Фкс с наркозом: Колоноскопия в Челябинске | Цены на ФКС под наркозом

Опубликовано 17.09.1971 от alexxlab Оставить комментарий

Содержание

Колоноскопия в Челябинске | Цены на ФКС под наркозом

Современный метод исследования слизистой толстого кишечника – от прямой до слепой кишки.

Колоноскопия – детальный осмотр толстого кишечника с помощью оптического прибора – колоноскопа (гибкого управляемого зонда, оснащенного видеокамерой).

Колоноскопия кишечника в Челябинске проводится в клинике «ЭВИМЕД». Проводят процедуру опытные врачи-эндоскописты с помощью новейшего аппарата экспертного класса, позволяющего обнаружить даже малейшие отклонения от нормы. При необходимости, врач в ходе обследования безболезненно удалит образования на стенках кишечника или проведет биопсию подозрительного участка.

Цель исследования

Колоноскопия – максимально эффективный способ получения исчерпывающей информации о состоянии толстого кишечника. Многократное увеличение исследуемых тканей позволяет выявлять даже мельчайшие изменения в их структуре, а цена колоноскопии доступна каждому пациенту.

Показания и противопоказания

Основными показаниями к проведению исследования, являются:

подозрение на любую патологию толстого кишечника
примесь слизи или крови во время дефекации
язвенный колит
хроническая диарея
боли в животе на фоне расстройства стула
железодефицитная анемия
болезнь Крона
наличие кишечных свищей, полипов

Колоноскопия кишечника в Челябинске проводится в качестве регулярной скрининговой процедуры всем женщинам и мужчинам старше 50 лет, с целью ранней диагностики онкопатологий.

Противопоказания к процедуре определяются гастроэнтерологом или врачом-эндоскопистом.

Как проводят процедуру

Колоноскопия занимает 20-30 минут и выполняется таким образом:

Пациент укладывается на левый бок, с подогнутыми коленями;

Доктор аккуратно вводит колоноскоп и медленно поворачивая прибор, последовательно его продвигает по всей протяженности толстой кишки, внимательно осматривая каждый участок слизистой.

В клинике «ЭВИМЕД» для устранения дискомфорта проводится колоноскопия под наркозом. Это позволяет врачу более тщательно и детально провести исследование, не доставляя пациенту никаких болезненных или неприятных ощущений.

Подготовка к колоноскопии

Исследование требует обязательной предварительной подготовки:

за несколько дней до исследования исключить из рациона грубую, газообразующую пищу;
вечером накануне процедуры и утром очистить кишечник.

Более подробные рекомендации по подготовке к обследованию даст врач-гастроэнтеролог.

Преимущества обращения в «ЭВИМЕД»

Если вам необходима колоноскопия под наркозом в Челябинске – обращайтесь в клинику «ЭВИМЕД». Обследование проводят опытные, грамотные врачи с помощью передового цифрового оборудования. В нашей клинике для наркоза применяются безопасные препараты последнего поколения, обладающие коротким сроком действия, не угнетающие дыхательную систему.

Мы предлагаем самые низкие цены на колоноскопию в Челябинске.

Фиброколоноскопия (ФКС) кишечника в СПб — сделать ФКС под наркозом в медцентре Эко-безопасность

Что такое колоноскопия (обследование кишечника) или ФКС?

Колоноскопия – это исследование, которое проводится с помощью специального прибора (колоноскопа). Врач-эндоскопист, проводящий исследование, осматривает и оценивает состояние всего толстого кишечника, а также конечные отделы тонкого кишечника. При необходимости, во время исследования берется биопсия – отщипывается кусочек слизистой кишечника или его патологических образований и отправляется в специальную лабораторию для изучения. Это позволяет осуществлять диагностику заболеваний кишечника, выявлять признаки злокачественного перерождения и в несколько десятков раз увеличивает вероятность успешного и полного излечения при ранней диагностике не только рака, но и целого ряда других заболеваний.

Необходимость выполнения колоноскопии определяет врач в случаях, когда пациента беспокоят:

боли в животе
вздутие живота, метеоризм
запор, диарея или их сочетание
патологические примеси в кале (кровь, слизь)
необъяснимое похудение
исчезновение аппетита
определяемое объемное образование в животе.

Как правильно подготовиться к процедуре?

В течение трех дней перед обследованием необходимо придерживаться бесшлаковой диеты.

Из рациона следует исключить:

Все фрукты и овощи

Зелень
Ягоды, бобовые, орехи
Жирное мясо, рыбу, колбасные изделия
Каши (перловая, пшенная, овсяная), макаронные изделия
Газированные напитки с искусственными красителями
Черный хлеб
Цельное молоко, кофе.

Все эти продукты тяжело перевариваются или являются причиной излишнего газообразования в кишечнике.

К употреблению рекомендуются:

Хлеб пшеничный из муки грубого помола
Нежирное отварное мясо (говядина, птица) или рыба
Диетические бульоны
Сухое печенье (галеты)
Кисломолочные напитки (кефир, простокваша, натуральный йогурт).

Последний прием пищи должен быть ориентировочно за 20 часов до начала обследования. Далее, в течение дня можно пить жидкость (воду, чай). В день обследования пищу принимать запрещено, можно пить слабый чай или питьевую воду.

Дальнейшая подготовка к колоноскопии кишечника заключается в его очищении – ЛАВАЖ кишечника (промывание с целью очищения).

Накануне исследования проводят очистку кишечника сбалансированными электролитными растворами, обладающими слабительными свойствами, которые проходят через кишечник, не всасываясь и не метаболизируясь, в результате чего удаётся избежать нарушения водно-электролитного баланса и обеспечить эффективный кишечный лаваж.

В настоящее время для подготовки к колоноскопии используются фортранс, мовипреп, лавакол, дюфалак, эндофальк.

Наиболее распространена очистка кишечника препаратом фортранс.
Традиционно считается, что для достижения очищающего эффекта, особенно у пациентов с массой тела, превышающей 70-80 кг, необходимы достаточно большие объемы (4 литра и более) препарата.

Наши преимущества

Новое, современное оборудование компании Pentax, Япония (диаметр трубки эндоскопа 9 мм).
Исследование выполняет опытный врач-эндоскопист.
Возможность одновременного проведения гастро- и колоноскопии под общим наркозом.
Возможность проводить процедуру в удобный для пациента день.
Возможность размещения до и после обследования в комфортабельных палатах дневного стационара.
Максимальный комфорт для пациента без боли и осложнений за счет использования гибкой эргономичной трубки гастроскопа и колоноскопа.

Сделаем фиброколоноскопию кишечника (ФКС) в Санкт-Петербурге – за несколько минут, без боли (при желании, под наркозом), с минимальными неприятными ощущениями на современном оборудовании.

Отзывы

Колоноскопия (видеоколоноскопия), ФКС для обледования толстой кишки под седацией, “наркозом”

Колоноскопия (видеоколоноскопия, ФКС) – это полное эндоскопическое обследование состояния слизистой оболочки толстой кишки, отдела кишечника начинающегося от выхода из тонкой кишки и заканчивающегося анальным отверстием.

В нашем центре колоноскопия проводится с использованием современной видеоэндоскопической системы японской компании PENTAX Medical и позволяет получить цветное изображение с высоким разрешением, а также записать данные обследования на диск. При необходимости во время обследования врач-эндоскопист возьмет для уточнения диагноза и проведения гистологического исследования небольшие участки слизистой для биопсии, кроме того колоноскопия используется для удаления полипов, обнаруженных в толстой кишке. По желанию пациента колоноскопию (видеоколоноскопию, ФКС) можно провести под общим медикаментозным сном (седацией) .

Главным условием получения качественного результата является подготовка к обследованию, она заключается в соблюдении бесшлаковой диеты

в течение трех суток перед колоноскопией и очистке кишечника накануне исследования с помощью лекарственных препаратов Фортранс, Мовипреп или Эзиклен. Выбор препарата рекомендуем согласовать со своим лечащим врачом.

Подготовка к колоноскопии подробнее.

Если колоноскопия проводится без наркоза, у большей части пациентов исследование может вызывать болезненные ощущения из-за подачи воздуха в кишечник для прохождения эндоскопа. Выраженность болезненных ощущений во время исследования зависит от индивидуальных особенностей пациента, профессионализм врача позволяет уменьшить неприятные ощущения до минимальных. Решение как проходить колоноскопию с наркозом или без принимает пациент после консультации с врачом-гастроэнтерологом.

Пациент в результате обследования получит

В результате видео колоноскопии вы получите заключение врача, содержащее информацию о цвете слизистой оболочки толстой кишки, характере ее сосудистого русла, а также о наличии или отсутствии отечности, утолщений, язв и новообразований и данные обследования, записанные на диск по желанию. Результаты гистологического исследования после взятия биопсии обычно готовы через 7-10 дней.

Седация при ФГС и ФКС

Многие люди приходят в ужас и годами не могут решиться на проведение необходимой им процедуры ФГДС или ФКС из-за страха дискомфорта и болевых ощущений. Такая позиция зачастую приводит к невозможности своевременной диагностики таких опасных заболеваний, как рак. А ведь современные технологии легко позволяют полностью исключить болевые ощущения при проведении данных процедур. В

ЛДЦ «АвисМед» Вы можете пройти данные исследования под наркозом — седацией. Эта процедура абсолютно безопасна и не приносит никаких неприятных ощущений пациенту.

Седация – это «сноподобное» состояние умиротворенности, спокойствия и невозмутимости, которое вызывается при помощи относительно небольшой дозы лекарств, позволяет пациенту физически и эмоционально расслабиться во время проведения какого-либо медицинского исследования или процедуры, которые могут быть неприятны или болезненны (к примеру эндоскопические исследования)

Состояние седации, с одной стороны, создаёт хорошие условия для работы врача, так как пациент, находясь в состоянии полудрёма, достаточно расслаблен, а, с другой стороны, учитывая, что седация по своей глубине является относительно поверхностным состоянием, пациент, при необходимости, в любой момент способен выполнить указания врача — эндоскописта, что, безусловно, является очень важным.

Сон в седации не очень глубокий, поэтому функция дыхания пациента, в отличие от общей анестезии (наркоза), не нарушается.

После седации Вы будите совсем ничего не помнить о произведенной процедуре, так же не останется никаких болевых ощущений.

Подробности уточняйте у администраторов!

Запишитесь по телефону ☎ 227-6-227!

или

Мы с радостью Вас ждём!

Колоноскопия в Пензе под наркозом

Описание

Фиброколоноскопия — это обследование кишечника, которое позволяет оценить состояние слизистой оболочки стенок толстой кишки (от анального отверстия до слепой кишки).

Основное преимущество ФКС — возможность проведения малоинвазивных вмешательств непосредственно во время осмотра.

Показания

Колоноскопия назначается в следующих случаях:
— боли и спазмы в животе;
— частые запоры и поносы;
— кровь или слизь в каловых массах;
— ощущение постороннего тела в прямой кишке;
— подозрение на наличие опухолей;
— наблюдение выявленного ранее заболевания и контроль эффективности лечения.

Также процедуру рекомендовано ежегодно проходить людям старше 40 лет для исключения или раннего выявления онкологических заболеваний.

Как проводится

Для проведения колоноскопии пациент ложится на левый бок и поджимает колени к животу. Через задний проход врач вводит фиброколоноскоп — длинный тонкий гибкий зонд с микрокамерой на конце. Прибор поступательно продвигается вперед, что дает возможность осмотреть стенки толстой кишки на всем ее протяжении. Одновременно для расправления складок стенок кишечника осторожно подается воздух. По завершении осмотра воздух втягивается обратно.

ФКС можно проводить в медикаментозном сне, под контролем анестезиолога. Такой вариант исследования рекомендуется для пациентов с низким болевым порогом и лиц, страдающих спаечной непроходимостью. Никаких неприятных ощущений пациент не испытывает. После процедуры предоставляется специальная палата, где можно отдохнуть и выпить чай.

Как подготовиться

За 2-3 дня до диагностики нужно исключить продукты, приводящие к метеоризму.

Колоноскопия проводится натощак: нужно воздержаться от употребления пищи не позднее, чем за 14 часов до обследования. Непосредственно перед процедурой можно пить только воду или некрепкий чай.

Накануне обследования нужно опорожнить кишечник с помощью клизмы или слабительного.

Длительность

Длительность исследования без медикаментозного сна составляет 20 минут, при проведении в медикаментозном сне – 40 минут.

Эндоскопия в г. Рязань, ФКС и ФГДС под наркозом и без

Качественная подготовка толстой кишки к колоноскопии

1.Соблюдение диеты

2.Выбор схемы приёма препарата МОВИПРЕП в зависимости от времени проведения обследования

3.Приём препарата МОВИПРЕП

1.Соблюдение диеты Пациенту необходимо соблюдать диету с исключением растительной клетчатки за 3 дня до проведения обследования (2 и 3 день диеты ограничить принятие пищи,можно только кефир,творог и кисель).

Запрещено

Вся растительная пища:

Овощи, фрукты, ягоды.
Хлебобулочные изделия, крупы каши, злаковые.
Бобовые, орехи, кунжут, мак, семечки и др зерна.
Морские водоросли и грибы.

Жидкости:

Окрашенные соки
Алкоголь
Газированные напитки
Вся жидкость, не входящая в список разрешенных

В день накануне обследования прием твердой пищи необходимо полностью исключить.Принимать пищу можно до 13:00 дня накануне обследования,далее пить разрешенные прозрачные жидкости в любом количестве.

Время приема пищи в день накануне обследования:

Утром – легкий завтрак (согласно списку разрешенных продуктов)
До 13:00 – легкий обед (согласно списку разрешенных продуктов)
Ужин- только жидкости (согласно списку разрешенных жидкостей)

2. Выбор схемы приема препарата МОВИПРЕП в зависимости от времени проведения обследования (а так же приобрести СИМЕТИКОН)

ОБСЛЕДОВАНИЕ 08:00-14:00

Двухэтапная схема (1л раствора препарата МОВИПРЕП принимается вечером накануне дня обследования и 1 л утром в день обследования):

19:00-20:00 принять первый литр раствора препарата МОВИПРЕП
Принять 500 мл разрешенной жидкости
Время утреннего приема второго литра раствора препарата МОВИПРЕП выбрать таким образом,чтобы от момента окончания приема препарата до обследования прошло минимум 2 часа и максимум 4 часа. (Утром во второй литр раствора МОВИПРЕП добавляем ¼ флакона СИМЕТИКОНА)

ОБСЛЕДОВАНИЕ 14:00–19:00

Одноэтапная утренняя схема (2л раствора препарата МОВИПРЕП принимаются утром в день обследования):

08:00-09:00 принять первый литр раствора препарата МОВИПРЕП (указано рекомендованное время для обследования в 14:00-14:30,для более позднего времени обследования начало приема препарата сместить соответственно)
Принять 500 мл разрешенной жидкости
Время приема второго литра раствора препарата МОВИПРЕП выбрать таким образом,чтобы от момента окончания приема препарата до исследования прошло минимум 2 часа и максимум 4 часа.
Принять 500 мл разрешенной жидкости

3.Приём препарата МОВИПРЕП

Колоноскопия (фкс) под наркозом Буйнакск

В какой клинике в нашего города качественнее всего можно сделать колоноскопию под наркозом. Самые лучшие проктологические клиники и отделения и самые дешёвые цены и стоимость проведения. На этом сайте вы сможете выбрать самую хорошую проктологию, где имеется возможность получить данную услугу или лечение. После того, как вы определите какое именно медицинское учреждение вам подходит оптимальнее всего – смотрите отзывы, находите где интересующая проктология располагается на карте города.

Колоноскопия под наркозом в Буйнакске

К задаче подбора самой квалифицированной проктологии надо подходить наиболее ответственно – данный момент исключительно в ваших персональных интересах. Ошибочное решение сделает Вам невероятное количество проблем, решать которые придётся Вам, потратив невероятное количество времени и денег.

Где в Буйнакске можно сделать колоноскопию под наркозом 0 отзывов пациентов мкр. Дружба, д. 1 0 отзывов пациентов ул. Аскерханова, д. 56 0 отзывов пациентов ул. Г. Цадасы, 1а 0 отзывов пациентов ул. Ленина, д. 65
колоноскопия (фкс) под наркозом. У Вас в распоряжении лучшие доктора, которые могут провести колоноскопия (фкс) под наркозом в Буйнакске. К задаче выбора лучшего специалиста требуется относится крайне дотошно и ответственно. компетентное лечение вызывает огромное количество осложнений в дальнейшем. колоноскопия (фкс) под наркозом. Вследствие этого подходите к выбору очень ответственно. Не следует отдавать предпочтения медицинским учреждениям с самой невысокой ценой, так как уровень качества проктологических услуг прямо зависит от стоимости.
С противоположной стороны большая стоимость не признак отличного уровня лечения. Однако, гарантированно можно определить четко – при малой стоимости получить высокого качества не получится. колоноскопия (фкс) под наркозом. Любой пациент ищет проктологическую клинику и отделение по своему кошельку , если они как-либо ограничены, то данный раздел этого сайта лучший способ для выбора самой лучшей проктологии.
Фкс под наркозом лучше всего
После посещения одной или нескольких медклиник – напишите персональный отзыв о ней. В отзыве напишите:
Доброжелательность сотрудников регистратуры.
Предерживание сроков и порядка записи – все ли врачебные мероприятия проходили вовремя и в срок?
Состояние помещений проктологий и совокупное впечатление от внутреннего интерьера.
Отношение специалистов – были ли внимательны, отвечали ли на все задаваемые Вами вопросы?
Профессионализм докторов и остального медперсонал – как Вы её оценивали тогда и в данный момент?
Оборудованность – насколько актуальное оборудование, достаточно ли его в полной мере?
Общее впечатление от данного медицинского учреждения, Вы порекомендовали ли бы его друзьям и членам семьи?
Ваши рекомендации будут очень нужны остальным гостям этого сайта, благодаря им они смогут не совершить чужих ошибок, или же наоборот сделают верный выбор. И проктологии, которые оказывают некачественные медицинские или прекратят своё существование, либо обязаны будут исправлять уровень лечения и увеличивать качество предоставляемых услуг.
границ | WS635 ослабляет когнитивные нарушения, вызванные анестезией / хирургическим вмешательством, у мышей
Введение
Ежегодно более 312 миллионов пациентов во всем мире делают операции под наркозом (Weiser et al., 2015). Периоперационное нейрокогнитивное расстройство (PND; Evered et al., 2018) является одним из наиболее частых послеоперационных осложнений у этих пожилых людей (Inouye et al., 2016; Daiello et al., 2019). Сообщалось, что PND связан с болезнью Альцгеймера (AD; Fong et al., 2009; Schenning et al., 2016), повседневные функциональные нарушения (Phillips-Bute et al., 2006), зависимость от государственной помощи (Steinmetz et al., 2009), а также повышение заболеваемости и смертности (Monk et al., 2008; Deiner and Silverstein , 2009; рассмотрено в Vutskits, Xie, 2016). Тем не менее, целенаправленных вмешательств с ПНП не было, в основном из-за неустановленного механизма ПНП.
Наши предыдущие исследования показали, что абдоминальные операции под изофлурановой анестезией могут вызывать когнитивные нарушения (Yang et al., 2017; Liufu et al., 2020) и бредовое поведение (Peng et al., 2016; Liufu et al., 2020) у мышей. Поэтому мы используем эту установленную модель для дальнейшего изучения ПНП, особенно целевых вмешательств и лежащих в их основе механизмов.
Циклоспорин A (CsA) является блокатором открытия митохондриальной проницаемой поры (mPTP) (Marchetti et al., 1996; Nicolli et al., 1996). Наши предыдущие исследования показали, что CsA ослабляет индуцированное изофлураном открытие mPTP, активацию каспазы-3, а также ухудшение обучения и памяти у мышей (Zhang et al., 2012). CsA также смягчал вызванное анестезией / хирургическим вмешательством поведение, подобное делирию, у мышей (Peng et al., 2016). Тем не менее, CsA является иммунодепрессивным препаратом в клиниках для лечения отторжения органов и имеет потенциальные побочные эффекты (Penninga et al. , 2013; Liddicoat and Lavelle, 2019), что ограничивает его использование в качестве вмешательства при ПНД.
WS635, новое соединение, разработанное Waterstone Pharmaceuticals (Ухань, Китай), аналог CsA без его иммуносупрессивных эффектов (Hopkins et al., 2010; Bobardt et al., 2014). Было показано, что WS635 является биодоступным при пероральном или внутривенном введении для нескольких видов животных (крысы и обезьяны) и продуцирует концентрации исходного лекарственного средства в крови и печени, которые превышают 50% эффективную дозу, определенную в бицистронном анализе репликона, производном от con1b (Hopkins et al., 2010 ). Однако не установлено, можно ли использовать WS635 для профилактики или лечения PND. Поэтому мы создали систему для дальнейшего изучения WS635 путем оценки того, может ли WS635 смягчить когнитивные нарушения, вызванные анестезией / хирургическим вмешательством, у мышей, используя нашу существующую модель на животных на мышах.
Постсинаптическая плотность-95 (PSD-95) является возбуждающим постсинаптическим маркером (Chen et al. , 2015; Coley and Gao, 2018), а синаптофизин является белком, связанным с синаптической пластичностью (Janz et al., 1999; Hao et al. ., 2017; Xiang et al., 2018). Уменьшение этих синаптических маркеров предполагает потерю синапсов, потенциально приводящую к когнитивным нарушениям (Clare et al., 2010; Kaufman et al., 2015; Murmu et al., 2015; Hong et al., 2016). Предыдущее исследование нашей лаборатории показало, что те же когнитивные нарушения, вызванные анестезией / хирургическим вмешательством, обнаруженные в тесте лабиринта Барнса, и снижение уровней PSD-95, синаптофизина и АТФ в гиппокампе в тканях мозга мышей (Miao et al., 2018). Наконец, CsA смягчал вызванное анестезией / хирургическим вмешательством снижение количества АТФ в тканях мозга мышей (Peng et al., 2016). Таким образом, в настоящем исследовании было высказано предположение, что WS635 ослабляет когнитивные нарушения, вызванные анестезией / хирургическим вмешательством, и снижает количество PSD-95, синаптофизина и АТФ в тканях мозга мышей.
PND – общее название когнитивных нарушений, выявленных до и послеоперационного периода (Evered et al., 2018). Отсроченное нейрокогнитивное расстройство (dNCR) является одним из типов PND и может возникнуть примерно через 1–4 недели после анестезии / операции (Evered et al., 2018). В настоящем исследовании мы определили dNCR в исследованиях на животных, оценив влияние анестезии / хирургического вмешательства на когнитивные функции через 2–11 дней после операции.
Материалы и методы
Анестезия и хирургическое лечение мышей
Постоянный комитет по животным при Массачусетской больнице общего профиля, Бостон, Массачусетс (протокол 2006N000219) одобрил протокол для животных. Мы проводили все эксперименты в соответствии с рекомендациями и правилами Национального института здравоохранения.Были предприняты усилия, чтобы свести к минимуму число используемых животных. Мы написали рукопись согласно приезжают правила.
Девятимесячных самок мышей дикого типа (WT) (C57BL / J6, штамм №: 000664, лаборатория Джексона, Бар-Харбор, штат Мэн) случайным образом распределяли по весу в группу анестезии / хирургии или контрольную группу. В текущих исследованиях использовались только самки мышей, поскольку наши предыдущие исследования показали, что у самок, но не самцов трансгенных мышей с болезнью Альцгеймера развились когнитивные нарушения и синаптическая потеря после наркоза севофлураном и хирургического вмешательства (Zhang et al., 2017). Всех мышей помещали в помещение для животных для адаптации (с периодом 12:12 ч свет: темнота с пищей и водой, доступными ad libitum) за 3 дня до исследования. Мышам из группы анестезии / хирургического вмешательства была выполнена простая лапаротомия с использованием 1,4% изофлурана и 40-100% кислорода с использованием методов, описанных в наших предыдущих исследованиях (Peng et al., 2016; Yang et al., 2017; Miao et al., 2018 ). Через 15 минут после индукции мышь была выведена из камеры и подвергнута непрерывной анестезии изофлураном через конусное устройство с одной иглой 16-го размера, вставленной в конус возле носа мыши для контроля концентрации изофлурана.Продольный разрез по средней линии от мечевидного отростка до проксимального лонного симфиза 0,5 см был сделан на коже, мышцах живота и брюшине. Затем мы зашили разрез слой за слоем ниткой Викрил 5–0. Мы наносили крем EMLA (2,5% лидокаина и 2,5% прилокаина) на место разреза в конце процедуры и три раза в день в течение 3 дней для снятия боли, связанной с разрезом. После завершения хирургической процедуры мы поместили мышь обратно в анестезиологическую камеру на оставшуюся часть анестезии до 2 часов.Ректальную температуру мышей контролировали и контролировали на уровне 37 ± 0,5 ° C во время анестезии / операции с помощью системы на основе обратной связи с системой контроля температуры постоянного тока (FHC, Bowdoinham, Maine). Мышей помещали обратно в их домашнюю клетку с пищей и водой, доступными ad libitum, после того, как они оправились от анестезии в 100% O2. Мышей контрольной группы помещали в свои домашние клетки с комнатным воздухом на 2 часа, что соответствовало состоянию пациентов, не подвергавшихся хирургическому вмешательству. Наши предыдущие исследования показали, что эта анестезия / операция существенно не изменили артериальное давление и показатели газов крови у мышей (Liufu et al. , 2020).
Лечение CsA и WS635
CsA (Sigma, Сент-Луис, Миссури) растворяли в кукурузном масле с 10% ДМСО. Каждой из мышей в группе контроля плюс CsA и группе анестезии / хирургии плюс CsA вводили раствор CsA в дозе 10 мг / кг в объеме 0,2 мл внутрибрюшинно (IP) за 30 мин до, 24 ч и 48 ч после наркоза / операции. Мыши в группе контроля плюс носитель и группы анестезии / хирургии плюс носитель получали 0,2 мл кукурузного масла с 10% ДМСО в те же моменты времени, что и лечение CsA.WS635 растворяли в кукурузном масле с 10% ДМСО. Каждой из мышей в контрольной группе плюс WS635 и группе анестезии / хирургии плюс WS635 вводили раствор WS635 с дозой 13,2 мг / кг, 26,4 мг / кг или 52,8 мг / кг в объеме 0,2 мл через IP через 30 мин. до, 24 ч и 48 ч после наркоза / операции. Мыши в группе носителя получали 0,2 мл кукурузного масла с 10% ДМСО.
Измерение потери правильного отражения (LORR)
Мыши получали различные концентрации изофлурана, севофлурана или десфлурана с 52. 8 мг / кг WS635 или контрольное условие. Затем мышей поместили в пустую домашнюю клетку, и клетку повернули на 180 градусов, чтобы поместить мышь на спину. LORR считался положительным, если мышь оставалась на спине, по крайней мере, тремя лапами в воздухе в течение 60 с.
Определение порога ноцицепции
Мы сравнили порог ноцицепции у мышей между группами анестезия / хирургическое вмешательство плюс кукурузное масло и анестезия / хирургическое вмешательство плюс WS635 (52,8 мг / кг) через 3 часа после анестезии / хирургического вмешательства.Порог ноцицепции определяли с использованием нейлоновых нитей фон Фрея, как описано в предыдущем исследовании (Chaplan et al., 1994). Точнее, каждую мышь помещали на платформу из проволочной сетки в прозрачных цилиндрических пластиковых корпусах (диаметром 8 см и высотой 10 см). После 20 минут пребывания на платформе нити прикладывались (диапазон изгибающей силы 0,008–26 г; North Coast Medical, Морган Хилл, Калифорния) к резаной ране (после обработки EMLA) по краю и задней лапе на 5 с. с 10 с между каждой стимуляцией.Прогибание назад или отрыв лапы от пола оценивали как положительный ответ, представляющий порог ноцицепции. Когда не было получено никакого ответа, следующую более жесткую нить в серии накладывали на ту же область. Каждую мононить использовали в тестовой зоне пять раз. Порог ноцицепции был получен как сила (в граммах), при которой прогибание спины или отдергивание лапы происходили, по крайней мере, при трех из пяти стимуляций.
Лабиринт Барнса
Мышей тестировали в лабиринте Барнса, как описано в предыдущем исследовании (Liufu et al., 2020). Обучение лабиринту Барнса проводилось с 7-10 дней после анестезии / операции. Днем тестирования лабиринта Барнса был 11-й день после анестезии / операции. Задержка, скорость и расстояние, на которое мышь опознает и входит в спасательную коробку в дни обучения и тестирования, измерялись и записывались с помощью системы видеонаблюдения ANY-Maze (Stoelting Co. Wood Dale, IL).
Система кондиционирования страха
Система кондиционирования страха (FCS) выполнялась, как описано в нашем предыдущем исследовании (Zhang et al. , 2012). Контекстные и тональные тесты FCS проводились на 8 и 13 дни после анестезии / операции. Функции обучения и памяти в тестах контекста и тона оценивались путем измерения времени, в течение которого мышь демонстрирует «застывшее поведение», определяемое как полностью неподвижная поза, за исключением дыхательных усилий. Any-Maze проанализировал время такого «замораживания» (время замораживания) (замораживание на пороге: 10; порог выключения замораживания: 20; минимальная продолжительность замораживания: 1 с; Stoelting).
Сбор, лизис и количественное определение белков головного мозга
Ткани головного мозга мышей собирали декапитацией сразу после анестезии / операции.В конце FCS ткани мозга мышей (кора и гиппокамп) собирали и хранили при -80 ° C для анализа вестерн-блоттингом. Собранные ткани головного мозга гомогенизировали на льду с использованием буфера для иммунопреципитации (10 мМ Трис-HCl, pH 7,4, 150 мМ NaCl, 2 мМ ЭДТА, 0,5% Nonidet P-40, реагент для экстракции белка млекопитающих, Thermo Scientific, Waltham, MA) плюс протеаза. ингибиторы (1 мг / мл апротинина, 1 мг / мл лейпептина и 1 мг / мл пепстатина A, Sigma). Лизаты собирали, центрифугировали при 12000 об / мин в течение 15 минут при 4 ° C и определяли количество общих белков с помощью набора для анализа белков бицинхониновой кислоты (BCA) (Thermo Scientific).Затем ткани головного мозга подвергали вестерн-блоттингу.
Вестерн-блоттинг
Антитело
PSD-95 (1: 1000, Cell Signaling, Danvers, MA) использовали для обнаружения PSD-95 (95 кДа). Антитело к синаптофизину (1: 1000, Abcam, Cambridge, MA) использовали для обнаружения синаптофизина (38 кДа). Антитело против β-актина (1: 10 000, Sigma) использовали для обнаружения β-актина (42 кДа). Количественное определение вестерн-блоттинга проводили, как описано Xie et al. (2008). Вкратце, интенсивность сигнала анализировали с помощью ChemiDoc XRS + с Image Lab 5.0 (Bio-Rad, Hercules, CA). Мы провели количественную оценку вестерн-блоттинга в два этапа. Во-первых, мы использовали уровни β-актина для нормализации (например, определения отношения PSD-95 к количеству β-актина) количества белка и ограничения различий в количестве загруженного белка. Во-вторых, мы представили количество белка в группе лечения анестезией / хирургическим вмешательством в процентах от такового в контрольной группе для сравнения.
Измерение ATP
Уровни АТФ в коре и гиппокампе мышей ( N = 6 в каждой группе) определяли с помощью набора для колориметрического / флуориметрического анализа АТФ в соответствии с протоколом, предоставленным производителем (Abcam), как описано в предыдущих исследованиях (Miao и другие., 2018).
Статистический анализ

Основываясь на результатах наших предыдущих исследований, мы использовали 5–6 мышей на группу для биохимических исследований и 14–18 мышей на группу для поведенческих исследований. Мы представляем данные биохимических исследований и время замораживания FCS как среднее значение ± стандартное отклонение (SD). Взаимодействие между факторами времени и группы определяли с использованием двухфакторного дисперсионного анализа с повторным измерением для анализа разницы в кривых обучения (на основе латентного времени ухода) между мышами в контрольной группе и группе анестезии / хирургии в тесте лабиринта Барнса.Двусторонний дисперсионный анализ ANOVA и апостериорный тест (поправка Бонферрони) были использованы для анализа взаимодействия между группой (контрольное состояние по сравнению с анестезией / хирургическим вмешательством) и лечением (носитель по сравнению с WS635) в отношении количества PSD-95, синаптофизина и АТФ и время замораживания FCS. Данные порога ноцицепции были представлены в виде медианы и межквартильного размаха; и был проанализирован с использованием теста Манна – Уитни U . Уровни АТФ были представлены как процент от контрольной группы. P значения <0.05 считались статистически значимыми, а проверка значимости была двусторонней. Статистический анализ проводился с использованием программного обеспечения GraphPad Prism (Сан-Диего, Калифорния; версия 8.0).

Результаты

Влияние WS635 на глубину анестезии у мышей

Во-первых, мы спросили, может ли WS635 изменить глубину анестезии у мышей. Данные исследований LORR продемонстрировали, что WS635 (52,8 мг / кг) не изменил кривую LORR изофлурана (Рисунок 1A), севофлурана (Рисунок 1B) и десфлурана (Рисунок 1C) по сравнению с носителем (контрольное условие). у мышей.Эти данные предполагают, что WS635 существенно не изменил глубину анестезии.

Рисунок 1 . Влияние WS635 на вызванную анестезией потерю рефлекса выпрямления у мышей. Влияние WS635 и условия контроля на наличие потери рефлекса выпрямления у мышей после различных концентраций изофлурана (A) , севофлурана (B) и десфлурана (C) . N = 6 мышей в каждой группе.

Влияние WS635 на боль, вызванную анестезией / хирургическим вмешательством

Мы спросили, может ли WS635 изменить порог ноцицепции у мышей после анестезии / операции.Данные исследований порога ноцицепции продемонстрировали, что WS635 (52,8 мг / кг) существенно не изменил порог ноцицепции в области раны (Рисунок 2A) и в области без раны (Рисунок 2B) по сравнению с носителем (кукурузным маслом) в мыши. Примечательно, что мы помещаем EMLA в область раны перед измерением порога ноцицепции. Эти данные предполагают, что WS635 существенно не изменил порог ноцицепции как в раневой, так и в нерановой областях у мышей после анестезии / хирургического вмешательства.

Рисунок 2 . Влияние WS635 на порог ноцицепции у мышей после анестезии / операции. Влияние WS635 и носителя (кукурузного масла) на порог ноцицепции в области раны (A), и не раневой области (B) у мышей после анестезии / хирургического вмешательства. WS635 существенно не изменил порог ноцицепции по сравнению с носителем у мышей после анестезии / хирургического вмешательства. N = 4 мыши в каждой группе.

Влияние WS635 на двигательную активность мышей

Затем мы обнаружили, что обработка 13.2 мг / кг или 26,4 мг / кг WS635 существенно не изменили скорость побега по сравнению с носителем в контрольных условиях (фиг. 3A) или в условиях анестезии / хирургического вмешательства (фиг. 3C) у мышей, испытанных в лабиринте Барнса. Более того, обработка 52,8 мг / кг WS635 или 10 мг / кг CsA не приводила к значительному изменению скорости побега по сравнению с обработкой носителем ни в контрольных условиях (рис. 3В), ни в условиях анестезии / хирургического вмешательства (рис. 3D) у мышей. . Эти данные предполагают, что WS635 существенно не изменял двигательную активность мышей.

Рисунок 3 . Влияние WS635, CsA и анестезии / хирургии на двигательную активность мышей. Влияние WS365 с 13,2 мг / кг и 26,4 мг / кг (A – C) и влияние WS365 с 52,8 мг / кг и CsA с 10 мг / кг (B – D) на скорость покидания лабиринта Барнса на дни обучения (7–10 дней после анестезии / операции) у мышей после контрольного состояния или анестезии / операции. N = 14–18 мышей в каждой группе.

WS635 Ослабляет когнитивные нарушения, вызванные анестезией / хирургическим вмешательством у мышей

Анестезия / операция увеличили латентность выхода из лабиринта Барнса в день тестирования по сравнению с контрольным условием (рис. 4A).Обработка 13,2 мг / кг или 26,4 мг / кг WS635 существенно не ослабляла вызванное анестезией / хирургическим вмешательством увеличение латентности побега (рис. 4A). Однако двухфакторный дисперсионный анализ показал значительное взаимодействие лечения (носитель, 52,8 мг / кг WS635 и CsA) и группы (контрольное состояние в сравнении с анестезией / хирургическим вмешательством) на латентность выхода из лабиринта Барнса в день тестирования ( F = 3,387, P = 0,038, рисунок 4B). В частности, обработка 52,8 мг / кг WS635 значительно ослабляла вызванное анестезией / хирургическим вмешательством увеличение латентности выхода из лабиринта Барнса в день тестирования (11 дней после анестезии / операции) по сравнению с носителем ( P = 0.037, рис. 4В).

Рисунок 4 . Влияние WS635, CsA и анестезии / хирургического вмешательства на когнитивные функции мышей, обнаруженных в лабиринте Барнса. (A) Эффекты WS635 с 13,2 мг / кг и 26,4 мг / кг на вызванные анестезией / хирургическим вмешательством изменения латентности побега в лабиринте Барнса в день тестирования (11 дней после анестезии / хирургического вмешательства) на мышах. (B) Влияние WS635 с 52,8 мг / кг и CsA на вызванные анестезией / хирургическим вмешательством изменения латентности побега в лабиринте Барнса в день тестирования (11 дней после анестезии / хирургического вмешательства) на мышах. N = 14–17 мышей в каждой группе. Использовался двухфакторный дисперсионный анализ с апостериорной коррекцией Бонферрони . * P <0,05. P Значения относятся к разнице между различными условиями задержки перехода. CsA, циклоспорин A.

Далее мы повторили исследование в ФТС. Анестезия / операция существенно не изменила время замораживания мышей в контекстном тесте (фиг. 5A) или тональном тесте (фиг. 5B) FCS на 8-й день после анестезии / хирургического вмешательства.Однако двухфакторный дисперсионный анализ показал значительное взаимодействие лечения (носитель против 52,8 мг / кг WS635) и группы (контрольное состояние против анестезии / хирургического вмешательства) в контекстном тесте ( F = 5,344, P = 0,024, Рисунок 5C) и тональный тест ( F = 4,137, P = 0,046, Рисунок 5D) FCS через 13 дней после анестезии / операции. В частности, анестезия / операция значительно сократила время замирания мышей в контексте ( P, = 0,038, рис. 5C) и тестах на тонус ( P = 0.009, фиг. 5D) FCS по сравнению с контрольным состоянием у мышей на 13 день после анестезии / операции. Обработка 52,8 мг / кг WS635 ослабляла вызванное анестезией / хирургическим вмешательством уменьшение времени замораживания в контексте ( P = 0,024, рис. 5C) и тоне ( P = 0,046, рис. 5D) тестов FCS. на 13 день после анестезии / операции по сравнению с носителем у мышей. Взятые вместе, данные свидетельствуют о том, что WS635 ослабляет когнитивные нарушения, вызванные анестезией / хирургическим вмешательством, у мышей дозозависимым образом.

Рисунок 5 . Влияние WS635 на вызванные анестезией / хирургическим вмешательством изменения когнитивной функции у мышей, обнаруженные в системе кондиционирования страха (FCS). Влияние WS365 (52,8 мг / кг) и носителя (ДМСО) на изменения времени замораживания, вызванные анестезией / хирургическим вмешательством, на контекст (A) и тон (B) тест FCS через 8 дней после анестезии /хирургия; и в контексте (C) и тон (D) тест FCS через 13 дней после анестезии / операции. N = 14–18 мышей в каждой группе. Использовался двухфакторный дисперсионный анализ с апостериорной коррекцией Бонферрони . * или ^# P <0,05; ** или ^## P <0,01. P Значения относятся к разнице между различными условиями по времени замораживания FCS. ДМСО, диметилсульфоксид; FCS, система кондиционирования страха.

WS635 ослабляет вызванное анестезией / хирургическим вмешательством снижение синаптических маркеров в тканях мозга мышей

Учитывая данные о том, что WS635 ослабляет когнитивные нарушения, вызванные анестезией / хирургическим вмешательством, мы спросили, может ли WS635 смягчить вызванное анестезией / хирургическим вмешательством снижение синаптических маркеров в тканях мозга мышей.Количественный анализ вестерн-блоттинга показал, что анестезия / хирургическое вмешательство вызвали видимое уменьшение количества PSD-95 как в гиппокампе (фиг. 6A), так и в коре головного мозга (фиг. 6C). Двусторонний дисперсионный анализ показал значимое взаимодействие лечения (носитель против WS635) и группы (контрольное состояние против анестезии / хирургического вмешательства) в отношении количества PSD-95 в гиппокампе ( F = 4,634, P = 0,044, фиг. 6B) и коры головного мозга ( F = 5,674, P = 0,027, рисунок 6D). В частности, WS635 смягчал вызванное анестезией / хирургическим вмешательством снижение количества PSD-95 в гиппокампе (Рисунок 6B) и коре головного мозга (Рисунок 6D).Количественный вестерн-блоттинг также показал, что WS635 смягчает вызванное анестезией / хирургическим вмешательством снижение количества синаптофизина в гиппокампе ( P = 0,091, граничная значимость, Рисунки 6E, F) и коре головного мозга ( P = 0,007, Рисунки 6G, H). . Учитывая, что молекулярные массы синаптофизина (38 кДа) и β-актина (42 кДа) близки, мы использовали два геля вместо одного из одних и тех же экспериментальных образцов с одинаковыми количествами нагрузки, выполняемыми одновременно, для представления полос синаптофизина и β-актина, соответственно, на рисунках 6E – G.Эти данные предполагают, что WS635 может ослаблять когнитивные нарушения, вызванные анестезией / хирургическим вмешательством, , посредством , смягчая сокращение синапсов, вызванное анестезией / хирургическим вмешательством.

Рисунок 6 . Влияние WS635 на вызванные анестезией / хирургическим вмешательством изменения количества постсинаптической плотности (PSD) -95 и синаптофизина в гиппокампе и коре головного мозга мышей. Влияние WS365 (52,8 мг / кг) и носителя (ДМСО) на вызванные анестезией / хирургическим вмешательством изменения количества PSD-95 в гиппокампе (A, B) и коре головного мозга (C, D) мыши на 13-е сутки после наркоза / операции.Влияние WS365 (52,8 мг / кг) и носителя (ДМСО) на вызванные анестезией / хирургическим вмешательством изменения количества синаптофизина в гиппокампе (E, F) и коре головного мозга (G, H) мышей на 13 день после наркоза / операции. N = 6 мышей в каждой группе * или ^# P <0,05; ** или ^## P <0,01; *** P <0,001. Использовался двусторонний дисперсионный анализ с апостериорным тестом (поправка Бонферрони). Значения P относятся к разнице между различными состояниями по количеству PSD-95 и синаптофизина.ДМСО, диметилсульфоксид.

Влияние WS635 на количество АТФ в мозге мыши после анестезии / операции

Анестезия / хирургическое вмешательство снижало количество АТФ в гиппокампе (рис. 7A) и коре головного мозга (рис. 7B) мышей. Двусторонний дисперсионный анализ показал значительное взаимодействие лечения (носитель против WS635) и группы (контрольное состояние против анестезии / хирургического вмешательства) на количество АТФ в гиппокампе (фигура 7A), но не в коре головного мозга (фигура 7B) мышей. Эти данные предполагают, что WS635 смягчает вызванное анестезией / хирургическим вмешательством снижение количества АТФ в гиппокампе мышей.

Рисунок 7 . Влияние WS635 на вызванные анестезией / хирургическим вмешательством изменения количества АТФ в гиппокампе и коре головного мозга мышей. Влияние WS365 (52,8 мг / кг) и носителя (ДМСО) на вызванные анестезией / хирургическим вмешательством изменения количества АТФ в гиппокампе (A) и коре головного мозга (B) мышей сразу после анестезии / хирургия. N = 6 мышей в каждой группе, * P <0,05; ** P <0,01. Использовался двусторонний дисперсионный анализ с апостериорным тестом (поправка Бонферрони). P Значения относятся к разнице между различными условиями по количеству АТФ. ДМСО, диметилсульфоксид.

Обсуждение

Это пилотное доклиническое исследование создало систему и изучило, может ли WS635, новое соединение и аналог CsA, быть вмешательством послеоперационного когнитивного нарушения у мышей. Выводы о том, что WS635 смягчил когнитивные нарушения, вызванные анестезией / хирургическим вмешательством, у мышей, предполагают, что нам следует провести больше исследований, чтобы определить, является ли WS635 эффективным средством лечения когнитивных нарушений у грызунов и PND у пациентов.

Мы впервые продемонстрировали, что WS635 не изменяет LORR мышей после различных концентраций изофлурана, севофлурана и десфлурана (рис. 1). WS635 существенно не изменил ни порог ноцицепции (рис. 2), ни скорость побега мышей (рис. 3). Эти данные предполагают, что WS635 не может существенно влиять на глубину анестезии и не может изменять двигательную активность или порог ноцицепции у мышей. Затем мы обнаружили, что обработка 13,2 мг / кг или 26.4 мг / кг WS635 не уменьшали вызванное анестезией / хирургическим вмешательством увеличение латентности побега у мышей, испытанных в лабиринте Барнса. Однако обработка 52,8 мг / кг WS635 ослабляла вызванное анестезией / хирургическим вмешательством увеличение латентности побега у мышей, испытанных в лабиринте Барнса (рис. 4). Эти данные предполагают, что WS635 может смягчать когнитивные нарушения, вызванные анестезией / хирургическим вмешательством, у мышей в зависимости от дозы. Более того, обработка 52,8 мг / кг WS635 смягчала вызванное анестезией / хирургическим вмешательством уменьшение времени замораживания мышей, испытанных в FCS (фиг. 5), дополнительно предполагая, что WS635 может лечить когнитивные нарушения, вызванные анестезией / хирургическим вмешательством, у мышей.Соответственно, обработка 52,8 мг / кг WS635 смягчала вызванное анестезией / хирургическим вмешательством снижение количества PSD-95 и синаптофизина в гиппокампе и коре головного мозга мышей (фиг. 6). Эти данные предполагают, что WS635 может смягчать когнитивные нарушения, вызванные анестезией / хирургическим вмешательством, путем ослабления синаптической потери, вызванной анестезией / хирургическим вмешательством. Необходимы дальнейшие исследования для проверки этой гипотезы.

На данный момент существует несколько исследований по изучению WS635. Единственное фармакокинетическое исследование WS635 было проведено на крысах и обезьянах для измерения количества WS635 в крови и печени после перорального или внутривенного введения WS635 (Hopkins et al., 2010). В настоящем исследовании создания системы на мышах мы использовали внутрибрюшинное (IP) введение WS635, потому что, как правило, пероральное или внутривенное введение сложнее, чем IP-введение мышам. Мы не проводили эксперимент по биодоступности в этом исследовании, подтверждающем концепцию. Однако данные о том, что IP-введение WS635 ослабляет вызванные анестезией / хирургическим вмешательством поведенческие и биохимические изменения, предполагают эффективность WS635 после IP-введения.Остается неизвестным, может ли WS635 достичь тканей мозга после введения. WS635 может ослабить влияние анестезии / хирургического вмешательства на когнитивные функции и количество АТФ и синаптических маркеров в мозге через мишень (и) в крови, периферической нервной системе или центральной нервной системе. Однако точная цель (и) WS635, например, центральная нервная система против периферической нервной системы против крови, в настоящее время остается неопределенной. Тем не менее, мы будем использовать установленную систему для дальнейшего изучения WS635, включая систематические фармакокинетические и механистические исследования, в будущем.

Интересно, что WS635 только смягчал вызванное анестезией / хирургическим вмешательством снижение количества АТФ в гиппокампе, но не в коре головного мозга мышей (рис. 7). Эти данные предполагают, что WS635 не может полностью регулировать митохондриальную функцию тканей мозга мышей. Таким образом, мы предполагаем, что WS635 может улучшить функцию митохондрий как периферических, так и мозговых тканей, что приведет к смягчению когнитивных нарушений, вызванных анестезией / хирургическим вмешательством. Необходимы дальнейшие исследования для определения цели действия WS635.

Не проводилось исследований, чтобы определить, может ли WS635 регулировать когнитивные функции у грызунов. Поэтому мы не можем сравнивать данные, полученные в текущем исследовании, и данные, полученные в результате предыдущих исследований. Однако предыдущие исследования показали, что идебенон может смягчить вызванное анестезией снижение количества АТФ в мозгу мышей и вызванное анестезией когнитивное нарушение у мышей (Zhang et al., 2020). Идебенон – синтетический аналог кофермента Q (Rauchova et al., 2008). Сообщалось, что идебенон может защищать функцию митохондрий (Orsucci et al., 2011; Erb et al., 2012; рассмотрено в Pfeffer et al., 2013). Идебенон может проникать через гематоэнцефалический барьер (Torii et al., 1985; Nagai et al., 1989). Эти данные предполагают, что важно определить, может ли WS635 преодолевать гематоэнцефалический барьер, и идентифицировать цель (периферические ткани по сравнению с тканями мозга) действия WS635.

Одно исследование показало, что кратковременное введение CsA может ослабить APOE4-опосредованное нейроваскулярное повреждение, включая нарушение гематоэнцефалического барьера, дисфункцию нейронов и нейродегенеративные изменения (Bell et al., 2012). Другое исследование демонстрирует, что потеря белка 1, связанного с рецепторами липопротеинов низкой плотности, приводит к разрушению гематоэнцефалического барьера, потере нейронов и когнитивным нарушениям через путь циклофилин А-матриксной металлопротеиназы-9 в эндотелии (Nikolakopoulo et al. ., 2021). Эти данные также подтверждают роль митохондрий и CsA в когнитивных нарушениях и нейродегенерации. Наши предыдущие исследования также продемонстрировали, что кратковременное введение CsA может ослабить вызванную анестезией митохондриальную дисфункцию и когнитивные нарушения in vitro, и у мышей (Zhang et al., 2012) и вызванное анестезией / хирургическим вмешательством снижение количества АТФ в головном мозге, увеличение латентного периода для приема пищи в тесте с закопанной пищей и уменьшение количества входов в новую руку у мышей в тесте лабиринта Y (Peng et al. , 2016). Эти результаты предполагают, что кратковременное введение CsA может быть многообещающим методом лечения послеоперационных когнитивных нарушений. Однако настоящее исследование сосредоточено только на создании системы для исследования WS635. Поэтому мы не изучали систематически эффекты CsA.Мы будем использовать установленную систему для сравнения эффектов CsA и WS635 в будущих доклинических исследованиях и потенциальных клинических исследованиях.

Не было никаких ссылок на дозировку WS635, которую мы могли бы использовать для определения эффектов WS635 на когнитивные функции у мышей. WS635 не является коммерчески доступным и был предоставлен исключительно компанией Waterstone Pharmaceuticals в рамках Соглашения о передаче материалов . После консультации с Waterstone Pharmaceuticals мы решили начать наши исследования с использованием WS635 с дозировкой 13.2, 26,4 и 52,8 мг / кг у мышей. Более низкая доза (13,2 и 26,4 мг / кг) WS635 не ослабляла изменений, вызванных анестезией / хирургическим вмешательством у мышей. Поэтому мы использовали 52,8 мг / кг WS635 в исследовании, которое ослабляло когнитивные нарушения, вызванные анестезией / хирургическим вмешательством, снижение АТФ и синаптическую потерю без смертности или явного аномального поведения, наблюдаемого у мышей.

В этом исследовании было несколько ограничений. Во-первых, у нас нет методов и технологий, чтобы определить, может ли WS635 преодолевать гематоэнцефалический барьер без анестезии / хирургического вмешательства.Следовательно, мы не знаем точных целей и механизмов, с помощью которых WS635 смягчает когнитивные нарушения, вызванные анестезией / хирургическим вмешательством, у мышей и снижение синаптических маркеров и АТФ в тканях мозга мышей. Во-вторых, мы провели различные поведенческие и биохимические тесты в разное время после анестезии / операции. Это время было выбрано на основе результатов наших предыдущих исследований (Yang et al., 2017) и того факта, что мы нацелены на dNCR (возникающие в течение 1–4 недель после анестезии / операции) в настоящем исследовании, что может привести к отсутствию эффектов. анестезии / хирургического вмешательства на более раннем этапе (например,г., 1–3 дня) когнитивная функция. Однако основной целью настоящего исследования было создание системы и доказательство концепции, согласно которой WS635 может смягчить когнитивные нарушения, вызванные анестезией / хирургическим вмешательством, у мышей. Мы будем использовать установленный подход для определения основного механизма и динамики WS635 в будущем. Наконец, мы не измеряли влияние WS635 на функцию печени, утечку гематоэнцефалического барьера, активацию микроглии, дегенерацию нейронов или аксонов, среди прочего, у мышей.Однако выполнение этих экспериментов займет много времени и значительно задержит публикацию текущих результатов, которые сосредоточены на создании системы и подтверждении концепции. Поэтому мы продолжим эти исследования в будущем.

В заключение, мы создали систему для изучения WS635 на мышах и обнаружили, что WS635 ослабляет когнитивные нарушения, вызванные анестезией / хирургическим вмешательством, в зависимости от дозы. Обработка WS635 ослабляла синаптическую потерю, вызванную анестезией / хирургическим вмешательством, и снижение количества АТФ в тканях мозга мышей.Эти результаты будут способствовать дальнейшему исследованию WS635, что в конечном итоге приведет к определению основного механизма и выявлению целевых вмешательств при ПНД у пациентов.

Заявление о доступности данных

Оригинальные материалы, представленные в исследовании, включены в статью, дальнейшие запросы можно направлять соответствующим авторам.

Заявление об этике

Исследование на животных было рассмотрено и одобрено Постоянным комитетом по животным при Массачусетской больнице общего профиля, Бостон, Массачусетс (протокол 2006N000219).

Авторские взносы

Схема эксперимента: YD, FL, YZ и ZX. Проведение экспериментов: JLin, FS и JLu. Анализ данных: JLin, FS, JLu и YD. Написание рукописи: JLin, YD и ZX.

Финансирование

Это исследование было поддержано исследовательским фондом от фармацевтической компании Waterstone (Ухань, Китай) до Массачусетской больницы общего профиля (Бостон, Массачусетс) через соглашение о передаче материалов . Фармацевтическая компания Waterstone не принимала участия в разработке, сборе, анализе, интерпретации данных, написании этой статьи или решении представить ее для публикации.YD, FL, YZ, JLu и ZX были поддержаны R01 AG041274 из Национального института здравоохранения, Бетесда, Мэриленд, США (для ZX).

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Благодарности

WS635 был предоставлен фармацевтической компанией Waterstone. Все эксперименты проводились в Массачусетской больнице общего профиля и Гарвардской медицинской школе, Чарлстаун, Массачусетс, США.

Список литературы

Белл Р. Д., Винклер Э. А., Сингх И., Сагаре А. П., Дин Р., Ву З. и др. (2012). Аполипопротеин E контролирует цереброваскулярную целостность через циклофилин A. Nature 485, 512–516. DOI: 10.1038 / nature11087

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бобардт, М., Чаттерджи, У., Лим, П., Гавлик, К., и Галлай, П. (2014). И ингибиторы циклофилина, и противовирусные препараты прямого действия предотвращают активацию PKR в клетках, инфицированных HCV. Откройте Virol. J. 8, 1–8. DOI: 10.2174 / 18743578010001