Иммуноглобулиновый комплексный препарат кип в Казани

Выберите районАвиастроительныйАзиноАзино-2ВахитовскийДербышкиКварталКировскийМосковскийПриволжскийСоветскийЦентрЮдиноКировский, ЮдиноНово-СавиновскийСоветский, ДербышкиСоветский, ЖК ВеснаСоветский, Константиновка

Выберите аптекуул.Фучика;д.82ул.Достоевского;д.53ул.Закиева;д.5ул.Галии Кайбицкой;д.3ул.Чистопольская;д.71, корп.Аул.Гарифа Ахунова;д.2ул.Гаврилова;д.40/2ул.Чистопольская;д.38ул.Юлиуса Фучика;д.64, корп.1ул.Карла Маркса;д.29/14 литер Бул.Кремлевская;д.23/17ул.Восстания;д.56ул.Нурсултана Назарбаева;д.21/64ул.Восстания;д.43ул.Карла Маркса;д.46ул.Ибрагимова проспект;д.19ул.Фрунзе;д.17ул.Татарстан;д.52ул.Победы проспект;д.152/33ул.Академика Парина;д.6ул.Кулахметова;д.25, к.2ул.Сибирский тракт;д.8пр-кт Хусаина Ямашева;д.91ул.Николая Ершова;д.56ул.Достоевского;д.66ул.Парковая;д.6ул.Ленинградская;д.22ул.Фатыха Амирхана;д.71ул.

Гвардейская;д.2/22ул.Белинского;д.5ул.Нурсултана Назарбаева;д.45ул.Горьковское шоссе;д.33ул.Копылова;д.18ул.Декабристов;д.117ул.Космонавтов;д.16ул.Академика Губкина;д.44ул.Волгоградская;д.1ул.Ломжинская;д.17ул.Мусина;д.68 Аул.Юлиуса Фучика;д.108ул.Дубравная;д.47ул.Академика Лаврентьева;д.22ул.Галии Кайбицкой;д.12ул.А.Глушко;д.16 Бул.Четаева;д.58 Бпр-кт Хусаина Ямашева;д.46/33пр-кт Победы;д.34ул.Мамадышский тракт;д.32пр-д.Оренбургский;д.138 Жул.Рихарда Зорге;д.58 Аул.Лейтенанта Красикова;д.5/34ул.Лейтенанта Красикова;д.8ул.Карбышева;д.12 Аул.Шмидта;д.8пр-кт Ямашева;д.17ул.Фатыха Амирхана;д.41 Аул.Баки Урманче;д.8ул.Чистопольская;д.11ул.Карбышева;д.48ул.Айдаров;д.8 Аул.Юлиуса Фучика;д.131пр-кт Ибрагимова;д.56ул.Мавлютова;д.45ул.Латышских Стрелков;д.4ул.Максимова;д.27ул.Батыршина;д.20 Аул.Голубятникова;д.5ул.Клары Цеткин, в/д;д.17ул.Рихарда Зорге;д.11 Бул.Хади Такташа;д.73ул.Кул Гали;д.32ул.Максимова;д.22/22ул.Сыртлановой;д.16ул.Рихарда Зорге;д.101ул.Аделя Кутуя;д.7ул.Сафиуллина;д.5ул.Зеленая; д. 85пр-кт Ямашева; д.97Оренбургский тракт;д.170ул.Даурская; д.12ул.Рихарда Зорге;д.66 пом.3ул. Мусина;д.29Татарстан ул, дом № 52Азата Аббасова ул,10Павлюхина ул, д.91 КазаньМоллФучика ул,108Адоратского ул, д.27Р.Зорге ул, д.67 Разведчика Ахмерова, 5Баумана ул зд.49/10 Аптека ПроломнаяДекабристов ул, д.131Пушкина ул, д № 5/43Даурская ул, дом № 21/9Победы пр-кт, д.139к.2Адоратского ул, д.2БВосстания ул, д.92А

КИП Иммуноглобулиновый комплексный препарат (лиофилизат для приготовления раствора для приема внутрь 300 мг 5 флакон ) Микроген НПО АО,г. Нижний Новгород Россия

08:00-22:00	ул. Гагарина, д. 1/Блюхера,д.10 8 800 755-00-03	795.00 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
8:00-21:00	Сыромолотова, 24 348-65-38, 347-55-06,	798. 20 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
07:30-23:00	ул. 8 Марта, д. 150 +7 (343) 377-72-22	800.30 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
ПН – ПТ 08:00 – 21:00 СБ – ВС 09:00 – 21:00	Академика Бардина 23 361-31-81	804.30 ₽ 27-08-2021 (086)
08:00-22:00	Викулова, 38а 242-24-89	812. 60 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
ПН – ПТ 08:00 – 22:00	Саввы Белых 1 361-31-81	814.90 ₽ 27-08-2021 (086)
08:00-22:00	Родонитовая, 27 (ортопедия 09:00 – 22:00 ) 218-59-89	821.40 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
ПН – ПТ 08:00 – 22:00 СБ – ВС 08:00 – 21:00	Баумана 1 331-22-77	822. 80 ₽ 27-08-2021 (086)
	Луначарского 74 361-31-81	823.10 ₽ 27-08-2021 (086)
08:00 – 21:00	Байкальская, 23 (343) 262-06-16	837.80 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
00:00-24:00	+7 (343) 289-00-30	851. 00 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
08:00-22:00	ул. Комсомольская, д. 6 +7 (343) 375-31-85	855.50 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
9:00-21:00	доставка осуществляется течении 4ч с момента подтвержд. зак 216-16-16	863.60 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
08:00-21:00	Гагарина, 6 (343) 375-84-74	863. 60 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
10:00-21:00	ул. Вильгельма де Геннина, д. 32 (воскресенье-выходный) +7 912 280-63-94 (смс/WhatsApp для запро	868.00 ₽ 26-08-2021 (ЦФИ)
08:00-22:00	проспект Ленина, д. 81 +7 (343) 301-55-70	883.80 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
08:00-21:00	ул. Щорса, д. 32 +7 (343) 346-58-27	885.00 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
08:00-21:00	Уральская, 61 369-48-08, 369-41-21	885.00 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
08:00-22:00	ул. Краснолесья, д. 14/2 (343) 345-91-11	888.00 ₽ 26-08-2021 (ЦФИ)
08:00-22:00	ул. Баумана, д. 1 +7 (343) 385-65-02	893.90 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
	ул.Уральская, д. 75 (круглосуточно) +7 (343) 289-00-00	909.00 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
08:00-21:00	Черноморский, 2 331-81-31	909.30 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
	ул. Грибоедова, д. 20 (круглосуточно) +7 (343) 289-00-00	935.00 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
	ул. Стахановская, д. 45 (режим работы круглосуточно) +7 (343) 289-00-00	945.00 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
	ул. 8 Марта, д. 118 (круглосуточно) +7 (343) 289-00-00	950.00 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
08:00-21:00	Верхняя Пышма, ул. Успенский проспект, д. 127а +7 (34368) 5-26-81	958.80 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
	проспект Ленина, д. 24 +7 (343) 289-00-00	961.00 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
ПН – ВС 08:00 – 21:00	Индустрии 57/1 290-21-38	969.00 ₽ 26-08-2021 (086)
08:00-21:00	Индустрии, 57/1 (343) 290-21-38	969. 00 ₽ 26-08-2021 (ЦФИ)
8:00-21:00	Заводская, 17 231-50-06,	969.60 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
08:00-22:00	ул. Репина, д. 52 +7 (343) 289-20-00	970.00 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
09:00-21:00	ул. Грибоедова, д. 12 +7 (343) 263-81-62	995.00 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
07:00-23:00	Родонитовая, 3/1 381-27-56	998.00 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
09:00-21:00	ул. Библиотечная, д. 43 (предварительное бронирование) (в Екатеринбурге, за исключением удаленных микрорайонов БЕСПЛАТНО при заказе на сумму от 800 ру +7 (343) 214-46-46	1,004. 50 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
8:00-21:00	г. Заречный, ул.Таховская, д. 4 (предварительное бронирование) +7 (34377) 7-27-35	1,004.50 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
8:00-18:00	ул. Суворовский, д. 5б +7 (343) 338-16-86	1,004.50 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
8:00-21:00	Березовский, Косых, 5 8 (34369) 4-75-40	1,004. 50 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
08:00-21:00	ул. Чкалова, д. 124 (предварительное бронирование, возможна доставка) (Доставка в Екатеринбурге, за исключением удаленных микрорайонов БЕСПЛАТНО при з 8 800 200-05-00	1,004.50 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
08:00-18:00	ул. Старых большевиков, д. 9 (ЦГБ №23, центральный вход поликлиники, 2-ой этаж, Предварительное бронирование.) (Выходной: СБ,ВС ) (343) 380-21-51	1,019. 50 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
08:00-17:00	Волгоградская, 185 (ОКБ №1) (343) 383-14-78	1,019.50 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
08:00-22:00	ул. Баумана, д.47 (Широкий ассортимент лекарст.препаратов, сопутс.товаров и лечебной косметики, скидки по дисконт.картам.) +7 (343) 289-00-00	1,040.00 ₽ 27-08-2021 (ЦФИ)
8:00 – 23:00	ул. Рябинина, д. 21 (Детское питание, товары для детей ) +7 (343) 3284648	1,077.00 ₽ 25-08-2021 (ЦФИ)

КОМПЛЕКСНЫЙ ИММУНОГЛОБУЛИНОВЫЙ ПРЕПАРАТ В ТЕРАПИИ КОКЛЮША У ДЕТЕЙ РАННЕГО ВОЗРАСТА | Новикова

1. Борисова О.Ю., Петрова М.С., Мазурова И.К., Лыткина И.Н., Попова О.П, ГадуаН.Т., Мерцалова Н.У, Захарова Н.С., Пяева А.П., Салова Н.Я, Требунских И.П, Комбарова С.Ю., Шинкарев А.С., Скачкова В.Г., Савинкова В.С., Алешкин В.А. Особенности коклюшной инфекции в различные периоды эпидемического процесса в г. Москве. Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2010, 4: 33-39.

2. Грачева Н.М., Малышев Н.А., Петрова М.С., Попова О.П., Крючкова П.С., Келли Е.И., Абрамова Е.Н. Коклюш (клиника, диагностика, лечение). Методические рекомендации. М„ 2009.

3. Иммунобиологические препараты и перспективы их применения в инфектологии. Под ред. Г.Г. Онищенко, В.ААлешкина, С.С.Афанасьева, В.В. Поспеловой. М., ГОУ ВУНМЦ М3 РФ, 2002.

4. Петрова М.С., Попова О.П., Звонарева С.В., Маркелов В.П., ВернадскаяТ.А. Коклюш: современные клинико-эпидемиологические аспекты и новые подходы ктерапии. Новые лекарственные препараты. 2001, 3: 13-28.

5. Петрова М.С., Попова О.П., Борисова О.Ю., Абрамова Е.Н., Вартанян Р.В., Келли Е.И. Коклюш у детей раннего возраста. Эпидемиология и инфекционные болезни. 2012, 6: 19-24.

6. Руководство по медицинской микробиологии. Частная медицинская микробиолоия и этиологическая диагностика инфекций. Книга И. Под ред. А.С. Лабинской, Н.Н. Костюковой, С.М. Ивановой. М., БИНОМ, 2012.

7. Семенов Б.Ф., Захарова Н.С., Мазурова И.К. Подъем заболеваемости коклюшем на фоне массовой вакцинации. Гипотезы, объясняющие этот феномен. Журн. микробиол. 2003, 6: 70-73.

Комплексный иммуноглобулиновый препарат (КИП) — Лекарства — Справочники — Медицинский портал «МЕД-инфо»

ИММУНОГЛОБУЛИНОВЫЙ КОМПЛЕКСНЫЙ ПРЕПАРАТ

Фармакологическое действие

Представляет собой лиофилизированный белковый раствор, содержащий иммуноглобулины классов IgG, IgA, IgM, выделенные из плазмы крови человека, проверенной на отсутствие антител к вирусу иммунодефицита человека ВИЧ-1 и ВИЧ-2, антител к вирусу гепатита С (HCV) и поверхностному антигену вируса гепатита В (HBsAg). Технология получения препарата предусматривает 2 специальные стадии инактивации возможно присутствующих вирусов.

Действующим началом препарата являются иммунологически активная фракция белков сыворотки крови человека, содержащая иммуноглобулины классов G, А, М. Иммуноглобулины имеют высокий титр антител против широкого спектра вирусов и бактерий одной специфичности, но различного класса, что обеспечивает эффективное лечебное действие препарата.

После перорального применения препарат оказывает местное действие в просвете тонкого и толстого кишечника, блокируя рецепторы микробных клеток, тем самым уменьшая адсорбцию микробов на клетках эпителия слизистой кишечника и угнетая размножение адсорбированных микробных клеток, ослабляя или предотвращая развитие инфекционного процесса.

Фармакокинетика

Иммуноглобулины и их фрагменты, сохранившие серологическую активность, обнаруживаются как в содержимом тостого кишечника, так и в копрофильтратax в течение нескольких суток после орального введения препарата.

Показания к применению препарата ИММУНОГЛОБУЛИНОВЫЙ КОМПЛЕКСНЫЙ ПРЕПАРАТ

— лечение вирусных и бактериальных кишечных инфекций у детей с 1 месяца и взрослых.

Режим дозирования

После вскрытия во флакон добавляют 5 мл (1/2 столовой ложки) кипяченой воды комнатной температуры. Препарат растворяют при легком встряхивании.

Применяют внутрь по 1-2 дозе 2-3сут.сут. в зависимости от возраста пациента и тяжести заболевания за 30 мин до еды в течение 5 сут. При необходимости курс лечения повторяют.

Препарат нельзя применять при отсутствии на флаконе этикетки или неполных сведений на ней и при наличии трещин на флаконах.

Побочное действие

Возможны аллергические реакции в виде сыпи. В этом случае прием препарата продолжают на фоне антигистаминных средств.

Противопоказания к применению препарата ИММУНОГЛОБУЛИНОВЫЙ КОМПЛЕКСНЫЙ ПРЕПАРАТ

— наличие в анамнезе указания на аллергические реакции на иммуноглобулины человека.

Применение у детей в возрасте до 12 лет

Применяется по показаниям у детей с 1 месяца.

Передозировка

Не описана.

Лекарственное взаимодействие

Применение препарата возможно в комплексе с антибиотиками, другими химиотерапевтическими средствами и бактериофагами.

Условия отпуска из аптек

Препарат отпускается по рецепту.

Условия и сроки хранения

Препарат хранят и транспортируют при температуре от 2° до 8°С. Хранят в местах, недоступных для детей. Срок годности – 3 года. Не использовать по истечении срока годности.

Фармакологическое действие

Представляет собой лиофилизированный белковый раствор, содержащий иммуноглобулины классов IgG, IgA, IgM, выделенные из плазмы крови человека, проверенной на отсутствие антител к вирусу иммунодефицита человека ВИЧ-1 и ВИЧ-2, антител к вирусу гепатита С (HCV) и поверхностному антигену вируса гепатита В (HBsAg). Технология получения препарата предусматривает 2 специальные стадии инактивации возможно присутствующих вирусов.

Действующим началом препарата являются иммунологически активная фракция белков сыворотки крови человека, содержащая иммуноглобулины классов G, А, М. Иммуноглобулины имеют высокий титр антител против широкого спектра вирусов и бактерий одной специфичности, но различного класса, что обеспечивает эффективное лечебное действие препарата.

После перорального применения препарат оказывает местное действие в просвете тонкого и толстого кишечника, блокируя рецепторы микробных клеток, тем самым уменьшая адсорбцию микробов на клетках эпителия слизистой кишечника и угнетая размножение адсорбированных микробных клеток, ослабляя или предотвращая развитие инфекционного процесса.

Фармакокинетика

Иммуноглобулины и их фрагменты, сохранившие серологическую активность, обнаруживаются как в содержимом тостого кишечника, так и в копрофильтратax в течение нескольких суток после орального введения препарата.

Показания

— лечение вирусных и бактериальных кишечных инфекций у детей с 1 месяца и взрослых.

Режим дозирования

После вскрытия во флакон добавляют 5 мл (1/2 столовой ложки) кипяченой воды комнатной температуры. Препарат растворяют при легком встряхивании.

Применяют внутрь по 1-2 дозе 2-3сут.сут. в зависимости от возраста пациента и тяжести заболевания за 30 мин до еды в течение 5 сут. При необходимости курс лечения повторяют.

Препарат нельзя применять при отсутствии на флаконе этикетки или неполных сведений на ней и при наличии трещин на флаконах.

Побочное действие

Возможны аллергические реакции в виде сыпи. В этом случае прием препарата продолжают на фоне антигистаминных средств.

Противопоказания

— наличие в анамнезе указания на аллергические реакции на иммуноглобулины человека.

Применение у детей в возрасте до 12 лет

Применяется по показаниям у детей с 1 месяца.

Передозировка

Не описана.

Лекарственное взаимодействие

Применение препарата возможно в комплексе с антибиотиками, другими химиотерапевтическими средствами и бактериофагами.

Условия отпуска из аптек

Препарат отпускается по рецепту.

Условия и сроки хранения

Препарат хранят и транспортируют при температуре от 2° до 8°С. Хранят в местах, недоступных для детей. Срок годности – 3 года. Не использовать по истечении срока годности.

Страница не найдена | Ліки-Інфо

ДОСТАВКА ТОВАРА ПО ВСЕЙ УКРАИНЕ

Авдеевка, Александрия, Александровск, Алмазная, Алупка, Алушта, Алчевск, Амвросиевка, Ананьев, Андрушёвка, Антрацит, Апостолово, Армянск, Артёмово, Артёмовск, Артёмовск, Арциз, Ахтырка, Балаклея, Балта, Бар, Барановка, Барвенково, Батурин, Бахмач, Бахчисарай, Баштанка, Белая Церковь, Белгород, Белз, Белицкое, Белогорск, Белозёрское, Белополье, Беляевка, Бердичев, Бердянск, Берегово, Бережаны, Березань, Березно, Березо́вка, Берестечко, Берислав, Бершадь, Бобринец, Бобрка, Бобровица, Богодухов, Богуслав, Болград, Болехов, Борзна, Борислав, Борисполь, Борщёв, Боярка, Бровары, Броды, Брянка, Бурштын, Бурынь, Буск, Буча, Бучач, Валки, Васильевка, Васильков, Ватутино, Вахрушево, Вашковцы, Великие Мосты, Верхнеднепровск, Верховцево, Вижница, Вилково, Винники, Винница, Виноградов, Вишнёвое, Владимир, Вознесенск, Волноваха, Волочиск, Волчанск, Вольногорск, Вольнянск, Ворожба, Вышгород, Гадяч, Гайворон, Гайсин, Галич, Геническ, Герца, Глобино, Глухов, Глиняны, Гнивань, Голая Пристань, Горловка, Горное, Горняк, Городенка, Городище, Городня, Городок, Городок, Горохов, Гребёнка, Гуляйполе, Дебальцево, Деражня, Дергачи, Джанкой, Дзержинск, Димитров, Днепродзержинск, Днепропетровск, Днепрорудное, Добромиль, Доброполье, Докучаевск, Долина, Долинская, Донецк, Дрогобыч, Дружба, Дружковка, Дубляны, Дубно, Дубровица, Дунаевцы, Евпатория, Енакиево, Жашков, Ждановка, Жёлтые Воды, Жидачов, Житомир, Жмеринка, Жолква, Залещики, Запорожье, Заставна, Збараж, Зборов, Звенигородка, Здолбунов, Зеленодольск, Зеньков, Зимогорье, Змиёв, Знаменка, Золотое, Золотоноша, Золочев, Зоринск, Зугрэс, Ивано, Измаил, Изюм, Изяслав, Иловайск, Ильинцы, Ильичёвск, Инкерман, Ирмино, Ирпень, Иршава, Ичня, Кагарлык, Казатин, Калиновка, Калуш, Каменец, Каменка, Каменка, Каменка, Камень, Канев, Карловка, Каховка, Керчь, Киверцы, Киев, Килия, Кировоград, Кировское, Кицмань, Кобеляки, Ковель, Кодыма, Коломыя, Комсомольск, Конотоп, Константиновка, Корец, Коростень, Коростышев, Корсунь, Корюковка, Косов, Костополь, Котовск, Краматорск, Красилов, Красноармейск, Красноград, Краснодон, Краснопартизанск, Красноперекопск, Красный Лиман, Красный Луч, Кременец, Кременчуг, Кривой Рог, Кролевец, Кузнецовск, Купянск, Ладыжин, Лановцы, Лебедин, Лисичанск, Лозовая, Лохвица, Лубны, Луганск, Лутугино, Луцк, Львов, Любомль, Люботин, Малин, Марганец, Мариуполь, Макеевка, Малая Виска, Мелитополь, Мена, Мерефа, Миргород, Мироновка, Миусинск, Могилёв, Молодогвардейск, Молочанск, Монастыриска, Монастырище, Мостиска, Мукачево, Надворная, Николаев, Николаев, Никополь, Нежин, Немиров, Нетешин, Новая Каховка, Новая Одесса, Новый Буг, Новоазовск, Нововолынск, Новгород, Новогродовка, Новомиргород, Новоград, Новодружеск, Новоднестровск, Новомосковск, Новопсков, Новоселица, Новоукраинка, Новый Роздол, Носовка, Обухов, Овруч, Одесса, Орджоникидзе, Орехов, Острог, Очаков, Павлоград, Первомайск, Первомайск, Первомайский, Перевальск, Перемышляны, Перечин, Перещепино, Переяслав, Першотравенск, Петровское, Пирятин, Погребище, Подволочиск, Подгайцы, Подгородное, Пологи, Полонное, Полтава, Попасная, Почаев, Приволье, Прилуки, Приморск, Припять, Пустомыты, Путивль, Пятихатки, Рава, Радехов, Радомышль, Радивилов, Рахов, Ржищев, Рогатин, Ровеньки, Ровно, Рожище, Ромны, Рубежное, Рудки, Саки, Самбор, Сарны, Свалява, Сватово, Свердловск, Светловодск, Севастополь, Северодонецк, Седнев, Селидово, Семёновка, Середина, Симферополь, Синельниково, Скадовск, Скалат, Сквира, Сколе, Славута, Славутич, Славянск, Смела, Снежное, Снигирёвка, Снятын, Сокаль, Сокиряны, Соледар, Старобельск, Староконстантинов, Старый Крым, Старый Самбор, Стаханов, Сторожинец, Стрый, Судак, Сумы, Суходольск, Счастье, Таврийск, Тальное, Тараща, Татарбунары, Теплодар, Тернополь, Терновка, Тетиев, Тысменица, Тлумач, Теребовля, Тростянец, Трускавец, Токмак, Торез, Тульчин, Тячев, Угледар, Угнев, Узин, Украинка, Ужгород, Умань, Устилуг, Фастов, Феодосия, Харцызск, Харьков, Херсон, Хмельник, Хмельницкий, Хорол, Хотин, Христиновка, Хуст, Хыров, Цюрупинск, Червоноград, Червонозаводское, Червонопартизанск, Черкассы, Чернигов, Чернобыль, Черновцы, Чигирин, Чоп, Чортков, Чугуев, Шаргород, Шахтёрск, Шепетовка, Шостка, Шпола, Шумск, Щёлкино, Щорс, Энергодар, Южное, Южноукраинск, Яворов, Яготин, Ялта, Ямполь, Яремче, Ясиноватая

В России началось производство нового препарата от COVID на основе плазмы :: Общество :: РБК

В России началось производство иммуноглобулина к коронавирусу на основе плазмы крови переболевших людей. Об этом сообщил министр здравоохранения России Михаил Мурашко в интервью «РИА Новости» на площадке Петербургского международного экономического форума (ПМЭФ).

«Это антиковидный иммуноглобулин — это уже высококонцентрированный препарат, который позволяет нейтрализовать вирус, и он, конечно, является наиболее приоритетным в сравнении с антиковидной плазмой», — пояснил министр.

Мурашко указал на необходимость наращивать производство препарата и добавил, что для этого обязательно потребуется плазма.

По словам министра, монотерапия не всегда дает необходимый эффект, поэтому врачи выбирают в том числе комбинацию, и сейчас появились данные о сочетании плазмы крови с противовирусными препаратами.

Правительство продлит регистрационные удостоверения лекарств от COVID-19

Минздрав России 1 апреля зарегистрировал первый в мире иммуноглобулин «Ковид-глобулин», предназначенный для лечения новой коронавирусной инфекции.

Иммуноглобулины. Экстренная помощь организму

Люди по природе своей весьма беспечны. Гром не грянет, мужик не перекрестится. Мало кто из нас, выезжая летом на природу, думает о том, чтобы сделать прививку против клещевого энцефалита. Ценой такой беспечности может стать потерянное здоровье или даже жизнь. К счастью, средство экстренной помощи найдено, это — препараты иммуноглобулина.

Природа иммуноглобулинов

Не секрет, что справляться с вирусами и микробами нам позволяет наша иммунная система. Помогают ей в этом совершенно особые иммунные молекулы – иммуноглобулины (антитела). Иммунная система идентифицирует антиген и подбирает для его нейтрализации соответствующие иммуноглобулины, уникальные по своей структуре, строению и функциям.

При этом, в отличие от других противомикробных и противовирусных препаратов с их общим воздействием на организм, иммуноглобулины можно сравнить со снайперской винтовкой. Они действуют прицельно и строго избирательно. Сколько существует различных микробов, токсинов или вирусов, столько же и разных антител уникального строения.

Классы антител

По своему строению и функциям иммуноглобулины делятся на пять классов – G(IgG), M(IgM), E(IgE), A(IgA), D(IgD).

IgG

Один из самых хорошо изученных классов. Он же является и самым многочисленным — в сыворотке крови содержание иммуноглобулина IgG доходит до 75% от всей фракции антетел. Играет главную роль в обеспечении длительного гуморального (существующего в жидких средах) иммунитета при инфекционных и вирусных заболеваниях.Обладает функцией антитоксического и антиаллергического действий. Благодаря своим малым размерам может преодолевать плацентарный барьер, защищая ребенка внутриутробно.

IgM

Начинает вырабатываться практически сразу после попадания антигена в организм, являясь первой линией защиты от инфекции. Составляет около 10% от общего числа антител. Иммуноглобулины класса IgM являются наиболее крупными среди прочих антител, вследствие чего не способны во время беременности преодолевать плацентарный барьер.

IgA

Антитела класса IgA хотя и уступают иммуноглобулинам IgG в количестве (15-20% от всех антител), тем не менее, играют не последнюю роль в формировании иммунитета. Их функция — защитить слизистые оболочки дыхательных путей, ротовой и носовой полости, глазных век, пищеварительной системы от инфекционных возбудителей, поэтому антитела IgA еще называют секреторными.

IgE

IgE, синтезируемый в клетках слизистых оболочек и лимфатических узлах, приходит на помощь иммуноглобулину IgA в случае прорыва обороны последнего. В результате присоединения IgE к антигену происходит выброс гистамина и серотонина. Как следствие, – аллергическая реакция со всеми ей присущими проявлениями (отек, зуд, высыпания).

Помимо участия в аллергических реакциях, IgE принимает участие в защитном иммунитете против гельминтов, что обусловлено существованием перекрестного связывания между IgE и антигеном паразитов. В норме Иммуноглобулин IgE в крови практически отсутствует.

IgD

Является самым малоизученным классом иммуноглобулинов. В норме его концентрация в крови крайне мала (менее 1% от общего количества антител). Вопрос о конкретной функции IgD в иммунных процессах остается открытым. Предположительно, IgD участвует в «специализации» лимфоцитов, направляя их против антигенов.

Применение

Клещевой энцефалит, столбняк, стафилококковые инфекции – долгое время эти заболевания считались трудно поддающимися лечению, и даже больше — смертельными. Ценой больших усилий микробиологов и иммунологов, найдено средство для подавления вирусов, их вызывающих.

В основу препаратов для лечения и проведения профилактических прививок заложен иммуноглобулин. Антитела входят в состав профилактических прививок против гриппа, кори, краснухи, клещевого энцефалита, столбняка, эпидемического паротита.

Разработаны лекарственные препараты на основе иммуноглобулинов против таких наиболее опасных инфекций, как коклюш, грипп, дизентерия, эпидемический паротит, корь, столбняк, оспа, скарлатина, вирус клещевого энцефалита и даже сибирская язва. И хотя цена на такие препараты довольно высокая, интерес к ним со стороны населения повышен. Рассмотрим наиболее востребованные препараты.

Иммуноглобулин антирезусный

Резус-фактор — наличие (положительный) или отсутствие (отрицательный) на поверхности эритроцитов антигена IgD. Положительный резус у ребенка в сочетании с отрицательным резусом у матери могут приводить к такой патологии, как резус-конфликт. На поздних сроках беременности иммуноглобулин может начать вырабатываться против эритроцитов плода. При тяжелом течении беременности вероятность возникновения резус-конфликта увеличивается. Патология может привести к разрушению эритроцитов у плода и, как следствие, к кислородному голоданию (гипоксии), нарушению обменных процессов, задержке внутриутробного развития.

Резус-конфликт может стать причиной выкидыша или преждевременных родов. Для профилактики подобных осложнений врачом может быть назначен анти-д-иммуноглобулин. На данный препарат цена достаточно высокая, однако в данном случае экономить не стоит. Ведь речь идет о здоровье будущей мамы и ее ребенка.

Иммуноглобулин противоаллергический

Противоаллергический иммуноглобулин получают методом фракционирования этиловым спиртом из плазмы крови здоровых доноров IgG, оказывающего выраженное противоаллергическое действие. Противоаллергические антитела  предназначены для комплексного лечения таких аллергических заболеваний, как поллинозы, нейродермит, астма, экземы, дермореспираторный синдром, применяется в качестве экстренной помощи при отеке Квинке. Как ни парадоксально звучит, но иммуноглобулин противоаллергический может вызвать сильнейшую аллергию на входящие в состав компоненты крови. Цена вопроса – собственное здоровье, поэтому назначение препарата должно осуществляться только врачом.

Иммуноглобулин человека против клещевого энцефалита

Противоклещевой иммуноглобулин является экстренной защитой против клещевого энцефалита. Представляет собой концентрированные антитела к вирусу клещевого энцефалита. Получают его из плазмы или сыворотки доноров, предварительно получивших прививку против клещевого энцефалита. С этим связана его высокая цена, а также наличие побочных эффектов. Самостоятельно назначать себе иммуноглобулин для лечения клещевого энцефалита не стоит, обратитесь к инфекционисту.

Исходя из опыта применения и оценки специалистов, введение иммуноглобулина в качестве средства защиты против клещевого энцефалита не является заменой полноценной профилактической вакцинации в соответствии с календарем прививок, так как сформированный иммунитет будет менее длительным, и не таким надежным.

Иммуноглобулин человека нормальный

Иммуноглобулин получают методом фракционирования этиловым спиртом из плазмы крови здоровых доноров иммуноглобулина IgG, активного по отношению к стафилококковому токсину. Иммуноглобулин предназначен для комплексного лечения заболеваний стафилококковой этиологии у детей и взрослых. Инструкция по применению препарата описывает, что, в зависимости от тяжести заболевания, препарат вводят внутримышечно ежедневно или через день. По отзывам фармацевтов, цена на препарат отечественного производства существенно ниже, чем цена на аналог зарубежного производства.

Лечение антителами проводится только под контролем лечащего врача. К лекарственным средствам, содержащим иммуноглобулин, в обязательном порядке должна прилагаться инструкция по применению. Цена на данный класс препаратов зависит от производителя лекарственного средства, формы выпуска и других характеристик.

Анализ крови

Анализ на иммуноглобулин — это комплексное исследование всей иммунной системы человека, направленное на выявление различных заболеваний. Лаборатории используют разные виды оборудования и применяют разные методы исследований. Поэтому референсные значения нормы в лабораториях будут отличаться. Отличаются, соответственно, и цены на исследования. Рассмотрим наиболее популярные исследования.

• Общий иммуноглобулин IgE. В норме общий IgE в крови практически отсутствует. Если уровень общих иммуноглобулинов класса IgE повышен, значит можно говорить об атопии (врожденной склонности организма к аллергическим заболеваниям), а также возможном заражении паразитами. При любых отклонениях общего IgE от нормы (повышен, понижен) требуется консультация аллерголога-иммунолога.
• Иммуноглобулин IgE. Выполняется аллергоскрининг — определение уровня специфических иммуноглобулинов IgE против трех видов аллергенов: бытовые, пыльцевые и пищевые комплексы. У каждого комплекса разные панели аллергенов и, соответственно, разные цены. На выбранную панель аллергенов проводится отдельное исследование. У больных аллергическими заболеваниями уровень специфических иммуноглобулинов IgE резко повышен.
• Иммуноглобулин IgG. По уровню антител класса IgG в сыворотке крови можно судить о наличии или отсутствии иммунитета на перенесенное заболевание, а также об эффективности сделанной прививки. Анализ на антитела IgG к туберкулезу может служить альтернативой пробе Манту.
• Иммуноглобулин IgM. Уровень антител класса IgM может быть повышен при таких острых инфекционных заболеваниях, как цитомегаловирусная инфекция, вирус Эпштейн-Барра и др. Если IgM повышен на фоне снижения  IgG , IgA, IgEможно говорить о первичном иммунодефиците.
• Иммуноглобулин IgA. Нормальное количество IgA – 10-15% от общего числа иммуноглобулинов. Уровень может быть повышен при таких аутоиммунных заболеваниях, как ревматоидный артрит, аутоиммунный тиреоидит, системная красная волчанка и др.

Заключение

Роль иммуноглобулинов в лечении острых и хронических воспалительных заболеваний переоценить невозможно. Клещевой энцефалит, инвалидность и смертность от которого достигала 30%, перестал быть приговором. Противоаллергический иммуноглобулин возвращает аллергиков к полноценной жизни, а антирезусный иммуноглобулин помогает женщине в ее стремлении любой ценой стать мамой.

продукция, механизмы действия и рецептуры

Rev Bras Hematol Hemoter. 2011; 33 (5): 377–382.

Служба гемотерапии, Instituto do Câncer do Estado de São Paulo – ICESP, Сан-Паулу, SP, Бразилия

Автор, ответственный за переписку: Marcia Cristina Zago Novaretti Serviço de Hemoterapia do Instituto do Câncer do Estado de São Paulo (ICESP) Av. Doutor Arnaldo 251, Cerqueira César 01246-000 – Сан-Паулу, SP, Бразилия Телефон: 55 11 3893-2000 moc.oohay@zrbaticram

Получено 3 февраля 2011 г .; Принята в печать 23 марта 2011 г.

Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями некоммерческой лицензии Creative Commons Attribution, которая разрешает неограниченное некоммерческое использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии правильного цитирования оригинальной работы.

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Реферат

Человеческий иммуноглобулин (Ig) начал применяться в клинической практике при лечении первичных иммунодефицитов. Применение Ig быстро увеличилось, поскольку выяснились его противовоспалительные и иммуномодулирующие функции.В настоящее время Ig является наиболее часто используемым продуктом крови. Ig получают обработкой плазмы; Методы, в частности методы снижения вирусной нагрузки в плазме, развивались на протяжении многих лет и включают: пастеризацию, обработку растворителем / детергентом, обработку каприловой кислотой и нанофильтрацию. Эти методы способствуют повышению безопасности и качества продуктов крови. Механизмы действия Ig включают не только блокаду Fc-рецепторов фагоцитов, но также контролируют пути комплемента, образование димера идиотип-антиидиотип, блокирование связывания суперантигена с Т-клетками, ингибирование дендритных клеток и стимуляцию регуляторных Т-клеток ( Трэги).Доступно несколько форм иммуноглобулина, каждый из которых имеет свои особенности. В Бразилии существует строгое законодательство, регулирующее качество Ig. К использованию допускаются только продукты Ig, которые полностью соответствуют критериям контроля качества. Эти стандарты включают различные тесты, от визуального осмотра до определения антикомплементарной активности. В этой статье мы дополнительно рассмотрим историю и текущее состояние Ig, включая его производство и механизмы действия. Будут представлены рецептуры, доступные в Бразилии, а также критерии контроля качества, применяемые в настоящее время.

Ключевые слова: Иммуноглобулины, внутривенное / терапевтическое применение; Иммуноглобулины, внутривенные / фармакокинетика; Плазма; Гемодеридные препараты; Иммуноглобулины; Антитела; Иммунная система

Введение

В 1890 году фон Беринг и Китасато доказали, что сыворотка кроликов, иммунизированных столбнячным токсином, обладала активностью против «яда столбняка» и, таким образом, когда эта сыворотка была передана здоровым кроликам, она защитила их от столбняка. ⁽¹⁾ Это было первое из многих исследований, которые показали, что многие заболевания можно предотвратить или лечить с помощью сыворотки как животных, так и человека.

В начале Второй мировой войны Кон и его коллеги разработали методы, которые позволили разделить белки плазмы на стабильные отдельные фракции с различными биологическими функциями. ^(2,3) Такие методы были усовершенствованы и применяются до сих пор для приготовления продуктов крови. Эти методы позволяют получать иммуноглобулин человека (Ig).

В 1952 году Ig начали успешно применяться у пациентов с первичными иммунодефицитами. Однако внутримышечный Ig вызывал некоторые недостатки, такие как боль во время инфузии и долгое время для достижения пиковых уровней в сыворотке. ⁽⁴⁾ В 1960 году был выпущен первый Ig для внутривенного введения, полученный обработкой плазмы трипсином. С тех пор были разработаны различные лабораторные стратегии для получения более безопасных, эффективных и хорошо переносимых продуктов крови.

Ig впервые был использован при лечении первичных иммунодефицитов; Показания к его применению значительно увеличились за последние 30 лет. Таким образом, Ig стал основным или вспомогательным средством лечения различных аутоиммунных и воспалительных заболеваний из-за его иммуномодулирующих и противовоспалительных свойств.

Были проблемы с мировым предложением Ig в конце 1990-х, когда спрос превышал предложение на 30%, и было трудно производить производные крови в Великобритании, ведущем поставщике Ig. Более того, увеличилось количество четко установленных клинических показаний и клинических показаний, которые не были полностью основаны на доказательствах. ⁽⁵⁾ В Бразилии годовое потребление оценивается от 500 кг до 1 тонны, что эквивалентно от 0,3 до 0,6 кг на 100 000 жителей в год.Чтобы удовлетворить этот спрос, Бразилия импортирует более 90% человеческого иммуноглобулина. ⁽⁶⁾

Методы производства и безопасность

Ig – это стерильный препарат концентрированных антител (иммуноглобулинов), которые получают из больших пулов плазмы человека от здоровых доноров. Хотя использование больших пулов плазмы для производства Ig дает множество антител, это увеличивает риск инфекций, будь то вирусных или прионных. Этот факт привел к неустанным поискам повышения безопасности Ig при сохранении переносимости этого продукта крови.

Производство Ig начинается с выбора доноров для сбора плазмы. Из этого факта можно сделать вывод, что составы Ig не равны, поскольку они зависят от состава антител в популяции доноров, который варьируется в зависимости от существующих заболеваний в этой популяции. Недавно был опубликован отчет, в котором говорилось, что уровни антител против гепатита А значительно различались в разных формах Ig. ⁽⁷⁾

Плазма, используемая для производства Ig, должна поступать от здоровых доноров крови с известной историей болезни и отсутствием известных факторов риска инфекционных заболеваний, передающихся через кровь. ⁽⁸⁾ Плазма может быть получена с помощью афереза ​​или от донорской цельной крови. Нет необходимости быстро замораживать плазму (менее чем через 24 часа после сбора), если она используется только для выработки Ig и альбумина.

Собранные единицы плазмы должны быть отрицательными для лабораторного скрининга вирусов иммунодефицита человека (ВИЧ) 1 и 2 и вирусов гепатита В и С. Следует использовать серологические методы, а также молекулярные (NAT) методы. В Бразилии плазма также должна быть отрицательной на сифилис, болезнь Шагаса и, в эндемичных районах, на малярию.

Процесс производства Ig включает стадии фракционирования и очистки плазмы. Существует два основных метода фракционирования плазмы. Первый включает осаждение плазмы этанолом, используемым в качестве нетоксичного осаждающего агента, а второй – хроматографический метод, в котором используются цилиндрические колонки, содержащие синтетические смолы, которые позволяют разделить белок. ⁽⁹⁾

Компании, производящие продукты крови, используют различные методы очистки плазмы и несколько одобренных методов удаления и инактивации вирусов. ^(10,11) В настоящее время используются по крайней мере три метода для производства Ig, чтобы улучшить переносимость и снизить риски передачи заболеваний.

Каждый этап обработки плазмы может вызывать изменения в ее белковой структуре и ее биологической активности. Как следствие, коммерческие препараты Ig различаются по переносимости, а также по эффективности. ⁽¹²⁾ Например, некоторые методы очистки, которые включают добавление химикатов или ферментов для инактивации вирусов или уменьшения образования агрегатов Ig, также могут изменять структуру и функцию Fc-фрагмента молекулы IgG. и, как следствие, снижение его биологической активности.

Методы, обычно используемые для снижения вирусной нагрузки: пастеризация, обработка растворителем / детергентом, обработка метиленовым синим, обработка каприловой кислотой и нанофильтрация. Из них каприловая кислота и методы растворителя / детергента эффективны против вирусов с оболочкой, в то время как нанофильтрация удаляет как вирусы с оболочкой, так и вирусы без оболочки (парвовирус B19 и гепатит A). ⁽¹³⁾ Существуют составы Ig, в которых три метода предназначены для удаления патогенов: обработка растворителем / детергентом, 35-нм нанофильтрация и инкубация при низком pH / высокой температуре для удаления / инактивации вирусов / прионов. ⁽¹⁴⁾

Недавно было показано, что методы инактивации / удаления вирусов, такие как использование нанофильтрации и каприлатной кислоты, защищают свойства Ig. ⁽¹²⁾ Следует отметить, что не только состав Ig должен содержать высокие уровни IgG (= 95%), но и молекула также должна быть неповрежденной и без агрегатов. Наличие высоких концентраций агрегатов коррелирует с реакциями во время инфузии Ig.

В 1980-х годах сообщалось о случаях передачи вируса, вызванных инфузией Ig, что вызывало серьезную озабоченность как среди медицинского сообщества, так и среди пользователей, поскольку во многих клинических ситуациях заменителя продукта крови не существует.Однако, поскольку в производственный процесс были добавлены метод растворителя / детергента и технология нуклеиновых кислот (NAT), больше не было зарегистрировано случаев передачи вируса. ^(15,16)

Механизм действия

При первичном или вторичном иммунодефиците назначение Ig имеет целью замену антител, и механизм его действия четко определен: восстановить уровни IgG. Однако, учитывая противовоспалительные и иммуномодулирующие свойства Ig, было предложено несколько механизмов для выяснения эффектов этого препарата на регуляцию иммунной системы, некоторые из которых показаны в. ^(17,18) и графически объясняют основные механизмы действия Ig.

Таблица 1

Механизмы действия иммуноглобулина человека ⁽¹⁸⁾

Взаимодействие с Fc-фрагментоспецифическим рецептором (FcR)

Контроль путей комплемента и активация механизмов, индуцирующих солюбилизацию циркулирующего иммунного комплекса

Образование димеров идиотип-антиидиотип

Модуляция некоторых цитокинов и продукция их антагонистов

Апоптоз В- и Т-клеток посредством активации рецептора Fas

Блокирование связывания между Т-клетками и суперантигенами

Контроль самореактивности и индукции толерантности

Ингибирование дифференцировки и созревания дендритных клеток

Блокада рецептора Fc фагоцитов с помощью Ig у пациента с иммунной тромбоцитопенической пурпурой (наличие антител к тромбоцитам).

Множественные действия Ig: образование димеров идиотип-антиидиотип, блокирование связывания суперантигенов с Т-клетками, ингибирование дендритных клеток, стимуляция регуляторных Т-клеток (Treg)

В последнее время действие Ig на регуляторные Т-клетки (Tregs) CD4 ⁺ , CD25 ⁺ и FoxP3 ⁺ . Treg играют важную роль в поддержании неиммунного ответа на аутоантигены и предотвращении иммунной агрессии и аутоиммунных заболеваний. ⁽¹⁹⁾ Ig, как было показано, способствует расширению и усилению подавляющей функции Treg, но механизм еще не известен. ⁽²⁰⁾

Помимо взаимосвязи между IV Ig и Tregs, существует гипотеза о взаимодействии между Ig и дендритными клетками. Эти клетки являются антигенпрезентирующими клетками и участвуют в индукции иммуногенного или толерогенного иммунного ответа. Считается, что влияние Ig на активацию Т-клеток может быть опосредовано дендритными клетками. ⁽²¹⁾

Недавно было показано, что составы Ig обладают ингибирующим действием на дифференцировку и амплификацию клеток Th27. Эти клетки соответствуют субпопуляции Т-клеток, которые, помимо защиты от внеклеточных патогенов (таких как Klebsiella и Candida ), играют решающую роль в патогенезе различных аутоиммунных, аллергических и воспалительных заболеваний. Ингибирование клеток Th27 снижает продукцию ряда воспалительных цитокинов и других провоспалительных медиаторов, тем самым препятствуя поддержанию хронической воспалительной реакции. ⁽²²⁾

Составы человеческого иммуноглобулина

Препараты Ig различаются стабилизаторами и разбавителями. Такие вариации делают каждый продукт уникальным и, следовательно, его эффективность и переносимость также специфичны. Это частично объясняет, почему некоторые пациенты реагируют на одни продукты, а не на другие.

Необходимо тщательно соблюдать некоторые характеристики составов Ig. Первый – наличие латекса; От 0,3 до 1% населения чувствительны к этому антигену и могут иметь аллергические реакции, иногда тяжелые, после воздействия. ⁽²³⁾ Другой – наличие сорбита, который противопоказан пациентам с наследственной непереносимостью фруктозы. показаны основные составы Ig, доступные в Бразилии.

Таблица 2

Составы человеческого иммуноглобулина, доступные в Бразилии ⁽²⁴⁾

6 (Blausiegel)

Продукт	Состав	Презентация	Использование	Наполнитель	Латекс	Происхождение
Лиофилизированный	0.6,3 и 9,0 г	IV	Глюкоза, хлорид натрия	№	CLB – Центральная лаборатория Нидерландов
Flebogamma 5% ® (Grifols Brasil)	Раствор для инъекций	0,5, 2,5, 5 и 10 г	IV	D-сорбитол, вода для инъекций	№	Институт Grifols, Испания
Гамаглобулина IM Grifols ® (Grifols Brasil)	Раствор для инъекций	320 и 800 мг	IM	Глицин, хлорид натрия, вода для инъекций	№	Институт Грифолс, Испания
Gamunex ® (Meizler Biopharma) Imunoglobulin® (Blausiegel)	Раствор для инъекций Раствор для инъекций	1,2.5, 5, 10 и 20 г 0,5, 1, 2,5, 3, 5 и 10 г	IV IV	N / D Мальтоза 100 мг / мл	N / D N / D	Talecris Biotherapeutics, INC (США) Производные плазмы Greencross – Корея
Imunoglobulin® (Blausiegel)	Лиофилизированный	0,5, 1,0, 2,5 и 5,0 г	IV	Альбумин, глюкоза и хлорид натрия	N / D	Производные Greencross плазмы – Корея
Imunoglobulina humana Normal® (Blausiegel)	Лиофилизированный	0.6,3,0, 6,0 и 9,0 г	IM	Глицин, хлорид натрия и сахароза	№	Красный Крест Финляндии, Хельсинки – Финляндия
Imunoglobulina humana Normal® (Blausiegel)	Лиофилизированный	0,6,3,0 , 6,0 и 9,0 г	IM	Глицин, хлорид натрия и сахароза	№	Красный Крест Финляндии, Хельсинки – Финляндия
Keyven ® (Macrofarma Quimica e Farmaceutica Industrial)	Раствор для инъекций	50 мг / колбы объемом 20, 50, 100 и 200 мл	IV	N / D	N / D	Kedrion SPA, Италия; Hardis SPA, Италия
Kiovig ® (Baxter)	Раствор для инъекций	1,2.5, 5, 10 и 20 г	IV	Глицин	№	Baxter – Европа и Северная Америка
Пентаглобин® (Marcos Pedrilson Produtos Hospitalares ltda)	Раствор для инъекций	Ампулы: 10 и 20 мл, флаконы: 50 и 100 мл	IV	Глюкоза 27,5 мг; Хлорид натрия: 78 ммоль	N / D	Biotest Pharma GmbH, Германия
Sandoglobulina® (Meizler Comercio Internacional S / A)	Лиофилизированный	1.0,3,0, 6,0 и 12,0 г	IV	Сахароза: 1,67 г / г IgG, хлорид натрия: 0,02 г / г белка	N / D	ZLB – Bioplasma AG, Швейцария
Sandoglobulina ® (CSL Behring Comercio de Produtos Farmaceuticos)	Лиофилизированный	1, 3, 6 и 12 г	IV	Сахароза, хлорид натрия	№	CSL Behring AG – Швейцария; CSL Behring LLC-США
Vigam®-Liquid (Meizler Comercio Internacional S / A)	Раствор для инъекций	1, 2.5 и 5 г	IV	Альбумин: 20 мг, сахароза: 24 мг, глицин: 5 мг, ацетат: 3 мг, н-октаноат, Na: 0,5 мг	N / D	BPL – Лабораторный кинжал биопродуктов Lane, Elstree – Великобритания
Tegeline ® (LFB-Hemoderivados e Biotecnologia)	Лиофилизированный	0,5, 2,5, 5 и 10 г	IV	N / D	N / D	LFB-Biomedicaments-France
CSL Venimmuna Nring ® ( )	Лиофилизированный	50 мг / мл с колбами для разбавителя на 10, 50, 100 и 200 мл	IV	Вода для инъекций	N / D	ZLB Behring GMBH-Germany

В Бразилии, Параметры качества Ig для терапевтического использования были определены Национальным агентством санитарного надзора (ANVISA) в 2000 году и объясняются в.

Таблица 3

Ключевые характеристики качества Ig ⁽²⁵⁾

Анализируемый параметр	Ожидаемый результат
Визуальный осмотр	– Препарат лиофилизированный: порошок или твердая масса кристально-белого цвета или слегка желтоватый – Раствор: цвет от бледно-желтого до бесцветного, без частиц
Объем	Должен составлять до 5% от заявленного на этикетке
pH	– Внутримышечно: 6.4-7,2 – Внутривенно: 4-7,4
Концентрация белка	– Внутримышечно: 100-180 г / л – Внутривенно: не менее 30 г / л
Электрофоретическая чистота	– Внутримышечно: гамма-глобулин соответствует 90% от общего количества белка – Внутривенно: гамма-глобулин составляет 95% от общего белка, присутствующего в образце
Определение полимеров и агрегатов	– Внутримышечно: менее 10% полимерных агрегатов – Внутривенно: менее 3% полимерных агрегатов
Подтверждение идентичности	Реактивность только с сывороткой против человека
Определение антител против поверхностных антигенов вируса гепатита В	Более 0.Должно быть обнаружено 5 МЕ / г
Тест на нормальную мощность Ig	– Внутримышечно: по крайней мере в 10 раз сильнее, чем исходная смесь – Внутривенно: по крайней мере в 3 раза сильнее, чем исходная смесь
Определение активатора прекалликреина	Активность менее 35 МЕ / мл (раствор 30 г / л)
Определение антикомплементарной активности	Расход комплемента ниже 50% (1 мг CH50 на мг Ig)
Определение гемагглютинина анти-A и анти-B	Отсутствие агглютинации при разведении 1:64
Осмоляльность	Выше 240 мосмоль / кг

Раствор инъекционного Ig следует хранить в холодильнике при температуре 4–8 градусов, а срок его хранения составляет от двух до трех лет.Лиофилизированный Ig следует хранить при комнатной температуре (до 25 градусов) и имеет срок годности до пяти лет. ⁽²⁵⁾

В последнее время появилась тенденция производить растворы Ig с более высокими концентрациями белка, такие как растворы 100 мг / мл (10%), и использовать низкий pH, который способствует стабильности продукта (pH = 4,3-5,0). . Повышение концентрации IgG (с 5 до 10%) сокращает время инфузии, что очень важно для пациентов с первичным иммунодефицитом, получающих препараты крови каждые 21-28 дней. ⁽²⁶⁾

Дозировка и введение иммуноглобулинов

Существует несколько рекомендуемых дозировок Ig в соответствии с клиническими показаниями. Заместительная доза Ig при иммунодефиците должна быть индивидуальной для каждого пациента. ⁽⁵⁾ Для других ситуаций доза, обычно используемая для взрослых, составляет 2 г / кг, которую можно разделить на пять дней инфузии (0,4 г / кг / день) или более двух дней инфузии (1 г / кг / день). день). Настой в течение двух дней особенно показан пациентам с острыми и тяжелыми состояниями.

Обычная скорость инфузии Ig варьируется от 4 мл до 8 мл / кг / ч в зависимости от состава (5% или 10%) и переносимости пациента. Однако в начале инфузии скорость должна быть ниже примерно на 0,4. до 0,6 мл / кг / ч, что эквивалентно 0,01 мл / кг / мин. ⁽⁶⁾ Рекомендуется сопровождать первые 20 минут инфузии этого продукта крови.

Ig обычно вводят внутривенно либо в периферические вены, либо через центральные катетеры. Подкожное введение использовалось у пациентов без венозного доступа и / или домашних инфузий с помощью специально разработанного инфузора.В исключительных случаях Ig можно вводить перорально или интратекально. ⁽⁶⁾

Выводы

Ig – наиболее часто используемый продукт крови в клинической практике. За прошедшие годы был достигнут значительный прогресс в его производстве за счет обработки плазмы, что гарантирует лучшую безопасность продукта, особенно с учетом снижения передачи вирусов.

Несмотря на наличие на рынке различных рецептур Ig, все они должны соответствовать параметрам качества, установленным законодательством Бразилии, направленным на обеспечение качества этого продукта крови.

Механизмы действия Ig многочисленны и выходят далеко за рамки простого блокирования рецепторов Fc фагоцитов. Считается, что многие механизмы еще предстоит выяснить и, безусловно, будут способствовать улучшению клинических показаний этого продукта крови.

Сноски

Раскрытие информации о конфликте интересов: авторы заявляют об отсутствии конкурирующих финансовых интересов

Ссылки

1. Фон Беринг Э., Китасато С. Убер дас зустандекоммен дер дифтерияиммунитет унд дер столбняк-иммунитет побег.Dtsch Med wochenschr. 1890; 16: 1113-4 [Google Scholar] 2. Кон Э. Дж. Белки крови и их терапевтическое значение. Наука. 1945; 101 (2612): 51-6 [PubMed] [Google Scholar] 3. Кон EJ, Hughes WL Jr, Weare JH. Подготовка и свойства белков сыворотки и плазмы; кристаллизация сывороточных альбуминов из смесей этанола и воды. J Am Chem Soc. 1947; 69 (7): 1753-61 [PubMed] [Google Scholar] 4. Эйбл М.М. История заместительной терапии иммуноглобулином. Immunol Allergy Clin North Am. 2008; 28 (4): 737-64, viii. [PubMed] [Google Scholar] 5.Provan D, Nokes TJ, Agrawal S, Winer J, Wood P, Group IGDGotIEW Клинические рекомендации по использованию иммуноглобулинов. 2-е изд Лондон: Министерство здравоохранения; 2008 г. [Google Scholar] 7. Farcet MR, Planitzer CB, Stein O, Modrof J, Kreil TR. Антитела к вирусу гепатита А в препаратах иммуноглобулинов. J Allergy Clin Immunol. 2010; 125 (1): 198-202 [PubMed] [Google Scholar] 8. Радосевич М., Бюрнуф Т. Внутривенный иммуноглобулин G: тенденции в методах производства, контроле качества и обеспечении качества. Vox Sang. 2010; 98 (1): 12–28 [PubMed] [Google Scholar] 9.Бучачер А., Иберер Г. Очистка внутривенного иммуноглобулина G из плазмы человека – аспекты урожайности и вирусной безопасности. Биотехнология Дж. 2006; 1 (2): 148-63 Комментарий в: Biotechnol J. 2006; 1 (2): 111. [PubMed] [Google Scholar] 10. Гельфанд Э.В. Критические решения при выборе препарата иммуноглобулина для внутривенного введения. J Infus Nurs. 2005; 28 (6): 366-74 [PubMed] [Google Scholar] 11. Шах С.Р. Новый иммуноглобулин для внутривенного введения (IGIV) – Гаммагард жидкость 10%: оценка эффективности, безопасности, переносимости и влияния на уход за пациентами.Экспертное мнение Biol Ther. 2008; 8 (6): 799-804 [PubMed] [Google Scholar] 12. Сигел Дж. Продукт: Все иммуноглобулины для внутривенного введения не эквивалентны. Фармакотерапия. 2005; 25 (11Пт 2): 78С-84С [PubMed] [Google Scholar] 13. О, DJ, Ли Ю.Л., Кан Дж. В., Квон С.И., Чо Н.С., Ким И.С. [Оценка эффективности нанофильтрации (Viresolve NFP) по элиминации вируса для парвовируса B19 и вируса гепатита A]. Корейский J Lab Med. 2010; 30 (1): 45-50 корейцев. [PubMed] [Google Scholar] 14. Poelsler G, Berting A, Kindermann J, Spruth M, Hammerle T, Teschner W. и др.Новый жидкий иммуноглобулин для внутривенного введения с тремя специальными этапами уменьшения количества вирусов: способность уменьшать количество вирусов и прионов. Vox Sang. 2008; 94 (3): 184-92 [PubMed] [Google Scholar] 15. Дорожка RS. Не-А, не-В гепатит от внутривенного иммуноглобулина. Ланцет. 1983; 2 (8356): 974-5 [PubMed] [Google Scholar] 16. Дихтельмюллер Х.О., Бизерт Л., Фаббрицци Ф., Гахардо Р., Гронер А., фон Хёген I и др. Надежность обработки производных плазмы растворителями / детергентами: сбор данных от компаний-членов ассоциации Plasma Protein Therapeutics Association.Переливание. 2009; 49 (9): 1931-43 гг. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 17. Liumbruno GM, Bennardello F, Lattanzio A, Piccoli P, Rossettias G, Итальянское общество трансфузионной медицины и иммуногематологии (SIMTI) Рекомендации по использованию альбумина и иммуноглобулинов. Переливание крови. 2009; 7 (3): 216-34 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 18. Ephrem A, Misra N, Hassan G, Dasgupta S, Delignat S, Duong Van Huyen JP, et al. Иммуномодуляция аутоиммунных и воспалительных заболеваний с помощью внутривенного иммуноглобулина.Clin Exp Med. 2005; 5 (4): 135-40 [PubMed] [Google Scholar] 19. Мияра М., Сакагучи С. Природные регуляторные Т-клетки: механизмы подавления. Тенденции Мол Мед. 2007; 13 (3): 108-16 [PubMed] [Google Scholar] 20. Maddur MS, Othy S, Hegde P, Vani J, Lacroix-Desmazes S, Bayry J, et al. Иммуномодуляция внутривенным иммуноглобулином: роль регуляторных Т-клеток. J Clin Immunol. 2010; 30Поставка 1: S4-8 [PubMed] [Google Scholar] 21. Кроу А.Р., Бринк Д., Лазарус А.Х. Новое понимание механизма действия IVIg: роль дендритных клеток.J Thromb Haemost. 2009; 7Поставка 1: 245-8 [PubMed] [Google Scholar] 22. Maddur MS, Vani J, Hegde P, Lacroix-Desmazes S, Kaveri SV, Bayry J. Ингибирование дифференцировки, амплификации и функции человеческих клеток TH 17 с помощью внутривенного иммуноглобулина. J Allergy Clin Immunol. 2011; 127 (3): 823-30 и 1-7. [PubMed] [Google Scholar] 23. Наваррете М.А., Салас А., Паласиос Л., Марин Дж. Ф., Квиралте Дж., Флоридо Дж. Ф. [Аллергия на латекс]. Farm Hosp. 2006; 30 (3): 177-86 испанский. [PubMed] [Google Scholar] 25. Бразилия. Ministério da Saúde.Agência Nacional de Vigilância Sanitária Resolução RDC №46 от 18 мая 2000 года. Техническое регулирование для производства и контроля качества человеческого здоровья. Бразилиа: Anvisa; [цитировано 12 января 2010 г.] Доступно с: http://www.anvisa.gov.br/legis/resol/2000/46_00rdc.htm [Google Scholar] 26. Хупер Я. Внутривенные иммуноглобулины: эволюция коммерческих препаратов ВВИГ. Immunol Allergy Clin North Am. 2008; 28 (4): 765-78, viii. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] Обзор

, использование внутривенного иммуноглобулина, фармакология и мониторинг

Chapman SA, Gilkerson KL, Davin TD, Pritzker MR.Острая почечная недостаточность и внутривенное введение иммуноглобулина: возникает при использовании препарата, стабилизированного сахарозой, но не стабилизированного D-сорбитолом. Энн Фармакотер . 2004 Декабрь 38 (12): 2059-67. [Медлайн].

Дантал Дж. Внутривенные иммуноглобулины: углубленный обзор вспомогательных веществ и риска острого повреждения почек. Ам Дж. Нефрол . 2013. 38 (4): 275-84. [Медлайн].

Имбах П., Барандун С., д’Апуццо В. и др. Высокие дозы внутривенного гаммаглобулина при идиопатической тромбоцитопенической пурпуре в детском возрасте. Ланцет . 1981, 6 июня (8232): 1228-31. [Медлайн].

Rutter A, Luger TA. Высокие дозы внутривенных иммуноглобулинов: подход к лечению тяжелых иммуноопосредованных и аутоиммунных заболеваний кожи. J Am Acad Dermatol . 2001 июн. 44 (6): 1010-24. [Медлайн].

Dalakas MC. Механизмы действия IVIg и терапевтические соображения при лечении острых и хронических демиелинизирующих невропатий. Неврология .2002 Dec 24. 59 (12 Suppl 6): S13-21. [Медлайн].

Казачкин М.Д., Кавери СВ. Иммуномодуляция аутоиммунных и воспалительных заболеваний с помощью внутривенного иммуноглобулина. N Engl J Med . 2001, 6 сентября. 345 (10): 747-55. [Медлайн].

Юки Н., Ватанабе Х, Накадзима Т., Спет П.Дж. IVIG блокирует отложение комплемента, опосредованное антителами против GM1, при мультифокальной моторной невропатии. J Neurol Neurosurg Psychiatry . 28 июля 2010 г.[Медлайн].

Фавр О., Леймгрубер А., Николь А., Спертини Ф. Внутривенное замещение иммуноглобулинов предотвращает тяжелые инфекции и инфекции нижних дыхательных путей, но не инфекции верхних дыхательных путей и не респираторные инфекции при общей вариабельной иммунной недостаточности. Аллергия . 2005 Март 60 (3): 385-90. [Медлайн].

Огава С. Биомаркер. Нихон Риншо . 2014 Сентябрь 72 (9): 1578-84. [Медлайн].

Kerr J, Quinti I, Eibl M, Chapel H, Späth PJ, Sewell WA, et al.Оптимальна ли дозировка терапевтических иммуноглобулинов? Обзор трех десятилетий дебатов в Европе. Фронт Иммунол . 2014 12 декабря. 5: 629. [Медлайн].

Гу Б., Чанг Х.Дж., Чунг В.Г., Чунг К.Ю. Внутримышечный иммуноглобулин при резистентных гнойных заболеваниях кожи: ретроспективный обзор 63 случаев. Br J Dermatol . 2007 Сентябрь 157 (3): 563-8. [Медлайн].

Scheinfeld N. Комментарий к болезни Дегоса: C5b-9 / интерферон-α-опосредованный эндотелиопатический синдром Магро и др.: Пересмотр болезни Дегоса как гематологического или эндотелиального генетического заболевания. Dermatol Online J . 2011 15 августа. 17 (8): 6. [Медлайн].

Schroeder HW Jr, Догерти CJ. Обзор испытаний внутривенной заместительной терапии иммуноглобулином для пациентов с первичным гуморальным иммунодефицитом. Инфекция . 2012 декабрь 40 (6): 601-11. [Медлайн]. [Полный текст].

Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США. Наркотики. Доступно на http://www.fda.gov/Drugs/default.htm. Доступ: 10 февраля 2013 г.

IVIG.Википедия. Доступно на http://en.wikipedia.org/wiki/Intravenous_immunoglobulin. Доступ: 10 февраля 2013 г.

Barnett C, Wilson G, Barth D, Katzberg HD, Bril V. Изменение показателей качества жизни при внутривенном введении иммуноглобулина или плазмафереза ​​у пациентов с миастенией гравис. J Neurol Neurosurg Psychiatry . 2013 Январь 84 (1): 94-7. [Медлайн].

Sorgun MH, Sener HO, Yucesan C, Yucemen N. Внутривенный иммуноглобулин для профилактики обострения миастении Gravis. Neurol Sci . 2014 8 января [Medline].

Wenderfer SE, Thacker T. Внутривенный иммуноглобулин в лечении волчаночного нефрита. Аутоиммунный вирус . 2012. 2012: 589359. [Медлайн]. [Полный текст].

Каликсто Р., Менезеш Ю., Остронофф М., Сукупира А., Ботельо Л. Ф., Флоренсио Р. и др. Благоприятный исход тяжелого, обширного, индуцированного гранулоцитарным колониестимулирующим фактором и устойчивого к кортикостероидам синдрома Свита при лечении с помощью высоких доз внутривенного иммуноглобулина. Дж. Клин Онкол . 2014 6 января [Medline].

de Chambrun MP, Gousseff M, Mauhin W, et al. Внутривенные иммуноглобулины улучшают выживаемость при синдроме системной капиллярной утечки, ассоциированном с моноклональной гаммопатией. Am J Med . 8 июня 2017 г. [Medline].

Мори М., Кувабара С., Фукутаке Т., Хаттори Т. Внутривенная иммуноглобулиновая терапия для синдрома Миллера Фишера. Неврология . 2007 г. 3 апреля. 68 (14): 1144-6. [Медлайн].

Корбер А., Франксон Т., Граббе С., Диссемонд Дж.Успешная терапия склеромикседемы Арндт-Готтрона низкими дозами внутривенного иммуноглобулина. J Eur Acad Dermatol Venereol . 2007 г., 21 (4): 553-4. [Медлайн].

Zinman L, Ng E, Bril V. IV иммуноглобулин у пациентов с миастенией: рандомизированное контролируемое исследование. Неврология . 2007 13 марта. 68 (11): 837-41. [Медлайн].

Сучак Р., Маседо С., Гловер М., Лоулор Ф. Внутривенный иммуноглобулин эффективен как единственный иммуномодулирующий агент при гангренозной пиодермии, не реагирующей на системные кортикостероиды. Клин Экспер Дерматол . 2007 марта 32 (2): 205-7. [Медлайн].

Kerr AC, Ferguson J. Возникший у взрослых pityriasis rubra pilaris типа II успешно лечится с помощью внутривенного иммуноглобулина. Br J Dermatol . 2007 май. 156 (5): 1055-6. [Медлайн].

Marenco F, Fava P, Fierro MT, Quaglino P, Bernengo MG. Высокодозированные иммуноглобулины и экстракорпоральная фотохимиотерапия в лечении фебрильной язвенно-некротической болезни Мухи-Хабермана. Дерматол Тер . 2010 июл.23 (4): 419-22. [Медлайн].

Асашима Х, Инокума С., Ямада Х. Пошаговое улучшение периферической полинейропатии, связанной с синдромом Чарджа-Стросса, с помощью шести курсов высокодозной внутривенной иммуноглобулиновой терапии. Аллергол Инт . 2012 г. 25 июня [Medline].

Reipert BM, Ilas J, Carnewal C, et al. Функция Fc нового продукта иммуноглобулина для внутривенного введения: 10% раствор тройного инактивированного вируса IGIV. Vox Sang . 2006 Октябрь 91 (3): 256–63. [Медлайн].

Baxter получает разрешение Европейской комиссии на сбыт продукции KIOVIG для лечения иммунодефицитов. Доступно на http://www.thefreelibrary.com/Baxter+Receives+Marketing+Authorization+From+the+European+Commission…-a0141266030. Доступ: 3 ноября 2007 г.

OMRIX Biopharmaceuticals Inc. OMRIX Biopharmaceuticals объявляет о проведении в США фазы III клинических испытаний внутривенного иммуноглобулина (ВВИГ) у субъектов с заболеваниями первичного иммунодефицита.Доступно на http://www.thefreelibrary.com/OMRIX+Biopharmaceuticals+Announces+U.S.+Phase+III+Clinical+Trial+for…-a0149600279. Доступ: 3 ноября 2007 г.

Фер Дж., Хофманн В., Каппелер У. Временное обращение тромбоцитопении при идиопатической тромбоцитопенической пурпуре с помощью высоких доз внутривенного гамма-глобулина. N Engl J Med . 1982, 27 мая. 306 (21): 1254-8. [Медлайн].

Салама А., Мюллер-Экхардт С., Кифель В. Эффект внутривенного иммуноглобулина при иммунной тромбоцитопении. Ланцет . 23 июля 1983 г. 2 (8343): 193-5. [Медлайн].

Lazarus AH, Ворона AR. Механизм действия ВВИГ и анти-D при ИТП. Transfus Apher Sci . 2003 июн. 28 (3): 249-55. [Медлайн].

Чандрамули Н.Б., Роджерс GM. Длительная инфузия иммуноглобулина и тромбоцитов для лечения иммунной тромбоцитопении. Ам Дж. Гематол . 2000 Сентябрь 65 (1): 85-6. [Медлайн]. [Полный текст].

Laosombat V, Wiriyasateinkul A, Wongchanchailert M.Внутривенное введение гамма-глобулина для лечения хронической идиопатической тромбоцитопенической пурпуры у детей. J Med Assoc Thai . 2000 Февраль 83 (2): 160-8. [Медлайн].

Йи QJ, Ли ЧР, Ян XQ. Влияние внутривенного иммуноглобулина на ингибирование апоптоза лимфоцитов периферической крови при острой болезни Кавасаки. Acta Paediatr . 2001 июн 90 (6): 623-7. [Медлайн].

Caccavelli L, Field AC, Betin V и др. Нормальный IgG защищает от острой реакции «трансплантат против хозяина», воздействуя на CD4 (+) CD134 (+) донорские аллореактивные Т-клетки. Eur J Immunol . 2001 сентября 31 (9): 2781-90. [Медлайн].

Кавери С.В., Маддур М.С., Хегде П., Лакруа-Десмаз С., Бейри Дж. Внутривенные иммуноглобулины при иммунодефицитах: больше, чем просто заместительная терапия. Clin Exp Immunol . Июнь 2011 г. [Medline].

Петерлана Д., Пуччетти А., Симеони С., Тинацци Е., Коррочер Р., Лунарди С. Эффективность внутривенного иммуноглобулина при хроническом идиопатическом перикардите: отчет о четырех случаях. Clin Rheumatol . 2005 24 февраля (1): 18-21. [Медлайн].

Ларссон Л., Мобини Р., Аукруст П. и др. Благоприятное влияние на функцию сердца при внутривенном введении иммуноглобулинов у пациентов с дилатационной кардиомиопатией не связано с нейтрализацией аутоантител против рецепторов. Аутоиммунитет . 2004 сен-ноя. 37 (6-7): 489-93. [Медлайн].

Dauvilliers Y, Carlander B, Rivier F, Touchon J, Tafti M. Успешное лечение катаплексии с помощью внутривенных иммуноглобулинов в начале нарколепсии. Энн Нейрол . 2004 декабрь 56 (6): 905-8. [Медлайн].

Danieli MG, Cappelli M, Malcangi G, Logullo F, Salvi A, Danieli G. Долгосрочная эффективность внутривенного иммуноглобулина при синдроме Черга-Стросса. Энн Рум Дис . 2004 декабрь 63 (12): 1649-54. [Медлайн]. [Полный текст].

Ахирон А., Кишнер И., Сарова-Пинхас И. и др. Внутривенное введение иммуноглобулинов после первого демиелинизирующего события, указывающего на рассеянный склероз: рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование. Arch Neurol . 2004 Октябрь 61 (10): 1515-20. [Медлайн].

Кройтер А., Гамбихлер Т., Брекманн Ф. и др. Импульсная внутривенная терапия иммуноглобулином при ливедоидном васкулите: открытое испытание с участием 9 последовательных пациентов. J Am Acad Dermatol . 2004 Октябрь, 51 (4): 574-9. [Медлайн].

Робинсон Дж., Хартлинг Л., Вандермейер Б., Классен Т.П. Внутривенный иммуноглобулин при предполагаемом вирусном миокардите у детей и взрослых. Кокрановская база данных Syst Rev .2015 20 мая. 5: CD004370. [Медлайн].

Gerstenblith MR, Antony AK, Junkins-Hopkins JM, Abuav R. Pompholyx и экзематозные реакции, связанные с внутривенной терапией иммуноглобулином. J Am Acad Dermatol . 2011 Май. [Медлайн].

Vucic S, Chong PS, Dawson KT, Cudkowicz M, Cros D. Тромбоэмболические осложнения лечения внутривенным иммуноглобулином. евро Neurol . 2004. 52 (3): 141-4. [Медлайн].

Орбах Х, Тишлер М, Шенфельд Я.Внутривенный иммуноглобулин и почка – палка о двух концах. Semin Arthritis Rheum . 2004 Декабрь 34 (3): 593-601. [Медлайн].

Накано И., Хаяси Т., Дегучи К., Сато К., Хисикава Н., Ямасита Т. и др. Двое молодых пациентов с инсультом, получавших регулярную внутривенную терапию иммуноглобулином (IVIg). J Neurol Sci . 2016 15 февраля. 361: 9-12. [Медлайн].

Jordan SC, Vo AA, Nast CC, Tyan D. Использование высоких доз человеческого внутривенного иммуноглобулина у сенсибилизированных пациентов, ожидающих трансплантации: опыт Cedars-Sinai. Клин Транспл . 2003. 193-8. [Медлайн].

Adrogue HE, Soltero L, Land GA, Ramanathan V, Truong LD, Suki WN. Иммуноглобулинотерапия при отторжении богатого плазматическими клетками почечного аллотрансплантата. Трансплантация . 2006 27 августа. 82 (4): 567-9. [Медлайн].

Акалин Е. Посттрансплантационная иммуносупрессия у высокочувствительных пациентов. Контриб Нефрол . 2009. 162: 27-34. [Медлайн].

Amagai M, Ikeda S, Shimizu H, et al.Рандомизированное двойное слепое исследование внутривенного иммуноглобулина при пузырчатке. J Am Acad Dermatol . 2009 апр. 60 (4): 595-603. [Медлайн].

Энтони Р.М., Вермелинг Ф., Карлссон М.С., Раветч СП. Идентификация рецептора, необходимого для противовоспалительной активности ВВИГ. Proc Natl Acad Sci U S A . 2008 16 декабря. 105 (50): 19571-8. [Медлайн]. [Полный текст].

Bonilla FA. Внутривенный иммуноглобулин: побочные реакции и лечение. J Allergy Clin Immunol . 2008 декабрь 122 (6): 1238-9. [Медлайн].

Браннаган ТД 3-й. Современные методы лечения хронических иммуноопосредованных демиелинизирующих полинейропатий. Мышечный нерв . 2009 Май. 39 (5): 563-78. [Медлайн].

Чепмен С.А., Гилкерсон К.Л., Дэвин Т.Д., Притцкер МР. Острая почечная недостаточность и внутривенное введение иммуноглобулина: возникает при использовании препарата, стабилизированного сахарозой, но не стабилизированного D-сорбитолом. Энн Фармакотер .2004 Декабрь 38 (12): 2059-67. [Медлайн].

Cikurel K, Schiff L, Simpson DM. Пилотное исследование внутривенного иммуноглобулина при ВИЧ-ассоциированной миелопатии. Уход за больными СПИДом STDS . 2009 23 февраля (2): 75-8. [Медлайн]. [Полный текст].

Cohen JA. Насколько эффективен внутривенный иммуноглобулин для лечения ремиттирующего рассеянного склероза? Нат Клин Практ Нейрол . 2008 4 ноября (11): 588-9. [Медлайн].

Cordonnier C, Chevret S, Legrand M и др.Следует ли применять иммуноглобулиновую терапию при трансплантации аллогенных стволовых клеток? Рандомизированное, двойное слепое, плацебо-контролируемое, многоцентровое исследование эффекта дозы. Энн Интерн Мед. . 1 июля 2003 г. 139 (1): 8-18. [Медлайн].

Крамер М., Фрей Р., Себальд А., Мазолетти П., Мейдер В. Стабильность в течение 36 месяцев нового жидкого 10% поликлонального иммуноглобулинового продукта (IgPro10, Privigen), стабилизированного L-пролином. Vox Sang . 2009 Апрель 96 (3): 219-25. [Медлайн].

Далакас М.IVIg при других аутоиммунных неврологических расстройствах: текущее состояние и перспективы на будущее. Дж. Neurol . 2008 июль 255 Дополнение 3: 12-6. [Медлайн].

Даниэли М.Г., Калькабрини Л., Калабрезе В., Маркетти А., Логулло Ф., Габриелли А. Внутривенный иммуноглобулин в качестве дополнения к лечению микофенолятмофетилом при тяжелом миозите. Аутоиммунная Ред. . 2009 Декабрь 9 (2): 124-7. [Медлайн].

Дашти-Хавидаки С., Агамохаммади А., Фаршади Ф. и др.Побочные реакции профилактического внутривенного введения иммуноглобулина; 13-летний опыт проведения 3004 инфузий у иранских пациентов с первичными иммунодефицитными заболеваниями. J Исследование Allergol Clin Immunol . 2009. 19 (2): 139-45. [Медлайн].

Динер А., Мехра А., Бернштейн Л., Шлиозберг Дж., Рубинштейн А. Внутривенное лечение гаммаглобулином при ВИЧ-1-инфекции. Immunol Allergy Clin North Am . 2008 28 ноября (4): 851-9, x. [Медлайн].

Диас-Манера Дж., Рохас-Гарсия Р., Илла I.Стратегии лечения миастении. Эксперт Опин Фармакотер . 2009 июн.10 (8): 1329-42. [Медлайн].

Эйбл ММ. История замены иммуноглобулинов. Immunol Allergy Clin North Am . 2008, 4 ноября: 737-64. [Медлайн].

Fazekas F, Lublin FD, Li D, et al. Внутривенный иммуноглобулин при ремиттирующем рассеянном склерозе: исследование по подбору дозы. Неврология . 2008 июл. 4: 265-71. [Медлайн].

Фер Т., Руси Б., Фишер А., Хопфер Х., Вутрих Р.П., Гасперт А.Ритуксимаб и внутривенное введение иммуноглобулинов при хроническом отторжении почечного аллотрансплантата, опосредованном антителами. Трансплантация . 2009, 27 июня. 87 (12): 1837-41. [Медлайн].

Фу округ Колумбия, Монтгомери-младший. Высокодозная быстрая инфузия ВВИГ при поствакцинальном остром диссеминированном энцефаломиелите. Неврология . 22 июля 2008 г. 71 (4): 294-5. [Медлайн].

Gürcan HM, Ахмед АР. Внутривенное введение иммуноглобулинов при пемфигоиде гортани. Клин Экспер Дерматол . 2009 декабрь 34 (8): 884-6. [Медлайн].

Hartung HP. Успехи в понимании механизма действия IVIg. Дж. Neurol . Июль 2008 г. 255 Дополнение 3: 3-6. [Медлайн].

Херцог-Царфати К., Шилоах Э., Корен-Миховиц М., Минха С., Рапопорт М.Дж. Успешное лечение затяжного агранулоцитоза, вызванного острой инфекцией парвовируса B19, с помощью внутривенных иммуноглобулинов. Eur J Intern Med .2006 Октябрь 17 (6): 439-40. [Медлайн].

Hommes OR, Haas J, Soelberg-Sorenson P, Friedrichs M. Испытания IVIG в MS. Альбумин – это плацебо? Дж. Neurol . 2009 Февраль 256 (2): 268-70. [Медлайн].

Hommes OR, Соренсен PS, Fazekas F, et al. Внутривенный иммуноглобулин при вторичном прогрессирующем рассеянном склерозе: рандомизированное плацебо-контролируемое исследование. Ланцет . 2004 г., 25 сентября – 1 октября. 364 (9440): 1149-56. [Медлайн].

Hooper JA.Внутривенные иммуноглобулины: эволюция коммерческих препаратов ВВИГ. Immunol Allergy Clin North Am . 2008, 28 ноября (4): 765-78, viii. [Медлайн].

Хьюз Р. Достижения в использовании ИГВВ при неврологических расстройствах. Дж. Neurol . 2008 июл. 255 Прил. 3: 1-2. [Медлайн].

Хьюз Р., Кьюсак С., Мерфи Г.М., Кирби Б. Солнечная крапивница успешно лечится с помощью внутривенного иммуноглобулина. Клин Экспер Дерматол . 2009 декабрь34 (8): e660-2. [Медлайн].

Хьюз РА. Внутривенный иммуноглобулин при хронической воспалительной демиелинизирующей полирадикулоневропатии: исследование ICE. Эксперт Rev Neurother . 2009 июн.9 (6): 789-95. [Медлайн].

Йодис В., Кимпински К., Вернино С., Сандрони П., Фили Р.Д., Лоу ПА. Эффективность иммунотерапии при серопозитивной и серонегативной предполагаемой аутоиммунной вегетативной ганглионопатии. Неврология . 2009 г. 9 июня. 72 (23): 2002-8.[Медлайн]. [Полный текст].

Йодис В., Кимпински К., Вернино С., Сандрони П., Лоу ПА. Иммунотерапия аутоиммунной вегетативной ганглионопатии. Auton Neurosci . 2009 12 марта. 146 (1-2): 22-5. [Медлайн].

Jordan SC, Peng A, Vo AA. Терапевтические стратегии в управлении реципиентами трансплантата с высокой HLA-сенсибилизацией и ABO-несовместимостью. Контриб Нефрол . 2009. 162: 13-26. [Медлайн].

Каладжян А.Х., Перриман Дж.Х., Каллен Дж.П.Внутривенная иммуноглобулиновая терапия дистрофического кальциноза кожи: ненадежно в наших руках. Арка Дерматол . 2009 г., 145 (3): 334; ответ автора 335. [Medline].

Коя Т., Цубата С., Кагаму Х. и др. Аутоантитела к гамма-интерферону у пациента с диссеминированным комплексом Mycobacterium avium. J Заразить Chemother . 2009 Апрель 15 (2): 118-22. [Медлайн].

Кубиш П., Пламенова И., Холли П., Стаско Дж. Успешная индукция иммунной толерантности с высокими дозами фактора свертывания VIII и внутривенными иммуноглобулинами у пациента с врожденной гемофилией и ингибитором фактора свертывания крови VIII с высоким титром, несмотря на неблагоприятный прогноз для терапии. Медицинский Научный Монит . 2009 июн. 15 (6): CS105-11. [Медлайн].

Ли К.Ю., Ли Х.С., Хонг Дж. Х., Хан Дж. У., Ли Дж. С., Ван К. Т.. Высокие дозы внутривенного иммуноглобулина подавляют активированные уровни воспалительных показателей, за исключением скорости оседания эритроцитов в острой стадии болезни Кавасаки. Дж. Троп Педиатр . 2005 апр. 51 (2): 98-101. [Медлайн].

Леонг Х., Стахник Дж., Бонк М.Э., Матушевский К.А. Немеченое использование иммуноглобулина для внутривенного введения. Am J Health Syst Pharm . 2008 октября 1. 65 (19): 1815-24. [Медлайн].

Lopez L, Wierzbicka-Hainaut E, Villers A, Guillet G. [Эффективность внутривенного иммуноглобулина при склеромикседе Арндта-Готтрона]. Энн Дерматол Венереол . 2009 апр. 136 (4): 330-6. [Медлайн].

Лузи Г., Бонджорно Ф., Папаро Барбаро С., Бруно Г. Внутривенный IgG: биологические модулирующие молекулы. Дж. Биол Регул Гомеост Агенты . 2009 январь-март.23 (1): 1-9. [Медлайн].

Magalhaes CM, Vasconcelos PA, Pereira MR, Alves NR, Gandolfi L, Pratesi R. Болезнь Кавасаки: клиническое и эпидемиологическое исследование 70 детей в Бразилии. Троп Докт . 2009 Апрель 39 (2): 99-101. [Медлайн].

Махоул Б., Браун Э., Херсковиц М., Рамадан Р., Хадад С., Норберто К. Гипериммунный гаммаглобулин для лечения энцефалита, вызванного вирусом Западного Нила. Isr Med Assoc J . 2009 марта 11 (3): 151-3.[Медлайн].

Максимович Л., Фремонт Г., Жанмужен М., Дюбертре Л., Вигье М. Солнечная крапивница успешно лечится с помощью внутривенных иммуноглобулинов. Дерматология . 2009. 218 (3): 252-4. [Медлайн].

Marie I, Maurey G, Herve F, Hellot MF, Levesque H. Внутривенный иммуноглобулин-ассоциированный артериальный и венозный тромбоз; отчет о серии и обзор литературы. Br J Dermatol . 2006 Октябрь, 155 (4): 714-21. [Медлайн].

Мастерсон Р., Пелликано Р., Близел К., МакМахон ЛП. Гранулематоз Вегенера во время беременности: новый подход к лечению. Am J Kidney Dis . 2004 Октябрь 44 (4): e68-72. [Медлайн].

Матаморос Н., Де Грасиа Дж., Эрнандес Ф., Понс Дж., Альварес А., Хименес В. Проспективное контролируемое перекрестное исследование новой презентации (10% против 5%) термообработанного внутривенного иммуноглобулина. Инт Иммунофармакол . 2005 марта, 5 (3): 619-26.[Медлайн].

Морозуми С., Кавагашира Ю., Иидзима М. и др. Внутривенное введение иммуноглобулинов при болезненной сенсорной нейропатии, связанной с синдромом Шегрена. J Neurol Sci . 2009 15 апреля. 279 (1-2): 57-61. [Медлайн].

Muley SA, Parry GJ. Воспалительные демиелинизирующие невропатии. Варианты лечения Curr Neurol . 2009 Май. 11 (3): 221-7. [Медлайн].

Нанри К., Окита М., Такегучи М. и др.Внутривенная иммуноглобулиновая терапия при аутоантител-положительной мозжечковой атаксии. Медицинский работник . 2009. 48 (10): 783-90. [Медлайн].

Национальная информационная служба, Консорциум университетских систем здравоохранения, Программа оценки технологий Центра улучшения клинической практики. Оценка технологии: препараты иммуноглобулинов для внутривенного введения . Ок-Брук, Иллинойс: Консорциум университетских систем здравоохранения; 1999 Март 216 стр. [Полный текст].

Национальные институты здравоохранения.Bethesda, Md. Внутривенный иммуноглобулин: профилактика и лечение заболеваний. Доступно по адресу: http://consensus.nih.gov/cons/080/080_statement.htm . Национальные институты здравоохранения: 21-23 мая 1990 г. [Полный текст].

Наварро М., Негре С., Матосес М.Л., Голомбек С.Г., Венто М. Некротический энтероколит после использования внутривенного иммуноглобулина при гемолитической болезни новорожденных. Acta Paediatr . 2009 Июль 98 (7): 1214-7. [Медлайн].

Николова К.А., Чорбанов А.И., Джумерска-Алексиева И.К., Николова М, Васильев ТЛ.Внутривенный иммуноглобулин усиливает экспрессию ингибирующего рецептора FcgammaIIB на В-клетках. Immunol Cell Biol . 2009 Октябрь 87 (7): 529-33. [Медлайн].

Palmeira P, Costa-Carvalho BT, Arslanian C, et al. Перенос антител через плаценту и в грудное молоко от матери, получавшей внутривенный иммуноглобулин. Pediatr Allergy Immunol . 2009 Сентябрь 20 (6): 528-35. [Медлайн].

Penate Y, Guillermo N, Melwani P, Martel R, Hernandez-Machin B, Borrego L.Кожный кальциноз, связанный с амиопатическим дерматомиозитом: ответ на внутривенный иммуноглобулин. J Am Acad Dermatol . 2009 июн. 60 (6): 1076-7. [Медлайн].

Proulx DP, Aubin E, Lemieux R, Bazin R. Спонтанная интернализация IVIg в активированных B-клетках. Иммунол Летт . 2009 14 мая. 124 (1): 18-26. [Медлайн].

Pul R, Stangel M. Использование иммуноглобулинов в лечении мышечных заболеваний. Экспертное мнение Biol Ther .2008 6 августа: 1143-50. [Медлайн].

Раджапаксе С. Внутривенные иммуноглобулины в лечении болезни денге. Trans R Soc Trop Med Hyg . 2009 Сентябрь 103 (9): 867-70. [Медлайн].

Sandler SG, Tutuncuoglu SO. Иммунная тромбоцитопеническая пурпура – современные методы лечения. Эксперт Опин Фармакотер . 2004 Декабрь 5 (12): 2515-27. [Медлайн].

Серати Ширази З., Иналоо С. Внутривенный иммуноглобулин в лечении токсического эпидермального некролиза, вызванного ламотриджином. Иран J Allergy Asthma Immunol . 2008 Декабрь 7 (4): 239-41. [Медлайн].

Пороги ES, Walsh DJ, Shkrobot LV, Palermo GD, Walsh AP. Клинический опыт внутривенного введения иммуноглобулинов и ингибиторов TNF-a при повторной потере беременности. Ольстер Мед J . 2009 Январь 78 (1): 57-8. [Медлайн]. [Полный текст].

Slatinska J, Honsova E, Burgelova M, Slavcev A, Viklicky O. Плазмаферез и внутривенный иммуноглобулин при раннем антителопосредованном отторжении почечного аллотрансплантата: опыт единственного центра. Термальный циферблат . 2009 Апрель 13 (2): 108-12. [Медлайн].

Sokos DR, Berger M, Lazarus HM. Внутривенный иммуноглобулин: соответствующие показания и применение при трансплантации гемопоэтических стволовых клеток. Пересадка костного мозга Biol . 2002. 8 (3): 117-30. [Медлайн].

Soltner E, Neel A, Tiab M, et al. Хроническая, в конечном итоге со смертельным исходом, болезнь Кавасаки у взрослого со спондилоартропатией, отвечающая на терапию ВВИГ. Костный сустав позвоночника .2009 Октябрь 76 (5): 559-61. [Медлайн].

Спалис А., Проперзи Е., Ло Фаро В., Акампора Б., Яннетти П. Внутривенный иммуноглобулин и интерферон: успешное лечение неврита зрительного нерва при рассеянном склерозе у детей. J Детский Neurol . 2004 августа 19 (8): 623-6. [Медлайн].

Stiehm ER, Keller MA, Vyas GN. Приготовление и использование терапевтических антител преимущественно человеческого происхождения. Биологические препараты . 2008 ноябрь 6: 363-74. [Медлайн].

Tremoulet AH, Best BM, Song S, et al. Устойчивость к внутривенному введению иммуноглобулинов у детей с болезнью Кавасаки. Дж. Педиатр . 2008 июль 153 (1): 117-21. [Медлайн]. [Полный текст].

Уэда А., Асакура К., Михара Т. и др. Острая вегетативная, сенсорная и моторная нейропатия: успешное лечение с помощью IVIg. Медицинский работник . 2009. 48 (10): 843-6. [Медлайн].

Winger EE, Reed JL, Ashoush S, Ahuja S, El-Toukhy T., Taranissi M.Лечение адалимумабом (Хумира) и внутривенным иммуноглобулином улучшает показатели наступления беременности у женщин, перенесших ЭКО. Am J Reprod Immunol . 2009 Февраль 61 (2): 113-20. [Медлайн].

Xie F, Blackhouse G, Assasi N, et al. Результаты анализа модели для оценки полезности затрат и ценности информации для внутривенного введения иммуноглобулина взрослым канадцам с хронической иммунной тромбоцитопенической пурпурой. Clin Ther . 2009 Май. 31 (5): 1082-91; обсуждение 1066-8.[Медлайн].

Yamane Y, Aihara M, Tatewaki S, et al. [Анализ лечения и случаев тяжелых побочных реакций на лекарства в умерших – анализ 46 случаев синдрома Стивенса-Джонсона и токсического эпидермального некролиза]. Ареруги . 2009 Май. 58 (5): 537-47. [Медлайн].

Perez EE, Orange JS, Bonilla F, Chinen J, Chinn I.K, Dorsey M и др. Обновленная информация об использовании иммуноглобулина при заболеваниях человека: обзор доказательств. J Allergy Clin Immunol .2017 Март 139 (3S): S1-S46. [Медлайн].

Надлежащее использование человеческого иммуноглобулина в клинической практике: меморандум с совещания IUIS / ВОЗ. Bull World Health Organ . 1982. 60 (1): 43-7. [Медлайн].

Подготовка к инфузионной терапии ВВИГ

Что такое инфузионная терапия?
Инфузионная терапия предполагает введение лекарства через иглу или катетер. Его назначают, когда состояние пациента не поддается лечению пероральными препаратами.Обычно инфузионная терапия означает, что лекарство вводится внутривенно (IV) в катетер, который находится в вашей вене, но этот термин также может относиться к ситуациям, когда лекарство вводится подкожно под кожу.

Зачем нужна инфузионная терапия?
У некоторых людей есть заболевание, которое может нуждаться в прерывистом или длительном лечении. Инфузионная терапия может улучшить ваше общее состояние здоровья и обеспечить лечение, которое может поддержать жизнь.

Какие лекарства можно давать при инфузионной терапии?
Пациентам с первичным иммунодефицитным заболеванием (PIDD) может потребоваться лечение внутривенным иммуноглобулином (IVIG).Различные компании выпускают множество различных препаратов ВВИГ. Вам следует поработать со своим врачом, чтобы определить, какой продукт лучше всего подойдет вам.

Многие пациенты могут получать заместительную терапию иммуноглобулином другими способами, например, подкожно, а не в вену. Некоторые пациенты начинают терапию ВВИГ и переходят на другие методы, чтобы вводить иммуноглобулин в удобное для них время дома. Если вас интересуют такие варианты, вам следует поговорить с врачом.

Многие другие лекарства, такие как антибиотики, стероиды и внутривенные жидкости, можно вводить внутривенно.

Как изготавливаются препараты иммуноглобулина?
Продукты иммуноглобулиновой терапии состоят из стерильных растворов концентрированных белков антител, извлеченных из крови здоровых доноров. Для извлечения необходимых иммуноглобулинов требуются тысячи объединенных доноров плазмы. Растворы высокоочищены, обработаны, чтобы свести к минимуму передачу известных патогенов, и стерильно упакованы для использования.

Сколько времени длится инфузия?
Продолжительность настоя зависит от нескольких факторов. Вливание ВВИГ обычно занимает около 3 часов. Эта оценка включает только время, необходимое для того, чтобы лекарство попало в ваше тело; потребуется дополнительное время на подготовку материалов и лекарств, а также на установку внутривенного катетера. Если ваш организм отреагирует на настой, это займет больше времени.

Время инфузии других лекарств сильно различается в зависимости от того, что вы принимаете, и от того, как ваше тело переносит это.Вы должны спросить своего врача, сколько времени потребуется для приема этих других лекарств.

Как часто делают инфузии?
Интервалы между инфузиями часто составляют от нескольких дней до недель. Частота инфузий зависит от многих факторов и должна определяться врачом. Пожалуйста, обсудите с ним или с ней ваш ожидаемый план лечения.

Болезненны ли настои?
Большинство инфузионных препаратов безболезненно. У некоторых людей установка внутривенного катетера может быть болезненной.Медицинские работники часто имеют множество способов уменьшить боль при установке внутривенного катетера, в том числе с помощью обезболивающих кремов и спреев, методов отвлечения внимания и устройств, которые блокируют физическую боль с помощью холода и вибрации. Посоветуйтесь со своим врачом, чтобы узнать, какой план обезболивания лучше всего подойдет вам.

Есть ли побочные эффекты у инфузий?
Побочные эффекты могут развиться при любом внутривенном введении. Могут возникнуть серьезные побочные эффекты, но они случаются редко. Некоторые побочные эффекты можно уменьшить с помощью премедикации определенными лекарствами.Проконсультируйтесь с врачом, чтобы получить полный список побочных эффектов от назначенных вам лекарств. Он или она выберет методы лечения, которые минимизируют ваш риск.

При внутривенном введении у вас может развиться головная боль во время или после инфузии. Некоторые люди также мерзнут во время инфузии и часто просят одеяло. Вы также можете почувствовать большую усталость, мышечные боли или лихорадку после инфузии, и вам нужно отдохнуть в течение дня, прежде чем почувствовать себя как обычно. Существуют и другие возможные побочные эффекты, но эти события являются наиболее частыми.Пожалуйста, поговорите со своим врачом о любых побочных эффектах, которые могут возникнуть при вливании.

Что произойдет, если это лечение не подействует на меня?
Все формы иммуноглобулиновой терапии эффективны, но человек может переносить одну лучше, чем другую. Доступны многие формы ВВИГ. Поговорите со своим врачом, и вместе вы можете попытаться найти продукт, который лучше всего подходит для вас.

Где проводятся инфузии?
Инфузии можно проводить в больнице или амбулаторно, в инфузионном центре или в кабинете врача.Сложные инфузии или инфузии, которые могут вызвать реакцию, следует назначать в кабинете врача или в инфузионном центре. Эти инфузионные центры готовы к работе со сложными инфузиями и часто имеют под рукой персонал и лекарства для лечения тяжелой инфузионной реакции.

Покрывают ли страховые компании инфузионную терапию?
Широкий спектр переменных влияет на то, какие услуги будет покрывать ваша страховая компания. Вы, ваш поставщик инфузионной терапии и ваш врач будете работать со своей страховой компанией, чтобы определить покрытие для ваших инфузий.

Узнайте больше о PIDD.

Эта статья была отрецензирована Эндрю Муром, MD, FAAAAI

Проверено: 28.09.20

Метод определения антигенов в иммунных комплексах, основанный на протеомике

Abstract

Новый подход к восстановлению и идентификации иммунных комплексов (IC) был разработан с использованием эксклюзионной хроматографии (SEC) и аффинной хроматографии на колонках для связывания иммуноглобулина (HiTrap Protein G).Процесс очистки контролировали с помощью 1D SDS-PAGE, окрашивания белков, вестерн-блоттинга и, наконец, тандемную масс-спектрометрию с жидкостной хроматографией (LC MS / MS) использовали для идентификации выделенных антигенов. Этот подход был применен к сыворотке с искусственно созданными иммунными комплексами (IC), содержащими вакцинный антиген (грипп) и антитела, что привело к выделению и идентификации пептидов гриппа в восстановленных IC. Этот подход сравнивали с установленным методом обнаружения и восстановления IC, осаждением полиэтиленгликолем (PEG) с последующей ЖХ-МС / МС.Оба подхода успешно позволили захватить, восстановить и охарактеризовать иммуноглобулины и антиген (ы) гриппа в комплексе с иммуноглобулинами. Однако осаждение ПЭГ имеет преимущество простоты и больше подходит для крупномасштабных исследований.

Образец цитирования: Menikou S, McArdle AJ, Li M-S, Kaforou M, Langford PR, Levin M (2020) Основанный на протеомике метод идентификации антигенов в иммунных комплексах. PLoS ONE 15 (12): e0244157. https: // doi.org / 10.1371 / journal.pone.0244157

Редактор: Николас Дж. Мантис, Департамент здравоохранения штата Нью-Йорк, США

Получено: 29 июня 2020 г .; Дата принятия: 3 декабря 2020 г .; Опубликовано: 23 декабря 2020 г.

Авторские права: © 2020 Menikou et al. Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Доступность данных: Все соответствующие данные находятся в рукописи и ее файлах с вспомогательной информацией. Данные масс-спектрометрической протеомики были депонированы в Консорциум ProteomeXchange через репозиторий партнеров PRIDE [37] с идентификаторами набора данных PXD021575 и 10.6019 / PXD021575.

Финансирование: Эта работа частично поддержана Имперским центром биомедицинских исследований Национального института медицинских исследований Великобритании (NIHR) при Имперском колледже (WMNP_P69099, Благотворительный фонд Джавона, Фонд исследования болезни Кавасаки для детей интенсивной терапии Святой Марии.) AJM финансируется через стипендию Wellcome Trust / Imperial College London 4i PhD.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что никаких конкурирующих интересов не существует.

Введение

Иммунные комплексы (ИК) образуются, когда антитела связываются с антигенами. Антиген (ы) могут быть эндогенными, как при аутоиммунных нарушениях, или экзогенными (например, лекарственные препараты, токсины или инфекционные агенты). ИК образуются во время многих воспалительных и инфекционных процессов, и обширная литература документирует их патофизиологическую роль в патологических процессах, как мы ранее рассмотрели [1].ИК выводятся из кровотока путем захвата клетками после связывания Fc-области тяжелой цепи иммуноглобулина с Fc-гамма-рецепторами (FcγR), экспрессируемыми многочисленными клетками (например, тучными клетками, моноцитами, макрофагами, нейтрофилами и базофилами) [2]. Связывание IC с FcγR может приводить либо к активации, либо к подавлению воспалительных клеток в зависимости от типа экспрессируемого гена FCGR [2], а индуцированная IC активация или подавление клеток документирована во многих болезненных процессах [3, 4].ИК также могут осаждаться в тканях, что приводит к местному воспалению или повреждению органов, притоку воспалительных клеток и активации комплемента [5]. Их важность хорошо известна при заболеваниях почек [6]; воспалительные заболевания, такие как ревматоидный артрит [7] и системная красная волчанка; инфекционные заболевания, такие как денге, склерозирующий панэнцефалит, гепатит и злокачественные новообразования [5, 8]. Хотя во многих исследованиях сообщается об идентификации IC во время процессов заболевания, лишь в нескольких исследованиях сообщается об идентификации антигенов внутри IC [9–12].

IC могут содержать любой класс иммуноглобулинов, но в основном включают IgM, IgA и IgG [5]. Основной класс иммуноглобулинов, ответственных за агглютинацию, – это IgM [5]. Методы обнаружения IC обычно основаны на их физико-химических свойствах, таких как размер, класс антител, сродство к специфическим клеточным рецепторам и предрасположенность к фагоцитозу макрофагами [13]. Доступны различные методы для выделения ИС или идентификации элементов, связанных с ИС, но не идентифицирующих их напрямую, и они обобщены в Menikou et al .[1]. Примеры включают способы, которые основаны на присоединении IC к специфическим клеточным рецепторам, таким как рецепторы Fc, связыванию с тромбоцитами или макрофагами или связыванию с рецепторами компонента 3 комплемента на клетках Raji. Другие методы включают связывание растворимых комплексов с C1q [5] или добавление радиоактивно меченных антител против человеческого IgG для определения количества связанных IC [14]. Дополнительные методы включают обнаружение IC по их способности агглютинировать тромбоциты [15, 16], гель-фильтрацию с использованием сефарозы 6B [17] или радиоактивно меченый C1q в сочетании с преципитацией полиэтиленгликоля (PEG) для удаления свободного C1q [18].Также использовались методы с использованием меченых агрегированных IgG и меченых макрофагов для изучения ингибирования IC [19]. Примеры методов прямой идентификации IC включают очистку с помощью магнитных шариков (белок G или белок A) с иммобилизованным белком G с последующим анализом тандемной масс-спектрометрии с помощью наножидкостной хроматографии (LC MS / MS) [9, 20–22]. Однако при использовании магнитных шариков существует возможность неспецифического связывания белков и чувствительность обнаружения идентифицированных антигенов считается низкой [9, 20].

ИК могут быть осаждены из сыворотки с использованием ПЭГ [13], и позже было подтверждено, что низкие концентрации ПЭГ избирательно осаждают ИК с минимальным количеством свободного IgG, вероятно, из-за эффектов стерического затруднения [23, 24]. Большие белки или комплексы осаждаются PEG путем стерического исключения только в том случае, если они окружены линейными цепями PEG [25, 26]. Несмотря на то, что доступны многочисленные методы восстановления IC с помощью преципитации PEG [5, 7, 23–32], очень мало исследований идентифицировали антиген внутри IC.

Здесь мы представляем метод, который позволяет извлекать ИК из сыворотки, а также выделять и идентифицировать антиген, который связан с ИК. Мы проверили эффективность метода с искусственно созданными комплексами иммуноглобулина и пептидов вируса гриппа и сравнили эксклюзионную и аффинную хроматографию с обычным осаждением ПЭГ для выделения IC, связанных с ЖХ-МС / МС для идентификации антигена (рис. 1). . В обоих случаях мы обнаружили белки гриппа в выделенных фракциях.Мы также охарактеризовали молекулы иммуноглобулинов и другие белки, которые были выделены.

Материалы и методы

Сбор образцов

Сыворотка была получена из венозной крови семи здоровых взрослых доноров. Конкретное одобрение настоящего исследования было дано Центральным офисом комитетов по этике исследований, St Mary’s NHS Trust, Великобритания, под номером REC 12 / WA / 0196 с проектом R13062 банка тканей Imperial College Healthcare. Устное информированное согласие было получено от здоровых добровольцев во время экспериментов.Все добровольцы впоследствии дали письменные подтверждения о своем устном согласии, и эти подтверждения были поданы вместе с Примечанием к файлу, приложенным к файлу места проведения исследования и подписанным исследователем, что соответствует утверждению этических норм. Все семь добровольцев были вакцинированы гриппозной вакциной Split Virion BP 2014/2015 (штаммы: A / California / 7/2009 (h2N1), A / Texas / 50/2012 (h4N2) и B / Massachusetts / 2/2012 от Sanofi Pasteur ) за 6–10 недель до сбора образца.В дополнение к семи добровольцам, указанным выше, сыворотка от двух здоровых людей, иммунизированных вакциной Split Virion BP 2015/2016 (A / California / 7/2009 (h2N1) pdm09, A / Switzerland / 971593/2013 (h4N2), B / Phuket / 3073/2013) за 6 месяцев до сбора сыворотки. Критерии включения добровольцев заключались в предварительной вакцинации противогриппозной вакциной за 6–10 недель до сбора образцов, а критерии исключения заключались в том, что добровольцы не болели гриппоподобным или другим заболеванием и не принимали никаких лекарств.Возраст добровольцев составлял от 20 до 49 лет. Десять пациентов с лихорадкой в ​​течение 10 дней после начала лихорадки были набраны в Калифорнийский университет Сан-Диего (UCSD) с согласия родителей и одобрения местного комитета по этике исследований (Программа защиты исследований человека № 140220). В таблице 1 представлена ​​дополнительная информация о демографических характеристиках пациентов с лихорадкой.

Пробоподготовка

Цельную венозную кровь добровольцев собирали в пробирки для разделения сыворотки (SST) II (Becton Dickinson), выдерживали при комнатной температуре (RT) в течение 30 минут и центрифугировали при 4 ° C при 3000 g в течение 10 минут для сыворотки. разделение и восстановление.

In vitro IC были созданы путем добавления 40 мкл противогриппозной вакцины к 160 мкл сыворотки. Для исследований преципитации ПЭГ оценивали два разных объема вакцины против гриппа – 4 мкл и 40 мкл. Сыворотку и вакцину против гриппа смешивали, инкубировали при 37 ° C в течение 1 часа для связывания антитела с антигеном, а затем обрабатывали либо эксклюзионной хроматографией (SEC), либо преципитацией PEG.

Выделение ИС из сыворотки крови человека

SEC.

Сыворотка, содержащая вакцину против гриппа, как указано выше, фракционировали на предварительно заполненной колонке Tricorn Superdex 200 10/300 GL (GE Healthcare), присоединенной к хроматографической системе AKTA purifier 10 (GE Healthcare).Образцы загружали и элюировали в буфере 50 мМ NaPO _4, , 150 мМ NaCl (pH 7,0). Элюирование образца контролировали по поглощению в ультрафиолетовом (УФ) диапазоне 280 нм. Стандарты молекулярной массы (High Molecular Weight Kit, GE Healthcare) использовали для построения калибровочных кривых. Все фракции после пустого объема (24 мл) были собраны.

Осаждение ПЭГ.

Равные объемы 200 мкл сыворотки и 6% PEG 6000 (BDH) были смешаны и растворены в боратном буфере, содержащем 100 мМ борной кислоты (Sigma Aldrich), 75 мМ NaCl (BDH), 25 мМ тетрабората натрия (Sigma Aldrich) и статически инкубировали при 4 ° C в течение ночи.Полученный осадок центрифугировали при 2000 g в течение 20 минут при 4 ° C. После декантации супернатанта осадки промывали один раз 400 мкл раствора ПЭГ той же конечной концентрации (3%). Супернатант декантировали и осадок растворяли в 200 мкл 1x фосфатного буферного раствора (PBS) (Sigma Aldrich), который оставляли стоять при 4 ° C в течение ночи и хранили при -80 ° C до анализа.

SDS-PAGE.

Образцы после осаждения ПЭГ разделяли на полиакриламидных гелях; Мини-гели с 3–8% трис-ацетатом 1.5 мм (Life Technologies). Десять микролитров предварительно окрашенного высокомолекулярного стандарта белка HiMark (HMW) (Life Technologies) использовали на один гель для определения молекулярной массы белков, которые были загружены в мини-гели с трис-ацетатом.

Белковая окраска.

После миграции гели окрашивали набором для обратимого окрашивания цинком (Thermo Fisher Scientific), а затем переносили на нитроцеллюлозную мембрану для вестерн-блоттинга.

Аффинная хроматография.

Для дальнейшей очистки белков во фракциях, собранных с помощью SEC, два начальных пика SEC были объединены по отдельности и нанесены отдельно на 5 мл колонку HiTrap Protein G (GE Healthcare) в 20 мМ натрий-фосфатном буфере (pH 7.0). Образцы элюировали 0,1 М глицин-HCl (pH 2,7) буфером и нейтрализовали 1 М трис-HCl буфером (pH 9,0).

Концентрация белка.

Мембраны для центробежных фильтров (GE Healthcare) были приготовлены в соответствии с инструкциями производителя. Мембраны промывали деионизированной водой (вода Milli-Q, чистота для ВЭЖХ, Acros). Использовали мембраны Vivaspin 20 с отсечкой по молекулярной массе 3000 (MWCO). Каждый образец центрифугировали при 5,000 g в течение 15 минут при 4 ° C с использованием ротора с поворотным ковшом.

Количественное определение белка.

Для количественного определения общего белка в образцах, осажденных ПЭГ, использовали Coomassie Plus (Pierce). Соблюдали стандартный протокол микропланшетов (рабочий диапазон = 100–1 500 мкг / мл). Поглощение при 595 нм каждой лунки определяли с использованием настраиваемого считывающего устройства для микропланшетов VERSAmax.

Вестерн-блоттинг.

Для обнаружения белков гриппа образцы денатурировали и подвергали электрофорезу в 3–8% трис-ацетатных гелях (Thermo Fisher Scientific).Белки переносили на поливинилидендифторидную мембрану (Thermo Fisher Scientific), зондировали первичными и вторичными антителами, конъюгированными с пероксидазой хрена (HRP), а затем детектировали с помощью ферментных хемилюминесцентных реагентов (GE Healthcare). Первичное антитело, используемое для иммуноблоттинга, представляло собой кроличий поликлональный нуклеокапсидный белок против вируса h2N1 гриппа A (Ab104870, Abcam). Вторичное антитело представляло собой козий антикроличий иммуноглобулин HRP (P0448, Dako). Вакцина против гриппа (Split Virion BP 2015/2016) использовалась в качестве положительного контроля.

Секвенирование белков.

После количественного определения белка образцы, полученные после аффинной хроматографии и преципитации ПЭГ, секвенировали с помощью ЖХ-МС / МС в лаборатории протеомики Бристольского университета (Великобритания) путем расщепления в геле [33].

Биоинформатический анализ

Данные масс-спектрометрии анализировали с помощью MaxQuant 1.6.6.10 [34]. Вкратце, поиск спектров проводился по протеому человека UniProt (февраль 2019 г.), последовательностям иммуноглобулинов (январь 2018 г., базы данных Kabat и NCBI) из базы данных abYisis (проф. Эндрю Мартин, Personal Communication and [35]) и стандартной базе данных о контаминантах MaxQuant.Трипсин был выбран как фермент с полной специфичностью и до двух пропущенных расщеплений. Допуск по массе предшественника пептида был установлен на уровне 10 частей на миллион, а допуск на МС / МС был установлен на 0,5 Да. Критерии поиска включали карбамидометилирование цистеина (+57,0214) как фиксированную модификацию и окисление метионина (+15,9949) как переменную модификацию. Использовалась абсолютная количественная оценка на основе интенсивности (iBAQ). Матч между запусками был активирован с настройками по умолчанию. Коэффициент ложного обнаружения был установлен на уровне 0,01 для пептидов и 1 для белков (для предотвращения исключения вариабельных пептидов иммуноглобулина, которые могут быть распределены между многими последовательностями белков).

Последующий анализ проводился в R для Windows 3.5.1 [36]. Полные названия генов для белков UniProt были определены InterMineR. Индивидуальные белки были классифицированы с использованием сопоставления строк как кератин, трипсин, комплемент, альбумин, фибриноген, иммуноглобулин, другие, контаминант и грипп. Затем индивидуальные пептиды были классифицированы в соответствии с их соответствующими белками. При совпадении нескольких классов выбирался первый из предшествующего списка.

iBAQ нормализует общую интенсивность MS1 на белок на основе количества триптических пептидов, приближая молярные отношения белков в образцах.Мы стремились рассчитать массовые отношения и пересчитать результаты иммуноглобулинов, используя только пептиды константной области. Поэтому мы рассчитали модифицированные значения на основе iBAQ на пептидном уровне.

Пептиды иммуноглобулина

были классифицированы как принадлежащие к константной области на основании расстояния редактирования, равного двум или меньше, до последовательности постоянного иммуноглобулина человека UniProt (приблизительный алгоритм расстояния Левенштейна).

Для каждого белка, включая константные последовательности иммуноглобулина, рассчитывали количество триптических пептидов на кДа.Нормализованные интенсивности пептидов рассчитывали путем деления исходных интенсивностей на соответствующие соотношения. Интенсивность пептида иммуноглобулина непостоянной области была установлена ​​равной нулю. Затем нормализованные постоянные интенсивности пептидов иммуноглобулина умножали на соотношение между молекулярной массой (MW) (подкласса) и его константной областью. Если пептид соответствует нескольким подклассам иммуноглобулинов, брали среднее значение каждой поправки.

Нормализованные интенсивности были суммированы по классам и выборкам, при этом общая сумма для каждой выборки нормализовалась, чтобы соответствовать доле интенсивности MS1, принадлежащей идентифицированным характеристикам.Таким образом, различия в скорости идентификации между образцами остаются информативными.

Данные масс-спектрометрической протеомики были депонированы в Консорциум ProteomeXchange через репозиторий партнеров PRIDE [37] с идентификаторами набора данных PXD021575 и 10.6019 / PXD021575.

Результаты

Анализ образования белковых комплексов с помощью SEC, SDS-PAGE гелей, окрашивания белков и вестерн-блоттинга

SEC смешанной сыворотки с вирусом гриппа выявила устойчивый образец пиков, представляющих элюированные белки на хроматограмме; типичный показан на рис.Были идентифицированы три основных пика: пик с. 600 кДа (HMW1), отдельный пик> 150 кДа (HMW2) и пик альбумина (67 кДа). SDS-PAGE с последующим вестерн-блоттингом для определения IgG и IgM показал, что пик HMW1 в основном содержал IgM, а HMW2 содержал IgG. Однако IgG также был обнаружен в HMW1, что позволяет предположить наличие IC в комплексах HMW.

Аффинная хроматография выбранных фракций из SEC

Для дальнейшей очистки IgM, IgG и других возможных антигенов, связанных с иммуноглобулинами, перед секвенированием пептидов была проведена аффинная хроматография.Был создан пул фракций из SEC, который соответствовал пикам HMW1 и HMW2, и каждый пул был нанесен на колонку HiTrap Protein G (рис. 2). Несвязанные белки смывали, а связанные белки извлекали элюирующим буфером с pH 2,7 (0,1 М глицин-HCl). Собирали как связанные, так и элюированные фракции, элюированные фракции нейтрализовали для восстановления pH до 7,3, а затем концентрировали до исходного объема.

Масс-спектрометрический анализ и обработка данных

Четыре пула фракций выделенных белков были получены фракционированием с помощью аффинной хроматографии: связанные и несвязанные фракции HMW1; связанные и несвязанные пулы пиков HMW2 (рис. 2).

После диализа и концентрирования объединенных фракций до их исходного объема проводили расщепление в растворе на 1 мкг белка и образцы анализировали с помощью ЖХ-МС / МС.

Идентификация антигенов гриппа методом вестерн-блоттинга после SDS-PAGE

После денатурации и разделения белков, осажденных ПЭГ, в 3–8% гелях трис-ацетатного мини-SDS-PAGE белки визуализировали путем окрашивания кумасси синим и сравнивали с белковым профилем непреципитированной сыворотки и белками вакцины против гриппа.

Фиг. 3 показывает, что белки гриппа были обнаружены только в образцах, осажденных PEG с добавкой вакцины против гриппа, и в образцах, осажденных PEG, где концентрация вакцины была самой высокой (40 мкл, дорожки 4 и 10). Дополнительные полосы, которые присутствовали в контрольных образцах, обусловлены неспецифической реактивностью, поскольку первичное антитело вырабатывается у кролика и имеет IgG в качестве изотипа.

Рис. 3. Вестерн-блоттинг h2N1 преципитатов PEG из двух контрольных образцов здоровых взрослых, сывороток здоровых взрослых, PBS в качестве отрицательного контроля и вакцины против гриппа в качестве положительного контроля показал, что PEG может преципитировать IC in vitro.

Lane one – это стандарт белка Precision Plus в диапазоне от 31 до 460 кДа. Три мкг белка на дорожку наносили на 3-8% трис-ацетатный денатурирующий гель SDS-PAGE, наносили блоттинг на нитроцеллюлозную мембрану и инкубировали с кроличьим анти-h2N1 вирусом гриппа A (первичное антитело), ​​козьим анти-кроличьим иммуноглобулином HRP (вторичный антитела) и окрашивали с помощью набора ECL. D обозначает донор, V обозначает вакцину, а отрицательный контроль (дорожка 7) обозначает PEG с PBS. Дорожка 15 представляет собой положительный контроль, вакцину против гриппа.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0244157.g003

Показав, что антигены гриппа можно обнаружить с помощью вестерн-блоттинга в вакцине, осажденной ПЭГ, в двух образцах донорской сыворотки (рис. 3, дорожки 4 и 10), дополнительные эксперименты были выполнены для сравнения обнаружения антигенов гриппа в сыворотке с добавкой вакцины без преципитации ПЭГ. Как показано на фиг.4, антиген гриппа был обнаружен с помощью вестерн-блоттинга только в образцах сыворотки с добавлением вакцины против гриппа, которые были подвергнуты преципитации PEG (дорожки 6 и 12), а не тогда, когда использовалась неосажденная сыворотка с добавлением вакцины той же концентрации. ни в необработанном (дорожки 5 и 11), ни в отрицательном контроле (дорожки 12 и 13).

Рис. 4. Вестерн-блоттинг h2N1 сыворотки здорового взрослого человека и сыворотки с добавлением вакцины, преципитата ПЭГ из двух образцов здоровых взрослых доноров показал, что антиген гриппа обнаруживался только в образцах преципитированной ПЭГ сыворотки с добавкой вакцины.

Дорожка 1 геля представляет собой стандарт белка Precision Plus в диапазоне от 31 до 460 кДа. Три мкг белка на дорожку наносили на 3-8% трис-ацетатный денатурирующий гель SDS-PAGE, наносили блоттинг на нитроцеллюлозную мембрану и инкубировали с кроличьим анти-h2N1 вирусом гриппа A (первичное антитело), ​​козьим анти-кроличьим иммуноглобулином HRP (вторичный антитела) и окрашивали с помощью набора ECL.D означает донор, V – вакцина. Отрицательный контроль (дорожка 13) представляет собой ПЭГ с H ₂ 0 и 40 мкл вакцины, а отрицательный контроль (дорожка 14) представляет собой ПЭГ с PBS.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0244157.g004

Эти эксперименты вестерн-блоттинга с использованием антител против h2N1 (рис. 3) подтвердили, что преципитация ПЭГ может захватывать белки гриппа в ИК (дорожки 4 и 10), и ни один из отрицательных контролей (необработанная сыворотка) не показал обнаруживаемых полос (дорожки 2 и 8).Сыворотка, в которую было добавлено 40 мкл вакцины и не подвергавшаяся преципитации PEG, имела едва обнаруживаемые полосы. Таким образом, мы пришли к выводу, что осаждение ПЭГ концентрировало белки гриппа во время осаждения ИК.

Масс-спектрометрический анализ

1. Определение классов белков.

Мы применили модифицированный подход iBAQ для получения количественной оценки различных классов белков в образцах на основе относительной массы (рис. 5A). Доля интенсивности MS1, принадлежащая идентифицированным признакам, самая низкая (около 30%) в образцах с наибольшей долей иммуноглобулина (колонки для элюента Control & V HMW2 и колонки для элюента Febrile HMW2 на рис. 5A), что ожидается из-за ограниченной идентификации признаков. ожидается для вариабельных пептидов иммуноглобулина.

Рис. 5. Количественная оценка различных классов белков и идентификация иммуноглобулинов.

V указывает образцы, в которые была добавлена ​​вакцина против гриппа. HMW1 относится к пику с наивысшей молекулярной массой, а HMW2 относится ко второму пику. Элюент Febrile HMW1, промывка и элюент Febrile HMW2 и промывка не содержат вакцину. (A) Относительные количества различных классов белков, рассчитанные с помощью модифицированного подхода на основе iBAQ. Общая высота каждой полосы – это доля интенсивности MS1, принадлежащая каждому идентифицированному объекту.Образцы поступают от двух доноров (донора 1 и донора 2). (B) Пропорция массы иммуноглобулина по классам, оцененная с использованием модифицированного подхода на основе iBAQ и экстраполированная только на основе константных пептидов. HA: тяжелая цепь IgA, HD: тяжелая цепь IgD, HE: тяжелая цепь IgE, HG: тяжелая цепь IgG и HM: тяжелая цепь IgM.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0244157.g005

Наибольшая доля иммуноглобулина определена в пике HMW2 от SEC, который был элюирован из аффинной колонки (94% и 98%).Несвязанные фракции имеют низкие доли IgG (11% и 29%), что указывает на то, что колонка HiTrap Protein G эффективно связывает IgG. Комплемент эффективно прошел при промывании (0,2% и 0,5% в элюенте против 21% и 34% при промывке).

Элюанты HMW1, которые должны быть обогащены IgM и IC, также имели высокие доли иммуноглобулина (76% и 82%), и промывки были аналогичным образом истощены (19% и 27%). Компоненты комплемента были в целом в низком количестве и в основном перешли в элюент (0.4% и 0,9% против 7% и 10%).

Осадки ПЭГ содержали промежуточные пропорции иммуноглобулина (38–47%), а другим основным компонентом был комплемент (27–44%). Доля иммуноглобулина была увеличена в пробах с добавлением вакцины по сравнению с контролем (46% и 47% против 38% и 41%).

IgG преобладали в элюенте HMW2 (99,4% и 99,7%) и почти отсутствовали при фебрильном промывании (2%) (рис. 5B). При промывании, вызванном гриппом, большая часть иммуноглобулинов составляла IgG.Это говорит о том, что столбец мог быть насыщенным. Остальное в обоих случаях было преимущественно IgM. IgG также преобладали в элюентах HMW1 (85% и 89%), при этом присутствовали IgM (6% и 9%) и IgA (4% и 6%). В промывках преобладали IgM и IgA.

Идентификация подклассов IgG (HG1, HG2, HG3, HG4) была дополнительно изучена (рис. 6). Некоторые пептиды нельзя однозначно отнести к подклассу (на их долю приходится 51–80% расчетной массы). IgG1, как и ожидалось, был в наибольшем количестве во всех образцах.Примечательно, что в преципитатах PEG доля IgG1 была увеличена в образцах с добавкой вакцины против гриппа по сравнению с образцами донора PEG 1 и 2, в которые не добавлялась добавка (83% и 90% против 68% и 58% соответственно).

Рис. 6. Доля расчетной массы IgG по подклассам (без учета неспецифических пептидов).

Образцы, осажденные ПЭГ, поступают от двух доноров (D1 и D2), а V указывает образцы, в которые была добавлена ​​вакцина против гриппа. HMW1 относится к пику с наивысшей молекулярной массой, а HMW2 относится ко второму пику.Элюент Febrile HMW1, промывка и элюент Febrile HMW2 и промывка не содержат вакцину. HG1: тяжелая цепь IgG подкласса 1, HG2: тяжелая цепь IgG подкласса 2, HG3: тяжелая цепь IgG подкласса 3 и HG4: тяжелая цепь IgG подкласса 4.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0244157.g006

2. Идентификация белков гриппа.

Пептиды гриппа были обнаружены во всех пробах с добавкой вакцины (рис. 7), причем наибольшее количество спектров было у преципитатов ПЭГ.В элюенте фракции элюента HMW1 было идентифицировано больше спектров, сопоставленных с пептидами гриппа, что позволяет предположить, что они были захвачены в IC. Расчетный массовый вклад белка гриппа также был выше в образцах с добавкой ПЭГ (2,4% и 3,2%), чем в элюенте HMW1 (0,02%). Пять спектров, которые соответствовали гриппу в образцах без добавок, соответствовали пептидам гриппа с высоким содержанием в образцах с добавками, что свидетельствует о некотором потенциальном пересечении образцов.

Рис. 7.

Количество спектров MS2, присвоенных пептидам гриппа в каждом образце. Функции MS1, соответствующие запуску, исключаются. Образцы поступают от двух доноров (D1 и D2). V указывает образцы, в которые была добавлена ​​вакцина против гриппа. Элюент SEC-AP V HMW1, промывка и элюент и промывка SEC-AP HMW2 являются контрольными образцами с добавлением вакцины. В элюант SEC-AP Febrile HMW1, для промывки и для элюента SEC-AP Febrile HMW2 и для промывки вакцина не добавляется.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0244157.g007

Обсуждение

Последовательность SEC с последующей аффинной хроматографией и ЖХ-МС / МС успешно извлекла и идентифицировала пептиды гриппа с добавками.Пептиды гриппа не были идентифицированы в контрольной группе без добавок с лихорадкой, за исключением пяти пептидов в одной фракции, скорее всего, перенесенных из образца с добавкой. Контрольные здоровые взрослые люди, которым вводили вакцину против гриппа, использовали для подтверждения возможности воссоздания in vitro IC и идентификации антигена внутри IC.

Секвенирование белков с помощью ЖХ-МС / МС выявило пептиды гриппа, что указывает на то, что процедура воссоздания IC in vitro была успешной.Результаты экспериментов с использованием сывороток здоровых взрослых людей из контрольной группы, ранее иммунизированных противогриппозной вакциной, которые были дополнены вакциной против гриппа для воссоздания IC in vitro , выявили присутствие антигена гриппа в пулах HMW с помощью аффинной хроматографии. Идентификация антигена гриппа главным образом во фракции очищенного белка G с наивысшей молекулярной массой (HMW1) подтверждает их присутствие и восстановление после IC.

Хотя комбинация SEC и аффинной хроматографии привела к высокообогащенным фракциям иммуноглобулина с совместным выделением белков гриппа, связанных с иммуноглобулином, процедура медленная и не подходит для высокопроизводительного анализа.Мы обнаружили, что более простой метод преципитации ПЭГ, хотя и осаждает другие высокомолекулярные белки, также успешно восстанавливает белки гриппа, связанные с иммуноглобулином. Вестерн-блоттинг показал, что осаждение только вакцины против гриппа было ограниченным. Таким образом, процедура PEG больше подходит для анализа большого количества отдельных образцов, тогда как SEC / аффинная очистка может быть более подходящей для идентификации антигенов в большом пуле образцов.

Мы показали, что с помощью нашей процедуры можно идентифицировать антиген гриппа внутри IC, продуцированных in vitro после добавления вакцины в образец.Эта последовательность экспериментов может обогащать и обнаруживать антигены внутри IC.

Существуют разногласия относительно того, предпочтительно ли PEG осаждает только циркулирующие IC. Наши результаты показали, что это не так и согласуется с другими более ранними исследованиями [31]. По нашим результатам, в образцах присутствовали осажденные ПЭГ белки и, в частности, IgM и IgG, без in vitro IC. Помимо иммунных белков, ряд исследований продемонстрировал, что сыворотки, осажденные ПЭГ, содержат не только свободные иммуноглобулины и C3, но и другие белки, такие как альбумин и фибронектин [7, 38].

Общий механизм действия ПЭГ еще не изучен, но его можно использовать для осаждения белков из сложных смесей. Эксперименты, описанные в этой статье, показывают, что этот простой и хорошо зарекомендовавший себя подход может быть использован для восстановления IC и идентификации антигена в комплексах. Осаждение ПЭГ – простой метод; он не включает много шагов, которые могут привести к заражению, и имеет потенциальные преимущества при поиске неизвестного антигена. Например, ПЭГ не денатурирует белки в такой степени, как другие органические растворители, и ПЭГ используется в низкой концентрации (3%), поскольку большая его часть находится в надосадочной жидкости раствора [26].Результаты LC MS / MS показали, что преципитация PEG предпочтительно осаждает иммуноглобулин и комплемент независимо от присутствия IC. Добавление вакцины против гриппа привело к большему преципитации иммуноглобулина и увеличению доли IgG1, что согласуется с образованием IC, поскольку известно, что ответ на IIV (инактивированная вакцина против гриппа) в основном представляет собой IgG1 [39–41].

В заключение мы показали, что с помощью этой процедуры можно идентифицировать антиген гриппа внутри IC, продуцированных in vitro после добавления вакцины в образец.Процедура может быть полезна для идентификации антигена-мишени при многих заболеваниях, связанных с внутренними клетками.

Благодарности

Мы благодарим добровольцев и пациентов, участвовавших в этом исследовании. Мы также благодарим профессора Дж. К. Бернса и доктора К. Симидзу с кафедры педиатрии Калифорнийского университета в Сан-Диего, США, без чьей помощи у нас никогда не было бы образцов, необходимых для этого исследования. Мы благодарим доктора Г. Мартенса, медицинский факультет, отделение инфекционных заболеваний, Имперский колледж Лондона за ее выдающуюся поддержку метода очистки белка.Мы также благодарим доктора М.С. Гамильтона, доктора В. Райта, доктора Дж. Херберга и других членов Отделения детских инфекционных заболеваний Департамента инфекционных заболеваний Имперского колледжа Лондона за обсуждения на протяжении всего обсуждения. Мы благодарим доктора К. Дж. Хисома из лаборатории протеомики Бристольского университета за услуги масс-спектрометрии.

Ссылки

1. 1. Menikou S, Langford PR, Levin M. Болезнь Кавасаки: пересмотр роли иммунных комплексов. Фронт в Иммунол. 2019; 10: (1156).pmid: 31263461
2. 2. Nimmerjahn F, Ravetch JV. Рецепторы Fcgamma как регуляторы иммунных ответов. Nat Rev Immunol. 2008. 8 (1): 34–47. Epub 2007/12/08. pmid: 18064051.
3. 3. Роннелид Дж., Тейде А., Матссон Л., Нильссон-Экдал К., Нильссон Б. Иммунные комплексы из сывороток СКВ индуцируют продукцию IL10 нормальными мононуклеарными клетками периферической крови с помощью FcgammaRII-зависимого механизма: последствия для возможного порочного цикла, поддерживающего гиперактивность В-клеток при СКВ.Ann Rheum Dis. 2003. 62 (1): 37–42. Epub 2002/12/14. pmid: 12480667; PubMed Central PMCID: PMC1754302.
4. 4. Цзян К., Чен И, Сюй К.С., Джарвис Дж. Активация Т-клеток растворимыми иммунными комплексами, несущими C1q: значение для патогенеза ревматоидного артрита. Clin Exp Immunol. 2003. 131 (1): 61–7. Epub 2003/01/10. pmid: 12519387; PubMed Central PMCID: PMC1808608.
5. 5. Чиа Д., Барнетт Е.В., Ямагата Дж., Кнутсон Д., Рестиво С., Ферст Д. Количественное определение и характеристика растворимых иммунных комплексов, осажденных из сыворотки полиэтиленгликолем (ПЭГ).Clin Exp Immunol. 1979. 37 (3): 399–407. Epub 1979/09/01. pmid: 315842; PubMed Central PMCID: PMC1537790.
6. 6. Левинский Р.Ю. Роль циркулирующих иммунных комплексов при заболеваниях почек. J Clin Pathol. 1981; 34 (11): 1214–22. Epub 1981/11/01. pmid: 6459344; PubMed Central PMCID: PMC494465.
7. 7. Матссон Л., Лампа Дж., Муллазехи М., Роннелид Дж. Иммунные комплексы из синовиальной жидкости при ревматоидном артрите индуцируют FcgammaRIIa-зависимую и коррелированную с ревматоидным фактором продукцию фактора некроза опухоли-альфа мононуклеарными клетками периферической крови.Arthritis Res Ther. 2006; 8 (3): R64. pmid: 16569263; PubMed Central PMCID: PMC1526644.
8. 8. Теофилопулос А.Н., Уилсон С.Б., Диксон Ф.Дж. Радиоиммунный анализ клеток Раджи для обнаружения иммунных комплексов в сыворотке крови человека. J Clin Invest. 1976; 57 (1): 169–82. pmid: 128562.
9. 9. Айбара Н., Ичиносе К., Баба М., Накадзима Х., Сато К., Атараси Р. и др. Протеомный подход к профилированию антигенов иммунных комплексов в образцах спинномозговой жидкости пациентов с аутоиммунными заболеваниями центральной нервной системы.Clin Chim Acta. 2018; 484: 26–31. Epub 2018.05.19. pmid: 29775619.
10. 10. Койл П.К. Обнаружение и выделение иммунных комплексов в спинномозговой жидкости при рассеянном склерозе. J Neuroimmunol. 1987. 15 (1): 97–107. Epub 1987/05/01. pmid: 3571487.
11. 11. Przybylski G, Golda R. Исследование встречаемости Mycobacterium tuberculosis антигенов в циркулирующих иммунных комплексах, выделенных из сыворотки крови больных туберкулезом. Med Sci Monit. 2014; 20: 6–10.Epub 2014/01/05. PubMed Central PMCID: PMC38. pmid: 24384554
12. 12. Манник М., Нарделла Ф.А., Сассо Э. Ревматоидные факторы в иммунных комплексах больных ревматоидным артритом. Springer Semin Immunopathol. 1988. 10 (2–3): 215–30. Epub 1988/01/01. pmid: 3055378
13. 13. Морроу В.Дж., Уортон М., Стрикер Р.Б., Леви Дж.А. Циркулирующие иммунные комплексы у пациентов с синдромом приобретенного иммунодефицита содержат ретровирус, связанный со СПИДом. Clin Immunol Immunopathol.1986. 40 (3): 515–24. Epub 1986/09/01. pmid: 3731542.
14. 14. Hay FC, Nineham LJ, Roitt IM. Стандартный анализ для обнаружения иммунных комплексов известного класса иммуноглобулинов с использованием твердой фазы C1q. Clin Exp Immunol. 1976; 24 (3): 396–400. pmid: 6.
15. 15. Myllyla G, Vaheri A, Penttinen K. Обнаружение и характеристика иммунных комплексов с помощью теста агрегации тромбоцитов. II. Циркуляционные комплексы. Clin Exp Immunol. 1971. 8 (3): 399–408. Epub 1971/03/01. pmid: 4102701; PubMed Central PMCID: PMC1712928.
16. 16. Биберфельд Г., Норберг Р. Циркулирующие иммунные комплексы в инфекции Mycoplasma pneumoniae . J Immunol. 1974. 112 (1): 413–5. Epub 1974/01/01. pmid: 4812179.
17. 17. Джуэлл Д.П., Макленнан ИК. Циркулирующие иммунные комплексы при воспалительном заболевании кишечника. Clin Exp Immunol. 1973; 14 (2): 219–26. Epub 1973/06/01. pmid: 4197968; PubMed Central PMCID: PMC1553792.
18. 18. Nydegger UE, Lambert PH, Gerber H, Miescher PA. Циркулирующие иммунные комплексы в сыворотке крови при системной красной волчанке и у носителей антигена гепатита В.Количественное определение путем связывания с радиоактивно меченным C1q. J Clin Invest. 1974. 54 (2): 297–309. Epub 1974/08/01. pmid: 4847246; PubMed Central PMCID: PMC301557.
19. 19. Onyewotu II, Holborow EJ, Johnson GD. Обнаружение и радиоанализ растворимых циркулирующих иммунных комплексов с использованием клеток перитонеального экссудата морских свинок. Природа. 1974. 248 (5444): 156–9. pmid: 4132041
20. 20. Охьяма К., Баба М., Тамай М., Айбара Н., Ичиносе К., Кишикава Н. и др. Протеомное профилирование антигенов в циркулирующих иммунных комплексах, связанных с каждым из семи аутоиммунных заболеваний.Clin Biochem. 2015; 48 (3): 181–5. Epub 2014/12/02. pmid: 25438073.
21. 21. Охьяма К., Хай Н.Т., Йошими Х., Кишикава Н., Нисидзава Дж. Э., Рока Ю. и др. Протеомный профиль циркулирующих иммунных комплексов при хронической болезни Шагаса. Parasite Immunol. 2016; 38 (10): 609–17. Epub 2016/05/26. pmid: 27223052.
22. 22. Охьяма К., Йошими Х., Айбара Н., Накамура Й., Мията Й., Сакаи Х. и др. Анализ иммунного комплекса выявляет специфическое и частое присутствие антигенов иммунного комплекса у пациентов с раком легких: пилотное исследование.Int J Cancer. 2017; 140 (2): 370–80. Epub 2016/09/30. pmid: 27685836.
23. 23. Дигеон М., Лейвер М., Риза Дж., Бах Дж. Ф. Обнаружение циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови человека с помощью упрощенных анализов с полиэтиленгликолем. J Immunol Methods. 1977. 16 (2): 165–83. Epub 1977/01/01. pmid: 881555.
24. 24. Creighton WD, Lambert PH, Miescher PA. Обнаружение антител и растворимых комплексов антиген-антитело осаждением полиэтиленгликолем. J Immunol. 1973; 111 (4): 1219–27.pmid: 4728683
25. 25. Коппок Дж. С., Скотт Д. Л., Картер С. Д., Морленд TM, Робинсон М. В.. Фибронектин в преципитатах полиэтиленгликоля: доказательства его роли в иммунных комплексах. Rheumatol Int. 1986; 6. pmid: 3764306
26. 26. Шарма ВК, Калония ДС. Вызванное полиэтиленгликолем осаждение интерферона альфа-2a с последующей сушкой в ​​вакууме: разработка нового способа получения сухого, стабильного порошка. AAPS PharmSci. 2004; 6 (1): E4. pmid: 15198505
27. 27.Левин М., Holland PC, Nokes TJ, Novelli V, Mola M, Levinsky RJ и др. Взаимодействие иммунного комплекса тромбоцитов в патогенезе болезни Кавасаки и детского полиартериита. BMJ. 1985. 290 (6480): 1456–60. Epub 1985/05/18. pmid: 32; PubMed Central PMCID: PMC1415706.
28. 28. Эльшафи А.И., Ахлин Э., Матссон Л., Эль-Газали Г., Роннелид Дж. Циркулирующие иммунные комплексы (IC) и индуцированные IC уровни GM-CSF повышены у суданских пациентов с острой висцеральной инфекцией Leishmania donovani, проходящих лечение стибоглюконатом натрия: последствия для патогенеза заболевания .J Immunol. 2007. 178 (8): 5383–9. pmid: 17404324
29. 29. Харкисс. Обнаружение иммунных комплексов с помощью нового теста, теста на потребление комплемента преципитацией полиэтиленгликоля (PEG-CC). Clin Exp Immunol. 1979; 36: 117–29. pmid: 111880
30. 30. Rænnelid J, Tejde A, Mathsson L, Nilsson-Ekdahl K, Nilsson B. Иммунные комплексы из сывороток СКВ индуцируют продукцию IL10 нормальными мононуклеарными клетками периферической крови с помощью FcgRII-зависимого механизма: последствия для возможного порочного цикла, поддерживающего гиперактивность В-клеток при СКВ.Ann Rheum Dis. 2003. 62: 37–42. pmid: 12480667
31. 31. Робинсон М. В., Скотт Д. И., Бэкон П. А., Уолтон К. В., Коппок Д. С., Скотт Д. Л.. Какие белки присутствуют в осадках полиэтиленгликоля из ревматической сыворотки? Ann Rheum Dis. 1989. 48: 496–501. pmid: 2742403
32. 32. Чен Й, Ван Х, Ян В., Джин В., Ю В., Ван В. и др. Новый метод осаждения макропролактина полиэтиленгликолем (ПЭГ) для выявления подлинной гиперпролактинемии. Журнал клинического лабораторного анализа.2016: н / д – н / д. pmid: 27219457
33. 33. Кальвопина К., Хинчлифф П., Брем Дж., Хисом К.Дж., Джонсон С., Каин Р. и др. Структурные / механистические сведения об эффективности неклассических ингибиторов бета-лактамаз против клинических изолятов Stenotrophomonas maltophilia с широкой лекарственной устойчивостью. Mol Microbiol. 2017; 106 (3): 492–504. Epub 2017/09/07. pmid: 28876489.
34. 34. Тянова С., Тему Т., Кокс Дж. Вычислительная платформа MaxQuant для протеомики дробовика на основе масс-спектрометрии.Nat Protoc. 2016; 11 (12): 2301–19. Epub 2016/11/04. pmid: 27809316.
35. 35. Swindells MB, Porter CT, Couch M, Hurst J, Abhinandan KR, Nielsen JH, et al. abYsis: интегрированное управление последовательностями и структурой антител, анализ и прогнозирование. J Mol Biol. 2017; 429 (3): 356–64. Epub 2016/08/27. pmid: 27561707.
36. 36. Команда RC. Язык и среда для статистических вычислений. R Фонд статистических вычислений. 2017. Доступно по адресу: https: //www.R-project.org /.
37. 37. Perez-Riverol Y, Csordas A, Bai J, Bernal-Llinares M, Hewapathirana S, Kundu DJ и др. База данных PRIDE и связанные с ней инструменты и ресурсы в 2019 году: улучшение поддержки количественных данных. Исследование нуклеиновых кислот. 2019; 47 (D1): D442 – d50. Epub 2018/11/06. pmid: 30395289; PubMed Central PMCID: PMC6323896.
38. 38. Crowley-Nowick PA, Campbell E, Schrohenloher RE, Mestecky J, Mestecky J, Jackson S. Осадки полиэтиленгликоля в сыворотке содержат большую часть несложных иммуноглобулинов и C3.Иммунол Инвест. 1996. 25 (1-2): 91-101. Epub 1996/01/01. pmid: 8675237
39. 39. Маненти А., Тете С.М., Мон К.Г., Джул-Ларсен А., Джанчекки Е., Монтомоли Е. и др. Сравнительный анализ подкласса IgG к гемагглютинину вируса гриппа A (h4N2) и ответов IgA у детей и взрослых после вакцинации против гриппа. Вакцина. 2017; 35 (1): 191–8. Epub 2016/10/30. pmid: 27789145.
40. 40. Педерсен Г.К., Хошлер К., Ойе Солбак С.М., Бредхольт Г., Патирана Р.Д., Афсар А. и др.Титры сывороточного IgG, но не авидность, коррелируют с ответом нейтрализующих антител после вакцинации против H5N1. Вакцина. 2014. 32 (35): 4550–7. Epub 2014/06/21. pmid: 24950357.
41. 41. Эль-Мадхун А.С., Кокс Р.Дж., Хаахайм Л.Р. Влияние возраста и естественного прайминга на ответы подклассов IgG и IgA после парентеральной вакцинации против гриппа. J Infect Dis. 1999. 180 (4): 1356–60. Epub 1999/09/09. pmid: 10479172.

Обнаружение комплексов антиген-антитело | Микробиология

Цели обучения

• Опишите различные типы анализов, используемых для поиска комплексов антиген-антитело
• Опишите обстоятельства, при которых комплексы антиген-антитело выпадают в осадок из раствора
• Объясните, как антитела в сыворотке крови пациента могут быть использованы для диагностики болезни

Лабораторные тесты для обнаружения антител и антигенов вне организма (например,g., в пробирке) называются анализами in vitro . Когда в растворе присутствуют и антитела, и соответствующие им антигены, мы часто можем наблюдать реакцию преципитации, в которой большие комплексы (решетки) образуются и выпадают из раствора. В следующих нескольких разделах мы обсудим несколько распространенных анализов in vitro .

Реакции преципитина

Видимый комплекс антиген-антитело называется преципитином , а анализы in vitro , которые продуцируют преципитин, называются реакциями преципитации .Реакция преципитации обычно включает добавление растворимых антигенов в пробирку, содержащую раствор антител. Каждое антитело имеет два плеча, каждое из которых может связываться с эпитопом. Когда антитело связывается с двумя антигенами, эти два антигена связываются вместе антителом. Решетка может образовываться, поскольку антитела связывают все больше и больше антигенов вместе, что приводит к преципитации (рис. 1). В большинстве тестов на преципитат используется поликлональная антисыворотка , а не моноклональные антитела , поскольку поликлональные антитела могут связываться с множеством эпитопов, что повышает вероятность образования решетки.Хотя mAb могут связывать некоторые антигены, связывание будет происходить реже, что значительно снижает вероятность образования видимого преципитина.

Рис. 1. Поликлональная антисыворотка связывается с несколькими эпитопами на антигене, что приводит к образованию решетки, которая приводит к видимому преципитину. Моноклональные антитела могут связываться только с одним эпитопом; следовательно, происходит меньшее связывание и обычно не происходит образования решетки.

Количество осадков зависит также от ряда других факторов.Например, преципитация усиливается, когда антитела имеют высокое сродство к антигену. В то время как большинство антител связывают антиген с высокой аффинностью, даже при высокоаффинном связывании используются относительно слабые нековалентные связи, так что индивидуальные взаимодействия часто будут нарушаться и возникать новые взаимодействия.

Кроме того, чтобы образование преципитина было видимым, должно быть оптимальное соотношение антитела к антигену. Оптимальным соотношением антиген: антитело вряд ли будет 1: 1; он может сильно различаться в зависимости от количества эпитопов антигена и класса антитела.Некоторые антигены могут иметь только один или два эпитопа , распознаваемых антисывороткой, тогда как другие антигены могут иметь много разных эпитопов и / или несколько экземпляров одного и того же эпитопа на одной молекуле антигена.

Рисунок 2 иллюстрирует, как соотношение антигена и антитела влияет на количество преципитации. Для достижения оптимального соотношения антиген медленно добавляют к раствору, содержащему антитела, и качественно определяют количество преципитата. Первоначально антигена недостаточно для образования видимой решетки; это называется зоной избытка антител.По мере добавления антигена реакция входит в зону эквивалентности (или зону эквивалентности), где происходит как оптимальное взаимодействие антиген-антитело, так и максимальное осаждение. Если бы было добавлено еще больше антигена, количество антигена стало бы чрезмерным и фактически уменьшило бы количество преципитации.

Рис. 2. Поскольку антиген медленно добавляется к раствору, содержащему постоянное количество антител, количество преципитина увеличивается по мере приближения отношения антитела к антигену к зоне эквивалентности и уменьшается, когда доля антигена превышает оптимальное соотношение.

Подумай об этом

• Что такое осадок?
• Почему поликлональные антисыворотки лучше вызывают реакцию преципитации?

Кольцевой тест с преципитином

Различные методы позволяют нам использовать образование преципитина для количественной оценки либо концентрации антигена, либо количества антитела, присутствующего в антисыворотке. Одним из таких методов является кольцевой тест преципитина (рис. 3), который используется для определения относительного количества антиген-специфических антител в образце сыворотки.Для проведения этого теста готовят набор пробирок, добавляя раствор антигена на дно каждой пробирки. В каждую пробирку поступает одинаковый объем раствора, а концентрация антигенов постоянна (например, 1 мг / мл). Затем к раствору антигена в каждой пробирке добавляют глицерин с последующим серийным разведением антисыворотки. Глицерин предотвращает смешивание антисыворотки с раствором антигена, позволяя связывать антиген-антитело только на границе раздела двух растворов.Результатом является видимое кольцо преципитина в пробирках, в которых соотношение антиген-антитело находится в зоне эквивалентности. Это самое высокое разведение с видимым кольцом используется для определения титра антител. Титр – это величина, обратная наибольшему разведению, показывающему положительный результат, выраженная в виде целого числа. На рисунке 3 титр равен 16.

Хотя измерение титра не говорит нам в абсолютном выражении, сколько антител присутствует, оно дает меру биологической активности, которая часто более важна, чем абсолютное количество.В этом примере было бы бесполезно знать, какая масса IgG присутствовала в антисыворотке, потому что существует много различных специфичностей присутствующих антител; но для нас важно знать, какая часть активности антител в сыворотке пациента направлена ​​против интересующего антигена (например, конкретного патогена или аллергена).

Рис. 3. Кольцевой тест на преципитат проводится с использованием стандартного раствора антигена в нижней части пробирки и серийного разведения антисыворотки в верхней части пробирки.Глицерин предотвращает смешивание двух растворов, поэтому осаждение происходит только на границе раздела. Видимое кольцо осадков видно в [латексе] \ frac {1} {4} [/ latex], [latex] \ frac {1} {8} [/ latex] и [latex] \ frac {1} {16} [/ latex] разведения, указывающие на то, что эти концентрации находятся в зоне эквивалентности. Поскольку [latex] \ frac {1} {16} [/ latex] – это самое высокое разведение, в котором наблюдается преципитин, титр является обратным, или 16.

Анализ Оухтерлони

Хотя кольцевой тест с преципитином позволяет получить представление о взаимодействиях антитело-антиген, он также имеет некоторые недостатки.Это требует использования большого количества сыворотки, и следует проявлять большую осторожность, чтобы избежать смешивания растворов и разрушения кольца. Выполнение аналогичного теста в матрице геля агара может свести к минимуму эти проблемы. Этот тип анализа называется по-разному двойной иммунодиффузией или Ouchterlony assay для Orjan Ouchterlony , который впервые описал метод в 1948 году.

Когда агар подвергается высокой очистке, он дает прозрачный бесцветный гель. В геле пробивают отверстия, чтобы сформировать лунки, и в соседние лунки добавляют антиген и антисыворотку.Белки способны диффундировать через гель, и дуги преципитина образуются между лунками в зоне эквивалентности. Поскольку осадок в решетке слишком велик для диффузии через гель, дуги надежно зафиксированы на месте и их легко увидеть (рис. 4).

Хотя сейчас существуют более чувствительные и количественные методы обнаружения взаимодействий антитело-антиген, тест Оухтерлони обеспечивает быстрый и качественный способ определения наличия в антисыворотке антител против определенного антигена.Тест Оухтерлони особенно полезен при поиске перекрестной реактивности . Мы можем проверить антисыворотку против группы близкородственных антигенов и посмотреть, какие комбинации образуют преципитированные дуги.

Рис. 4. Тест Оухтерлони помещает антиген (лунка А) и антисыворотка (лунки с 1 по 5) в гель. Антитела и антиген диффундируют через гель, вызывая образование дуги преципитации в зоне эквивалентности. В этом примере только антисыворотка в лунке 1 содержит антитела к антигену.Образовавшаяся дуга преципитирования стабильна, поскольку решетка слишком велика, чтобы диффундировать через гель. (кредит слева: модификация работы Хиггинса П.Дж., Тонга С., Боренфройнда Э., Окина Р.С., Бендича А.)

Анализ радиальной иммунодиффузии

Анализ радиальной иммунодиффузии (RID) аналогичен анализу Оухтерлони, но используется для точного количественного определения концентрации антигена, а не для сравнения различных антигенов. В этом анализе антисыворотку добавляют в темперированный агар (жидкий агар при температуре чуть выше 45 ° C), который выливают в небольшую чашку Петри или на предметное стекло и дают ему остыть.Лунки вырезают в охлажденном агаре, затем в лунки добавляют антиген и дают ему диффундировать. При взаимодействии антигена и антитела они образуют зону преципитации. Квадрат диаметра зоны преципитации прямо пропорционален концентрации антигена. Измеряя зоны осаждения образцов с известной концентрацией (см. Внешнее кольцо образцов на рисунке 5), мы можем подготовить стандартную кривую для определения концентрации неизвестного раствора.Анализ RID также является полезным тестом для определения концентрации многих белков сыворотки, таких как, среди прочего, белки комплемента C3 и C4.

Рис. 5. В этом анализе радиальной иммунодиффузии (RID) антисыворотка смешивается с агаром перед его охлаждением, и растворы, содержащие антиген, добавляются в каждую лунку в возрастающих концентрациях (лунки 1–4). В лунку 5 добавляют раствор антигена неизвестной концентрации. Зоны преципитации измеряются и наносятся на стандартную кривую для определения концентрации антигена в неизвестном образце.(кредитные круги: модификация работы Кангвы М., Елемана В., Полата А.Н., Горрепати К.Д., Грасселли М., Фернандеса-Лахора М.)

Подумай об этом

• Почему в тесте с преципитированными кольцами образуется преципитиновое кольцо и каковы некоторые причины, по которым кольцо может не образовываться?
• Сравните и сопоставьте методы, используемые в анализе Оухтерлони и в анализе радиальной иммунодиффузии.

Анализы флокуляции

Анализ флокуляции похож на реакцию преципитации, за исключением того, что он включает нерастворимые антигены, такие как липиды.Флокулянт похож на преципитин в том, что имеется видимая решетка из антигена и антитела, но поскольку липиды нерастворимы в водном растворе, они не могут осаждаться. Вместо осаждения в жидкости из пробирки наблюдается флокуляция (пенообразование).

Использование флокуляции для тестирования на сифилис

Сифилис – это инфекция, передающаяся половым путем, которая может вызывать тяжелые хронические заболевания у взрослых. Кроме того, он легко передается от инфицированных матерей их новорожденным во время беременности и родов, что часто приводит к мертворождению или серьезным долгосрочным проблемам со здоровьем младенца.К сожалению, сифилис также сложно диагностировать у будущих мам, поскольку он часто протекает бессимптомно, особенно у женщин. Кроме того, возбудителя, бактерии Treponema pallidum , трудно выращивать на обычных лабораторных средах, и они слишком малы, чтобы их можно было увидеть с помощью обычной микроскопии. По этим причинам предполагаемый диагноз сифилиса обычно подтверждается косвенно в лаборатории с помощью тестов, выявляющих антитела к трепонемным антигенам.

В 1906 году немецкий ученый Август фон Вассерман (1866–1925) представил первый тест на сифилис, основанный на обнаружении антитрепонемных антител в крови пациента.Антитела, обнаруженные в тесте Вассермана, представляли собой антифосфолипидные антитела, неспецифические к T. pallidum . Их присутствие может помочь в диагностике сифилиса, но поскольку они неспецифичны, они также могут приводить к ложноположительным результатам у пациентов с другими заболеваниями и аутоиммунными состояниями. Первоначальный тест Вассермана был модифицирован на протяжении многих лет, чтобы свести к минимуму ложных срабатываний , и теперь известен как тест лаборатории исследования венерических заболеваний, более известный под аббревиатурой VDRL test .

Для проведения теста VDRL сыворотку пациента или спинномозговую жидкость помещают на предметное стекло со смесью кардиолипина (антигенный фосфолипид, обнаруженный в митохондриальной мембране различных патогенов), лецитина и холестерина. Лецитин и холестерин стабилизируют реакцию и уменьшают количество ложноположительных результатов. Анти-трепонемные антитела из сыворотки инфицированного пациента будут связывать кардиолипин и образовывать флокулянт. Хотя тест VDRL более специфичен, чем исходный анализ Вассермана, ложноположительные результаты могут все же возникать у пациентов с аутоиммунными заболеваниями, вызывающими обширное повреждение клеток (например,g., системная красная волчанка ).

Анализ нейтрализации

Чтобы вызвать инфекцию, вирусы должны связываться с рецепторами на клетках-хозяевах. Противовирусные антитела могут нейтрализовать вирусные инфекции, покрывая вирионы, блокируя связывание (рис. 6 в обзоре специфического адаптивного иммунитета). Эта активность нейтрализует вирионы и может привести к образованию больших комплексов антитело-вирус (которые легко удаляются путем фагоцитоза) или путем связывания антитела с вирусом и блокирования его связывания с рецепторами клетки-хозяина.Эта нейтрализующая активность лежит в основе анализов нейтрализации , чувствительных анализов, используемых для диагностики вирусных инфекций.

Рис. 6. В анализе нейтрализации антитела в сыворотке пациента нейтрализуют вирусы, добавленные в лунки, предотвращая образование бляшек. В изображенном анализе лунки с многочисленными бляшками (белыми пятнами) содержат низкую концентрацию антител. Лунки с относительно небольшим количеством бляшек имеют высокую концентрацию антител. (кредит: модификация работы Центров по контролю и профилактике заболеваний)

Когда вирусы инфицируют клетки, они часто вызывают повреждение ( цитопатических эффектов ), которое может включать лизис клеток-хозяев.Цитопатические эффекты можно визуализировать, выращивая клетки-хозяева в чашке Петри, покрывая клетки тонким слоем агара и затем добавляя вирус (см. Выделение, культивирование и идентификация вирусов). Вирус будет очень медленно распространяться через агар. Вирус проникает в клетку-хозяин, размножается (вызывая повреждение клетки), высвобождается из мертвой клетки-хозяина, а затем перемещается в соседние клетки. По мере того, как все больше и больше клеток умирают, образуется бляшек и мертвых клеток (рис. 6).

Во время вирусной инфекции у пациента вырабатывается ответ антител на вирус, и мы можем количественно определить эти антитела, используя анализ уменьшения бляшек .Для проведения анализа на образце сыворотки проводят серийное разведение . Затем каждое разведение смешивают со стандартизированным количеством подозреваемого вируса. Любые вирус-специфические антитела в сыворотке нейтрализуют часть вируса. Затем суспензии добавляют к клеткам-хозяевам в культуре, чтобы позволить любому ненейтрализованному вирусу заразить клетки и образовать бляшки через несколько дней. Титр определяется как величина, обратная наибольшему разведению, показывающая 50% -ное уменьшение бляшек.Титр всегда выражается целым числом. Например, если разведение 1/64 было наивысшим разведением, показывающим 50% уменьшение зубного налета, тогда титр равен 64.

Наличие антител в сыворотке крови пациента не говорит нам о том, инфицирован ли пациент в настоящее время или был инфицирован в прошлом. Текущие инфекции можно определить, подождав две недели и проверив еще один образец сыворотки. Четырехкратное увеличение нейтрализующего титра во втором образце указывает на новую инфекцию.

Подумай об этом

• Если в сыворотке крови пациента содержится большое количество противовирусных антител, ожидаете ли вы увидеть больше или меньше бляшек в тесте нейтрализации?

Иммуноэлектрофорез

Когда у пациента повышен уровень белка в крови или он теряет белок с мочой, клиницист часто назначает анализ на электрофорез в полиакриламидном геле ( PAGE ) (см. «Визуализация и характеристика ДНК, РНК и белка»).Этот анализ сравнивает относительное содержание различных типов белков сыворотки. Паттерны патологического электрофореза белков могут быть дополнительно изучены с помощью иммуноэлектрофореза (IEP) . IEP начинается с запуска СТРАНИЦЫ. Антисыворотки против выбранных белков сыворотки добавляются во впадины, идущие параллельно дорожке электрофореза, образуя дуг преципитина , подобных тем, которые наблюдаются в анализе Оухтерлони (фигура 7). Это позволяет идентифицировать аномальные белки иммуноглобулинов в образце.

IEP особенно полезен при диагностике множественной миеломы , рака клеток, секретирующих антитела. Пациенты с множественной миеломой не могут вырабатывать здоровые антитела; вместо этого они производят аномальные антитела, которые представляют собой моноклональные белки (М-белки). Таким образом, пациенты с множественной миеломой будут иметь повышенные уровни сывороточного белка, которые будут демонстрировать отчетливую полосу в области гамма-глобулина геля для электрофореза белков и резкий всплеск (в М-белке) на сканировании денситометра, а не на обычном широком мазке (рис. 8). ).Когда антитела против различных типов тяжелых и легких цепей антител используются для образования дуг преципитина, белок M будет вызывать отчетливо перекошенные дуги против одного класса тяжелой цепи и одного класса легкой цепи, как показано на Фигуре 7.

Рис. 7. (a) На этом графике показаны нормальные измерения сывороточных белков. (b) На этой фотографии показан иммуноэлектрофорез мочи. После электрофореза в углубления добавляли антисыворотку и образовывали дуги преципитина, иллюстрирующие распределение определенных белков.Перекошенные дуги (стрелки) помогают диагностировать множественную миелому. (кредит а, б: модификация работы Идзавы С., Акимото Т., Икеучи Х., Кусано Э., Нагаты Д.)

Электрофорез белков и характеристика структуры иммуноглобулинов

Появление электрофореза в конечном итоге привело к исследованию и пониманию структуры антител. Когда шведский биохимик Арне Тизелиус (1902–1971) опубликовал первые результаты электрофореза белков в 1937 году, он смог идентифицировать белковый альбумин (самый маленький и самый распространенный сывороточный белок) по острой полосе, которую он производил в геле.Другие сывороточные белки не могут быть разделены с помощью простого электрофореза белков, поэтому он назвал три широкие полосы со многими белками в каждой полосе: альфа, бета и гамма-глобулины. Два года спустя американский иммунолог Элвин Кабат (1914–2000) поехал в Швецию, чтобы работать с Тизелиусом, используя этот новый метод, и показал, что антитела мигрируют в виде гамма-глобулинов. Обладая этим новым пониманием, исследователи вскоре узнали, что множественная миелома, поскольку это рак клеток, секретирующих антитела, может быть предварительно диагностирована по наличию большого выброса M в области гамма-глобулина с помощью электрофореза белка.До этого открытия исследования структуры иммуноглобулинов были минимальными из-за сложности получения чистых образцов для изучения. Сыворотки пациентов с множественной миеломой оказались отличным источником высокообогащенного моноклонального иммуноглобулина, предоставив исходный материал для исследований в течение следующих 20 с лишним лет, которые привели к выяснению структуры иммуноглобулина.

Рис. 8. Картины электрофореза миеломы (справа) и нормальной сыворотки (слева). Белки были окрашены; когда плотность каждой полосы количественно определяется денситометрией, данные образуют гистограмму справа.Оба геля показывают ожидаемую плотную полосу альбумина внизу и аномальный всплеск в области гамма-глобулина. (кредит: модификация работы Soodgupta D, Hurchla MA, Jiang M, Zheleznyak A, Weilbaecher KN, Anderson CJ, Tomasson MH, Shokeen M)

Подумай об этом

• В целом, что дает иммуноэлектрофорез?

Анализ иммуноблоттинга: Вестерн-блот

После проведения электрофореза в протеиновом геле специфические протеины могут быть идентифицированы в геле с помощью антител.Этот метод известен как вестерн-блот . После разделения белков с помощью PAGE белковые антигены в геле переносятся на нитроцеллюлозную мембрану и иммобилизуются на ней. Затем на эту мембрану можно воздействовать первичным антителом , продуцируемым для специфического связывания с представляющим интерес белком. Второе антитело, снабженное молекулярным маяком, затем свяжется с первым. Эти вторичные антитела связаны с другой молекулой, такой как фермент или флуорофор (молекула, которая флуоресцирует при возбуждении светом).При использовании антител, связанных с ферментами, добавляется хромогенный субстрат для фермента. Этот субстрат обычно бесцветен, но приобретает цвет в присутствии антитела. Флуоресценция или окраска субстрата идентифицируют расположение конкретного белка в мембране, с которой связаны антитела (рис. 9).

Обычно для вестерн-блоттинга используют поликлональных антител . Они более чувствительны, чем mAb, из-за их способности связываться с различными эпитопами первичного антигена, а сигнал от поликлональных антител обычно сильнее, чем от mAb.Также можно использовать моноклональные антитела; однако они намного дороже в производстве и менее чувствительны, поскольку способны распознавать только один специфический эпитоп.

В исследованиях можно использовать несколько вариантов вестерн-блоттинга. В юго-западном блоте белки разделяют с помощью SDS-PAGE, наносят на нитроцеллюлозную мембрану, дают возможность ренатурировать, а затем исследуют флуоресцентно или радиоактивно меченным ДНК-зондом; цель юго-запада – выявить специфические ДНК-белковые взаимодействия. Фар-вестерн-блоттинг проводят для определения белок-белковых взаимодействий между иммобилизованными белками (разделенными с помощью SDS-PAGE, нанесенными на нитроцеллюлозную мембрану и оставленными для ренатурации) и белками, не имеющими отношения к антителам. Связанные белки, не являющиеся антителами, которые взаимодействуют с иммобилизованными белками при дальнем вестерн-блоттинге, могут быть обнаружены с помощью радиоактивной метки, флуоресценции или использования антитела с ферментативным молекулярным маяком.

Рисунок 9. Щелкните, чтобы увеличить изображение. (а) Эта диаграмма обобщает процесс вестерн-блоттинга.Антитела используются для идентификации определенных полос на протеиновом геле. (б) Вестерн-блоттинг на антитела против ВИЧ. Верхняя полоска – отрицательный контроль; следующая полоска – положительный контроль. Две нижние полоски – это образцы сыворотки пациентов, содержащие антитела. (кредит а: модификация работы «Bensaccount» / Wikimedia Commons)

Подумай об этом

• Какова функция фермента в анализе иммуноблоттинга?

Иммуноанализ, опосредованный комплементом

Одна из ключевых функций антител – активация (фиксация) комплемента.Когда антитело связывается с бактериями, например, определенные белки комплемента распознают связанное антитело и активируют каскад комплемента . В ответ другие белки комплемента связываются с бактериями, некоторые из которых служат в качестве опсонинов для повышения эффективности фагоцитоза, а другие создают отверстия в мембранах грамотрицательных бактериальных клеток, вызывая лизис. Эту литическую активность можно использовать для обнаружения в сыворотке крови антител против специфических антигенов.

Эритроциты являются хорошими индикаторными клетками для оценки цитолиза, опосредованного комплементом. Гемолиз эритроцитов высвобождает гемоглобин, который представляет собой ярко окрашенный пигмент, а гемолиз даже небольшого количества эритроцитов приводит к тому, что раствор становится заметно розовым (рис. 10). Эта характеристика играет роль в тесте фиксации комплемента , который позволяет обнаруживать антитела против определенных патогенов. Тест на фиксацию комплемента можно использовать для проверки антител против патогенов, которые трудно культивировать в лаборатории, таких как грибы, вирусы или бактерии Chlamydia .

Для проведения теста на фиксацию комплемента к сыворотке пациента добавляется антиген патогена. Если антитела к антигену присутствуют, антитело свяжет антиген и зафиксирует весь доступный комплемент. Когда в смесь впоследствии добавляются эритроциты и антитела против эритроцитов, комплемента для лизиса эритроцитов не остается. Таким образом, если раствор остается прозрачным, тест положительный. Если в сыворотке пациента нет антител к патогенам, добавленные антитела активируют комплемент, чтобы лизировать эритроциты, что дает отрицательный результат (рис. 10).

Рисунок 10. Щелкните, чтобы просмотреть увеличенное изображение. Тест на фиксацию комплемента используется для определения того, содержит ли сыворотка пациента антитела к определенному антигену. Если это произойдет, произойдет фиксация комплемента, и не будет доступного комплемента для лизиса связанных с антителами эритроцитов барана, которые добавляются в раствор на следующем этапе. Если образец не содержит антител к антигену, будет наблюдаться гемолиз клеток крови барана.

Просмотрите это видео, чтобы увидеть схему этапов теста фиксации комплемента:

Подумай об этом

• В тесте на фиксацию комплемента, если сыворотка становится розовой, есть ли у пациента антитела к антигену или нет? Объяснять.

В таблице 1 приведены различные типы анализов антитело-антиген, обсуждаемые в этом разделе.

Таблица 1. Механизмы отдельных анализов антитело-антиген
Тип анализа	Механизм	Примеры
Осадки	Антитело связывается с растворимым антигеном, образуя видимый преципитин	Кольцевой тест с преципитином для визуализации образования решетки в растворе
		Иммуноэлектрофорез для изучения распределения антигенов после электрофореза
		Анализ Оухтерлони для сравнения различных антигенов
		Радиальный иммунодиффузионный анализ для количественного определения антигенов
Флокуляция	Антитело связывается с нерастворимыми молекулами в суспензии, образуя видимые агрегаты	Тест VDRL на сифилис
Нейтрализация	Антитело связывается с вирусом, блокируя проникновение вируса в клетки-мишени и предотвращая образование бляшек	Анализ уменьшения бляшек для обнаружения присутствия нейтрализующих антител в сыворотках пациентов
Активация комплемента	Антитело связывается с антигеном, вызывая активацию комплемента и не оставляя комплемента для лизиса эритроцитов	Тест фиксации комплемента для антител пациента к трудно культивируемым бактериям, таким как Chlamydia

Основные понятия и краткое изложение

• При наличии в правильном соотношении антитело и антиген будут образовывать преципитат или решетку, которая выпадает в осадок из раствора.
• Тест с кольцом преципитации можно использовать для визуализации образования решетки в растворе. Анализ Оухтерлони демонстрирует образование решетки в геле. Анализ радиальной иммунодиффузии используется для количественного определения антигена путем измерения размера зоны преципитации в геле, наполненном антителами.
• Нерастворимые антигены в суспензии образуют флокулянтов при связывании антителами. Это основа теста VDRL на сифилис, при котором антитрепонемные антитела связываются с кардиолипином в суспензии.
• Вирусные инфекции могут быть обнаружены путем количественного определения вирус-нейтрализующих антител в сыворотке крови пациента.
• Различные классы антител в плазме или сыворотке идентифицируются с помощью иммуноэлектрофореза .
• Присутствие специфических антигенов (например, бактериальных или вирусных белков) в сыворотке может быть продемонстрировано с помощью вестерн-блоттинга , в котором белки переносятся на нитроцеллюлозную мембрану и идентифицируются с использованием меченых антител.
• В тесте фиксации комплемента комплемент используется для обнаружения антител против различных патогенов.

Множественный выбор

Образование ________ является положительным результатом теста VDRL.

1. флокулянт
2. осадков
3. коагуляция
4. ярко-розовый цвет

Показать ответ

Ответ а. Образование флокулянта является положительным результатом теста VDRL.

Титр теста нейтрализации вируса – это максимальное разведение сыворотки пациента

1. , в котором нет обнаруживаемой вирусной ДНК.
2. , в котором нет обнаруживаемого вирусного белка.
3. , который полностью блокирует образование зубного налета.
4. , который уменьшает образование зубного налета как минимум на 50%.

Показать ответ

Ответ d. Титр теста нейтрализации вируса – это максимальное разведение сыворотки пациента, которое снижает образование бляшек как минимум на 50%.

В анализе Ouchterlony мы видим резкую дуговую форму преципитина между антигеном и антисывороткой. Почему эта дуга остается видимой долгое время?

1. Молекулы антител слишком велики, чтобы диффундировать через агар.
2. Решетка преципитата слишком велика, чтобы диффундировать через агар.
3. Метанол, добавляемый после образования дуги, денатурирует белок и блокирует диффузию.
4. Молекулы антигена химически связаны с гелевой матрицей.

Показать ответ

Ответ б. Решетка преципитата слишком велика, чтобы диффундировать через агар.

Заполните пропуск

При медленном добавлении антигена к антисыворотке количество преципитина будет постепенно увеличиваться до достижения ________; добавление большего количества антигена после этого момента фактически уменьшило бы количество преципитина.

Показать ответ

При медленном добавлении антигена к антисыворотке количество преципитина будет постепенно увеличиваться до достижения зоны эквивалентности (зоны эквивалентности) ; добавление большего количества антигена после этого момента фактически уменьшило бы количество преципитина.

Тест радиальной иммунодиффузии позволяет количественно определить антиген, смешивая ________ с гелем и затем позволяя антигену диффундировать из лунки, вырезанной в геле.

Показать ответ

Тест радиальной иммунодиффузии определяет количество антигена путем смешивания антисыворотки с гелем, а затем позволяет антигену диффундировать из лунки, вырезанной в геле.

Подумай об этом

1. Объясните, почему гемолиз в тесте фиксации комплемента является отрицательным тестом на инфекцию.
2. Что подразумевается под термином «нейтрализующие антитела» и как мы можем количественно оценить этот эффект, используя анализ вирусной нейтрализации?
3. В реакциях преципитации можно использовать как антитела IgM, так и IgG. Однако один из этих классов иммуноглобулинов будет образовывать преципитаты при гораздо более низких концентрациях, чем другой. Что это за класс и почему он намного эффективнее в этом отношении?

---

Внутривенный иммуноглобулин оказывает противовоспалительное действие на мононуклеарные клетки периферической крови, вызывая аутофагию

1.

He, C. & Klionsky, D. J. Механизмы регуляции и сигнальные пути аутофагии. Annu. Преподобный Жене. 43 , 67–93 (2009).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

2.

Klionsky, D. J. et al. Руководство по использованию и интерпретации анализов для мониторинга аутофагии (3-е издание). Аутофагия 12 , 1–222 (2016).

PubMed PubMed Central Статья Google ученый

3.

Mehrpour, M., Esclatine, A., Beau, I. & Codogno, P. Обзор регуляции макроаутофагии в клетках млекопитающих. Cell Res. 20 , 748–762 (2010).

PubMed Статья Google ученый

4.

Бхаттачарья А. и Эйсса Н. Т. Аутофагия и перекрестные помехи аутоиммунитета. Фронт. Иммунол. 4 , 88 (2013).

PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

5.

Пуа, Х. Х., Джагалов, И., Чак, М., Мизушима, Н. и Хе, Ю. В. Критическая роль гена аутофагии Atg5 в выживании и пролиферации Т-клеток. J. Exp. Med. 204 , 25–31 (2007).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

6. ​​

Рокель, Дж. С. и Капур, М. Аутофагия: контроль судьбы клеток при ревматических заболеваниях. Nat. Rev. Rheumatol. 12 , 517–531 (2016).

CAS PubMed Статья Google ученый

7.

Gros, F. et al. Макроаутофагия нарушена в Т-лимфоцитах волчанки мыши и человека. Аутофагия 8 , 1113–1123 (2012).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

8.

Hampe, J. et al. Полногеномное сканирование ассоциации несинонимичных SNP идентифицирует вариант восприимчивости к болезни Крона в ATG16L1. Nat. Genet. 39 , 207–211 (2007).

CAS PubMed Статья Google ученый

9.

Rioux, J. D. et al. Полногеномное ассоциативное исследование выявляет новые локусы восприимчивости к болезни Крона и вовлекает аутофагию в патогенез болезни. Nat. Genet. 39 , 596–604 (2007).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

10.

Ramos, P. S. et al. Всесторонний анализ общих локусов системной красной волчанки (СКВ) и шестнадцати аутоиммунных заболеваний показывает ограниченное генетическое перекрытие. PLoS Genet. 7 , e1002406 (2011).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

11.

Lin, N.Y. et al. Аутофагия регулирует TNFα-опосредованное разрушение суставов при экспериментальном артрите. Ann. Реум.Дис. 72 , 761–768 (2013).

CAS PubMed Статья Google ученый

12.

Alirezaei, M. et al. Повышенная экспрессия ATG5 при аутоиммунной демиелинизации и рассеянном склерозе. Аутофагия 5 , 152–158 (2009).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

13.

Ногальская, А., Д’Агостино, К., Terracciano, C., Engel, W. K. & Askanas, V. Нарушение аутофагии при спорадическом миозите с тельцами включения и в культивируемых мышечных волокнах человека, вызванных стрессом эндоплазматического ретикулума. Am. J. Pathol. 177 , 1377–1387 (2010).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

14.

Villella, V. R. et al. Аутофагия подавляет патогенный иммунный ответ на пищевые антигены при муковисцидозе. Cell Death Dis. 10 , 258 (2019).

PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

15.

Yin, H. et al. Терапевтическая и патогенная роль аутофагии при аутоиммунных заболеваниях. Фронт. Иммунол. 9 , 1512 (2018).

PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

16.

Бонам С. Р., Ван Ф. и Мюллер С. Аутофагия: новая концепция регуляции аутоиммунитета и новый терапевтический вариант. J. Autoimmun. 94 , 16–32 (2018).

CAS PubMed Статья Google ученый

17.

Гельфанд Э. У. Внутривенный иммунный глобулин при аутоиммунных и воспалительных заболеваниях. N. Engl. J. Med. 367 , 2015–2025 (2012).

CAS PubMed Статья Google ученый

18.

Байри, Дж., Неги, В. С. и Кавери, С. В. Внутривенная иммуноглобулиновая терапия при ревматических заболеваниях. Nat. Rev. Rheumatol. 7 , 349–359 (2011).

CAS PubMed Статья Google ученый

19.

Perez, E. E. et al. Обновленная информация об использовании иммуноглобулина при заболеваниях человека: обзор доказательств. J. Allergy Clin. Иммунол. 139 , S1 – S46 (2017).

CAS PubMed Статья Google ученый

20.

Lunemann, J. D., Nimmerjahn, F. & Dalakas, M. C. Внутривенный иммуноглобулин в неврологии – механизм действия и клиническая эффективность. Nat. Rev. Neurol. 11 , 80–89 (2015).

CAS PubMed Статья Google ученый

21.

Галеотти, С., Кавери, С. В. и Бейри, Дж. Эффекторные функции, опосредованные IVIG, при аутоиммунных и воспалительных заболеваниях. Внутр. Иммунол. 29 , 491–498 (2017).

CAS PubMed Статья Google ученый

22.

Seite, J. F., Shoenfeld, Y., Youinou, P. & Hillion, S. Каково содержание волшебного черновика IVIg? Аутоиммун. Ред. 7 , 435–439 (2008).

PubMed Статья Google ученый

23.

Зейт, Дж. Ф., Хиллион, С., Харбонье, Т. и Перс, Дж. О. Обзор: внутривенный иммуноглобулин и В-клетки: когда продукт регулирует продуцент. Arthritis Rheumatol. 67 , 595–603 (2015).

CAS PubMed Статья Google ученый

24.

Маддур, М. С., Кавери, С. В. и Бейри, Дж. Циркуляция нормального IgG в качестве стимулятора регуляторных Т-клеток: уроки внутривенного иммуноглобулина. Trends Immunol. 38 , 789–792 (2017).

CAS PubMed Статья Google ученый

25.

Kabeya, Y. et al. LC3, гомолог дрожжевого Apg8p у млекопитающих, после процессинга локализуется в мембранах аутофагосом. EMBO J. 19 , 5720–5728 (2000).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

26.

Fiebiger, B.M., Maamary, J., Pincetic, A. & Ravetch, J.V. Для защиты от опосредованных антителами и Т-клетками аутоиммунных заболеваний с помощью противовоспалительных Fcs IgG требуются FcR типа II. Proc. Natl Acad. Sci. США 112 , E2385 – E2394 (2015).

CAS PubMed Статья Google ученый

27.

Schwab, I. et al. Широкая потребность в концевых остатках сиаловой кислоты и FcγRIIB для профилактической и терапевтической активности внутривенных иммуноглобулинов in vivo. Eur. J. Immunol. 44 , 1444–1453 (2014).

CAS PubMed Статья Google ученый

28.

Massoud, A.H. et al. Иммунорецептор дендритных клеток: новый рецептор для внутривенного иммуноглобулина опосредует индукцию регуляторных Т-клеток. J. Allergy Clin. Иммунол. 133 , 853–863 (2014). e855.

CAS PubMed Статья Google ученый

29.

Bozza, S., Kasermann, F., Kaveri, S. V., Romani, L. & Bayry, J. Внутривенный иммуноглобулин защищает от экспериментального аллергического бронхолегочного аспергиллеза посредством механизма, зависимого от сиалирования. Eur. J. Immunol. 49 , 195–198 (2019).

CAS PubMed Статья Google ученый

30.

Othy, S. et al. Сиалирование может быть незаменимым для реципрокной модуляции хелперных Т-клеток с помощью внутривенного иммуноглобулина. Eur. J. Immunol. 44 , 2059–2063 (2014).

CAS PubMed Статья Google ученый

31.

Nagelkerke, S.Q. et al. Ингибирование FcγR-опосредованного фагоцитоза с помощью IVIg не зависит от сиалирования IgG-Fc и FcγRIIb в макрофагах человека. Кровь 124 , 3709–3718 (2014).

CAS PubMed Статья Google ученый

32.

Campbell, I. K. et al. Терапевтический эффект ВВИГ при воспалительном артрите у мышей зависит от части Fc и не зависит от сиалирования или базофилов. Дж.Иммунол. 192 , 5031–5038 (2014).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

33.

Леонтьев Д. и др. Независимый от сиалирования механизм, участвующий в ослаблении иммунной тромбоцитопении у мышей с использованием внутривенного гаммаглобулина. Переливание 52 , 1799–1805 (2012).

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

34.

Tha-In, T. et al. Внутривенные иммуноглобулины подавляют прайминг Т-клеток, модулируя двунаправленное взаимодействие между дендритными клетками и естественными клетками-киллерами. Кровь 110 , 3253–3262 (2007).

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

35.

Trepanier, P., Aubin, E. & Bazin, R. Опосредованное IVIg ингибирование презентации антигена: преобладающая роль встречающихся в природе катионных IgG. Clin. Иммунол. 142 , 383–389 (2012).

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

36.

Blommaart, E.F., Krause, U., Schellens, J.P., Vreeling-Sindelarova, H. & Meijer, A.J. Ингибиторы фосфатидилинозитол-3-киназы вортманнин и LY294002 ингибируют аутофагию в изолированных гепатоцитах крыс. Eur. J. Biochem. 243 , 240–246 (1997).

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

37.

Эренштейн, М. Р. и Нотли, К. А. Важность природного IgM: поглотитель, защитник и регулятор. Nat. Rev. Immunol. 10 , 778–786 (2010).

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

38.

Кавери, С. В., Сильверман, Г. Дж. И Бейри, Дж. Естественные IgM в иммунном равновесии и использование их терапевтического потенциала. J. Immunol. 188 , 939–945 (2012).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

39.

Panda, S. & Ding, J. L. Природные антитела соединяют врожденный и адаптивный иммунитет. J. Immunol. 194 , 13–20 (2015).

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

40.

Peral de Castro, C. et al. Аутофагия регулирует секрецию IL-23 и врожденные Т-клеточные ответы посредством воздействия на секрецию IL-1. J. Immunol. 189 , 4144–4153 (2012).

CAS PubMed Статья Google ученый

41.

Harris, J. et al. Цитокины Т-хелпера 2 подавляют аутофагический контроль внутриклеточной микобактерии туберкулеза. Иммунитет 27 , 505–517 (2007).

CAS PubMed Статья Google ученый

42.

Park, H.J. et al. IL-10 подавляет аутофагию, вызванную голоданием, в макрофагах через путь фосфатидилинозитол-3-киназы (PI3K) класса I. Мол. Иммунол. 48 , 720–727 (2011).

CAS PubMed Статья Google ученый

43.

Fischer, A. et al. Аутоиммунные и воспалительные проявления часто возникают у пациентов с первичным иммунодефицитом. J. Allergy Clin. Иммунол. 140 , 1388–1393 (2017).e1388.

CAS PubMed Статья Google ученый

44.

Laragione, T. & Gulko, P. S. mTOR регулирует инвазивные свойства синовиальных фибробластов при ревматоидном артрите. Мол. Med. 16 , 352–358 (2010).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

45.

Cejka, D. et al. Мишень млекопитающих передачи сигналов рапамицина имеет решающее значение для разрушения суставов при экспериментальном артрите и активируется в остеокластах пациентов с ревматоидным артритом. Arthritis Rheum. 62 , 2294–2302 (2010).

CAS PubMed Статья Google ученый

46.

Ramos-Barron, A. et al. Профилактика мышиной волчанки у мышей (NZBxNZW) F1 путем лечения сиролимусом. Волчанка 16 , 775–781 (2007).

CAS PubMed Статья Google ученый

47.

Превель, Н., Алленбах, Ю., Клацманн, Д., Саломон, Б. и Бенвенисте, О. Полезная роль рапамицина в экспериментальном аутоиммунном миозите. PLoS ONE 8 , e74450 (2013).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

48.

Bayry, J. et al. Внутривенный иммуноглобулин отменяет дифференцировку дендритных клеток, вызванную интерфероном-α, присутствующим в сыворотке крови пациентов с системной красной волчанкой. Arthritis Rheum. 48 , 3497–3502 (2003).

CAS PubMed Статья Google ученый

49.

Siragam, V. et al. Внутривенный иммуноглобулин улучшает ИТП за счет активации рецепторов Fc гамма на дендритных клетках. Nat. Med. 12 , 688–692 (2006).

CAS PubMed Статья Google ученый

50.

Smed-Sorensen, A. et al.IgG регулирует профиль экспрессии CD1 и липидную антигенпредставляющую функцию в дендритных клетках человека через FcγRIIa. Кровь 111 , 5037–5046 (2008).

PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

51.

Kozicky, L. K. et al. Внутривенный иммуноглобулин смещает макрофаги в противовоспалительное состояние активации, продуцирующее IL-10. J. Leukoc. Биол. 98 , 983–994 (2015).

CAS PubMed Статья Google ученый

52.

Fann, D. Y. et al. Внутривенный иммуноглобулин подавляет опосредованную воспалением NLRP1 и NLRP3 гибель нейронов при ишемическом инсульте. Cell Death Dis. 4 , e790 (2013).

CAS PubMed Статья Google ученый

53.

Tarique, A. A. et al. Фенотипические, функциональные и пластические особенности классических и альтернативно активируемых макрофагов человека. Am. J. Respir. Cell Mol. Биол. 53 , 676–688 (2015).

CAS PubMed Статья Google ученый

54.

Webber, J. L. Регулирование аутофагии с помощью p38alpha MAPK. Аутофагия 6 , 292–293 (2010).

CAS PubMed Статья Google ученый

55.

Kim, D. S. et al. p38 Активированная митогеном протеинкиназа участвует в индуцированной стрессом эндоплазматической сети гибели клеток и аутофагии в фибробластах десен человека. Biol. Pharm. Бык. 33 , 545–549 (2010).

CAS PubMed Статья Google ученый

56.

Kim, J., Kundu, M., Viollet, B. & Guan, K. L. AMPK и mTOR регулируют аутофагию посредством прямого фосфорилирования Ulk1. Nat. Клетка. Биол. 13 , 132–141 (2011).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

57.

Shang, L. et al. Недостаток питательных веществ вызывает острую аутофагическую реакцию, опосредованную дефосфорилированием Ulk1 и его последующей диссоциацией от AMPK. Proc. Natl Acad. Sci. США 108 , 4788–4793 (2011).

CAS PubMed Статья Google ученый

58.

Bai, A. et al. Агонист AMPK подавляет врожденные и адаптивные иммунные ответы при остром и рецидивирующем колите у мышей, индуцированном TNBS. Biochem.Pharmacol. 80 , 1708–1717 (2010).

CAS PubMed Статья Google ученый

59.

Nath, N. et al. Потеря AMPK усугубляет тяжесть экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита. Biochem. Биофиз. Res. Commun. 386 , 16–20 (2009).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

60.

Энтони, Р. М., Кобаяши, Т., Вермелинг, Ф. и Раветч, Дж. В. Внутривенный гаммаглобулин подавляет воспаление посредством нового пути T (H) 2. Природа 475 , 110–113 (2011).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

61.

Shoenfeld, Y. et al. Эффективность аффинно очищенных антиидиотипических антител против двухцепочечной ДНК IVIG при лечении экспериментальной мышиной модели системной красной волчанки. Внутр. Иммунол. 14 , 1303–1311 (2002).

CAS PubMed Статья Google ученый

62.

Maddur, M. S. et al. Подавление дифференцировки, амплификации и функции клеток Th27 человека с помощью внутривенного иммуноглобулина. J. Allergy Clin. Иммунол. 127 , 823–830 (2011). e821–827.

CAS PubMed Статья Google ученый

63.

Trinath, J. et al. Внутривенный иммуноглобулин увеличивает количество регуляторных Т-клеток за счет индукции циклооксигеназы-2-зависимого простагландина E2 в дендритных клетках человека. Кровь 122 , 1419–1427 (2013).

CAS PubMed Статья Google ученый

64.

Othy, S. et al. Внутривенный гаммаглобулин подавляет энцефалитогенный потенциал патогенных Т-клеток и препятствует их доставке в центральную нервную систему, вовлекая сфингозин-1-фосфатный рецептор 1-мишень рапамицина млекопитающих. J. Immunol. 190 , 4535–4541 (2013).

CAS PubMed Статья Google ученый

65.

Wiedeman, A. E. et al. Противопоставление механизмов ингибирования интерферона-α внутривенным иммуноглобулином после индукции иммунными комплексами по сравнению с агонистами Toll-подобных рецепторов. Arthritis Rheum. 65 , 2713–2723 (2013).

CAS PubMed Google ученый

66.

Saha, C. et al. Мономерный иммуноглобулин А из плазмы подавляет ответы Th27 человека in vitro независимо от FcαRI и DC-SIGN. Фронт. Иммунол. 8 , 275 (2017).

PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

67.

Schneider, C. et al. ВВИГ регулирует выживание нейтрофилов человека, но не мыши. Sci. Отчет 7 , 1296 (2017).

PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

68.

Galeotti, C. et al. Внутривенный иммуноглобулин индуцирует IL-4 в базофилах человека посредством передачи сигналов через поверхностно-связанный IgE. J. Allergy Clin. Иммунол. 144 , 524–535 (2019). e528.

CAS PubMed Статья Google ученый

69.

Росси, Ф., Джейн, Д.Р., Локвуд, С.М. и Казачкин, М.Д. Антиидиотипы против нейтрофильных цитоплазматических антигенных аутоантител в нормальных полиспецифических IgG человека для терапевтического использования и в сыворотках ремиссии пациентов с системным васкулитом . Clin. Exp. Иммунол. 83 , 298–303 (1991).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

70.

Dalakas, M.C. et al. Контролируемое испытание высоких доз внутривенных инфузий иммуноглобулинов для лечения дерматомиозита. N. Engl. J. Med. 329 , 1993–2000 (1993).

CAS PubMed Статья Google ученый

71.

Basta, M. & Dalakas, M.C. Высокие дозы внутривенного иммуноглобулина оказывают положительное влияние на пациентов с дерматомиозитом, блокируя отложение активированных фрагментов комплемента в эндомизиале. J. Clin. Инвестировать. 94 , 1729–1735 (1994).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

72.

Tournadre, A. et al. Баланс Th2 и Th27 при воспалительных миопатиях: взаимодействие с дендритными клетками и возможная связь с ответом на высокие дозы иммуноглобулинов. Цитокин 46 , 297–301 (2009).

CAS PubMed Статья Google ученый

73.

Bayry, J., Mouthon, L. & Kaveri, S. V. Внутривенный иммуноглобулин увеличивает количество регуляторных Т-клеток при аутоиммунном ревматическом заболевании. J. Rheumatol. 39 , 450–451 (2012).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

74.

Lutz, H.U. et al. Внутривенно введенный IgG стимулирует ослабление комплемента при комплемент-зависимом аутоиммунном заболевании на уровне амплифицирующей конвертазы C3. Кровь 103 , 465–472 (2004).

CAS PubMed Статья Google ученый

75.

Sharma, M. et al. Внутривенный иммуноглобулин-индуцированный IL-33 недостаточен для опосредования экспансии базофилов у аутоиммунных пациентов. Sci. Rep. 4 , 5672 (2014).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

76.

Raju, R. & Dalakas, M. C. Профиль экспрессии генов в мышцах пациентов с воспалительными миопатиями: эффект терапии IVIg и биологическая проверка клинически значимых генов. Мозг 128 , 1887–1896 (2005).

PubMed Статья Google ученый

77.

Ching, J. K. et al. Дисфункция mTOR способствует патологии вакуолей и слабости при миопатии с тельцами включения, связанной с валозинсодержащим белком. Hum. Мол. Genet. 22 , 1167–1179 (2013).

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

78.

Ramachandran, N. et al. Дефицит VMA21 предотвращает сборку вакуолярной АТФазы и вызывает аутофагическую вакуолярную миопатию. Acta Neuropathol. 125 , 439–457 (2013).

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

79.

Mukherjee, S., Karnam, A., Das, M., Babu, SPS & Bayry, J. Wuchereria bancrofti filaria активирует дендритные клетки человека и поляризует T-хелпер-1 и регуляторные T-клетки посредством toll- как рецептор 4. Commun. Биол. 2 , 169 (2019).

PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

80.

Chalumeau, C. et al. Клетки коры почек, полученные от трансгенных мышей SV40, сохраняют присущие поляризованным клеткам проксимальных канальцев свойства. Kidney Int. 56 , 559–570 (1999).

CAS PubMed Статья Google ученый

От терапевтических антител к иммунным комплексным вакцинам

1.

Касадеваль, А. и Шарфф, М. Д. Возвращение в прошлое: пример терапии инфекционных заболеваний на основе антител. Clin. Заразить. Дис. 21 , 150–161 (1995).

CAS PubMed Статья Google ученый

2.

Ву, Х., Пфарр, Д. С., Лосонский, Г. А. и Кинер, П. А. Иммунопрофилактика RSV-инфекции: переход от RSV-IGIV к паливизумабу и мотавизумабу. Curr. Верхний. Microbiol. Иммунол. 317 , 103–123 (2008).

CAS PubMed Google ученый

3.

Тджандра, Дж. Дж., Рамади, Л. и Маккензи, И. Ф. Развитие реакции человеческих антимышиных антител (НАМА) у пациентов. Immunol. Cell Biol. 68 , 367–376 (1990).

PubMed Статья Google ученый

4.

Пендли К., Шанц А. и Вагнер С. Иммуногенность терапевтических моноклональных антител. Curr. Opin. Мол. Ther. 5 , 172–179 (2003).

CAS PubMed Google ученый

5.

Моррисон, С. Л., Джонсон, М. Дж., Герценберг, Л. А. и Ой, В. Т. Химерные молекулы антител человека: мышиные антигенсвязывающие домены с доменами константной области человека. Proc. Natl. Акад. Sci. США 81 , 6851–6855 (1984).

CAS PubMed Статья Google ученый

6. ​​

Брюггеманн М., Винтер Г., Вальдманн Х. и Нойбергер М.С. Иммуногенность химерных антител. J. Exp.Med. 170 , 2153–2157 (1989).

PubMed Статья Google ученый

7.

Скотт С.Д. Ритуксимаб: новое терапевтическое моноклональное антитело против неходжкинской лимфомы. Рак Практик. 6 , 195–197 (1998).

CAS PubMed Статья Google ученый

8.

Osborn, M. J. et al. Антитела IgG с высоким сродством развиваются естественным образом у крыс с нокаутом по Ig, несущих локусы человеческого IgH / Igκ / Igλ зародышевой линии, несущие участок СН крысы. J. Immunol. 190 , 1481–1490 (2013).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

9.

Borrebaeck, C. A., Danielsson, L. & Möller, S. A. Человеческие моноклональные антитела, полученные первичной иммунизацией лимфоцитов периферической крови in vitro. Proc. Natl. Акад. Sci. США 85 , 3995–3999 (1988).

CAS PubMed Статья Google ученый

10.

Дил, К. Э. и Балаш, А. Б. Разработка гуморального иммунитета в качестве профилактики или терапии. Curr. Opin. Иммунол. 35 , 113–122 (2015).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

11.

Шрайбер, Р. Д., Олд, Л. Дж. И Смит, М. Дж. Иммуноредактирование рака: интеграция роли иммунитета в подавлении и стимулировании рака. Наука 331 , 1565–1570 (2011).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

12.

Jeon, Y. J. et al. Регулирование белков-носителей глутамина с помощью RNF5 определяет ответ рака молочной железы на химиотерапию, вызывающую стресс ER. Cancer Cell. 27 , 354–369 (2015).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

13.

Tumeh, P.C. et al. Блокада PD-1 вызывает ответы, подавляя адаптивную иммунную резистентность. Природа 515 , 568–571 (2014).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

14.

Arlauckas, S.P. et al. Визуализация in vivo выявляет связанный с опухолью макрофаг-опосредованный путь резистентности в терапии анти-PD-1. Sci. Пер. Med. 9 , eaal3604 (2017).

PubMed PubMed Central Статья Google ученый

15.

Салеми, С., Маркович, М., Мартини, Г. и Д’Амелио, Р. Расширяющаяся роль терапевтических антител. Внутр. Rev. Immunol. 34 , 202–264 (2015).

CAS PubMed Статья Google ученый

16.

Targan, S. R. et al. Краткосрочное исследование химерного моноклонального антитела cA2 к фактору некроза опухоли альфа при болезни Крона. Группа изучения болезни Крона cA2. N. Engl. J. Med. 337 , 1029–1035 (1997).

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

17.

Чан, А.С. и Картер, П.Дж. Терапевтические антитела против аутоиммунитета и воспаления. Nat. Rev. Immunol. 10 , 301–316 (2010).

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

18.

Мурад, Дж. П., Лин, О. А., Эспиноза, Э. В.И Хасауна, Ф. Т. Текущие и экспериментальные терапевтические средства на основе антител: идеи, открытия, неудачи и направления на будущее. Curr. Мол. Med. 13 , 165–178 (2013).

CAS PubMed Статья Google ученый

19.

Сагил А., Фарго М. и Гроган С. Диагностика и лечение болезни Кавасаки. Am. Fam. Врач 91 , 365–371 (2015).

PubMed Google ученый

20.

Nolan, B.E. et al. Высокие дозы внутривенного иммуноглобулина сильно связаны с гемолитической анемией у пациентов с болезнью Кавасаки. Переливание 58 , 2564–2571 (2018).

CAS PubMed Статья Google ученый

21.

Хан, К. Л. и Чжао, С. Л. Внутривенный гамма-иммуноглобулин (ВВИГ) в сравнении с ВВИГ плюс инфликсимаб у маленьких детей с болезнью Кавасаки. Med. Sci. Монит. 11 , 7264–7270 (2018).

Артикул Google ученый

22.

Аббас А. и Раджабалли Ю. А. Осложнения иммуноглобулиновой терапии и последствия для лечения воспалительной нейропатии: обзор. Curr. Безопасность лекарств , https://doi.org/10.2174/1574886313666181017121139 (2018).

23.

Мараско, В. А. и Суи, Дж. Рост и потенциал терапевтических средств противовирусными моноклональными антителами человека. Nat. Biotechnol. 25 , 1421–1434 (2007).

CAS PubMed Статья Google ученый

24.

Марстон, Х. Д., Полес, К. И. и Фаучи, А. С. Моноклональные антитела к возникающим инфекционным заболеваниям – заимствования из истории. N. Engl. J. Med. 378 , 1469–1472 (2018).

CAS PubMed Статья Google ученый

25.

van Griensven, J.и другие. Оценка плазмы выздоравливающих при болезни, вызванной вирусом Эбола, в Гвинее. N. Engl. J. Med. 374 , 33–42 (2016).

PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

26.

Ло, М. и Хангартнер, Л. Антитела против вирусов: пассивная и активная иммунизация. Curr. Opin. Иммунол. 20 , 486–492 (2008).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

27.

Чан Т. и Бринк Р. Отбор на основе аффинности и реакция зародышевого центра. Immunol. Ред. 247 , 11–23 (2012).

PubMed Статья CAS Google ученый

28.

Вайнер, Л. М., Сурана, Р. и Ван, С. Моноклональные антитела: универсальные платформы для иммунотерапии рака. Nat. Rev. Immunol. 10 , 317–327 (2010).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

29.

Баич, Г., Дегн, С. Е., Тиль, С. и Андерсен, Г. Р. Активация, регуляция и молекулярные основы комплемента для заболеваний, связанных с комплементом. EMBO J. 34 , 2735–2757 (2015).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

30.

Nimmerjahn, F. & Ravetch, J. V. Дивергентная активность подкласса иммуноглобулинов g за счет селективного связывания рецептора Fc. Наука 310 , 1510–1512 (2005).

CAS PubMed Статья Google ученый

31.

Pincetic, A. et al. Рецепторы Fc типа I и типа II регулируют врожденный и адаптивный иммунитет. Nat. Иммунол. 15 , 707–716 (2014).

CAS PubMed Статья Google ученый

32.

Jefferis, R. et al. Сравнительное исследование структур N-связанных олигосахаридов белков подкласса IgG человека. Biochem. J. 268 , 529–537 (1990).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

33.

Reusch, D. & Tejada, M. L. Fc-гликаны терапевтических антител как критические атрибуты качества. Гликобиология 25 , 1325–1334 (2015).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

34.

Okazaki, A. et al. Истощение фукозы из человеческого олигосахарида IgG1 увеличивает энтальпию связывания и скорость ассоциации между IgG1 и FcgammaRIIIa. J. Mol. Биол. 336 , 1239–1249 (2004).

CAS PubMed Статья Google ученый

35.

Herter, S. et al. Гликоинженерия терапевтических антител усиливает опосредованный моноцитами / макрофагами фагоцитоз и цитотоксичность. J. Immunol. 192 , 2252–2260 (2014).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

36.

Theodoratou, E. et al. Гликозилирование IgG плазмы в прогнозе колоректального рака. Sci. Отчет 6 , 28098 (2016).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

37.

Kanoh, Y. et al. Анализ олигосахаридной цепи человеческого сывороточного иммуноглобулина g у пациентов с локализованным или метастатическим раком. Онкология 66 , 365–370 (2004).

CAS PubMed Статья PubMed Central Google ученый

38.

Reiding, K. R. et al. N-гликозилирование сывороточного белка изменяется в зависимости от активности ревматоидного артрита во время и после беременности. Фронт. Med. 4 , 241 (2017).

Артикул Google ученый

39.

Селман, М.H. et al. Изменения антиген-специфического N-гликозилирования Fc IgG1 при вакцинации против гриппа и столбняка. Мол. Клетка. Proteom. 11 , M111.014563 (2012).

Артикул CAS Google ученый

40.

Wang, J. R. et al. Гликомические сигнатуры сывороточных IgG для прогнозирования поствакцинального ответа. Sci. Отчет 5 , 7648 (2015).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

41.

Родс, Д. А. и Изенберг, Д. А. TRIM21 и функция антител внутри клеток. Trends Immunol. 38 , 916–926 (2017).

CAS PubMed Статья Google ученый

42.

Dickson, C. et al. Передача сигналов внутриклеточных антител регулируется фосфорилированием рецептора Fc TRIM21. eLife 7 , e32660 (2018).

PubMed PubMed Central Статья Google ученый

43.

McEwan, W. A. ​​et al. Патогены, связанные с внутриклеточными антителами, стимулируют передачу иммунных сигналов через Fc-рецептор TRIM21. Nat. Иммунол. 14 , 327–336 (2013).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

44.

Рупениан, Д. К. и Акилеш, С. FcRn: неонатальный рецептор Fc достигает зрелости. Nat. Rev. Immunol. 7 , 715–725 (2007).

CAS PubMed Статья Google ученый

45.

Lux, A., Yu, X., Scanlan, C. N. & Nimmerjahn, F. Влияние размера иммунного комплекса и гликозилирования на связывание IgG с человеческими FcgammaRs. J. Immunol. 190 , 4315–4323 (2013).

CAS PubMed Статья Google ученый

46.

Ioan-Facsinay, A. et al. FcgammaRI (CD64) вносит существенный вклад в тяжесть артрита, реакции гиперчувствительности и защиту от бактериальной инфекции. Иммунитет 16 , 391–402 (2002).

CAS PubMed Статья Google ученый

47.

Olaru, F. et al. Интракапиллярные иммунные комплексы привлекают и активируют slan-экспрессирующие моноциты CD16 + при волчаночном нефрите человека. JCI Insight 3 , 96492 (2018).

PubMed Статья Google ученый

48.

Холстед, С. Б., Махалингам, С., Марович, М. А., Убол, С. и Моссер, Д.М. Внутреннее антитело-зависимое усиление микробной инфекции в макрофагах: регуляция болезни иммунными комплексами. Lancet Infect. Дис. 10 , 712–722 (2010).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

49.

Yamada, D.H. et al. Подавление эффекторной функции антител, опосредованной Fcgamma-рецептором, при персистирующей вирусной инфекции. Иммунитет 42 , 379–390 (2015).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

50.

Wieland, A. et al. Эффекторные функции антител, опосредованные Fcγ-рецепторами, нарушаются во время персистирующей вирусной инфекции. Иммунитет 42 , 367–378 (2015).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

51.

Terres, G. & Wolins, W.Повышенная иммунологическая сенсибилизация мышей путем одновременного введения антигена и специфической антисыворотки. I. Эффект изменения количества используемого антигена относительно антисыворотки. J. Immunol. 86 , 361–368 (1961).

CAS PubMed Google ученый

52.

Randall, R.E. & Young, D.F. Комплексы твердого матрикса-антитело-антиген индуцируют антиген-специфические клетки CD8 +, которые устраняют стойкую парамиксовирусную инфекцию. J. Virol. 65 , 719–726 (1991).

CAS PubMed PubMed Central Google ученый

53.

Селис, Э., Зуравски, В. Р. Дж. И Чанг, Т. В. Регулирование функции Т-клеток с помощью антител: усиление ответа клонов Т-клеток человека на поверхностный антиген гепатита В с помощью антиген-специфических моноклональных антител. Proc. Natl. Акад. Sci. США 81 , 6846–6850 (1984).

CAS PubMed Статья Google ученый

54.

Берзофски, Дж. А. и др. Антигенные пептиды, распознаваемые Т-лимфоцитами людей с иммунной оболочкой вируса СПИДа. Nature 334 , 706–708 (1988).

CAS PubMed Статья Google ученый

55.

Hamano, Y., Arase, H., Saisho, H. & Saito, T. Опосредованное иммунным комплексом и Fc-рецептором усиление презентации антигена для ответов Th-клеток in vivo. J. Immunol. 164 , 6113–6119 (2000).

CAS PubMed Статья Google ученый

56.

Schuurhuis, D. H. et al. Дендритные клетки, нагруженные иммунными комплексами, превосходят растворимые иммунные комплексы в качестве противоопухолевой вакцины. J. Immunol. 176 , 4573–4580 (2006).

CAS PubMed Статья Google ученый

57.

van Montfoort, N. et al. Циркулирующие специфические антитела усиливают системное перекрестное праймирование путем доставки комплексного антигена к дендритным клеткам in vivo. Eur. J. Immunol. 42 , 598–606 (2012).

PubMed Статья CAS Google ученый

58.

Schuurhuis, D. H. et al. Иммунные комплексы антиген-антитело позволяют дендритным клеткам эффективно инициировать специфические ответы CD8 + CTL in vivo. J. Immunol. 168 , 2240–2246 (2002).

CAS PubMed Статья Google ученый

59.

Rafiq, K., Bergtold, A. & Clynes, R. Представление антигена, опосредованное иммунным комплексом, индуцирует опухолевый иммунитет. J. Clin. Инвестировать. 110 , 71–79 (2002).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

60.

Bergtold, A., Desai, D. D., Gavhane, A. & Clynes, R. Рециклинг интернализованного антигена на клеточной поверхности позволяет дендритным клеткам праймировать В-клетки. Иммунитет 23 , 503–514 (2005).

CAS PubMed Статья Google ученый

61.

Heesters, B.A. et al. Эндоцитоз и рециклинг иммунных комплексов фолликулярными дендритными клетками усиливают связывание и активацию антигена В-клеток. Иммунитет 38 , 1164–1175 (2013).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

62.

Моллой, М. Дж., Чжан, В. и Ушервуд, Э. Дж. Передовые технологии: иммунные комплексы ИЛ-2 в качестве терапии стойкой вирусной инфекции. J. Immunol. 182 , 4512–4515 (2009).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

63.

Сен-Пьер, К. А., Леонард, Д., Корвера, С., Курт-Джонс, Э. А. и Финберг, Р. В. Антитела к белкам клеточной поверхности перенаправляют пути внутриклеточного транспорта. Exp.Мол. Патол. 91 , 723–732 (2011).

Артикул CAS Google ученый

64.

Леон, Б., Баллестерос-Тато, А., Рэндалл, Т. Д. и Лунд, Ф. Е. Длительная презентация антигена дендритными клетками, связывающими иммунный комплекс, программирует пролиферативную способность Т-клеток памяти CD8. J. Exp. Med. 211 , 1637–1655 (2014).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

65.

Boross, P. et al. Передача сигналов ITAM FcRgamma-цепи критически необходима для перекрестной презентации растворимых комплексов антитело-антиген дендритными клетками. J. Immunol. 193 , 5506–5514 (2014).

CAS PubMed Статья Google ученый

66.

Lofano, G. et al. Гликозилирование Fc антиген-специфических антител усиливает гуморальный иммунитет за счет привлечения комплемента. Sci. Иммунол. 3 , eaat7796 (2018).

PubMed PubMed Central Статья Google ученый

67.

Janczy, J. R. et al. Иммунные комплексы подавляют секрецию ИЛ-1 и активацию инфламмасом. J. Immunol. 193 , 5190–5198 (2014).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

68.

Choi, J. Y. et al. Иммунный комплекс антител к IL-2 / IL-2 регулирует воспаление, вызванное HSV, посредством индукции рецептора IL-2 альфа, бета и гамма на мышиной модели. Иммунобиология 220 , 1381–1392 (2015).

CAS PubMed Статья Google ученый

69.

Han, K.H. et al. Эффекты стимуляции комплексов интерлейкин-2 / анти-интерлейкин-2 антитела на почечно-клеточную карциному. BMC Urol. 16 , 2 (2016).

PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

70.

Kasahara, K. et al. Комбинированная терапия антителом CD3 и ИЛ-2 подавляет атеросклероз, усиливая регуляторный иммунный ответ. J. Am. Сердце доц. 3 , e000719 (2015).

Google ученый

71.

Kim, M. G. et al. Комплекс IL-2 / анти-IL-2 ослабляет ишемическое реперфузионное повреждение почек за счет экспансии регуляторных Т-клеток. J. Am. Soc. Нефрол. 24 , 1529–1536 (2013).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

72.

Вэнь, Ю. М., Му, Л. и Ши, Ю. Иммунорегуляторные функции иммунных комплексов в вакцинах и терапии. EMBO Mol. Med. 8 , 1120–1133 (2016).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

73.

Hioe, C.E. et al. Использование иммунокомплексных вакцин для усиления ответа антител против нейтрализующих эпитопов на gp120 оболочки ВИЧ-1. Вакцина 28 , 352–360 (2009).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

74.

Kumar, R. et al. Выявление широко реактивных антител против гликанов-модулированных нейтрализующих эпитопов V3 ВИЧ-1 с помощью иммунокомплексных вакцин. Вакцина 31 , 5413–5421 (2013).

CAS PubMed Статья Google ученый

75.

Smith, A.J. et al. Живая вакцина против обезьяньего вируса иммунодефицита – коррелят защиты: взаимодействия рецепторов Fc, ингибирующие иммунный комплекс, которые снижают доступность клеток-мишеней. J. Immunol. 193 , 3126–3133 (2014).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

76.

Wang, T. T. et al. Гликоформы анти-HA управляют отбором по аффинности В-клеток и определяют эффективность вакцины против гриппа. Ячейка 162 , 160–169 (2015).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

77.

Maamary, J., Wang, T. T., Tan, G. S., Palese, P. & Ravetch, J. V. Повышение широты и эффективности ответа на вакцину против сезонного вируса гриппа путем иммунизации иммунным комплексом. Proc. Natl. Акад. Sci. США 114 , 10172–10177 (2017).

CAS PubMed Статья Google ученый

78.

Рини, Б. Будущие подходы в иммунотерапии. Семин. Онкол. 41 Дополнение 5 , S30 – S40 (2014).

PubMed Статья CAS Google ученый

79.

Kosinska, A. D., Bauer, T., Protzer, U. Терапевтическая вакцинация от хронического гепатита B. Curr. Opin. Virol. 23 , 75–81 (2017).

CAS PubMed Статья Google ученый

80.

Wen, Y.M., Wu, X.H., Hu, D.C., Zhang, Q.P. и Guo, S.Q. Вакцина против гепатита B и комплекс анти-HBs как подход к вакцинации. Lancet (Лондон, англ.) 345 , 1575–1576 (1995).

CAS Статья Google ученый

81.

Yao, X. et al. Терапевтический эффект комплекса поверхностный антиген-антитело гепатита В связан с цитолитическим и нецитолитическим иммунным ответом у пациентов с гепатитом В. Вакцина 25 , 1771–1779 (2007).

CAS PubMed Статья Google ученый

82.

Zheng, B.J. et al. Терапевтическая эффективность композита поверхностный антиген-антитела-рекомбинантная ДНК гепатита В у трансгенных мышей HBsAg. Vaccine 19 , 4219–4225 (2001).

CAS PubMed Статья Google ученый

83.

Xu, D. Z. et al. Результаты клинического испытания фазы III иммуногенной комплексной терапевтической вакцины HBsAg-HBIG для пациентов с хроническим гепатитом B: опыт и результаты. J. Hepatol. 59 , 450–456 (2013).

CAS PubMed Статья Google ученый

84.

Xu, D. Z. et al. Рандомизированное контролируемое испытание фазы IIb иммуногенной комплексной терапевтической вакцины антиген-антитело у пациентов с хроническим гепатитом B. PLoS. ONE 3 , e2565 (2008).

PubMed PubMed Central Статья Google ученый

85.

Liu, H. et al. Визуализирован иммуно-потенцирующий путь иммуногенного комплекса HBsAg-HBIG. Hum. Вакцин. Immunother. 12 , 77–84 (2016).

PubMed Статья Google ученый

86.

Zhou, C. et al. Анализ иммунологических механизмов, проявляемых терапевтической вакциной HBsAg-HBIG в сочетании с адефовиром у пациентов с хроническим гепатитом B. Hum. Вакцин. Immunother. 13 , 1989–1996 (2017).

PubMed PubMed Central Статья Google ученый

87.

Phoolcharoen, W. et al. Экспрессия иммуногенного иммунного комплекса Эбола в Nicotiana benthamiana . Завод. Biotechnol. J. 9 , 807–816 (2011).

88.

Kim, M. Y. et al. Новый подход к вакцинации от инфекции денге на основе универсальной платформы рекомбинантного иммунного комплекса. Вакцина 33 , 1830–1838 (2015).

PubMed Статья Google ученый

89.

Росалес-Мендоза, С., Нието-Гомес, Р. и Ангуло, К. Перспективы разработки вакцин растительного происхождения для борьбы с вирусом Эбола. Фронт. Иммунол. 8 , 252 (2017).

PubMed PubMed Central Статья CAS Google ученый

90.

Шарма П., Ху-Лиескован С., Варго Дж. А. и Рибас А. Первичная, адаптивная и приобретенная устойчивость к иммунотерапии рака. Ячейка 168 , 707–723 (2017).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

91.

DiLillo, D. J. & Ravetch, J. V. Дифференциальное взаимодействие Fc-рецептора вызывает противоопухолевый вакцинный эффект. Ячейка 161 , 1035–1045 (2015).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

92.

Klevorn, L.E. et al. Спасение толерантных CD8 + Т-клеток во время иммунотерапии рака комплексами IL2: антитело. Cancer Immunol. Res. 4 , 1016–1026 (2016).

CAS PubMed PubMed Central Статья Google ученый

93.

Барабас А.З., Коул К.Д., Барабас А. Д. и Лафренье Р. Модифицированный метод вакцинации для профилактики и лечения экспериментального аутоиммунного заболевания почек. Ann. Акад. Sci. 1110 , 619–629 (2007).

CAS PubMed Статья Google ученый

94.

Вен, Ю. М. Иммуногенный комплекс антиген-антитело: новые многообещающие вакцины от устойчивых микробных инфекций. Эксперт. Opin. Биол. Ther. 9 , 285–291 (2009).

CAS PubMed Статья Google ученый

95.

Junker, F., Krishnarajah, S., Qureshi, O., Humphreys, D. & Fallah-Arani, F. Простой метод измерения опосредованной иммунным комплексом, зависимой от рецептора Fc гамма-рецептора антиген-специфической активации первичных Т-клеток человека. J. Immunol. Методы 454 , 32–39 (2018).

CAS PubMed Статья Google ученый

96.

Мейсон, Х.С. Рекомбинантные иммунные комплексы как универсальные и мощные вакцины. Hum. Вакцин. Immunother. 12 , 988–989 (2016).

PubMed PubMed Central Статья Google ученый

97.

Zhao, J., Nussinov, R. & Ma, B. Связывание антигена аллостерически способствует распознаванию рецептора Fc. Маб 5 , 1–17 (2018).

Google ученый

98.

Wang, X. Y. & Wen, Y. M. Стратегия «сэндвича» для функционального лечения хронического гепатита B. Emerg. Микробы заражают. 7 , 91 (2018).

PubMed PubMed Central Статья Google ученый

99.

Бойман, О., Ковар, М., Рубинштейн, М. П., Сур, С.

No related posts.