099 / vir.0.82255-0

Артикул CAS PubMed Google ученый

21.

Graff JW, Ettayebi K, Hardy ME: Ротавирус NSP1 ингибирует активацию NFkappaB, индуцируя протеасомозависимую деградацию бета-TrCP: новый механизм антагонизма IFN. PLoS Pathog 2009, 5: e1000280. 10.1371 / journal.ppat.1000280

PubMed Central Статья PubMed Google ученый

22.

Barro M, Patton JT: Неструктурный белок 1 ротавируса подрывает врожденный иммунный ответ, индуцируя деградацию регуляторного фактора 3 IFN. Proc Natl Acad Sci USA 2005, 102: 4114-4119. 10.1073 / pnas.0408376102

PubMed Central Статья CAS PubMed Google ученый

23.

Barro M, Patton JT: Ротавирус NSP1 ингибирует экспрессию интерферона I типа, противодействуя функции факторов регуляции интерферона IRF3, IRF5 и IRF7. J Virol 2007, 81: 4473-4481. 10.1128 / JVI.02498-06

PubMed Central Статья CAS PubMed Google ученый

24.

Holloway G, Truong TT, Coulson BS: Ротавирус противодействует клеточным противовирусным реакциям, ингибируя накопление в ядре STAT1, STAT2 и NF-kappaB. J Virol 2009, 83: 4942-4951. 10.1128 / JVI.01450-08

PubMed Central Статья CAS PubMed Google ученый

25.

Credle JJ, Finer-Moore JS, Papa FR, Stroud RM, Walter P: О механизме восприятия развернутого белка в эндоплазматическом ретикулуме. Proc Natl Acad Sci USA 2005, 102: 18773-18784. 10.1073 / pnas.0509487102

PubMed Central Статья CAS PubMed Google ученый

26.

Merksamer PI, Papa FR: Краткий обзор UPR и судьбы клеток. J Cell Sci 123: 1003-1006.

27.

Maaty WS, Wiedenheft B, Tarlykov P, Schaff N, Heinemann J, Robison-Cox J, Valenzuela J, Dougherty A, Blum P, Lawrence CM, et al. .: Что-то старое, что-то новое , что-то позаимствованное; как термоацидофильная архея Sulfolobus solfataricus реагирует на окислительный стресс. PLoS One 2009, 4: e6964. 10.1371 / journal.pone.0006964

PubMed Central Статья PubMed Google ученый

28.

Huang da W, Sherman BT, Lempicki RA: Систематический и комплексный анализ больших списков генов с использованием ресурсов биоинформатики DAVID. Nat Protoc 2009, 4: 44-57.

Артикул PubMed Google ученый

29.

Gaddameedhi S, Chatterjee S: Связь между развернутым белковым ответом, индуцированным 2-дезоксиглюкозой, и гиперчувствительностью к цисплатину: механистическое исследование с использованием молекулярной геномики. J Cancer Res Ther 2009, 5 (Приложение 1): S61-66.

CAS PubMed Google ученый

30.

Haze K, Yoshida H, Yanagi H, Yura T, Mori K: Фактор транскрипции млекопитающих ATF6 синтезируется как трансмембранный белок и активируется протеолизом в ответ на стресс эндоплазматического ретикулума. Mol Biol Cell 1999, 10: 3787-3799.

PubMed Central Статья CAS PubMed Google ученый

31.

Шен Дж., Чен Х, Хендершот Л., Прайвес Р: Регулирование стресса ER локализации ATF6 путем диссоциации связывания BiP / GRP78 и демаскирования сигналов локализации Гольджи. Dev Cell 2002, 3: 99-111. 10.1016 / S1534-5807 (02) 00203-4

Артикул CAS PubMed Google ученый

32.

Shamu CE, Walter P: Олигомеризация и фосфорилирование киназы Ire1p во время внутриклеточной передачи сигналов от эндоплазматического ретикулума к ядру. EMBO J 1996, 15: 3028-3039.

PubMed Central CAS PubMed Google ученый

33.

Okamura K, Kimata Y, Higashio H, Tsuru A, Kohno K: Диссоциация Kar2p / BiP от сенсорной молекулы ER, Ire1p, запускает ответ развернутого белка у дрожжей. Biochem Biophys Res Commun 2000, 279: 445-450. 10.1006 / bbrc.2000.3987

Артикул CAS PubMed Google ученый

34.

Calfon M, Zeng H, Urano F, Till JH, Hubbard SR, Harding HP, Clark SG, Ron D: IRE1 связывает нагрузку эндоплазматического ретикулума с секреторной способностью путем обработки мРНК XBP-1. Природа 2002, 415: 92-96. 10.1038 / 415092a

Артикул CAS PubMed Google ученый

35.

Harding HP, Zhang Y, Ron D: Трансляция и фолдинг белка связаны с резидентной киназой эндоплазматического ретикулума. Природа 1999, 397: 271-274. 10.1038 / 16729

Артикул CAS PubMed Google ученый

36.

Marciniak SJ, Garcia-Bonilla L, Hu J, Harding HP, Ron D: Зависимое от активации рекрутирование субстрата киназой PERK фактора инициации трансляции 2 эукариот. J Cell Biol 2006, 172: 201-209. 10.1083 / jcb.200508099

PubMed Central Статья CAS PubMed Google ученый

37.

Бертолотти А., Чжан И., Хендершот Л. М., Хардинг HP, Рон Д. Динамическое взаимодействие датчиков стресса BiP и ER в ответе развернутого белка. Nat Cell Biol 2000, 2: 326-332. 10.1038 / 35014014

Артикул CAS PubMed Google ученый

38.

Park HR, Tomida A, Sato S, Tsukumo Y, Yun J, Yamori T, Hayakawa Y, Tsuruo T, Shin-ya K: Влияние на опухолевые клетки блокирования реакции выживания на депривацию глюкозы. J Natl Cancer Inst 2004, 96: 1300-1310. 10.1093 / jnci / djh343

Артикул CAS PubMed Google ученый

39.

Lee AH, Iwakoshi NN, Glimcher LH: XBP-1 регулирует подмножество генов шаперонов, резидентов эндоплазматического ретикулума, в ответе на развернутый белок. Mol Cell Biol 2003, 23: 7448-7459. 10.1128 / MCB.23.21.7448-7459.2003

PubMed Central Статья CAS PubMed Google ученый

40.

Микеланджели Ф, Руис М.С., дель Кастильо Дж. Р., Людерт Дж. Э., Липранди Ф .: Влияние ротавирусной инфекции на внутриклеточный гомеостаз кальция в культивируемых клетках. Вирусология 1991, 181: 520-527. 10.1016 / 0042-6822 (91) -E

Артикул CAS PubMed Google ученый

41.

Беркова З., Моррис А.П., Эстес МК: Измерение цитоплазматического кальция в клетках, экспрессирующих зеленый флуоресцентный белок (NSP4-EGFP), усиленных энтеротоксином ротавируса, нагруженных Fura-2. Cell Calcium 2003, 34: 55-68. 10.1016 / S0143-4160 (03) 00022-8

Артикул CAS PubMed Google ученый

42.

Ruiz MC, Diaz Y, Pena F, Aristimuno OC, Chemello ME, Michelangeli F: Ca2 + проницаемость плазматической мембраны, индуцированная ротавирусной инфекцией в культивируемых клетках, ингибируется туникамицином и брефельдином A. Virology 2005, 333: 54-65. 10.1016 / j.virol.2004.12.032

Артикул CAS PubMed Google ученый

43.

Diaz Y, Chemello ME, Pena F, Aristimuno OC, Zambrano JL, Rojas H, Bartoli F, Salazar L., Chwetzoff S, Sapin C, et al. .: Экспрессия неструктурного белка ротавируса NSP4 Изменения гомеостаза Ca2 +, вызванные ротавирусной инфекцией в культивируемых клетках. J Virol 2008, 82: 11331-11343. 10.1128 / JVI.00577-08

PubMed Central Статья CAS PubMed Google ученый

44.

Zambrano JL, Diaz Y, Pena F, Vizzi E, Ruiz MC, Michelangeli F, Liprandi F, Ludert JE: Подавление экспрессии ротавируса NSP4 или VP7 снижает изменения в гомеостазе Ca2 +, вызванные инфицированием культивируемых клеток. J Virol 2008, 82: 5815-5824. 10.1128 / JVI.02719-07

PubMed Central Статья CAS PubMed Google ученый

45.

Nejmeddine M, Trugnan G, Sapin C, Kohli E, Svensson L, Lopez S, Cohen J: Ротавирусный спайковый белок VP4 присутствует на плазматической мембране и связан с микротрубочками в инфицированных клетках. J Virol 2000, 74: 3313-3320. 10.1128 / JVI.74.7.3313-3320.2000

PubMed Central Статья CAS PubMed Google ученый

46.

Brunet JP, Jourdan N, Cotte-Laffitte J, Linxe C, Geniteau-Legendre M, Servin A, Quero AM: Ротавирусная инфекция вызывает дезорганизацию цитоскелета в эпителиальных клетках кишечника человека: значение увеличения внутриклеточного кальция концентрация. J Virol 2000, 74: 10801-10806. 10.1128 / JVI.74.22.10801-10806.2000

PubMed Central Статья CAS PubMed Google ученый

47.

Xu A, Bellamy AR, Taylor JA: Иммобилизация раннего секреторного пути гликопротеином вируса, который связывается с микротрубочками. EMBO J 2000, 19: 6465-6474. 10.1093 / emboj / 19.23.6465

PubMed Central Статья CAS PubMed Google ученый

48.

Cabral-Romero C, Padilla-Noriega L: Ассоциация ротавирусных вироплазм с микротрубочками через NSP2 и NSP5. Mem Inst Oswaldo Cruz 2006, 101: 603-611. 10.1590 / S0074-02762006000600006

Артикул CAS PubMed Google ученый

49.

Беркова З., Кроуфорд С.Е., Блатт С.Е., Моррис А.П., Эстес М.К.: Экспрессия ротавируса NSP4 изменяет организацию актиновой сети посредством ремоделирующего актин белка кофилина. J Virol 2007, 81: 3545-3553. 10.1128 / JVI.01080-06

PubMed Central Статья CAS PubMed Google ученый

50.

Gardet A, Breton M, Trugnan G, Chwetzoff S: Роль актина в поляризованном высвобождении ротавируса. J Virol 2007, 81: 4892-4894. 10.1128 / JVI.02698-06

PubMed Central Статья CAS PubMed Google ученый

51.

Мартин Д., Дуарте М., Лепо Дж., Понсе Д.: Секвестрация свободных молекул тубулина вирусным белком NSP2 вызывает деполимеризацию микротрубочек во время ротавирусной инфекции. J Virol 84: 2522-2532.

52.

Cuadras MA, Greenberg HB: Инфекционные частицы ротавируса используют липидные рафты во время репликации для транспорта на поверхность клетки in vitro и in vivo. Вирусология 2003, 313: 308-321. 10.1016 / S0042-6822 (03) 00326-X

Артикул CAS PubMed Google ученый

53.

Cuadras MA, Bordier BB, Zambrano JL, Ludert JE, Greenberg HB: Рассечение взаимодействия частиц ротавируса с плотом и малыми интерферирующими РНК: понимание транзита ротавируса через секреторный путь. J Virol 2006, 80: 3935-3946. 10.1128 / JVI.80.8.3935-3946.2006

PubMed Central Статья CAS PubMed Google ученый

54.

Sen A, Feng N, Ettayebi K, Hardy ME, Greenberg HB: Ингибирование IRF3 ротавирусом NSP1 зависит от клетки-хозяина и штамма вируса, но не зависит от протеасомной деградации NSP1. J Virol 2009, 83: 10322-10335. 10.1128 / JVI.01186-09

PubMed Central Статья CAS PubMed Google ученый

55.

McCullough KD, Martindale JL, Klotz LO, Aw TY, Holbrook NJ: Gadd153 сенсибилизирует клетки к стрессу эндоплазматического ретикулума, подавляя Bcl2 и нарушая окислительно-восстановительное состояние клеток. Mol Cell Biol 2001, 21: 1249-1259. 10.1128 / MCB.21.4.1249-1259.2001

PubMed Central Статья CAS PubMed Google ученый

56.

Jousse C, Oyadomari S, Novoa I, Lu P, Zhang Y, Harding HP, Ron D: Ингибирование конститутивного фактора инициации трансляции 2альфа-фосфатазы, CReP, способствует выживанию стрессированных клеток. J Cell Biol 2003, 163: 767-775. 10.1083 / jcb.200308075

PubMed Central Статья CAS PubMed Google ученый

57.

Nguyen T, Sherratt PJ, Pickett CB: Регуляторные механизмы, контролирующие экспрессию генов, опосредованную элементом антиоксидантного ответа. Annu Rev Pharmacol Toxicol 2003, 43: 233-260. 10.1146 / annurev.pharmtox.43.100901.140229

Артикул CAS PubMed Google ученый

58.

Harding HP, Novoa I, Zhang Y, Zeng H, Wek R, Schapira M, Ron D: Регулируемая инициация трансляции контролирует стресс-индуцированную экспрессию генов в клетках млекопитающих. Mol Cell 2000, 6: 1099-1108. 10.1016 / S1097-2765 (00) 00108-8

Артикул CAS PubMed Google ученый

59.

Harding HP, Zhang Y, Bertolotti A, Zeng H, Ron D: Perk необходим для регуляции трансляции и выживания клеток во время развернутого белкового ответа. Mol Cell 2000, 5: 897-904. 10.1016 / S1097-2765 (00) 80330-5

Артикул CAS PubMed Google ученый

60.

Рохас М., Ариас С.Ф., Лопес S: Протеинкиназа R отвечает за фосфорилирование eIF2alpha при ротавирусной инфекции. Дж. Вирол 84: 10457-10466.

61.

Halasz P, Holloway G, Coulson BS: Механизмы гибели эпителиальных клеток после ротавирусной инфекции, воздействия инактивированного ротавируса или трансфекции генома. J Gen Virol 91: 2007-2018.

62.

Огата М., Хино С., Сайто А., Морикава К., Кондо С., Канемото С., Мураками Т., Танигучи М., Тани И., Йошинага К., и др. .: Аутофагия активируется для выживания клеток после стресса эндоплазматического ретикулума. Mol Cell Biol 2006, 26: 9220-9231. 10.1128 / MCB.01453-06

PubMed Central Статья CAS PubMed Google ученый

63.

Беркова З., Кроуфорд С.Е., Тругнан Г., Йошимори Т., Моррис А.П., Эстес МК: Ротавирус NSP4 индуцирует новый везикулярный компартмент, регулируемый кальцием и связанный с вироплазмами. J Virol 2006, 80: 6061-6071. 10.1128 / JVI.02167-05

PubMed Central Статья CAS PubMed Google ученый

64.

Лопес Т., Камачо М., Заяс М., Наджера Р., Санчес Р., Ариас К.Ф., Лопес С. Замалчивание морфогенеза ротавируса. J Virol 2005, 79: 184-192. 10.1128 / JVI.79.1.184-192.2005

PubMed Central Статья CAS PubMed Google ученый

Анализ рентабельности устройств в месте использования для снижения риска для здоровья от патогенов в питьевой воде | Журнал воды и здоровья

Сводка по каждому представляющему интерес патогену и связанным с ним AI, последствиям и уровням смертности, инцидентам и связанным с ними медицинским расходам для каждой категории и патогена определены в таблице 3.На рис. 1 показаны стоимость и общее количество случаев, связанных с AI, последствиями и смертностью для каждого патогена. Основываясь на выявленных показателях инфицирования и численности населения США, по оценкам, ежегодно происходит более 9 000 000 случаев заболевания гриппом птичьего гриппа, что связано с присутствием 10 включенных патогенов, передающихся через воду, в питьевой воде. Если предположить, что население США составляет 330 172 512 человек, количество патогенов и инфекций приведет к 9 026 216 случаям ИИ, 618 047 случаям осложнений и 1470 смертельным исходам, связанным с питьевой водой ежегодно.Наиболее значимыми возбудителями заболеваний, передающихся через воду, были ротавирус ( n _всего = 3 558 337 случаев AI, последствия и смертность), аденовирус ( n _всего = 2 721 134) и Cryptosporidium spp. ( n _всего = 1 946 623). Cryptosporidium spp. имел самую высокую частоту осложнений и смертности – примерно 253 742 и 1269 случаев каждого в год, соответственно. Cryptosporidium spp.также были связаны самые высокие затраты, связанные с последствиями и смертностью, с оценочными общенациональными годовыми затратами в 6,00 млрд долларов и 11,0 млрд долларов соответственно. Legionella инфекции, вызванные потреблением питьевой воды (например, аспирацией питьевой воды), привели к наименьшему количеству случаев заболевания AI по сравнению с другими патогенами.

Обработка воды POU, определенная для целей этого исследования, включала обратный осмос, активированный уголь, УФ-обработку, адсорбционные среды, проточный фильтр с гранулированным активированным углем, дистилляцию и ионный обмен (умягчитель).Затраты и претензии по удалению устройств POU / POE, сертифицированные ANSI / NSF для каждой из этих систем, сведены в Таблицу 1. За 5-летний период RO (680 долларов США), фильтрация с активированным углем (546 долларов США) и проточные фильтрующие устройства ( 645 долларов США) имеют аналогичную стоимость. УФ-обработка (POE) (1499 долларов США), адсорбционные среды (936 долларов США) и дистилляция (740 долларов США) были почти вдвое дороже по сравнению с 5-летними операционными затратами. Ионный обмен (POE) (1870 долларов) был самым дорогим вариантом за 5 лет. Однако RO был единственным POU, сертифицированным для удаления микроорганизмов, включенным в анализ рентабельности из-за наличия применимых данных по снижению здоровья.

Применяя 35% сокращение заболеваемости, связанной с питьевой водой, с использованием системы обратного осмоса (Платеж и др. 1991a) к исходным показателям заболеваемости и смертности, можно было бы ожидать, что ежегодно для всего 3 376 007 дел. Снижение случаев AI, последствий и смертности для каждого патогена суммировано на Рисунке 2. Частота заболеваний, связанных с питьевой водой, широко варьировалась (от 67% для Giardia sequela до 0.0001% для смертности от норовируса) между отдельными патогенами и отраженным источником воды, типом очистки и типами патогенов, присутствующих в источнике сырой воды (Таблица 3).

На национальном уровне приблизительно 87 022 212 домохозяйств потребуют установки системы обратного осмотра, и оснащение всех этих домохозяйств будет стоить в общей сложности 11,3 млрд долларов США в год. Общая стоимость бремени болезней для всех патогенов и последствий для здоровья (т. Е. AI, последствий и смертности) составит 24 доллара.2Б. Результаты анализа экономической эффективности демонстрируют, что самая высокая экономическая эффективность наблюдается при рассмотрении совокупного бремени болезней (AI, последствия и смертность) от всех патогенов. Если учесть все патогены и бремя болезней (острые случаи, случаи осложнений и смертность), затраты на предотвращенный случай заболевания составили 1815 долларов в год. Самая низкая окупаемость инвестиций (т. Е. Самые высокие затраты с учетом стоимости болезни, уравнение (2)) для хронических последствий и смертности на национальном уровне была связана с норовирусом, потому что случаев очень мало, но затраты на вмешательство остаются такими же, как и для другие организмы с более высокой заболеваемостью.Стоимость, которой удалось избежать при использовании одобренного лечения POU, суммирована в Таблице 4, а результаты представлены для каждого отдельного патогена и в целом.

Терапия естественной оральной регидратации для ротавирусов и норовирусов – Birth Song Botanicals Co.

Вы когда-нибудь болели «желудочным гриппом»? Симптомы незабываемые, но название может немного сбивать с толку, потому что слово грипп технически связано с вирусом гриппа, который является инфекцией верхних дыхательных путей и не влияет на пищеварительный тракт.

Смотрите на Youtube:

Слушайте на SoundCloud:

То, что у вас, вероятно, было гастроэнтеритом, а не гриппом. Однако, как и грипп, скорее всего, был вызван вирусом. Гастроэнтерит – это воспаление слизистой оболочки желудка и кишечника. Это вызвано вирусом, бактериями, паразитами, грибком или химическими веществами.

Вирусный гастроэнтерит – второе по распространенности заболевание в США, вспышки которого происходят каждую осень до весны.Это чаще встречается у маленьких детей, чем у взрослых, но любой может заразиться им в любое время года.

В большинстве случаев норовирус или ротавирус являются виновниками сильной рвоты, диареи, лихорадки и болей в животе. Симптомы у младенцев и детей ясельного возраста, как правило, более серьезны из-за развития их иммунной системы.

Норовирусная инфекция может вызвать внезапное начало сильной рвоты и диареи. Вирус очень заразен и обычно распространяется через пищу или воду, зараженную во время приготовления, или через загрязненные поверхности.

Симптомы норовируса обычно начинаются через 12-48 часов после контакта и длятся 1-3 дня. Вирус все еще заразен еще 2 недели из-за распространения вируса. Симптомы включают диарею, боль в животе, рвоту, головную боль, жар и озноб. Некоторые люди заразны и не имеют симптомов.

Ротавирус – очень заразный вирус, вызывающий диарею. Это самая частая причина диареи у младенцев и детей во всем мире. Обезвоживание – серьезное осложнение ротавируса и основная причина детской смертности в развивающихся странах.

Ротавирусная инфекция обычно начинается в течение 2 дней после заражения вирусом. Первоначальные симптомы – лихорадка и рвота, за которыми следует водянистая диарея в течение 3-8 дней. Инфекция также может вызвать боль в животе.

У здоровых в остальном взрослых ротавирусная инфекция может вызывать только легкие признаки и симптомы или не вызывать их вовсе.

Большинство людей полностью выздоравливают благодаря уходу за собой и гидратации. Они не нуждаются в лечении. Однако у некоторых людей – особенно младенцев, пожилых людей и людей с основным заболеванием – рвота и диарея могут вызывать сильное обезвоживание и требовать медицинской помощи.

Как распространяются эти вирусы

Ротавирусные инфекции являются наиболее распространенными патогенами желудочно-кишечного тракта, присутствующими в местах скопления людей, таких как детские сады и школы. Попадая в дом, они могут заразить всю семью.

Оба этих вируса очень заразны и передаются через оральные фекалии. Это происходит примерно так: кто-то пользуется ванной или меняет подгузник и моет руки, но недостаточно хорошо.Они касаются объекта, затем вы касаетесь того же объекта, а затем подносите руку ко рту.

Профилактика:

• Тщательно мойте руки водой с мылом после посещения туалета или смены подгузников
• Тщательно очистите все поверхности
• Пить чистую воду
• Вымойте фрукты и овощи чистой водой или натуральным ополаскивателем для овощей
• Готовьте пищу полностью
• Избегайте еды, приготовленной больным человеком
• Избегайте фуршетов.Еда остается на складе надолго, и несколько человек дотрагиваются до ручек посуды
• Изолируйте больного

Как лечить вирусный гастроэнтерит Антибиотики, противовирусные и противодиарейные препараты не помогают при ротавирусе. Остались поддерживающие меры и домашние средства, которые помогут справиться с симптомами.

Другие советы по уходу при гастроэнтерите

Даже после того, как вы думаете, что все улеглось и рвота прекратилась, подкладывайте хотя бы два полотенца под больного, пока он спит.Если случится еще один инцидент, вы можете легко снять одно полотенце и вытереть его, пока они еще отдыхают, и вам не нужно сразу менять простыни.

Команда тегов по уходу и стирке. Одна из самых больших проблем – не просто заботиться о своем ребенке, когда его рвет, но и не отставать от стирки.

Получите поддержку, чтобы поддерживать чистоту в доме и пополнять жидкий рацион.

Предотвращение обезвоживания

Важно слушать своих детей, когда они больны.Если они не хотят есть, это их способ выразить свои чувства. Это нормально – позволить их телам использовать энергию для борьбы с инфекцией, вместо того, чтобы переваривать пищу! Но им действительно нужно избегать обезвоживания, чтобы их органы и иммунная система могли выполнять свою работу.

Как я уже упоминал, наиболее распространенной проблемой этих вирусных инфекций является обезвоживание. Это происходит, если вы не пьете достаточно жидкости, чтобы восполнить то, что вы теряете из-за рвоты и диареи. Обезвоживание чаще всего встречается у младенцев, маленьких детей, пожилых людей и людей со слабой иммунной системой.

Методы пероральной регидратационной терапии, которая не является простой водой

Вот несколько идей, как поддерживать водный баланс организма с помощью достаточного количества углеводов, белков и минералов. Приготовить в домашних условиях напитки с электролитом для пероральной регидратации, фруктовое мороженое и натуральное желе легко. В свою травяную кухню вы можете добавить поддерживающие травы, чтобы сделать пероральную регидратационную терапию более лечебной. Кроме того, в вашем не будет рафинированного сахара, искусственных ароматизаторов или добавок! Вот несколько рецептов.

Напиток с натуральным электролитом, лучше, чем педиалит, сделай сам

Каждый раз, когда возникает риск обезвоживания, вам нужно приготовить натуральный электролитный напиток своими руками. Коммерческие и электролитные напитки, такие как Pedialyte и Gatoraide, наполнены сахаром, искусственными красителями и ароматизаторами. В идеале вы должны поддерживать организм своего ребенка, пока он здоровым образом выздоравливает от болезни желудка. Приготовить собственный электролитный напиток в качестве альтернативы коммерческим напиткам для регидратации очень просто.Вот мой рецепт быстрого напитка для регидратации на травах, чтобы получился напиток лучше, чем Педиалит. Это смесь лимона, очищающего от токсинов, богатого минералами кленового сиропа, хлорофилла и морской соли.

По этому рецепту получается каменная банка с пинтой. Большинство маленьких детей не смогут выпить это количество за один день, когда они болеют и рвут. Это хорошее количество, чтобы они могли пить небольшими порциями в течение дня.

Вы также можете превратить это во все фруктовое мороженое с натуральными электролитами, которое идеально подходит от боли в горле, вызванной рвотой.

Состав

Инструкции

Просто смешайте все в пол-литровой банке с крышкой и хорошо встряхните, чтобы все перемешалось. Вы можете удвоить количество, если у вас есть дети старшего возраста, сделав это в банке размером с кварту. Не забывайте делать достаточно и для вас!

Кормить ложкой или маленькими глотками каждые 15-30 минут.

Хранить в холодильнике несколько дней.

Травяное фруктовое мороженое с электролитом для регидратации

Фруктовое мороженое – отличный способ предотвратить обезвоживание и снизить уровень жидкости, когда у кого-то рвота и жидкий стул.Чтобы сделать регидратирующее фруктовое мороженое, вы можете просто следовать приведенному выше рецепту и разливать его в формы для мороженого или лотки для льда. Или вы можете усилить их, приготовив фруктовое мороженое с добавлением ягод бузины, повышающей иммунитет. Я призываю вас проявить творческий подход и создать свои собственные любимые ароматы.

Состав

• 2 чашки чая с иммунитетом или чая из бузины
• или сделать
• 1 чашку травяного чая смешать с 2 чашками ягодного сока (клюква, черника, виноград, гранат)
• Сок ½ лимона
• 2 ч.л. кленового сиропа класса А
• от 1/8 до 1/4 чайной ложки настоящей морской или гималайской соли.
• 5-10 капель Energizing Chlorophyll
• 5-10 капель соски для желудка (необязательно, если вы уже добавляете травяной чай)

Маленькие дети могут не успеть закончить мороженое целиком, поэтому вы можете сделать их маленькими, как кубики льда.

Будьте проще, поиграйте со смесью, используйте ингредиенты, которые у вас уже есть на кухне. Обычно самый простой рецепт лучше всего, пока они активно болеют.

Натуральное желе из полезного желатина

Желатин – отличный источник легкоусвояемого белка, который, как известно, способствует пищеварению и уменьшает воспаление желудка и кишечника.Желатин – популярный компонент в протоколах здоровья кишечника, поскольку он покрывает тонкий кишечник, снимая раздражение и дискомфорт в животе. Аминокислоты желатина делают его очень питательным продуктом, не содержащим многих аллергенов, таких как соя, молочные продукты, глютен, яйца, орехи и рыба. Однако он сделан из говядины и содержит альфа-гал, и не является веганским.

Состав

• 2 стакана ягодного сока (клюква, малина, гранат, черника)
• 1 столовая ложка желатина без вкусовых добавок (натуральная говядина зернового откорма)
• 1 столовая ложка сахара (кленовый сироп) (по желанию)
• 10 капель хлорофилла
• 1/2 стакана свежих фруктов (по желанию)

Инструкции

• Налейте 1 стакан сока в миску средней жаростойкости.
• Посыпать соком желатин и растворить; отложите минимум на 5 минут.
• Смешайте оставшийся 1 стакан сока и сахар (сироп) в небольшой кастрюле.
• Доведите до кипения, помешивая, чтобы сахар растворился. Снять с огня.
• Добавьте в сок 10 капель бодрящего хлорофилла
• Влейте смесь горячего сока в желатиновую смесь и перемешайте. Переложите в отдельные сервировочные тарелки или в одну среднюю миску.
• Добавьте фрукты (по желанию) и поставьте в холодильник на 4 часа или пока они не станут твердыми.

Почему вам следует добавить бодрящий хлорофилл?

Хлорофилл – почти безвкусный травяной экстракт с легким привкусом мяты перечной. Он богат витаминами и минералами. Он может поддерживать здоровую иммунную систему и здоровье кишечника. Когда человек чувствует себя разбитым и истощенным, это может помочь укрепить и восстановить тело. Несколько капель могут действительно улучшить электролитный напиток, чтобы вы или ваш ребенок быстрее почувствовали себя сильнее.

Зачем добавлять пустышку для желудка?

Пустышка для желудка – это смесь пищеварительных трав.Хотя нет лучшего решения, чем позволить вирусу развиваться, травы могут помочь при боли в животе, перепелиной тошноте, а также улучшить пищеварение и абсорбцию, если вы научитесь сдерживать пищу и жидкость.

Что насчет бузины и чая с иммунитетом?

Бузина – это противовирусное растение с высоким содержанием антиоксидантов, которое поддерживает естественную способность организма бороться с инфекциями и быстро восстанавливаться. Immune Tea смешан с бузиной, эхинацеей, цветками ромашки и перечной мятой.Эти травы поддерживают пищеварительный тракт и здоровье кишечника.

Вопросы, которые можно задать себе при уходе за больным ребенком

• Когда появились симптомы?
• Симптомы носят постоянный характер или они приходят и уходят?
• Насколько серьезны симптомы?
• Кажется, что-нибудь улучшает симптомы?
• Что может ухудшить симптомы?

Когда обращаться к врачу

В большинстве случаев эти заболевания проходят сами собой без медицинской помощи.Однако, пожалуйста, позвоните врачу вашего ребенка, если ваш ребенок:

• Диарея или рвота более 24 часов
• Стул черный или дегтеобразный либо стул, содержащий кровь или гной
• Имеет температуру 104 F (40 C) или выше
• Кажется вялым, раздражительным или испытывает боль
• Имеет признаки или симптомы обезвоживания, включая сухость во рту, плач без слез, слабое мочеиспускание или его отсутствие, необычную сонливость или невосприимчивость

Если вы взрослый, позвоните своему врачу, если вы:

• Не может удерживать жидкость в течение 24 часов
• Диарея более двух дней
• Кровь в рвоте или дефекации
• Иметь температуру выше 103 F (39.4 С)
• Имеются признаки или симптомы обезвоживания, включая чрезмерную жажду, сухость во рту, слабое мочеиспускание или его отсутствие, сильную слабость, головокружение при стоянии или дурноту

Это часть нашей серии статей о здоровье иммунной системы. См. Соответствующую запись в блоге и видео.

Этот пост предназначен только для образовательных целей. Пожалуйста, используйте эту информацию с умом. Вся ответственность за то, что вы делаете с этой информацией, лежит на вас.

Ссылки: Mayo Clinic

Эпидемиология и профилактика болезней, предупреждаемых с помощью вакцин: Ротавирус.Центры по контролю и профилактике заболеваний. https://www.cdc.gov/vaccines/pubs/pinkbook/rota.html. По состоянию на 29 января 2019 г.

Расчетная смертность от ротавируса среди детей в возрасте до 5 лет: 2013 г., 215 000. Всемирная организация здравоохранения. https://www.who.int/immunization/monitoring_surveillance/burden/estimates/rotavirus/en/. Доступ 12 февраля

.

Ротавирус. Центры по контролю и профилактике заболеваний. https://www.cdc.gov/rotavirus/index.html. По состоянию на 1 февраля 2019 г.

Норовирус: Технический бюллетень.Центры по контролю и профилактике заболеваний. http://www.cdc.gov/norovirus/index.html. По состоянию на 15 ноября 2016 г.

.

No related posts.