Гастропротекторы

Гастропротекторы – это препараты, название которых происходит от двух греческих слов: gaster – желудок и protecto – защищать. Это значит, что гастропротекторы – «защитники» слизистой оболочки желудка. Одним из таких препаратов является висмута трикалия дицитрат.

От чего могут происходить повреждения слизистой оболочки? Слишком горячая, холодная или острая пища оказывает на них раздражающее действие. Соляная кислота, которая является составляющей желудочного сока, также может повреждать слизистую оболочку. Слизистая оболочка желудка может травмироваться вследствие, например, бесконтрольного приема нестероидных противовоспалительных средств или вследствие стресса.³

Механизмы действия гастропротекторов:

Применение гастропротекторов

Среди показаний к применению препарата висмута трикалия дицитрата, одного из группы гастропротекторов:

• Язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки. Препарат может применяться в качестве универсального цитопротектора. ²
• Хронический гастрит и гастродуоденит в фазе обострения (в том числе ассоциированный с Helicobacter pylori).⁴
• Синдром раздраженного кишечника, сопровождающийся симптомами диареи.⁴
• Функциональная диспепсия, не связанная с органическими повреждениями ЖКТ.⁴

Противопоказания к применению висмута трикалия дицитрата

• Индивидуальная непереносимость.
• Беременность и кормление грудью.
• Выраженная почечная недостаточность.
• Возраст до 4 лет.⁴

Побочные эффекты висмута трикалия дицитрата 

• Со стороны органов пищеварения это могут быть запоры или диарея. Также возможно появление тошноты и рвоты. Описанные явления часто носят временный характер.
• Аллергические реакции в виде сыпи или кожного зуда, а также других проявлений.
• Длительное применение может вызывать энцефалопатию, связанную с накоплением висмута в организме. Поэтому необходимо проконсультироваться с врачом, чтобы получить рекомендации в соответствии с индивидуальными особенностями.⁴

Улькавис^® – препарат висмута трикалия дицитрата. Действующее вещество препарата повышает устойчивость слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта к воздействию пепсина, соляной кислоты, ферментов и солей желчных кислот. Кроме того, висмута трикалия дицитрат снижает активность пепсина, что может положительно сказываться на течении различных заболеваний желудка и кишечника (язвенной болезни, гастрита, гастродуоденита и др.).⁴

Появление беспокоящих симптомов – это всегда повод для обращения к врачу. Только специалист сможет определить причины недомогания и поможет подобрать оптимальную схему лечения.

Эндокринолог рассказала, как восстановить слизистую желудка

https://rsport.ria.ru/20210311/zheludok-1600819723.html

Эндокринолог рассказала, как восстановить слизистую желудка

Эндокринолог рассказала, как восстановить слизистую желудка – Спорт РИА Новости, 11. 03.2021

Эндокринолог рассказала, как восстановить слизистую желудка

Врач-эндокринолог, доктор медицинских наук Зухра Павлова объяснила, как ускорить восстановление слизистой оболочки желудка и 12-перстной кишки после воспаления. Спорт РИА Новости, 11.03.2021

2021-03-11T17:50

2021-03-11T17:50

2021-03-11T17:50

зож

зухра павлова

здоровье

питание

/html/head/meta[@name=’og:title’]/@content

/html/head/meta[@name=’og:description’]/@content

https://cdn24.img.ria.ru/images/07e4/03/13/1568839669_1042:0:4425:1903_1920x0_80_0_0_568b0308032a73a8aa81c8f30a68e89f.jpg

МОСКВА, 11 мар — РИА Новости. Врач-эндокринолог, доктор медицинских наук Зухра Павлова объяснила, как ускорить восстановление слизистой оболочки желудка и 12-перстной кишки после воспаления.По ее мнению, в первую очередь в рацион необходимо включить продукты, обладающие свойством обволакивать слизистую. К ним, прежде всего, относятся рисовый отвар и кисель. Положительный эффект также обеспечат фрукты, содержащие пектин, например, запеченные яблоки. “Надо исключить продукты, усугубляющие поражение слизистой желудочно-кишечного тракта, то есть специи (особенно перец и уксус), жареные блюда, сырые овощи и фрукты, содержащие грубую клетчатку, например, капусту или сельдерей”, — написала в своем telegram-канале Павлова.Она добавила, что пищу важно тщательно пережевывать. В таком случае риск травм слизистых оболочек минимизируется.

https://rsport.ria.ru/20210311/avokado-1600787662.html

Спорт РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

2021

Спорт РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

Новости

ru-RU

https://rsport.ria.ru/docs/about/copyright.html

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/

Спорт РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og. xn--p1ai/awards/

https://cdn23.img.ria.ru/images/07e4/03/13/1568839669_1577:0:4308:2048_1920x0_80_0_0_e443f1fe5ace095ecb6b7c23534ac14e.jpg

Спорт РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

Спорт РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

зухра павлова, здоровье, питание

МОСКВА, 11 мар — РИА Новости. Врач-эндокринолог, доктор медицинских наук Зухра Павлова объяснила, как ускорить восстановление слизистой оболочки желудка и 12-перстной кишки после воспаления.

По ее мнению, в первую очередь в рацион необходимо включить продукты, обладающие свойством обволакивать слизистую. К ним, прежде всего, относятся рисовый отвар и кисель. Положительный эффект также обеспечат фрукты, содержащие пектин, например, запеченные яблоки.

“Надо исключить продукты, усугубляющие поражение слизистой желудочно-кишечного тракта, то есть специи (особенно перец и уксус), жареные блюда, сырые овощи и фрукты, содержащие грубую клетчатку, например, капусту или сельдерей”, — написала в своем telegram-канале Павлова.

Она добавила, что пищу важно тщательно пережевывать. В таком случае риск травм слизистых оболочек минимизируется.

11 марта, 16:00ЗОЖЧто произойдет с организмом, если регулярно есть авокадо?

Враньё про восстановление слизистой желудка | Для пациентов

От супчика пользы не будет

От супчика пользы не будет

Здравствуйте! Я работаю врачом 21 год. Меня зовут Георгий Олегович Сапего. В этой статье расскажу про то, как вам морочат голову всякой чепухой о восстановлении слизистой желудка.

Снова заметил статью с враньём на тему желудка. Людям нравится лечить желудок разными диетами. Кое-кто спекулирует на этом интересе.

Буду приводить цитату и сразу объяснять, что там не так.

Желудок – это очень чувствительный ко всем раздражителям орган.

На самом деле желудок – это очень устойчивый ко всем раздражителям орган. В нем постоянно плещется кислота, которая убивает микробов, но мы эту кислоту не чувствуем.

А еще некоторые люди глотают канцелярские принадлежности и прочие несъедобные предметы, а желудок это какое-то время терпит.

Представьте зубчики чеснока или чистый спирт, который кое-кто употребляет в больших количествах. Желудки и с этим справляются.

А еще в Китае замечали, что те люди, которые съедают больше 50 г жгучего перца, потом иногда жалуются на снижение памяти.

Взвешивали когда-нибудь жгучий перец? Когда я в последний раз пытался его в Ашане взвесить, то весы не определили вес двух стручков. Пришлось покупать три стручка. А теперь представьте китайца, который съел 50 г перца.
Это много стручков. И ничего с его желудком не произошло. Только память потом слегка ослабла.

Так что желудок – это очень крепкий орган. Не зря говорят: “луженый желудок”.

Не нужно игнорировать начальные признаки болезни желудка. Иначе дело закончится гастритом.

Если гастрит – это плохой исход, то о каком заболевании прямо сейчас идет речь? Непонятно. Гастрит – это воспаление желудка. Он или есть, или его нет. Если будет гастрит, то будет проблема. Если гастрита нет, то и проблемы пока нет. Кушайте на здоровье!

Сразу подумалось – а как автор или его читатели собираются определять проблему в желудке? Ну то есть допустим, что у нас есть чудо-блюдо для лечения желудка. А как мы узнаем, что лечить нужно именно желудок, а не двенадцатиперстную кишку, желчный пузырь, печень или поджелудочную железу? Загадка…

Правильное питание помогает обратить вспять негативные процессы в желудке.

Не спасет питание желудок. Потому что здоровый желудок обычно от питания не болит.

Если будете пить уксус или бытовое чистящее средство, то получится ожог желудка. Это понятно. А вот всякие язвы желудка бывают в подавляющем большинстве случаев от геликобактерной инфекции или нестероидных противовоспалительных препаратов. Есть еще редкие причины, но они именно редкие. И дело не в пище.

Если интересно, то потом еще напишу про редкие причины, которые повреждают желудок. Спрашивайте в комментариях.

Полезный продукт для желудка – это бульон.

Если в желудке воспаление или язва, то нужно уменьшить секрецию кислоты. Для этого есть целый арсенал лекарств. Без кислоты слизистая желудка быстренько сама себя заживляет и зарастает.

Раньше диета имела значение. Теперь врач при случае назначит вам такое лечение, что все пройдет за несколько дней. Диета будет полезна только в первые дни лечения язвы желудка, пока не подействовали лекарства.

Бульон относят к средствам, стимулирующим выделение кислоты. В те времена, когда еще не было эффективных лекарств, желудок тоже пытались лечить. А для обследования использовали тесты со стимуляторами выделения кислоты. В качестве одного из таких стимуляторов применяли мясной бульон.

В мясном бульоне есть экстрактивные вещества из мяса. Когда бульон попадает в желудок, то желудок не понимает, что это водичка. Желудок чувствует экстрактивные вещества и думает, что в него положили целый кусок мяса. И начинает выделять много кислоты, чтобы переварить воображаемый кусок мяса. Но там нет мяса. Поэтому кислота будет переваривать сам желудок. Это сойдет для здорового желудка, но навредит при больном желудке. Не пытайтесь лечить бульоном гастрит. Будет хуже.

Желудок выдерживает многое. Если считаете, что у вас не все в порядке с желудком, то обращайтесь к врачу.

Если вам понравилась статья, то ставьте лайки и подписывайтесь на мой канал. Почитайте мою статью про слизь в желудке и кишечнике.

Недостаточно заботиться только о микрофлоре! | Еженедельник АПТЕКА

Нарушение микрофлоры кишечника — актуальная и часто обсуждаемая проблема. Казалось бы, ничего нового по этой теме уже нельзя сказать, все известно. Однако следует помнить, что наш организм — единая система, и микрофлора является ее частью. Поэтому невозможно рассматривать ее изолировано от места, где она обитает. А значит, состояние места обитания кишечной микрофлоры не менее важно, чем ее баланс.

Наш пищеварительный тракт является органом с наибольшей протяженностью. Но при этом он помещается в относительно небольшом человеке. Так, длина пищевой трубки составляет почти 9 м, а площадь ее поверхности — около 400 м²! За всю жизнь через нее проходит приблизительно 60 т пищи. И справиться с этой едой кишечнику помогает микрофлора. Она формирует сложную самоорганизующуюся, саморегулирующуюся и саморазвивающуюся экосистему. В нее входит более 50 родов, насчитывающих около 500 видов различных бактерий. Масса всех микроорганизмов, обитающих в нашем кишечнике, равна массе печени и достигает 1,5 кг, благодаря чему они получили название микробный орган. Такое количество бактерий вполне оправдано. Они выполняют ряд важных функций: участвуют в регуляции иммунной системы организма и физиологической моторики пищеварительного тракта, синтезе витаминов группы В и витамина К, жирных кислот и полиаминов, принимают участие в переваривании пищи, дальнейшем всасывании питательных веществ в кровь, защищают кишечную стенку от колонизации патогенной, условно-патогенной микрофлорой и прикрепления к ней других чужеродных микроорганизмов, повышают скорость обновления клеток кишечника.

В составе основной (облигатной) нормальной кишечной микрофлоры присутствуют молочнокислые бактерии (бифидо- и лактобактерии), кишечные палочки, бактероиды, пептострептококки, энтерококки. Все они позволяют человеку не отвлекаться на работу кишечника в повседневной жизни.

Все вышесказанное большинству из нас очень хорошо известно. Но вот о взаимосвязи состояния слизистой оболочки кишечника и физиологической микрофлоры говорят не так часто. Тем не менее, результатом взаимодействия клеток эпителия и микроорганизмов является формирование сложной структуры — так называемого приэпителиального слизистого барьера. Он представляет собой биопленку, состоящую из слизи, молекул секреторного IgA, нормальной микрофлоры и ее метаболитов. Именно эта биопленка защищает слизистую оболочку кишечника от негативного воздействия различных физических и химических факторов, проникновения патогенных микробов и различных токсинов. Этот барьер обеспечивает также устойчивость к колонизации, конкуренцию с патогенными микроорганизмами за питательные вещества, витамины, минералы и метаболиты, синтез специальных бактериоцинов, которые ингибируют размножение патогенных штаммов.

Такой компонент, как секреторный IgA также связывает антигены вирусов и бактерий, не позволяет им прикрепляться к слизистым оболочкам, связывает пищевые антигены и аллергены, способные провоцировать аллергические реакции. Наконец, от состояния слизистой оболочки кишечника и формирующегося на ней приэпителиального слизистого барьера зависит способность нормальной микрофлоры прикрепляться к эпителию кишечника. Поэтому если слизистая оболочка кишечника повреждена, то и восстановить баланс нормальной микрофлоры довольно затруднительно.

Нет, мы не будем утверждать, что дисбаланс кишечной микрофлоры достиг размеров эпидемии и возникает буквально у каждого. На самом деле, нередко нарушение баланса кишечной микрофлоры протекает практически бессимптомно. И в случае, если мы имеем дело всего лишь с дисбалансом нормальной микрофлоры, восстановить это равновесие не так уж и сложно: часто это происходит само по себе, без какого-либо нашего вмешательства, или же при употреблении кисломолочных продуктов.

Но вот когда мы сталкиваемся с различными диспептическими явлениями (вздутие живота, периодическая боль в эпигастрии, тяжесть и дискомфорт, возникающие после еды, диарея и расстройства стула) — самое время задуматься: быть может, мы имеем дело с повреждением энтероцитов — клеток эпителия кишечника?

Именно на фоне такого повреждения эпителия слизистой оболочки кишечника, снижается уровень активности пристеночных ферментов, в частности лактазы. Как результат — ухудшается переваривание белков, жиров и углеводов, развивается вторичная лактазная недостаточность. Это значит, что нарушается гидролиз лактозы (молочного сахара). Нерасщепленный молочный сахар накапливается в просвете тонкой кишки, из-за чего повышается осмотическое давление, увеличивается объем содержимого толстой кишки, что приводит к избыточному поступлению жидкости в просвет кишечника, нарушению реабсорбции воды и электролитов из просвета кишечника. Все это проявляется таким симптомом, как диарея.

Вторичная лактазная недостаточность усугубляет дисбаланс микрофлоры кишечника. Накопление нерасщепленной лактозы в просвете кишечника сопровождается активным размножением условно-патогенных микроорганизмов. Это становится причиной появления таких симптомов, как метеоризм, боль и урчание в животе, ощущение тяжести и т.п.

Стоит ли говорить о том, что для устранения всех состояний, которые мы перечисляли выше — диареи, скопления газов, урчания и колик в животе — недостаточно лишь улучшить состояние кишечной микрофлоры. Необходимо еще обратить внимание на слизистую оболочку кишечника.

Позаботиться не только о нормализации состава микрофлоры, но и помочь восстановить нормальную функцию слизистой оболочки кишечника поможет препарат ЛАКТОВИТ ФОРТЕ.

Наиболее важной отличительной особенностью этого лекарственного средства является его комплексный состав, в который входят: Bacillus coagulans (Lb. sporogenes), фолиевая кислота и витамин В₁₂. Благодаря этому обеспечивается двойное действие препарата.

1. Восстановление нормальной микрофлоры кишечника: Bacillus coagulans продуцируют молочную кислоту, которая обладает антагонистической активностью в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, а также создает благоприятные условия для формирования нормального микробиоценоза кишечника. Споры бактерий Bacillus coagulans, содержащиес­я в капсулах ЛАКТОВИТ ФОРТЕ, активизируются в желудке, после чего в двенадцатиперстной кишке трансформируются в живую вегетативную форму и создают благоприятные условия для формирования нормального микробиоценоза кишечника за счет выделения L (+) молочной кислоты. Это лекарственное средство также стимулирует рост собственной микрофлоры, в том числе бифидобактерий, угнетает рост и размножение патогенной флоры (сальмонелл, шигелл, клостридий, стрептококков). В ходе своей жизнедеятельности эти бактерии осуществляют ферментативное расщепление белков, жиров и сложных углеводов (в том числе при дефиците лактазы у детей).

2. Восстановление слизистой оболочки кишечника. Фолиевая кислота (витамин В₉) и цианокобаламин (витамин В₁₂), входящие в состав препарата ЛАКТОВИТ ФОРТЕ, принимают участие в синтезе нуклеиновых кислот и белков, действуют сообща и способствуют восстановлению слизистой оболочки кишечника.

Также этому способствует L (+) молочная кислота, вырабатываемая бактерией Bacillus coagulans и являющаяся энергетическим субстратом для слизистой кишечника.

Кому же рекомендовано принимать ЛАКТОВИТ ФОРТЕ? Кто нуждается в восстановлении не только микрофлоры, но и функции слизистой оболочки кишечника? Прежде всего, пациентам с жалобами на вздутие живота, периодическую боль в эпигастрии, тяжесть и дискомфорт после еды, диарею или расстройства стула — все эти симптомы могут свидетельствовать о том, что кроме дисбаланса микрофлоры произошло и повреждение слизистой оболочки кишечника.

В качестве второй категории следует отметить больных, которые применяют антибактериальные препараты. Ведь сегодня специалистам хорошо известно, что некоторые антибиотики оказывают непосредственное токсическое воздействие на слизистую оболочку кишечника (неомицин, тетрациклин) (Хавкин А.И., Жихарева Н.С., 2006).

Наконец, остается выяснить последнее: как принимают ЛАКТОВИТ ФОРТЕ? Тем более, что для удобства наших больших и маленьких пациентов он представлен в форме не только капсул, но и саше.

Так, например, у взрослых и детей препарат применяют 2 раза в сутки за 40 мин до еды. Разовая и суточная дозы определяются в зависимости от возраста (схема).

Детям в возрасте до 2 лет лекарственное средство можно принимать непосредственно перед кормлением по ½ капсуле/пакетику (раскрыв и растворив капсулу/содержимое пакетика в воде или молоке), в возрасте старше 2 лет — по 1 капсуле/пакетику; взрослым — 1–2 капсулы/пакетика.

ПРЕИМУЩЕСТВА препарата ЛАКТОВИТ ФОРТЕ

обладает двойным действием – способствует восстановлению микрофлоры и слизистой оболочки кишечника:

1. препятствует росту патогенных бактерий и способствует стимуляции роста собственной лактофлоры, в том числе при дисбиозе на фоне антибиотикотерапии;

2. содержит фолиевую кислоту (витамин В9) и цианокобаламин (витамин В12), оказывающие синергичное действие и восстанавливающие слизистую оболочку кишечника

Информация для профессиональной деятельности медицинских и фармацевтических специалистов

ЛАКТОВИТ ФОРТЕ (LAKTOVIT FORTE). Состав и форма выпуска. Капсулы, № 30: молочнокислые бактерии — 120 000 000 спор; кислота фолиевая — 1,5 мг; цианокобаламин — 15 мкг; Порошок. д/п орал. сусп. пакетик 4 г, № 10: молочнокислые бактерии — 120 000 000 спор; кислота фолиевая — 1,5 мг; цианокобаламин — 15 мкг. Показания. Взрослым и детям (начиная с первых месяцев жизни) при хроническом колите различной этиологии, в том числе неспецифическом язвенном колите; дисбактериозе, возникшем в результате применения антибиотиков, сульфаниламидных препаратов и т.д.; после перенесенных острых кишечных инфекций; при наличии дисфункции пищеварительного тракта или выделении патогенных и условно-патогенных бактерий; в акушерско-гинекологической практике при неспецифических воспалительных заболеваниях половых органов и предродовой подготовке у беременных, входящих в группу риска, с нарушением чистоты вагинального секрета III–IV степени; в составе комплексной терапии при крапивнице, экземе, диатезе у детей, атопическом дерматите. Применение. Взрослым и детям внутрь 2 раза в сутки за 40 мин до еды. Детям в возрасте до 2 лет можно принимать препарат непосредственно перед кормлением по ½ капсуле/пакетику (раскрыв и растворив капсулу/содержимое пакетика в воде или молоке), старше 2 лет и взрослым — по 1 капсулы/пакетика; взрослым — 1–2 капсулы/пакетика. Противопоказания. Гиперчувствительность к лактозе или другим компонентам препарата. Побочные эффекты. При медицинском применении препарата ЛАКТОВИТ ФОРТЕ в рекомендуемых дозах возникновение побочных реакций маловероятно. В редких случаях — аллергические реакции; незначительная диарея; очень редко — периферический сосудистый тромбоз.

Р.с. МЗ Украины № UA/0160/01/01 от 12.12.2008 г. до 12.12.2013 г. (капсулы), № UA/0160/02/01 от 24.09.2008 г. до 24.09.2013 г. (порошок).

Представительство «Мили Хелскере» в Украине: 01032, Киев, бульв. Тараса Шевченко, 33Б, 5-й этаж; тел./факс: +38 (044) 498-13-34, 498-13-35.

Пресс-служба «Еженедельника АПТЕКА»

Лактовіт Форте

Цікава інформація для Вас:

Язвенный колит / Заболевания / Клиника ЭКСПЕРТ

Язвенный колит – тяжелое хроническое заболевание, характеризующееся эрозивно-язвенным поражением слизистой толстой кишки, прогрессирующим течением и частым развитием осложнений (кровотечения, перфорации, сужения просвета и др. ). Второе название этого заболевания – неспецифический язвенный колит (НЯК).

Ведется набор в клиническое исследование пациентов с заболеваниями кишечника

Клиника ЭКСПЕРТ приглашает принять участие в долгосрочном исследовании II фазы по оценке эффективности и безопасности препарата у пациентов с воспалительными заболеваниями кишечника умеренной или выраженной степени активности.

Подробнее

Длительность участия: 58 недель.

Мы приглашаем пациентов в возрасте от 18 до 65 лет с:

• болезнью Крона
• язвенным колитом.

Чтобы принять участие в клинических исследованиях, пациент должен подходить под критерии, устанавливаемые фармакологической компанией. Если Вас заинтересовало данное исследование, запишитесь на первичную платную оценочную консультацию к врачу-гастроэнтерологу Харитонову А.Г. или к врачу-гастроэнтерологу Соколовой К. С. для определеня возможности Вашего участия. Участникам исследования гарантируется бесплатное обследование, консультации специалиста и лечение препаратами фармкомпании.

Вы можете связаться с нами по телефону 8 (812) 426-35-35:

• ПН-СБ: с 09-00 до 21-00
• ВС: с 09-00 до 16-00.

Причины и происхождение язвенного колита кишечника пока не определены, несмотря на изучение и исследования по этой теме.

Симптомы

Характерные для язвенного колита симптомы можно разделить на три группы:

• общие
• кишечные
• внекишечные

Общие симптомы

Это проявления заболевания со стороны всего организма в целом, не являются специфичными для язвенного колита и встречаются при многих заболеваниях:

• слабость
• повышение температуры тела
• тахикардия
• похудание

Кишечные симптомы

Это разнообразные нарушения в работе кишечника, такие как:

• диарея
• в редких случаях – запоры
• кровь и слизь в кале
• «ложные» позывы, императивные (неотложные) позывы на дефекацию
• боли в животе (чаще боли возникают в левой подвздошной области, но могут распространяться по всему животу)
• вздутие, урчание живота.

При появлении подобных симптомов рекомендуется пройти обследование для исключения язвенного колита.

Внекишечные проявления заболевания

Заболевания имеет проявления со стороны других органов, которые могут появиться раньше симптомов со стороны кишечника.

Это изменения со стороны:

• кожи (высыпания, гнойнички на коже)
• полости рта (язвочки в полости рта)
• глаз (боль, резь в глазах, покраснение глаз, слезотечение и светобоязнь, снижение зрения, изменение цвета радужки)
• поражение суставов (боль, припухлость, покраснение, скованность суставов)
• поражение печени и желчевыводящих путей (пожелтение, зуд кожи)
• другие состояния (анемия, в т.ч. железодефицитная, недостаточность питания).

Обострения язвенного колита проявляется частым стулом, повышением температуры тела и лабораторных показателей (СОЭ, С-реактивный белок).

Выделяют следующие степени тяжести обострения:

Легкая

• стул с кровью менее 4 раз в день
• пульс, температура, гемоглобин и СОЭ в норме.

Средней тяжести

• стул с кровью более 4-х, но менее 6 раз в день
• пульс не более 90 уд/минуту
• температура тела не более 37,5 С
• гемоглобин меньше нормы, но не менее 105 г/л
• СОЭ больше нормы, не выше 30 мм/час

Тяжелая

• стул с кровью более 6 раз в день
• пульс более 90 уд/минуту
• температура тела больше 37,5 С
• гемоглобин меньше 105г/л
• СОЭ больше 30 мм/час.

При легкой и тяжелой степени атаки лечение возможно проводить в условиях поликлиники/дневного стационара. При тяжелой атаке необходима госпитализация в стационар.

При тяжелых формах пациентам рекомендовано обязательное обследование и лечение в стационаре, т. к. любые диагностические, лечебные процедуры и вмешательства могут иметь серьезные осложнения с риском летального исхода.

При любой степени тяжести заболевания необходимо незамедлительно обратиться к врачу гастроэнтерологу за помощью, так как легкая атака в любой момент может ухудшиться до тяжелой, что является жизнеугрожающей ситуацией.

Диагностика

В Клинике ЭКСПЕРТ отработан четкий алгоритм диагностики язвенного колита. Необходимое комплексное обследование включает:

Лабораторные методы

• исключается инфекционная природа заболевания: исследуется кал и кровь больного на бактерии, вирусы, простейшие и грибы.
• выполняются клинический, биохимический анализ крови, копрограмма
• проводится иммунологический скрининг на воспалительные заболевания кишечника (кровь на ASCA, рANCA)
• исследуется кал на кальпротектин (отражает наличие воспаления в кишечник)

Инструментальные исследования

• УЗИ брюшной полости. Оцениваются косвенные признаки воспаления кишечной стенки, а также изменения со стороны других органов желудочно-кишечного тракта для исключения осложнений заболевания, а также сопутствующей патологии).
• Ректороманоскопия с биопсией. Очень важно оценить состояние поверхности слизистой оболочки, а также выполнить биопсию с дальнейшим исследованием кусочка слизистой морфологом.
• ФГДС. Визуализация пищевода, желудка и двенадцатиперстной кишки необходима для исключения признаков болезни Крона в них, так как с этим заболеванием всегда ведется дифференциальный диагноз при подозрении на язвенный колит.
• Колоноскопия с биопсией. Является очень важным исследованием. Это достаточно сложный метод исследования, несущий определенные риски, поэтому показания к его проведению должен определять врач, а выполнять высококвалифицированный специалист.
• Тест «Colon View». Диагностирует риски появления опухоли в кишке у пациентов, длительно страдающих язвенным колитом.

Важно! Объем необходимого обследования может определить только врач гастроэнтеролог.

Лечение

Язвенный колит – достаточно серьезное заболевание, которое может прогрессировать (резко или постепенно)/. У некоторых пациентов изначально имеется устойчивость к применяемым лекарственным препаратам или она возникает в процессе лечения, и возможны осложнения с риском для жизни.

В зависимости от конкретной клинической ситуации при лечении применяют:

• препараты, содержащие 5-ацетилсалициловую кислоту. Как в виде таблеток, гранул или капсул, так и в виде лекарственных форм для введения в прямую кишку (свечей, готовых клизм или пен)
• кортикостероиды в виде таблеток, обычных или ректальных (вводятся через задний проход), капельниц
• иммуносупрессоры
• средства биологической терапии.

Все виды лекарственной терапии должен назначать и обязательно контролировать врач гастроэнтеролог, так как:

• эти лекарства имеют серьезные побочные эффекты на другие органы и системы
• у части пациентов отмечается изначальная невосприимчивость или постепенно развивается устойчивость к препаратам

В Клинике ЭКСПЕРТ придерживаются принципа этапности в лечении.

На первом этапе составляется план лечения, который включает:

• режим
• диету
• подбор базисной терапии препаратами 5-аминосалициловой кислоты
• по необходимости – антибактериальные препараты, пре- и пробиотики, так как обострение язвенного колита в большинстве случаев сопровождается выраженным дисбактериозом кишечника

На втором этапе оценивается эффективность проводимой терапии:

• Если на фоне применения препаратов 5-АСК активность заболевания снижается, клиническая симптоматика становится менее выраженной, то расширяется режим и диета, назначается дату повторного визита к врачу.
• Если на фоне проводимой терапии улучшения самочувствия не наступает, решается вопрос о назначении более сильных препаратов (глюкокортикоидов системного и местного действия, цитостатиков, биологической терапии). Однако следует отметить, что при очень тяжелом течении процесса данные препараты могут быть назначены сразу, на первом этапе лечения.

Третий этап лечения осуществляется после достижения стойкой ремиссии.

Он представляет собой схему постепенного снижения доз назначенных препаратов до поддерживающих.

Даже после достижения долгожданной ремиссии пациенту рекомендуется быть внимательным к себе и регулярно наблюдаться у врача гастроэнтеролога, так как высок риск рецидива заболевания.

Практически всем пациентам необходимо принимать рекомендованные врачом средства противорецидивной терапии. Некоторые препараты способствуют снижению риска развития толстокишечного рака.

Прогноз

Язвенный колит является тяжелым хроническим заболеванием, течение которого без адекватного лечения со временем ухудшается, симптомы становятся более выраженными, обострения более длительными и частыми, а также высока вероятность возникновения осложнений (разрыв стенки кишки, кишечное кровотечение).

У пациентов с язвенным колитом значительно повышен риск развития рака кишечника. В связи с этим часто назначается длительная поддерживающее лечение.

На данный момент вылечить язвенный колит с помощью лекарственных препаратов невозможно, однако правильно подобранная терапия в большинстве случаев позволяет достичь стойкой и длительной ремиссии заболевания.

При наличии каких-либо из перечисленных выше симптомов (боль в животе, диарея, кровь или слизь в кале), необходимо срочно обратиться к врачу за помощью.

Помните, что очень важно начать лечение на ранних стадиях болезни, так как в запущенных случаях, как правило, требуется применение длительной, тяжелой и дорогостоящей терапии.

Рекомендации

Для профилактики развития заболевания, а также рецидива, необходимо придерживаться правильного, сбалансированного и регулярного питания – избегать фаст-фуда, консервированных, ароматизированных продуктов, жареных, копченых; рекомендуется есть в одно и тоже время. Важно оградить себя от стрессовых ситуаций.

В период обострения пациентам рекомендуется щадящая диета, соответствующая следующим требованиям:

• устранение грубой клетчатки (сырых овощей, ягод, фруктов, орехов, семечек, мака, кунжута, отрубей, бобовых и т.п.)
• продукты готовят на пару или отваривают
• теплую пищу протирают или (при запорах) отварные овощи натирают на крупной терке
• исключают химические раздражители кишечной слизистой (острые, соленые, маринованные, кислые продукты)
• рекомендуются высокобелковые продукты (постное мясо, индейка, нежирная речная рыба, яичный белок, соевые продукты, творог и др.)
• специальные продающиеся в аптеках лечебные смеси для питания («Модулен» и др.).

С целью профилактики рецидивов всем пациентам рекомендуется один раз в квартал консультация врача гастроэнтеролога для необходимой коррекции медикаментозной терапии.

Часто задаваемые вопросы

Излечим ли язвенный колит?

Язвенный колит – это хроническое заболевание аутоиммунной природы. В организме происходит выработка антител против слизистой оболочки собственной толстой кишки, в результате чего слизистая повреждается. Что является причиной выработки эти антитела до сих пор не известно. Не зная причины, невозможно найти лекарства против нее.

Таким образом, имеющиеся лекарственные препараты направлены на уменьшение интенсивности воспалительного процесса, позволяют добиться ремиссии, но не могут полностью излечить заболевание.

Единственный возможный способ излечения – хирургическое лечение (удаление толстой кишки). Показаниями к хирургическому лечению язвенного колита служат низкая эффективность консервативной терапии или невозможность ее продолжения, кишечные осложнения язвенного колита (токсическая дилатация, перфорация кишки, кишечное кровотечение), а также рак толстой кишки или высокий риск его возникновения.

Из-за чего возникает заболевание?

По каким причинам развивается данное заболевание до сих пор точно не известно.

Установлена значительно более высокая заболеваемость людей язвенным колитом среди городского населения в отличие от жителей сельской местности. Предполагается, что в возникновении заболевания играет роль генетическая предрасположенность и факторы окружающей среды (экология, неправильное питание, стресс).

Является ли заболевание противопоказанием к беременности?

Язвенный колит не является противопоказанием к беременности, однако перед ее планированием важно добиться стойкой ремиссии заболевания, необходимо провести ряд обследований, а так же подобрать лекарственные препараты, которые возможно применять во время беременности.

Может ли язвенный колит проявляться запорами?

Язвенный колит может проявляться запорами из-за спазма прямой кишки в результате ее воспаления. Рекомендуется пройти полное обследование для исключения данной патологии.

Увеличивается ли риск заболеть язвенным колитом, если близкий родственник страдает данным заболеванием?

Наличие язвенного колита родственника увеличивает ваши риски возникновения этого заболевания у Вас.

Истории лечения

История №1

Пациентка Н. , 23 года, обратилась к гастроэнтерологу Клиники ЭКСПЕРТ с жалобами на боль в нижних отделах живота перед дефекацией, кашицеобразный стул до 4-5 раз в сутки с примесью алой крови, общую слабость.

В начале своего заболевания, когда пациентка заметила кровь в кале, она пробовала лечиться самостоятельно, предположив, что это геморрой, но без эффекта. Со временем ситуация усугублялась, и самочувствие ухудшилось: наросла общая слабость, количество дефекаций увеличилось до 5-6 в сутки, боли усилились. Несколько раз вызывала скорую помощь, проходила ректоскопию и колоноскопию. По результатам исследований – слизистая прямой, сигмовидной кишки воспалена, кровоточива, с множественными эрозиями. Пациентке назначили курс противовоспалительных препаратов. Самочувствие оставалось прежним, девушка стала отмечать повышение температуры тела до 37,2 С, похудела на 9 кг.

В Клинике ЭКСПЕРТ обследование проводилось поэтапно: тщательный осмотр кожи, языка, измерение температуры, роста, веса, пальпация брюшной полости. Затем – общеклинические анализы, по результатам которых выявлена железодефицитная анемия, в копрограмме – большое количество слизи и эритроцитов. Врач исключил инфекционный процесс: в кале вредоносных бактерий не обнаружено. Пациентка прошла ректоскопию, ФГДС, УЗИ брюшной полости. По результатам всего обследования поставлен диагноз язвенный колит, острое течение, и дисбактериоз кишечника. Врач отметил также НР-ассоциированный поверхностный гастрит, и первую стадию желчно-каменной болезни.

Пациентка проконсультировалась у опытного диетолога: учитывая тяжесть воспаления, ей разъяснили режим питания, указали на разрешенные и запрещенные продукты и способы их приготовления. Врач гастроэнтеролог назначил препараты для восстановления слизистой желудка и кишечника, нормализации оттока желчи, препараты железа для устранения анемии. Учитывая наличие дисбактериоза кишечника с ростом условно-патогенной флоры, назначен курс кишечных антибиотиков и пробиотиков.

Через неделю приема терапии и соблюдения диеты самочувствие пациентки улучшилось, а через два месяца все симптомы постепенно исчезли. Пациентка ведет нормальный образ жизни, в плановом порядке посещая лечащего врача 2-3 раза в год.

Эзофагит пищевода: описание болезни, причины, симптомы, стоимость лечения в Москве

Воспаление пищевода эзофагит или гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь – воспалительное заболевание, вызванное дисфункцией нижнего пищеводного сфинктера. Для него характерен возврат пищи из желудка в пищевод. Если клиническая картина наблюдается длительное время, значит, эзофагит перешел в хроническую стадию. Среди болезней пищевода эзофагит диагностируется чаще всего, в 35% случаев он может протекать без выраженных признаков. Нередко для лечения патологии достаточно изменить рацион питания, но если у пациента запущенный эзофагит, лечение заключается в использовании медикаментов или в хирургическом вмешательстве.

Особенности эзофагита пищевода

В зависимости от течения заболевание бывает 3 видов:

• Острое;

• Подострое;

• Хроническое.

Острые эзофагиты делят на 3 степени:

• Поражение поверхности пищевода без язвенных и эрозивных дефектов;

• Поражение слизистой органа с некрозом и язвенными дефектами;

• Поражение охватывает подслизистые слои, вызывая глубокие дефекты и кровотечения. После лечения могут образоваться рубцовые структуры.

Согласно классификации Савари и Миллера, хронический эзофагит делят на 4 степени:

• Первая. Гиперемия без эрозивных изменений в дистальных отделах;

• Вторая. Мелкие эрозии сливаются, но не поражают всю слизистую.

• Третья. Характеризуется образованием язвенных поражений в нижней трети пищевода.

• Четвертая. Возникает хроническая язва и стеноз.

При хроническом виде болезни на слизистая оболочка пищевода становится рыхлой, отечной и покрывается слизью. В ходе гистологического исследования врач выявляет клеточную инфильтрацию, атрофию пищеводных желез с формированием микроабсцессов и кист. Длительное отсутствие лечения приводит к дисплазии и атрофии слизистой с образованием гетеротопных участков желудочного типа. Они выделяют соляную кислоту, приводящую к развитию синдрома Барретта.

По характеру воспалительного процесса и клинической картины врачи выделяют такие виды эзофагита:

• Геморрагический;

• Катаральный;

• Некротический;

• Отечный;

• Псевдомембранозный;

• Флегмонозный;

• Эксфолиативный;

• Эрозивный.

Некротический эзофагит появляется при тяжелом течении инфекционных патологий и агранулоцитозе, характеризуется формированием глубоких язв.

На появление геморрагического эзофагита влияют некоторые вирусные и инфекционные заболевания. Они вызывают кровоизлияния в стенку пищевода.

Наиболее распространенными считаются катаральная и отечная формы. Для них характерны гиперемия и отечность слизистой оболочки.

Причиной флегмонозного эзофагита может стать попадание в стенку пищевода инородного тела.

Псевдомембранозный и эксфолиативный вид болезни развиваются при дифтерии и скарлатине.

Эрозивный эзофагит возникает при острых инфекционных патологиях и действии раздражающих веществ на стенку пищевода.

По распространенности воспаления и его локализации гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь бывает 3 типов:

В зависимости от фактора, который спровоцировал эзофагит, он бывает 4 форм:

• Алиментарный. Возникает при употреблении острых и горячих блюд, крепких спиртных напитков.

• Аллергический. Развивается на фоне пищевой аллергии.

• Застойный. Появляется при задержке остатков пищи в дивертикулах

• Инфекционный. Развивается вследствие вирусных и бактериальных инфекций.

• Профессиональный. Возникает при воздействии вредных производственных факторов.

Диагностика

В первую очередь, врач анализирует жалобы пациента. Затем направляет его на сдачу общего анализа крови и мочи.

Для уточнения диагноза используют такие методы диагностики:

• УЗИ органов брюшной полости;

• Рентгенография;

• Тест кислотности желудка;

• Эзофагогастродуоденоскопия;

• Импедансометрия пищевода;

• Компьютерная томография;

• Манометрия;

• Сцинтиграфия;

• Биллиметрия;

• Дыхательный тест на Helicobacter pylori.

В некоторых случаях требуется гистологическое исследование биоптата слизистой пищевода. Его получают с помощью прицельной биопсии.

Если у пациента эзофагит, диагностика и лечение патологии в Москве может обойтись ему в среднем в 10500-50000, в зависимости от диагностических методов и вида лечения.

Как понять, что начал развиваться эзофагит пищевода

Выраженность симптоматики при остром течении патологии зависит от выраженности воспаления органа. При катаральной форме эзофагит может не вызывать симптомов, только изредка он проявляется повышенной чувствительностью пищевода к холодной или горячей пище. Тяжелые формы патологии сопровождаются выраженной болью за грудиной, отдающей в спину и шею, дисфагией из-за сильного болевого синдрома, изжогой и повышенным слюноотделением. В особо тяжелых случаях отмечается рвота с примесями крови вплоть до шокового состояния. Спустя неделю пациент может ощутить мнимое благополучие и заметит исчезновение неприятных симптомов, но без правильного лечения спустя несколько недель эзофагит приведет к образованию грубых рубцов и стенозу, что спровоцирует прогрессирование расстройства глотания и регургитации пищи.

Основным признаком хронического эзофагита считается изжога, усиливающаяся после приема острых и жирных блюд, кофе и сильногазированных напитков. Переедание также может вызывать жжение в области эпигастрия. В ночное время у пациента может возникать регургитация.

Нередко при эзофагите присоединяются другие патологии:

• Бронхиальная астма;

• Ларингоспазм;

• Расстройства дыхания;

• Частые пневмонии.

У детей в возрасте до 1 года недостаточность сфинктера пищевода диагностируется при многократных обильных срыгиваниях в горизонтальном положении сразу после кормления. В более старшем возрасте дети жалуются на приступообразную боль в эпигастрии, особенно после приема горячей пищи. Болевой синдром усиливается при наклонах туловища, выполнении физических упражнений и в ночное время. Детей младшего возраста нередко беспокоит тошнота и рвота, старшего – изжога и отрыжка. После пробуждения на подушке ребенка можно обнаружить мокрое бесцветное или желтоватое пятно, обусловленное регургитацией. Если не лечить заболевание в детском возрасте, то оно грозит кровотечениями, образованием рубцов и стеноза пищевода, развитием аспирационной пневмонии и анемии.

Причины заболевания

На развитие эзофагита оказывают влияние следующие факторы:

• попадание инородных тел в пищевод;

• наличие избыточного веса;

• ожоги пищевода;

• отравления химическими и токсическими веществами;

• алкоголизм;

• неправильное питание;

• язва желудка и 12-перстной кишки;

• холецистит;

• панкреатит;

• желчнокаменная болезнь;

• повреждение слизистой оболочки желудка;

• синдром Золлингера-Элиссона;

• грыжа пищеводного отверстия диафрагмы;

• опухоли желудка;

• хронические запоры;

• наследственная предрасположенность;

• подъем тяжестей;

• стрессы;

• патологии блуждающего нерва;

• инфекционные заболевания.

У детей острый эзофагит возникает по таким же причинам, что у взрослых. В то же время риск развития заболевания у детей значительно выше. Оно чаще наблюдается при скарлатине и сепсисе, воздействии слабых растворов кислот на слизистую оболочку пищевода. Вторичное поражение слизистой оболочки пищевода у детей связано с язвой, гастритом, гастродуоденитом, холецистохолангитом и патологиями других отделов кишечника. В 85% случаев у них диагностируются поверхностные формы, в 15% – эрозивный и язвенный эзофагит.

Диета при эзофагите пищевода

При эзофагите пищевода из рациона питания следует исключить такие продукты:

• алкогольные напитки;

• крепкий чай;

• газированные напитки;

• кофе;

• шоколад;

• грибы;

• копченые изделия;

• маринады;

• острые приправы;

• кетчуп;

• майонез;

• бобовые;

• консервы;

• свежая и квашеная капуста;

• черный хлеб;

• кислые соки;

• жирные и жареные блюда;

• жевательная резинка;

• фаст-фуд.

Если дискомфорт возникает после еды, следует обратить внимание на то, какие продукты были съедены и убрать их из меню.

Полезно при воспалении пищевода (эзофагите) внести в рацион питания следующие продукты:

• обезжиренные протертый творог;

• молоко и сметана с низким процентом жирности;

• свежие и вареные яйца;

• любые крупы;

• паровые котлеты;

• запеченные овощи;

• вареная и печеная рыба;

• сухарики собственного приготовления.

Принимать пищу рекомендуется 4-5 раз в день, избегая спешки и суеты. После еды желательно пройтись или поработать стоя. Также следует носить свободную одежду, не стесняющая движения в области живота. Нельзя напрягать мышцы живота, поэтому исключен подъем тяжестей.

Слизистая оболочка кишечника – главный рубеж защиты здоровья ЖКТ — ЗдоровьеИнфо

Мы часто слышим, что защитные силы организма, достаточно сильны от природы, чтобы уберечь нас от опасных болезней. Мало кто задумывается о том, что самым главным рубежом защиты организма от бактерий и токсинов является слизистая оболочка пищевода, желудка и кишечника, площадь которой у взрослого человека равна теннисному корту. Несмотря на то, что она очень тонкая, слизистая способна уберечь организм от большинства агрессивных факторов. Но иногда они все-таки берут верх, и возникают жалобы на боли, изжогу и другие расстройства ЖКТ.

Как устроена слизистая оболочка ЖКТ?

Слизистая оболочка, выстилающая абсолютно все органы ЖКТ, отделяет внутреннюю среду организма от агрессивных факторов. Действительно, пища, лекарства, бактерии, токсины, пищеварительные соки 24 часа в сутки атакуют желудочно-кишечный тракт. Защиту от них обеспечивает слизистая.

Слизистая оболочка кишечника состоит всего из одного слоя клеток, но имеет огромную площадь – около 250 квадратных метров, то есть почти как теннисный корт. Такая площадь получается за счет того, что слизистая собрана в складки. Продолжительность жизни клеток – всего от 24 до 72 часов, то есть они постоянно обновляются. Слизистая лежит на особой «подложке» из соединительной ткани, в которой проходят нервы и кровеносные сосуды.

Надежная защита

Первый уровень защиты, которую обеспечивает внутренняя оболочка кишечника, – это выработка защитной слизи. Ее производят так называемые бокаловидные клетки. Слизь обволакивает пищевой комок, чтобы он не травмировал стенки желудка или кишечника. Если же повреждение произошло, то слизь заполняет рану, ускоряя ее заживление. Важной составляющей этого защитного поверхностного слоя являются кишечные бактерии, которые также участвуют в защите организма.

Другой важный рубеж защиты – это плотные контакты между клетками слизистой. Поговорим о них немного подробнее.

Как регулируется проницаемость слизистой оболочки

Эпителиальные клетки, которые образуют слизистую оболочку кишечника, примыкают друг к другу очень плотно. Более того: они скреплены между собой специальными белками. Но это не значит, что барьер непроходим: благодаря сложным механизмам регулирования, в плотных контактах могут открываться каналы, которые пропускают строго определенные компоненты. За счет этого поддерживается нормальный метаболизм, а потенциально опасные соединения и микроорганизмы проникнуть в слизистую не могут.

В норме слизистая оболочка надёжно защищает организм. Однако, если интенсивность факторов агрессии выражена, то защитные силы ослабевают. К главным повреждающим факторам относятся алкоголь, курение, неправильное питание, стресс, воспалительные заболевания, аллергены, ряд препаратов. Также имеет значение возраст и наследственность. Если все эти факторы в совокупности более активны, чем защитные силы слизистой, ее проницаемость для бактерий и токсинов повышается.

Чем опасна повышенная проницаемость слизистой ЖКТ?

В последние годы учёные-гастроэнтерологи всего мира всё больше говорят о повышенной проницаемости как о революционном открытии в медицине, которое «засыпало яму» в их представлениях о механизме развития заболеваний системы пищеварения.

Исследования показали, что при таких жалобах, как изжога, отрыжка, тяжесть, боль, дискомфорт, вздутие, запор или диарея наблюдается повышение проницаемости слизистой оболочки ЖКТ для бактерий и токсинов. Истончение слоя защитной слизи, расхождение клеток слизистой оболочки, которые в норме должны быть плотно сцеплены между собой, позволяет бактериям и токсинам проникать в подслизистый слой, где проходят кровеносные сосуды и нервные волокна, управляющие работой ЖКТ.  В результате может развиваться так называемое воспаление низкой интенсивности, когда явных язв или эрозий нет, а пациент чувствует постоянный дискомфорт, боль, страдает от изжоги, повышенного газообразования и расстройства стула.

Повышенная проницаемость слизистой может быть не видна при проведении стандартных обследований, таких как ФГДС. В таких случаях мы говорим о функциональных заболеваниях. Однако часто повышенную проницаемость можно увидеть на обследовании – она проявляется эрозиями, язвами, покраснением слизистой.

Диеты, отказ от вредных привычек и изменение образа жизни при повышенной проницаемости кишечника улучшают самочувствие пациента, но не решают проблему. На сегодняшний день есть лекарства, которые восстанавливают плотные контакты между клетками слизистой и нормализуют ее проницаемость. В частности, врачи назначают препараты ребамипида, которые увеличивают продукцию защитной слизи, восстанавливают плотные контакты клеток и обеспечивают защиту ЖКТ. А значит, избавляют пациента от неприятных симптомов расстройства кишечника.

Новый подход к устранению дефектов слизистой оболочки желудка с использованием свежего аллотрансплантата амниотической мембраны у собак (экспериментальное исследование) | Исследование стволовых клеток и терапия

1.

DeNovo RC. Заболевания желудка. В: Тамс Т.Р., редактор. Справочник по гастроэнтерологии мелких животных. 2-е изд. Филадельфия: У. Б. Сондерс; 2003. с. 160.

Google Scholar

2.

Haithem AMA, Farghali HA, Shimaa FA, Ghozy E, El-Mehiry HF. Изучите действие базиликового масла в качестве лечебного средства при язве желудка, вызванной ацетилсалицилатом, у экспериментальных крыс.Модель Global Vet. 2014; 12 (4): 431–48.

Google Scholar

3.

Паррах Д.Д., Моулви Б.А., Гази М.А., Махдуми Д.М., Атар Х., Дар С., Мир А.К. Язвы желудка у собак: обзор. Ветеринарный мир. 2013. 6 (7): 449–54.

Артикул Google Scholar

4.

Головка кВт. Опухоли нижних отделов пищеварительного тракта. Bull World Health Organ. 1976; 53: 167–86.

CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

5.

Fonda D, Gualtieri M, Scanziani E. Карцинома желудка у собак – клинико-патологическое исследование 11 случаев. J Small Anim Pract. 1989; 30: 353–60.

Артикул Google Scholar

6.

Couto CG, Rutgers HC, Sherding RG, Rojko J. Желудочно-кишечная лимфома у 20 собак. J Vet Intern Med. 1989; 3: 73–8.

CAS Статья PubMed Google Scholar

7.

Добсон JM.Породная предрасположенность к раку у породистых собак. ISRN Vet Sci. 2013; 2013: 941275.

Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

8.

NA A e-K, Farghali HA. Оценка экспериментальной эндоскопической резекции слизистой оболочки желудка (EMR) у собак. Азиатский J Anim Vet Adv. 2016; 11 (9): 531–7.

Артикул Google Scholar

9.

Чопра А., Томас Б.С. Амниотическая мембрана: новый материал для регенерации и восстановления.J Biomimetics Biomater Tissue Eng. 2013; 18: 106.

Google Scholar

10.

Chen HC, Tan HY, Hsiao CH, Huang SC, Lin KK, Ma DH. Трансплантация амниотической мембраны при стойких язвах и перфорациях роговицы при остром грибковом кератите. Роговица. 2006; 25: 564–72.

Артикул PubMed Google Scholar

11.

Никнеджад Х., Пейрови Х., Джорджани М., Ахмадиани А., Ганави Джанд Сейфалян А.М.Свойства амниотической мембраны для потенциального использования в тканевой инженерии. Eur Cells Mater. 2008; 15: 88–99.

CAS Статья Google Scholar

12.

Ueta M, Kweon MN, Sano Y, Sotozono C, Yamada J, Koizumi N, Kiyono H, Kinoshita S. Иммуносупрессивные свойства амниотической мембраны человека для реакции смешанных лимфоцитов. Clin Exp Immunol. 2002; 129: 464–70.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

13.

Шимазаки Дж., Шинозаки Н., Цубота К. Трансплантация амниотической мембраны и лимбального аутотрансплантата пациентам с рецидивирующим птеригием, связанным с симблефароном. Br J Ophthalmol. 1998. 82: 235–40.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

14.

Гуо М., Гриннелл Ф. Базальная мембрана и дифференцировка эпидермиса человека in vitro. J Investigate Dermatol. 1989; 93: 372–8.

CAS Статья PubMed Google Scholar

15.

Boudreau N, Sympson CJ, Werb Z. Подавление ICE и апоптоза в эпителиальных клетках молочной железы внеклеточным матриксом. Наука. 1995; 267: 891–3.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

16.

Фергали Х.А., АбдельКадер Н.А., Хаттаб М.С., Абу-Бакр Х.О. Оценка подкожной инфильтрации аутологичной плазмы, богатой тромбоцитами, при заживлении кожных ран у собак. Biosci Rep. 2017; 37: 1–13.

Артикул Google Scholar

17.

Гаджийский О., Анатасов Н. Амниотические оболочки для временного покрытия ожогов. Annu Burn Fire Disasters. 1990; 9: 88–92.

Google Scholar

18.

Сакурагава Н., Какинума К., Кикучи А., Окано Н., Учида С., Камо И., Кобаяси М., Йокояма Ю. Клетки мезенхимы амниона человека экспрессируют фенотипы клеток-предшественников нейроглии. J Neurosci Res. 2004; 78: 208–14.

CAS Статья PubMed Google Scholar

19.

Ми С., Дэвид А.Л., Чоудхури Б., Джонс Р.Р., Хэмли И.В., Сквайрс А., Коннон С.Дж. Тканевая инженерия оболочки плода. Tissue Eng A. 2012; 18 (3–4): 373–81.

CAS Статья Google Scholar

20.

Choolani M, Chan J, Fisk NM. Терапия плода: 2020 г. и далее. Prenat Diagn. 2010. 30 (7): 699–701.

Артикул PubMed Google Scholar

21.

Шета Э, Эльзомор С., Эльтоохи О., Абд Элькадер Н. А и Ахмед К. А.Структурно-функциональное обновление мочевого пузыря после имплантации амниотической мембраны у собак. Int J Vet Sci Med. 2014; 2: 57–66. http://dx.doi.org/10.1016/j.ijvsm.2014.05.001. По состоянию на 14 июня 2014 г.

22.

Робин С., Боллерот К., Мендес С., Хаак Е., Крисан М., Церизоли Ф, Лау И., Каймакис П., Йорна Р., Вермёлен М. и др. Плацента человека представляет собой мощную гематопоэтическую нишу, содержащую гемопоэтические стволовые клетки и клетки-предшественники на протяжении всего развития. Стволовая клетка. 2009. 5 (4): 385–95.

CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

23.

Сейфельдин А. Восстановление стенки влагалища с использованием трансплантата амниотической мембраны. Акушерский гинекол Инт Дж. 2015; 2 (5): 00056.

Артикул Google Scholar

24.

Dino BR, Eufcmio GG, DeVilla MS, Reysio-Cruz M, Jurado RA. Использование гомотрансплантатов плодных мембран при местном лечении ожогов. J Philipp Med Assoc.1965; 41: 890–8.

Google Scholar

25.

Kruse-Elliott KT. Индукционные агенты и общая внутривенная анестезия. В анестезии и обезболивании мелких животных, под редакцией Кэрролла Г.Л. Эймс: Блэквелл Паблишинг; п. 83–94.

26.

Гуандалини С. Пробиотики для профилактики и лечения диареи. J Clin Gastroenterol. 2011; 45 (Прил.): S149–53.

Артикул PubMed Google Scholar

27.

Knoll JS, Rowell SL. Клиническая гематология: клинический анализ, контроль качества, контрольные значения и выбор системы. Ветеринарная клиника N Am Small Anim Pract. 1996. 26 (5): 981–1002.

CAS Статья Google Scholar

28.

Арох И., Клемент Э, Сегев Г. Клинические, биохимические и гематологические характеристики, распространенность заболевания и прогноз собак с цитоплазматической токсичностью нейтрофилов. J Vet Intern Med. 2005. 19 (1): 64–73.

Артикул PubMed Google Scholar

29.

Doumas BT. Колориметрическое определение общего белка в сыворотке или плазме. Clin Chem. 1975. 21 (8): 1159–66.

CAS PubMed Google Scholar

30.

Lanter AL. Клиническая биохимия. 7-е изд. Филадельфия: W.B. Компания Сондерс; 1975. с. 147–59.

Google Scholar

31.

Fossati P, Prencipe L. Триглицериды сыворотки, определяемые колориметрически с помощью фермента, вырабатывающего перекись водорода. Clin Chem. 1982; 28 (1): 2077–80.

CAS PubMed Google Scholar

32.

Deeg R, Ziegenohrm J. Кинетический ферментативный метод для автоматического определения общего холестерина в сыворотке. Clin Chem. 1983. 29 (10): 1798–802.

CAS PubMed Google Scholar

33.

Hawk PB, Oser BL, Summerson WH. Практическая физиологическая химия. Нью-Йорк: Блэкидион; 1960. с. 348–52.

Google Scholar

34.

Suvarna SK, Layton C, Bancroft JD. Теория и практика гистологических методов Бэнкрофта. 7-е изд. Нью-Йорк: Черчилль Ливингстон; 2012.

Google Scholar

35.

Барски Д., Геруллис Х., Экке Т., Ян Дж., Варга Дж., Борос М., Пинтелон И., Тиммерманс Дж. П., Отто Т.Реконструкция мочевого пузыря с амниотической мембраной человека на модели крысы с ксенотрансплантатом: доклиническое исследование. Int J Med Sci. 2017; 14 (4): 310–8. https: //doi.org/10.7150/ijms.18127 \.

Артикул PubMed PubMed Central Google Scholar

36.

Лайне Л., Такеучи К., Тарнавски А. Защита слизистой оболочки желудка и цитопротекция: от скамьи к постели. Гастроэнтерология. 2008; 135: 41–60. https://doi.org/10.1053/j.gastro.2008.05.030.

CAS Статья PubMed Google Scholar

37.

Tarnawski AS, Ahluwalia A, Jones MK. Механизмы повреждения слизистой оболочки желудка: основное внимание уделяется эндотелию микрососудов как ключевой мишени. Curr Med Chem. 2012; 19: 4–15. https://doi.org/10.2174/092986712803414079.

CAS Статья PubMed Google Scholar

38.

Guilford WG, Strombeck DR. Острый гастрит. В: Guilford WG, Center CA, Strombeck DR, et al., Редакторы. Гастроэнтерология мелких животных. 3-е изд. Филадельфия: У. Б. Сондерс; 1996 г.п. 261–73.

Google Scholar

39.

Kesting MR, Wolff KD, Mücke T., Demtroeder C, Kreutzer K, Schulte M, Jacobsen F, Hirsch T., Loeffelbein DJ, Steinstraesser L. Биоискусственный хирургический пластырь из многослойной амниотической мембраны человека – In vivo исследования на модели крысы. J Biomed Mater Res B Appl Biomater. 2009. 90 (2): 930–8.

Артикул PubMed Google Scholar

40.

Hasegawa M, Fujisawa H, Hayashi Y, Yamashita J. Аутологический трансплантат амниона для восстановления миеломенингоцеле: техническое примечание и клиническое значение. J Clin Neurosci. 2004. 11 (4): 408–11.

Артикул PubMed Google Scholar

41.

Meller D, Pauklin M, Thomasen H, Westekemper H, Steuhl KP. Трансплантация амниотической мембраны глаза человека. Dtsch Arztebi Int. 2011; 108 (14): 243–8.

Google Scholar

42.

Duarte IGL, Durval-Araujo I. Амниотическая мембрана как биологическая повязка при заживлении инфицированных ран у кроликов. Acta Cir Bras. 2014; 29 (5): 334–9.

Артикул PubMed Google Scholar

43.

Аваноглу А., Эрденер А., Ульман И., Херек Ö, Озджан С., Оздемир Н. Амниотическая мембрана как биопротез: это постоянный материал? Турецкий J Med Res. 1994. 12 (5): 224–7.

Google Scholar

44.

Сато Х., Шимазаки Дж., Шинозаки Н. Роль факторов роста в реконструкции глазной поверхности после трансплантации амниотической мембраны. Исследование Ophthalmol Vis Sci. 1998; 39: S428.

Google Scholar

45.

Такашима С., Исэ Х, Чжао П., Акаике Т., Никайдо Т. Человеческие амниотические эпителиальные клетки обладают характеристиками и функциями, подобными гепатоцитам. Функция сотовой структуры. 2004. 29: 73–84.

CAS Статья PubMed Google Scholar

46.

King AE, Paltoo A, Kelly RW, Sallenave JM, Bocking AD, Challis JR. Экспрессия естественных антимикробных препаратов плацентой человека и оболочками плода. Плацента. 2007; 28: 161–9.

CAS Статья PubMed Google Scholar

47.

Барбуто Р.С., Деарауджо, ИД, Бономи Д.Д., Тафури Л.С., Нето А.С., Малиновски Р., Бардин В.С.Д., Лейте, М.Д., Дуарте, Иллинойс. Использование амниотической мембраны для покрытия брюшной полости при реконструкции брюшной стенки полипропиленовой сеткой у крыс.Rev Col Bras Cir. 2015; 42 (1): 49–54.

Артикул PubMed Google Scholar

48.

Ilancheran S, Michalska A, Peh G, Wallace EM, Pera M, Manuelpillai U. Стволовые клетки, полученные из плодных мембран человека, обладают потенциалом многолинейной дифференцировки. Биол Репрод. 2007; 77: 577–88.

CAS Статья PubMed Google Scholar

49.

Хе Х, Ли В., Чен С.Ю., Чжан С., Чен Ю.Т., Хаяшида Ю., Чжу Ю.Т., Цзэн СК.Подавление активации и индукции апоптоза в клетках RAW264.7 экстрактом амниотической мембраны. Исследование Ophthalmol Vis Sci. 2008; 49: 4468–75.

Артикул Google Scholar

50.

Tseng SC, Espana EM, Kawakita T, D.I. Pascuale MA, Li W, He H, Liu TS, Cho TH, Gao YY, Yeh LK, et al. Как работает амниотическая мембрана? Ocul Surf. 2004. 2: 177–87.

Артикул PubMed Google Scholar

51.

Li H, Niederkorn JY, Neelam S, Mayhew E, Word RA, Mcculley JP, Alizadeh H. Иммунодепрессивные факторы, секретируемые амниотическими эпителиальными клетками человека. Исследование Ophthalmol Vis Sci. 2005; 46: 900–7.

Артикул Google Scholar

52.

Wolbank S, Peterbauer A, Fahrner M, Hennerbichler S, Van Griensven M, Stadler G, Red H, Gabriel C. Дозозависимый иммуномодулирующий эффект стволовых клеток человека из амниотической мембраны: сравнение с мезенхимальным стволом человека клетки из жировой ткани.Tissue Eng. 2007; 13: 1173–83.

CAS Статья PubMed Google Scholar

53.

Li X, Hung Wong GL, ToK-F, Wong VW-S, Lai LH, Chow DK-L, Lau JY-W, Sung JJ-Y, Ding C. Профилирование бактериальной микробиоты при гастрите без Helicobacter pylori или прием нестероидных противовоспалительных препаратов. Плос один. 2009; 4 (11): e 7985. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0007985. По состоянию на 14 июня 2014 г.

54.

Такеучи К., Окабе С., Такаги К., Умеда Н.Влияние аспирина на заживление хронической язвы желудка у собак. Пищеварение. 1977; 16: 51–6.

CAS Статья PubMed Google Scholar

55.

Rodriguez-Ares MT, López-Valladares MJ, Touriño R, Vieites B, Gude F, Silva MT. Влияние лиофилизации на амниотическую мембрану человека. Acta Ophthalmol. 2009. 87 (4): 396–403.

Артикул PubMed Google Scholar

56.

Tseng SCG, Li D-Q, Ma X. Подавление экспрессии рецепторов TGF-β1, β2, β3 и TGG-β II в фибробластах роговицы человека амниотической мембраной. Инвестируйте Ophthalmol Vis Sci. 1998; 39: S428.

Google Scholar

57.

Williams MJ, Avery AC, Lana SE, Hillers KR, Bachand AM, Avery PR. Лимфопролиферативное заболевание собак, характеризующееся лимфоцитозом: иммуно-фенотипические маркеры прогноза. J Vet Intern Med. 2008; 22: 596–601.

Бариатрическая хирургия индуцирует новый фенотип слизистой оболочки желудка с увеличением функциональных клеток, экспрессирующих глюкагоноподобный пептид-1

Операции на животных и послеоперационные процедуры

Все исследования на животных проводились в соответствии с директивами ЕС по экспериментам на животных и были одобрены Комитет по этике Северного Парижа и министр высшего образования, исследований и инноваций Франции (MESRI APAFIS # 8290).Крыс-самцов линии Wistar массой 220–240 г кормили HFD (Altromin C45, Genestil, Royaucourt, Франция) в течение 4 месяцев. Некоторых из этих крыс умерщвляли и желудки использовали для исследований ex vivo, а других крыс с ожирением HFD случайным образом распределяли в группы RYGB, VSG и группы ложнооперированных (ложных).

Первым этапом операции является удаление негландулярной части желудка (предсердия) с помощью скобки ETS-Flex 35 мм (Ethicon, Issy les Moulineaux, Франция). Для процедуры VSG было резецировано 80% дна желудка путем наложения второй 35-мм скобки ETS-Flex, в результате чего остался тонкий желудочный зонд, соединенный с пищеводом.Для процедуры RYGB применялась вторая линия скоб (Proximate TX30V 30 мм, Ethicon), параллельная первой, для ограничения желудочного мешка, который составлял 20% от исходного размера желудка, при сохранении артериального и венозного кровоснабжения. Тощая кишка была рассечена через 20 см от привратника. Пищеварительную конечность анастомозировали с желудочным мешком, а билиопанкреатическую конечность анастомозировали на 15 см дистальнее гастроеюнального анастомоза. Швы наложили проволокой Prolene 7-0 (Ethicon). У крыс с ложной операцией живот зажимали невооруженным пистолетом для скоб и сразу после этого разрезали тощую кишку и зашивали.Все операции закончились наложением швов викрила 4-0 и викрила 3-0 (Ethicon) для ушивания брюшной стенки и кожи соответственно.

Непосредственный послеоперационный уход включал ежедневную оценку здоровья и поведения каждого животного, подкожные инъекции 10 мл Bionolyte G5 (Baxter, Maurepas, Франция) один раз в день в течение 3 дней. Свободный доступ к твердой нормальной диете (Altromin 1324, Genestil, Royaucourt, Франция) был разрешен с 3-го дня. Крысы, подвергшиеся ложной операции, получали такой же послеоперационный уход, что и хирургические группы.После 3-го дня послеоперационный анализ состоял из ежедневного контроля массы тела (BW) и приема пищи. Состав всего тела измеряли у крыс без анестезии до и после операции с использованием анализатора состава всего тела EchoMRI 100 (EchoMRI, Хьюстон, Техас, США). Через две недели после операции был проведен пероральный тест на толерантность к глюкозе через 16 часов натощак, как описано ранее ^16,17 . Наконец, крыс лишали пищи на ночь, усыпляли и отбирали образцы желудочно-кишечных сегментов для анализа.

Образцы желудка человека

Все пациенты дали письменное информированное согласие, и исследование было одобрено Комитетом по защите человека, Ольне-су-Буа, Сен-Сен-Дени, Франция. Для проведения биопсии желудка пациенты с ожирением и кандидаты на бариатрические операции были набраны в Объединенном центре медико-хирургической помощи при ожирении нашей больницы (HUPNVS). Исследования соответствовали всем применимым нормам, касающимся использования участников исследования на людях, и были проведены в соответствии с критериями, установленными Хельсинкской декларацией.Пациенты соответствовали следующим критериям хирургического лечения ожирения: индекс массы тела не менее 40 или 35 кг / м 2 ² по крайней мере с двумя сопутствующими заболеваниями (артериальная гипертензия, диабет 2 типа, дислипидемия или синдром обструктивного апноэ во сне). Кандидаты на хирургическое вмешательство не имели в анамнезе абдоминальных операций или больших грыж пищеводного отверстия диафрагмы (> 5 см) и в анамнезе не было воспалительных заболеваний желудочно-кишечного тракта, не было язвенной болезни, нарушений моторики пищевода или желудочно-кишечного тракта, таких как гастропарез, не было продолжающегося лечения с потерей веса. прием лекарств, антикоагулянтов или нестероидных противовоспалительных препаратов, хорошее общее состояние здоровья и отсутствие признаков психических проблем.Шестнадцать пациентов [12 женщин / 4 мужчин], средний возраст 42 года [31–52; 95% доверительный интервал (ДИ), N = 16], со средним ИМТ 43,85 [37,3–58,79; 95% ДИ, N = 16]. Во время эндоскопического исследования собирали биопсии глазного дна и антрального отдела, немедленно замораживали в жидком азоте и хранили при -80 ° C до дальнейшей экстракции белка для RIA общего GLP-1.

Для гистологических и иммуногистохимических исследований из файлов отделения патологии больницы Биша, Париж, Франция, ретроспективно был отобран 21 пациент, получавший или не лечившийся бариатрической хирургией.Информированное согласие было получено от всех пациентов (дополнительная таблица 3: характеристики каждого пациента).

Возраст различных групп был: контрольная группа с ожирением [6 женщин (F) / 2 мужчины (M)], средний возраст 42 года [35–51, 95% ДИ], группа VSG [4 F / 2 M], средний возраст. 43,6 года [35–52, 95% ДИ], группа RYGB [5 F / 1 M], средний возраст 45 лет [30–56, 95% ДИ], и не было значительных различий между группами.

Для ИМТ (кг / м ² ): контрольная группа с ожирением: средний ИМТ 49,8 [41–56; 95% ДИ, N = 9], средний ИМТ группы VSG 40.05 ([32,3–42,3, 95% ДИ, N = 6] P <0,01 по сравнению с контрольной группой с ожирением) и медианный ИМТ в группе RYGB 36,70 ([27,8–42,3, 95% ДИ, N = 6] , P <0,001 по сравнению с контрольной группой с ожирением). Никто из людей не болел диабетом и не принимал лекарства для контроля гликемии.

Обратная транскрипция и количественная ПЦР в реальном времени (qPCR)

Общую РНК экстрагировали из замороженных сосков слизистой оболочки глазного дна и антрального отдела у худых крыс или крыс с ожирением HFD с помощью реагента TRIzol (Invitrogen, Saint Aubin, Франция).Один микрограмм из каждого образца был преобразован в кДНК с использованием набора Verso cDNA Synthesis Kit (Thermo Scientific, Waltham, MA, USA). Праймеры (дополнительная таблица 2) были разработаны с использованием центра разработки анализов Roche или на основе предыдущих исследований. Компания Eurofins Genomics (Ebersberg, Германия) синтезировала все праймеры. КПЦР в реальном времени выполняли с использованием системы Light Cycler 480 (Roche Diagnostics, Индианаполис, Индиана, США) в соответствии с инструкциями производителя при следующих условиях: 15-минутная денатурация при 95 ° C с последующими 40 циклами по 10 с при 95 ° C. , 45 с при 60 ° C и 10 с при 72 ° C.Кривые плавления строили для каждой реакции от 55 ° C до 95 ° C при 0,11 ° C / с. Значения Ct интересующего гена были нормализованы с помощью двух различных эталонных генов (L19 и HPRT1), которые были выбраны после множественных сравнений с многочисленными эталонными генами.

Экстракты слизистой оболочки для количественного определения GLP-1

Замороженные постные или страдающие ожирением крысы соскоба слизистой оболочки желудка и биопсии фундального и антрального отделов человека гомогенизировали (TissueLyser II, Retsch France) с ледяным буфером, содержащим 1.5% HCl 1 M и 75% этанол. Гомогенаты центрифугировали при 10000 × g в течение 20 минут при 4 ° C, супернатанты собирали и подвергали гидрофобной хроматографии (картриджи C18 SepPak, Waters Corporation) в соответствии с инструкциями производителя. Элюирование колонок выполняли 1 мл 80% (об. / Об.) Изопропанола / 0,1% трифторуксусной кислоты и полностью сушили в вакуумном концентраторе.

Для целей сравнения весь желудок (дно + антральное отверстие), подвздошная кишка и слизистая оболочка толстой кишки соскребали и гомогенизировали, как указано выше, в присутствии ингибитора DPP-4 для анализа общего и активного GLP-1 RIA.Для общего и активного анализа GLP-1 высушенные гранулы ресуспендировали в буфере для РИА, а для анализа МС высушенные гранулы ресуспендировали в PBS, и в каждом случае концентрацию белка определяли с использованием набора Pierce BCA Protein Assay Kit (Prod # 23225, ThermoFisher Scientific, Франция).

РИА общего и активного GLP-1

РИА общего и активного GLP-1 выполняли с использованием набора Millipore RIA Kit, кат. GLP1T-36HK и кат. GLP1A-35HK (ImmunoDiagnostics, Франция) соответственно.GLP1T-36HK позволяет количественно определять все формы амида GLP-1 (7–36), амида GLP-1 (7–37), GLP-1 (9–36), GLP-1 (9–37), GLP-1 (1–36) амид и GLP-1 (1–37). Антитело, используемое в анализе, специфически связывается с С-концевой частью GLP-1 и как с амидированными, так и с неамидированными формами, и амид GLP-1 (7–36) использовался в качестве стандарта и для получения радиоактивно меченого ГПП-1. Специфичность анализа составляла 100% GLP-1 [7–36], GLP-1 [9–36] и GLP-1 [7–37]. Мы также подтвердили отсутствие перекрестной реактивности с GLP-2 и глюкагоном (дополнительный рис.2). GLP1A-35HK позволяет количественно определять биологически активную форму GLP-1 [т.е. амид GLP-1 (7–36) или GLP-1 (7–37)].

Получение ЖХ-МС / МС

Тридцать микрограммов белка, экстрагированного в двух экземплярах из толстой кишки, подвздошной кишки и желудка, осаждали ацетоном при -20 ° C. Белки расщепляли в течение ночи при 37 ° C с помощью 3 протеаз степени секвенирования: трипсин (12,5 мкг / мл; Promega, Мэдисон, Висконсин, США) в 20 мкл 25 мМ NH ₄ HCO ₃ , протеаза GluC (25 мкг / мл; Promega, Мэдисон, Висконсин, США) в 20 мкл 20 мМ фосфатного буфера и химотрипсин (25 мкг / мл; Sigma-Aldrich) в 20 мкл 100 мМ трис-HCl и 10 мМ CaCl ₂ pH 7 .8. Пептиды обессоливали с помощью наконечников для пипеток ZipTip µ-C18 (Thermo Scientific) и анализировали с помощью Orbitrap Fusion Tribrid, соединенного с Nano-LC Proxeon 1000, оборудованным источником ионов для легкого распыления (все от Thermo Scientific). Пептиды разделяли хроматографией со следующими параметрами: предколонка Acclaim PepMap100 C18 (2 см, внутренний диаметр 75 мкм, 3 мкм, 100 Å), колонка Pepmap-RSLC Proxeon C18 (75 см, внутренний диаметр 75 мкм, 2 мкм, 100 Å). ), Расход 300 нл / мин, используя градиент, повышающийся от 95% растворителя A (вода, 0.1% муравьиной кислоты) до 40% B (80% ацетонитрила, 0,1% муравьиной кислоты) за 120 минут с последующей регенерацией колонки в течение 20 минут для общего цикла 140 минут. Пептиды анализировали в ячейке Orbitrap в режиме полного ионного сканирования с разрешением 120 000 (на м / z 200), с диапазоном масс м / z 350–1550 и мишенью AGC. из 2 × 10 ⁵ . Фрагменты были получены с помощью высокой активации диссоциации, вызванной столкновениями, с энергией столкновения 30% и квадрупольным окном изоляции 1.6 Да. Данные МС / МС были получены в ячейке Orbitrap в режиме максимальной скорости с общим циклом 3 с при разрешении 30 000, с целевым значением AGC 1 × 10 ⁴ , динамическим исключением 50 с и продолжительность исключения 60 с. Приоритетом прекурсора было состояние самого высокого заряда, за ним следовало самое интенсивное состояние. Пептиды с зарядовыми состояниями от 2 до 8 были выбраны для получения МС / МС. Максимальное время накопления ионов было установлено на 250 мс для сбора данных MS и 30 мс для сбора данных MS / MS в режиме распараллеливания.Все данные МС и МС / МС для образцов белка обрабатывали с помощью программного обеспечения Proteome Discoverer (Thermo Scientific, версия 2.1), соединенного с собственной поисковой системой Mascot (Matrix Science, версия 2.5.1). Допуск по массе был установлен на уровне 7 частей на миллион для ионов-предшественников и 0,5 Да для фрагментов. Параметр фермента был установлен как полеспецифический для каждого используемого фермента (трипсин, Glu-C, Lys-C и химотрипсин) для идентификации предполагаемых сайтов эндогенных протеаз. Допускались следующие вариабельные модификации: окисление (Met), фосфорилирование (Ser, Thr) и ацетилирование (N-термин белка).База данных SwissProt (02/2017) с таксономией Rattus norvegicus использовалась на этапе идентификации MS / MS. Идентификация пептидов была подтверждена с использованием порога вероятности ложного обнаружения 1%, рассчитанного с помощью алгоритма Percolator. Содержание пептидов и белков определяли с помощью узла детектора площади иона-предшественника из программного обеспечения Proteome Discoverer 2.1.

Высвобождение GLP-1 из фрагментов желудка и толстой кишки, инкубированных ex vivo

Желудки и толстые кишки худых крыс с ND или HFD с ожирением собирали после эвтаназии, промывали для удаления мусора и затем разрезали на мелкие кусочки.Небольшие кусочки каждого сегмента инкубировали на бане при 37 ° C при перемешивании в среде, содержащей PBS, непрерывно газированный 95% O ₂ –5% CO ₂ . После 30-минутной стабилизационной инкубации добавляли PBS (без IBMX) и 100 мкМ 3-изобутил-1-метилксантина (с IBMX) (Sigma Chemicals, St Louis Mo) и инкубировали в течение 60 минут, чтобы каждая крыса служила своей собственной контроль. После этого супернатанты собирали и фрагменты замораживали до гомогенизации и количественного определения белка с помощью набора Pierce BCA Protein Assay Kit (Prod # 23225, ThermoFisher Scientific, Франция).Супернатанты хранили при -20 ° C до RIA GLP-1. Высвобождение GLP-1 (пМ) в каждом инкубированном фрагменте нормализовали по количеству белка, определенному с помощью набора Pierce BCA Protein Assay Kit (Prod # 23225, ThermoFisher Scientific, Франция).

Гистологические, иммуногистохимические и иммунофлуоресцентные исследования

Образцы тканей крыс немедленно фиксировали в формалине в течение 24 часов, обезвоживали и заливали парафином. Из каждого отобранного парафинового блока вырезали трехмикронный срез слизистой оболочки глазного дна.Были проведены окрашивания гематоксилином, флоксином, шафраном и альциановым синим + PAS. Иммуногистохимия выполнялась с использованием автоматического иммуногистохимического окрашивающего устройства в соответствии с инструкциями производителя (автокраситель Bond-Max, Leica, Wetzlar, Германия) после депарафинизации и регидратации парафиновых срезов и определения антигена путем предварительной обработки высокой температурой при pH 9. Затем срезы тканей подвергали иммуноокрашиванию. с первичными антителами: моноклональные мышиные антитела против человеческого Ki67 (M7240; Dako), разведенные 1: 100, pH 9; моноклональное мышиное антитело GLP-1 [8G9] (Abcam, Cambridge, UK MA), разведенное 1: 3000, pH 9, поликлональное кроличье антитело 5HT (серотонин) (Immunostar WI, США), разбавленное 1/10 000, моноклональное антитело грелина мыши / человека SST (R&D Systems # MAB8200) или антитело против SST (Dako, # A0566) использовали в разведении 1: 500.Замена первичного антитела на PBS использовалась в качестве отрицательного контроля. Затем ткани инкубировали с полимером вторичных антител в течение 10 мин (обнаружение Bond Polymer Refine; DS9800; Leica Microsystems) и проявляли с DAB-хромогранином. Трое патологов, A.S., A.C. и M.H., не знавшие клинических данных, оценивали иммуноокрашивание. Каждый слайд сканировали с помощью системы Aperio ScanScope CS (Leica Microsystemes SAS, Нантер, Франция). Морфометрические анализы были выполнены с использованием программного обеспечения Calopix версии 4.1.0.4 (порошок TRIBVN, Шатийон, Франция) не менее чем на 2 секции на образец. Количество клеток GLP-1 оценивали в 3–4 поперечных срезах.

Для иммунофлуоресценции в качестве первичных антител использовали моноклональные [8G9] к GLP-1, моноклональные антитела SST (# MAB2358) и моноклональные антитела к человеческому / мышиному грелину (R&D systems # MAB8200), а вторичными антителами были Alexa Fluor® 488. AffiniPure Donkey Anti-Rat IgG и Cyanine Cy ™ 3 AffiniPure Donkey Anti-Mouse IgG от Jackson ImmunoResearch (Europe Ltd.) и использовались при конечном разведении 1/300. Ядра окрашивали йодидом пропидия от (Invitrogen France) или раствором Hoechst (Sigma Chemicals, Сент-Луис, Миссури). Срезы наблюдали с помощью флуоресцентной микроскопии и анализировали с помощью конфокальной микроскопии Sp8 Leica (Leica Microsystems, Франция)

Измерение уровней GLP-1 в воротной вене или желудочной вене после нагрузки на желудок или двенадцатиперстную кишку глюкозой

Крысы Wistar (без худых , Страдающих ожирением HFD или ожирением HFD, оперированных на VSG) голодали в течение ночи со свободным доступом к воде.Их анестезировали внутримышечной инъекцией уретана (1,125 г / кг), и катетер вводили либо в воротную вену, либо в желудочную вену. Через тридцать пять минут (период стабилизации) после завершения операции привратник пережимали, и крысы получали внутрижелудочную или интрадуоденальную нагрузку глюкозой (2 г / кг массы тела) или PBS в объеме, который не приводил к растяжению желудка. Образцы крови собирали из воротной вены или желудочной вены до и через 15 и 30 минут после нагрузки.

В другой серии экспериментов мы измерили общий и активный уровни GLP-1 в желудочной вене после нагрузки на желудок глюкозой. С этой целью образцы крови собирали в гепаринизированные пробирки, содержащие ингибитор DPP-4 (Roche Diagnostics, Indianapolis, IN, USA), из желудочной вены до и через 15 и 30 минут после нагрузки на желудок глюкозой. Кровь центрифугировали (2500 × g, , 4 ° C, 10 мин), и плазму собирали, немедленно замораживали и хранили при -20 ° C до RIA для общего и / или активного GLP-1.

Статистический анализ

Данные представлены в виде разбросанных графиков или средних значений +/– стандартной ошибки (SE) или стандартной ошибки среднего (SEM). Односторонний дисперсионный анализ (ANOVA) с последующим тестом множественного сравнения Тьюки использовался для сравнения более двух групп; Для сравнения двух групп использовались непараметрические критерии Манна – Уитни. Двусторонний дисперсионный анализ был использован для сравнения эффекта, зависящего от времени.

Сводка отчетов

Дополнительная информация о дизайне исследования доступна в Сводке отчетов по исследованиям природы, связанной с этой статьей.

Фармакологический подход к подавлению желудочной кислоты: прошлое, настоящее и будущее – FullText – Заболевания пищеварения 2020, Vol. 38, № 2

Аннотация

Менее 2 столетий прошло с момента обнаружения соляной кислоты в желудке. Уточнение молекулярных механизмов позволило эффективно подавить секрецию желудочного сока. Впечатляющие достижения в лечении связанных с кислотой расстройств представляют собой синтез вкладов нескольких блестящих фармакологов, фундаментальных ученых и врачей-клиницистов.Эффективная терапия, подавляющая кислотность желудочного сока, значительно улучшила лечение и исход кислотозависимых расстройств. Внедрение ингибиторов протонной помпы (ИПП) в клиническую практику значительно изменило лечение заболеваний верхних отделов желудочно-кишечного тракта. ИПП представляют собой «золотой стандарт» терапии кислотных расстройств. Тем не менее, некоторые проблемы сохраняются в терапии связанных с кислотой заболеваний, включая ведение пациентов, которые неадекватно реагируют на терапию ИПП, более эффективную гастропротекцию или более мощное антисекреторное лечение для эрадикации инфекции Helicobacter pylori .В настоящее время разрабатываются и исследуются новые антисекреторные препараты, которые в дальнейшем обеспечивают более эффективное и глубокое ингибирование секреции желудочной кислоты. Основным достижением стала разработка антагонистов кислотной помпы, препаратов, блокирующих кислоту калиевых каналов (P-CAB). Долгосрочные исследования, сравнивающие P-CAB и PPI, помогут определить точное место и профиль безопасности этого класса препаратов при лечении связанных с кислотой расстройств.

© 2019 S. Karger AG, Базель

---

Введение

Функции и секреция желудка веками оставались настоящей загадкой.До 17 века существовало примечательное заблуждение относительно роли желудка в пищеварительном процессе. Формулировка нескольких представлений о природе желудочной жидкости долгое время оставалась спорной. Древние греки определяли кислоту только как горько-кислые жидкости [1].

Парацельс (1493–1541) считал, что желудок содержит кислоту, необходимую для пищеварения, но источник и природа кислоты были неясны. Он считал, что кислота в желудке человека возникает из-за употребления кислой курортной воды («голодная кислота») [2].

Лазаро Спалланцини (1729–1799), профессор естествознания в Павии, открыл пищеварительную способность слюны и подтвердил растворяющие свойства желудочного сока. В 1780 году опубликовал свои наблюдения в этой области, но он не был уверен в своих выводах относительно кислотности желудочного сока. Окончательное решение о точной природе кислоты, производимой желудком, было дано в 1823 году Уильямом Праутом. Он определенно идентифицировал соляную кислоту в желудочном соке у людей и других животных, и он смог количественно определить общее количество и свободную соляную кислоту и хлорид [3, 4].

Научные исследования продолжились первым описанием желудочных желез как источника желудочной кислоты (Пуркинье и Гольджи, середина и конец 19 века). Роль блуждающих нервов в контроле секреции желудочного сока и теория «нервизма» (нейрорефлекторная стимуляция желудочной секреции блуждающим нервом) была определена Павловым (начало 20 века). Эта теория была расширена за счет опосредованной гистамином концепции желудочной секреции (Popielski and Code, середина 20 века). Сложность желудочной секреции была завершена в 1836 году Шванном, который описал водорастворимый фактор, названный «пепсин», и пришел к выводу, что желудочная кислота и пепсин необходимы для пищеварения.Влияние кислоты желудочного сока на этиопатогенез повреждения слизистой оболочки резюмируется в знаменитом заключении Шварца («Нет кислоты – нет язвы», 1910). Было продемонстрировано, что простагландины влияют на все компоненты защитных барьеров слизистой оболочки желудка (Vane, 1970-е) [5, 6].

Helicobacter pylori был впервые описан как возбудитель пептической язвы Барри Маршаллом и Робином Уорреном (1984), которые позже получили Нобелевскую премию за открытие, что бактерии могут вызывать заболевания, которые ранее считались вызванными человеческим фактором.Это открытие побудило многих экспертов заключить, что психологические факторы, в частности знаменитая теория стресса Ганса Селье, имеют второстепенное значение [7].

Выявление первичной патогенной роли H. pylori в язвенной болезни (PUD) произвело революцию в наших представлениях о язве слизистой оболочки и позволило вылечить болезнь [8, 9].

Антациды, защитные агенты, холинолитики, антагонисты гастрина и простагландины десятилетиями использовались для лечения ЯБ с неадекватными эффектами и общими побочными эффектами.

Регуляция секреции желудочной кислоты

Секреция желудочной кислоты влияет как центрально, так и периферически и точно регулируется нервными (ацетилхолин), гормональными (гастрин) и паракринными (гистамин, соматостатин) механизмами. Стимулирующий эффект ацетилхолина и гастрина опосредуется увеличением цитозольного кальция, тогда как действие гистамина опосредуется активацией аденилатциклазы и образованием циклического аденозинмонофосфата. Потенцирование между гистамином и гастрином или ацетилхолином может отражать пострецепторное взаимодействие между отдельными путями и способность гастрина или ацетилхолина высвобождать гистамин из энтерохромаффиноподобных клеток слизистой оболочки.Основным циркулирующим стимулом секреции кислоты является гастрин, который не стимулирует непосредственно париетальные клетки, но мобилизует гистамин из оксинтовой слизистой оболочки через энтерохромаффиноподобные клетки. Жесткая регуляция париетальных клеток обеспечивает правильную секрецию HCl. Последним фактором секреции кислоты является стимуляция фермента протонного насоса (H ⁺ , K ⁺ -ATPase), экспрессируемого в париетальных клетках, который регулирует обмен цитоплазматического H ⁺ на внеклеточный K ⁺ .H ⁺ , секретируемый в просвет желудка с помощью H ⁺ , K ⁺ -АТФазы, соединяется с люминальным Cl ^– с образованием желудочной кислоты. После того, как произошла соответствующая секреция желудочной кислоты, механизм обратной связи прекращает секрецию желудочной кислоты. Основным ингибитором секреции кислоты является соматостатин. Снижение внутрижелудочного pH стимулирует высвобождение соматостатина из D-клеток антрального отдела. Соматостатин подавляет не только секрецию кислоты желудочного сока, но и замедляет высвобождение гастрина. Кроме того, закисление двенадцатиперстной кишки может вызвать высвобождение секретина, который также подавляет секрецию кислоты желудочного сока [10].В некоторых особых случаях секреция кислоты желудочного сока нарушается, что приводит к чрезмерному снижению или увеличению выхода кислоты. Хронический атрофический гастрит – обычно бессимптомное состояние, имеющее большое значение, поскольку у ряда пациентов оно перерастает в рак желудка. Есть 2 типа атрофического гастрита. Атрофический гастрит может быть связан с давней инфекцией H. pylori (мультифокальный атрофический гастрит) и с аутоиммунным процессом, который постепенно разрушает кислородную слизистую оболочку (аутоиммунный атрофический гастрит).Аутоиммунный гастрит – это хроническое прогрессирующее воспалительное состояние, которое приводит к замещению массы париетальных клеток атрофической и метапластической слизистой оболочкой. Патогенез аутоиммунного атрофического гастрита включает опосредованную антителами потерю париетальных клеток, приводящую к гипохлоргидрии, а затем ахлоргидрии, в то время как аутоантитела против внутреннего фактора ухудшают абсорбцию витамина B ₁₂ . Аутоиммунный атрофический гастрит прогрессирует от легкого хронического воспаления тела желудка до поздней стадии, связанной с тяжелой формой дефицита витамина B ₁₂ , известной как злокачественная анемия [11].Гастринома – очень редкая опухоль, приводящая к гиперсекреции гастрина, гиперхлоргидрии и характеризующаяся синдромом Золлингера-Эллисона, то есть тяжелой и множественной гастродуоденальной язвой и обильной диареей. Заболевание может быть спорадическим или семейным в рамках синдрома множественной эндокринной неоплазии 1 типа. Опухоли обычно располагаются в двенадцатиперстной и поджелудочной железе [12].

H

₂ Антагонисты рецепторов

Подавление секреции кислоты желудочного сока с помощью антисекреторных агентов было основой лечения связанных с кислотой заболеваний.Развитие концепции гистаминовых (h3) -рецепторов (Джеймс Блэк, 1970-е) дало толчок появлению мощных антагонистов h3-рецепторов (H ₂ RA), которые частично подавляют базальную и стимулируемую едой секрецию кислоты. Некоторые из этих агентов могут вызывать внутрижелудочный pH> 3, сохраняющийся примерно 10 ч / день при приеме дважды в день в рекомендуемых дозах. H ₂ RA обладают высокой селективностью и не влияют на h2-рецепторы; кроме того, они не являются холинолитиками. Уровень подавления желудочного сока может способствовать заживлению язв двенадцатиперстной кишки; однако было доказано, что подавление секреции кислоты желудочного сока, достигаемое с помощью H ₂ RA, является субоптимальным для эффективного контроля более тяжелых связанных с кислотой расстройств, особенно для лечения тяжелого эрозивного эзофагита, и имеет ограниченную эффективность при других показаниях (например,g., кровотечение из верхних отделов желудочно-кишечного тракта). Кроме того, развитие толерантности к H ₂ RA еще больше ограничивает их широкое клиническое использование. Несмотря на это, H ₂ RA могут использоваться как часть стратегии постепенного снижения гастроэзофагеальной рефлюксной болезни (ГЭРБ) для самоконтроля (лечение по требованию) связанных с кислотой симптомов. Было также высказано предположение, что эффективность ночной дозы H ₂ RA может быть полезной для устранения ночного кислотного прорыва [13-15].

Ингибиторы протонной помпы

Конечным этапом секреции кислоты является стимуляция протонной помпы (H ⁺ , K ⁺ -АТФаза) для секретирования ионов водорода в просвет желудка в обмен на ионы калия. Открытие протонных насосов в париетальных клетках (Ganser, Forte and Sachs, конец 1970 г.) и признание того, что протонный насос (H ⁺ , K ⁺ -АТФаза) является заключительным этапом секреции кислоты, открыли путь к более сильному действию. и глубокое ингибирование кислоты, что привело к разработке ингибиторов протонной помпы (ИПП; конец 1980-х), которые нацелены на прямое ингибирование этого фермента [16-18].ИПП произвели революцию в терапии нарушений, связанных с кислотой, и представляют собой один из наиболее часто назначаемых классов лекарств. Прием ИПП один раз в сутки подавляет максимальный выход кислоты примерно на 66% через 5 дней. ИПП могут индуцировать внутрижелудочный pH выше 3 в течение примерно 17 ч / день и внутрижелудочный pH выше 5 примерно в течение 9 ч / день после перорального введения один раз в день в рекомендуемых дозах. Можно получить еще более высокие целевые значения pH с помощью более высоких доз и непрерывного внутривенного введения ИПП.Они наиболее эффективны, когда париетальные клетки стимулируют секрецию желудочного сока после еды. Этот феномен имеет практическое клиническое значение для определения времени приема. Максимальная секреторная способность желудочного сока может не восстановиться в течение 24–48 часов после прекращения терапии ИПП [19, 20].

Химически все доступные PPI состоят из бензимидазольного кольца и пиридинового кольца, но различаются по конкретному замещению кольца. Все ИПП имеют схожий механизм действия. Однако есть некоторые различия между ИПП в их фармакокинетике, фармакодинамике и потенциале лекарственного взаимодействия.Хотя отдельные ИПП во многих случаях обладают одинаковой эффективностью, при выборе схемы лечения следует учитывать различия между ними [21, 22].

Многие исследования показали явное превосходство ИПП над H ₂ RA в качестве лечения связанных с кислотой расстройств. Было показано, что существует значительная корреляция между заживлением и степенью, продолжительностью подавления желудочного сока и продолжительностью лечения [23].

Несколько метаанализов действительно показали, что ИПП более эффективны, чем Н ₂ РА, при лечении ЯБ, тяжелой ГЭРБ, синдрома Золлингера-Эллисона или кровотечений из верхних отделов желудочно-кишечного тракта [24–27].Присутствие кислоты необходимо при поражении слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки, вызванном приемом нестероидных противовоспалительных препаратов (НПВП) и аспирином. Существуют убедительные доказательства того, что ИПП могут эффективно предотвращать и лечить НПВП и аспирин-ассоциированные поражения слизистой оболочки гастродуоденальной зоны [28, 29]. Повышение внутрижелудочного pH с помощью ИПП улучшает антимикробную и бактерицидную эффективность антибиотиков против эрадикации H. pylori . Как следствие, комбинация ИПП с антибиотиками является хорошо зарекомендовавшей себя стандартной схемой первой линии для эрадикации H.pylori [30].

Ключевые сообщения, касающиеся основных показаний и надлежащего использования ИЦП, сведены в Таблицу 1 [31-33].

Таблица 1.

Текущие показания и надлежащее использование терапии ИПП [31-33]

Безопасность длительной терапии ИПП

Терапия ИПП обычно используется вне четких показаний, что приводит к широкому распространению несоответствующего использования или для показания с небольшой пользой; поэтому неправильное длительное лечение вызывает беспокойство.Хотя чрезмерное и неправильное использование может поставить под сомнение профиль безопасности, переносимость ИПП очень хорошая. Частота нежелательных явлений обычно составляет 1–3%. Долгосрочные исследования показывают, что уровень переносимости такой же, как и в краткосрочных исследованиях. Основные показания, целесообразность и неправильное долгосрочное использование ИПП, а также некоторые опасения по поводу долгосрочной терапии ИПП были недавно подробно рассмотрены Scarpignato et al. [31], Ядлапати и Кахрилас [32], а также Фридберг и др. [33]. Наблюдательные исследования вызвали опасения, что ИПП могут быть связаны с повышенным риском пневмонии, остеопороза, Clostridium difficile -ассоциированной диареи, сердечно-сосудистых заболеваний, заболеваний печени, хронических заболеваний почек, микроскопического колита, деменции или карциноида желудка.Несмотря на большое количество исследований, общее качество доказательств побочных эффектов ИПП низкое [31, 34–38]. Совсем недавно в большом плацебо-контролируемом рандомизированном исследовании с участием 17 598 участников долгосрочные нежелательные явления были аналогичны в группе ИПП (пантопразола) по сравнению с группой плацебо с периодом наблюдения 53000 пациенто-лет: пантопразол не был связан с какими-либо значительными нежелательными явлениями при использовании в течение 3 лет, за возможным исключением повышенного риска кишечных инфекций (1,4 vs.1,0% в группе плацебо; ИЛИ 1,33; 95% ДИ 1,01–1,75) [37].

Общие клинические преимущества терапии ИПП перевешивают потенциальные риски, но те, у кого нет четких показаний, подвержены только потенциальным незначительным рискам лечения ИПП. Следовательно, соблюдение научно обоснованных показаний является обязательным для безопасного и эффективного лечения ИПП. Уменьшение количества неправильных назначений ИПП может минимизировать вероятность нежелательных явлений [31, 34–38].

Ограничения терапии ИПП

Несмотря на общую эффективность ИПП, у них есть некоторые недостатки, по крайней мере, из-за их фармакологических ограничений, включая задержку начала действия, неполное подавление кислотности, необходимость приема пищи перед едой для достижения максимальной эффективности.Вот почему остаются некоторые проблемы в лечении заболеваний, связанных с кислотой. К ним относятся лечение пациентов с ГЭРБ, которые не реагируют должным образом на терапию ИПП (ГЭРБ, резистентная к ИПП), более эффективная гастропротекция (лечение и профилактика повреждения слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта, вызванное приемом НПВП и аспирином) или оптимальная медикаментозная терапия кровотечения из верхних отделов желудочно-кишечного тракта, не связанного с варикозом. Существующие ИПП также не подходят для лечения неэрозивной рефлюксной болезни «по требованию». Несмотря на терапию ИПП, восстановление секреции желудочного сока в течение ночи, называемое «ночной выброс кислоты», также является проблемой [39, 40].Среди проблем, растущая скорость безуспешной эрадикации H. pylori также вызывает серьезную озабоченность и требует модификации терапевтических стратегий с оптимальной комбинацией мощных антисекреторных и антибиотических схем. Есть несколько объяснений снижения эффективности ИПП-кларитромицин, содержащего стандартную тройную терапию: комплаентность, высокая кислотность желудочного сока, высокая бактериальная нагрузка и бактериальные штаммы, но наиболее важным является повышение устойчивости H. pylori к кларитромицину.Было продемонстрировано, что уровень устойчивости H. pylori к антибиотикам растет в большинстве регионов мира [30].

Разработка новых лекарств

В настоящее время исследуются несколько новых подходов к исправлению фармакологических ограничений ИПП. Попытки преодолеть эти проблемы включали разработку сильнодействующих агонистов рецепторов H ₂ , агонистов гастрина, небензимидазольных ИПП, ИПП с пролонгированным и отсроченным высвобождением, комбинации ИПП, новых агентов с более длительным периодом полураспада и нового поколения ИПП.Еще предстоит определить, принесут ли эти новые подходы значительную клиническую пользу или принесут с собой новые неожиданные побочные эффекты (таблица 2) [41–43].

Таблица 2.

Разработка новых лекарств для ингибирования кислоты желудочного сока [41-43]

Калий-конкурентные блокаторы кислоты

Основным достижением стала разработка антагонистов кислотной помпы, препаратов, блокирующих кислотные каналы калиевых каналов (P-CABs). ), которые блокируют канал K ⁺ , H ⁺ -ATPase K ⁺ .P-CAB блокируют K-обменный канал протонной помпы, что приводит к конкурентному, обратимому, независимому от пищи ингибированию секреции кислоты желудочного сока, имеют быстрое начало действия и поддерживают длительное и постоянное повышение внутрижелудочного pH. Основные различия в механизме действия между PPI и P-CAB показаны в таблице 3.

Таблица 3.

Основные различия в механизмах действия между PPI и P-CAB [20, 41]

Вонопразан фумарат (Takecab®) – это первый в своем классе блокатор кислоты, конкурирующий с калием, который доступен в Японии с февраля 2015 года и до сих пор был представлен только в небольшом количестве азиатских стран [44–47].Основные фармакологические свойства вонопразана приведены в таблице 4.

Таблица 4.

Основные фармакологические свойства вонопразана [44-47]

Вонопразан 20 мг оказался эффективен и не уступал лансопразолу 30 мг с точки зрения эндоскопии. скорость заживления эрозивного эзофагита через 8 недель. Кроме того, скорость заживления эзофагита через 2 и 4 недели была немного выше при лечении вонопразаном в дозе 20 мг по сравнению с лечением лансопразолом в дозе 30 мг. Профиль безопасности вонопразана 20 мг был аналогичен профилю безопасности лансопразола 30 мг один раз в сутки [48].Чрезвычайно мощный антисекреторный эффект вонопразана может быть особенно полезен при длительном лечении пациентов с тяжелым эзофагитом и пищеводом Барретта. Действительно, было высказано предположение, что вонопразан более эффективен, чем большинство ИПП, для пациентов с тяжелым эрозивным эзофагитом, а эффективность фонопразана при поддерживающем лечении ГЭРБ может быть выше, чем у некоторых ИПП [49, 50].

Также предполагается, что вонопразан может стать новым вариантом лечения для профилактики НПВП или связанных с аспирином побочных эффектов гастродуоденальной слизистой оболочки у пациентов с высоким риском [51, 52].

Наконец, также была рассмотрена полезность вонопразана в качестве альтернативы терапии ИПП для эрадикации H. pylori , особенно в резистентных и трудно поддающихся лечению группах. Тройная терапия на основе фонопразана показала более высокую эффективность с точки зрения эрадикации H. pylori по сравнению с тройной терапией на основе ИПП. Более того, похоже, что вонопразан превосходит традиционную терапию на основе ИПП для эрадикации устойчивых к кларитромицину штаммов H. pylori .Тройная терапия на основе фонопразана показала сопоставимую переносимость и частоту нежелательных явлений [53, 54]. Также было высказано предположение, что двойная терапия вонопразаном и амоксициллином так же эффективна, как тройная терапия вонопразаном, амоксициллином и кларитромицином, предполагая, что двойная терапия на основе вонопразана может обеспечить и приемлемую скорость эрадикации инфекции H. pylori (намерение 92,9%). анализ на лечение, 95% доверительный интервал 82,7–98,0%) без необходимости применения вторых противомикробных препаратов, таких как кларитромицин [55, 56].

Долгосрочные исследования, сравнивающие P-CAB и PPI, помогут четко определить точное место и профиль безопасности этого нового класса лекарств при лечении связанных с кислотой расстройств.

Заявления о раскрытии информации

Авторы не заявляют о конфликте интересов.

Вклад авторов

L.H .: замысел рецензирования, подготовки и исправления рукописи. Т.Б .: Подготовка рукописи. Л.Б .: Подготовка рукописи, поиск ссылок.З.Т .: критическая рецензия на рукопись. Все авторы одобрили окончательную рукопись.

Список литературы

1. Модлин ИМ. От Праута до протонной помпы – история науки о секреции желудочного сока и хирургии язвенной болезни.Surg Gynecol Obstet. 1990 Янв; 170 (1): 81–96.
2. Кусулис А.А., Цокалас Г., Арменис И., Маринели Ф., Караману М., Андроутсос Г. От «голодной кислоты» до пепсиногена: путешествие во времени в поисках желудочного секрета. Энн Гастроэнтерол. 2012. 25 (2): 119–22.
3. Модлин И.М., Сакс Г.Заболевания, связанные с кислотой – Биология и лечение. Милан: Schnetztor-Verlag GmnH Констанц; 1998 г.
4. Прут В. О природе кислых солевых веществ, обычно имеющихся в желудках животных. Кишечник. 1974 Январь; 15 (1): 45.1–9.1.
5. Банич М., Малфертхайнер П., Бабич З., Остойч Р., Куюнджич М., Фатович-Ференчич С. и др.Историческое влияние на исследования язвенной болезни. Dig Dis. 2011; 29 (5): 444–53.
6. Konturek SJ, Konturek PC, Brzozowski T, Konturek JW, Pawlik WW. От нервов и гормонов до бактерий в желудке; Нобелевская премия за достижения в области гастрологии за последнее столетие.J. Physiol Pharmacol. 2005 декабрь; 56 (4): 507–30.
7. Херсени Л., Юхас М., Михай Э., Тулассай З. [Язвенная болезнь и стресс]. Орв Хетиль. 2015 август; 156 (35): 1426–9.
8. Гейнор EC, Шимански CM.30-летие семинаров по Campylobacter, Helicobacter и родственным организмам – чему мы научились за три десятилетия? Front Cell Infect Microbiol. 2012 фев; 2:20.
9. Грэм Д.Ю. В анамнезе: Helicobacter pylori, язва двенадцатиперстной кишки, язвенная болезнь желудка и рак желудка. Мир Дж. Гастроэнтерол.2014 Май; 20 (18): 5191–204.
10. Engevik Ac, Kaji I, Goldenring JR. Физиология париетальной клетки желудка. Physiol Rev. DOI: 10.1152 / Physrev.00016.2019.
11. Ли И, Ся Р, Чжан Б., Ли К.Хронический атрофический гастрит: обзор. J Environ Pathol Toxicol Oncol. 2018; 37 (3): 241–59.
12. Hain E, Coriat R, Dousset B, Gaujoux S. [Управление гастриномой]. Presse Med. 2016 ноябрь; 45 (11): 986–91.
13. Хуанг Дж.К., Хант Р.Х.Фармакологические и фармакодинамические основы антагонистов H (2) -рецепторов и ингибиторов протонной помпы для практикующего врача. Лучшие Практики Рес Клин Гастроэнтерол. 2001 июн; 15 (3): 355–70.
14. Шим Ю.К., Ким Н. Эффект антагониста рецептора h3 в ингибировании кислоты и его клиническая эффективность.Корейский J Gastroenterol. 25 июля 2017 г .; 70 (1): 4–12.
15. Тутуян Р., Кац ПО, Кастелл Д.О. Ночной прорыв в кислоте: pH, лекарства и насекомые. Eur J Gastroenterol Hepatol. 2004 Май; 16 (5): 441–3.
16. Херси SJ, Сакс Г.Секреция желудочного сока. Physiol Rev.1995, январь; 75 (1): 155–89.
17. Сакс Дж., Шин Дж. М., Брайвинг К., Уоллмарк Б., Херси С. Фармакология насоса желудочного сока: H +, K + АТФаза. Annu Rev Pharmacol Toxicol. 1995. 35 (1): 277–305.
18. Айхара Т., Накамура Э., Амагасе К., Томита К., Фуджишита Т., Фурутани К. и др.Фармакологический контроль секреции кислоты желудочного сока для лечения язвенной болезни, связанной с кислотой: прошлое, настоящее и будущее. Pharmacol Ther. 2003 апр; 98 (1): 109–27.
19. Гарнетт WR. История подавления кислоты: внимание к условиям больницы. Фармакотерапия. 2003 окт; 23 (10, часть 2): 56S – 60S.
20. Скарпиньято С., Пелозини И., Ди Марио Ф. Кислотоподавляющая терапия: куда мы пойдем дальше? Dig Dis. 2006. 24 (1-2): 11–46.
21. Herszényi L, Tulassay Z.[Сравнительное исследование ингибиторов протонной помпы]. Орв Хетиль. 2001 сентябрь; 142 (36): 1953–61.
22. Hagymási K, Müllner K, Herszényi L, Tulassay Z. Обновленная информация о фармакогеномике ингибиторов протонной помпы. Фармакогеномика. 2011 июн; 12 (6): 873–88.
23. Бургет Д.В., Чивертон С.Г., Хант Р.Х.Есть ли оптимальная степень кислотного подавления для заживления язв двенадцатиперстной кишки? Модель взаимосвязи между заживлением язвы и подавлением кислоты. Гастроэнтерология. 1990 Авг; 99 (2): 345–51.
24. Салас М., Уорд А., Каро Дж. Являются ли ингибиторы протонной помпы препаратом первого выбора для лечения острых язв желудка? Метаанализ рандомизированных клинических исследований.BMC Gastroenterol. 2002 июл; 2 (1): 17.
25. van Pinxteren B, Numans ME, Bonis PA, Lau J. Краткосрочное лечение ингибиторами протонной помпы, антагонистами h3-рецепторов и прокинетиками для симптомов, подобных гастроэзофагеальной рефлюксной болезни, и эндоскопической отрицательной рефлюксной болезни. Кокрановская база данных Syst Rev.2004 Октябрь; 4 (4): CD002095.
26. Цзян М., Чен П., Гао К. Систематический обзор и сетевой мета-анализ вмешательств при кровотечении из верхних отделов желудочно-кишечного тракта. Cell Physiol Biochem. 2016; 39 (6): 2477–91.
27. Чжан Ю.С., Ли Кью, Хэ Б.С., Лю Р., Ли З.Дж.Терапия ингибиторами протонной помпы по сравнению с терапией антагонистами рецептора h3 при кровотечении из верхних отделов желудочно-кишечного тракта после эндоскопии: метаанализ. Мир Дж. Гастроэнтерол. 2015 Май; 21 (20): 6341–51.
28. Ростом А., Дьюб С., Уэллс Дж., Тагвелл П., Уэлч В., Джоликер Э. и др. Профилактика гастродуоденальных язв, вызванных приемом НПВП.Кокрановская база данных Syst Rev.2002; 4 (4): CD002296.
29. Hritz I, Herszényi L, Molnár B, Tulassay Z, Prónai L. Совместная терапия с ингибиторами протонной помпы нормализует повышенный обмен клеток слизистой оболочки желудка как при приеме НПВП, так и при селективных приемах ЦОГ-2. Int J Immunopathol Pharmacol. 2005, январь-март; 18 (1): 75–84.
30. Мальфертхайнер П., Меграуд Ф., О’Морайн К.А., Гисберт Дж. П., Койперс Э. Дж., Аксон А. Т. и др .; Европейская группа по изучению хеликобактер и микробиоты и консенсусная группа. Управление инфекцией Helicobacter pylori – Маастрихтский V / Флорентийский консенсусный доклад. Кишечник. 2017 Янв; 66 (1): 6–30.
31. Скарпиньято С, Гатта Л., Зулло А, Бландицци С; Группа компаний SIF-AIGO-FIMMG; Итальянское общество фармакологии, Итальянская ассоциация больничных гастроэнтерологов и Итальянская федерация врачей общей практики.Эффективная и безопасная терапия ингибиторами протонной помпы при кислотозависимых заболеваниях – позиционный документ, посвященный преимуществам и потенциальному вреду подавления кислотности. BMC Med. 2016 ноя; 14 (1): 179.
32. Ядлапати Р., Кахрилас П.Дж. Когда целесообразно использовать ингибитор протонной помпы? BMC Med. 2017 Февраль; 15 (1): 36.
33. Фридберг Д.Е., Ким Л.С., Ян YX. Риски и преимущества длительного использования ингибиторов протонной помпы: обзор экспертов и рекомендации Американской гастроэнтерологической ассоциации. Гастроэнтерология. 2017 Март; 152 (4): 706–15.
34. Pregun I, Herszényi L, Juhász M, Miheller P, Hritz I, Patócs A, et al.Влияние терапии ингибиторами протонной помпы на уровень хромогранина а в сыворотке. Пищеварение. 2011; 84 (1): 22–8.
35. Бакуц Т., Вайзенбергер О., Вираг А., Херсени Л. Использование ингибиторов протонной помпы: прописываем ли мы их по четким показаниям? CEU J Gastroentrol Hepatol. 2017; 3: 41–4.
36. Herszényi L, Bakucz T., Weiszenberger O, Virág A, Pálinkás D, Andrási P.Безопасность длительной терапии ингибиторами протонной помпы. CEU J Gastroentrol Hepatol. 2017; 3: 36–40.
37. Моайеди П., Эйкельбум Дж. В., Бош Дж., Коннолли С. Дж., Дьял Л., Шестаковска О. и др .; КОМПАС следователи. Безопасность ингибиторов протонной помпы основана на большом многолетнем рандомизированном исследовании пациентов, получающих ривароксабан или аспирин.Гастроэнтерология. 2019 сентябрь; 157 (3): 682–691.e2.
38. Корли Д.А. Безопасность и осложнения длительной терапии ингибиторами протонной помпы: ближе к истине. Гастроэнтерология. 2019 сентябрь; 157 (3): 604–7.
39. Tytgat GN.Есть ли неудовлетворенные потребности в подавлении кислоты? Лучшие Практики Рес Клин Гастроэнтерол. 2004; 18 Suppl: 67–72.
40. Strand DS, Kim D, Peura DA. 25 лет ингибиторам протонной помпы: всесторонний обзор. Кишечная печень. 2017 Янв; 11 (1): 27–37.
41. Scarpignato C, Hunt RH.Ингибиторы протонной помпы: начало конца или конец начала? Curr Opin Pharmacol. 2008 декабрь; 8 (6): 677–84.
42. DeVault KR, Talley NJ. Взгляд в будущее подавления кислоты желудочного сока. Нат Рев Гастроэнтерол Гепатол. 2009 Сен; 6 (9): 524–32.
43. Марадей-Ромеро К., Фасс Р.Новые и будущие разработки лекарств от гастроэзофагеальной рефлюксной болезни. J Neurogastroenterol Motil. 2014 Янв; 20 (1): 6–16.
44. Гарнок-Джонс КП. Вонопразан: первое глобальное одобрение. Наркотики. 2015 Март; 75 (4): 439–43.
45. Этидзен Х.Первый в своем классе блокатор кислоты, конкурирующий с калием, вонопразан фумарат: фармакокинетические и фармакодинамические соображения [Hunt RH]. Клин Фармакокинет. 2016 Апрель; 55 (4): 409–18.
46. Hunt RH, Scarpignato C. Мощное подавление кислоты с помощью PPI и P-CAB: что нового? Варианты лечения Curr Gastroenterol.2018 декабрь; 16 (4): 570–90.
47. Scarpignato C, Hunt RH. Потенциальная роль калий-конкурентных блокаторов кислоты в лечении гастроэзофагеальной рефлюксной болезни. Курр Опин Гастроэнтерол. 2019 Апрель; 35 (4): 344–55. ; Epub впереди печати.
48. Xiao Y, Zhang S, Dai N, Fei G, Goh KL, Chun HJ и др.Фаза III, рандомизированное, двойное слепое, многоцентровое исследование для оценки эффективности и безопасности вонопразана по сравнению с лансопразолом у азиатских пациентов с эрозивным эзофагитом. Кишечник. 2019 август; pii: gutjnl-2019-318365.
49. Мива Х, Игараси А, Тэн Л, Уда А, Дегучи Х, Танго Т.Систематический обзор с сетевым метаанализом: косвенное сравнение эффективности фонопразана и ингибиторов протонной помпы для поддерживающего лечения гастроэзофагеальной рефлюксной болезни. J Gastroenterol. 2019 август; 54 (8): 718–29.
50. Миядзаки Х., Игараси А., Такеучи Т., Тэн Л., Уда А., Дегучи Х. и др.Вонопразан по сравнению с ингибиторами протонной помпы для лечения гастроэзофагеальной рефлюксной болезни: систематический обзор. J Gastroenterol Hepatol. 2019 август; 34 (8): 1316–28.
51. Каваи Т., Ода К., Фунао Н., Нисимура А., Мацумото Ю., Мизоками Ю. и др. Вонопразан предотвращает рецидив язв, связанных с приемом низких доз аспирина: рандомизированное исследование фазы 3.Кишечник. 2018 июн; 67 (6): 1033–41.
52. Mizokami Y, Oda K, Funao N, Nishimura A, Soen S, Kawai T. и др. Вонопразан предотвращает рецидив язвы при длительной терапии НПВП: рандомизированное, контролируемое лансопразолом исследование не меньшей эффективности и простое слепое расширенное исследование. Кишечник. 2018 июн; 67 (6): 1042–51.
53. Ли М., Осима Т., Хорикава Т., Тозава К., Томита Т., Фукуи Х. и др. Систематический обзор с метаанализом: вонопразан, мощный блокатор кислоты, превосходит ингибиторы протонной помпы в эрадикации устойчивых к кларитромицину штаммов Helicobacter pylori. Helicobacter. 2018 августа; 23 (4): e12495.; Epub.
54. Юнг Й.С., Ким Э.Х., Пак Ч. Систематический обзор с метаанализом: эффективность тройной терапии на основе фонопразана в отношении эрадикации Helicobacter pylori. Алимент Pharmacol Ther. Июль 2017; 46 (2): 106–14.
55. Фурута Т., Ямаде М., Кагами Т., Уотани Т., Сузуки Т., Хигучи Т. и др.Двойная терапия фонопразаном и амоксициллином так же эффективна, как тройная терапия фонопразаном, амоксициллином и кларитромицином для эрадикации Helicobacter pylori. Пищеварение. DOI: 10.1159 / 000502287.
56. О’Коннор А., Лиу Дж. М., Гисберт Дж. П., О’Морайн С. Обзор: лечение инфекции Helicobacter pylori 2019.Helicobacter. 2019 Сентябрь; 24 (Дополнение 1): e12640.

---

Автор Контакты

Ласло Херсени, доктор медицинских наук, магистр наук

Отделение гастроэнтерологии, Медицинский центр Сил обороны Венгрии

Клиническая больница Университета Земмельвейса

Podmaniczky Street 111, HU – 1062 Budapest (Венгрия)

hers [email protected]

---

Подробности статьи / публикации

Предварительный просмотр первой страницы

Поступила: 13 ноября 2019 г.
Дата принятия: 3 декабря 2019 г.
Опубликована онлайн: 17 декабря 2019 г.
Дата выпуска: 2020 январь

Количество страниц для печати: 8
Количество рисунков: 0
Количество столов: 4

ISSN: 0257-2753 (печатный)
eISSN: 1421-9875 (онлайн)

Для дополнительной информации: https: // www.karger.com/DDI

---

Авторские права / Дозировка препарата / Заявление об ограничении ответственности

Авторские права: Все права защищены. Никакая часть данной публикации не может быть переведена на другие языки, воспроизведена или использована в любой форме и любыми средствами, электронными или механическими, включая фотокопирование, запись, микрокопирование, или с помощью любой системы хранения и поиска информации, без письменного разрешения издателя. .
Дозировка лекарств: авторы и издатель приложили все усилия, чтобы гарантировать, что выбор и дозировка лекарств, указанные в этом тексте, соответствуют текущим рекомендациям и практике на момент публикации.Тем не менее, ввиду продолжающихся исследований, изменений в правительственных постановлениях и постоянного потока информации, касающейся лекарственной терапии и реакций на них, читателю рекомендуется проверять листок-вкладыш для каждого препарата на предмет любых изменений показаний и дозировки, а также дополнительных предупреждений. и меры предосторожности. Это особенно важно, когда рекомендованным агентом является новое и / или редко применяемое лекарство.
Отказ от ответственности: утверждения, мнения и данные, содержащиеся в этой публикации, принадлежат исключительно отдельным авторам и соавторам, а не издателям и редакторам.Появление в публикации рекламы и / или ссылок на продукты не является гарантией, одобрением или одобрением рекламируемых продуктов или услуг или их эффективности, качества или безопасности. Издатель и редактор (-ы) не несут ответственности за любой ущерб, причиненный людям или имуществу в результате любых идей, методов, инструкций или продуктов, упомянутых в контенте или рекламе.

Электропроводность и холинергическая активность слизистой оболочки желудка крысы через 4 и 170 часов после рентгеновского облучения 600 R на JSTOR

Слизистые оболочки желудка были приготовлены для инкубации из иссеченных цельных желудков облученных и необлученных крыс.{2} $ или после метаболического ингибирования (азот). Ответ в обоих случаях был подобен деполяризации с одновременным уменьшением потенциала. После облучения через 4 часа и через 170 часов возник другой тип реакции. Через 4 часа потенциал был на 40% выше, чем у необлученного контроля, с незначительным изменением проводимости. Не было обнаружено значительного изменения реактивности по отношению к 10 ^-3 М ACh (добавлен в ванны). Через 170 часов потенциал был идентичен таковому у необлученного контроля, но проводимость показала устойчивое увеличение примерно на 17%.В этих случаях 10 ^-3 M ACh вызывали более быстрое ингибирование потенциала. АХ не влиял на проводимость ни в одной из групп облучения. Анализ 4-часовых данных показал, что острым действием радиации было подавление холинергической эффекторной активности без воздействия на участки рецепторов ACh. В группе, получавшей 170 часов, холинергическая эффекторная активность вернулась к норме, но облучение сделало слизистую более проницаемой для ионов (то есть увеличилась проводимость) и с повышенной чувствительностью участков рецептора ACh.

Информация о журнале

Radiation Research публикует статьи, посвященные воздействию радиации и связанным темам в областях физики, химии, биологии и медицины, включая эпидемиологию и трансляционные исследования. Термин «излучение» используется в самом широком смысле и включает, в частности, ионизирующий и ультрафиолетовый, видимый и инфракрасный свет, а также микроволны, ультразвук и тепло. Связанные темы включают (но не ограничиваются ими) исследования с химическими агентами, способствующими пониманию эффектов радиации, изотопных методов, а также методов и приборов дозиметрии.

Поляризованные эпителиальные монослои слизистой оболочки желудка раскрывают понимание гомеостаза слизистой оболочки и защиты от инфекции

Введение

Helicobacter pylori, – грамотрицательная бактерия, которая поражает около половины человеческой популяции, может сохраняться в желудке на протяжении десятилетий и в некоторых случаях приводить к аденокарциноме желудка.1–4 Исключительная способность избегать иммунной защиты слизистой оболочки, по-видимому, неразрывно связана при хроническом воспалительном статусе.5–7 Воспалительная реакция слизистой оболочки опосредует защиту хозяина от инфекции и восстановление тканей за счет усиленной регенерации, аспекта, который был вовлечен в развитие опухоли.

H. pylori прилипает к желудочным фовеолам, 9 но в конечном итоге может проникать в железы 10 и взаимодействовать с компартментом стволовых клеток, расположенным у основания.11 Эксперименты на мышах показали, что гиперплазия и другие патологические изменения в желудке происходят в основном в ответ такой глубокой железистой колонизации.Таким образом, более подробные исследования динамики инфекции выиграют от надежной модели in vitro, которая воспроизводит особенности базального железистого компартмента.

В последние годы возросшее понимание биологии стволовых клеток привело к развитию органоидных культур как способа поддержания взрослых стволовых клеток in vitro, 12, 13, включая клетки, полученные путем выделения желез из образцов ткани желудка. 14 15 Эпителий Антральный отдел поддерживается стволовыми клетками Lgr5 +, расположенными в основании желез16, где секретируется MUC6.Поддержание этих стволовых клеток in vitro с помощью сигнальных факторов ниши Wnt и R-spondin позволяет создавать долгоживущие культуры органоидов желудка, и было выдвинуто предположение, что решающую роль в этом играет строма посредством секреции факторов ниши (17-19).

Органоиды можно вводить с H. pylori для моделирования инфекции in vitro, 20 21 но эта система не поддерживает крупномасштабные исследования инфекций. Альтернативный подход заключался в переносе органоидных клеток в двумерную (2D) монослойную культуру 14, но инфицированные культуры погибают в течение 24 часов.Это может быть связано не только с потерей архитектуры и поляризации ткани, что дает бактериям доступ к гораздо большей части клеточной поверхности, чем in situ, но и с рассеянием защитных муцинов. Система, которая делает возможным обычное инфицирование при сохранении эпителиальной архитектуры, характеризующейся поляризованными клетками и плотными контактами, а также неповрежденным слоем слизи, может, таким образом, поддерживать длительную инфекцию H. pylori .

Здесь мы использовали методологию интерфейса воздух-жидкость (ALI) для создания «слизистых» культур – функциональных, долгоживущих, поляризованных монослоев эпителия – из здоровой ткани желудка человека, которые полностью воспроизводят различные клеточные линии, обнаруженные в антральных желудочных железах у человека. на месте.Эти успехи были достигнуты путем сочетания известных методов культивирования, основанных на поликарбонатных фильтрах18, 22, с более свежими знаниями о размножении первичных клеток ЖКТ из взрослых стволовых клеток14, 15, 23.

Мы также показываем, что эта система делает возможной направленную дифференцировку в фовеолярные или базальные фенотипы либо посредством модуляции передачи сигналов Wnt, либо путем сокультивирования с определенной популяцией стромы. Апикальная поверхность монослоя защищена секретируемой слизью, что делает возможным хроническое инфицирование in vitro H.пилори. Эти особенности представляют собой ключевые преимущества по сравнению с существующими методами культивирования и позволяют проводить углубленные исследования механизмов хронического воспаления, роли слизи в эпителиальной защите и факторов, контролирующих эпителиальный гомеостаз во время инфекции. Таким образом, он представляет собой важный новый инструмент для освещения механизмов, лежащих в основе желудочного канцерогенеза.

Результаты

Создание культур слизистых оболочек желудка на фильтрах

Желудочные железы были выделены из образцов антрального отдела желудка человека (рис. 1А), как описано ранее.14 Антрум (пунктирная линия на рисунке 1А) был идентифицирован как область, противоположная глазному дну (отмеченная хирургом), которая не содержит морщин, типичных для тела. Диссоциированные клетки из свежей ткани или органоидов желудка высевали на покрытые коллагеном поликарбонатные фильтры. Через 3 дня среду поверх клеток удаляют, чтобы создать условия на границе раздела воздух-жидкость (рис. 1B). В течение следующих 10 дней они развивают морфологию зрелого эпителия, становясь все выше (рис. 1C). Через 10–13 дней прозрачная слизь начинает скапливаться поверх монослоя (~ 50–100 мкл / неделя), и ее необходимо регулярно удалять (см. Дополнительный фильм в Интернете).Клетки из зрелых монослоев можно пассировать на новые фильтры или выращивать как органоиды, и наоборот, таким образом, эти два метода взаимопревращаемы. Культуры слизистой оболочки желудка содержат спорадические Ki67-положительные пролиферативные клетки (рисунок 1D) даже после 1 и 2 месяцев культивирования (рисунок 1E, F), что указывает на их стабильность даже без пассирования.

Рисунок 1

(A) Пример рукавной резекции, показывающий расположение антрального отдела, тела и глазного дна. Глазное дно (отмеченное хирургом) определяет ориентацию ткани.Антрум берут из нижней части резекции, лишенной морщин желудка. (B) Схема метода культивирования слизистых оболочек: клетки высевают при конфлюэнтной плотности на поликарбонатные фильтры вставок лунок, помещенных в 24-луночный планшет, и среду над слоем клеток удаляют через 3 дня, чтобы инициировать культивирование на границе раздела воздух-жидкость (C) Через 1 день после посева клетки образовали сливной монослой. На 3-й день они увеличиваются в высоте и среда над клетками удаляется. Высота и поляризация клеточного слоя продолжают увеличиваться, и на 10-й день на поверхности присутствует слой муцина.Высота монослоя измерялась с помощью программного обеспечения FIJI. (D – F) Мечение иммунофлюоресценции (IF) антителом Ki67 маркирует пролиферирующие клетки в культурах мукозоидов между 2 неделями и 2 месяцами культивирования. (G – I) уровни экспрессии мРНК генов, специфичных для эпителиальных (G), стволовых (H) и железистых клеток (I), определенные из двух параллельных культур слизистой оболочки за восемь пассажей (6 месяцев), как определено с помощью кПЦР. ΔCt = разница между Ct каждого гена по сравнению с GAPDH . Результаты взяты из одной из двух проанализированных культур мукозоидов.Масштабные линейки: 10 мкм. GAPDH, глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа; H. pylori, Helicobacter pylori ; мРНК, информационная РНК; qRT-PCR, количественная ПЦР с обратной транскрипцией.

Мы использовали количественную ПЦР с обратной транскрипцией (qRT-PCR) для мониторинга долговременной стабильности культур, которые пассировали один раз в месяц. Экспрессия маркеров эпителия желудка KRT8 , 18 и 19 , EPCAM и CHD1 оставалась постоянной до 7 месяцев (фигура 1G).Экспрессия маркера стволовых клеток желудка Lgr512 также оставалась постоянной после первого пассажа, как и β-катенин и CD44 , маркер пролиферирующих и стволовых клеток в желудке34 (фигура 1H). В то же время маркеры дифференцированных фенотипов железы также экспрессировались на постоянных уровнях, включая пепсиноген C ( PGC ) для главных клеток, MUC6 для клеток у основания железы, MUC5AC для фовеолярных, хромогранин A ( CHGA ) для энтероэндокринных и ATP4B для париетальных клеток (рис. 1I), что указывает на то, что фенотипический состав остается неизменным с течением времени.

Заметная поляризация культур слизистой оболочки

Поляризация культур слизистой оболочки желудка отражает то, что наблюдается в желудке: апикальная сторона обращена вверх, где собирается слизь, а базальная сторона обращена к фильтру, где поглощаются питательные вещества и факторы роста. Ядра локализованы на базальной стороне (рисунок 2A), в то время как E-кадгерин экспрессируется только базолатерально и никогда не апикально (рисунки 1C и 3D после посева), а экспрессия маркера плотного соединения окклюдина ограничена апикальной стороной (рисунок 2B).Трансэпителиальное электрическое сопротивление (TEER) миграции ионов колебалось от 370 до 470 Ом * см ² , в зависимости от плотности клеток, которая выше, чем толстая кишка, но ниже, чем эпителий легкого.25 Вид сверху показывает, что плотные контакты (зеленые) выглядят как характерные точки, соединяющие апикально смежные клетки, образующие непрерывный барьер (рисунок 2С). Поскольку эпителиальные барьеры имеют высокий оборот, пролиферация, а также экструзия клеток одинаково важны для сохранения постоянного числа клеток. Интересно, что когда мы визуализировали нижние стопки, мы обнаружили инвагинации плотных соединений, которые образовывали розетко-подобные структуры с окружающими клетками (рисунок 2D).Сходный феномен был описан во время экструзии клеток, которая запускает базальную физиологическую перестройку плотных контактов 26, 27, чтобы поддерживать целостность эпителиального барьера. Чтобы еще больше подчеркнуть высокую поляризацию культур, мы проанализировали секретируемые белки желудочного эпителия в апикальном и базальном компартментах. Железы содержат большое количество слизистых клеток, в частности муцин MUC5AC. IF-анализ недифференцированных культур слизистой оболочки также выявил небольшое количество внутриклеточных MUC5AC и большое количество гранул MUC6, которые накапливаются апикально для секреции (рис. 2E-F) и способствуют формированию апикального слоя слизи (см. Дополнительный онлайн-фильм 1).С другой стороны, мы наблюдали базальное накопление гранул CHGA, типичных для энтероэндокринных клеток (рисунок 2G и дополнительный рисунок 1A онлайн). Редкие PGCII-положительные клетки (<0,5%), обнаруженные в культурах мукозоидов, представляют собой главные клетки, выделяющие пепсиноген на апикальной стороне (рисунок 2H и дополнительный рисунок 1B онлайн).

Рисунок 2

(A) Окрашивание H&E среза культуры слизистых оболочек показывает базальное распределение ядер. (B) Мечение IF против окклюдина показывает, что клетки апикально соединены плотными контактами.(C) IF вид сверху культуры мукозоидов, показывающий, что окклюдин присутствует во всех соединениях клеток. (D) IF-изображение нижнего участка того же монослоя, показывающее базальную перестройку апикального окклюдина вокруг клеток, организованных в розетко-подобную структуру. (E) Несколько гранул в клетках из (+ W + R) культур слизистых оболочек антрального отдела кишечника положительны в отношении MUC5AC апикально. (F) клетки из (+ W + R) культур антрального отдела слизистой оболочки показывают большое количество апикальных MUC6-положительных гранул. (G) Мечение IF против хромогранина A, показывающее положительные гранулы на базальной стороне гормон-продуцирующих энтероэндокринных клеток культуры антральных слизистых оболочек (H).Мечение IF против пепсиногена CII, показывающее главные клетки, продуцирующие пепсиноген II, в культуре мукозоидов антрального отдела. Масштабные линейки: 10 мкм.

Динамика дифференцировки и пролиферации

Эксперименты по отслеживанию клонов на мышах продемонстрировали, что основание антральных желез заселено Lgr5 -экспрессирующими стволовыми клетками, которые способны повторно заселять всю железу. Эти клетки пролиферируют и мигрируют вверх к ямке железы, образуя фовеолярный клон.12 Ниша стволовых клеток in vivo в значительной степени зависит от активации пути Wnt, что имитируется добавлением в культуральную среду рекомбинантного Wnt3A (+ W) и R-спондин (RSPO) 1 (+ R) 14, приводящий к высвобождению β-катенина в цитоплазме и транслокации в ядро ​​(рисунок 3A), где он действует как транскрипционный коактиватор факторов транскрипции.Лишение культур Wnt3A / RSPO1 (-W-R) в течение 6 дней удаляет β-катенин из ядра (рис. 3B) и имитирует процесс дифференцировки в фовеолярный фенотип. Зона пролиферации в желудке находится чуть ниже ямок слизистой оболочки желудка. В антральном отделе, который характеризуется более высоким фовеолярным отделом, эта зона расположена глубоко в ямках28 (рис. 3E). В культурах, лишенных Wnt3A и RSPO1, мы заметили повышенное количество пролиферативных клеток Ki67 + (рисунок 3C, количественное определение D в F), что увеличивает высоту и плотность клеток, что типично для ямок (рисунок 3G).Лишение Wnt3A и RSPO1 дополнительно привело к резкому снижению экспрессии маркера стволовых клеток LGR5 (фигура 3H). Чтобы проверить, является ли эта дифференцировка обратимой, мы высевали первичные клетки на фильтры для создания культур слизистой оболочки, а затем удалили Wnt3A и RSPO1 на 12 или 30 дней. Отдельные клетки переносили в условия культивирования органоидов, восстанавливая поступление WN3A и RSPO1. Способность образовывать органоиды была значительно и навсегда снижена по сравнению с контролем, даже когда Wnt и RSPO были отменены только в течение 12 дней (рисунок 3I).

Рисунок 3

Две или три различных культуры слизистой оболочки антрального отдела использовали для оценки влияния Wnt и RSPO на клеточную дифференцировку и пролиферацию. (A) Мечение IF против β-катенина, показывающее универсальную ядерную локализацию в состоянии + W + R. (B) β-катенин отсутствует в ядре после отмены W / R в течение 6 дней. (C, D) Удаление W / R также сопровождается увеличением количества клеток, положительных по маркеру пролиферации Ki67, и увеличением роста. (E) Срез антрального отдела желудка, окрашенный на Ki67, показывает субфовеолярную локализацию компартмента пролиферации в антральном отделе.(F, G) Количественная оценка Ki67-положительных клеток и плотности клеток после изъятия W / R из восьми секций n> 400 (H) LGR5, определенной с помощью qRT-PCR, по сравнению с таковой в среде + W + R. Столбцы представляют собой среднее из трех. (I) Сканирование плитки 50 мкл капли Matrigel, засеянной 30 000 клеток, с последующим 6-дневным ростом сфероидов. Слева: культуры мукозоидов культивировали в течение 30 дней в среде + W + R перед переносом в культуры Matrigel в среде + W + R для выращивания органоидов. Показаны репрезентативные изображения трех независимых культур.В центре: культивирование слизистых оболочек в течение 6 дней в среде + W + R с последующим удалением Wnt3A и RSPO1 в течение 12 дней с последующими 12 днями в среде + W + R, что приводит к резкому снижению выживаемости органоидов. Справа: клетки, культивированные без Wnt3A и RSPO1, не генерировали никаких органоидов. Непарный t-критерий: **** P≤0,00005; ** P≤0,005. Немаркированные стержни: 10 мкм. Lgr5, рецептор 5, связанный с G-белком, содержащий богатые лейцином повторы; qRT-PCR, количественная ПЦР с обратной транскрипцией; РСПО, Р-спондин.

Дифференциация регулирует секрецию слизи

Железы слизистой оболочки желудка защищены от кислоты и пищеварительных ферментов гелем слизи, который полимеризуется с различной плотностью.В нормальной слизистой оболочке антрального отдела MUC5AC продуцируется на поверхности, тогда как MUC6 экспрессируется глубже в железе.29 30 Точно так же культуры слизистых оболочек, выращенные в среде + W + R, содержат низкие уровни MUC5AC (красный) (рисунок 4A), в то время как среда -WR индуцирует экстенсивное производство этого муцина (рисунок 4B). Противоположное наблюдается для MUC6 (рисунок 4C, D). Смешанный MUC5AC / MUC6, а также мягкий пролиферативный фенотип получают, если альтернативно удалять Wnt3A и RSPO1 (см. Дополнительный рисунок 2 в Интернете). Гранулы муцина обнаруживаются с помощью электронной микроскопии и накапливаются на апикальной стороне в обоих условиях, хотя в культурах -W-R апикальные гранулы крупнее и многочисленнее (рис. 4E, F).Эта дифференцированная продукция муцинов была подтверждена с помощью ОТ-ПЦР (рисунок 4G). Масс-спектрометрический анализ слизи из культур + W + R по сравнению с культурами -WR подтвердил, что наиболее распространенными муцинами являются MUC5AC и MUC6, и что последний секретируется в культурах + W + R, что соответствует базовым условиям (рисунок 4H и дополнительная таблица 1 онлайн. ). Факторы Trefoil, трипсин 1 и 2, гастрокин 1 и особенно лизоцим антимикробного белка также присутствуют в слизи в большом количестве (рисунок 4H и дополнительная таблица 1 в Интернете).Интересно, что белок PROM1, связанный со стволовыми клетками, также присутствовал в высоких количествах в слизи, хотя его секреция только прогнозируется (рисунок 4H). Таким образом, культуры слизистых оболочек воспроизводят основные характеристики исходной ткани и дают уникальную возможность изучить слизь и изменения апикального секретома в различных физиологических и, в конечном итоге, патологических состояниях.

Рисунок 4

(A – B) Мечение IF против фовеолярного маркера MUC5AC показывает, что экспрессия низкая в состоянии + W + R и увеличивается после отмены W / R в течение 6 дней (-W-R).(C – D) Напротив, экспрессия базального маркера MUC6 высока в состоянии + W + R и резко снижается после отмены W / R в течение 6 дней (-W-R). (E) ЭМ культуры антральных слизистых оболочек в условиях + W + R, показывающая обогащенные MUC6 гранулы апикальной слизи. (F) Повышенное накопление и секреция гранул, обогащенных MUC5AC, в культурах антральных слизистых оболочек в условиях -W-R. (G) анализ qRT-PCR показывает, что относительные уровни мРНК MUC5AC выше при отмене W / R, тогда как уровни MUC6 высоки в + W + R.Столбики представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение двух независимых экспериментов * P <0,05. (H) Протеомный анализ общей слизи, продуцируемой четырьмя образцами культуры антральных слизистых оболочек, выявил дифференциальную секрецию муцинов, секретируемых ферментов и других белков при сравнении + W + R и -W-R. Wnt и RSPO удаляли на 5 дней. График в виде прямоугольников и усов представляет собой среднее и минимальное / максимальное значения нормализованного сигнала LFQ, рассчитанного с помощью программного обеспечения MaxQuant (четыре образца слизи на условие). На графике показаны только высокосекретируемые белки с более чем двумя уникальными пептидами в четырех условиях, с наивысшей нормализованной интенсивностью и наивысшим баллом (> 250), обнаруженные в слизи, полученной из всех четырех культур слизистых оболочек антрального отдела.ЭМ, электронная микрофотография; LFQ, количественное определение без этикеток; мРНК, информационная РНК; qRT-PCR, количественная ПЦР с обратной транскрипцией; РСПО, Р-спондин.

Перекрестное взаимодействие между стромальными клетками и эпителием

Слизистая оболочка желудка состоит из желез, интеркалированных собственной пластинкой, состоящей из стромальных фибробластов. Эти стромальные клетки отличаются от миофибробластов слизистой оболочки мышечной оболочки непосредственно под железами (рис. 5А). Мы изолировали и увеличили стромальные клетки желудка (GSC) собственной пластинки и добавили их в базальный компартмент культур.Через 6 дней уровень эпителиальной информационной РНК (мРНК) LGR5 был снижен, как было определено с помощью q-PCR. Этот эффект был воспроизведен путем воздействия на культуры GSC-кондиционированной среды (фиг. 5В), что позволяет предположить, что за это отвечает секретируемый фактор. Чтобы проверить, связано ли снижение экспрессии Lgr5 с изменениями пути передачи сигналов Wnt, мы титровали GSC-кондиционированную среду на линии репортерных клеток Wnt, активированной 50% супернатанта LWnt3A (линия клеток, продуцирующая большое количество Wnt3A) (рис. 5C). ).В то время как 50% супернатант LWnt3A генерировал сильный репортерный сигнал (фигура 5C и дополнительная фигура 3A, верхняя панель), комбинация с GSC-кондиционированной средой уменьшала сигнал (фигура 5C и дополнительная фигура 3A в режиме онлайн, нижняя панель). Распределение β-катенина также показало расположение ядра только тогда, когда путь Wnt активируется Wnt3A и RSPO1 (рисунок 5D, F), но не тогда, когда клетки совместно культивируются с GSC (рисунок 5H) и претерпевают частичную дифференцировку в фовеолярный фенотип, как показано увеличение количества клеток, продуцирующих MUC5AC (рисунок 5I по сравнению с 5G).Строма собственной пластинки, таким образом, снижает способность эпителия к стволу и вызывает частичную дифференцировку посредством секретируемых факторов, которые ингибируют путь Wnt зависимым от β-катенина способом. Чтобы дополнительно проанализировать, какие факторы ответственны за снижение экспрессии Lgr5, мы проверили экспрессию мРНК всех растворимых ингибиторов Wnt. Мы наблюдали сильную экспрессию sFRP1 , DKK1 и DKK3 , а также BARX1 , регулирующего фактор транскрипции sFRPs (рисунок 5J).Поскольку эпителиальный гомеостаз строго контролируется, сигналы, полученные от других клеток, могут нарушать это равновесие, на что указывают розеткообразные структуры, наблюдаемые в культурах слизистой оболочки желудка, которые указывают на возможные места экструзии и регенерации клеток. Розетки были в изобилии в культурах, содержащих активаторы Wnt, но почти отсутствовали без активаторов Wnt, в то время как присутствие GSC приводило к снижению количества (см. Дополнительную диаграмму 3C-E и количественную оценку в B). Это указывает на то, что культуры слизистой оболочки желудка позволяют моделировать связь между эпителием и стромой в сокультурах, представляя чувствительную систему для анализа стволовости и эпителиального гомеостаза.

Рисунок 5

(A) Схема желудочной железы, показывающая положение стромы собственной пластинки, из которой происходят изолированные GSC. (B) Фильтры, содержащие культуры антральных слизистых оболочек, перемещали в лунки, содержащие GSC, и культивировали совместно в течение 6 дней или, альтернативно, культивировали с 50% идентичной среды, кондиционированной GSC. Уровни экспрессии мРНК LGR5 измеряли с помощью qRT-PCR и выражали относительно условия + W + R; Столбцы представляют собой среднее значение ± SEM трех независимых биологических повторов; * Р <0.05, **** P <0,00005, непарный t-критерий. (C) Т-клетки 293, трансфицированные сайтом связывания 7x для TCF, управляющего экспрессией GFP , использовали для измерения активации пути Wnt. Среду, кондиционированную GSC, титровали в постоянном присутствии 50% среды, кондиционированной LWnt3A. (D, E) Культуры слизистых оболочек, выращенные в среде -W-R, почти не показывают ядерного β-катенина (D), но сильно экспрессируют MUC5AC (E). (F, G) Культуры антральных слизистых оболочек, выращенные в среде + W + R, обнаруживают ядерный β-катенин (F), но почти не экспрессируют определяемый MUC5AC (G).(H, I) После 6 дней совместного культивирования с GSC в присутствии + W + R β-катенин больше не локализуется в ядрах (H), и MUC5AC снова экспрессируется (I). (J) Экспрессия растворимых ингибиторов Wnt в GSC, обнаруженная с помощью RT-PCR. Экспрессию SFRP2 и DKK3 тестировали с праймерами против двух разных участков, охватывающих экзоны. Масштабные линейки: 10 мкм. GSC, стромальные клетки желудка; мРНК, информационная РНК; qRT-PCR, ПЦР с обратной транскрипцией.

Отчетливые ответы базальных и фовеолярных клеток на

H.pylori

Для моделирования инфекции, вызванной H. pylori , мы инфицировали культуры слизистой оболочки желудка с помощью P12 при множественности инфекции (MOI) 100 в течение 3 дней. Чтобы изучить, как «базальные» и «фовеолярные» культуры реагируют на инфекцию, культуры слизистых оболочек антрального отдела трех пациентов культивировали в течение 13 дней перед удалением Wnt3A и RSPO1 из половины культур в течение 5 дней. Полученные недифференцированные монослои MUC6 ^hi и фовеолярного типа MUC5AC ^hi инфицировали в течение 3 дней, затем анализировали с помощью кПЦР и микроматрицы.Никаких значительных изменений жизнеспособности бактерий в условиях + W + R по сравнению с –W-R не наблюдалось (рисунок 6A). Экспрессия генов, связанных со стволовыми клетками, была снижена в дифференцированных клетках, как и ожидалось, и экспрессия MUC6 и MUC5AC изменилась соответственно (см. Дополнительные рисунки 2A, B в Интернете).

Рисунок 6

(A) Выживаемость бактерий (P12) при заражении культур слизистых слизистой оболочки антрального отдела + W + R (MOI = 25) по сравнению с -W-R (четыре разных образца на условие), выраженная в процентах от введенного количества.(B – I) Культуры антральных слизистых оболочек, полученные от трех разных пациентов, культивировали в течение 13 дней. Параллельные образцы были дифференцированы путем исключения Wnt3A и RSPO1 из культуры в течение 5 дней с последующим заражением P12 в течение 3 дней при MOI 100. (B) Экспрессия IκBα ( NFKBIA ) была проанализирована с помощью qRT-PCR и нормализована к не- инфицированные контрольные клетки в + W + R. Показанные результаты являются репрезентативными для двух биологических повторностей. (C) РНК из трех биологических повторов анализировали с помощью микроматрицы.На тепловой карте представлены гены-мишени NF-κB, сгруппированные по их функциям. (D – I) Проверка результатов выбранных массивов с помощью qRT-PCR, нормализованных к незараженным контрольным клеткам в + W + R. Показанные результаты являются репрезентативными для двух биологических повторностей. (J, K) Культуры слизистых от трех разных пациентов культивировали, как в (B – I), затем обрабатывали 10 мкг / мл TNF-α или 5 мкг / мл IL-1β в течение 3 дней. Экспрессию IL-8 анализировали с помощью qRT-PCR и нормализовали для необработанных контрольных клеток в среде + W + R. нс: не имеет значения; * Р <0.005, непарный t-критерий. Планки погрешностей представляют собой минимальные и максимальные значения из технических реплик. ИЛ, интерлейкин; qRT-PCR, количественная ПЦР с обратной транскрипцией; TNF-a, фактор некроза опухоли альфа.

Далее мы сосредоточились на воспалительной реакции, опосредованной NF-κB. При инфицировании NFKBIA обычно разрушается, позволяя p65 проникать в ядро ​​и активировать транскрипцию κB-чувствительных генов, включая сам IκBα, создавая петлю отрицательной обратной связи. Интересно, что транскрипция NFKBIA была намного выше, если заражение проводилось в условиях + W + R по сравнению с -W-R (фигура 6B), что позволяет предположить, что способность базального компартмента воспринимать бактерии значительно выше по сравнению с фовеолами.Чтобы подтвердить это наблюдение, мы проанализировали все потенциальные гены-мишени NF-κB на нашем микрочипе. После заражения у большинства генов-мишеней была повышенная регуляция в + W + R по сравнению с состоянием -W-R (фигура 6C). Мы использовали кПЦР для проверки нескольких важных медиаторов воспаления, зависимых от NF-κB, в том числе хемокинов, рекрутирующих Т-клетки, интерлейкина 8 ( CXCL8 ), CXCL1 , CXCL3 , CCL20 и IL-23A и IL-23A . а также лимфотоксин B ( LTB ) (рисунок 6D – H).Сильная позитивная регуляция в ответ на инфекцию наблюдалась только в среде + W + R.

Поскольку это говорит о том, что клетки основания железы демонстрируют гораздо более сильный воспалительный ответ, мы проверили, связано ли это с большей чувствительностью к воспалительным стимулам. С этой целью культуры + W + R и -W-R обрабатывали либо фактором некроза опухоли альфа (TNF-α), либо IL-1β в течение 3 дней с последующей количественной ПЦР. TNF-α индуцировал экспрессию IL-8 , независимо от W / R (фигура 6J), тогда как IL-1β индуцировал IL-8 предпочтительно в культурах + W + R (фигура 6K).Поскольку TNF-α, но не IL-1β экспрессируется эпителиальными клетками, мы проверили его экспрессию после заражения. H. pylori индуцирует экспрессию TNF-α преимущественно в + W + R культурах (фигура 6I), подтверждая наше наблюдение, что компартмент стволовых клеток желудка преимущественно реагирует на инфекцию, в то время как клетки фовеолярного компартмента остаются молчаливыми.

Апикальная динамика

инфекции H. pylori

Во время инфекции бактерии всегда располагались в очагах и не разрушали монослой, как в традиционной 2D-культуре.Поэтому мы исследовали динамику адгезии и роль слизи в борьбе с инфекцией. Конфокальные изображения инфицированных культур антральных слизистых оболочек (+ W + R) через 72 часа показывают, что некоторые из этих колоний все еще задерживаются в слизи (рисунок 7A, увеличение слева) или прилипают к поверхности эпителия (рисунок 7A, увеличение справа). Транслокация бактериального белка CagA была подтверждена присутствием фосфорилированного белка, обнаруженного с помощью вестерн-блоттинга (фигура 7B). Чтобы улучшить разрешение, мы использовали изогенный штамм, экспрессирующий зеленый флуоресцентный белок (GFP), и обрезали фильтр до областей, содержащих зеленую флуоресценцию, чтобы обогатить инфицированные клетки перед обработкой для электронной микроскопии.Интересно, что большинство бактерий через 12–24 часов становятся кокковыми, продуцируют большое количество пузырьков, и большинство из них контактирует не с эпителием на апикальной поверхности, а через микроворсинки (рисунок 7C, левая панель). Однако спиральные бактерии также могут быть обнаружены прилипшими к поверхности через 6 часов после заражения (рис. 7C, правая панель).

Рисунок 7

(A) Культуры антральных слизистых оболочек, инфицированные в течение 72 часов при MOI 50, меченные антителом против CagA, демонстрирующие группы бактерий, которые еще не прикрепились к клеткам (*) или не прикрепились к поверхности (**).(B) Вестерн-блот-анализ фосфорилированного CagA, обнаруженного с помощью антитела против PY99 в клеточных лизатах из неинфицированных клеток (левая полоса), культур антральных слизистых оболочек, инфицированных P12 при MOI 100 в течение 72 часов (средняя полоса), и тех же клеток, засеянных как плоские монослои на покрытом коллагеном пластике, инфицированном в течение 18 часов при MOI 25 (правая полоса) (C), левая панель: ЭМ культуры антрального слизистого тела, показывающая взаимодействие между микроворсинками и очагами коккоидных бактерий через 24 часа после инфицирования: правая панель: спиральная бактерия, прикрепившаяся к апикальной поверхности через 6 часов после заражения.P12-GFP MOI = 100. (D) Парафиновый срез культуры слизистой оболочки, инфицированной P12 при MOI 50 в течение 72 часов. Яркий слой указывает на слой ячеек. Бактерии в основном связаны со сплошным слоем слизи, в который удалось проникнуть лишь немногим (стрелки). (E) Слизь собирали из культур слизистой оболочки, инфицированных P12 при MOI 100 или неинфицированных контролей, центрифугировали для удаления бактерий и использовали для внесения устойчивых к канамицину изогенных штаммов P12-GFP в течение 1 и 2 часов. Образец помещали на чашки с канамицином и подсчитывали колонии относительно количества посеянных бактерий.Результаты представляют собой процент колоний по сравнению с входными +/- SD трех образцов слизи. ЭМ, электронная микрофотография; H. pylori, Helicobacter pylor i; PY99, фосфорилированный тирозин.

Поскольку апикальная сторона также характеризуется наличием слизи, мы проанализировали изображения необработанных срезов, которые показали, что большинство бактерий заблокировано слоем слизи (рис. 7D), через который они могут пройти лишь изредка, чтобы образовать очаговые колонии наверху. ячеек (стрелки). Это может объяснить, почему культуры мукозоидов не инфицированы однородно.Интересно, что мы заметили, что слизь является физическим барьером и обладает бактерицидной активностью. Мы аспирировали поверхностную слизь из P12-инфицированных и неинфицированных антральных культур (+ W + R), удаляли бактерии центрифугированием и инкубировали с изогенным штаммом P12-GFP, экспрессирующим кассету устойчивости к канамицину в векторе GFP, высеянным в различных разведениях на канамицин. чашки, затем подсчитали колонии. Слизь из инфицированных культур убила все бактерии через 2 часа, в то время как слизь из неинфицированных культур вообще не повлияла на жизнеспособность бактерий (рисунок 7E).Это показывает, что слизь желудка играет центральную роль в контроле инфекции H. pylori , действуя сначала как физический барьер, который затем становится токсичным для бактерий после инфицирования эпителия. Это может объяснить, почему в наших культурах мукозоидов, а также in vivo инфекция является очаговой, и отдельные бактерии, покидающие очаги, могут погибнуть при контакте со слизью.

Длительное инфицирование культур слизистой оболочки желудка

H. pylori

Для моделирования длительной инфекции H.pylori , мы инфицировали культуры слизистой оболочки в течение 24 часов при MOI 100 и промывали поверхность фосфатно-солевым буфером (PBS) после первого дня, чтобы удалить свободно плавающие бактерии. Для мониторинга динамики бактерий мы использовали изогенный штамм P12, экспрессирующий GFP. Инфекции были прекращены через 4 недели, что намного превосходит любую другую модель инфекции, особенно при использовании внеклеточных бактерий. Накапливающаяся слизь, содержащая бактерии, удалялась регулярно, но при переносе на агар образовывались только спорадически образующиеся колонии (не показаны), вероятно, из-за высокой токсичности слизи.Конфокальные изображения длительно инфицированных монослоев показывают, что бактерии сильно конденсируются в кластеры диаметром ~ 5 мкм (рис. 8A). Изображения с большим увеличением показывают, что отдельные бактерии за пределами скоплений имеют кокковидную форму, напоминающую действие дефенсинов 31 (рис. 8B и увеличенное изображение). Относительное количество бактериальных клеток по сравнению с человеческими клетками контролировали каждую неделю с помощью qPCR соответствующей геномной ДНК (фигура 8C). В день 0 бактерии были немедленно лизированы. В день 1 лизис проводили после промывания PBS, и каждую неделю после этого сначала удаляли слизь.Количество бактерий со временем уменьшалось и не определялось через 4 недели (рисунок 8C). Однако уровни мРНК TNF-α и IL-8 были лишь незначительно увеличены через 2 недели (фигура 8D), но стали заметно повышенными через 4 недели после инфицирования (фигура 8E). Экспрессия мРНК MUC5AC была резко снижена в оба момента времени (фигура 8D, E). Мы пришли к выводу, что наша система может моделировать эффект длительной инфекции и показывает стойкое воспаление.

Рисунок 8

Культуры слизистых оболочек антрального канала были инфицированы изогенным вирусом H.pylori штамм P12-GFP при MOI 100. Через 24 часа поверхность дважды промывали PBS и удаляли слизь каждые 3-4 дня. (A) Через 2 недели фильтры фиксировали и метили антителами против cagA и E-кадгерина с последующим введением цельного IF. (B) Изображение с большим увеличением и детали (*) увеличены в правом верхнем углу той же инфекции, что и в (A). (C) Относительное количество P12-GFP по отношению к клеткам-хозяевам рассчитывали с помощью кПЦР, сравнивая количество 16-секундной последовательности рибосомной ДНК с последовательностью GAPDH человека.(D, E) Экспрессию TNF-α , IL-8, и MUC5AC анализировали с помощью qRT-PCR через 2 и 4 недели инфекции и нормализовали до неинфицированного контроля. День-0 ДНК собирали непосредственно после нанесения бактерий; день-1 ДНК собирали после промывания PBS. Δ Ct – разница между Ct каждого гена по сравнению с GAPDH , горизонтальный знак представляет собой среднее значение значений, представленных точками, каждая точка – одна повторность. GAPDH, глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа; ИЛ, интерлейкин; NI, незараженный; PBS, забуференный фосфатом физиологический раствор; qPCR, количественная ПЦР; TNF-α, фактор некроза опухоли альфа.

Обсуждение

Используя новую систему культивирования слизистых оболочек эпителия желудка, мы предоставляем интересную информацию о различных аспектах взаимодействия патогена и ткани хозяина, что напоминает подлинное состояние in vivo. Благодаря поразительной степени поляризации и функциональной целостности эпителия в сочетании со значительно сниженной частотой прохождения, мы достигли полной дифференциации по всем антральным фенотипам, о чем ранее не сообщалось в чистых культурах эпителия взрослых.Было обнаружено, что изменения интенсивности передачи сигналов Wnt контролируют дифференцировку базальных типов клеток в фовеолярные. Секреция апикальной слизи представляет собой защитный экран от бактерий, предотвращая чрезмерную гибель клеток-хозяев и, в свою очередь, создавая условия для гомеостатической инфекции H. pylori . Исследование эффектов стромальных клеток из собственной пластинки, окружающей желудочные железы, показало, что они вызывают дифференцировку за счет действия секретируемых ингибиторов Wnt. Таким образом, будущие исследования с этой моделью позволят детально изучить пути передачи сигналов между эпителием и стромой и то, как на них влияет бактериальная инфекция.

Глубокие эффекты, возникающие в результате изменений в передаче сигналов в микросреде, иллюстрируются удивительной легкостью, с которой культуры трансформируются из фенотипа основания железы MUC6 ^hi в фенотип фовеолярной области MUC5AC ^hi при удалении Wnt3A и RSPO1. Заражение этими отдельными монослойными фенотипами указывает на то, что активация пути NF-κB существенно выше у основания железы, чем в ямках. Об этом фенотипе свидетельствует активация генов-мишеней p65 в культурах базального типа, включая медиаторы воспаления LTB , IL-8 , CXCL1-3 , CCL20 , IL-23A и TNF -α , как ранее было обнаружено, сверхэкспрессируется H.pylori- инфицированных пациентов.32-34 Фовеолярная линия, с другой стороны, также была менее чувствительна к провоспалительному цитокину IL-1β, происходящему из макрофагов. В совокупности эти наблюдения подтверждают мнение о том, что поверхностные инфекции H. pylori на поверхности железы вызывают лишь незначительные иммунологические реакции, что, вероятно, объясняет отсутствие явных симптомов у здоровых носителей H. pylori . Будущие исследования с культурами слизистых оболочек желудка помогут выяснить, в какой степени недавно описанный H.pylori , опосредованная системой секреции 4 типа (cag PAI), транслокация эффекторной молекулы гептоз-1,7-бисфосфата (HBP) 35 36 отвечает за индукцию NF-κB в этом весьма аутентичном сценарии поляризации и функции эпителия.

Другой интересный результат – очевидная связь между путями NF-κB и Wnt. Клетки фовеолярного типа возникают в отсутствие передачи сигналов Wnt или экспрессии генов-мишеней Wnt. Действительно, ранее было показано, что главный медиатор передачи сигналов Wnt, β-катенин, регулирует воспаление посредством перекрестного взаимодействия с сигнальным путем NF-κB, 37 подтверждая представление о том, что активная передача сигналов Wnt может придавать способность эпителиального компартмента отвечать на воспалительные сигналы.С помощью новой модели инфекции мы ожидаем получения новых сведений о координации этих двух путей в желудочной железе во время инфекции. Примечательно, что этот подход может объяснить связь между воспалением и измененным гомеостазом компартмента стволовых клеток во время хронической инфекции H. pylori и то, как это может привести к злокачественной трансформации.

H. pylori может проникать глубоко в железы и взаимодействовать с компартментом стволовых клеток, где вызывает гиперплазию11 и воспаление.Иммунные клетки, такие как макрофаги, Т-лимфоциты и В-клетки, затем проникают в слизистую оболочку и нацелены на эпителий, 38 усугубляя воспаление. Более того, H. pylori может дестабилизировать геном хозяина, индуцируя двухцепочечные разрывы ДНК и сдвигая механизмы репарации в сторону склонного к ошибкам негомологичного соединения концов. 39 40 Эта комбинация хронической воспалительной, прорегенеративной среды и выраженного генотоксического эффекта, оказываемого бактерии могут способствовать развитию неоплазии.Культуры слизистой оболочки желудка предлагают уникальный инструмент для исследования ранних канцерогенных явлений, поскольку они позволяют беспрецедентно продлить период инфицирования в сочетании с возможностью подвергать эпителий минимальной цитокиновой среде в базальном компартменте, чтобы имитировать хроническую воспалительную среду.

Чтобы колонизировать эпителиальную поверхность, бактерии должны преодолеть гелеобразную слизистую оболочку желудка, движущуюся их жгутиками. 41 Мы наблюдали, что лишь нескольким бактериям удалось пройти через слизь, образовав редкие бактериальные колонии.Через два дня после инокуляции культур большинство бактерий все еще находится на поверхности слизи, что позволяет предположить, что различия в приспособленности бактерий и поддержание эффективного слизистого барьера играют роль в контроле судьбы патогенов. В отличие от мукозоидных культур, органоидные культуры обычно выращивают в матригеле, который стабилизируется антибиотиками, потенциально влияя на приспособленность бактерий. Было показано, что секреция слизи играет центральную роль в защите эпителия в других областях желудочно-кишечного тракта.42 43 Мы только начинаем осознавать важную роль, которую слизь играет в желудочно-кишечном тракте, например, как место иммунной защиты, а система мукозоидной культуры позволяет исследовать слизь в культуре и производит обильное количество слизи, которую можно собрать. для дальнейшего анализа.

Таким образом, наша модель закладывает основу для изучения детерминант и эффектов хронической инфекции H. pylori in vitro, а также влияния муцинов и модификаций муцина на комменсальные и патогенные бактерии.Процедура, которая одинаково хорошо работает для определения слизистых оболочек тела желудка (данные не показаны), вероятно, будет перенесена на другие цилиндрические эпителии человека и других видов млекопитающих, а также может оказаться полезной в качестве инструмента скрининга лекарств, влияющего на персонализированная медицина будущего.

Материалы и методы

Материал ткани человека, выделение желудочной железы и сфероидная культура

Образцы ткани желудка были предоставлены Центром бариатрической и метаболической хирургии Университета Шарите и Центром ожирения и метаболической медицины Helios Klinikum, ( оба в Берлине, Германия) с предварительного одобрения этического комитета Медицинского университета Шарите, Берлин (EA1 / 129/12).Псевдонимизированные образцы (см. Дополнительную онлайн-таблицу 2) были получены от в общей сложности 12 пациентов с отрицательным результатом на H. pylori , подвергшихся резекции желудочного рукава, и обработаны, как описано ранее для органоидных культур.14 Вкратце, ткань промывали в PBS перед удалением жира и соединительной ткани. ткань. Затем его разрезали на ~ 1 мм ² кусочков и промывали холодным PBS до тех пор, пока супернатант не стал прозрачным (8–10 раз), с последующей 30-минутной инкубацией в хелатирующем растворе (5,6 мМ Na2HPO4 / 8.0 мМ Kh3PO4 / 96,2 мМ NaCl / 1,6 мМ KCl / 43,4 мМ сахарозы / 54,9 мМ D-сорбитол / 0,5 мМ DL-дитиотреитол / 2 мМ EDTA в H ₂ O) при 37 ° C на платформе для встряхивания. Фрагменты ткани оставляли для осаждения, переносили в чашку Петри и выделяли железы, слегка надавливая на предметное стекло, перед ресуспендированием в среде, содержащей 10% инактивированной нагреванием фетальной телячьей сыворотки (Biochrom). После переноса в пробирку Фалькона более крупные фрагменты удаляли, оставляя их отстаиваться в течение 1 мин перед переносом супернатанта, содержащего большую часть изолированных желез, в новую пробирку.После промывания раствор центрифугировали в течение 5 минут при 250 г , ресуспендировали в усовершенствованной среде Игла, модифицированной Дульбекко / F12 (Invitrogen), и растирали с помощью отполированной пламенем стеклянной пипетки до тех пор, пока не остались только отдельные клетки и очень маленькие комки. Количество клеток оценивали с помощью гемоцитометра и ресуспендировали в соответствующем объеме культуральной среды для создания культур мукозоидов или инициирования культур органоидов.

Создание культур слизистой оболочки желудка

Около 200 000–250 000 клеток, полученных либо непосредственно из свежевыделенных желез, либо из органоидов, были засеяны в 200 мкл культуральной среды в покрытой коллагеном оболочке (Gibco A10644-01, 15 мкг / см ² ) вставки трансвелл (Millipore PIHP01250), помещенные в 24-луночный планшет при 37 ° C, 5% CO ₂ в увлажненном инкубаторе.Пространство между фильтром и лункой было заполнено 400 мкл культуральной среды (см. Дополнительную таблицу 2 онлайн). На 3-й день среду, покрывающую клетки, удаляли из вставки в лунку, чтобы начать культивирование ALI. Впоследствии 500 мкл среды под фильтром заменяли дважды в неделю.

Инфекция

H. pylori

H. pylori P12 (коллекция штаммов P511) и изогенные штаммы P12-GFP (коллекция штаммов P421) выращивали и собирали для заражения, как описано ранее.14 Число бактерий определяли путем измерения оптической плотности при 550 нм. Заражение проводили в 30 мкл PBS поверх фильтров в течение от 6 часов до 3 дней. Длительное инфицирование (2 и 4 недели) проводили при MOI 100 в течение 1 дня с последующей промывкой PBS и удалением избытка слизи при каждой смене среды.

(PDF) Защитный эффект препарата ферментированной папайи на вызванное стрессом острое поражение слизистой оболочки желудка

S. Murakami et al. / Journal of Biophysical Chemistry 3 (2012) 311-316 315

, что FPP может снижать накопление нейтрофилов и последующее производство ROS в слизистой оболочке желудка до

, и, таким образом,

он может подавлять повреждение слизистой оболочки желудка.

NF-κB – фактор транскрипции, который, как известно, индуцирует

различных генов, участвующих в физиологических процессах, а также

генов, связанных с ответом на травму и инфекцию [17].

Активация NF-κB в цитоплазме с последующей его транслокацией

в ядро ​​контролируется направленным форилированием фосфора

и последующей деградацией I-каппа B

(IκB) [18]. NF-κB активируется после воздействия на

клеток липополисахаридов, воспалительных цитокинов (например,g.,

,

TNF и IL-1), вирусная инфекция и ОС. NF-κB может индуцировать транскрипцию провоспалительных цитокинов,

хемокинов, молекул адгезии, матриксной металлопротеиназы

, Cox-2 и индуцибельной синтазы оксида азота. Ex-

Периодические данные показывают, что акцепторы свободных радикалов

ингибируют индуцированное WIRS повреждение слизистой оболочки желудка посредством подавления

активации NF-κB [7]. Следовательно, предполагается, что OS

активирует NF-κB посредством фосфорилирования и деградации IκB в цитоплазме клеток слизистой оболочки желудка у

крыс, подвергшихся воздействию WIRS.В подтверждение этого предположения, исследование, отправленное до

, показало, что WIRS индуцировал значительное увеличение ядерной транслокации NF-κB в mu-

cosa желудка, и что введение FPP предотвращало эти изменения.

В заключение, настоящее исследование продемонстрировало положительные

официальных эффектов FPP против индуцированного WIRS AGML и

, что эти эффекты, вероятно, связаны с антиоксидантными и

противовоспалительными свойствами FPP.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

[1] Такаги К. и Окабе С. (1968) Влияние лекарств на

процессы образования и восстановления стрессовой язвы.

Японский журнал фармакологии, 18, 9-18.

doi: 10.1254 / jjp.18.9

[2] Kwiecień, S., Brzozowski, T. и Konturek, S.J. (2002)

Эффекты действия активных форм кислорода на слизистую оболочку желудка

на различных моделях повреждения слизистой оболочки. Журнал психологии

и фармакологии, 52, 39-50.

[3] Хамагучи, М., Ватанабэ, Т., Хигучи, К., Томинага, К.

Фудзивара, Ю. и Аракава, Т. (2001) Механизмы и роль

инфильтрации нейтрофилов при стресс-индуцированных Повреждение желудка

у крыс. Заболевания пищеварения и наука, 46, 2708-2715.

doi: 10.1023 / A: 1012779530004

[4] Nishida, K., Ohta, Y., Kobayashi, T. и Ishiguro, I. (1997)

Участие ксантин-ксантиноксидазной системы и

нейтрофилов в развитии острых поражений слизистой оболочки желудка

у крыс с иммерсионным сдерживающим стрессом.Di-

gestion, 58, 340-351.

[5] Охта, Ю. и Нишида, К. (2003) Защитное действие coad-

мини-супероксиддисмутазы и каталазы против вызванных стрессом

поражений слизистой оболочки желудка. Клинические и экспериментальные –

тал Фармакология и физиология, 30, 545-550.

doi: 10.1046 / j.1440-1681.2003.03871.x

[6] Хирота, М., Иноуэ, М., Андо, Ю., Хираяма, К., Морино, Ю.,

Сакамото, К. ., Мори К. и Акаги М.(1989) Ингибирование

вызванного стрессом повреждения желудка у крыс глутатионом.

Gas tro en te rol ogy, 97, 853-859.

[7] Цзя, Ю.Т., Ма, Б., Вэй, В., Сюй, Ю., Ван, Ю., Тан, Х.Т.

и Ся, З.Ф. (2007) Устойчивая активация ядерного фактора

κB активными формами кислорода участвует в патогенезе вызванного стрессом повреждения желудка у крыс. Critical

Care Medicine, 35, 1582-1591.

DOI: 10.1097 / 01.CCM.0000266824.82280.17

[8] Нода, Ю., Мураками, С., Манкура, М. и Мори, А. (2008)

Ингибирующее действие ферментированного препарата папайи на гидрокси-

дроксил образование радикалов из метилгуанидина. Журнал

клинической биохимии и питания, 43, 185-190.

doi: 10.3164 / jcbn.2008062

[9] Имао, К., Ван, Х., Комацу, М. и Хирамацу, М. (1998)

Активность ферментированной папайи по улавливанию свободных радикалов до

пара и его влияние на уровень перекиси липидов и активность супероксида

дисмутазы в индуцированных железом эпилептических очагах у крыс.

Biochemistry and Molecular Biology International, 45,

11-23.

[10] Имао, К., Комацу, М., Ван, Х. и Хирамацу, М. (1999)

Ингибирующее действие ферментированного препарата папайи на окси-

дативное повреждение ДНК и повреждение ткани в сформированном мозге

при железо-индуцированном эпилептогенезе у крыс. Журнал

Brain Science, 25, 71-77.

[11] Zhang, J., Mori, A., Chen, Q. and Zhao, B.L. (2006) Препарат ферментированной папайи

ослабляет белок-предшественник β-амилоида

сор-белок: опосредованная β-амилоидом медь нейротоксичность

белка-предшественника β-амилоида и предшественника β-амилоида

Шведская мутация с избыточной экспрессией SH-SY5 клетки.Ной-

Наука, 143, 63-72.

doi: 10.1016 / j.neuroscience.2006.07.023

[12] Хирамото, К., Имао, М., Сато, Э., Иноуэ, М. и Мори, А.

(2008) Эффект ферментированного препарат папайи на кожный

и иммунитет слизистой оболочки кишечника и аллергические воспаления –

тин. Journal of the Science of Food and Agriculture, 8,

1151-1157. doi: 10.1002 / jsfa.3190

[13] Охта, Ю., Имаи, Ю., Кайда, С., Камия, Ю., Каваниси, М.

и Хирата I. (2010) Витамин Е защищает от стресса –

индуцированных поражений слизистой оболочки желудка у крыс

более эффективно, чем биофакторы витамина С., 36, 60-69.

[14] Абдаллах, Д.М., Эль-Абхар, Х.С. и Abdel-Aziz, D.H.

(2009) TEMPOL, мембранопроницаемый поглотитель радикалов,

ослабляет повреждение слизистой оболочки желудка, вызванное ишемией /

Реперфузия

: ключевая роль супероксид-аниона. Европейский

Журнал фармакологии, 603, 93-97.

doi: 10.1016 / j.ejphar.2008.11.057

[15] Охта, Ю., Кобаяши, Т., Нисида, К., Нагата, М. и Исигуро,

I. (1999) Терапевтический эффект Орен-гедоку-то экстракт на

стресс-индуцированных острых поражениях слизистой оболочки желудка у крыс. Phy-

toherapy Research, 13, 588-592.

doi: 10.1002 / (SICI) 1099-1573 (199911) 13: 7 <588 :: AID-P

TR505> 3.0.CO; 2-P

[16] Ивасаки, Ю., Мацуи, Т. и Аракава, Ю. (2004) Защитные и гормональные эффекты проантоцианидина против повреждения слизистой оболочки желудка

у крыс линии Вистар.Журнал гастроэнтерологии,

39, 831-837. doi: 10.1007 / s00535-004-1399-5

[17] Боуи, А., О’Нил Л.А. (2000) Окислительный стресс и ядерная активация

фактора-κB: переоценка доказательств в

Copyright © 2012 SciRes . ОТКРЫТЫЙ ДОСТУП

7 основных стратегий для лечения слизистой оболочки кишечника и устранения дырявого кишечника

Простой план оздоровления естественного поддержания слизистой оболочки кишечника

Сильный барьер слизистой оболочки кишечника имеет решающее значение для здоровья кишечника.

Барьер слизистой оболочки отделяет слизистую оболочку кишечника от миллиардов микробов в кишечнике и защищает его от патогенов и вредных белков.

Когда слизистая оболочка разрушается, это вызывает воспаление кишечника, инфекцию и активацию иммунной системы (1).

Дисфункция и заболевание слизистой оболочки кишечника

Изменение выработки слизи, иммуноглобулинов, антимикробных пептидов и других иммуномодуляторов – частая находка при воспалительном заболевании кишечника (болезнь Крона и язвенный колит), синдроме раздраженного кишечника и целиакии (2; 3; 4).

Тот же дисбаланс влияет на болезни, выходящие за пределы кишечника.

Например, диабет регулируется иммунными клетками, которые живут в слое слизистой оболочки кишечника (5).

Хроническое воспаление, вызванное повреждением слизистой оболочки, способствует развитию любого серьезного заболевания. Исправление кишечника – краеугольный камень стратегии улучшения здоровья и качества жизни.

Ниже я в первую очередь обсуждаю общие причины дисфункции слизистой оболочки, а затем обрисовываю наиболее распространенные стратегии, используемые для восстановления.

7 ключевых стратегий по поддержанию здоровья слизистой оболочки кишечника:

1. Предотвращение повреждений в первую очередь

2. Покрытие и лечение
3. Связывание или переваривание токсинов и раздражителей
4. Устранение избыточного роста бактерий, грибов или вирусов
5. Непосредственная поддержка слизистой оболочки кишечника
6. Восстановление здоровья Бактерии
7. Накормите здоровыми бактериями
Бонусная стратегия: Поддержите здоровье нервов в кишечнике

Стратегия № 1: предотвращение повреждений в первую очередь

«Все болезни начинаются в кишечнике» – Гиппократ, 460BC-375BC

Первое правило лечения кишечного барьера – в первую очередь не допускать его повреждения.

НПВП (ибупрофен или ацетаминофен), алкоголь, кофе, сигареты, а также прием воспалительных и сахаросодержащих продуктов вредит кишечнику.

Зерновые, бобовые и орехи также повреждают кишечник, если их не приготовить должным образом. Традиционные препараты, такие как замачивание и проращивание орехов, бобовых и злаков, лучше всего подходят для снижения содержания лектинов и других соединений, которые, как известно, облегчают повреждение слизистой оболочки кишечника.

Эти ингредиенты также часто хранятся в контейнерах в течение длительного времени.Влага, споры плесени или рост других микробов могут загрязнять даже органические и полезные для здоровья продукты. Эти микробы производят токсины и вызывают иммунные реакции, которые также наносят вред кишечнику.

При уборке зерновых, таких как пшеница, также используются вредные для кишечника соединения, такие как глифосфат (“Round-up”).

Облавы недавно попали в заголовки газет, поскольку мужчине с неизлечимой формой рака было присуждено 39 миллионов долларов, а компания Monsanto (теперь принадлежащая Bayer) была оштрафована на 250 миллионов долларов после того, как постановление указывало на глифосфат как на причину болезни этого человека.

Глифосфат помогает обезвоживать пшеницу перед сбором урожая и облегчает физический процесс сбора зерна. Большая часть неорганической пшеницы содержит остатки глифосфата.

Даже если вы не чувствительны к глютену или ко многим другим проблемным белкам пшеницы, вам также необходимо бороться с остатками глифосфата.

Пшеница трудно переваривается – чрезмерное потребление утомляет кишечник и естественным образом раздражает слизистую оболочку – независимо от иммунного ответа.

Чувствительность к глютену без целиакии также является клинической единицей, используемой для описания симптомов, связанных с глютеном, при отсутствии общепринятого диагноза.

Молочные продукты также вызывают воспаление кишечника.

Молочные продукты содержат лактозу, которую очень трудно переваривать после двухлетнего возраста. Мы резко сокращаем производство естественных ферментов, ответственных за расщепление лактозы.

Грубо говоря, молоко предназначено для младенцев – мы единственное млекопитающее, которое пьет молоко другого млекопитающего.

Молочная промышленность также снижает количество ферментов, естественным образом присутствующих в сыром молоке, которые в противном случае облегчили бы пищеварение. Коровье молоко может также содержать добавки, консерванты и химические остатки корма или антибиотики и гормоны, вводимые коровам для предотвращения инфекции и ускорения роста или производства молока.

Непереносимость лактозы часто встречается у взрослых, особенно у лиц африканского и азиатского происхождения. Молочные продукты также часто вызывают аллергию из-за реакций на сыворотку, казеин, бета-лактоглобулин и другие соединения в коровьем молоке, которые могут увеличить нагрузку на кишечник.

Ферментированные твердые сыры, как правило, содержат меньше этих белков и иногда могут быть добавлены в здоровую диету с меньшими проблемами, но при этом содержат полезные побочные продукты брожения.

В краткосрочной перспективе позвольте слизистой оболочке и иммунной системе успокоиться, прежде чем снова добавлять «разрешенные» молочные продукты в рацион.

Даже те, кто осторожно употребляет молочные продукты или глютен, все равно могут подвергаться перекрестному заражению дома, в общих кухонных помещениях и во время еды вне дома в ресторанах.

Я использую специальные пищеварительные ферменты, чтобы защитить себя от этих микробов, которые все еще могут оказывать пагубное воздействие на чувствительных и нетерпимых людей. Вы также должны обеспечить хорошую кислотность в желудке, , в первую очередь, для пищеварения.

Я использовал Wheat Rescue от Microbiome Labs , Gluten Manager от Integrative Therapeutics , Комплекс непереносимости от Enzyme Science и Gluten-Dairy Digest от Pure Encapsulations для смягчения воздействия глютена и молочных продуктов во время процесса заживления кишечника.

Если вы следуете временной диете с низким содержанием FODMAP в начале вашего протокола, рассмотрите возможность добавления фермента, переваривающего FODMAP, такого как FODMATE от Microbiome Labs.

Стратегия № 2: Покрытие и лечение

Существуют стратегии, помогающие успокоить раздражение слизистой оболочки кишечника.

Многие растения или экстракты трав обладают слизистыми свойствами, которые помогают покрывать раздраженную слизистую оболочку.

Алоэ – одно из самых известных домашних средств от раздраженного кишечника.

Алоэ очень похоже на слизь благодаря своему «охлаждающему» эффекту.Он физически покрывает поврежденные участки подкладки, предотвращает раздражение в будущем, позволяя начать заживление. Покрытие слизистой оболочки кишечника также блокирует способность болезнетворных микроорганизмов прилипать к незащищенным участкам, что помогает уменьшить количество инфекций или управлять ими.

Экстракты алоэ также содержат множество растительных химикатов, которые обладают антиоксидантными и балансирующими свойствами. Кратковременно используйте гели для перорального применения, поскольку они могут вызвать зависимость от него как слабительного. По этой причине я обычно придерживаюсь «экстракта листьев алоэ», содержащегося в порошках и капсулах.

Деглицирризиновая солодка (DGL), корень алтея, скользкий вяз, мастичная камедь, коровяк, бамия и окопник также обладают слизистыми свойствами, которые помогают покрывать и успокаивать слизистую оболочку кишечника.

Продукты, такие как Glutagenics от Metagenics и Mastic Gum / DGL от Klaire Labs , сочетают в себе различные экстракты этих трав. MegaGuard от Microbiome Labs поддерживает нормальный уровень H. pylori , способствует здоровью и подвижности слизистых оболочек.

Подавить воспаление слизистой оболочки

Еще одна стратегия ускорения заживления – уменьшение чрезмерного воспаления.

Иногда кишечник слишком воспален, чтобы отреагировать на лучшую диету и стратегии приема добавок. Вы не можете восстановить то, что все еще тлеет. Стратегии исцеления работают лучше, когда мы охлаждаем это воспаление.

Куркумин – прекрасный противовоспалительный экстракт куркумы, который является одним из наиболее изученных ботанических экстрактов в мире.

Помимо своих противовоспалительных свойств, куркумин помогает улучшить целостность слизистой оболочки кишечника и способствует детоксикации. Я часто обращаюсь к нему в личных и профессиональных целях.

Я использую Theracurmin HP от Integrative Therapeutics , так как это наиболее биоабсорбируемая форма куркумина, которая, как показали сторонние исследования, абсорбируется в 27 раз (2700%) по сравнению с другими версиями. Это всегда мой первый выбор в отношении добавок куркумина.

PEA + от Enzyme Science сочетает в себе Meriva (еще одну форму куркумина) с пальмитоилэтаноламидом (PEA) для поддержки стресса и воспаления, которые меня взволновали своим потенциалом, особенно при воспалении кишечника.

Иммуноглобулины, подобные тем, которые содержатся в MegaIgG2000, поддерживают воспаление слизистой оболочки и обсуждаются в следующем разделе.

Стратегия № 3: Связывание или переваривание токсинов и раздражителей

Инфекции способствуют деградации слизистых оболочек двумя способами.

Во-первых, вирулентность инфекции непосредственно раздражает слизистую оболочку и усиливает воспаление.

Во-вторых, острые и хронические инфекции выделяют токсины и побочные продукты, которые повреждают, воспаляют и вызывают эффекты домино в других областях, удаленных от очага инфекции.

«Связывание» этих токсинов снижает вирулентность, способствует их удалению и открывает временное окно для заживления слизистой оболочки.

Иммуноглобулины – Первая защита природы

Естественно, организм вырабатывает иммуноглобулины, такие как секреторный IgA, который является первой линией защиты от патогенов и чужеродных белков (6)

Другие иммуноглобулины включают IgG или IgM.

Иммуноглобулины – это антитела, которые связываются с внешними антигенами (из продуктов питания, инфекций или антропогенных химикатов).После связывания антитела нейтрализуют и помогают иммунной системе нацеливать токсины на выведение.

Природные иммуноглобулины часто недостаточны при иммунных нарушениях, хронической инфекции и повышенной кишечной проницаемости. Одним из самых ранних признаков нарушения функции кишечника и желудочно-кишечного тракта является дефицит секреторного иммуноглобулина А (IgA).

Вы можете поставлять некоторые из этих иммуноглобулинов через пероральные добавки и помогать организму связывать вредные антигены и токсины.

Я использую Mega IgG2000 и MegaMucosa от Microbiome Labs, которые поставляют безмолочные иммуноглобулины для поддержания здоровья и воспаления слизистых оболочек.

Древесный уголь и системные ферменты

Другие средства связывания и переваривания могут включать активированный уголь или протеолитические ферменты.

• Активированный уголь – это пористое вещество, которое «вытирает» токсины. Он также может связывать минералы – поэтому он отлично подходит для краткосрочного использования, но не идеален в качестве долгосрочного варианта.
• Протеолитические ферменты помогают физически переваривать плохо перевариваемые белки, поврежденные клетки, а также токсины и клеточный мусор.После распада они не могут вызвать воспаление или иммунные реакции в организме.

Я использую Enzyme Defense Pro от Enzyme Science , MyoMend от Enzyme Science или Interfase Plus от Klaire Labs .

При приеме протеолитических ферментов принимайте их за 30 минут до еды или через два часа после еды, чтобы ферменты работали системно и не использовались при переваривании пищи.

Стратегия № 4: Убить чрезмерный рост бактерий, грибов или вирусов

Что было раньше, курица или яйцо?

Концепция применяется к инфекциям кишечника.Инфекции могут вызвать дисфункцию кишечника. Дисфункция кишечника также создает иммунную среду, которая способствует инфекции. В любом случае, когда присутствует инфекция, с ней нужно бороться соответствующим образом. Затяжная инфекция задерживает и препятствует заживлению.

Как я уже упоминал ранее, сложно восстановить то, что все еще тлеет. Причиной тления может быть скрытая инфекция.

Вот ряд инфекций, которые стоит обсудить, когда речь идет о здоровье слизистой оболочки кишечника.

Вирус Эпштейна-Барра (EBV): Инфекция

ВЭБ может сохраняться и возобновляться через несколько лет после острой инфекции или заражения.

EBV принадлежит к тому же семейству вирусов, что и вирус простого герпеса (HSV1 или HSVII), опоясывающий лишай (опоясывающий лишай), цитомегаловирус (CMV) и другие. Все эти вирусы имеют «оболочку» или «липидную капсулу» как часть своей вирусной структуры.

Вирусы, покрытые липидной оболочкой, такие как EBV, вызывают хронические заболевания, усталость и воспаление во всем организме, включая слизистую оболочку кишечника.

ВЭБ живет в ваших лимфоцитах, которые широко представлены в лимфоидной ткани, ассоциированной с кишечником (GALT). Это превращает лимфоциты в состояние, подобное «зомби», когда они остаются в организме намного дольше, чем предполагалось.

EBV также увеличивает выработку вирусных белков, которые оказывают воспалительное действие на организм. Лимфоциты, инфицированные EBV, также могут вызывать большее воспаление, чем необходимо для повседневной иммунной деятельности. Таким образом, EBV способствует аутоиммунитету и развитию измененных клеток.

При одновременном воспалении от других инфекций (включая Helicobacter pylori, и другие, перечисленные ниже) – ВЭБ добавляет оскорбление к травме.

Известно, что монолаурин разрушает структуру вирусных оболочек. Это может помочь подавить инфекцию и минимизировать взаимодействие вируса с «сопутствующими инфекциями». Это мой лучший выбор для естественной противовирусной поддержки.

В своей практике я использую Ultimate Monolaurin от Inspired Nutrition.

Helicobacter pylori ( H.pylori ):

H. pylori распространен в западном мире. Высокий уровень использования антибиотиков среди населения США может увеличить заболеваемость по сравнению с другими частями мира.

H. pylori может быть нормальным обитателем желудочной флоры с возможной пользой для здоровья. Это ПРЕВЫШЕНИЕ из H. pylori , которое вызывает проблемы.

H. pylori живет в стенке желудка – он производит химические вещества, ослабляющие и разрушающие слизистую оболочку.

При перерастании – эти побочные продукты H. pylori разрушают более крупный участок слизистой оболочки, чем может выдержать организм. Кислота желудка теперь брызгает на открытую область, создавая почву для воспаления и язвы желудка.

Язвы могут быть довольно серьезными, особенно если вы сочетаете инфекцию H. pylori с приемом НПВП (ибупрофен и ацетаминофен) или других раздражителей.

Разрастание H. pylori может превратиться в активный тлеющий огонь, который крадет лечебные ресурсы и разжигает воспаление по всему телу.

В лаборатории также было показано, что монолаурин подавляет рост H. pylori . Мастичная резинка – тоже довольно популярное средство.

При лечении часто используется «тройная антибиотикотерапия» для уничтожения H. pylori . Недавно я подробно рассказал о пробиотической поддержке при приеме антибиотиков.

Карнозин цинка работает вместе с этими методами лечения и улучшает результаты. Я использую Zinc Carnosine от Integrative Therapeutics .

MegaGuard – это новый состав от Microbiome Labs, который сочетает в себе экстракт листьев артишока, флавоноиды солодки и экстракт имбиря для поддержки слизистой оболочки кишечника и нормального состояния H.pylori уровней.

В частности, было показано, что экстракты солодки помогают блокировать способность H. pylori прилипать к слизистой оболочке.

Кандидозные и грибковые разрастания:

Дисбактериоз кишечника способствует расцвету грибков, особенно Candida .

Организмы Candida имеют клеточную стенку вместо клеточной мембраны – они не чувствительны к антибиотикам. Необходимо использовать противогрибковые препараты. Разрастание грибка затрудняет заживление кишечника, если не лечить его должным образом.

Candida производят токсичные для нас побочные продукты. Токсины способствуют воспалению, раздражению кишечника, усталости, изменению активности щитовидной железы, умственному туману и многому другому.

Монолаурин заслуживает упоминания еще раз, когда речь идет о разрастании Candida .

Кандида «прячется» от иммунной системы, производя биопленку. Биопленка создает маску-невидимку – иммунные клетки проходят мимо организма, как будто его даже нет.

Монолаурин разрушает эту биопленку, позволяя монолаурину воздействовать на организм.Разрушение биопленки также позволяет иммунной системе «видеть» клетки Candida, когда они выходят из укрытия.

Подобно действию монолаурина, каприловая кислота – популярная добавка, используемая для подавления широкого спектра грибков, дрожжей и плесени.

Наконец, ундециленовая кислота из клещевины поддерживает новый механизм защиты от Candida. Дрожжевые организмы, такие как Candida, внедряются в слизистую оболочку кишечника с помощью корневых структур, известных как гифы.

Ундециленовая кислота помогает избавиться от этих корней и подавляет рост Candida.

Microbiome Labs объединила ундециленовую кислоту с широкими антимикробными свойствами пчелиного прополиса (как пчелы защищают свои ульи от микробов) в новой формуле под названием MegaMycobalance. Mega Mycobalance можно использовать в сочетании с монолаурином, Saccharomyces boulardii и пробиотиками со спорами , такими как Megaspore .

При использовании всех противомикробных стратегий начните с малого и работайте дальше.Используйте ферменты с высоким содержанием протеазы и целлюлазы, чтобы помочь с отмиранием, например, Candida Control от Enzyme Science .

Я использую Inspired Nutrition и Natural Cure Labs в качестве источников монолаурина в своей практике.

Escherichia coli ( E. coli ), Salmonella spp. , и пищевые инфекции:

Патогенный E. coli может вызывать воспаление и структурные изменения кишечных «ворот», вызывая инфекцию и дисфункцию слизистой оболочки (8).Прочный барьер слизистой оболочки помогает предотвратить оппортунистическую инфекцию.

Для поддержки разрастания E. Coli , а также пищевых патогенов, таких как Salmonella enterica , мне нравится берберин , масло орегано или коллоидное серебро . Их можно использовать отдельно или в сочетании с монолаурином.

Разрастание тонкого кишечника (SIBO):

SIBO – настолько обширная тема, что мне понадобится целый курс, чтобы ее обсудить.

СИБР является результатом чрезмерного роста здоровых или патогенных микробов в тонком кишечнике. Это может быть результатом воспалительной диеты с высоким содержанием углеводов, повторяющихся запоров, а также использования антибиотиков или противогрибковых препаратов в анамнезе.

Часто вовлекаются обычные подозреваемые H. pylori и Candida . Удивительно, но здоровые бактерии, такие как лактобациллы, также могут перерасти в SIBO. SIBO проявляется наряду с нарушением функции кишечника и слизистых оболочек.

Содержит ли ваш пробиотик штаммы лактобацилл? Если вы подозреваете SIBO, вы можете ненадолго отдохнуть от этого.

SIBO частично вызван плохой моторикой кишечника.

Когда пища не проходит через кишечник эффективно, ваш кишечник будет ферментировать пищу раньше, что приводит к газам и вздутию живота там, где этого не ожидается. Это может вызвать как запор, так и диарею, а также боль в животе, вздутие живота, чрезмерную отрыжку или газы.

Когда SIBO присутствует, определенные крахмалы и волокна в здоровой пище могут усилить его.

Лечение СИБР может включать специализированные диеты, и вы должны правильно рассчитывать стратегии, поскольку слишком раннее или слишком быстрое выполнение шагов может привести к рецидиву СИБР.

Люди с СИБР проходят период уничтожения как хороших, так и плохих бактерий, за которым следует период медленного добавления полезных бактерий (и диетических крахмалов / волокон) по мере успокоения воспаления.

Если вы подозреваете SIBO, вы сэкономите время и деньги, обратившись к профессиональному наставнику.Практикующий специалист в области функциональной медицины может помочь вам сориентироваться в избавлении от пищи, уничтожении бактерий, добавлении пробиотиков и поддержании здоровья кишечника в долгосрочной перспективе.

Для более глубокого обсуждения SIBO ознакомьтесь с моей коллекцией статей SIBO.

В дополнение к антимикробным и пробиотическим стратегиям, поддержка моторики является важным компонентом предотвращения рецидива и рецидива SIBO. Поддержка моторики – одно из важнейших недостающих звеньев в лечении SIBO.

Избыточный рост Candida может присутствовать вместе с SIBO в двух третях случаев.Если стратегии строго сосредоточены на бактериях, дрожжи расцветут. Выше я упомянул монолаурин и каприловую кислоту как естественные варианты для поддержки нормального роста дрожжей. Saccharomyces boulardii (штамм, обнаруженный в RestorFlora ) также является поддерживающим. Я подробно описываю споровые пробиотики в Стратегии №6.

Для поддержки подвижности я использую MotilPro от Pure Encapsulations . Megaguard от Microbiome Labs также содержит высокоактивные гингеролы из имбиря, которые также могут поддерживать моторику. Гуперзин A также может способствовать подвижности.

Стратегия № 5: Прямая поддержка слизистой оболочки кишечника

Представьте кишечник как трехслойную трубку.

Кишечные микробы составляют внутреннюю часть трубки.

Здесь они взаимодействуют с нестерильной суспензией, доставленной из желудка. Жидкий раствор может содержать патогены и вредные белки.

Средний слой – это слизистая оболочка – это соединительная подушка, которая содержит иммунные клетки и «пищу» для кишечных микробов и топливо для иммунных клеток и слизистой оболочки кишечника.

Следующий внутренний слой трубки – это клетки слизистой оболочки кишечника («клетки кишечного эпителия»).

Абсорбирующие складки, известные как «ворсинки», обеспечивают поверхность для абсорбции. Между ячейками складок находятся микроскопические стыки. Эти плотные соединения составляют физические «ворота», которые контролируют, что попадает в кровь, а что остается. «Дырявый кишечник» относится к непреднамеренному открытию этих ворот.

Выстилка кишечника – последний слой защиты между внешней средой и внутренним миром кровотока.Он также координирует взаимодействие между слизистой оболочкой, иммунной системой и бактериями (9).

Опора слизистой оболочки

L-глутамин – вариант первой линии для поддержки слизистой оболочки. Он способствует росту клеток кишечника и иммунных клеток.

Хотя он легко доступен в большинстве диет – L-глютамин является условно незаменимым – это означает, что он первым уходит, когда мы испытываем стресс или ослабляем иммунитет. Отчасти поэтому ваш кишечник терпит поражение при стрессе.

Дополнение

поддерживает восстановление в любом скомпрометированном состоянии. При лечении кишечника я принимаю L-глутамин по 10 г трижды в день. Я могу подняться выше у людей с большим размером тела.

Многие дозы содержат всего 3-6 г L-глютамина на порцию – увеличивайте потребление по своему усмотрению.

Я использую L-глутамин в порошке от Pure Encapsulations и часто использую более доступный L-глутамин от Progressive Labs в больших объемах.

Цинк Карнозин

Цинк карнозин заслуживает отдельного упоминания как прямая поддержка футеровки.Это одна из самых недооцененных добавок и одна из моих любимых.

• Он выживает в желудочной кислоте и способен напрямую взаимодействовать с желудочно-кишечными язвами и воспалительным колитом (10; 11; 12)
• Ряд исследований был обсужден в статье 2007 года, опубликованной в журнале Gut. Авторы прокомментировали способность карнозина цинка помогать «стабилизировать» слизистую оболочку кишечника и способствовать восстановлению (13).
• Хорошо зарекомендовал себя в плане заживления ран (особенно заживления слизистых оболочек) и естественного антиоксидантного действия (14; 15; 16)
• Прочтите мою предыдущую статью о преимуществах цинк-карнозина.
  
• Я использую Zinc Carnosine от Integrative Therapeutics в качестве предпочтительного источника.

Строительные блоки иммуноглобулинов и аминокислот для восстановления слизистой оболочки

L-глутамин и карнозин цинка – это только часть истории.

Микробные токсины и пищевые белки раздражают слизистую оболочку и замедляют заживление. Сильная стратегия защиты слизистой оболочки – это добавление дополнительных иммуноглобулинов.

Слизистая оболочка имеет физическую структуру.Эта структура состоит из строительных блоков аминокислот. Четыре наиболее важные аминокислоты для восстановления слизистой оболочки включают: L-пролин, L-серин, L-треонин и L-цистеин.

Растительные соединения, известные как полифенолы , помогают уменьшить воспаление, снять окислительный стресс и способствовать развитию полезных бактерий.

MegaMucosa от Microbome Labs – это приятный на вкус порошок, который содержит иммуноглобулин, полифенолы и четыре стандартные аминокислоты для восстановления слизистой оболочки.

Mega IgG2000 также можно использовать в качестве дополнительного источника иммуноглобулинов в форме капсул.

Вот краткое описание того, как эти питательные вещества поддерживают восстановление слизистой оболочки:

• L-глутамин напрямую поддерживает рост иммунных и кишечных клеток.
• Цинк карнозин напрямую поддерживает заживление слизистых оболочек, возобновление роста тканей и поддерживает устойчивость к будущим стрессам. Он может предложить преимущества против старения и долголетия, которые мы только начинаем понимать.
• Иммуноглобулины захватывают и связывают раздражители, нейтрализуя их и подготавливая к устранению.
• Полифенолы (включая биофлавоноиды) помогают уменьшить воспаление и поддерживают разнообразие микробов.
• Аминокислоты (L-пролин, L-серин, L-треонин и L-цистеин) поставляют строительные материалы, необходимые для новой слизистой оболочки. ( Megamucosa от Microbiome Labs сочетает в себе иммуноглобулины, полифенолы и указанные выше аминокислоты, поэтому это один из моих вариантов первой линии для поддержки слизистой оболочки).

Стратегия № 6: Восстановить здоровые бактерии

Здоровые бактерии в кишечнике активируют иммунные сигналы, которые необходимы для производства здоровой слизи в кишечнике и поддержания кишечных клеток.

Слизистая оболочка и флора кишечника работают симбиотически. Каждый работает, чтобы поддерживать другого.

Когда этот симбиоз нарушается, кишечник становится нарушенным и «дырявым», что приводит к дисбалансу питательных веществ и электролитов, а также к восприимчивости к патогенам и поглощению вредных белков.Добавление пробиотиков улучшает важную селективность слизистой оболочки кишечника по отношению к захватчикам.

Здоровые кишечные бактерии также конкурируют с патогенами за ресурсы и снижают риск острой инфекции, вызываемой такими видами, как Clostridium difficile , E. coli и Salmonella enterica (17).

1.) Наличие вредных бактерий (или отсутствие здоровых бактерий) способствует воспалению.
2.) Воспаление вызывает утечки на слизистой оболочке.
3.) Утечки топлива системное заболевание (18).

Полезные для кишечника бактерии производят собственные пребиотические соединения и вытесняют конкурирующие микробы, позволяя естественным образом процветать широкому спектру разнообразной флоры.

Перезагрузка кишечника требует как восстановления здоровой флоры, так и поддержки слизистой оболочки.

Четыре основных правила приема пробиотиков

Правило № 1: Пробиотики должны пройти через желудочную кислоту живыми.

В младенчестве мы колонизируемся кишечной флорой в результате развития, рождения и грудного вскармливания в первые два года жизни.

Когда наша желудочно-кишечная система созревает, pH желудка подкисляется, образуя гораздо более защитный барьер. Вновь закислый желудок убивает большинство «живых» пробиотиков. Кислота желудочного сока убивает пробиотики с добавками до того, как они попадут в кишечник.

После колонизации в младенчестве мы поддерживаем флору, полученную от рождения и грудного вскармливания, потребляя с пищей различные волокна и крахмалы.

Если мы соблюдаем ограниченную диету, испытываем стресс, принимаем антибиотики, едим сахар или пьем много алкоголя, будучи взрослыми, мы уничтожаем нашу флору и теряем разнообразие – и в конечном итоге разрушаем слизистую оболочку кишечника!

Я использую пробиотики Master Supplements, такие как Theralac , Trubifido и Truflora , чтобы восстановить микрофлору кишечника. У компании есть запатентованный метод «Acid Proof Delivery», который позволяет доставлять пробиотики живыми – глубоко в кишечник.

Кроме того, компания сочетает уникальную доставку с другим запатентованным ингредиентом «Lactostim», который помогает регидратировать и накормить бактерии, попавшие в кишечник, что дает ему преимущество перед пробиотиками с энтеросолюбильным покрытием.

Пробиотики других брендов могут быть высокого качества, но вам нужна высокая доза на каждый штамм пробиотика (я использую 10 миллиардов КОЕ на ШТАММ), чтобы обеспечить правильную пробиотическую поддержку.

Это беспокойство не имеет отношения к продуктам Master Supplements .Они могут похвастаться фантастической дозировкой и мерами контроля качества с запатентованной системой доставки.

Правило № 2: Споры пробиотиков живут в почве. Эти почвенные организмы представляют собой кишечные микробы, которые используют грязь как переносчик в наш организм.

Споровые пробиотики обеспечивают иммунитет всем млекопитающим. Наши предки ежедневно взаимодействовали с грязью, добываемой при добыче пищи, охоте, активном отдыхе на природе и жизни в менее санитарных условиях жизни.

Споры прорастают в живые организмы и находятся в нашем тонком кишечнике в течение 7-21 дней.Затем они снова превращаются в споры, которые выводятся из организма. Они остаются в форме спор в почве в течение многих лет, пока их не подберет другой хозяин.

Современный образ жизни лишен воздействия почвенных микробов и спор. Регулярный прием пробиотиков со спорами восполняет эту недостающую стимуляцию.

Споры помогают вытеснять нежелательные организмы, способствуют разнообразию другой флоры и производят органические кислоты, короткоцепочечные жирные кислоты (SCFA), витамины группы B и витамин K2 для нашего организма.

Повышенная кишечная проницаемость приводит к абсорбции эндотоксинов в системном кровотоке, а также к повышенному риску воспаления и изменению метаболических сигналов.

Клиническое испытание, проведенное в Университете Северного Техаса, продемонстрировало, что 30-дневный прием пробиотиков со спорами значительно снижает уровень эндотоксинов в крови («метаболическая эндотоксемия») на чистую разницу в 78% (p = 0,011) и триглицеридов на 19%. (p = 0,011) по сравнению с уровнями эндотоксинов и триглицеридов в группе плацебо.

Группа лечения спорами также имела значительно более низкие маркеры воспаления и грелин (гормон голода), чем группа, не получавшая пробиотик (19).

Из-за естественного жизненного цикла споровых пробиотиков 7-21 – добавляйте их на основе «три дня, семь дней отдыха» на неопределенный срок, чтобы поддерживать их уровень в организме.

Первоначально принимайте их в течение 30-60 дней, прежде чем переходить к графику «три часа, семь выходных». Начните с малого и сначала увеличивайте дозировку, как и в случае с большинством пробиотиков, пребиотиков или противомикробных экстрактов.

Правило № 3: Диетические крахмалы и волокна не питают пробиотики спор (как лактобациллы или бифидобактерии)

Поскольку большинство из нас не играют регулярно в грязи и не едят присыпанную почвой пищу, как наши предки, я рекомендую принимать добавки со споровыми пробиотиками, чтобы гарантировать, что мы получаем пользу кишечника и иммунитета от почвенных организмов.

Я использую Megasporebiotic , Restorflora , HU58 и, в меньшей степени, Truflora для поддержки разнообразия спор – Microbiome Labs является лидером отрасли по производству спор пробиотиков и создал фантастические, клинически исследованные набор продуктов для кишечника.

Правило № 4: Вы не можете добавлять некоторые полезные бактерии в кишечник, так как кишечник по своей природе является анаэробной (без кислорода) средой. Анаэробные бактерии не могут выжить в богатой кислородом среде капсульного порошка.

Используйте пребиотики для стимуляции роста этих штаммов. В следующем разделе я расскажу о пребиотиках.

Стратегия № 7: Кормление здоровыми бактериями

Волокна и крахмалы, содержащиеся в пище, не всегда могут быть разрушены нами. Кишечные микробы ферментируют и расщепляют эти вещества за нас.

В свою очередь, они производят бесценные вещества, такие как жирные кислоты с короткой цепью (SCFA), витамины группы B и витамин K2 .

SCFAs поддерживают здоровье слизистой оболочки, способствуя выработке слизи и локально регулируя развитие иммунных клеток в кишечнике (20).

Споровые пробиотики увеличивают количество SCFA на целых 40% – и клинические исследования, готовящиеся к публикации, демонстрируют, что количество спор также удваивается, а то и в четыре раза увеличивается разнообразие другой кишечной флоры (вероятно, из-за повышенного производства SCFA).

Вы также можете поддержать SCFA напрямую добавками. Мы используем Enterovite , чтобы поддерживать уровни SCFA в краткосрочной перспективе, работая над более глобальными проблемами здоровья желудочно-кишечного тракта и микробного разнообразия.

При отсутствии достаточного количества клетчатки и крахмала здоровые бактерии умирают от голода, а микробное разнообразие падает. Дрожжи и условно-патогенные микроорганизмы также растут и занимают больше участков в кишечнике.

Важность увеличения и поддержания разнообразия рациона

Рацион предков был богат пищевым разнообразием.Только с появлением современного сельского хозяйства наш рацион стал менее разнообразным.

Предки человека употребляли в пищу многочисленные виды растений, животных, насекомых, а также корни и клубни. Теперь мы употребляем гораздо более ограниченный набор продуктов в нашем рационе. Современная диета неестественно богата монокультурами пшеницы, молочных продуктов, кукурузы и сои.

Раньше существовали тысячи разновидностей этих продуктов, но теперь мы едим ограниченное разнообразие с удобными для промышленности гибридными версиями одной и той же пищи.

Отсутствие разнообразия рациона приводит к недостатку разнообразия микробов в кишечнике. Это также увеличивает шансы развития чувствительности и непереносимости продуктов.

Если добавление разнообразия пищи приводит к чрезмерному газообразованию, вздутию живота или общему дискомфорту – скорее всего, вам нужно есть меньше крахмалистой пищи на данный момент и улучшить баланс кишечной флоры, либо убивая чрезмерный рост, либо добавляя пробиотики.

Симптомы являются признаком того, что в кишечнике отсутствует бактериальный баланс, необходимый для ферментации этих трудно перевариваемых продуктов.

Сосредоточьтесь на избавлении кишечника от чрезмерного разрастания, восстановлении кишечника и продвижении ключевых штаммов бактерий, таких как Akkermansia muciniphila , Faecalibacterium prausnitzii и B ifidobacteria spp (проверьте MegaPrebiotic для поддержки прецизионных пробиотиков).

Остерегайтесь Lactobacilli spp. на раннем этапе выздоровления, поскольку эти пробиотические штаммы могут быть чрезмерно иммуностимулирующими и им противопоказаны при профилях избыточного роста (по крайней мере, в краткосрочной перспективе).

Используйте такие продукты, как Megaspore, RestorFlora, HU58 и Trubifido, и переходите к другим формулам, таким как Theralac и TruFlora, если это допускает ваша система.

После 1-3 месяцев поддержки начните кормить бактерии пребиотиками, такими как MegaPrebiotic, TruFiber или Biotagen. Вводите их в том порядке, в котором количество бактерий увеличивается с каждой смесью. В долгосрочной перспективе я чередую формулы из месяца в месяц и даже изо дня в день, чтобы моя система оставалась в догадках.

Сама слизистая оболочка медленно восстанавливается и восстанавливается.Упростите этот процесс с помощью таких продуктов, как MegaMucosa и Mega IgG2000.

Как упоминалось выше, цинк карнозин и L-глутамин являются хорошо известными продуктами для восстановления слизистой оболочки.

Как и при любой терапии кишечника, начинайте МЕДЛЕННО и постепенно поднимайтесь вверх. При необходимости узнайте мнение профессионала.

Если это не помогает, подумайте о перезагрузке кишечника с помощью полной или частичной элементарной диеты и противовоспалительной поддержки, такой как куркумин – один из наиболее изученных и хорошо поддерживаемых экстрактов, известных в клиническом питании.

Обратитесь за профессиональным советом по поводу других специализированных диет – диеты с низким содержанием FODMAP, диеты с определенными углеводами (SCD), протокола GAPS, аутоиммунного протокола (AIP) или другого индивидуального питания или медицинских инструкций.

Большинство из этих специализированных планов – это краткосрочных, диетических вмешательств, не предназначенных для длительного использования. Цель состоит в том, чтобы исправить защиту кишечника и слизистых оболочек, чтобы вам не приходилось придерживаться ограниченной диеты.

Бонусная стратегия: устранение проблем со здоровьем нервов в кишечнике

Кишечник имеет обширную нервную сеть, известную как кишечная нервная система .Раздражение или изменение режима возбуждения нервов связаны с дисфункцией желудочно-кишечного тракта. Эти нервы также регулируют слизистую оболочку кишечника.

Управление и снижение стресса

Первым шагом в решении проблемы кишечной нервной системы является управление стрессом и его снижение.

Это успокоит нервную систему «бей или беги», а также поможет восстановить и укрепить функции «отдыха и переваривания».

Кортизол – ваш основной гормон стресса. Он действует как естественное противовоспалительное и стероидоподобное соединение в организме.Избыток кортизола разрушает слизистую оболочку кишечника и подавляет иммунную систему.

Вот почему при стрессе можно «вызвать у себя язву». Стресс истончает слизистую оболочку и подавляет иммунную систему – язвы развиваются на незащищенных участках.

К стрессу можно подходить по-разному, с добавками или без них, но многие обращаются к адаптогенам не зря. Эти травы обладают двойным действием, помогая вашему телу «адаптироваться». Они помогают поддерживать стрессовую реакцию, когда она снижается, и помогают успокоить стрессовую реакцию, когда она повышена.

Мне нравится HPA Adapt для поддержки энергии, Cortisol Manager и / или Lavela для успокаивающей поддержки и Mycobotanicals Stress Decompress для всего понемногу.

Кишечник как второй мозг

Кишечник – это «второй мозг» тела. Он содержит особую нервную систему, известную как «кишечная нервная система».

Нервный компонент дисфункции слизистой оболочки является недооцененным аспектом восстановления здоровья кишечника.

Стресс, сахар, иммунные атаки, чрезмерное употребление и усталость также повреждают нервы кишечника. Повреждение этих нервов влияет на моторику, а также на выработку ферментов и слизи.

Одно из моих любимых нервно-защитных средств и средств восстановления в Lion’s Mane .

Львиная грива – лекарственный гриб, известный тем, что повышает концентрацию внимания и познавательные способности, а также помогает восстанавливать поврежденные нервы , включая кишечные нервы.

Здоровая функция кишечной нервной системы, в частности блуждающего нерва, запускает и поддерживает здоровье слизистых оболочек.

Грибы защиты хозяина Львиная грива – мой любимый источник львиной гривы. Если вы можете переносить вкус настойки на спиртовой основе – она ​​немного предпочтительнее капсул, поскольку спирт извлекает более широкий спектр активных соединений. Для удобства использования капсулы однозначно того стоят.

Поскольку все грибы Host Defense выращиваются в собственном хозяйстве, вы также не найдете лучшей цены на эффективность.

Каждая покупка также поддерживает инициативу «Спасите пчел» – Host Defense – фантастическая компания сверху донизу.

Следующим в моем арсенале инструментов стал пальмитоилэтаноламид или ПЭА. PEA – это нервный протектор, который действует на каннабиноидную систему как противовоспалительное средство. Если вы когда-либо уклонялись от продуктов CBD из-за стоимости и вопросов относительно их эффективности, PEA найдет баланс, который вы, возможно, искали.

Мне нравится PEA + от Enzyme Science . Он сочетает в себе PEA с куркумином для получения отличной комбинации одного-двух ударов при воспалении слизистой оболочки, но мне также нравится, что он был специально показан как средство защиты нервов.

Enzyme Science – единственная версия на рынке, в которой для экстракции не используется синтетический растворитель, называемый толуолом. Он использует ПЭА из сафлорового лецитина, содержащегося в семенах сафлора, который получают без использования толуола.

Блуждающий нерв – главный регулятор кишечника

Блуждающий нерв – это главный нерв, управляющий пищеварительной системой и парасимпатической нервной системой. Он также контролирует частоту сердечных сокращений и дыхание. Укрепление блуждающего нерва становится все более популярным как важный компонент здоровья кишечника и долголетия.

Полоскание горла, пение, жужжание, воздействие холода (холодный душ / ледяные ванны), кофейные клизмы, маневры Вальсальвы и глубокое диафрагмальное дыхание – все это основанные на фактах стратегии, используемые для укрепления блуждающего нерва.

Блуждающий нерв также подвержен атаке инфекций, подобных рассмотренным выше.

Бактерии, вирусы, плесень и грибки – все они производят токсины и вызывают воспаление, которые могут напрямую повредить нервы, в том числе блуждающий нерв.

Вы можете поддержать свою иммунную систему при многих из этих скрытых инфекций с помощью монолаурина.В моей практике я предпочитаю использовать монолаурин в лабораториях Inspired Nutrition и Natural Cure Labs.

Рейши – отличный тоник для всего тела, который, как и куркумин, является одним из самых популярных и исследованных лекарственных экстрактов в мире.

Как упоминалось ранее, пальмитоилэтаноламид представляет собой комбинацию нервно-защитного и противовоспалительного средства.

Помните о скрытых инфекциях при персонализации стратегии восстановления.

Реализация плана

Вот и все!

Семь полных стратегий для поддержания здоровья слизистых оболочек и дополнительное обсуждение здоровья блуждающего нерва и кишечной нервной системы.

Рассматривайте эти варианты как набор инструментов – это еще не все.

Поддержка не требует одновременного приема двадцати различных добавок.

No related posts.